UYGULAMA NOTU. Otomatik Numune Hazırlama Sistemi (GPC/EVA) ve GCMSMS ile Bitkisel Yağlarda Pestisit Kalıntısı Analizi

Transkript

1 UYGULAMA NOTU Gaz Kromatografi Kütle Spektrometri M042 Otomatik Numune Hazırlama Sistemi (GPC/EVA) ve GCMSMS ile Bitkisel Yağlarda Pestisit Kalıntısı Analizi HAZIRLAYAN Canerdem Yiğitsoy-Ozan Halisçelik Ant Teknik Cihazlar Ltd. Şti.

2 KONU: Bitkisel yemeklik yağlar ya da tıbbi uçucu yağlardaki pestisit miktarının tayininde; ön hazırlık işlemlerinin otomatik GPC/Evaporasyon cihazı ile gerçekleşmesi ve ardından hazırlanan ekstraktın nicel analizinin GCMSMS ile yapılması. Uygulamanın fındık yağı, zeytinyağı, ayçiçek yağı gibi bitkisel kökenli yemeklik yağlar; tereyağı gibi hayvansal kökenli yağlar ve ruşeym yağı, sarı kantaron yağı, rezene yağı gibi tıbbi aromatik bitkisel yağlar gibi çeşitli yağlara uyarlanması mümkündür. ÇALIŞMANIN AMACI: Pestisitler, Uluslararası Çevre Koruma Ajansı (EPA) tarafından zirai ürünlere, insanlara veya diğer canlılara zarar verebilecek böcek, haşere, kemirgen, yabani ot, mantar, bakteri ve virüs vb. canlıların olumsuz etkilerini engellemek, hafifletmek, yok etmek ya da kontrol altında tutabilmek için kullanılan her türlü madde veya madde karışımı olarak tanımlanmaktadır. Tüm dünyada olduğu gibi ülkemizde de halen tüketilen gıdalardaki kalıntılar ile ilgili yasal düzenlemelerle birçok tarım ilacının kullanımı sınırlanmış; zirai ürünlerin ithalatı ve ihracatı için gıda kodekslerinde ve tebliğlerde belirlenen listelerde yasaklı pestisitler tanımlanmış, gıda maddelerinde bulunmasına izin verilen pestisitler için ise maksimum kalıntı limitleri (MRL) belirlenmiştir. Günümüzde doğal ve sentetik yağlarda pestisit kalıntılarının analizi gıda güvenliği açısından hassasiyetle ele alınan konulardan biridir. METOD VE MATERYALLER: Bu çalısmamızda, LCTech marka Freestyle model Jel Geçirgenlik Kromatografi (GPC) ve Evaporatör (EVA) cihazı ile ilk olarak numune içindeki pestisit grupları saflaştırılmış, ardından evaporatörle saflaştırma işleminin yapılması sağlanmış; Shimadzu marka GCMSMS sistemiyle de ekstraktın tek enjeksiyonda miktar tayinleri basit, hızlı ve güvenilir bir metot ile tespit edilmiştir. GPC ve Clean-up metotlarının referans kaynağı Modular Multiple Analytical Method for the Determination of Pesticide Residues in Foodstuffs dır. Bu kaynağa göre numune içindeki yağ miktarına uygun bir ön hazırlık gerekmektedir. (Metodun tamamı için: ftp://ftp.ksph.kz/chemistry_food%20safety/background%20documents/english/pesticides.doc)

3 STANDART VE NUMUNE HAZIRLIĞI: Standartlar önceden pozitif çıkmamış bir yağ örneğinin içine katılmak suretiyle (Spike standart) Otomatik GPC/EVA cihazında ppb olarak hazırlanmıştır. Numuneler de aynı şekilde 1 e 5 oranında seyreltilmek suretiyle Otomatik GPC/EVA cihazında hazırlanarak, 1,5 ml lik viale alınıp, direkt enjeksiyona hazırlanmıştır. Referans metoda göre elimizdeki yağ numunesi 1/1 oranında etil asetat/siklohekzan karışımda 10 kat seyreltilir ve hazırlık için otomatik GPC/EVA cihazına bırakılır. GPC kolon türleri (Sadece Pestisit Grubunu Ayırmak için Kullanılır):

4 Otomatik GPC/EVA koşulları:

5 ANALİTİK KOŞULLAR: MS Koşulları (GCMSMS); Cihaz Model İyon Kaynağı Sıcaklığı GC Kolonu Basınç Enjeksiyon Modu Akış Kontrol Modu Veri Toplama Modu Split Oranı Interface Sıcaklığı Kolon Sıcaklık Programı : Shimadzu : GCMS-TQ8040 : 230 C : Restek RTX-5MS 0.25um 0.25 mm, 30m) : 125 kpa : Splitless : Pressure : MRM : -1 : 270 C : 100 C 1.5 dk 22 C/dk 150 C 0 dk 5 C/dk 200 C 0 dk 10 C/dk 300 C 3 dk

6 MRM listesi: Bileşen İsmi MRM1 CE MRM2 CE 1 Ethalfluralin 316.1> > Ethion 230.9> > Ethoprophos 200.0> > Etridiazole > > Etrimfos 292.1> > Fenamiphos 303.1> > Fenchlorphos 284.9> > Fenitrothion 277.0> > Fenson > > Fenobucarb 150.1> > Fenvalerate > > Fipronil 366.9> > Flucythrinate > > Flucythrinate > > Flumetralin > > Flusilazole 233.1> > Folpet 259.9> > Formothion 224.0> > Halfenprox 263.0> > Heptachlor 271.8> > Heptachlor-exo-epoxide (cis-. isomer B) Heptachlor-endo-epoxide (trans-. isomer A) 352.8> > > > Hexachlorobenzene 283.8> > Imazamethabenz-methyl 256.1> > Iodofenfos 125> > Iprodione > > Isazofos 257.0> > Isofenphos 213.1> > Isodrin 193> > Kresoxim-methyl 206.1> > Leptophos 376.9> > Mefenpyr-diethyl 299.0> > Metalaxyl 249.2> > Methidathion 145.0> > Methoxychlor 227.1> > Metolachlor 238.1> > Mirex > > Molinate > > Nereistoxin 149.1> > Nitrapyrin 193.9> > Nitrofen 282.9> > Nitrothal-isopropyl 254.1> > Oxyfluorfen > > Parathion-methyl 263.0> > Parathion 291.1> >

7 46 Pentanochlor 141> > Pentanochloraniline 263> > Pentachloroanisole > > Permethrin 183.1> > Phenothrin > > Phenothrin > > Phtalimide > > Procymidone 283.0> > Profenofos 336.9> > Pyrazophos 221.1> > Pyrethrin 1-2* > > Pyrimethanil 198.1> > Quinalphos 146> > Quinoxyfen 237.1> > Quintozene 294.8> > Quizalofop-ethyl (Quizalofop-P-ethyl) 372.1> > Resmethrin > > Silafluofen 286.1> > Simetryn 213.1> > Sulprofos 322.0> > Tau Fluvalinate > > Tau Fluvalinate > > Tecnazene 260.9> > Tefluthrin 177.0> > Terbacil 161.0> > Terbutryn 241.2> > Tetrachlorvinphos > > Tetrachlorvinphos > > Tetradifon 355.9> > THPI (Captan met.) 79.00> > Tetramethrin Trans 164.1> > Tetramethrin Cis 164.1> > Tetrasul > > Thiometon 125.0> > Tolclofos-methyl 264.9> > Tolylfluanid 238.0> > Triazophos 257.0> > Tribufos 258.0> > Trifluralin 306.1> > Vinclozolin 285.0> > Esfenvalerate 419.1> > Endrin Ketone 281> > Endrin 262.9> > Endosulfan-sulfate 386.8> > Endosulfan (beta) > > Endosulfan (alpha) > > Diphenylamine 169.1> > Diphenamid 167.1> > Dioxabenzofos (Salithion) 216.0> >

8 95 Dinobuton 211> > Diniconazole 268.0> > Dimethipin > > Dimethipin > > Dieldrin 276.9> > Dicofol 250.0> > Dicloran > > Dichlobenil 170.9> > Diazinon 304.1> > delta-hch 218.9> > Cypermethrin (technical) 181.1> > Cyfluthrin 226.1> > cis-chlordane (alpha) 372.8> > Chlozolinate > > Chlorthal-dimethyl 285.9> > Chlorpyrifos Methyl 265.9> > Chlorpyrifos 213.1> > Chlorpropham > > Chlorothalonil > > Chlorothalonil > > Chloropropylate 251.0> > Chloroneb > > Chlorobenzilate > > Chlormephos 233.9> > Chlorfenvinphos 323.0> > Chlorfenson 301.9> > Chlorfenprop-methyl > > Chlorfenapyr 247.1> > Chlorethoxyfos > > Chlordecone > > Chlorbufam > > Chlorbenside 125.0> > chinomethionat 234.0> > Carbosulfan 323.1> > Captan* > > Butylate 174.1> > Bromopropylate 340.9> > Bromophos-methyl 330.9> > Bromophos-ethyl 358.9> > Bipheny* > > Bifenthrin 181.1> > beta-hch 218.9> > beta-cypermethrin 181.1> > beta-cyfluthrin 226.1> > Benfluralin 292.1> > Benalaxyl 148.1> > B-Cyfluthrin 226.1> > Azinphos-ethyl 160.1> > gamma-hch(lindane) 218.9> >

9 144 alpha-hch 218.9> > alpha-cypermethrin 181.1> > Aldrin (HHDN) 262.9> > Acrinathrin 289.1> > '-DDT 235.0> > '-DDE 246.0> > '-DDD 235.0> > '-DDT 235.0> > '-DDE 246.0> > '-DDD 235.0> > Bitertanol > > Captafol 79.0> > Carfentrazone-ethyl 340.1> > trans-chlordane 372.8> > Chlorthiophos > > Chlorthiophos > > Chlorthiophos > > Crimidine 156.1> > Cyfluthrin > > Cyfluthrin > > Cyfluthrin > > Cypermethrin > > Cypermethrin > > Cypermethrin > > Diflufenican 394.1> > Dioxathion 271.0> > EPTC 189.1> > Diclofob- methyl 340> > Phenylphenol 170.1> > Pentachlorobenzene 249.8> > Cyhalothrin > > Cyhalothrin > > Diprofentryn 255.1> > Isocarboxid 142> > Cybutryn > > Dimethylaniline > > Aclonifen > > Anthraquinone > > Benazolin-Ethyl > > Benzoylprop-Ethyl > > Bromocyclen > > Butralin > > Carbophenothion > > Carvone > > Chlordimeform > > Cyanofenphos > > Cyanophos > > Cycloate > > Cyhalofop-butyl > >

10 193 DEET > > Dichlormid > > p.p'- dichlorobenzophenone > > Diclofop-methyl > > Dienochlor > > Diofenolan > > Diofenolan > > Empenthrin > > Empenthrin > > Empenthrin > > Empenthrin > > Empenthrin > > Etacanozole > > Etacanozole > > Fenchlorine > > Fluazifop-butyl > > Fluchloralin 306> > Fluotrimazole 311> > Flurochloridone 313> > Flurprimidol 107> > Furalaxyl 242.1> > Isofenphos-Methyl 199> > Isofenphos-Methyl 199> > Lactofen 344> > Metazachlor 133> > Monalide 257.1> > N-Methyl-N-1-Naphthyl-1- Acetamide > > Orbencarb > > Phenylphenol > > Oxadiargyl > > Pebulate > > Perthane > > Pirimiphos-methyl > > Pirimiphos-ethyl > > Profluralin > > Propham > > Proticanazole-Desthio > > Cinerin I > > Jasmolin I > > Pyrethrin I > > S > > Secbumeton > > Tebutam 91.00> > Terbumetom-Desethyl > > Terbuthylazine > > Thiazopyr > > Thiafanox > > Thionazin 97.00> >

11 241 Tiocarbazil > > TPP > > Tributyltin Hydride > > Dibenzofuran > > SONUÇLAR VE DEĞERLENDİRME: Kromatogramlar, Kalibrasyon Eğrisi ve Bileşen Listesi: 25 ppb Standart Mix (TIC): Bilinmeyen Numune (TIC):

12 Kalibrasyon Eğrisi (Örnek olarak 2 etken verilmiştir): 1.25 Area Ratio Conc. Ratio THPI (R 2 =0.9957) 0.75 Area Ratio Conc. Ratio Cybutyrn (R 2 =0.9993) Not: Geri kazanımlar, 244 farklı bileşen madde için %80-%120 arasındadır. Çalışmalarımız Zade Vital Kalite Kontrol Laboratuvarı nda gerçekleştirilmiştir. Desteklerinden dolayı kendilerine teşekkürlerimizi sunarız. Bu Aplikasyon Notu uygulamanın gerçekleştirildiği tarihe ait bilgiler ışığında oluşturulmuştur. Bu yayında yer alan bilgilerin referans gösterilerek başka bir yerde kullanılması Ant Teknik in iznine tabidir. Aplikasyon Notu Ant Teknik tarafından önceden bildirilmeksizin değiştirilebilir. antteknik.com