Deneysel Omurilik Yaralanmalarında Kefirin Lizozomal Proteasların Salınımı Üzerine Etkisi h

Transkript

1 e A þ t ý m Efficcy of Kefi on the Relese of Lysosoml Poteses Afte Expemintl Spinl Cod Tum l n i j i O O i g in Deneysel Omuilik Ylnmlınd Kefiin Lizozoml Poteslın Slınımı Üzeine Etkisi h c s Re l Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum Eme Delen 1, Rmzn Dumz 2, Ayeşegül Oğlkçı 3, Güngö Knbk 3, Dilek Buukoğlu 4, Cengiz Bl 5 1 Edine Stte Hospitl Dept. of Neuosugey, Edine, 2 Eskişehi Osmngzi Üniv. Nöoşiüji Anbilim Dlı, Eskişehi, 3 Eskişehi Osmngzi Üniv. Biyokimy Anbilim Dlı, Eskişehi, 4 Eskişehi Osmngzi Üniv. Histoloji ve Embiyoloji Anbilim Dlı, Eskişehi, 5 Eskişehi Osmngzi Üniv. Biyoisttistik Anbilim Dlı, Eskişehi, Tükiye Bu çlışm Tük Nöoşiüji Deneği 28. bilimsel kongesinde (Nisn 2014/Antly) ttışmlı poste olk sunulmuştu. Özet Amç: Spinl kod tvmsı sonucund gelişen ikincil hslnmnın engellenmesi, tvm sonsı oluşbilecek nöolojik defisiti önemli deece de zltcktı. Deneysel çlışml d bu konu üzeinde duulmkt ve pek çok jn denenmektedi. Çlışmmızd, bi pobiyotik oln, yşm uzmsı ile ilişkilendiilen, ypıln bilimsel çlışml kısıtlı ols d, ntioksidn ve lipid peoksidsyonu üzeine etkilei oty konn kefiin spinl kod tvmsınd önemli ol oynyn lipid peoksidsyonu ve lizozoml potezl üzeine oln etkileini ştıdık. Geeç ve Yöntem: Çlışmd, g. sınd ğılıklı değişen Spque Dwley ıkı dişi sıçnl kullnıldı. Çlışm, kontol, tvm, tvm+tedvi, tvm+tedvi+kefi ve tvm+kefi olmk üzee 5 gup toplm 40 sıçn üzeinde ypıldı. Tedvi olk yüksek doz metilpednizolon kullnıldı. Omuilik tvmsı klip kompesyon yöntemi ile, T10 seviyesinden geçekleştiildi. Kefi sıçnl oogstik yoll, tvm öncesinde, 7 gün süeyle 2*1cc/100g dozund veildi. Tüm sıçnl işlemden 48 st son skfiliye edildi. Doku ktepsin B ve L, MDA değeleindeki değişiklikle ile histoptolojik değişiklikle incelendi. Bulgul: Çlışmmızd biyokimysl değele gözden geçiildiğinde; kefiin, ktepsin B değeleini tedvi gubun göe nlmlı deecede düşümediği(p>0,05), MDA değeleini ise tedvi gubun göe nlmlı deecede düşüdüğünü göstemektedi(p<0,05). Ktepsin L değeleinin ise he iki gup için nlmlı olk düşmediği göülmektedi. Histoptolojik incelemede, tvm+tedvi+kefi ve tvm+kefi gubunun tvm sonsınd nomle ykın histolojik ypıy ship olduğu göüldü. Ttışm: Sunuln çlışmd, kefiin ship olduğu ntioksidn özelliği bşt olmk üzee diğe nöopotektif özelliklei ile kut omuilik ylnmlınd ikincil ylnmyı kısmen de ols engellediği söylenebili. Spinl tvmlın tedvisinde kullnılbilecek yeni bi jn olk kefiin, bi pobiyotik olmsı bkımındn, bu deneysel çlışm lnın yeni bi bkış çısı getiebileceğine düşünmekteyiz. Anht Kelimele Kefi; Lizozoml Potezl; Tvm; Spinl Kod Abstct Aim: Pevention of secondy injuy developing s esult of spinl cod injuy will educe significntly neuologicl deficits which my occu fte tum. These e focused in expeimentl studies nd mny gents e being tested. In ou study, we hve invesitigted the effects of kefi, which is pobiotic, ssocited with life polongtion, whose ntioxidnt nd lipid peoxidtion effects wee eveled on despite the scientific studies wee limited, on lipid peoxidtion nd lysosoml poteses which ply impotnt oles in spinl cod. Mteil nd Method: In the study, femle Spgue Dwley ts weighing 200 to 250 g wee used. The study ws conducted on five goups with totl of 40 ts including the contol, tum, tum+tetment, tum+tetment+ kefi nd tum+ kefi goups. The high-dose methylpednisolone ws used s the thepy. Spinl cod tum ws pefomed with clip compession method t the level of T10. Kefi ws given to ts vi oogstic wys, pio to tum fo 7 dys t dose of 2 * 1cc/100g. All ts wee scificed 48 hous fte tetment. The chnges in the vlue of tissue cthepsins B nd L, MDA nd histopthologicl chnges wee exmined. Results: It hs been found in ou study ccoding to the eview of biochemicl vlues tht; kefi did not educe significntly cthepsin B vlues comped to the tetment goup (p> 0.05), did educe significntly MDA vlue comped to tetment goup (p <0.05). It hs been seen tht cthepsin L vlues did not educe significntly fo both goups. It hs been obseved in histopthologicl exmintion tht the tum+tetment + kefi nd tum+ kefi goups hd ne-noml histologicl stuctue fte tum. Discussion: It cn be sid in the pesent study tht kefi could ptly pevent the secondy injuy in cute spinl cod injuy with its neuopotective popeties especilly with the ntioxidnt popety. We believe tht kefi s new gent cn be used in the tetment of spinl tum, cn bing new pespective to this expeimentl study field in tems of being pobiotic. Keywods Kefi; Lysosoml Poteses; Tum; Spinl Cod DOI: /JCAM.2628 Received: Accepted: Pinted: J Clin Anl Med 2015;6(suppl 1): 21-5 Coesponding Autho: Eme Delen, Edine Devlet Hstnesi Beyin Cehisi Kliniği. Edine, Tükiye. GSM: F.: E-Mil: emedelen1979@yhoo.com Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine 1 21

2 Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum Giiş Ülkemizde kut omuilik ylnmsının insidnsı yıld yeni vk olk bildiilmekte ve pevelnsın he yıl 12,7/ olduğu thmin edilmektedi[1-2]. Neden olduğu mobidite ve motlite çısındn önemli bi sğlık sounudu. İlk kez Allen tfındn oty tıln omuilik ylnmsının iki bsmk teoisi çokc tft bulmuş ve günümüzde lbotu çlışmlı ikincil ylnmyı önlemeye yönelik olk devm etmektedi. Pek çok fmkolojik jn lbotu ştlınd denenmişti. Anck ikincil ylnmyı kesin olk önleyen hehngi bi jn tespit edilmemişti. Pobiyotikle, çoğunlukl bkteileden oluşn cnlı mikoognizml olup, çeşitli hstlıklın tedvisinde kullnım olnğı oln besinledi. Bi pobiyotik oln kefi, ypıln çlışml kısıtlı ols d, kuvvetli bi ntioksidndı. Bu çlışmd deneysel omuilik ylnmsı fizyoptolojisi ve tedvisi gözden geçiilmiş olup, ikincil hslnmnın engellenmesi mcıyl kefiin lezyon üzeine etkisi ştıılmıştı. Geeç ve Yöntem Bu deneysel çlışm Eskişehi Osmngzi Ünivesitesi Tıp Fkültesi Hyvn deneylei Yeel Etik Kuul lınn k ile Eskişehi Osmngzi Ünivesitesi Tıp Fkültesi Tıbbi ve Cehi Deneysl Aştım Mekezi nde (TİCAM) ypıldı. Çlışmd, g. Asınd ğılıklı değişen Spque Dwley ıkı dişi sıçnl kullnıldı. Aştım yeteli hv sikülsyonu ve çeve ısısının sğlndığı odld ypıldı. Lezyon ypıldıktn son tüm deneklee yı ve koly beslenmeleini sğlyn kfeslede bkım uygulndı. Deneklein uyutulmsı işleminde 60 mg/kg Ketmin Hidokloü (Ketl, Pke-Dvis lisnsı ile Eczcıbşı İlç Sn., İstnbul) ve 12 mg/kg Ksilzin (Rompun, Bye İlç Snyi, İstnbul) kışımının intpeitoenl yol ile veilmesi ile genel nestezi sğlndı. Bu deneysel çlışmd cehi kesi sıçnın sıt kısmınd, tış ypılıp ntisepti sğlndıktn son ypıldı. Deneysel çlışmd beş gup ye lmış olup, toplm 40 det t kullnıldı. T9 ve T11 veteblı hizsındn lokl sh temizliği ve çeve izolsyonu sğlndıktn son cilt, cilt ltı dokulı geçildi. Fsy çılk pvetebl dlele subpeiostl sıyıldı. T9 ve T10 vetebl lmninektomi ypıldı. Omuilik çığ çıkıldı. Omuilik tvmsı klip kompesyon yöntemi ile geçekleştiildi. Klip kompesyon yönteminde 1,43 N kuvvet uygulyn (Yşgil, FE 740 K,Aesculp AG, Almny) nevizm klibi kullnıldı. Klip epidul olk ltmış sniye süeyle uygulndı. Klip kldııldıktn son mkoskopik olk kompesyon uğmış spinl kod dokusu göüldü. Kontol gubu hiç tvm uygulnn sıçnl tvmdn son ppelejik olduğu tespit edildi. Tüm gupldki sıçnldn 48 st son biyokimysl ve histoptolojik değelendime mcıyl omuilik doku öneklei lındı. Kefi, sıçnl 1 hft süeyle oogstik yoldn 2*1cc/100g dozund veildi. Tedvi olk veilen metilpednizolon yükleme dozu olk 30mg/kg dh son idme 6h yl 5,4mg/kg intpeitonel yoll 24 stte veildi. 1.Gup (Kontol): Bu gub sdece lminektomi uygulndı. 2.Gup (Tvm): Bu gupt sdece omuilik ylnmsı ypıldı. 3.Gup (Tvm+Tedvi): Oluştuuln tvm sonsı sıçnl metilpednizolon tedvisi veildi. 4.Gup (Tvm+Tedvi+Kefi): Diyetleine kefi eklenmiş sıçnl metilpednizolon tedvisi veildi. 5.Gup (Tvm+Kefi): Bu gup sdece dietleine kefi eklenen sıçnldn oluştuuldu. Biyokimysl Ölçümle Süpentndn sitozolik fksiyonun elde edilmesi için spinl kod dokusu homojentı sükoz Tis-HCL tmponund (0.32 M sucose, 0.05 M Tis-HCl buffe, ph 7.4) homojeniztö kullnılk hzılndı. Dh son homojentl +4 oc de 5 dkik boyunc 1000 g de sntifüj edildi. Pelletle yıldıktn son süpentnl +4 oc de 20 dkik boyunc g de sntifüj edildi. Süpentnl sitozolik fksiyon olk kullnıldı. Pellet ise 1 ml Titon X 100 içeen tmpon ile esüspnse edileek lizozoml fksiyon olk kullnıldı. Sitozolik ve lizozoml fksiyonld yı yı ölçülen ktepsin ktiviteleinin onı lizozoml bütünlüğün miktını göstedi. Ktepsin B ve L enzim ktivitesi Kischke ve k. nın modifiye ettiklei yönteme göe çlışıldı. Enzim ktivitesi metilkumilmid substtı kullnılk ölçüldü. 75 ml. Mdde B (8.0 mm L-sistein) 0.90 ml. Mdde C (% 0.1 (v/v) Bij 35 çözeltisi), 0.10 ml. homojent kıştııldı. Üzeine 0.75 ml mdde D (0.02 mm Z-g-g-7-mido-4-metilkumin ve 0.02 mm Z-Phe-Ag-7-Amido-4-Methylcoumin) konulduktn son oluşn floesns 348 nm eksitsyon ve 440 nm emisyond ölçüldü.[3] Lipid peoksidsyonu üünleinden oln mlondildehit (MDA) tyini, tiyobbütiik sit (TBA) ile MDA nın eksiyon veeek 532 nm dlg boyund ölçülebilen enkli bi bileşik vemesi essın dynmktdı. Tetmetoksipopn stndt olk kullnıldı. Sonuçl, nmol/ml olk tnımlndı. Bu yöntemde; tiyobbütiik sitile eksiyon veen mddele ölçülecek olup, litetüde TBARS olk ye lmktdı.[3] Doku homejentlındn 0,5 ml lınk üzeine 0,5 ml fosft tmponu, 0,5 ml %15 lik tikloosetik sit solüsyonu ilve edileek votekslendi ve buz keselei üzeinde 2 st tutuldu. 40C de 4400 pm de 10 dk sntifüj edildi. Son 1 ml süpentnt lınıp üzeine 75 ul 0.1 M EDTA ve 250 ul 0.05 N NOH içeisinde hzılnmış % 1 lik TBA solüsyonu ilve edildi, 15 sniye voteksleni ve kynyn su bnyosund 15 dkikd tutuldu. Absobnsl, 532 nm dlg boyund köe kşı spektofoometede ölçüldü. Histolojik İnceleme İçin Öneklein Hzılnmsı Guplını oluştun tüm sıçnldn medull spinlis öneklei lındı. Alınn medull spinlis önekleinin % 10 luk fomlin fikstifi içinde 48 st süe ile fikssyonlı sğlndı. Fikssyonlı sğlnn önekle fikstifin çökmesini engellemek mcıyl 3-4 st çeşme suyund yıkndı. Çeşme suyuyl yıknn doku pçlı dh son sısıyl kdemeli olk %70 lik, %80 lik, %90 lık ve %96 lık lkol seileinde 45 e dkik bekletileek dehidtsyonlı sğlndı. Dehidtsyonlının dındn önekle şeffflndıılmk üzee 2 kez 20 şe dkik ksilolde bekletildi. Medull spinlis öneklei şeffflnmlının dındn etüv içinde 65oC de eitilmiş pfinlee lınk 60 dkik süeyle üç yı pfinde bekletildi. Pfinize edilen dokul yı yı pfin içeen ksetlee gömüleek bloklndı ve kesit lınmy hzı duum getiildi. Pfin blokldn kesitlein lınmsınd kullnılck mikotom bıçğı buzdolbınd soğutulk, mikotom cılığı ile he bi önekten 5 e mikomete klınlığınd doku kesitlei lındı. Kesitlein 45oC de su bnyosund çılmlı sğlnk temiz lml üzeine lınmsındn son etüv 2 22 Jounl Jounl of Clinicl of Clinicl nd Anlyticl nd Anlyticl Medicine Medicine

3 Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum içinde 1 st süe ile bekletilmelei sğlndı. Peptl 1 e st süe ile iki yı ksilolde tutulup depfinizsyonlı sğlndıktn son boym şmsın geçildi. Kesitlein boynmsınd Hemtoksilen-Eosin ikili boysı kullnıldı. Depfinizsyonu ypılmış oln doku kesitlei 5 e dkik süeyle %96, %90, %80, %70 lik lkollede ve distile sud bekletildi. Kesitle Hemtoksilen ile 2 dkik ve Eosin ile 10 dkik boyndı. Çeşme suyu ile fzl boysı lınn kesitle hızl lkol seileinden geçiilip dehidtsyonlı sğlndı. Dokul iki yı ksilolde 30 dkik tutulk şeffflştııldı ve şeffflnn dokul dh son entelln ile kptılk ışık mikoskobik düzeyde Olympus BH-2 mikoskop ile değelendimelei ypıldı ve medull spinlis önekleini içeen tüm pepetlın Olympus DP-70 digitl kme ile fotoğflı çekildi. Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum Ktepsin L sonuçlı: Kontol gubundki tlın ktepsin B sonuçlı, tvm,tedvi,tedvi+kefi ve kefi guplının ktepsin L sonuçlı sındki fk isttistiksel olk nlmlı değildi. (p>0,05) Tedvi uygulnn he üç gubun (tedvi,tedvi+kefi,kefi guplı) ktepsin L değelei sınd nlmlı fk yoktu. (p>0,05) MDA sonuçlı: Kefi gubunun MDA değelei, tedvi ypıln diğe iki gub göe (tedvi ve tedvi+kefi) nlmlı olk düşük bulundu. (p<0,05) Tedvi ve tedvi+kefi gubunun ikisi sındki MDA değelei isttistiksel olk nlmı fkı yoktu. (p>0,05) Tvm gubun göe, tedvi ve tedvi+kefi gubunun değelei isttistiksel olk nlmı düşük bulundu. (p<0,05) Kefi gubunun MDA değelei, tvm gubun göe isttistiksel olk nlmı düşük bulundu. (p<0,05) (Tblo 2) İsttiksel değelendime Çlışmd elde edilen bulgul değelendiiliken, isttistiksel nlizle için SPSS (Sttisticl Pckge fo Socil Sciences) fo Windows 17.0 pogmı kullnılmıştı. Çlışm veilei değelendiiliken tnımlyıcı isttistiksel metotlı (Otlm, Stndt spm) kullnılmıştı. Veilein noml dğılıp dğılmdığının belilenmesinde Shpio Wilk s testi kullnıldı. Beş fklı gubun Ktepsin B ve L, MDA değişkenleine göe otlmlının kşılştıılmsınd ANOVA testi kullnıldı. Fklı guplın belilenmesinde POST HOC testleden Tmhne testi kullnıldı. Anlmlı değe olk %95 güven lığınd, p<0,05 kbul edildi. Tblo 2. MDA değeleinin gupl göe dğılımı Bulgul Biyokimysl Bulgul Ktepsin B ve L, MDA değeleine belilemek üzee, genel nestezi ltınd tldn omuilik doku öneklei lındı. Ktepsin B sonuçlı: Kontol gubundki tlın ktepsin B sonuçlı, tvm,tedvi,tedvi+kefi ve kefi guplının ktepsin B sonuçlı sındki fk isttistiksel olk nlmlı değildi. (p>0,05) Kefi gubunun ktepsin B değelei, diğe tüm gupl göe nlmlı olk yüksek bulundu. (p<0,05) (Tblo 1) Şekil 1. Tvm gubun it deney hyvnlının medull spinlisinde te duvınd klınlşm (sı ok bşı) (,b) (X10,40), k mddede miyelin kılıfld hs ve vkuolizsyon (siyh ok) (b,c,d)(he, X40), dm içi kongesyon (*)(c) (HEx40), gi mddedeki moto nöonld bzofilik boynmış ve nekotik hücele (sı ok) (d,e,f) (HE, X40) ve doku içi hs (siyh ok bşı)(e)(he,x40) gözlenmektedi. Tblo 1. Ktepsin B değeleinin gupl göe dğılımı Histoptolojik Bulgul Kontol gubun, 1. gubu it deney hyvnlının histolojik göünüm nomldi. Tvm gubun, 2. gub it deney hyvnlının medull spinlislei üzeinde ışık mikoskobik olk ypıln incelemelede te duvınd klınlşm, k mddede miyelin kılıfld hs ve vkuolizsyon ile dm içi kongesyon göüldü. Ayıc gi mddedeki moto nöonld bzofilik boynm ve nekoz ile doku içi hs göüldü.( Şekil 1) Tvm+tedvi gubun, 3. gub deney hyvnlının medull spinlislei üzeinde ypıln ışık mikoskobik incelemelede k mddede hemoji, miyelin kılıfld hs ve vkuolizsyon gözlendi. Gi mddedeki moto nöonld nükleuslı seçilemeyen bzofilik boynm ve nekotik hücele dikkt çekti.(şekil 2) Tvm+tedvi+kefi gubun, 4.gub it deney hyvnlının medull spinlislei üzeinde ypıln ışık mikoskobik incelemelede k mddede ye ln miyelinli lifle nomle ykın gözlendi. Gi mddede yeleşen moto nöonl nükleus ve sitoplzmik boynm özellikleiyle bebe noml ypıd göüldü. Ayıc medull spinlisin mekezinde ye ln ve ependim hücelei ile döşeli knlis sentlis 3 Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine 23

4 Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum Şekil 2. Tedvi gubun it deney hyvnlının medull spinlisinde k mddede gözlenen hemoji (*) (,b,d) (HE, X10,40), miyelin kılıfld hs ve vkuolizsyon (ok) (d)(he, X40), gi mddedeki moto nöonld bzofilik boynmış ve nekotik hücele (sı ok) (b,c) (HE, X40) gözlenmektedi. ypısı d noml göüldü. (Şekil 3) Tvm+kefi gubun, 5. gub it deney hyvnlının medull spinlislei üzeinde ypıln ışık mikoskobik incelemelede diğe tüm gupll kşılştııldığınd medull spinlis, k mddede bulunn miyelinli liflei ve gi mddede ökomtik nükleuslu moto nöonlı ile bilikte oldukç düzgün ypıd göüldü. (Şekil 4) Şekil 3. Tvm+tedvi+kefi gubun it deney hyvnlınd k mddede noml göünümlü miyelinli lifle (*), gi mddede noml göünümlü moto nöonl (ok) (,b,c,d) ve ependim hücelei ile döşeli knlis sentlis ypılıyl (ok bşı) noml göünümlü medull spinlis ypısı gözlenmektedi (HE, X10,20,40). Ttışm Kefi, beyzımtık enkte, knıbhı ndın ekşi ve köpüklü bi süt üünü olup, pobiyotik gubundndı. İçindeki yüksek miktd lktik sit bkteilei, kefiin ship olduğu kuvvetli ntioksidn özelliğinden soumlu tutulmktdı[4]. Ypıln çlışmld kuvvetli bi ntioksidn oln vitmin E den dh kuvvetli bi şekilde lipid peoksidsyonunu engellediği tespit edilmişti. [5] Bunun ynınd kefiin ntibkteiel ntifungl[6], ntitumol[5-6], hipokolesteolomik [7-8] ve immunomodültö [ ] etkilei gösteilmişti. Akut omuilik ylnmlınd, ikincil hslnm, biincil hslnm sonucund gelişen bi dizi ileleyici biyokimysl bi süeç olup hüce ölümü ile sonuçlnmktdı. Ypıln çlışml Şekil 4. Tvm+ kefi gubun it deney hyvnlınd küçük ve büyük büyültmelede k mddede noml göünümlü miyelinli lifle (*) ve gi mddede ökomtik nükleuslu noml göünümlü moto nöonl (ok) (c,d) gözlenmektedi (HE, X10,40,100). d nöolojik fonksiyon bozukluğunun gelişiminde n bi ol oyndığını göstemektedi[12]. Lipid peoksidsyonu, membnd bulunn polinstüe yğ sitleinin, sebest oksijen dikllei tfındn peoksitle, lkolle, ldehidle, hidoksi yğ sitlei, etn ve pentn gibi çeşitli üünlee yıkılmsı eksiyonudu. Otmd bulunn sebest dikl miktınd tm ile bilikte lipid peoksidsyonu tmktdı. İkincil ylnm sonucund d otmd bulunn sebest oksijen dikl miktınd tış meydn geli. Sebest diklle ognizmd, hem noml metbolizmnın yn üünü olk hemde çevesel fktölein etkisi ile oluşbilmektedi. Anck kut omuilik ylnmsı sonucund sebest oksijen diklleinde tış kşı endojen dikl temizliyecilei yetesiz klmktdı[13]. Sntl sini sistemi yüksek konsntsyond polinstüe yğ sidi içediği için, sebest dikl eksiyonlı sonucu tn lipit peoksidsyonun oldukç duylı bi dokudu[14]. Lipid peoksidsyonu ile bilikte, bozuln hüce membn bütünlüğü sonucund, noml iyon giişiyle bilikte hüce ölümüne neden olu. Bu olyın kontol edilememesi hlinde oluşn zinci eksiyon ile hücesel ölümün yyılmsı oty[15]. Lipid peoksidsyonu, dikllein MDA dönüşümü ile sonlnı, in vito membn lipid peoksidsyonunu tespit etmek için MDA düzeyinin ölçülmesi oldukç sık kullnıln bi metottu. Akut omuilik ylnmsınd tn sebest dikllei ile bilikte lipid peokisdsyonu t ve MDA değelei yükseli. Akut omuilik ylnmsı sonucund intsellüle otmd bi diğe yıkıln ypıl poteinledi. Lizozomlın ypısınd ye ln lizozoml potezl iskemik ve eksitoksik nöonl hüce ölümünde önemli ol oynl. Lizozoml sidik potez gubundn oln ktepsin B, mekezi sini sistemi hstlıklınd ve ylnmlınd potez olü üstleneek göev yp. Ktepsinlein poptozis egulsyonund d önemli olü vdı[16-17]. Ypıln çlışml sntl sini sistemi iskemi ve epefüzyonu neticesinde ktepsin B ve ktepsin L değeleinin yükseldiği tespit edilmişti[18]. Ktepsin B değeleinin yükselmesinin moto nöonlın ölümü ile ykınd ilişkili olduğu gösteilmişti[19]. Metilpednosolon, nöl doku ylnmlınd üzeinde en çok çlışıln jnldn bii olmsın ğmen ttışmlın odğındki jnldndı. Sentetik bi glukokotikoid steoid olup, güç Jounl Jounl of Clinicl of Clinicl nd Anlyticl nd Anlyticl Medicine Medicine

5 Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum lü nti-inflmtu etkisi ve ntioksidn özelliğiyle, kut omuilik ylnmsı tedvisinde klinik olk kbul gömüş tek seçenek olm özelliğini südümektedi[20]. Klinik olk kullnıln ilk 8 stte 30 mg/kg/ 15 dkik, devmınd 5.4 mg/kg/ 23 st infüzyon dozlı Ntionl Acute Spinl Cod İnjuy Study-II (NAS- CIS) çlışmsı ile elde edilmişti. NASCIS-III çlışmsın göe ise ylnm sonsı ilk 3 st içinde tedviye lınn ve 48 st südüülen hstld sonuçl dh iyi bulunmuştu[21-22]. Çlışmmızd deneysel olk sık kullnıln klip kompesyon modeli ile tvm oluştuuln sıçnld kouyucu olk veilen kefiin nöopotektif etkilei; omuilik dokusund histoptolojik olk ve omuilik dokusund ktepsin B ve L, MDA değelei ölçümleine göe değelendiilmiş ve ştıılmıştı. Sonuçlımız gözden geçiildiğinde ktepsin B değeleinin sdece kefi ln gupt diğe gupl göe isttiksel olk nlmlı ttığı ve ktepsin L değelei bkımınd gupl sınd isttiksel bi fk olmdığı sptnmıştı. MDA değelei gözden geçiildiğinde, tvm gubun göe, tedvi uygulnn ve kefi veilen sıçnld nlmlı bi düşme tespit edilmişti. Kefi gubundki düşmenin, tedvi gubun göe dh fzl olduğu göze çpmktdı. Histoptolojik incelemesinde ise tedvi gubunun sonuçlınd k mddede hemoji, miyelin kılıfld hs ve vkuolizsyon gözlenmesi, gi mddedeki moto nöonld nükleuslı seçilemeyen bzofilik boynm ve nekotik hücele dikkt çekici olmkl bilikte, bi hft süeyle oogstik yoldn kefi ln tld k mddede bulunn miyelinli liflei ve gi mddede ökomtik nükleuslu moto nöonlı ile bilikte oldukç düzgün ypıd göülmesi dikkt çekicidi. Kefi, Deneysel Omuilik Ylnmsı / Kefi, Expemintl Spinl Cod Tum contining lctobcillus cidophilus 11 on seum cholesteol in hypecholesteolemic humns. J Am Col Nut 1999;18(1): Hoolihn LK. Pophylctic nd thepeutic use of pobiotics: A evieu. J Am Diet Assoc 2001;101: Osd K, Ngi K, Teuy K, Tchibn H, Shiht S, Mukmi H: Enhncement of intefeon-b poduction with sphingomiyelin fom femented milk. Bithepy 1994; Thoueux K, Schmucke DL. Kefi: Milk enhnces intestinl immınity in young but not old ts. J Nut 2001;131(3): Rivlin AS, Tto CH. Regionl spinl cod blood flow in ts fte sevee cod tum. J Neuosug 1978;49: But Ş, Cnbolt A, Bilge T, Aydın Y, Çokneşeli B, Ky U. Lipid peoxidtion in expeimentl spinl cod injuy: time-level eltionship. Neuosugey Rev 1993;16: Toystmn RJ. Oxygen dicl mechnism of bin injuy following ischemi nd epefusions. J Appl Physiol 1991;71: Dumont RJ, Vem S, Okonkwo DO, Hulbet RJ. Acute spinl cod injuy, Pt II: Contempoy Phmcothepy. Clin Neuophmocology. 2001;24(5): Stok V, Tuk V, Tuk B. Lysosoml cysteine cthepsins: signling pthwys in poptosis. Biol Chem 2007;388: Ivnov S, Repnik U, Bojic L, Petelin A, Tuk V, Tuk B. Lysosomes in poptosis. Methods Enzymol 2008;442: Seyfied D, Hn Y, Zheng Z, Dy N, Moin K, Rempel S, et l. Cthepsin B nd middle ceebl tey occlusion in the t J Neuosug 1997;87(5): Sun L, Wu Z, Bb M, Petes C, Uchiym Y, Nknishi H. Cthepsin B-dependent moto neuon deth fte neve injuy in the dult mouse. Biochem Biophys Res Commun 2010;399: Mion DW. Hed nd spinl cod injuy. Neuol Clin 1998;16(2): Bcken MB, Shepd MJ, Holfod TR, Leo-Summes L, Aldich EF, Fzl M, et l. Methylpednisolone o tiilzd mesylte dministtion fte cute spinl cod injuy: 1 ye follow up. Results of the Thid Ntionl Acute Spinl Cod Injuy Study (NASCIS III). J Neuosug 1998;89: Hll ED, Spinge JE. Neuopotection nd Acute Spinl Cod Injuy: A Reppisl. NeuoRx 2004;1(1): How to cite this ticle: Delen E, Dumz R, Oğlkçı A, Knbk G, Buukoğlu D, Bl C. Efficcy of Kefi on the Relese of Lysosoml Poteses Afte Expemintl Spinl Cod Tum. J Clin Anl Med 2015;6(suppl 1): Sonuç Kefiin ship olduğu ntioksidn özelliği bşt olmk üzee diğe nöopotektif özelliklei ile kut omuilik ylnmlınd ikincil ylnmyı kısmen de ols engellediği söylenebili. Spinl tvmlın tedvisinde kullnılbilecek yeni bi jn olk kefiin, bi pobiyotik olmsı bkımındn, bu deneysel çlışm lnın yeni bi bkış çısı getiebileceğine düşünmekteyiz. Anck kefiin klinik kullnımı için dh fzl syıd deneysel ve klinik çlışmy ihtiyç vdı. Çık Çkışmsı ve Finnsmn Beynı Bu çlışmd çık çkışmsı ve finnsmn destek lındığı beyn edilmemişti. Kynkl 1. Hncı M. Vetebomedull Ylnmlın Tihçesi. Mut Hncı, Önde Aydıngöz, editöle. Medull Spinlis Ylnmlı. İstnbul: Logos Yyıncılık; p Kcn I, Koyuncu H, Pekel O, Sümbüloğlu G, Kimp M, Dusun H, et l. Tumtic spinl cod injuies in Tukey: ntion-wide epidemiologicl study. Spinl Cod 2000;38(11): Ellis RC, O Steen WA, Hyes RL, Nick HS, Wng KK, Andeson DK. Cellul locliztion nd enzymtic ctivity of cthepsin B fte spinl cod injuy in the t. Exp Neuol 2005;193(1): Lin MY. The beneficl effect of lctic cid bctei. J Chin Nut Soc 1995;20: Shiomi M, Sski K, Muofushi M, Aib K. Antitumo ctivity in mice of olly dministeed polyscchide fom Kefi gin. Jpn. J Med Sci Biol 1982;35(2): Çevikbş A, Yemni E, Ezzeden FW, Ydımcı T. Antitumoul, ntibcteil nd ntifungl ctivities of kefi nd kefi gin. Phytothe Res 1994;8: Tmi Y, Yoshimitsu N, Wtnbe Y, Kuw Y. Effect of milk femented by cultuing with vious lctic cid bctei nd yest of seum cholosteols level in ts. J Fement Bioeng 1996;8: JAmes W, Andeson MD, Stnly F, Gillilnd PHD. Effect of femente milk (yogut) 5 Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine Jounl of Clinicl nd Anlyticl Medicine 25