BD CHROMagar Orientation Medium

Transkript

1 KULLANIM TALİMATLARI KULLANIMA HAZIR PLAK BESİYERİ PA Rev.: Sep 2011 BD CHROMagar Orientation Medium KULLANIM AMACI BD CHROMagar Orientation Medium idrar yolu patojenlerinin izolasyonu, doğrudan tanımlanması, ayrıştırılması ve sayılması için seçici olmayan bir besiyeridir. BD CHROMagar Orientation Medium doğrulama testi olmaksızın Escherichia coli ve Enterococcus un ayrıştırılması ve tanımlanmasına izin verir. PROSEDÜR İLKELERİ VE AÇIKLAMASI Mikrobiyolojik yöntem. Escherichia coli, enterokoklar, Klebsiella-Enterobacter-Serratia ve Proteus-Morganella- Providencia grupları en sık idrar yolu enfeksiyonları oluşturan organizmalardır (=UTI). UTI nin %60 ila 70 ine saf kültürde veya enterokoklar ile birlikte E. coli neden olmaktadır. Staphylococcus saprophyticus ve Streptococcus agalactiae ye daha nadiren olmakla birlikte, kadınlarda UTI de karşılaşılmaktadır. Yer alan ajanların farklı antimikrobiyal duyarlılıkları sebebiyle, biyokimyasal test dizileri ile türlerinin belirlenmesi etkili antimikrobiyal tedavi için gereklidir. Bu, idrar örneklerini işleyen bir laboratuvarda en çok zaman tüketen işlerden biridir. En sık izole edilen tür veya organizma grupları karakteristik enzimler üretir. Bu sebeple, bu organizmaları tür düzeyinde sınırlı sayıda substrat fermantasyonu veya kullanım testleri ile tanımlamak mümkündür. 1,2 Dahil olan bazı organizmalar laktoz veya glikozit metabolizması veya her ikisi için enzim üretirken diğerleri bu enzimlerin hiçbirini üretmez. Örnek olarak, E. coli laktoz metabolizması enzimleri üretir fakat ß-glukozidaz negatiftir. Enterobacteriaceae familyasının diğer üyeleri ß- glukozidaz pozitiftir fakat laktoz fermantasyonu için gerekli enzimleri içermezken diğerleri her iki enzim tipini de içerebilir veya hiçbirini içermeyebilir. Beta-glukozidazlar aynı zamanda Enterococcus spp. ve Streptococcus agalactiae gibi gram pozitif koklarda bulunur. Triptofan deaminaz (TDA) karakteristik olarak Proteus-Morganella-Providencia grubu organizmalarda bulunan bir enzimdir. Performans değerlendirmeleri BD CHROMagar Orientation Medium un, UTI patojenlerinin izolasyonu, ayrıştırılması ve sayımı için CLED agar veya Kan ve MacConkey Agarların kombinasyonu gibi yaygın olarak kullanılan diferansiyel besiyerlerinden üstün olduğunu göstermiştir. 3-5 BD CHROMagar Orientation Medium doğrudan izolasyon plağında E. coli ve enterokokların tanımlanmasına izin verir; ayrıca, birçok Staphylococcus saprophyticus ve S. agalactiae suşunun yanı sıra Klebsiella-Enterobacter-Serratia (=KES) ve Proteus-Morganella- Providencia (=PMP) gruplarının olası tanımlanması koloni ve besiyeri renklenmesi yoluyla mümkündür. BD CHROMagar Orientation Medium seçici değildir, diğer UTI patojenleri de gelişecektir fakat tanımlanmaları için biyokimyasal testlere ihtiyaç duyulur. CHROMagar Orientation Medium, A. Rambach tarafından geliştirilmiştir ve CHROMagar, Paris, Fransa ile bir lisans anlaşması altında BD tarafından satılmaktadır. BD CHROMagar Orientation Medium da özel olarak seçilen peptonlar besinleri sağlar. Kromojen karışımı, spesifik mikrobiyal enzimlerle degradasyon üzerine farklı renkli bileşikleri serbest bırakan yapay substratları (kromojenleri) içerir, bu sayede belirli türlerin doğrudan ayrıştırılmasını veya belirli organizma gruplarının yalnızca minimum doğrulayıcı testler ile saptanmasını sağlar. PA

2 REAKTİFLER BD CHROMagar Orientation Medium 1 Litre Saf Su için Formül* Kromopepton 16,1 g Kromojen Karışımı 1,3 Agar 15,0 ph 6,9 +/- 0,2 *Performans kriterlerini karşılamak üzere gereken şekilde ayarlanmış ve/veya desteklenmiştir. ÖNLEMLER. Yalnızca profesyonel kullanım içindir. Mikrobiyal kontaminasyon belirtileri, renk değişimi, kuruma, çatlama veya diğer bozulma belirtileri görülen plakları kullanmayın. Aseptik kullanma prosedürleri, biyolojik tehlikeler ve kullanılmış ürünün atılmasıyla ilgili olarak GENEL KULLANIM TALİMATLARI na bakın. SAKLAMA VE RAF ÖMRÜ Alındıktan sonra plakları kullanana kadar orijinal kaplı ambalajında karanlıkta 2 ila 8 C de saklayın. Dondurmaktan ve aşırı ısıtmaktan kaçının. Plaklar son kullanma tarihine kadar (ambalaj etiketine bakın) ve önerilen inkübasyon sürelerinde inkübe edilebilir. 10 plaklık açılmış yığınlardan alınan plaklar temiz bir alanda, 2 ila 8 C de saklandığında bir hafta kullanılabilir. KULLANICI TARAFINDAN KALİTE KONTROLÜ Temsili örnekleri aşağıdaki suşlar ile inoküle edin (detaylar için, bkz. GENEL KULLANIM TALİMATLARI belgesi). Plakları ters konumda 35 ila 37 C de aerobik olarak 20 ila 24 saat inkübe edin. Suşlar Gelişim Sonuçları Escherichia coli İyi ila mükemmel gelişim; koloniler orta büyüklükte ila büyük, ATCC koyu gül rengi ila pembe, şeffaf Enterobacter cloacae İyi ila mükemmel gelişim; koloniler orta büyüklükte, koyu mavi, ATCC Proteus mirabilis ATCC Enterococcus faecalis ATCC Streptococcus agalactiae ATCC Staphylococcus aureus ATCC Staphylococcus saprophyticus ATCC (=NCTC 10516) İnoküle edilmemiş mor haleler var veya yok İyi ila mükemmel gelişim; koloniler orta büyüklükte, soluk ila bej, kehribar rengi ila kahverengi hale ile çevrili; yoğun gelişim olan alanlarda, besiyeri tamamen kehribar rengi ila kahverengi olabilir. Yayılma kısmi ila tamamen inhibe edilmiş. İyi ila mükemmel gelişim; koloniler küçük, mavi-yeşil ila mavi Orta düzey ila iyi gelişim; koloniler iğne ucu kadar ila küçük, açık mavi-yeşil ila açık mavi, haleler var veya yok İyi ila mükemmel gelişim; koloniler orta büyüklükte ila küçük, doğal renklerinde (beyaz ila krem) Orta düzey ila iyi gelişim; koloniler küçük, opak, açık pembe ila kırmızı Renksiz ila çok açık kehribar rengi, şeffaf PROSEDÜR Sağlanan Malzemeler BD CHROMagar Orientation Medium (90 mm Stacker plaklar). Mikrobiyolojik açıdan kontrol edilmiştir. Sağlanmayan Malzemeler Yardımcı kültür ortamı, reaktifler ve gerekli laboratuvar ekipmanı. PA

3 Örnek Türleri Bu besiyeri özellikle idrarda bakterilerin sayılması ve ayrıştırılması için kullanılır. Orta kısım veya kateter idrar veya suprapubik mesane delme yoluyla alınan idrar kullanılabilir (aynı zamanda bkz. PERFORMANS ÖZELLİKLERİ VE PROSEDÜRÜN KISITLI OLDUĞU ALANLAR). İdrar örneklerinin alınmasında aseptik teknikleri uygulayın. İdrar (alındıktan en fazla 2 saat sonra) doğrudan besiyeri üzerine sürme yöntemi kullanılarak ekilmelidir veya bu besiyerinin inokülasyonundan önce enfeksiyöz ajanların veya kontaminantların aşırı gelişimini engellemek için buzdolabında saklanmalıdır (en fazla 24 saat). Test Prosedürü Kalibre edilmiş özeler veya idrar örneklerinin plağa uygulanmasında yaygın olarak kullanılan diğer tekniklerin kullanılması tipik renk ve biçimlerde izole kolonilerin elde edilmesi için zorunludur. Kalibre edilmiş öze kullanarak seyreltilmemiş, iyi karıştırılmış idrardan örnek alın (0,01 veya 0,001 ml). Özeye uygun miktarda örnek alınmasını sağlayın. Örneği plağın ortasına tek bir sürme ile inoküle ederek buradan inokülumun ilave yaymasını gerçekleştirin. 6,7 İnoküle edilmiş plakları ters konumda 35 ila 37 C de aerobik olarak 20 ila 24 saat inkübe edin. Kromojenleri parçalayabileceğinden, inkübasyon sırasında ışığa maruz bırakmaktan kaçının. Koloni renkleri geliştikten sonra, ışığa maruz kalınabilir. Sonuçlar İnkübasyondan sonra, plaklar inokülumun uygun şekilde seyreltildiği alanlarda izole koloniler göstermelidir. Tanımlama veya ayrıştırma ve ilave teyit testleri için bir rehber olarak Tablo 1 ve Şema 1 kullanılmalıdır. Sonuçları doğrulamak için bir gram boya ve mikroskop kullanılabilir. Tablo 1 Farklı Koloni Renkleri Temelinde Tanımlama için Yönergeler Organizma BD CHROMagar Orientation Medium üzerinde görünüm Teyit Testleri (Daha ileri ayrıştırma için gerekli) E. coli a Orta-büyüklükte ila geniş, koyu gül rengi ila pembe, çevreleyen besiyerinde haleler bulunan veya bulunmayan şeffaf koloniler KES b grubu PMP c grubu Orta-büyüklükte, mavi ila koyu mavi koloniler, mor haleler var veya yok Kahverengi haleler ile çevrili soluk ila bej koloniler d Cins içerisinde ayrıştırma için BBL CRYSTAL E/NF Cins içerisinde ayrıştırma için Indol, H 2 S e, ODC f, BBL CRYSTAL E/NF Enterococcus Küçük mavi-yeşil koloniler S. agalactiae Açık mavi-yeşil ila mavi, iğne ucu PYR g kadar ila küçük koloniler, haleler var veya yok S. saprophyticus (çoğu suşları) Açık pembe ila gül rengi, küçük 5 µg novobiyosin disk h opak koniler, haleler var veya yok Diğer (mayaları da kapsayan) Doğal (krem) pigmentasyon Uygun biyokimyasal veya serolojik tanımlama testleri Dipnot a-h için, bkz Şema 1 Teyit Testleri Doğrulayıcı testleri gerektiği şekilde gerçekleştirin (Tablo 1, Şema 1). BD CHROMagar Orientation Medium üzerindeki kolonilerin üzerine doğrudan herhangi bir saptama reaktifi uygulamayın, Bunun yerine, testler filtre kağıdı üzerinde ilgili kolonilerden elde edilen gelişimlerle gerçekleştirilmelidir. Koloni rengi pozitif indol testinin kırmızı rengi ile karışacağından koyu gül rengi ila pembe, fakat boyutu iğne ucu kadar ila küçük olan E. coli kolonileri için Kovacs indol reaktifi kullanmayın; bunun yerine dimetilaminosinamaldehit (DMACA) indol reaktifi kullanın (yeşil = pozitif). Diğer doğrulayıcı testler veya biyokimyasal tanımlama sistemleri kullanılıyorsa, bu testler veya sistemlerle birlikte verilen talimatlar takip edilmelidir. PA

4 Yalnızca cins düzeyi ötesinde tanımlama gerekiyorsa Enterococcus için teyit testini gerçekleştirin. Şema 1: Seçilen Organizmalar üzerinde Tanımlama Testlerinin Gerçekleştirilmesi için Yönergeler Koloni Görünüşü Küçük, gül rengi, opak Renksiz ila bej koloniler, turuncukahverengi besiyeri 5 µg novobiyosin disk PMP grubu duyarlı dirençli DMACA i Indol testi S. intermedius, S. simulans Cins içerisinde ayrıştırma S. sapro- için BBL CRYSTAL GP phyticus, S. xylosus yeşil (pozitif) H 2 S pozitif e H 2 S negatif e renksiz ila gül rengi (negatif ODC pozitif f ODC negatif f P. vulgaris Providencia spp., Morganella spp. P. mirabilis P. penneri a Bkz. Prosedürün Kısıtlı Olduğu Alanlar b KES = Klebsiella-Enterobacter-Serratia grubu c PMP = Proteus-Morganella-Providencia grubu d Kehribar rengi ila kahverengi, bütün PMP grubu organizmalarda ortak pozitif triptofan deaminaza (TDA) bağlıdır. P. vulgaris suşlarının yaklaşık %50 si kehribar rengi ila kahverengi besiyeri üzerinde mavi koloniler oluşturur. e Geleneksel hidrojen sülfit testi. f Geleneksel ornitin dekarboksilaz testi g Pirolidonil arilamidaz için piroglutamat testi h Mueller Hinton II Agar plağı izolat ile yayarak inoküle edin. İnoküle edilen plağa novobiyosin (5 µg disk) yerleştirin. 35 ila 37 C de 18 ila 24 saat inkübe edin ve inhibisyon zonu boyutunu belirleyin. (dirençli: 16 mm, duyarlı: > 16 mm). i DMACA= indol üretimi için dimetilaminosinamaldehit reaktif. Reaktifi filtre kağıdına uygulayın ve filtre kağıdı üzerinde reaktif içeren alana bir koloni sürün saniye bekleyin. Yeşil renk indol üretiminin göstergesidir (kırmızı ila renksiz = negatif). Sonuçların Hesaplanması ve Yorumlanması 6,7 Plaktaki kolonileri (cfu) sayın. 0,01 ml öze kullanıldığında, oluşan her koloni 100 CFU/mL yi temsil eder; 0,001 ml öze kullanıldığında, her koloni 1000 CFU/mL idrara karşılık gelir. 7 Orta kısım ve kateter idrarı: Mevcut rehberler 10 5 CFU/mL yoğunlukta tek bir izolatın enfeksiyonu gösterdiğini, <10 5 cfu/ml nin üretral veya vajinal kontaminasyonu gösterdiğini ve 10 4 ila 10 5 cfu/ml arasının klinik bilgilere göre yeniden değerlendirilmesi gerektiğini göstermektedir. 7 Kontaminant bakteriler genellikle değişen koloni morfolojilerinde düşük sayılarda görülür. Suprapubik mesane delme yoluyla alınan idrar: Enfekte olmamış bireylerde mesane steril olduğundan, saptanan herhangi bir cfu enfeksiyon belirtisidir. İdrar yolu patojenleri, bu besiyeri üzerinde genellikle tekdüze koloni morfolojisine ve rengine sahip yüksek sayımlar verecektir. PERFORMANS ÖZELLİKLERİ VE PROSEDÜRÜN KISITLI OLDUĞU ALANLAR BD CHROMagar Orientation Medium yaygın idrar yolu patojenlerinin doğrudan tanımlanması, ayrıştırılması ve sayılması için kromojenik bir besiyeridir. Bu besiyeri idrar örneklerinden Enterobacteriaceae, Pseudomonas ve diğer fermente edici olmayan Gram negatif çubuk, enterokoklar, stafilokoklar ve diğer birçoğu gibi aerobik olarak gelişen birçok mikroorganizmanın izolasyonu için uygundur. Performans değerlendirmeleri BD CHROMagar Orientation Medium un, UTI patojenlerinin izolasyonu, ayrıştırılması ve sayımı için CLED Agar veya Kan ve PA

5 MacConkey Agarların kombinasyonu gibi yaygın olarak kullanılan diferansiyel besiyerlerine kıyasla avantajlara sahip olduğunu göstermiştir. 3-5 BD CHROMagar Orientation Medium CLSI standardı M35-A Bakteri ve Mayaların Kısaltılmış Tanımlanması; Onaylanmış Kılavuz tarafından belirlenen tanımlama kriterleri temelinde E. coli ve enterokokların teyit testleri olmaksızın ayrıştırılması ve tanımlanmasına olanak sağlar. 8 S. saprophyticus, S. agalactiae, Klebsiella-Enterobacter-Serratia (KES) ve Proteus-Morganella- Providencia (PMP) gruplarının olası tanımlanması koloni morfolojisi, pigmentasyon ve besiyeri renk değişimi yoluyla mümkündür. Yaygın idrar yolu enfeksiyonlarının çoğuna E. coli ve/veya enterokoklar neden olduğundan, bu besiyerinin kullanılması, geleneksel besiyeri kullanıldığında gerekli olan tanımlama sistemlerini inoküle etme ve okuma için iş yükünü ve süreyi önemli ölçüde azaltır. Performans Sonuçları 4,9,10 BD CHROMagar Orientation Medium ve kromojenik rakip besiyerinin mikrobiyal performansı, idrar yolu enfeksiyonlarından sorumlu bakterilerin sayımı ve olası tanımlanması için %5 koyun kanı içeren Columbia agar ve kristal viyole içermeyen MacConkey agar ile kıyaslanmıştır. 4 Toplam 658 klinik idrar örneğinden, 118 örnek gelişme göstermemiş, 402 örnek 10 5 CFU/mL hücre sayısı ile gelişme göstermiş ve 138 örnek <10 5 CFU/mL hücre sayısı ile gelişme göstermiştir. Hücre sayıları 10 5 CFU/mL olan örneklerden, 163 ü saf kültür ve 239 u karışık kültürdür. Her iki kromojenik besiyerinde toplam 266 Escherichia coli izolatı elde edilmiştir, 260 ı kan agarda izole edilmiş ve 248 i MacConkey agarda izole edilmiştir. Bir suş (%0,4) BD CHROMagar Orientation Medium üzerinde beklenen pembe rengi geliştirmede başarısız olmuş ve 23 suş (%8,7) rakip besiyerinde beklenen pembe rengi geliştirmede başarısız olmuştur. Enterokoklar (BD CHROMagar Orientation Medium, n = 266; rakip besiyeri, n = 265) her iki kromojenik besiyerinde küçük mavi-yeşil koloniler oluşturmuşladır. Karışık kültürlerin elli tanesi yalnızca kromojenik besiyerinde saptanan enterokokları içermiştir. Klebsiella-Enterobacter- Serratia (KES) ve Proteus-Morganella-Providencia (PMP) grupları her iki kromojenik besiyerinde tanımlanabilmiştir. KES grubuna ait 66 izolattan 63 ü BD CHROMagar Orientation Medium üzerinde beklenen renkte gelişmiştir ve 64 izolattan 58 i rakip besiyerinde beklenen renkte gelişmiştir. Diğer mikroorganizmalar daha ileri tanımlama testleri gerektirmiştir. 286 sı bakteri veya maya gelişimi gösteren toplam 421 klinik idrar örneği ile ikinci bir performans değerlendirmesinde, BD CHROMagar Orientation Medium, BD Columbia Agar with 5% Sheep Blood ile karşılaştırılmıştır. 9 Kromojenik besiyerinde, 483 izolat elde edilmiştir ve kan agar besiyerinde 447 suş izole edilmiştir. Suşlar biyokimyasal olarak tanımlanmıştır. E. coli suşlarının %95 i gül rengi ila pembe koloni rengi ile doğru şekilde tanımlanırken, geri kalan E. coli suşları pigmentsizdi. Bütün Enterococcus spp. izolatları tipik mavi ila mavi-yeşil koloni rengi göstermiştir. Streptococcus agalactiae izolatları küçük, açık mavi ila mavi-yeşil koloniler oluşturmuşlardır ve enterokoklardan negatif PYR testi ile ayrıştırılmışlardır. Bütün Staphylococcus saprophyticus ve S. simulans izolatları küçük gül rengi opak koloniler oluşturmuşlar ve novobiyosin testi ile ayrıştırılıp biyokimyasal testlerle tür düzeyinde tanımlanmışlardır. İdrara aşılanmış 900 ün üzerinde bakteri suşunun test edilmesini kapsayan kör bir dahili çalışmada, yalnızca koloni rengi ve morfolojisi temelinde E. coli tanýmlanmasýnda BD CHROMagar Orientation Medium un duyarlýlýðý ve özgünlüðü sýrasýyla %97 ve %99 idi; Enterococcus için tanýmlama duyarlýlýðý ve özgünlüðü sýrasýyla %99 ve %97 idi (bkz tablo). 10 Organizma Duyarlılık %(%95 Güven Aralığı) E. coli 277/286 %96,9 (%94,1-98,6) Enterococcus 319/324 %98,5 (%96,4-99,5) Özgünlük %(%95 Güven Aralığı) 638/645 %98,9 (%97,8-99,6) 603/622 %97 (%95,3-98,2) PA

6 Prosedürün Kısıtlı Olduğu Alanlar Bu besiyeri seçici olmadığından, diğer UTI patojenleri gelişecektir. BD CHROMagar Orientation Medium üzerinde doğal renklerini gösteren ve kromojenik substratlarla reaksiyona girmeyen koloniler uygun biyokimyasal veya serolojik testlerle daha ileri düzeyde ayrıştırılmalıdır. Referanslara bakın. 1,2 Koyu gül rengi ila pembe olan E. coli kolonilerinin boyutları iğne ucu kadar veya daha küçüktür, nokta indol gibi ilave teyit testleri gerektirir (DMACA indol reaktifi). KES grubuna ait olanlar dışındaki gram negatif çubuklar BD CHROMagar Orientation Medium üzerinde geniş mavi koloniler oluşturabilir ve bu sebeple tanımlanmaları için ilave biyokimyasal testler gerektirir. 11 Çok nadir durumlarda, Listeria monocytogenes veya diğer Listeria türleri idrarda bulunabilir (örn., bu ajanlara bağlı olarak düşüklerden sonra). Listeria, PYR-negatif olan, Streptococcus agalactiae ye benzeyen küçük mavi ila mavi-yeşil koloniler oluşturacaktır. Bu sebeple, bu besiyeri üzerinde PYR negatif olan, çok küçük ila küçük, mavi ila mavi-yeşil koloniler oluşturan bütün suşların bir gram boyasını hazırlamak faydalı olabilir. Gram pozitif çubukların varlığı Listeria türleri için gösterge olabilir, fakat tanımlamalarını doğrulamak için ilave biyokimyasal testler gereklidir. Çok nadiren, Aeromonas hydrophila izolatları gül rengi ila pembe koloniler oluşturabilir. Bunlar E. coli den bir oksidaz testi ile ayrıştırılabilir (Aeromonas = pozitif; E. coli = negatif). Zaman zaman, S. saprophyticus dışındaki koagülaz-negatif stafilokoklar, örn., S. simulans, S. xylosus, ve S. intermedius küçük gül rengi opak koloniler oluşturabilir. Bu sebeple, bu izolatlar üzerinde ilave testler (bkz Şema 1) gerçekleştirmek gereklidir. BD CHROMagar Orientation Medium Neisseria, Haemophilus, veya Mycoplasma spp. gibi güç üreyen organizmaların gelişimini desteklemeyecektir. Bu besiyerinin idrar dışındaki klinik dışı veya klinik örnekler ile kullanımı belgelenmemiştir. BD CHROMagar Orientation Medium u ilk defa kullanmadan önce, belirli suşlar, örn., KULLANICI TARAFINDAN KALİTE KONTROLÜ altında bahsedilen suşlar, ile tipik koloni görünümünün öğrenilmesini öneririz. REFERANSLAR 1. Isenberg, H.D. (ed.) Clinical Microbiology Procedures Handbook, vol. 1. American Society for Microbiology. Washington, DC. 2. Forbes, B.A., D.F. Sahm, and A.S. Weissfeld Bailey & Scott s diagnostic microbiology, 10 th ed. Mosby, Inc., St. Louis. 3. Merlino, J., S. Siarakas, G. J. Robertson, G. R. Funnell, T. Gottlieb, and R. Bradbury Evaluation of CHROMagar Orientation for differentiation and presumptive identification of gram-negative bacilli and Enterococcus species. J. Clin. Microbiol. 34: Hengstler, K.A., R. Hammann, and A.-M. Fahr Evaluation of BBL CHROMagar Orientation medium for detection and presumptive identification of urinary tract pathogens. J. Clin. Microbiol. 35: Samra, Z., M. Heifetz, J. Talmor, E. Bain, and J. Bahar Evaluation of use of a new chromogenic agar in detection of urinary tract pathogens. J. Clin. Microbiol. 36: Clarridge, J.E., M.T. Pezzlo, and K.L. Vosti Cumitech 2A, Laboratory diagnosis of urinary tract infections. Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 7. Forbes, B.A., and P.A. Granato. Processing specimens for bacteria In: Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 8. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS). Approved Guideline M35. Abbreviated identification of bacteria and yeast, CLSI, Wayne, PA.Search for latest version at 9. Data on file. BD Diagnostic Systems Europe, Heidelberg, Germany. PA

7 10. Data on file. BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA. 11. Abbott, S.L Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Plesiomonas, and other Enterobacteriaceae. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8 th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. AMBALAJ/TİCARİ TAKDİM ŞEKLİ BD CHROMagar Orientation Medium Kat. No Kullanıma Hazır Plak Besiyeri, cpu 20 Kat. No Kullanıma Hazır Plak Besiyeri, cpu 120 EK BİLGİ Daha fazla bilgi için lütfen yerel BD temsilcinizle temasa geçin. Becton Dickinson GmbH Tullastrasse 8 12 D Heidelberg/Germany Phone: Fax: Reception_Germany@europe.bd.com CHROMagar is a trademark of Dr. A. Rambach. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD PA