Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 293 ml) Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D

Transkript

1 Sipariş bilgisi Kitlerin kullanılabileceği analizörler ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 43 ml) Roche/Hitachi MODULAR P ([1] 6 x 186 ml) ([2] 6 x 118 ml) (4 x 470 ml) (4 x 293 ml) Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D Roche/Hitachi MODULAR D ([1] 6 x 40 ml, [2] 3 x 49 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 3 ml) Kod Precinorm U (20 5 ml) Kod Precinorm U plus (10 3 ml) Kod Precipath U (20 5 ml) Kod Precipath U plus (10 3 ml) Kod PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kod PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kod PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kod PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kod Bacalar Gösterilen bazı analizörler ve kitler tüm ülkelerde mevcut olmayabilir. Ek sistem uygulamaları için, yerel Roche Diagnostics temsilcinizle irtibata geçin. Türkçe Sistem bilgisi Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analizörleri için: Urea ACN 418, ACN 419; BUN ACN 421, ACN 427. Kullanım amacı Roche otomatik klinik kimya analizörlerinde insan serum, plazma ve idrarında üre/üre azotunun kantitatif tayini için enzimatik in vitro test. Özet 1,2,3,4,5,6,7,8,9 Üre tayini böbrek fonksiyonunun değerlendirmesinde en yaygın kullanılan testtir. Bu test sıklıkla prerenal hiperürisemi (kardiyak dekompansasyon, su eksikliği, yüksek protein katabolizması), renal hiperürisemi (glomerülonefrit, kronik nefrit, polikistik böbrek, nefroskleroz, tübüler nekroz) ve postrenal hiperüriseminin (idrar yolunun tıkanması) diferansiyel tanısı için kreatinin tayiniyle birlikte kullanılır. Üre, protein ve amino asit metabolizmasının son bozunma ürünüdür. Protein katabolizmasında proteinler amino asitlere parçalanır ve deamine olurlar. Bu proseste oluşan amonyak karaciğerde üreye sentezlenir. Bu, insan vücudundaki fazla azotu elimine etmenin en önemli katabolik yolağıdır yılında Marshall kandaki ürenin tayini için üreaz enzimine dayalı bir testi tanıtmıştır. Bu yöntemde üreden üreaz sayesinde serbest kalan amonyak titrimetrik olarak ölçülmektedir. O zamandan bu yana ortaya çıkan amonyağın ölçümü için çok çeşitli teknikler kullanılmıştır. Bunlar arasında Berthelot un indofenol testi ve Nessler reaktifi ile amonyak reaksiyonu sayılabilir. Bundan sonra Fawcett ile Scott ve Chaney ile Marbach tarafından modifikasyonlar yayımlanmıştır yılında Talke ve Schubert ürenin tayini için bağlanmış üreaz/glutamat dehidrojenaz (GLDH) enzim sisteminin kullanıldığı tamamen enzimatik bir prosedür yayımlamıştır. Roche testi de Talke ve Schubert in yöntemine dayalıdır ve kinetik (sabit süreli) ölçümlere izin veren analizörlere göre optimize edilmiştir. Bu formülasyon daha fazla doğrusallık ve artırılmış reaktif stabilitesi sağlar. Test prensibi Kinetik UV testi ve R1'in eklenmesi R2'nin eklenmesi ve reaksiyonun başlaması: Üre, üreaz tarafından hidrolize edilerek CO 2-3 ve amonyak oluşturur. üre + H 2 O üreaz 2 NH CO 3 2- Oluşan amonyak bundan sonra GLDH varlığında α ketoglutarat ve NADH ile reaksiyona girerek glutamat ve NAD + oluşturur. α ketoglutarat + NH NADH GLDH L glutamat + NAD + + H 2 O Absorbansta NADH tüketiminden kaynaklanan düşüş kinetik olarak ölçülür. Reaktifler - çalışma solüsyonları R1 R2 CAPSO a) tamponu: 5 mmol/l, ph 9.65; NADH (maya) 0.23 mmol/l; koruyucu madde BICIN b) tamponu: 1000 mmol/l, ph 7.6; üreaz (Canavalia ensiformis fasulyesi) 120 μkat/l; GLDH (sığır karaciğeri) 15.0 μkat/l; α ketoglutarat 8.3 mmol/l; koruyucu madde a) CAPSO = 3 [sikloheksilamino] 2 hidroksi 1 propansülfonik asit b) BICIN = N,N bis(2 hidroksietil) glisin Önlemler ve uyarılar İn vitro diagnostik kullanım içindir. Tüm laboratuvar reaktiflerinin kullanılmasında gerekli olan normal önlemleri uygulayın. Tüm atık malzemelerin atılması yerel yönetmeliklere göre olmalıdır. Talep edildiği takdirde profesyonel kullanıcılara güvenlik veri formu verilebilir. Reaktif kullanımı R1: Kullanıma hazır R2: Kullanıma hazır Bu kit, havadaki NH3'ün reaktifler tarafından absorbsiyonunu azaltan renk kodlu bacaların (chimney) kullanılmasını gerektirir. Bacalar doğrudan uygun reaktiflerin içine yerleştirilmelidir: beyaz = R1 Bacalar aynı kit içindeki reaktif şişeleri için tekrar kullanılabilir. Ancak, reaktifin deterjanla kontaminasyonunu veya suyla dilüsyonunu önlemek için bacaların yeniden kullanılmadan önce yıkanmasına izin verilmez. Bacalar tüm sistemlerde kullanılabilir. Saklama ve stabilite Açılmamış kit bileşenleri: 2 8 C'de son kullanma tarihine kadar R1: Açılıp analizörde soğutulduğunda 4 hafta R2: Açılıp analizörde soğutulduğunda 4 hafta. 1 / 5

2 Örnek toplama ve hazırlama Örnek toplamak ve hazırlamak için sadece uygun tüpler ve toplama kapları kullanın. Sadece aşağıda listelenen örnekler test edilmiştir ve kabul edilebilir bulunmuştur. Plazma: Li heparin, Na heparin, veya K EDTA'lı plazma. Amonyum heparin kullanmayın. Stabilite: C'de 7 gün 2 8 C'de 7 gün (-15) (-25) C'de 1 yıl : ı koruyucu maddeler kullanmadan toplayın. Stabilite: C'de 2 gün 2 8 C'de 7 gün (-15) (-25) C'de 4 hafta Roche/Hitachi MODULAR analizörleri: numuneleri % 0.9'luk NaCl veya analizörlerde bulunan distile/deiyonize su ile otomatik olarak oranında seyreltilir. Sonuçlar hesaplanırken ilgili dilüsyonlar göz önünde bulundurulur. Roche/Hitachi analizörleri - otomatik numune dilüsyonu olmadan: numunelerini % 0.9'luk NaCl veya distile/deiyonize su ile manuel olarak seyreltin (örn oranında). Sonucu uygun dilüsyon faktörü (örn. 11) ile çarpın. Listelenen numune tipleri test sırasında piyasada bulunan numune toplama tüplerinin bir kısmı ile test edilmiştir; bir başka deyişle, tüm üreticilerin mevcut tüm tüpleri test edilmemiştir. Çeşitli üreticilerden alınan numune toplama sistemleri bazı durumlarda test sonuçlarını etkileyebilecek farklı materyaller içerebilir. leri primer tüplerde (numune toplama sistemleri) işleme tabi tutarken tüp üreticisinin talimatlarına uyun. Testi yapmadan önce çökelti içeren numuneleri santrifüje tabi tutun. Kit içinde bulunan malzemeler Reaktifler için Reaktifler çalışma solüsyonları bölümüne bakın. Gerekli malzemeler (kit içinde bulunmayan) Sipariş bilgisi bölümüne bakın. % 0.9'luk NaCl Genel laboratuvar ekipmanı Test Çalışması Testin optimum performansı için, bu belgede ilgili analizör için verilen talimatlara uyun. Analizöre özgü test talimatları için uygun kullanıcı kılavuzuna bakın. Roche tarafından valide edilmemiş aplikasyonların performansı garanti edilmez ve kullanıcı tarafından tanımlanmalıdır. Kalibrasyon İzlenebilirlik: Bu yöntem ID/MS'ye göre standardize edilmiştir. /idrar S1: % 0.9'luk NaCl S2: C.f.a.s. (Otomatik sistemler için kalibratör) Kalibrasyon sıklığı 2 noktalı kalibrasyon önerilir: 42 günde bir reaktif lotu değiştikten sonra kalite kontrol prosedürlerinin ardından gerektikçe Kalite kontrol /idrar Kalite kontrol için, Sipariş bilgisi bölümünde listelenen kontrol materyallerini kullanın. Ayrıca, başka uygun kontrol materyali de kullanılabilir. Kontrol aralıkları ve sınırları her laboratuvarın kendi gereksinimlerine uyarlanmalıdır. Elde edilen değerler tanımlanan sınırlar içerisinde olmalıdır. Her laboratuvar, değerler tanımlanan sınırlar dışında olduğu takdirde alınacak düzeltici önlemleri belirlemelidir. Kalite kontrolü için geçerli resmi düzenlemelere ve yerel kılavuzlara uyun. Hesaplama Analizör her bir numunenin analit konsantrasyonunu otomatik olarak hesaplar. Çevirme faktörleri: mg/dl üre x = mmol/l üre mmol/l üre x = mg/dl üre mg/dl üre azotu x = mmol/l üre mg/dl üre x = mg/dl üre azotu Örnek olarak 24 saatlik idrar kullanıldığında, değerleri g veya mmol/24 saat cinsinden elde etmek için sonucu 24 saatlik hacim ile çarpın. Sınırlamalar etkileşim Kriter: Başlangıç değerinin ± % 10'u içinde geri kazanım. /plazma İkterus: 11 Konjuge ve konjuge olmayan bilirubin için I indeksi 60 olana kadar belirgin etkileşim yok (yaklaşık konjuge ve konjuge olmayan bilirubin konsantrasyonu: 1026 µmol/l veya 60 mg/dl). Hemoliz: 11 H indeksi 1000 olana kadar belirgin etkileşim yok (yaklaşık hemoglobin konsantrasyonu: 621 µmol/l veya 1000 mg/dl). Lipemi (Intralipid): 11 L indeksi 1000 olana kadar belirgin etkileşim yok. L indeksi (bulanıklığa karşılık gelir) ile trigliserid konsantrasyonu arasında zayıf bir korelasyon vardır. GLDH tayini sırasında küvette oluşan amonyak, üre/bun testiyle etkileşime girer. Bu nedenle, üre/bun reaktifi analizörlere GLDH testi reaktifleriyle birlikte yüklenmemelidir. da endojen amonyum iyonları üre/bun testiyle etkileşime girer. Asidik koşullar (örn. asidoz) altında yüksek konsantrasyonlar oluşabilir. İlaçlar: Yaygın ilaç panelleri kullanıldığında terapötik konsantrasyonlarda hiçbir etkileşim bulunmamıştır. 12,13 Üre/üre azotu testinde kullanılan örneklerin ve kalibratörlerin amonyak ile kontaminasyonunu önlemek için çok dikkat edilmelidir. Çok nadir durumlarda, gammopati, özellikle tip IgM (Waldenström makroglobulinemi) güvenilmez sonuçlara neden olabilir. 14 İlaçlar: Yaygın ilaç panelleri kullanıldığında terapötik konsantrasyonlarda hiçbir etkileşim bulunmamıştır. 13 Tanı koyulurken sonuçlar mutlaka hastanın tıbbi hikayesi, klinik muayene ve diğer bulgularla birlikte değerlendirilmelidir. GEREKLİ İŞLEM Özel yıkama programı: Roche/Hitachi analizörlerinde bazı test kombinasyonları birlikte çalışıldığında, özel yıkama adımlarının kullanılması zorunludur. Diğer talimatlar için bulaşmadan kaçınma listelerinin en son sürümüne ve kullanıcı el kitabına bakın. Gerektiği takdirde, bu testle elde edilen sonuçları raporlamadan önce özel yıkama/bulaşmadan kaçınma programı uygulanmalıdır. Sınırlar ve aralıklar Ölçüm aralığı /plasma mmol/l (5 400 mg/dl üre veya mg/dl üre azotu) Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analizörleri: Konsantrasyonları daha yüksek olan numuneleri tekrar çalışma fonksiyonu aracılığıyla tayin edin. Tekrar çalışma fonksiyonu ile numunelerin dilüsyonu 1:1.5 oranında bir dilüsyondur. Tekrar çalışma fonksiyonu kullanılarak seyreltilen numunelerin sonuçları otomatik olarak 1.5 faktörü ile çarpılır. Tekrar çalışma fonksiyonu olmayan cihazlarda numuneleri % 0.9'luk NaCl veya distile/deiyonize su ile manuel olarak seyreltin (örn oranında). Sonucu uygun dilüsyon faktörü (örn. 2) ile çarpın. Roche/Hitachi 902 analizörü mmol/l ( mg/dl üre veya mg/dl üre azotu) 2 / 5

3 Tekrar çalışma fonksiyonu olmayan cihazlarda numuneleri % 0.9'luk NaCl veya distile/deiyonize su ile manuel olarak seyreltin (örn oranında). Sonucu uygun dilüsyon faktörü (örn. 3) ile çarpın. Konsantrasyonları teknik sınır olan 66.8 mmol/l (400 mg/dl üre veya 187 mg/dl üre azotu) değerinin altında olan numuneleri tayin edin. Roche/Hitachi MODULAR P analizörleri: mmol/l ( mg/dl üre veya mg/dl üre azotu) Konsantrasyonları daha yüksek olan numuneleri tekrar çalışma fonksiyonu aracılığıyla tayin edin. Tekrar çalışma fonksiyonu ile numunelerin dilüsyonu 1:1.5 oranında bir dilüsyondur. Tekrar çalışma fonksiyonu kullanılarak seyreltilen numunelerin sonuçları otomatik olarak 1.5 faktörü ile çarpılır. Teknik sınır olan 66.8 mmol/l (400 mg/dl üre veya 187 mg/dl üre azotu) değerinin altında konsantrasyona sahip numuneleri tekrar çalışma fonksiyonu aracılığıyla tayin edin. lerin ölçümü seyreltilmeden yapılır. Alt ölçüm sınırları Testin alt saptama sınırı /plasma Saptama sınırı: 0.84 mmol/l (5 mg/dl üre veya 2 mg/dl üre azotu) Saptama sınırı: 1.0 mmol/l (6 mg/dl üre veya 2.8 mg/dl üre azotu). Alt saptama sınırı, sıfırdan ayırt edilebilen en düşük ölçülebilir analit düzeyini temsil eder. En düşük standardın 3 standart sapma üzerinde bulunan değer olarak hesaplanır (standart SD, tekrarlanabilirlik, n = 21). Beklenen değerler (üre) /plazma mmol/l ( mg/dl) 24-saatlik idrar mmol/24 saat ( g/24 saat), mmol/l'ye ( g/dl) karşılık gelir L/24 saatlik ortalama idrar çıkışı esas alınır. Beklenen değerler (üre azotu) /plazma Yetişkin (18 60 yaş): mmol/l (6 20 mg/dl) Yetişkin (60 90 yaş): mmol/l (8 23 mg/dl) Bebek (< 1 yaş): mmol/l (4 19 mg/dl) Bebek/çocuk: mmol/l (5 18 mg/dl) 24-saatlik idrar: mmol/24 saat (12 20 g/24 saat) üre azotu, mmol/l'ye ( mg/dl) karşılık gelir c) c) L/24 saatlik ortalama idrar çıkışı esas alınır. Her laboratuvar beklenen değerlerin kendi hasta popülasyonuna aktarılabilirliğini araştırmalı ve gerekiyorsa kendine ait referans aralıkları belirlemelidir. Spesifik performans verileri Analizörlerden alınan temsili performans verileri aşağıda verilmektedir. Ayrı ayrı laboratuvarlardan elde edilen sonuçlar farklılık gösterebilir. Hassasiyet Üre İnsan serumu / 5 Precinorm U Precipath U İnsan idrarı İnsan idrarı İnsan idrarı Üre azotu İnsan serumu Precitrol N Precitrol A kısım, gün başına 1 çalışma, 10 gün) ile bir iç protokolde insan İnsan idrarı Kontrol idrarı Kontrol idrarı Yöntem karşılaştırması Üre Üre için Roche sıvı reaktifleri kullanılarak Roche/Hitachi 717 analizörü üzerinde yeni dalga boyu kombinasyonu 700/340 nm (y) ile eski kombinasyon 405/340 nm'nin (x) karşılaştırması aşağıdaki korelasyonu vermiştir (mg/dl üre): y = 1.01x y = 1.02x τ = r = 1.00 Ölçülen numune sayısı: 85 konsantrasyonları 4.84 ile 57.3 mmol/l (29 ile 343 mg/dl) üre Üre için Roche sıvı reaktifleri kullanılarak Roche/Hitachi 911 analizörü üzerinde yeni dalga boyu kombinasyonu 700/340 nm (y) ile eski

4 kombinasyon 376/340 nm'nin (x) karşılaştırması aşağıdaki korelasyonu vermiştir (mg/dl üre): y = 0.99x y = 1.00x τ = r = Ölçülen numune sayısı: 53 konsantrasyonları 15.4 ile 271 mmol/l (92 ile 1625 mg/dl) üre Üre Azotu Roche Diagnostics Germany üre sıvı reaktifi ile Roche Diagnostics Corporation üre azotu reaktifi kullanılarak Roche/Hitachi 917 analizöründe yapılan üre azotu tayininin karşılaştırması aşağıdaki korelasyonu vermiştir (mg/dl üre N): y = 0.992x y = 0.982x τ = r = 1.00 Ölçülen numune sayısı: 51 konsantrasyonları 3.21 ile 51.4 mmol/l (9 ile 144 mg/dl) üre N Roche Diagnostics Germany üre sıvı reaktifi ile Roche Diagnostics Corporation üre azotu reaktifi kullanılarak Roche/Hitachi 917 analizöründe yapılan üre azotu tayininin karşılaştırması aşağıdaki korelasyonu vermiştir (mg/dl üre N): y = 0.975x y = 0.958x τ = r = Ölçülen numune sayısı: 30 konsantrasyonları 35.0 ile 451 mmol/l (98 ile 1262 mg/dl) üre N Kaynaklar 1 Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1976; Marshall EK Jr. A new method for the determination of urea in blood. J Biol Chem 1913;15: Berthelot MPE. Violet d'aniline. Repert Chim Appl : Gentzkow CJ. An accurate method for the determination of blood urea nitrogen by direct Nesslerization. J Biol Chem 1942;143: Fawcett JK, Scott JE. A rapid and precise method for the determination of urea. J Clin Path 1960;13: Chaney AL, Marbach EP. Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clin Chem 1962;8: Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung im Blut und im optischen Test nach Warburg. Klin Wschr 1965;43: Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Neumann U, Ziegenhorn J. Estimation of serum urea by UV kinetic method. Scand J Clin Lab Invest 1977; 37:Abstract Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Löhr B, El-Samalouti V, Junge W, et al. Reference Range Study for Various Parameters on Roche Clinical Chemistry Analyzers. Clin Lab 2009;55: Wu AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th edition. St. Louis (MO): Saunders Elsevier 2006; Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Cihaz ayarları MODULAR analizörlerinin kullanıcıları: Barkod sayfasından aplikasyon parametrelerini girin. Roche/Hitachi 902 analizörü No. <Kimya> 1 Test Adı UREA 2 Test Kodu (Yöntem) 2 Noktalı Kin. 3 Test Kodu (2. Test) 0 4 Reaksiyon Süresi 5 5 Test Noktası Test Noktası Test Noktası Test Noktası Dalga boyu (ALT) Dalga boyu (ANA) Hacmi R1 Hacmi R1 Poz R1 Şişe Boyutu Büyük 15 R2 Hacmi R2 Poz R2 Şişe Boyutu Büyük 18 R3 Hacmi 0 19 R3 Poz R3 Şişe Boyutu Küçük 21 Kalib. Tipi (Tip) Doğrusal 22 Kalib. Tipi (Ağırlık) 0 23 Kalib. Kons Kalib. Poz Kalib. Kons Kalib. Poz Kalib. Kons Kalib. Poz Kalib. Kons Kalib. Poz Kalib. Kons Kalib. Poz Kalib. Kons Kalib. Poz S1 ABS 0 4 / 5

5 36 K Faktörü K2 Faktörü K3 Faktörü K4 Faktörü K5 Faktörü A Faktörü 0 42 B Faktörü 0 43 C Faktörü 0 44 SD Sınırı Tekrar Sınırı Duy. Sınırı S1 Abs. Sınırı (D) S1 Abs. Sınırı (Y) Abs. Sınırı Abs. Sınırı (D/A) Düşme 51 Prozon Sınırı 0 52 Prozon Sınırı (Üst/Alt) Alt 53 Prozon (Sonlanım Noktası) Beklenen Değer (D) Beklenen Değer (Y) Cihaz Faktörü (a) 1 57 Cihaz Faktörü (b) 0 58 Tuş ayarları Kullanıcı tarafından girilen veri Daha fazla bilgi için, lütfen söz konusu analizör için uygun olan kullanıcı kılavuzuna, gerekli tüm bileşenlerin ilgili aplikasyon sayfalarına ve yöntem sayfalarına bakın. Bu Yöntem Sayfasında, ondalık sayıların tam ve kesirli kısımları arasındaki sınırı işaretlemek için ondalık ayırıcısı olarak her zaman nokta kullanılır. Binler basamağı için ayırıcı kullanılmaz. Semboller Roche Diagnostics, ISO standardında listelenenlerin yanı sıra aşağıdaki sembol ve işaretleri kullanmaktadır. GTIN Kit içeriği Reaktif Kalibratör Sulandırıldıktan veya karıştırıldıktan sonra hacim Global Ticari Ürün Numarası İlaveler, silinmeler veya değişiklikler kenarda bir değişiklik çubuğu ile gösterilir. 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 5 / 5