DRI Amphetamines Test Kiti

Transkript

1 Amphetamines Test Kiti İn Vitro Diyagnostik Kullanım İçin (3 x 18 ml) 0017 (100 ml Kit) 0018 (500 ml Kit) Kullanım Amacı Amphetamines test kiti, insan idrarında amfetamin ve metamfetaminin niteliksel veya yarı niceliksel belirlemesinde kullanılmak içindir. Test kitinin hassasiyet leri 500 ve dir. Test kiti, otomatik klinik analizörleriyle insan idrarında amfetamin ve metamfetamini tespit etmeye yönelik basit ve hızlı bir analitik tarama prosedürü sağlar. Test kiti metamfetamin kalibre edilmiştir. Bu test kiti yalnızca preliminer bir analitik test sonucu verir. Onaylanmış bir analitik sonuç elde etmek amacıyla daha spesifik bir alternatif kimyasal yöntem kullanılmalıdır. Tercih edn onay yöntemi gaz kromatografisi/kütle spektrometrisidir (). 1,2 Özellikle preliminer pozitif sonuçlar kullanılıyorsa, kötüye kullanılan maddelerin test sonuçları için klinik değerlendirme yapılmalı ve profesyonel muhakeme yapılmalıdır. Test Özeti ve Açıklaması ler efedrinin sentetik türevleridir. En yaygın amfetaminler arasında d-amfetamin, d-metamfetamin ve d,l-amfetamin bulunmaktadır. Bunlar merkezi sinir sistemi üzerinde stimülan etkisi yapar. en sempatomimetik amindir. 3,4 yutulduğunda karaciğerde hızla etkisiz hale gelir ya da değişmeden idrar içerisinde boşaltılır. gibi diğer efedrin türevleri metabolize edbilir ve amfetamin olarak idrar içerisinde boşaltılır. 5 Amphetamines test kiti kullanıma hazır sıvı reaktifler kullanan homojen bir enzim immün testidir. 6 Test kiti, yapısal olarak ilgisiz reçetesiz satılan muhtelif bşiklerle minimal de çapraz reaktiviteye girerek, idrardaki amfetamin ve/veya metamfetamini tespit edebn spesifik antikorlar kullanır. Test, sabit bir spesifik antikor bağlanma bölgesi miktarı için glikoz-6-fosfat dehidrojenaz (G6PDH) enzimiyle işaretlenmiş bir ilaçla idrar numunesinden elde edn ilaç arasındaki rekabete dayanır. Numuneden elde edn serbest ilacın yokluğunda, spesifik antikor G6PDH işaretlenen ilaca bağlanır, böylece enzim aktivitesinde bir azalmaya neden olur. Numuneden elde edn serbest ilacın varlığında, serbest ilaç antikor bağlanma bölgelerine yerleşir ve G6PDH işaretlenen ilacın substrat etkşimine izin vererek enzim aktivitesiyle sonuçlanır. Bu fenomen idrardaki ilaç konsantrasyonuyla enzim aktivitesi arasında doğrudan bir ilişki meydana getirir. Enzim aktivitesi, nikotinamid adenin dinükleotidi (NAD) NADH ye dönüştürme becerisi ölçülerek spektrofotometrik olarak 340 nm de belirlenir. Önlemler ve Uyarılar TEHLİKE: 1. Bu test sadece in vitro diyagnostik kullanım içindir. Reaktifler yutulduğu takdirde sağlığa zarar verir. 2. Bu test kitinde kullanılan reaktifler %0,09 sodyum azit içerir, bu da kurşun veya bakır tesisatla reaksiyona girerek potansiyel patlayıcı metal azitler oluşturabilir. Bu gibi reaktifleri imha ederken, azit birikimini engellemek için her zaman bol miktarda suyla yıkayın. 3. Testi (100 ml), %0,5 İlaca özgü antikor ve %0,2 bovin serum albümini (BSA) içerir. 4. Son kullanma tarihlerinden sonra reaktifleri kullanmayın. H317 - Alerjik cilt reaksiyonuna neden olabilir. H334 - Solunması durumunda alerji veya astım semptomlarına veya nefes alma güçlüğüne neden olabilir. Buğu veya buhar solumaktan kaçının. Kontamine olan çalışma giysisi işyerinin dışına çıkmamalıdır. Koruyucu eldivenler/ koruyucu gözlük/yüz koruyucu takın. Yetersiz havalandırma olması durumunda solunum koruması takın. Cilde temas etmesi halinde: Bol sabun ve suyla yıkayın. SOLUNMUŞSA: Maruz kalan nefes almada güçlük çekiyorsa temiz havaya çıkarın ve nefes alması için rahat bir konumda tutun. Ciltte tahriş veya döküntü oluşursa: Tıbbi yardım/destek alın. Solunum semptomları yaşanıyorsa: ZEHİR MERKEZİNİ veya doktoru/hekimi arayın. Yeniden kullanmadan önce kontamine olan giysri yıkayın. İçerikleri/kabı, yerel/bölgesel/ulusal/uluslararası yönetmeliklere uygun şekilde bertaraf edin. Reaktifler Antikor/Substrat Reaktifi: Koruyucu madde olarak sodyum azit içeren Tris tamponu içerisinde monoklonal anti-amfetamin antikorları, glikoz-6-fosfat (G6P) ve nikotinamid adenin dinükleotid (NAD) içerir. Enzim Eşlenik Reaktifi: Koruyucu madde olarak sodyum azit içeren Tris tamponu içerisinde glikoz-6-fosfat dehidrojenaz (G6PDH) etiketlenmiş amfetaminler içerir. Reaktif Hazırlama ve Saklama Reaktifler kullanıma hazırdır. Reaktif hazırlamaya gerek yoktur. Tüm test kiti bşenleri 2 ila 8 C de saklandığında kutunun üzerindeki etikette belirtn son kullanma tarihine kadar stabildir. Gereken Ek Malzemeler (ayrı satılır): Kit Açıklaması 1664 Kalibratör, 10 ml 1388 Kalibratör, 25 ml 1588 Çoklu Madde Kalibratör 1, 10 ml 1589 Çoklu Madde Kalibratör 1, 25 ml 1591 Çoklu Madde Kalibratör 2, 10 ml 1592 Çoklu Madde Kalibratör 2, 25 ml 1594 Çoklu Madde Kalibratör 3, 10 ml 1595 Çoklu Madde Kalibratör 3, 25 ml 1597 Çoklu Madde Kalibratör 4, 10 ml 1598 Çoklu Madde Kalibratör 4, 25 ml DOAT-2 MAS DOA Total Düzey 2, 6 x 18 ml DOAT-3 MAS DOA Total Düzey 3, 6 x 18 ml DOAT-4 MAS DOA Total Düzey 4, 6 x 18 ml DOAT-5 MAS DOA Total Düzey 5, 6 x 18 ml Numune Toplama ve Çalışma İdrar örneklerini plastik veya cam kaplarda toplayın. Testin taze idrar örnekleriyle yapılması önerilir. ph aralığı 3 ila 11 olan örnekler, bu test kiti test edilmeye uygundur. Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü, Klinik Laboratuvarda Toksikoloji ve Madde Testi Onaylanmış İlkeleri, analiz öncesinde idrar örneklerinin beş gün süre 2 ila 8 C arasında saklanabceğini belirtir. İdrar örnekleri analiz öncesinde daha uzun süre saklanacak veya analiz sonrasında numune elde tutulacaksa, -20 C veya daha altında saklanmalıdır. 9 SAMHSA zorunlu ilkelerini takip eden laboratuvarlar SAMHSA Short-Term Refrigerated Storage ve Long-Term Storage koşullarına başvurmalıdır. 2 Donmuş örnekleri analiz öncesinde çözün ve karıştırın. Pipetle alınmış numunelerde çok miktarda yabancı madde olmamasına çalışılmalıdır. Test etmeden önce yüksek türbiditeli örneklerin santrifüje sokulması önerilir. İdrar numunesi saflığının bozulması hatalı test sonucuna neden olabilir. Numune saflığının bozulduğundan şüphelenilirse test için başka bir numune alınmalı ve her iki numune de test edilmek üzere laboratuvara gönderilmelidir. Tüm idrar numuneleri, potansiyel olarak enfeksiyöz kabul edrek çalışılmalıdır. Test Prosedürü Sabit bir sıcaklık sağlayan, numuneleri pipetleyen, reaktifleri karıştıran ve enzimatik oranları 340 nm de ölçen ve tepkime zamanlamasını doğru bir şekilde sağlayan analizörler bu test kitini çalıştırmak için kullanılabilir. Testi uygulamadan önce parametreler ve/veya kullanım için ek bilgr içeren, analizöre özel protokol sayfasına başvurun. Kalite Kontrolü ve Kalibrasyon İyi laboratuvar uygulamaları, uygun test performansının sağlanması için kontrol numunesi kullanımını önermektedir. Kalibrasyonu doğrulamak için hassasiyet kalibratörüne yakın kontroller kullanın. Kontrol sonuçlarının, laboratuvarınızca belirlenen prosedürler ve ilkeler dahilinde olması gerekir. ların sabitlenen değerler dışında kalması durumunda test sonuçları geçersizdir. Tüm kalite kontrolü koşulları yerel, eyalet ve/veya federal yönetmeliklere ve akreditasyon koşullarına uygun olarak gerçekleştirilmelidir. Her bir laboratuvar kendi kalibrasyon ve kontrol sıklığını oluşturmalıdır. Niteliksel Analiz Numunelerin niteliksel analizi için Çoklu Madde İdrar Kalibratörü 1 veya 2 kullanın. Kalibratör 1, 500 hassasiyet için pozitif negatif arasında ayırım yapmak için hassasiyet referansı olarak kullanılan 500 d-metamfetamin içerir. Kalibratör 2, hassasiyet için pozitif negatif arasında ayırım yapmak için hassasiyet referansı olarak kullanılan d-metamfetamin içerir. Yarı niceliksel analiz Yarı niceliksel analiz için tüm kalibratörleri kullanın. lar ve Beklenen Değerler Niteliksel sonuçlar Absorbans değişim değeri ( A), hassasiyet kalibratörü elde edn değere eşit veya bu değerden büyük bir numune pozitif olarak değerlendirilir. Absorbans değişim değeri ( A), hassasiyet kalibratörü elde edn değerden düşük bir numune negatif olarak değerlendirilir. Yarı niceliksel sonuçlar Numunelerdeki ilaç konsantrasyonunun kaba bir tahmini, tüm kalibratörlerle bir ölçüm eğrisini çalıştırarak ve numuneleri ölçüm eğrisinden nicelikselleştirerek elde edbilir. Yüksek kalibratör üzerindeki numune sonuçları negatif idrar seyreltilmeli ve tekrar test edilmelidir. sonuçların yarı nicelikselleştirilmesi, laboratuvarlara örneğin uygun bir seyreltisinin onaylanmak üzere gibi bir onay yöntemi tayin edilmesi olanağını verir. Ayrıca, laboratuvara kalite kontrol prosedürlerini belirlemekte ve kontrol performansını değerlendirmekte yardımcı olur. Kısıtlamalar 1. Bu testten alınan pozitif bir sonuç, yalnızca amfetamin veya metamfetamin varlığını belirtir; ancak fizyolojik ve psikolojik etkrin kapsamı orantılı değildir. 2. Bu test kiti elde edn pozitif sonuç GC, TLC veya gibi bir diğer immünolojik olmayan yöntem onaylanmalıdır. 3. Test sadece insan idrarı kullanım için tasarlanmıştır. 4. Spesifisite tablosunda belirtilmeyen diğer maddelerin ve/veya faktörlerin (örn. teknik veya prosedür) testi etkmesi ve hatalı sonuçlara neden olması mümkündür. Spesifik Performans Özellikleri Beckman Coulter AU680 analizöründe elde edn genel performans verri aşağıda gösterilmiştir. 7

2 Seyreltme Geri Kazanımı ve Lineerlik Yaklaşık metamfetamin içeren bir yüksek hasta idrar numunesi, analit içermeyen idrar %10 artışlarla seri olarak seyreltilmiştir ve yarı niceliksel modda 5 tekrarla test edilmiştir. Tüm numuneler beklenen değerin ± %10 u hata geri kazanılmıştır ve R değeri 0,9998 olmuştur. Farklı miktarlarda d-amfetamin ve d-metamfetamin eklenmiş numuneler, CLSI (EP05-A2) kesinlik protokolü kullanarak niteliksel ve yarı niceliksel modda test edilmiştir. 8 Numuneler çift tekrarlar halinde, 20 gün süresince günde iki kez ve toplamda N = 80 kez test edilmiştir. lar aşağıdaki tablolarda sunulmuştur. Niteliksel Analiz: Numune konsantrasyonu, Yarı niceliksel Analiz: Numune Kons., Determinasyon sayısı d- 500 #Neg / #Poz #Neg / #Poz / 0 80 / / 0 80 / / 0 80 / / / / / / 80 0 / / 80 0 / 80 d / 0 80 / / 0 80 / / 0 80 / / / / / / 80 0 / / 80 0 / 80 Ortalama, SD, Çalışma içi %CV SD, d- Toplam 500 #Neg / #Poz #Neg / #Poz ,9 9,0 6,2 10,1 6,9 80 / 0 80 / ,8 10,2 2,7 10,9 2,9 80 / 0 80 / ,9 11,2 1,6 13,5 2,0 0 / / ,4 14,1 1,8 17,6 2,3 0 / / ,9 23,6 1,8 28,4 2,2 0 / 80 0 / ,6 23,0 1,6 32,0 2,2 0 / 80 0 / 80 d ,4 7,4 4,4 9,3 5,5 80 / 0 80 / ,8 8,0 2,0 11,1 2,8 80 / 0 80 / ,1 9,6 1,5 12,1 1,9 0 / / ,4 9,7 1,3 11,8 1,5 0 / / ,1 15,5 1,2 18,9 1,5 0 / 80 0 / ,1 21,4 1,4 27,3 1,8 0 / 80 0 / 80 Karakterizasyonu değerlerine yakın numuneler, negatif idrar havuzuna birbirinden ayrı olarak d-amfetamin ve d-metamfetamin eklenerek hazırlanmıştır. Numuneler niteliksel ve yarı niceliksel modların her ikisinde de 20 tekrar yapılarak test edilmiştir. Niteliksel modda tüm numuneler doğru şekilde tespit edilmiştir; negatif numuneler hassasiyet kalibratörlerinden daha az geri kazanmış, pozitif numuneler hassasiyet kalibratörlerinden daha fazla geri kazanmıştır. Yarı niceliksel modda numuneler nominal değerlerinin ± %12 si hata geri kazanmıştır. 20 tekrarın kesinliği niteliksel mod için %1 CV altında ve yarı niceliksel mod için %4 CV altında olmuştur. %CV Doğruluk 160 klinik idrar örneği Amphetamines test kit Beckman Coulter AU680 ve test edilmiştir. lar aşağıdaki tablolarda sunulmuştur. Test kiti amfetamin ve metamfetamin analitlerini birbirinden ayrı olarak tespit etmek için kullanıldığında, bazı uyumsuz sonuçlar alınmıştır. Test kiti amfetamin ve metamfetamin analitlerinin her ikisini de %100 çapraz reaktivite tespit edebilme kapasitesine sahiptir. Bu nedenle bir analit için test edn numuneler diğer analitin varlığı nedeniyle yanlış pozitif sonuçlar verebilir. Niteliksel Analiz: Amphetamines test kiti ve amfetamin için arasındaki genel konkordans 500 hassasiyet için %58,0 ve hassasiyet için %59,4 olmuştur. Katmanlaştırılmış lar 500 Yaklaşık hassasiyet arası) Yaklaşık %100, %22, %97, %43,9 500 Niteliksel Yarı Niceliksel Analiz: Amphetamines test kiti ve amfetamin için arasındaki genel konkordans 500 hassasiyet için %58,0 ve hassasiyet için %58,7 olmuştur. Katmanlaştırılmış lar 500 hassasiyet arası) %100, %22, %97, %42,9 500 Yarı niceliksel

3 Uyumsuz ların Özeti: Doğruluk numuneleri yalnız d-amfetamin konsantrasyonu temelinde kategorize edilmiştir. Aşağıdaki tablo Amphetamines test kiti sonuçlarının pozitif olduğu gözlemlenen, hassasiyet değerinin altında d-amfetamin konsantrasyonuna sahip numuneleri belirtmektedir. Değeri () () () a Tablo devamı Değeri () () ()

4 Tablo devamı Değeri () () () b Niteliksel Analiz: Amphetamines test kiti ve metamfetamin için arasındaki genel konkordans 500 hassasiyet için %87,4 ve 1000 hassasiyet için %87,4 olmuştur. Katmanlaştırılmış lar 500 hassasiyet arası) %100, %65, %100, %75,9 Katmanlaştırılmış lar Niteliksel arası) %100, %65, %100, % Yarı niceliksel Uyumsuz ların Özeti: Doğruluk numuneleri yalnız d-metamfetamin konsantrasyonu temelinde kategorize edilmiştir. Aşağıdaki tablo Amphetamines test kiti sonuçlarının pozitif olduğu gözlemlenen hassasiyet değerinin altında d-metamfetamin konsantrasyonuna sahip numuneleri belirtmektedir. Değeri () () () a Numune ayrıca MDA~288 ve MDMA~2.530 içeriyordu. b Numune ayrıca PPA ~1.000 ve Psödoefedrin 40 µg/ml içeriyordu. Spesifisite Test kitinin spesifisitesi, yapısal olarak ilişkili ve ilişkisiz farklı bşiklerle çapraz reaktivite için değerlendirilmiştir. Potansiyel çapraz reaktant bşik negatif, listelenen konsanstrasyonlarda idrar havuzuna eklenerek niteliksel ve yarı niceliksel modda test edilmiştir. Test sonucu pozitif veya hassasiyet konsantrasyonundan daha büyük olan numunelerin test kiti çapraz reaksiyon gösterdiği, test sonucu negatif veya hassasiyet konsanstrasyonundan daha az olan numunelerin önemli bir çapraz reaktivite göstermediği kabul edilmiştir. 4

5 Aşağıdaki ana bşik ve metabolitler, Amphetamines test kiti test edildiklerinde aşağıda listelenen konsantrasyonlarda pozitif sonuç üretmiştir d d Metndioksiamfetamin (MDA) Metndioksimetamfetamin (MDMA) Yapısal olarak ilgisiz bşikler ve/veya eş zamanlı olarak kullanılan maddeler, aşağıda listelenen konsantrasyonlarda negatif sonuç vermiştir Asetaminofen Asetilsalisilik Asit l Benzokgonin Benzfetamin Benzilpiperazin Bupropion Kafein Setirizin Dihidroklorür Klorpromazin Kodein Dekstrometorfan d-efedrin l-efedrin d,l-efedrin Fenfluramin İsomethepten İsoxsuprin Meperidin Mefentermin Metadon l Metaprn Metilfenidat Metronidazol Morfin Nor-psödoefedrin Oksazepam Fensiklidin Fendimetrazin Fenetilamin Fenmetrazin Fenobarbital Fenotiazin Fentermin Fenfrin Fenilpropanolamin Prokainamit Prometazin Tablo devamı Propranolol d-psödoefedrin l-psödoefedrin Ranitidin Skopolamin Sekobarbital Tiyoridazin Trifluoperazin Triflupromazin Tiramin OH-Tiramin Girişim Amphetamines test kitini kullanan amfetaminlerin geri kazanımı üzerinde ph, endojen ve ekzojen maddelerin potansiyel etkisi değerlendirilmiştir; bu değerlendirme için bilinen miktarlarda potansiyel olarak girişim yapan maddeler, kararlı şekilde negatif sonuç veren en yüksek amfetamin ve metamfetamin konsantrasyonu içeren ve kararlı şekilde pozitif sonuç veren en düşük amfetamin ve metamfetamin konsantrasyonu içeren (hassasiyet değerinin ± %25 i arasında), maddeden arınmış iki idrar havuzuna eklenmiştir. Numuneler, test kitinde niteliksel ve yarı niceliksel olarak test edilmiştir. Aşağıdaki tabloda listelenen bşiklerin listede göstern konsantrasyonlara kadar eklenmesi hiçbir girişim gözlenmemiştir. Madde:, Girişim yapan Konsantrasyon Neg 500 (NEG/POZ) Poz (NEG/POZ) Neg Asetaminofen 100 µg/ml Neg Poz Neg Poz Aseton 1 g/dl Neg Poz Neg Poz Askorbik asit 1 g/dl Neg Poz Neg Poz Aspirin 100 µg/ml Neg Poz Neg Poz Kafein 100 µg/ml Neg Poz Neg Poz Kreatinin 500 mg/dl Neg Poz Neg Poz Etanol 1 g/dl Neg Poz Neg Poz Galaktoz 10 mg/dl Neg Poz Neg Poz -globülin 500 mg/dl Neg Poz Neg Poz Glikoz 3 g/dl Neg Poz Neg Poz Hemoglobin 150 mg/dl Neg Poz Neg Poz İnsan serum albümini 500 mg/dl Neg Poz Neg Poz İbuprofen 100 µg/ml Neg Poz Neg Poz Oksalik asit 100 mg/dl Neg Poz Neg Poz ph Aralığı 3-11 Neg Poz Neg Poz Riboflavin 7,5 mg/dl Neg Poz Neg Poz Sodyum klorit 1 g/dl Neg Poz Neg Poz Özgül Ağırlık 1,004-1,038 g/ml Neg Poz Neg Poz İdrar 1,25 g/dl Neg Poz Neg Poz Poz 5

6 Referanslar 1. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute on Drug Abuse (NIDA). Research Monograph 73, Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. National Institute On Drug Abuse. Federal Register Vol. 73, No. 228, 2008: Julien RM. A Primer of Drug Action. 6th ed. New York, NY: WH Freeman & Co; Miller NS, Gold MS. Amphetamine and its derivatives. In: Giannini AJ, Slaby AE, eds. Drugs of Abuse. Oradell, NJ: Medical Economics Books; Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man, 5th ed. Foster City, CA: Chemical Toxicology Institute; Rubenstein KE, Schneider RS, and EF Ullman: Homogenous Enzyme Immunoassay: A New Immunochemical Technique. Biochem Biophys Res Commun. 1972:47, Thermo Fisher Scientific e bağlı Microgenics Corporation dosyalarında kayıtlı bilgr. 8. Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline. 2nd ed. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS EP05-A2 Document Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Second Edition, Vol.27, No.15. CLSI document C52-A2, Wayne, PA Microgenics Corporation Kato Road Fremont, CA USA US Customer and Technical Support: Microgenics GmbH Spitalhofstrasse 94 D Passau, Germany Tel: +49 (0) Fax: +49 (0) Prospektüs güncellemeleri için: Diğer ülkeler: Lütfen yerel Thermo Fisher Scientific temsilcinize başvurun TR