UYGULAMA NOTU. LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 1. Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre HAZIRLAYAN

Ebat: px

Şu sayfadan göstermeyi başlat:

Download "UYGULAMA NOTU. LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 1. Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre HAZIRLAYAN"

Umut Onut
6 yıl önce
İzleme sayısı:

1 UYGULAMA NOTU Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre M030 LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 1 HAZIRLAYAN Dr. Engin Bayram Ant Teknik Cihazlar Ltd. Şti.

2 KONU: Bebek mamasında multitoksinlerin (Aflatoksin B1, B2, G1, G2 ve Okratoksin A) LCMSMS ile analizi. ÇALIŞMANIN AMACI: İnsanlar ve hayvanlar için yüksek toksisiteye sahip olabilen mikotoksinler, gıda üretiminin bütün basamaklarında, üretim sonrası depolama aşamasında ortaya çıkabilir ve bunun da ekonomi, gıda güvenliği ve insan sağlığı açısından oldukça kritik sonuçları olabilir. Mikotoksinleri üreten küf mantarlarının, çoğunlukla ilgili gıdaya özel olması, immünoafinite kromatografisi (numune hazırlık)-hplc metodlarının, mikotoksinlerin birçoğunun (özellikle de aflatoksinlerin) analizlerinde, halihazırda en yaygın olarak kullanılan teknikler olması sonucunu doğurmuştur. Eğer analizde, tekil bir gıda gurubu hedefleniyorsa (sadece fındık, buğday, bebek devam sütü vb.) bahsedilen teknikler rahatlıkla tercih edilebilirler ancak konu kompleks gıdalara geldiğinde (bebek maması, tıbbi amaçlı bebek diyet ürünleri, kakaolu fındık kreması vb.) durum karmaşık bir hal alacaktır. Bu tür gıdalar, birer karışım olduğundan ve içerdikleri bitkisel/hayvansal gıdaların kaynakları da farklı olduğundan birer mikotoksin kokteyli olabilirler ve her bir mikotoksin grubunun analizi de ayrı bir numune hazırlık aşaması demektir. Özetle kompleks gıda maddesi ile karşılaşıldığında analiz süresi uzayacak ve analiz maliyeti artacaktır. LC-MSMS yöntemi kullanılarak multi-bileşen içeren kompleks bir gıda maddesinin analizini, numune hazırlığı tek metoda indirgeyerek, tek enjeksiyon ile gerçekleştirmek mümkündür. METOD VE MATERYALLER: Numune hazırlık: Gerçek numuneler: Tahıl katkılı bebek maması numunesinden 5 tartılır, numune üzerine 20mL Su:Asetonitril (1:4, 0.2%(v/v) asetik asit içeren) eklenir, 35 dakika çalkalanır, santrifüj edilir (4000rpm, 10 dakika) ve 0,22um lik şırınga ucu filtreden süzülerek sisteme enjekte edilir. Standard hazırlık: Sertifikalı analit standardları, Aflatoksin B1,B2,G1,G2 ve Okratoksin A içermeyen mama ekstraktı ile, uygun derişimlere seyreltilir.

ANALİTİK KOŞULLAR: MS Koşulları; Cihaz Model Interface Temp Block Heater Temp DL Temp Nebulizing Gas Drying Gas Heating Gas Source/Polarity : Shimadzu : LCMS-8060 TQ : 350 C : 400 C : 250 C : 2.

3 ANALİTİK KOŞULLAR: MS Koşulları; Cihaz Model Interface Temp Block Heater Temp DL Temp Nebulizing Gas Drying Gas Heating Gas Source/Polarity : Shimadzu : LCMS-8060 TQ : 350 C : 400 C : 250 C : 2.5 L/min : 5 L/min : 15 L/min : HESI(+) MRM Transitions ID# Name m/z Ref. Ions 1 AFG > > AFG > > AFB > > AFB > > OTA > > LC Koşulları; Cihaz Model Kolon Mobil Phase A Mobil Phase B Akış Hızı Enjeksiyon Hacmi : Shimadzu : Nexera X2 UHPLC : Raptor Biphenyl (2.7um, 100x2.1mm) : Water (2mM Ammonium Formate, 0.2% Formic Acid) : Methanol (2mM Ammonium Formate, 0.2% Formic Acid) : 0.5 ml/min (Gradient Program) : 5 ul

4 SONUÇLAR VE DEĞERLENDİRME: Aflatoksin B1,B2,G1,G2 ve Okratoksin A nın LOQ seviyesinde hazırlanan geri kazanım numunesine ait derişim ve S/N değeri aşağıda verilmiştir. Cihaz Kal. Sev. Derişim Mikotoksin S/N (ug/l) (Spiked ug/l) AFG2 0,0025 0, AFG1 0,0025 0, AFB2 0,0025 0, AFB1 0,0025 0,01 34,3 OTA 0,005 0, Kromatogramlar Kalibrasyon Çözeltisi, AF G2, G1, B2, B1 10ng/L, OTA 20ng/L (Kantitatif Kromatogram) 1:330.90>245.10(+) 1:330.90>189.10(+) 8.0 AFG2 (x1,000) 2:328.80>243.10(+) 2:328.80>200.20(+) AFG :314.90>287.10(+) 3:314.90>259.00(+) AFB :312.90>241.10(+) 5:312.90>285.10(+) 7.0 AFB

5 4:403.90>239.00(+) 4:403.90>257.10(+) 3.5 OTA Geri Kazanım Numunesi, Spike Derişimi: AF G2, G1, B2, B1 10ng/L, OTA 20ng/L (Kantitatif Kromatogram) 1:330.90>245.10(+) 1:330.90>189.10(+) 6.0 AFG2 (x1,000) :328.80>243.10(+) 2:328.80>200.20(+) AFG :314.90>287.10(+) :314.90>259.00(+) AFB2 5:312.90>241.10(+) 6.0 5:312.90>285.10(+) AFB :403.90>239.00(+) 4:403.90>257.10(+) OTA

Kalibrasyon Eğrisi AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 OTA AF G2, G1, B2, B1 L1 L2 L3 L4 L5 L6

40 80 160 Bu Aplikasyon Notu uygulamanın gerçekleştirildiği tarihe ait

Bu yayında yer alan bilgilerin referans gösterilerek başka bir yerde

6 Kalibrasyon Eğrisi AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 OTA AF G2, G1, B2, B1 L1 L2 L3 L4 L5 L6 Derişim (ug/l) 2, OTA L1 L2 L3 L4 L5 L6 Derişim (ug/l) Bu Aplikasyon Notu uygulamanın gerçekleştirildiği tarihe ait bilgiler ışığında oluşturulmuştur. Bu yayında yer alan bilgilerin referans gösterilerek başka bir yerde kullanılması Ant Teknik in iznine tabidir. Aplikasyon Notu Ant Teknik tarafından önceden bildirilmeksizin değiştirilebilir. antteknik.com

Benzer belgeler

UYGULAMA NOTU. LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 2. Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre HAZIRLAYAN

UYGULAMA NOTU. LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 2. Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre HAZIRLAYAN UYGULAMA NOTU Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre M031 LCMSMS ile Bebek Mamasında Multitoksin Analizi - 2 HAZIRLAYAN Dr. Engin Bayram Ant Teknik Cihazlar Ltd. Şti. KONU: Bebek mamasında multitoksinlerin