PATOLOJİ LABORATUVARI İŞLEYİŞ TALİMATI

Transkript

1 SAYFA NO 1/22 1. AMAÇ VE KAPSAM: İnönü Üniversitesi Turgut Özal Tıp Merkezi Patoloji Laboratuarında yürütülen faaliyetleri tanımlamaktır. Patoloji Laboratuarlarının hizmetlerini kapsar. 2. GÖREV VE SORUMLULUK: Bu talimatın yürütülmesinden Patoloji Laboratuarı çalışanları sorumludur. Diğer birimler işleyişlerini bu talimata göre düzenlemekle sorumludur. 3. TALİMATIN DETAYI: Preanalitik Evre: Örneklerin ENLİL sistem üzerinden istemlerinin yapılması, alınması, kaydedilmesi, barkotlanması, laboratuara ulaştırılmasını. Laboratuara gelen örneklerin kabulünün yapılması, uygunluğunun onaylanması ve çalışmaya almadan önceki ön işlemlerini kapsayan süreçlerinin tümüdür. Analitik Evre: Örneklerin hazırlık aşamasından yorumlama aşamasına kadar olan çalışılma süreçlerinin tümüdür. Post analitik Evre: Çalışılan testlerin değerlendirilmesi, yorumlanması, onaylanması, raporlanması ve sonuçların iletilmesi süreçlerinin tümüdür ÜNİTEDE BULUNAN CİHAZLAR Mikrotom (iki adet) Doku takip cihazı ( iki adet) Doku bloklama cihazı ( üç adet) Boyama cihazı (bir adet) Kapama cihazı (bir adet), Lam yazma cihazı (bir adet) Tam otomotik İHK cihazı (iki adet test karılığı.) Frozen (bir adet) Manyetik karıştırıcı (bir adet) Su banyosu (iki adet) Santrifüj (iki adet) Sitosipin cihazı (iki adet) Sıvı bazlı sitoloji cihazı ( bir adet, test karşılığı cihaz.) Formaldehit ahzılama cihazı (1 adet) Formaldehit detoksifikasyon cihazı (1adet) Distile su cihazı (bir adet) Mikroskop (üç adet) Etüv (üç adet). Hasas terazi (dört adet) Cihazların bakımı Cihaz takip ve bakım formları klasöründe tutulur. Cihazlara ait bakım kullanım dosyaları cihaza yakın bir yerde muhafaza edilir. Hastane demirbaşına kayıtlı cihaz arızaları için, cihazdan sorumlu Patoloji uzmanı ve laboratuar teknisyeni tarafından TOTM-FRM-004 Arıza ve Bakım Talep Formu.xls ile teknik servise bildirilerek, teknik servis tarafından ya da ilgili firma tarafından arızanın giderilmesi sağlanır. Ünitede çevrenin, çalışan personelin güvenliği Labaratuvar Güvenlik Rehberi ne göre sağlanır PATOLOJİ LABORATUARININ ÇALIŞMA DÜZENİNİN SAĞLANMASI Patoloji Laboratuarında çalışan laborantların çalışma listesi Patoloji uzmanı tarafından yapılır. Laboratuarda çalışılan testlerde; hasta güvenliğini tehlikeye atabilecek sonuçlar elde edildiğinde ilgili hekimin veya hastanın uyarıldığı Patolojilaboratuvarı Testleri Panik Değer Listesi ne göre hareket edilir. Laboratuarda kitlerin uygun ısıda bulundurulması için kalibre edilmiş termometre ile ortamın ısısı kontrol edilir ve TOTM-FRM-099 Sıcaklık ve Bağıl Nem Ölçüm Takip Formu.xls na kaydedilir PREANALİTİK EVRE İstemin Yapılması

2 SAYFA NO 2/22 Patoloji Laboratuarlarında çalışılan testlerin listesi HBSY sisteminde tanımlanmıştır. Hastane İşletim Sisteminde problem olması durumunda istemler için TOTM-FRM-077 Patoloji ve Sitoloji İstem Formu. ile istem yapılır. Şayet hastanın testlerinin acil olarak çalışılması isteniyorsa bu hastaların numuneleri öncelikli olarak çalışılır İstem yapılırken; patoloji istem formuna; Hastanın Adı Soyadı Yaşı (Doğum Tarihi) Cinsiyeti Yattığı servis Hastanın tanısı veya ön tanısı İstem Yapan Hekimin adı soyadı Varsa önceki patoloji sonucu,yazılmış olmalıdır Tetkik yapılmasını isteyen klinik sekreteri hastaya ait bilgileri, tetkik istemini tetkik kodunu girerek ENLİL sistem üzerinden yapar. Barkod çıkartılır. Barkod patoloji istem formu üstüne yapıştırılır. Materyal patoloji sekreterliğine yönlendirilir. Sekreterlikte tetkik istem formu ( Patoloji Laboratuarı Test Ve Uygulama Rehberi kabul ve red kriterlerine uyularak) alınır Numunelerin Taşınması Alınan numuneler hastane görevli personeli veya hasta yakınları tarafından patoloji laboratuarına ulaştırılır Numune Kabulü Aşamalar Patoloji Laboratuarı Test Ve Uygulama Rehberi ne göre gerçekleştirilir. Rehberde belirtilen özelliklere ve kriterlere uymayan örneklerin kabulü yapılmaz ve gerekli düzenlemeler için yönlendirilir. Uygun bulunarak kabul edilen numuneler ENLİL sistem üzerinden kabulü yapılır. Materyal sıvı ise sitoloji defterine doku parçası ise biyopsi defterine kaydı yapılarak Laboratuarın tüm sürecinde kullanılacak Patoloji Kayıt Numarası verilir. Materyalin kayıt ve kabulüne ait işlemler kayıt kabul departmanında bulunan aşağıdaki talimatlara göre yürütülür; Hastanemize gelen hastaların ilgili klinik ve poliklinikten muayenesinden sonra gerek duyulması halinde alınan parçaların kabulü; Gelen parçaların frozen, biyopsi, sitoloji ve hazır blok olarak ayrımını yapmak. Yapılan bu işlemden sonra eğer gelen numune frozen ise öncelikle ilgili teknisyene sonrada günün sorumlu hekimine haber verilmektedir. Bu işlemden sonra HBYS ne kayıt yapılı defter kaydı tamamlandıktan sonra işlem kağıdı teslim edilir. Gelen dokusu sisteme kaydedilir. Gelen parça eğer biyopsi yada sitoloji ise sistem üzerinden kaydına bakılır klinik bilgisi ile yapılan istem ve numune ye bakılır varsa yanlışlıklar giderilir. Boya girilmesi gerekiyorsa gerekli boya girilir numunelere gerekli kayıt numaraları verildikten sonra hastaya raporun çıkma tarihi ile ilgili bilgi verilir ve işlem tamamlanmış olur. Gelen numune başka bir patoloji kliniğinde çalışılmış ancak yeniden çalışılması gerektiği kliniğimize gönderilen hazır parafın blok ve hazır lamların kabulü ise öncelikle hastane kaydına bakılır. Sonra getirilen blok, camlara ve çalışıldığı kliniğin patoloji raporunda rapor numaraları ve kayıt numaraları teyit edildikten sonra hastada bulunan tahlil ve tetkik sonuçlarından örnek alınır lam ve blok sayısı sisteme girildikten sonra defter kaydı ve numarası verilir. Gelen numunenin sorumlu hekimine teslim edilir. Sonuçlanmış olan numunelerin raporu hasta veya hasta yakınına teslim edilir.

3 SAYFA NO 3/ Numunelerin Sıralanması, Ayrılması, Çalışılması Patoloji laboratuara kabul edilen numuneler makroskopi çalışma alanına alınır. Patoloji istem formlarına makroskopi formu ilave edilir. Materyaller istem formunda belirtilen özelliklerine göre çalışılacak sesksiyonlara yönlendirilir ANALİTİK EVRE Patoloji laboratuarında bu evre histopatolojik ve sitolojik olarak ayrı takip edilir Histopatolojik süreç; Makroskopik inceleme ve örneklerin alınarak kasetlere yerleştirilmesi Doku takip işlemi Doku bloklama işlemi Parafin bloklardan Lam üzerine Kesit alama işlemi Lam üzerine alınan dokuların doku boyaları ile boyanması ve kapatılması işlemi Hazırlanan Preparatların patoloji istem kâğıtları ile birlikte sorumlu hekime teslim edilmesi işlemlerini kapsar Sitolojik süreç; Vücut Sıvıları Preparasyonu Gelen sıvı sekreterlikten numune ile istem kâğıdı kontrol edilerek alınır Sitoloji defterine kaydedilir Sıvının makroskobik görünümü, rengi, hacmi, nasıl gönderildiği istem formuna kaydedilir. Gelen sıvıdan ne çalışılacağı, geriye sının kalıp kalmadığı, sitospin yapılıp yapılmadığı belitilir. Vücut sıvılarından genelde 2 MGG 2 PAP boyası çalışılır Gelen vücut sıvıları üç eşit miktarda ayrılır. İkisi tüpe konur üçüncüsü gelen numune kabında vakaa sonuçlanıncaya kadar buzdolabında saklanır. 1.kısımdan tüpün yarısına kadar konularak üzerine fiksatif solüsyonu ekleyip çökelmesi için beklenir 2. kısımdan ise iki adet megafunula eşit miktarda sıvılardan konulup sitoloji numarası yazılarak sitospin cihazında 3. Programda 1500 devirde 5 dakika çalıştırılır Çevirme işlemi bittikten sonra funullardan iki adet lam çıkartılır Çıkartılan lamların üzerne boş lam bırakılır ve çekilir boş lamın üzerine kodu yazılır Bu şekilde her iki boş lamada sıvı yayılmış olur 4 adet lam elde adilir Bulamların iki adedi mgg boyanması için mgg sepetine iki adedi pap boyanması için pap sepetine konur Pap sepeti boya makinesine kurularak boyanır PAPs Preparasyonu Gelen paps kutuları sekreterlikden hasta ismi, sitoloji numarası kontrol edilerek alınır ve sitoloji defterine kaydedilir Paps kutularının içindeki sıvının karışması için 15 saniye vortexlenerek karıştırılır boş tüpe sitoloji barkodu yapıştırılarak sıvı boşaltılır Tüpe boşaltılan sıvı santifürüj cihazına konur Gün boyunca gelen paps sıvıları bu şekilde santifürüj makinesinde birikir ve gün sonunda çalışılır Santifürüj makinesindeki sıvılar karşılıklı ve dengeli bir şekilde konulduktan sonra 1.Programda 2.5 dakika 550 devirde çalıştırılır 1.programda çalışması bittikden sonra tüp üzerindeki sıvının 2/3 hacmindeki gereksiz kanlı ve infilamasyonlu sıvı alınır Tüpün içerisinde geriye kalan 1/3 lük sıvı 2. Programda 10 dakika 1000 devirde çalıştırılır

4 SAYFA NO 4/22 2. programda çalıştırıldıktan sonra peletin üzerindeki fazla sıvı dökülerek tüpün dibinde sadece pelet kalır Tüpün dibinde kalan pelet vortexlenerek iyicekarıştırılır Karıştırılan tüpler paps makinesini sporlarına dizilir Paps makinesi açılarak spordaki tüp adedi girilerek makine çalıştırılır Makine tüplerdeki peleti lamlara yayarak işlemini tamamlar Sporlardaki tüpler kapakları kapatılarak sonuçları çıkıncaya kadar saklama kutusunda saklanır Makinenin hazırladığı lamlar pap sepetine konularak boya makinesine kurulur ve boyanır Hücre Bloğu Çalışılması Hücre bloğu için alınan sıvı tüpün en fazla yarısına kadar konur üzerine fiksatif solüsyonu konularak pipet yardımı ile karıştırılır ve çökelmesi için bekletilmeye bırakılır Bekletilmeye bırakılan tüpler gün sonunda satifürüj makinesine karşılıklı ve dengeli bir şekilde konularak 5 dakika 2000 devirde çalıştırılır 5 dakika çalıştıktan sonra tüplerin üzerinde fazla sıvı tek seferde dökülerek dibindeki pelet elde edilmeye çalışılır Tüpün dibindeki pelet filitre kağıdına minimum kayıpla aktarılır Filitre kağıdı kasedin üzerine sitoloji numarası yazılarak kaset kapatılır Kaset rutindeki vakaalarla takip makinesine girer Makroskobik Değerlendirme Süreci Patoloji laboratuarı kayıt sekreterliğince kabulü yapılan ve biyopsi numarası alan parçalar makroskopi sekreteri tarafından istem belgesi ile birlikte, hasta adı soyadı, protokol numarası vs. kontrolleri yapılarak sırasıyla makroskopi alanına alınır. İstem belgelerine, gönderilen örneğe uygun matbu kâğıtlar zımbalanır. Günlük örneklemesi yapılacak olan numuneler için takip formuna biyopsi numarası yazılır. Örneğin kaç kaset ve kaç parça alındığı yazılır. Gerek duyulduğunda kesit esnasında istenen histokimyasal boyamalar ve İHK boyamalar için alınması gereken kesitler not edilir. Sorumlu asistan, makroskopi teknisyeni günlük çalışmalarını tamamladıktan sonra. makroskopi sekreteri makroskopik parçaların kalanı frozeen oadasında bulunan bekleme alanına düzenli bir şekilde taşır ve günlük olarak sıralanır. Her bir örnek raporlama işlemi tamamlanıncaya dek bu alanda bekletilir. Gün sonunda makroskopik çalışmaların tamamlanmasıyla çalışma alanının temizliği yapılır. Her haftanın ilk iş günü frozeen odasında bekleme alanında tutulan parçaların raporlama işleminin tamamlanıp tamamlanmadığına bakılarak kontrol edilir. Raporlama işlemi tamamlanmış makroskopik parçalar sırasıyla kontrol edilir ve bu alandan alınarak ayrılır. Raporu çıkmış ve ayrılmış parçalar yasal bekleme süresince tutulmak üzere B2 katta bulunan depolama noktasına taşınır. Yasal bekleme süresini tamamlamış makroskobik parçalar ilgili personelin gözetiminde tıbbi atık olarak tıbbi atık yükleme alanına taşınır TESTİN SONUÇLANDIRILMASI VE DEĞERLENDİRİLMESİ: Patoloji laboratuarınca kabul edilen materyallerden biyopsi kayıt numarası almış olanlar; Makroskopi ünitesinde incelemesi yapılır makroskopik notlar alınır, doku parça sayısı ve kaset sayısı doku takip formuna not edilerek kasetlenir. İş günü sonunda doku takip kasetleri doku takip cihazına yüklenir. TOTM-CHT-104 Doku Takip Cihazı Kullanma Talimatı.pdf

5 SAYFA NO 5/22 Ertesi sabah görevli teknik personel doku takibi tamamlanmış kasetlerden dokuları çıkararak bloklama işlemlerini yerine getirir. TOTM-CHT-097 Doku Bloklama Cihazı Kullanma Talimatı.pdf Parafin bloklar sıraya dizilir doku takip formundan kontrolleri yapılır, kalite kontrolleri yapılır. Parafin bloklardan mikrotomlarda kesitler yapılır. TOTM-CHT-220 Rotary Mikrotom Cihazı Kullanma Talimatı.pdf Kesitler Lam üzerine alınır ve Boya sepetine sırayla yerleştirilir. Boya sepeti boyama cihazına uygun boyama protokolüne göre klips takılarak yükleme noktasından cihaza yüklenir. Boyama işlemi tamamlanan sepetler otomotik olarak kapama cihazına transfer edilir. Kapama cihazında lamel ile kapatılan lamlar Preparasyon işlemi tamamlanmış halde liftten alınır. Sorumlu hekime Patoloji istem kağıdı ile birlikte preparatlar teslim edilir. Patoloji laboratuarınca kabul edilen materyallerden sitoloji kayıt numarası almış olanlar; Sitolojik materyalin türüne göre uygun yöntemler kullanılarak teknik personelce preparasyonları yapılır. Materyale göre fiksasyon yöntemi seçilir. Havada kurutulan preparatlar MGG Giemsa ile boyanacak şekilde, alkol fiksatifi preparatlar ise PAP veya sitolohi H&E boyanacak şekilde uygun klipsler boyama sepetine takılarak boyama cihazı yükleme noktasından cihaza yüklenir. Boyama işlemi tamamlanan sepetler otomotik olarak kapama cihazına transfer edilir. Kapama cihazında lamel ile kapatılan lamlar Preparasyon işlemi tamamlanmış halde liftten alınır. Sorumlu hekime Patoloji istem kağıdı ile birlikte preparatlar teslim edilir. İntraoperatif (Frozen) değerlendirme sürecinde TOTM-TLM-117 İntraoperatif Konsültasyon (Frozen Section) Süreci Talimatına göre çalışılır. Mataryalin kabulü, kaydının alınması ve sorumlu hekim ile teknik ekip bilgilendirilir. Makroskopik notlar alınır ve örnekleme yapılır. Alınan örnek Teknik personelce TOTM-CHT-147 Leıca Cm 3050 S Frozen Cihazı Kullanma Talimatı.pdf uygun olarak kesit alınır ve Frozen Kesitler İçin H&E Boyama Protokolüne uygun olarak boyanır. Sorumlu hekime teslim edilir. Frozen Çalışmasında, Frozen Çalışan Hekim ve Teknisyen Mataryal geliş saati Sonuç bildirme Saati Sonuç bildirilen hekim Frozen İstem Fromuna Ve Frozen Kayıt Defterine not edilir BOYAMA YÖNTEMLERİ Rutin boyamalar Patoloji Laboratuvarında Rutin uygulanan tüm boyama protokolleri tam otomotik boyama kapama cihazında yapılır. Histokimya ve İHK boyamalara ait dehidratasyon işlemi ve kapama işlemi yine tam otomotik boyama kapama cihazınca yapılmaktadır. Boyama Protokolleri cihaz başında bulunan Leica Boyama Kapama Cihazı Çalışma Protokolün de yer almaktadır. Ototmotik Boyama Cihazı Klips Renkleri Ve Boyama Protokolleri

6 SAYFA NO 6/22 KIRMIZI KLİPS: Rutin H&E (Hematoksilen &Eozin ) MOR KLİPS: Histokimyasal Boyama SARI KLİPS: PAP (Papanicolaou) AÇIK MAVİ KLİPS: MGG Giemsa KOYU MAVİ KLİPS: Sitoloji Hematoksilen&Eozin PEMBE KLİPS: Deparafinize olmuş histolojik kesitler Hematoksilen&Eozin boyaması YEŞİL KLİPS: İHK boyaması dehidratasyonu ve kapaması Histokimyasal Ve İmmünohistokimyasal Çalışması Boyama kitlerinin kutusunda yeralan bilgi formlarında yazılı olan boyama ve dilusyon kriterlerine uyulmaktadır. İmmünohistokimyasal kitlerin formlarında pozitif kontrol dokuları yazmaktadır, bunlara göre kontrol blokları seçilerek immün boyama sırasında, eğer vakada iç kontrol yoksa pozitif kontrol de boyanmaktadır. Histokimyasal boyaların boyama prosedürleri bir klasörde toplanmıştır. İmmünohistokimyasal çalışma kitten bağımsız ortak bir yazılı prosedüre göre boyanmaktadır. Sadece bazı kitlerde ön işlem :sitrat veya EDTA şeklinde değişebilmektedir İMMÜNHİSTOKİMYA BOYAMASI Kesitler 60 0 C lik etüvde 30 dakika deparafinize edilir. Ksilen içine alınan kesitler 2 ayrı ksilen de 5 er dakika bekletilir. %96 lık alkolde 10 dakika bekletilir. Distile su ile kesitler yıkanır. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Sonra antikora göre Citrat, EDTA veya Enzimde işleme tabii tutulur. Citrat ve EDTA da mikrodalgada 600 Watt da 10 dakika 360 Watt da 5 dakika ve Defrost ta 5 dakika bekletilir. Enzimde nemli ortamda 10 dakika bekletilir. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Daha sonra kesitlerin üzerine Hidrojen peroksit block solisyonu damlatılır ve 10 dakika bekletilir. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Kesitlerin üzerine Ultra V Block solisyonu damlatılır ve 10 dakika bekletilir dakika arasında antikor işlemine tabii tutulur. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Kesitlerin üzerine Biotinylated Antikor solisyonu damlatılır ve 15 dakika bekletilir. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Kesitlerin üzerine Streptavidin peroxidaz solüsyonu damlatılır ve 15 dakika bekletilir. Kesitler Tbs içerisinde 5 dakika yıkanır. Kesitlerin üzerine DAB Substrate Buffer solüsyonu damlatılır ve 1-5 dakika arasında dokular kızarana kadar bekletilir. Distile suda yıkanır. 1 dakika Mayer s hematoxylin solüsyonunda bekletilir. Çeşme suyunda yıkanır. 2 dakika alkolde, 2 dakika ksilende bekletilir. Daha sonra lamlar kapatılır ve patologlar tarafından incelemeye alınır.

7 SAYFA NO 7/ HİSTOKİMYASAL BOYAMASI Bölümümüz histokimya departmanında uygulanan Histokimyasal Boya Listesi Adı geçen departmanda boyama protokolleri güncel uygulamalarının yer aldığı bir dosyada tutulmaktadır. Teknik personel boyamalarda karşılaştıkları sorunları ve çözümleri bu dosyada yer alan protokol eklerine not alırlar. Acridin Orange Alcian blue Safranin Alcian Blue ph : 1 Alcian Blue ph: 0,5 Alcian Blue ph: 2,5 Aldehit Fuchsin Elastick Aldehit Fuchsin Lipofuchsin Auramine Bielschowsky Collaidal demir ( Hale s) Congo Red Congo Red (Permanganant ) Creysl violet Crystal violet Domanici d-pas EVG EZN Fouchel Fuelgen Giemsa Gmelin Reaction GMS (Fungus) Gomori s Reticulin Gram Hemotoxylen Eozin Hyaluronidase Alcian Blue JMS Lead Hemotoxyline Luxol Fast Blue Luxol Fast blue Cresyl Wiolet Malaria PigmentAgNOR Masson Fontana Masson Trichrom Melanin Soldurma Methylene Blue MGP (Methyl Green Pyronine) Musicarmine Oil Red O Orcein PAMS PAP Boyama PAS PAS - Alcian Blue Perl s Prussian Blue (Demir) PTAH(Fibrin) PTAH(SSS) Rhodanine Romonowsky Rubeanic Acid (Bakır) Sudan Black Thioflavine S Timm Toluidine Blue Van Gieson Van Kossa Warthin Starry

8 SAYFA NO 8/22 PAS ALCİAN BLUE (Ph 2,5 veya Ph1) 1-Alcian Blue Alcian blue 86x solüsyonu (ph2,5 veya ph1,0) 2-%1 periodik asit solüsyonu: periodik asit 1gr distile su 100 ml 1. -deparafinize+distile su 2. -alcian blue (ph2,5- ph 1,0) 30 dk 3. -ph 2,5 için çeşme suyunda 5 dk yıka 4. ph 1,0 için havada kurut 5. -periodic asit solüsyonu.10 dk 6. -çeşme suyu... 5 dk 7. - schiff 15 dk 8. -ılık çeşme suyu..5 dk 9. Mayer hematoksilen Ilık çeşme suyu..5 dk 11. -alkol ksilen kapat + Kontrol ile çalışılır. pas kontol kullanılıyor ALCİAN BLUE : ALCİAN BLUE Ph 2,5 Alcian blue 1,0 GR %3 Asetik Asit 100ML %3 LÜK ASETİK ASİT Glacial Asetik Asit.3ML Distile Su. 97 ML NUCLEAR FAST RED Nuclear fast red 0,1 gr %5 lik monyum sülfat.100 ml Çözülür.yavaşça atılarak kaynatılır.soğutulup süzülür ve içerisine bir miktar koruyucu olarak thymol kristali katılır. 1-deparafinize-distile su 2-%3 lük asetik asit 3 dk 3-alcian blue 30 dk 4-çeşme suyu 10 dk 5-distile suda çalkala 6-nuclear fast red 5 dk 7-çeşme suyu 1 dk 8-alkol-ksilen-kapat + Kontrol ile çalışılır. pas kontol kullanılıyor

9 SAYFA NO 9/22 AURAMİNE-RHODAMİNE 1.Auramine- rhodamine solüsyonu; Auramine O.1,5gr Rhodamine B.. 0,75gr + distile su..50 ml gliserin...75ml 56 santigrat derecede Hepsini iyice karıştır eritilmiş fenolden 10ml ekle NOT:Bu solüsyon 2 ay saklanabilir. 2.%0,5 lik HCI(Asit Alkol) 0,5ml HCI(konsantre) +%70 lik 99,5ml alkol (%90-95 de olabilir) 3. *%0,5 KMnO4 0,5gr KMnO4+100ml distile su 1. *Distile su 2. *Auramine- Rhodamine solüsyonu filtre edilip şale içine camları yerleştirip etüvde(60 santigrat derecede)..10 dk. (Veya daha fazla tut). 3. *. Distile suda yıka.. 2 dk 4. *HCI solüsyonunda dk beklet. 5. *Distile suda yıka..2 dk.. 6. *KMnO4 solüsyonunda...1 dk. 7. *Distile suda yıka.2 dk.. 8. *Hızlıca alkol-ksilen-kapat. SONUÇ Floresan mikroskopta bakıldıgında zemin koyu yeşil, tüberküloz basilleri altın sarısı renkte görülür. Kontrol ile çalışılır. KONTROL kullanılıyor 1-%1 Kristal viole ; Kristal viole 1gr Distile su 100ml 2-%1 Basic fuchsin; Basic fuchin %1 Distile su.. 100ml %0.1 Basic fucsin; Basic fuchsin (%1).10ml Distile su..90ml 3-Gram s iodine; İodide(iyot).. 1gr Potasyum iodide...2gr Distile su...300ml 4-Gallego s differating solüsyonu Distile su.. 100ml BROWN-HOPS GRAM STAİN

10 SAYFA NO 10/22 %37.40 formalin.. 2ml Glacial asetik asit.. 1ml 5-Picric asit- aseton solüsyonu Picric asit 1gr Aseton..100ml 6-Aseton- kristal solüsyonu (Eşit miktarlarda karıştırılır. 1-Deparafinize distile su 2-%1 K. Viole 1 dakika 3-Çeşme suyunda çalkala 5-Grams iodine 1 dakika 5-Çeşme suyunda çalkala 6-Asetonla zemin temizlenene kadar renk gider 7-Hemen çeşme suyuyla yıka 8-%0.1basic fuchsin 5 dakika 9-Çeşme suyuyla çalkala 10-Gallego s solüsyonunda 2 değişim 1 dakika 11-Çeşme suyuyla çalkala saniye asetonda tut 13- Picric aseton 2-3 dak. 14Aseton- ksilen 2 dak 15-Ksilen kapat SONUÇ: Gram pozitif Mavi Zemin Sarı Gram negatif Kırmızı + Kontrol VAR CRYSTAL VİOLET Crystal Violet Stok:: 2gr crystal violet + 20ml %95 lik etil alkol ile çöz. 80 ml %1lik amonyum oksalat eklenir. Ve hafif ısıda iyice karıştırılır.soğutulup süzülür. : 1-deparafinize-distile su 2- crystal violet 10dk(+-5 dk) 3-distile suda yavaşça çalkala 4-dist su+%1 lik asetik asit karışımından geçir.renk açık mor olacak 5-distile suda çalkala 2 kez 6-preparat hala ıslak iken apathy s ile kapat + Kontrol ile çalışılır. +KONTROL kullanılıyor Solüsyonlar A Solüsyonu : DOMİNİCİ STAİN

11 SAYFA NO 11/22 %5lik aluöz Eozin %0,54 lik akuöz Orange 6 B Solüsyonu : % 0,5lik aluöz toluidne blue 1)a solüsyonunda 20 dakika 2)distile suda 30 saniye 3)b solüsyonunda 30 saniye 4) musluk suyunda yıkanır. 5)suyunu süzdür ve gliserin jel ile kapatılır. + Kontrol ile çalışılır. pas kontol düz kas arasında mast hücresine bakılmalı kullanılıyor RHODANİNE METHOD FOR COPPER 1-%0.2 Rhodanine stok solüsyonu Etil alkol 100ml 5(p-dimethylaminobenzylidine)rhodanine 0.2 gr 2-Acetate Buffer solüsyonu (ph 8-8.3). Formalin %40 5ml distile su 1000 ml Sodium Acetate 20gr 3-Rhodanine çalışma solüsyonu Rhodanine %0.2 (stoktan) 3 ml Acetat Buffer solüsyonu 50 ml 4 Mayer s hematoksilen solüsyonu. 1. -deparafinize+distile su 2. Rhodanine çalışma solüsyonunda 37 o C 18 saat (etüv) 3. Acetate Buffer solüsyonunda 3-4 defa yıka 4. Mayer hematoksilen solüsyonu 10 dk 5. Acetate Buffer solüsyonunda 3-4 defa yıka 6. Hızlıca alkolden geçirilir. 7. -Alkol ksilen kapat + Kontrol ile çalışılır. bakır kontol kullanılıyor EZN (ZİEHL NİEELSEN) 1.Ziehl Nieelsen; * Phenol kristali(erimiş) 2,5 ml İyice karıştır. * Absol etil alkol 5,0 ml Yavaş yavaş * Basic fuchoin 0,5 gr ekledikten * Distile su 50,0 ml sonra filtre et 2.%1 Lik Asit Alkol.HCI 1 ml

12 SAYFA NO 12/22 %70 lik etil alkol.99 ml.3.metilen Mavisi Stok: metilen blue 1,4 gr %95 lik l etil alkol..100 m Çalışma:10 ml stok metilen mavisi+90ml çeşme suyu NOT:Acid-fast organizmalar için kullanılır(tüberküloz basillerini görmek için). *Deparafinize+distile su *EZN 1 saat *Çeşme suyu 5 dk. *%1 lik asit alkolde soluk pembe olana kadar beklet. *Çeşme suyu 5 dk. *Metilen mavisi(1-2 kez batır çıkar.) *Çeşme suyu *Dikkatlice alkol-ksilen-kapat. SONUÇ:: Basiller parlak kırmızı renkte boyanır. + Kontrol ile çalışılır. EZN + kontol kullanılıyor GİEMSA (DOKU İÇİN) 1- Distile su 2- % 2 lik veya % 4 lük Giemsa solüsyonu 30 dakika ( 2 ml giemsa + 98ml distile su) ( 4ml giemsa + 96ml distile su) 3- Çeşme suyuyla yıka 3- Dikkatli alkol ksilen kapat + Kontrol YOK GMS(GROCOTT S METHENAMİNE SİLVER) %10 chromic asid: gr chromic asid +100cc distile su %5 gümüş nitrat(agno3): 5gr gümüş nitrat+100cc distile su %2 sodyum tiyosülfat:2gr sodyum tiyosülfat+100cc distile su %3 methenamine: 3 gr methenamine +100cc distile su %5 borax: 5gr borax+100cc distile su %1 lik sodyumbisulfit: 1 gr sodyumbisulfit+ 100cc distile su %1 lik goldchloride: 1 gr goldchloride+ 100cc distile su %0,2 light gren: 0,2gr light gren+100cc distile su Methenamine-gümüş nitrat stok solüsyonu %5 gümüş nitrat 5ml %3 methenamine.100ml

13 SAYFA NO 13/22 Methenamine-gümüş nitrat çalışma solüsyonu: Stok sol..25 cc Dist. Su 25 cc %5 borax..2 cc Not kullanmadan hemen önce hazırlanmalıdır. 1. Kesitler suya alınır 2. %10 chromic acid te mikro dalga fırında max. Seviyede 20 sn tutulur sn sıcak solusyonda bekletilir. 4. Distile suda veya musluk suyunda yıkanır 5. %1 lik sodyumbisulfit sol 1 dak 6. Distile suda yıka 3 değişim 7. Methenamine-gümüş nitrat çalışma solüsyonunda mikro dalga fırında max. Seviyede 20 sn tutulur 8. Camlar sıcak solüsyon içerisinde 60c lik etüv veya su banyosunda kesitler açık kahve rengi olana kadar bekletilir(30 sn) 9. Camlar üç kez distile suda yıkanır 10. %1 lik goldchloride 10 sn tonlama yapılır 11. Distile sudan geçirilir(3 kez) 12. %0,2 light gren den 30 sn ile 3dk arasında tutulur. Alkol ksilen kapat + Kontrol ile çalışılır. GMS kontol kullanılıyor GRİMELİUS SİLVER METHOD FOR ARGY ROPHIL CELLS Silver Solüsyonu: Acetat tamponu(ph5.6)..10 ml Rodiutilled su. 87 ml %1 Silver nitrat solüsyonu ( taze hazırlanmış) 3 ml Acetat tamponu: Stok A: 0.2m asetik asit 1.2ml glacial asetik asit ml distile su Stok B: 1.64gr sodyum asetat anhydrous veya 2.72gr sodyum asetat anihidrat + 100ml distile su Tampon Çözelti: ph 5. 6 için; 4.8ml stok A ml stok B + 100ml distile su Reducing solüsyonu Hydroquınone 1gr Sodyum sülfit 5 gr Distile Su 100 ml 1- Distile su Kullanmadan önce taze olarak hazırlanır

14 SAYFA NO 14/22 2- Silver solüsyonunda 60 C lik etüvde 3saat 3- Camları kurula 4- Taze hazırlanmış reducing solüsyonunda ( 45 de 1 dakika) Solüsyonu 45 C ye ısıt 5- Distile suda çalkala 6- İstenirse zıt boya 7- Çeşme suyunda yıka 8- Alkol ksilen kapat + Kontrol ile çalışılır. +KONTROL kullanılıyor MASSON FONTANA %10 luk silver nitrat silver nitrat.10 gr distile su.100 ml Fontana silver nitrat stok solüsyonu %10 luk silver nitrat 95 ml içerisine damla damla concantre amonyum hidroksit (amonyak) eklenir bir çökelek oluşur bu çökelek kaybolana kadar amonyak eklemeye devam edilir. Kalan 5 ml silver nitrat yavaş yavaş eklenir. Çözelti hafif bulanık olana kadar devam edilir. İşlem tamamlandıktan sonra çözelti 1 gece dinlendirilir ve kullanmaya hazır hale gelir. Fontana silver nitrat working solüsyonu Stok solüsyonu 25 ml kullanımdan önce Distile su 75 ml filtre edilir. %1 Gold chloride %5 soldyum tiyosülfat sodyum triyosülfat. 5 gr distile su. 100 ml Nüclear Fast Red (daha önceki boyalarda anlatıldı) 1. Deporafinize distile su 2. Fontana silver nitrat çalişma solüsyonunda 37 ⁰C de 1 saat etüvde bekletilir. (açık kahverengine dönene kadar) 3. 5 dak soğutulur değişim distile suda çalkala 5. Gold chloride çalişma solüsyonu 10 dak 6. Distile suda çalkala 7. %5 lik sodyum tiyosülfat 5 dak 8. Distile suda çalkalanır. 9. Nüclear Fast Red 5 dak zıt boya 10. Hızlıca distile suda çalkalanır. 11. Alkol-Ksilen-Kapat SONUÇ Argentaffin siyah

15 SAYFA NO 15/22 Melonin Nukleus ve çekirdek siyah pembeden kırmızıya + Kontrol ile çalışılır. +KONTROL kullanılıyor MASSON TRİKROM BOYASI Bouin Fiksatifi Demirli Hematoksilen Çalışma Sol.( Weıgert) Biebrich Scarlet-Acid Fuchsin Solusyonu Biebrich scarlet %1 aqueus 90 ml Acid fuchsine % aqueus..10 ml Acetic asit.1 ml Phospho Molibdic-Phospho Tungstic Acid Sol. Phospho molibdic acid 5 gr Phospho tungstic acid..5gr Distile su..200 ml Aniline Blue Sol. Veya Lıght Green Sol. Aniline blue...2,5 gr Acetic acid glasial. 2 ml Distile su 100 ml Light green..5 gr Distile su. 250 ml Acetic acid glas...2 ml %1 Acetic Acid Sol Veya %5 Phospho Tungstic 1 ml acetic asid + 99 ml dist. Su 5gr phospho tungstic acid ml dist su 1. Deparafinize ve hidreat edilen kesitler 2. Bouın fiksatifinde ( formol fiksasyonu ile takip edilmişse ) 56 c da 1 saat 3. Dışarı alınır ve soğuması beklenir..10 dk 4. Akan çeşme altında kesitler sarı renk giderilene dek yıkanır takribi dk 5. Weigert demirli hematoksilende 3-5 dk 6. Akan çeşme altında hematoksilenden çıkan kesitler yıkanır dk 7. Biebrich scarlet-acid fuchsin solusyonunda.15 dk ( dk) 1. ( not ss sisteminde süre 2 dk dır) 8. Phospho molibdic-phospho tungstic acid sol. İle diferansiyon yapılır..1-2 dk i. ( mikroskopta kontrol edilerek bağ doku daki boya uzaklaşana dek ) ii. ( not : ss sisteminde 30 dakikaya dek uzayabilir.) 9. Tercih edilen light green ise.1-2 dk ( +2 dk olabilir) tercih edilen anilin bulu ise dk 10. Diferansiyon tercih edilken lıght green ise %5 phospho tungstic 1 dk ( veya 3-5 kez çalkala) Diferansiyon tercih edilken anilin blue ise %1 acetic acid sol ile yapılır 3-5 dk 11. % 96 alkol den geçirilir xylen ve kapat + Kontrol YOK

16 SAYFA NO 16/22 MAYER MUCICARMINE Southgate s Mucicarmine Stok 1.5 gr Carmine + 1 gr Aluminyum Hidroksit Ml Etil Alkol İle Çöz. Hazırlanışı: Bunları Az Az Karıştırarak Ekle,İyice Karıştır.0,5gr Aluminyum Chloride(Anyhrous) Ekle.Kaynamak Üzere Olan Sıcak Su Banyosunda 2-3 Dk Tut.Çeşme Suyunda Hızlıca Soğut Süzüp Sakla.(1 Gece Dinlendir) Southgate s çalışma solüsyonu Stok çözeltiden 10 ml alınır.+ 90 ml distile su +100 ml etil alkol (hazırlandıktan 30 dk sonra kullanılmalı) Demirli hematoksilen solusyonu (weigert s) Stok a : 1gr hematoksilen + %95 lik 100ml etil alkol Stok b:%29 luk ferric chlorid 4ml + 95 ml distile su+ 1ml kons. Hcl %29 luk ferric chlorid 29 gr ferric chlorid +100ml distile su Weigert s çalışma sol:stok a ve b eşit oranlarda karıştırılır.karışım 2 hafta tazeliğini korur % 0.25 metanil yellow 0.25 gr metanil yellow + 100ml distile su ml glacial asetik asit : 1) Deporafinize + dist. Su 2) Weigert s hematoksilen 5 3) Yavaşça çeşme suyu 4) Distile suda çalkala 5) Southgate smucicarmine çalışma sol 30 veyda daha fazla tut. 6) Distile suda 2 kez çalkala 7) Metanil yellow 1 kere batır çıkar(duruma göre sayı artabilir) 8) Alkol-ksilen-kapat + kontrol ile çalışılır. pas kontol kullanılıyor MELANİN BLECH SOLDURMA METODU 1- Deparafinize + distile su 2- % 0.25 lik KMnO4 sol. 5 dakika 3- Çeşme suyuyla yıka 4- %5 lik oksalik asit sol 5 saniye (kesitler solana kadar! mikroskopta kontrol et!) 5- Hangi boya ile boyanacaksa işleme ona göre devam edilir METİL GREEN PYRONİN(MGP) 1. %1 metil gren stok solüsyonu metil gren... 1 gr distile su.100 ml Extraction:bu çözeltideki metil violeti uzaklaştırmak için kloroformla ekstraksiyon yapılır.

17 SAYFA NO 17/ ml %1metil green solüsyonu ve eşit miktarda kloroform ayırma hunisine konularak iyice çalkalanarak karıştırılır. Bir gece sabit bir yerde bekletilir. Huninin altında ayrılan mavi renkli kloroform alınarak atılır. huniye alınan kloroform kadar tekrar temiz kloroform konup karıştırılıp 1 saat bekletilir.alttan tekrar mavi renkli kloroform alınarak atılır.(bu işlem kloroformun rengi açılana kadar tekrarlanır.genelde 3 kez yeterlidir.) hunideki metil violetten temizlenmiş çözelti temiz bir kaba alınır. 2.%1pyronin gs stok solüsyonu 1 gr pironin gs +100 ml distile su hafifce ısıtılarak pyroninin iyice erimesi sağlanır. 3.mgp working solüsyonu 70ml ekstraksiyondan elde edilen %1 lik metil green 30 ml % 1 pyronin iyice karıştırılır.% 1 lik sodyum asetat ile ph 4,8 ayarlanır.bir gece dinlendirilip kullanılır. 4.%1 sodyum asetat 1 gr sodyum asetat +100 ml distile su 1.deparafinize (Xylene Alkol Su D Su) distile su 2.mgp 2 dakika 3.dokuların kenarlarını kurula 5 dk havada kurut 4.camları distile suya hızlıca daldır çıkar (üzerinden boya akacak)mikroskopta bak çok kırmızıysa -5 c lik %80 etil alkole 1-2 defa batır çıkar kez asetona hızlıca batır çıkar 6.eşit miktarlarda ki aseton ksilen karışımına batır arkasından iki değişim ksilene batır çıkar. 7.kapat. + Kontrol ile çalışılır. MGP kontrol kullanılıyor OIL RED O BOYASI Not:hiç bir surette kesitler alkole girmemeli taze frozen kesitler için. %100 Propilen Glikol %0.5 Lik Oil Red O Solüsyonu Oil red o 0,5gr Propilen glikol % ml Hazırlanışı: geniş bir kapta küçük bir miktar propilen glikole oil red o eklenerek iyice karıştırılır.geri kalan propilen glikol de azar azar eklenir.solüsyon hafif hafif ısıtılarak 95c alınır.(dikkat 100 dereceyi aşmamalı)solüsyon hala sıcakken filtre kağıdından geçirilir bir gece oda ısısında dinlendirilir.tekrar filtre edilir ve kullanımna hazırdır.not:solüsyon uzun süre kullanılabilir. %85 Propylen Glycol Sol. (85 Ml.%100 Propilen Glikol + 15 Ml Distile Su) Glyserin Jel Gelatin..10 gr Distile su 60 ml Jelatin eriyene dek ısıtılır ve aşağıdakiler eklenir.

18 SAYFA NO 18/22 Gliserin.70 ml ü Phenol.1 ml 1. Frozen kesitler distile suya alınır 2. %100 propilen glikol de.2 dak 3. %0.5 lik oil red o solüsyonunda 16 saat ( uygulamamızda 6 saat te sonuç alıyoruz) 4. %85 propylen glycol sol. İle diferansiye edilir 1 dak. 5. Mayer hematoksilende 2-3 dakika 6. Distile su ile birkaç kez çöalkalanır. ( hematoksilen boyası olgunlaşmalı) 7. Hafifce ısıtılarak sıvı hale gelen gliserin jel ile kapatılır. + Kontrol ile çalışılır PAMS ( PERİODİC ACİD METHANAMİNE SİLVER STAİN) Gomori methanamine silver stak sol %3 hexamethilene tetramine aqueos..100 ml %5 gümüş nitrat aqueos.5 ml Gomori methanamine silver çalışma sol. Stok methanamine silver sol.100 %5 boraks aqueos 10 ml %0,5 periodic acid sol (0,5 periodic acid ml dist su) %0,2 gold chloride sol %1 gold chloride sol.20 ml Distle su 80 ml %2 sodiumtio sülfate (2gr sodiumtio sülfate + distile su 100) 1. Kesitler hidrate edilir 2. Periodic asit sol.. 15 dk 3. Dist.su ile yıkanır 4. Gms çalışma solüsyonunda 60 c de dak. Tutulur Süre sonunda lamlar 60 c distl. Suyla yıkanır mikroskopta kontrol edilir glopmerul bazal membranı boyanmışsa sıcak suyla yıkanıp alınır şayet yeterli değilse tekrar boya solusyonuna alınır. Makroskopik olarak bakıldığında kesit yüzeyleri acı kahve reni olunca boyanma tamamlanmış olabilir. 5. Distile su ile 2-3 kez çalkala 6. Altın klorürde tonlama yapılır 7. Distile su ile iyce yıkanır 8. Sodyum tio sülfat ile.. 2 dk ( duruma göre daha az) 9. İstenirse kontur stain yapılır ( trikrom protokolü uygulanır metilen blue olan. ) 10. Alkol ksilen kapat + Kontrol YOK.

19 SAYFA NO 19/22 PERLS IRON ( PRUSYA MAVİSİ- DEMİR ) BOYASI A) %20 HCl ( 20 ML HCl +80 ML dist. Su ) B) %10 POTASYUM FERROSİYANİD ( 10 gr Potasyum Ferrosiyanid Cc Distle Su) Çalışma Solüsyonu Kullanımdan hemen önce A ve B solüsyonundan eşit miktarda karıştırılarak kullanılır. Nuclear Fast Red Nuclear fast red 0,1 gr %5 lik monyum sülfat.100 ml Çözülür.yavaşça atılarak kaynatılır.soğutulup süzülür ve içerisine bir miktar koruyucu olarak thymol kristali eklenir. 1. Deparafinize, Hidrate, Distile Su 2. Çalışma Solüsyonunda...30 Dak 3. Distile Su İle Çalkala 4. Nukleer Fast Red ( Zıt Boya ).. 5 Dak ( Altarnatif Olarak Distile Su İle Çalkalkala Ve Havada Kurut) 5. Akan Çeşme Suyunda.2 Dak 6. Alkol Ksilen Kapat YAYMALAR İÇİN DEMİR BOYASI 1. Distile Su 2. %10 Potasyum Ferrosiyanid..5 Dak Çalışma Sol : (%10 Potasyum Ferrosiyanid 70 Ml + %10 Hcl.30 Ml) 3. Çalışma Sol. Da 20 Dak 4. Distile Su İle Çalkala 5. Nukleer fast red sol 5 Dak. ( Altarnatif Olarak Distile Su İle Çalkalkala Ve Havada Kurut) 6. Akan Çeşme Suyunda 2 Dak 7. Alkol Ksilen Kapat + Kontrol ile çalışılır Demir + KONTROL SAFRANİN O METHOD 1-Weigert s Hematoksilen (Daha önceki protokollerde hazırlanışı bulunuyor) 2- %0.001 Fast Gren sol. Fast Gren..0.1gr distile su..100ml 3-%1 Asetik asit glacial asetik asit 1 ml distile su.99 ml 4-%0.11 Safranin Safranin 0.1gr

20 SAYFA NO 20/22 distile su 100ml 1- Deparafinize+Distile su 2- Weigert s Hematoksilen 7 dakika 3-10 dakika akan çeşme suyunda yıka 4- Fast gren sol. 3 dakika 5- Hızlıca %1 lik asetik asit solusyonunda sn çalkala 6- %0.1 Safranin sol. 5 dakika 7- Dikkatli alkol ksilen kapat + Kontrol YOK VAN GİESON Weigert s (Demirli Hemotoksilen) Stok A:1gr hematoksilen + 100ml %95 lik etil alkol Stok B:4ml %29 luk ferric chloride + 95ml dist. Su + 1 ml hcl Çalışma solüsyonu: stok A ve stok B den eşit miktarda karıştırılarak kullanılır(2 hafta taze kalır) Van Gieson Solüsyonu 5ml %1 lik acid fuchsin solüsyonu + 95 ml doymuş picric asit 1. Deparafinize + distile su 2. Weigert s (demirli hemotoksilen)..10dak(5dk) 3. Akan çeşme altında bir kaç dakika 4. Van gieson solüsyonu.1-2 dak 5. Sudan geçirmeden dikkatlice alkol-ksilen-kapat VERHOEFF S ELASTİC STAİN %10 luk alkolik hemotoksilen Hemotoksilen.. 10 gr absolü alkol 100 ml %10 luk ferric chloride ferric chloride 10 gr distile su 100 ml Verhoeff s iodine solüsyonu 2 gr iodine katı maddeler iyice karıştırılır distile suyu 4 gr potasyum iodine 20 ml konur hızlıca çalkalanır. Artan distile 100 ml distile su su 20 şer ml aralıklarla konularak çalkalanır. Verhoeff s elastik çalışma solüsyonu 25 ml %10 luk alkolik hemotoksilen 25 ml %100 lük etil alkol 25 ml %10 luk ferric chride Bu üçü iyice karıştırılır ve 25 ml verhoeff s iodin solüsyonu eklenir.

21 SAYFA NO 21/22 %2 ferric chloride 20 ml %10 luk ferric chloride 80 ml distile su Van gieson solüsyonu (daha önceki protokolde bulunuyor.) %5 sodyum tiyosülfat (5 gr sodyum tiyosülfat ml distile su ) 1. Deporafinize 2. Verhoeff s elastik çalışma solüsyonu 15 dak 3. Çeşme suyunda yıkanır 20 dak 4. Distile su 5. %2 lik ferric chloride de ayrıştırılana kadar (1-2 kez batırıp çıkarılır) tut. 6. %5 lik sodyum tiyosülfat 1 dak 7. Çeşme suyu 5 dak 8. Distile su 9. Van gieson solüsyonu 1 dak 10. Alkol- Ksilen-Kapat + Kontrol ile çalışılır. +KONTROL kullanılıyor VON KOSSA METODU %5 Silver nitrat Agno₉. 5 gr Distile su ml Photographic developer solüsyon Photographic developer (siyah-beyaz film için) 50 ml Distile su 50 ml %5 sodyum tiyosülfat Sodyum tiyosülfat.5 gr Distile su ml Nuclear fust red NFR...0,1 gr %5 lik amonyum sülfat 100 ml Çözelti içinde ısıtılarak yavaşça kaynatılır, soğutulup süzülür. İçerisine koruyucu olarak thymol eklenir. 1. Deparatinize, distile su 2. %5 lik AgNO₉ solüsyonu 1 saat değişim distile su ile iyice yıkanır. 4. Photographic developer solüsyonu 2 dak 5. 2 değişim distile su ile iyice yıkanır. 6. Sodyum tiyosülfat 5 dak 7. Akan çeşme suyunda 2 dak yıkanır. 8. NFR ile 5 dak zıt boya

22 SAYFA NO 22/22 9. Akan çeşme suyunda 2 dak yıkanır Alkol-Ksilen-Kapat + Kontrol ile çalışılır. +KONTROL kullanılıyor 3.7. POST ANALİTİK EVRE TESTİN RAPORLANMASI ve DAĞITILMASI Raporlar bir sekreter tarafından bilgisayarda yazılır ve sonuçları hastalara verilir. Sitoloji sonuçları 5 iş günü içerisinde ve biyopsi sonuçları 15 iş günü içerisinde sonuçlandırılır. Kesinleşen raporlar ENLİL sistemi üzerinden görüntülenebilir. 3.8.TEST SONUÇLARININ HASTALARA AÇIKLANMASI İLE İLGİLİ KURALLAR Hasta ve hasta yakını dışındaki kişilere açıklama yapılmaz. Telefon ve sözel olarak hiçbir test sonucu açıklanmaz. 3.9.NUMUNELERİN SAKLANMASI VE ARŞİVLEME Bloklar, Lamlar ve raporlar süresiz, elektronik kayıtlar yedekleme ile birlikte süresiz arşiv birimimizde saklanmaktadır. Blok ve lamlar C sıcaklıkta saklanmaktadır. Hastaya ait kalan dokular ve sıvılar raporlama tarihinden itibaren en az 1 ay laboratuar içinde, 3 ay makroskobik parça saklama odasında saklanmaktadır ATIK YÖNETİMİ VE LABORATUARIN TEMİZLİĞİ Tüm materyaller ve kullanılan ek malzemeleri TOTM-TLM-087 Tıbbi Atık Talimatı.pdf na göre imha edilir. Laboratuarın temizliği günlük yapılır. Cihaz temizliği; doku takip cihazı solüsyonları cihaza yüklenmiş olan program dahilinde otomotik olarak cihaz tarafından atık bidonlarına alınır. Kimyasal atıklar Kimyasal atık lavabolarına dökülür. Su banyosu; her gün temizlenir ve yeni distile su doldurulur; akşam iş bittiği zaman boşaltılır. Gün içinde kirlendiğinde de su değiştirilir PANİK TANI BİLDİRİMİ Bir gün içerisinde ilgili hekim telefon ya da rapor üzerinde uyarılmalıdır. TOTM-FRM-307 Panik Değer Bildirim Formu.pdf na kayıt edilmelidir. Panik tanı kriterleri TOTM-LST-011 Patoloji Laboratuvarı Panik Değer Listesi dokümanında belirtilmiştir. 4.REFERANS DOKÜMANLAR: