Nitrate A, Nitrate B ve Nitrate C Reagent Droppers

Transkript

1 B Nitrate A, Nitrate B ve Nitrate C Reagent Droppers U L Ekin sonundaki sembol açıklamalarına bakın. 2006/12 Türkçe KULLANIM AMACI BBL Nitrate Reagent A, BBL Nitrate Reagent B ve BBL Nitrate Reagent C Droppers (BBL Nitrat Reaktifi A, BBL Nitrat Reaktifi B ve BBL Nitrat Reaktifi C Damlalıkları), bakterilerin nitratı nitrite veya serbest nitrojen gazına indirgeme yeteneklerini belirlemek amacıyla kullanım içindir. ÖZET VE AÇIKLAMA Enterobacteriaceae, diğer birçok gram-negatif bakteriler, mikobakteriler ve mantarlar nitratı nitrite indirger. Bir türün nitratı indirgeme özelliği belirli cins ve türler için değişmezdir. Nitrat A ve B Reaktifleri, eşit miktarda eklendiklerinde, besiyerinde katabolik bir son ürün varlığını veya nitrat yokluğunu gösterir. 1,2 Negatif reaksiyon olması durumunda, Nitrat C Reaktifi eklenmesi besiyerinde nitrat varlığını gösterir ve negatif reaksiyonu doğrular. ProseDür İlkeleri Reaksiyon, organizmanın nitratı (NO 3 ) nitrite (NO 2 ), nitröz okside (N 2 O), nitrik okside (NO) veya amonyağa (NH 3 ) indirgeme yeteneğini gösterir. Bu son ürünlerden herhangi birinin varlığı durumunda, organizma nitrat pozitif ise, eşit oranlarda eklenen Nitrat A ve B Reaktifleri, besiyerini pembeye veya kırmızıya döndürecektir. Besiyerini pembe veya kırmızıya döndürmeyen başka son ürünlerin oluşması da muhtemeldir; bu sebeple ilave Nitrat C Reaktifi (çinko tozu) indirgenmemiş nitratın saptanması için kullanılır. İndirgenmemiş nitrat varlığında, çinko tozu besiyerini pembe veya kırmızıya döndürecektir. Çinko tozu eklenmesinden sonra renk oluşmaması nitratın nitrojen gazına indirgendiğini (N 2 ) ve organizmanın nitrat pozitif olduğunu gösterir. REAKTİFLEr Nitrat A Reaktifi Damlalıkları, 0,5 ml 5 N Asetik Asit içerisinde %0,8 Sülfanilik Asit içerir. Nitrat B Reaktifi Damlalıkları, 0,5 ml, 5 N Asetik Asit içerisinde %0,6 N,N-Dimetil-alfa-naftilamin içerir. Nitrat C Reaktifi Damlalıkları 1 g çinko tozu içerir. Uyarılar ve Önlemler: In vitro Diagnostik Kullanım içindir. Bulaşıcı malzemeleri kullanırken ve atarken, uygun laboratuvar uygulamalarını takip edin. Nitrat A Reaktifi yanıklara sebep olur. Çocukların ulaşamayacağı bir yerde kapalı halde muhafaza edin. Gözle temas etmesi halinde, derhal bol suyla yıkayın ve bir doktora danışın. Uygun, koruyucu kıyafetler, eldiven ve göz/yüz koruyucu kullanın. Nitrat B Reaktifi yanıklara sebep olur. Kullanım esnasında yiyip içmeyin. Gözle temas etmesi halinde, derhal bol suyla yıkayın ve bir doktora danışın. Uygun, koruyucu kıyafetler ve göz/yüz koruyucu kullanın. Nitrat B Reaktifi, U.S. Occupational Safety and Health Administration (OSHA) tarafından karsinojenik olarak sınıflandırılmış olmamasına rağmen, karsinojenik kabul edilen alfanaftilamin ile yakından ilişkilidir. 3 Nitrat C Reaktifi suyla temas etmesi halinde oldukça yanıcı gazlar açığa çıkarır. Havada ani olarak yanıcıdır. Çocukların ulaşamayacağı bir yerde muhafaza edin. Kabı sıkıca kapalı ve kuru muhafaza edin. Yangın durumunda, kum, karbondioksit veya toz söndürücü kullanın. Asla su kullanmayın. Saklama Talimatları: Reaktif Damlalıklarını C (59 86 F) oda sıcaklığında saklayın. Işıktan koruyun. Ampulü kırdıktan sonra her damlalık bir gün içinde kullanılmalıdır. Ürünün Bozulması: Bu reaktifler, son kullanma tarihine kadar kimyasal instabiliteden koruyan bir şişede hava geçirmeyecek şekilde kapatılmıştır. Reaktif A ve B renginin berrak veya açık sarıdan kahverengiye dönmesi, daha zayıf reaksiyonlara neden olabilen uygun olmayan saklama koşullarının göstergesidir. PROSEDÜR Sağlanan malzemeler: Nitrate A Reagent Droppers, Nitrate B Reagent Droppers veya Nitrate C Reagent Droppers (siparişe göre). Gerekli fakat sağlanmamış malzemeler: Bu prosedür için gerekli olan yardımcı kültür ortamları, reaktifler, kalite kontrol organizmaları ve laboratuvar ekipmanı. Test Prosedürleri: Ninhidrin A veya B Reaktif Damlalıklarını kullanmak için, dik olarak tutun ve UÇ KISMINI KENDİNİZDEN UZAĞA DOĞRU TUTUN. Orta kısmını baş ve işaret parmağınızla tutun ve damlalığın içerisindeki ampulü kırmak için hafifçe sıkın. Dikkat: Ampulü merkezine yakın noktadan yalnızca bir kez kırın. Plastik delinip yaralanmaya neden olabileceğinden damlalığı daha fazla sıkmayın. Damlalığın alt kısmını masanın üzerine birkaç defa vurun. Kullanıma hazır olduğunda, reaktifin uygun şekilde damla damla dağılması için ters çevirin. Nitrat C Reaktifi Damlalıklarını kullanmak için, kapağı çıkarın ve çinko tozunu dağıtmak için ters çevirin. Sıvı Besiyeri Yöntemi: Enterobacteriaceae ve fermente etmeyen gram negatif çubuklar için yöntem. 1. Nitrat Broth u test edilecek organizmayı içeren Durham tüpü ile saatlik kültür kullanarak inoküle edin. 2. İnoküle edilmiş tüpleri C de saat boyunca inkübe edin. Bazı organizmalarda pozitif reaksiyon elde edebilmek için uzatılmış inkübasyon gerekebilir Durham tüpünü inkübatörden çıkarın ve gaz bulunup bulunmadığını görmek için inceleyin. Gaz mevcutsa, organizma nitrat pozitiftir. Gaz mevcut değilse, adım 4 ile devam edin. 4. Tüpe 10 damla Nitrat A ve 10 damla Nitrat B ekleyin. (Alternatif prosedür: Yaklaşık olarak 2 ml broth alın ve 12 x 75 mm lik temiz bir test tüpüne koyun. Tüpe 5 damla Nitrat A ve 5 damla Nitrat B ekleyin. Reaktifleri karıştırmak için hafifçe çalkalayın. Negatif olması durumunda, kalan broth tekrar inkübe edilebilir ve sonraki gün test edilebilir). 5. Broth da 2 dakika içerisinde pembe/kırmızı renk gelişimi olup olmadığını inceleyin. 6. Pembe/kırmızı renk gelişirse, organizma nitrat pozitiftir dakika içerisinde hiçbir renk gelişimi olmazsa, tüpe az miktarda Nitrat C (bir kez tersine döndürerek) ekleyin.

2 8. Besiyeri 2 dakika içerisinde pembe/kırmızıya dönerse, nitrat mevcuttur (yani, organizma tarafından indirgenmemiştir) ve organizma nitrat negatiftir dakika içerisinde hiçbir renk değişimi kaydedilmezse, broth da nitrat mevcut değildir (yani, organizma nitratı nitrojen gazına indirgemiştir) ve organizma nitrat pozitiftir. Yarı Katı Besiyeri Yöntemi: Güç üreyen gram-negatif çubuklar, anaeroblar ve gram-pozitif organizmalar için yöntem. 1. Indole Nitrite Medium u saatlik bir kültür kullanarak test edilecek organizma ile inoküle edin. 2. İnoküle edilmiş tüpleri C de saat boyunca inkübe edin. Bazen, bazı organizmalarda pozitif reaksiyon elde edebilmek için uzatılmış inkübasyon gerekebilir Tüpe 10 damla Nitrat A ve 10 damla Nitrat B ekleyin. (Alternatif prosedür: Yaklaşık olarak 2 3 ml besiyeri alın ve 12 x 75 mm lik temiz bir test tüpüne koyun. Tüpe 5 damla Nitrat A ve 5 damla Nitrat B ekleyin. Reaktifleri karıştırmak için hafifçe çalkalayın. Negatif olması durumunda, kalan broth tekrar inkübe edilebilir ve sonraki gün test edilebilir). 4. Broth da 2 dakika içerisinde pembe/kırmızı renk gelişimi olup olmadığını inceleyin. 5. Pembe/kırmızı renk gelişirse, organizma nitrat pozitiftir dakika içerisinde hiçbir renk gelişimi olmazsa, tüpe az miktarda Nitrat C (bir kez tersine döndürerek) ekleyin. 7. Besiyeri 2 dakika içerisinde pembe/kırmızıya dönerse, nitrat mevcuttur (yani, organizma tarafından indirgenmemiştir) ve organizma nitrat negatiftir dakika içerisinde hiçbir renk değişimi olmadığı takdirde, besiyerinde nitrat mevcut değildir (yani, organizma nitratı nitrojen gazına indirgemiştir) ve organizma nitrat pozitiftir. Diğer Yöntemler: Bu reaktifler Nitrat A, Nitrat B ve Nitrat C gerektiren nitrat indirgeme testinin herhangi bir varyasyonunda kullanılabilir. Kullanıcı Tarafından Kalite Kontrolü: Reaktifleri bozulma belirtileri açısından inceleyin (bkz. Ürünün Bozulması ). Escherichia coli ATCC pozitif bir sonuç verirken, Acinetobacter baumannii ATCC negatif bir sonuç verecektir. Gerekli kalite kontrolleri ilgili yerel, resmi ve/veya federal düzenlemelere veya akreditasyon gerekliliklerine ya da laboratuvarınızın standart Kalite Kontrol prosedürlerine uygun olarak gerçekleştirilmelidir. Kullanıcının, uygun Kalite Kontrol uygulamaları için ilgili CLSI (eski adı NCCLS) yönergelerine ve CLIA düzenlemelerine uyması önerilir. Sonuçlar Nitrat Pozitif: a. Durham tüpünde gaz veya, b. Reaktiflerin eklenmesinden sonra, pembe/kırmızı renk oluşur veya, c. Reaktiflerin eklenmesinden sonra hiçbir renk oluşmaz ve çinko tozu eklenmesinden sonra hiçbir renk oluşmaz. Nitrat Negatif: Reaktiflerin eklenmesinden sonra hiçbir renk oluşmaz ve çinko tozu eklenmesinden sonra pembe/kırmızı renk oluşur. ProseDürÜN KISITLI OLDUĞu alanlar Nitrat testini negatif kabul etmeden önce en az 2 dakika renk oluşumunu bekleyin. Organizmanın nitratı nitrojen gazına indirgeme yeteneğine bağlı olarak hatalı negatif reaksiyon olasılığını ortadan kaldırmak için herhangi bir negatif reaksiyona Nitrat C (çinko tozu) eklenmelidir. Yalnızca saf kültür kullanın. Karışık kültürler hatalı sonuçlara yol açabilir. Yalnızca önerilen miktarda çinko tozu kullanın. Fazla çinko tozu hatalı reaksiyonlara yol açabilir. 4 Performans Özellikleri BBL Nitrat A, B ve C Reaktiflerini ticari olarak mevcut başka bir Nitrat Reaktifleri seti ile karşılaştıran bir dahili çalışma yürütülmüştür. 5 Tabloda belirtildiği gibi, her iki Nitrat Reaktifleri seti kullanılarak test edilen 7 ATCC suşu için bütün reaksiyonlar tanımlanmıştır. Organizma Beklenen Sonuçlar BBL Reaktifleri Ticari Reaktifler Acinetobacter anitratus ATCC 7961 Escherichia coli ATCC Pasteurella multocida ATCC W+ W+ Branhamella catarrhalis ATCC W+ W+ Eikenella corrodens ATCC Branhamella catarrhalis ATCC W+ W+ Enterobacter cloacae ATCC Anahtar Negatif + Pozitif W+ Zayıf Pozitif Ticari Takdim Şekli Kat. No. Açıklama BBL Nitrate A Reagent Droppers, 50 x 0,5 ml BBL Nitrate B Reagent Droppers, 50 x 0,5 ml BBL Nitrate C Reagent Droppers, 50 x 1 g. 2

3 REFERANSLAR 1. MacFaddin, J.F Biochemical tests for the identification of medical bacteria, 2nd ed. Williams & Wilkins, Baltimore. 2. Forbes, B.A., D.F. Sahm, and A.S. Weissfeld Bailey and Scott s diagnostic microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St Louis. 3. Balows, A., W.J. Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, and H.J. Shadomy (ed.) Manual of clinical microbiology, 5th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 4. Porres, J.M., and V. Porter Rapid nitrate reduction test. Am. J. Med. Technol. 40: Data on file, BD Diagnostic Systems. 3

4 Manufacturer / Výrobce / Producent / Fabrikant / Tootja / Valmistaja / Fabricant / Hersteller / ÊáôáóêåõáóôÞò / Gyártó / Ditta produttrice / Gamintojas / Producent / Fabricante / Výrobca / Tillverkare / Производител / Producãtor / Üretici / Proizvoðaè Use by / Spotøebujte do / Anvendes før / Houdbaar tot / Kasutada enne / Viimeinkäyttöpäivä / A utiliser avant / Verwendbar bis / Çìåñïìçßá ëþîçò / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Naudokite iki / Brukes før / Stosowaæ do / Utilizar em / Použite do / Usar antes de / Använd före / Използвайте до / A se utiliza pânã la / Son kullanma tarihi / Upotrebiti do YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec mìsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) / JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) VVVV-KK-PP / VVVV-KK (kuukauden loppuun mennessä) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) / JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) / ÅÅÅÅ-ÌÌ-ÇÇ / ÅÅÅÅ-ÌÌ (ÌÌ = ôýëïò ôïõ ìþvá) / ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) / MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mënesio pabaiga) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesi¹ca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) aaaa-mm-dd / aaaa-mm (mm = fin del mes) / ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet på månaden) / ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) / AAAA-LL-ZZ / AAAA-LL (LL = sfârºitul lunii) / YYYY-AA-GG / YYYY-AA (AA = ayın sonu) / GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj meseca) Catalog number / Katalogové èíslo / Katalognummer / Catalogusnummer / Kataloogi number / Tuotenumero / Numéro catalogue / Bestellnummer / Áñéèìüò êáôáëüãïõ / Katalógusszám / Numero di catalogo / Katalogo numeris / Numer katalogowy / Número do catálogo / Katalógové èíslo / Número de catálogo / Каталожен номер / Numãr de catalog / Katalog numarası / Kataloški broj Authorized Representative in the European Community / Autorizovaný zástupce pro Evropskou unii / Autoriseret repræsentant i EU / Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Valtuutettu edustaja Euroopan yhteisössä / Représentant agréé pour la C.E.E. / Autorisierte EG-Vertretung / ÅîïõóéïäïôçìÝíïò áíôéðñüóùðïò óôçí ÅõñùðáúêÞ Êïéíüôçôá / Hivatalos képviselet az Európai Unióban / Rappresentante autorizzato nella Comunità europea / Ágaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej / Representante autorizado na União Europeia / Autorizovaný zástupca v Európskom spoloèenstve / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Auktoriserad representant i EU / Оторизиран представител в ЕU / Reprezentant autorizat în Uniunea Europeanã / Avrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi / Ovlašæeni predstavnik u Evropskoj zajednici In Vitro Diagnostic Medical Device / Lékaøské zaøízení urèené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Lääkinnällinen in vitro -diagnostiikkalaite / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medizinisches In-vitro-Diagnostikum / In vitro äéáãíùóôéêþ éáôñéêþ óõóêåõþ / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medico diagnostico in vitro. / In vitro diagnostikos prietaisas / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urz¹dzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Dispositivo médico de diagnóstico in vitro / Medicinsk anordning för in vitro-diagnostik / Медицински уред за диагностика ин витро / Aparaturã medicalã de diagnosticare in vitro / In Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz / Medicinski ureðaj za in vitro dijagnostiku Temperature limitation / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperatuurlimiet / Temperatuuri piirang / Lämpötilarajoitus / Température limite / Zulässiger Temperaturenbereich / ¼ñéï èåñìïêñáóßáò / Hõmérsékleti határ / Temperatura limite / Laikymo temperatûra / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limitação da temperatura / Ohranièenie teploty / Limitación de temperatura / Temperaturbegränsning / Температурни ограничения / Limitare de temperaturã / Sıcaklık sınırlaması / Ogranièenje temperature Contains sufficient for <n> tests / Dostateèné množství pro <n> testù / Indeholder tilstrækkeligt til <n> test / Voldoende voor <n> tests / Küllaldane <n> testide jaoks / Sisältöon riittävä <n> testejä varten / Contenu suffisant pour <n> tests / Ausreichend für <n> Tests / ÐåñéÝ åé åðáñêþ ðïóüôçôá <n> åîåôüóåéò / <n> teszthez elegendõ / Contenuto sufficiente per <n> test / Pakankamas kiekis atlikti <n> testø / Innholder tilstrekkelig for <n> tester / Zawiera iloœæ wystarczaj¹c¹ do <n> testów / Contémo suficiente para <n> testes / Obsah vystaèí na <n> testov / Contenido suficiente para <n> pruebas / Räckertill <n> antal tester / Съдържанието е достатъчно за <n> теста / Conþine suficient pentru <n> teste / <n> testleri için yeterli miktarda içerir / Sadržaj dovoljan za <n> testova Batch Code (Lot) / Kód (èíslo) šarže / Batch kode (Lot) / Chargenummer (lot) / Partii kood / Eräkoodi (LOT) / Code de lot (Lot) / Chargencode (Chargenbezeichnung) / Êùäéêüò ðáñôßäáò (Ðáñôßäá) / Tétel száma (Lot) / Codice del lotto (partita) / Partijos numeris (Lot) / Batch-kode (Serie) / Kod partii (seria) / Código do lote (Lote) / Kód série (šarža) / Código de lote (Lote) / Satskod (parti) / Код (Партида) / Numãr lot (Lotul) / Parti Kodu (Lot) / Kod serije Keep away from light / Nevystavujte svìtlu / Må ikke udsættes for lys / Weghoudvan licht / Hoida eemal valgusest / Suojattava valolta / Conserver à l abri de la lumière / Vor Licht schützen / ÖõëÜîôå ôï ìáêñéü áðü ôï öùò / Fény nem érheti / Tenere al riparo dalla luce / Laikyti atokiau nuo ðilumos ðaltiniø / Må ikke utsettes for lys / Przechowywaæ z dala od Ÿróde³ œwiat³a / Manter ao abrigo da luz / Uchovávajte mimo dosahu svetla / Mantener alejado de la luz / Får ej utsättas för ljus / Пазете от светлина / A se feri de luminã / / Držite dalje od svetlosti Consult Instructions for Use / Prostudujte pokyny k použití / Læs brugsanvisningen / Raadpleeg gebruiksaanwijzing / Lugeda kasutusjuhendit / Tarkista käyttöohjeista / Consulter la notice d emploi / Gebrauchsanweisung beachten / Óõìâïõëåõôåßôå ôéò ïäçãßåò ñþóçò / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l'uso / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja u ytkowania / Consulte as instruções de utilização / Pozri Pokyny na používanie / Consultar las instrucciones de uso / Se bruksanvisningen / Направете справка в инструкциите за употреба / Consultaþi instrucþiunile de utilizare / Kullanım Talimatları na başvurun / Pogledajte uputstvo za upotrebu 4

5 B BBL m Becton, Dickinson and Company A BENEX Limited 7 Loveton Circle Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Sparks, Maryland USA Shannon, County Clare, Ireland Tel: Fax: ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. Difco is a trademark of Difco Laboratories, Inc., subsidiary of Becton, Dickinson and Company. BD, BD Logo and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company BD