KOLOREKTAL ADENOM VE SERRATED POLİPLERDE KRAS MUTASYONU, BRAF MUTASYONU VE MİKROSATELLİT İNSTABİLİTE VARLIĞININ ANALİZİ

Transkript

1 KOLOREKTAL ADENOM VE SERRATED POLİPLERDE KRAS MUTASYONU, BRAF MUTASYONU VE MİKROSATELLİT İNSTABİLİTE VARLIĞININ ANALİZİ Evren Uzun 1,Sülen Sarıoğlu 1,Özgül Sağol 1,Müjde Soytürk 2,Ender Ellidokuz 2,Aras Emre Canda 3,Mehmet Füzün 3,Mehtat Ünlü 1 1 Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi Tıbbi Patoloji Anabilim Dalı 2 Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi İç Hastalıkları Anabilim Dalı 3 Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi Genel Cerrahi Anabilim Dalı

2 Kolorektal Karsinogenez SERRATED YOLAK BRAFm HP SSA/P MSI CIMP-H TSA APC KROMOZOMAL KRAS İNSTABİLİTE P53 18q del. MLH-1 MİKROSATELLİT hipermetilasyonu ya İNSTABİLİTE da germline mutasyon Alkol,Sigara CpG ADA DNMT, TET METİLASYON JCV FENOTİPİ IDH1, 2 KLASİK ADENOM-KARSİNOM YOLAĞI KONVANSİYONEL KRASm, APCm MSS, ADENOM CIMP-L Ogino, S. and A. Goel, J Mol Diagn, (1): p Al-Sohaily, S., et al. J Gastroenterol Hepatol, (9): p

3 Kolorektal Poliplerin Sınıflandırılması (WHO 2010) Konvansiyonel Adenomlar Tübüler Adenom Tübülovillöz Adenom Villöz Adenom Displazi (intraepitelyal neoplazi) Düşük Dereceli Displazi (intraepitelyal neoplazi) Yüksek Dereceli Serrated Polipler Hiperplastik Polip * Mikroveziküler HP (MVHP) * Goblet Hücreden Zengin HP (GCHP) * Müsinden Fakir HP (MPHP) Sesil Serrated Adenom/Polip * Sitolojik Displazi İçermeyen SSA/P * Sitolojik Displazili SSA/P Traditional Serrated Adenom Bosman FT, C.F., Hruban RH, Theise ND, eds., WHO Classification of Tumors of the Digestive System, in WHO Classiffications Of Tumors. 2010, IARC: Lyon.

4 Amaç BİRİNCİL AMAÇ: Konvansiyonel adenomlar ve serrated poliplerin moleküler özelliklerini ortaya koymak İKİNCİL AMAÇ: Adenom ve poliplerin morfolojik ve histolojik özelliklerinin moleküler profile etkisi Moleküler analizlerin kolorektal poliplerin ayırıcı tanısındaki rolü

5 GEREÇ VE YÖNTEM

6 12 Konvansiyonel Adenom 12 HP 24 Serrated Polip TA 4 MVHP 7 SSA/P TVA 4 MPHP VA 4 GRHP 5 TSA

7 12 Ara Form Polip SSA/P-HP 3 ten az kriptte SSA/P özellikleri içeren 3 HP (WHO 2010) TSA-TVA Fokal alanlarda TSA (<%50) özellikleri (hipereozinofili, ektopik kript) içeren 9 TVA (Hafezi et. al.)

8 Yöntem DNA ekstraksiyonu (cobas DNA preparation kit) KRAS mutasyon analizi (codon 12, 13, 61)* BRAF mutasyon analizi (V600E)* Mikrosatellit instabilite analizi (BAT-25, BAT-26, MONO-27, NR-21 and NR-24)* *Real Time PCR (cobas z480 analyzer)

9 SONUÇLAR

10 Konvansiyonel adenomlar Tübüler adenom Tübülovillöz adenom Villöz adenom KRAS mut. KRAS 6/12 (%50) 0/4 (%0) 3/4 (%75) 3/4 (%75) KRAS mut. BRAF mut. Serrated polipler 9/24 (%37) 14/24 (%63) HP 2/12 (%17) * MVHP 0/7 (%0) * GRHP 2/2 (%100) * MPHP 0/3 (%0) SSA/P 2/7 (%29) TSA 5/5 (%100) BRAF BRAF BRAF KRAS 8/12 (%67) 5/7 (%71) 0/2 (%0) 3/3 (%100) 6/7 (%86) 0/5 (%0)

11 Konvansiyonel adenomlar ve serrated poliplerde MSI saptanmamıştır. Cinsiyet, yaş ve yerleşim olarak konvansiyonel adenomlar ile serrated polipler arasında anlamlı fark yoktur (p>0,05) Konvansiyonel adenomlar, HPler ve TSAlar çoğunlukla SOL KOLON SSA/Pler çoğunlukla SAĞ KOLON yerleşimlidir. Konvansiyonel adenomlarda villözite boyutla koreledir. Konvansiyonel adenomlar serrated poliplerden daha büyük boyutludur. (p:0,076) Sol kolon yerleşimli polipler daha büyük boyutludur.

12 KRAS-Villözite-Boyut (p:0,028) Tümü Konv. Ad. Serrated 0 KRASm KRASwt 17,07 mm 12,24 mm BRAFm polipler daha küçük olma eğilimindedir. p:0,056

13 KRAS-Displazi YDD olan konvansiyonel adenomlar: 1 (%50) KRASm DDD olan konvansiyonel adenomlar: 5 (%50) KRASm *Nando, Y., et al., Hum Pathol, : p *Jass, J.R., et al., Histopathology, (2): p **Morris, Robert G et al. The Journal of pathology (1996):

14 Ara Form Vakalar 3 ten az kriptte SSA/P özellikleri taşıyan 3 HP - 1 i (%33) BRAF mutant (proksimal yerleşimli) - KRAS mutasyonu yok - MSI yok Fokal TSA özellikleri gösteren 9 TVA - 7 si (%77) KRAS mutant - BRAF mutasyonu yok - KRAS mutant olanlardan biri MSI-H (5/5 loküs)

15 TARTIŞMA

16 TARTIŞMA Konvansiyonel adenomlarda boyut ve villözite ile KRAS korele * KRAS büyüme avantajı sağlıyor Aynı ilişki displazi için geçerli değil * KRAS adenom gelişiminin erken evrelerinde meydana geliyor BRAF mutasyonu serrated fenotip oluşumunda etkin Serrated yolakta ise esas yürütücü MSI ve CIMP BRAF mutasyonunun CIMP için de başlatıcı olduğu bildiriliyor Ren, J., et al., Dis Colon Rectum, (8): p Rajagopalan, H., et al. Nature, (6901): p Liang, J.J., S. Alrawi, Int J Clin Exp Pathol, (4): p Snover, D.C., Semin Diagn Pathol, (4): p

17 TARTIŞMA MVHP BRAF mutant olup, sağ yerleşimli ise daha fazla metilasyon göstermektedir. MVHP SSA/P nin öncül formu olabilir MPHP BRAF mutasyonu göstermektedir. L. Propriada sıklıkla inflamasyon içermesi nedeniyle MVHP nin irrite olmuş formu olduğu düşünülmektedir GRHP KRAS mutasyonu göstermektedir. Sol yerleşimli olması KRASm, MSS olması nedeniyle TSA nın öncülü olabileceği düşünülmektedir. TSAlar ise KRAS mutant Sol yerleşimli olmasından kaynaklı- Alternatif yolak?? Snover, D.C., Hum Pathol, (1): p Yang, S., et al, Am J Surg Pathol, (11): p Bettington, M.L., et al. Mod Pathol, (3): p

18 TSA ALANLARI İÇEREN 9 TVA 7 si KRASm, BRAFm yok, 1 i MSI-H KRAS ın ayrımda faydası yok, morfoloji ve yerleşim net ayırıcı değil Serrated TVA/İntestinal displazi içeren TSA %10 dan fazla TSA alanı varsa TSA alanı içeren TVA-VA olarak isimlendirilmeli SSA/P ALANLARI İÇEREN 3 HP 1 İ BRAFm, KRASm yok, MSS BRAF ın ayrımda faydası yok En önemlisi displazi varlığını saptamak Terminoloji karmaşası mevcut 12 Ara Form Polip Fearon, E.R., Ann N Y Acad Sci, : p Ogino, S. and A. Goel, J Mol Diagn, (1): p Sinicrope, F.A. and D.J. Sargent, Clin Cancer Res, (6): p Hafezi Bakhtiari, Sara, et al. Histopathology 66.2 (2015):

19 KRAS + BRAF mutant SSA/P Prekürsörler hakkında literatür yok Ancak bu değişikliğin saptandığı SSA/P endoskopik olarak deprese görünümlü Deprese lezyonların daha hızlı progrese olduğu biliniyor KRASm/BRAFm lezyonlar hızlı progresyon gösterebilir 1928 KRK vakasının 3 ünde KRAS ve BRAF mutasyon birlikteliği Geniş kapsamlı çalışmaların toplamında 4323 vakadan sadece birinde bu birliktelik Biyolojik davranışları bilinmiyor Sahin, I.H., et al., J Cancer, (4): p

20 MVHP SSA/P BRAFm NORMAL MUKOZA KRASm TA, TVA VA MLH1 met. P16 kaybı MGMTkaybı p53 mut. TSA TSA TVA MGMT met. p53 mut. SMAD4m SSA/Pd SSA/Pd TSAd TSAd TVAydd YDD BRAFm CIMP-H MSI BRAFm CIMP-L MSS KRASm CIMP-L MSS KRASm CIMP- MSS SERRATED YOLAK ALTERNATİF YOLAK KLASİK YOLAK