CANDİDA İLE UYARILMIŞ VAJİNAL VE BUKKAL EPİTEL HÜCRELERİNİN SİTOKİN ÜRETİMİ

Ebat: px

Şu sayfadan göstermeyi başlat:

Download "CANDİDA İLE UYARILMIŞ VAJİNAL VE BUKKAL EPİTEL HÜCRELERİNİN SİTOKİN ÜRETİMİ"

Nesrin Kurt
8 yıl önce
İzleme sayısı:

1 CANDİDA İLE UYARILMIŞ VAJİNAL VE BUKKAL EPİTEL HÜCRELERİNİN SİTOKİN ÜRETİMİ Emine Yeşilyurt, Sevgi Özyeğen Aslan, Ayşe Kalkancı, Işıl Fidan, Semra Kuştimur Gazi Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, ANKARA

Özyeğen Aslan, Ayşe Kalkancı, Işıl Fidan, Semra Kuştimur

2 Giriş Tıbbi girişimlerin artışı Organ transplantasyonu Antibiyotik kullanımı AIDS Mantar infeksiyonları Oral ve vulvovaginal kandidoz immün sistemi baskılanmış hastalar + immün sistemi sağlıklı olan kişilerde de önemli

ve vulvovaginal kandidoz immün sistemi baskılanmış

3 Candida Normal flora Yuvarlak, oval, ökaryot, dimorfik ph 4-7, C, sa., SDA agar Germ tüp testi, Gram (+)

4 Fungal İnf. Savunma Bağışıklık Konağa ait faktörler Fiziki bariyerler Doğal Hücresel/Humoral Mononükleer Hücreler Mantara ait faktörler Yapışma (Aderans) Morfolojik Değişim Fenotipik Değişim Toksinler ve Enzimler IFN-γ, TNF-α Nötrofiller Lenfositler Biyofilm Oluşumu IL-10, IL-4, TGF-β IL-2, IL-4, IL-5 T lenfosit B lenfosit

Mononükleer Hücreler Mantara ait faktörler Yapışma (Aderans) Morfolojik Değişim

5 uyarı Sitokin geni Sitokin üreten hücre Sitokin sinyal Gen aktivasyonu Biyolojik etki Sitokin Reseptör Hedef hücre İmmun ve inflamatuvar reaksiyonların mediatörleri Salgısal, düşük molekül ağırlıklı glikoproteinler Biyolojik olayların düzenlenmesi

ve inflamatuvar reaksiyonların mediatörleri Salgısal, düşük

6 Sitokinler Proinflamatuvar sitokinler Antiinflamatuvar sitokinler IL-2 IL-4 IL-12 IL-10 IFN-γ TGF-β TNF-α IL-13

7 Candida infeksiyonlarına karşı lokal immün yanıt önemli Epitelyal hücreler sitokin ve kemokin üretimi + antimikrobiyal etkileri = mukozal immün yanıtta etkin + doğal ve kazanılmış immun sistemin düzenlenmesi

üretimi + antimikrobiyal etkileri = mukozal immün

8 Enfeksiyon

9 Candida albicans (C. albicans) ve C. glabrata ile uyarılmış vajinal ve bukkal epitel hücreleri arasında sitokin salınımında görülen farklılıkların belirlenmesi Amaç

10 Neler yaptık??? 0,24,48 sa inkübasyon C. albicans C. glabrata

11 Proinflamatuvar IFN-γ IL-6 IL-17 IL-23 Antiinflamatuvar IL-10 TGF-β Sitokin ekspresyonu??? Gerçek zamanlı PCR ELISA

12 ??? RNA ölçümü RNA ekstraksiyonu cdna dönüşümü Gerçek zamanlı PCR

13 cdna Çoğaltılması İçin Yapılan PCR Sıcaklık Döngüleri Döngü Sayısı Sıcaklık Süre 1X 95 C 1 dakika 45X 95 C Primer için bağlanma sıcaklığı* 72 C 30 saniye 45 saniye 60 saniye 1X 72 C 5 dakika

14 Analiz Primer dizileri IL-6 IL-10 IL-17 F-AGGAGCTGAGGAAAGAGATGTG R-TGTTTTCTTCGTCACTCCTGAA F-TTCTTTCAATCGAAGGATCAGC R-CTCATTCATGGCTTTGTAGACG F-CTCAGACTACCTCAACCGTTC R-GTGCCTCCCAGATCACAGAAG IL-23 IFN-γ TGF-β F-CATGGGGCTATCAGGGAGTA R-AATAATGTGCCCCGTATCCA F-CAC GCC GCG TCT TGG TCT R-TCT AGG CTT TCA ATG AGT F-GCCCTGGACACCAACTATT R-AGGCTCCAAATGTAGGGG

F-CTCAGACTACCTCAACCGTTC R-GTGCCTCCCAGATCACAGAAG IL-23 IFN-γ TGF-β

15 Çalışmamızın sonucunda: Candida ile uyarılmış vajinal ve bukkal epitel hücrelerinde mikroorganizma ile uyarılmamış epitel hücrelerine göre, proinflamatuvar sitokinlerden IL-6, IFN-γ yanıtı ELISA

16 Antiinflamatuvar sitokinlerden TGF-β düzeyleri Candida ile uyarılmış epitel hücrelerinde Antiinflamatuvar sitokinlerden IL-10 yanıtı değişiklik IL-17, IL-23 sitokin ekspresyonunda artış

21 Diğerleri??? Pivarcsi ve ark. çeşitli mikrobiyal komponentlerin (LPS, peptidoglikan, Candida, zimosan) vaginal epitel hücreleri üzerinde proinflamatuvar sitokin, kemokin ve antimikrobiyal peptit seviyelerini Pivarcsi A. Microbial compounds induce the expression of pro-inflammatory cytokines, chemokines and human b- defensin-2 in vaginal epithelial cells. Microbes and Infection 7 (2005)

22 Schaller ve ark. C. albicans ın insan vajinal epitel hücreleri üzerindeki gen ifadelenmesi proinflamatuvar sitokin seviyeleri genler arası farklılık Schaller M. Candida albicans-secreted Aspartic Proteinases Modify the Epithelial Cytokine Response in an In Vitro Model of Vaginal Candidiasis. INFECTION AND IMMUNITY, May 2005, p Vol. 73, No. 5

23 Steele ve ark. C. albicans a ait oral/ vaginal mukozal epitel yanıtı??? TNF-ɑ IL-1ɑ IL-12, IFN-γ, IL-10, TGF-β, MCP-1, IL-8 oldukça az IL-6 Heterojenik dağılım, proinflamatuvar sitokinler dominant Chad Steele and Paul L. Fidel, Jr. Cytokine and Chemokine Production by Human Oral and Vaginal Epithelial Cells in Response to Candida albicans. INFECTION AND IMMUNITY 2002, Vol. 70, No. 2, p

24 Villar ve ark. Candida enfeksiyonu proinflamatuvar sitokin seviyesini mayanın mukozal yüzeylerde kolonizasyonu üzerinde oldukça etkili C. C. Villar. Invasive Phenotype of Candida albicans Affects the Host Proinflammatory Response to Infection. INFECTION AND IMMUNITY, Aug. 2005, p Vol. 73, No. 8

25 Fahey ve ark. kadın genital sisteminde patojenik mikroorganizmalara karşı savunmada immun hücrelerin aktivasyonu??? Artan kemokin ve sitokin oranları sayesinde epitel hücreleri koruyucu Secretion of cytokines and chemokines by polarized human epithelial cells from the female reproductive tract. J.V.Fahey, T.M Schaefer, J.Y.Channon and C.R.Wira. Human Reproduction Vol.20, No.6 pp , 2005

26 Sonuç olarak Vajinal ve bukkal epitel hücrelerinde Candida infeksiyonuna yanıt olarak özellikle proinflamatuvar sitokin yanıtında artış olduğu Ancak, iki epitel hücre grubu arasında sitokin cevabı açısından bir fark bulunmadığı görülmüştür

27 Teşekkür ederim

Benzer belgeler

Gebelikte vulvavagina kandidozu:

Gebelikte vulvavagina kandidozu: Borik asit ile 13 farklı antifungal ilacın CLSI M27-A3 protokolüne göre duyarlılık sonuçları ve dört virulans faktörünün incelenmesi Ayşe Kalkancı 1, Ahmet Barış Güzel