SANİTER GIDA-ÇEVRE BİLİMİ LTD.ŞTİ.

Transkript

1 EK RAPOR IC-1001 İÇ CEPHE BİR KAPLAMADA MANTARLARA KARŞI FİLM KORUYUCULARIN ETKİNLİK TESTİ (TS EN 15457) MAYIS 2011 * BRT No lu raporun ekidir. Sayfa 1 / 6

2 İÇİNDEKİLER 01. GİRİŞ 02. NUMUNENİN TANITILMASI 03. DENEYİN YAPILIŞI Deney Numunelerinin Hazırlanması Deney Numunelerinin Şartlandırılması Deney Numunesi Parçalarının Hazırlanması ve Sayısı Petri Kaplarının Hazırlanması Stok kültürlerin ve alt kültürlerin hazırlanması 03.6 Spor süspansiyonunun hazırlaması 03.7 Aşılama ve inkübasyon 04. DEĞERLENDİRME VE ANALİZ SONUÇLARI Sayfa 2 / 6

3 01. GİRİŞ Bu çalışma, IC-1001 İç Cephe örneğinin TS EN ye gore biyosidal/biostatic etkinliğini tayin etmek için yapılmıştır. 02. NUMUNENİN TANITILMASI IC-1001 İç Cephe 03. DENEYİN YAPILIŞI Deney Numunelerinin Hazırlanması Biyosidal etkisi olmayan bir süzgeç kağıdı şeridi, denenecek kaplama malzemesi ile kaplanır. Uygulama oranı normal kullanım için kaplama üreticisi tarafından önerildiği gibi olmalıdır Deney Numunelerinin Şartlandırılması Deney numunesi, yatay konumda (23±2) C ta ve %(50 ±5) bağıl nemde en az 5 gün şartlandırılır Deney numunesinin parçalarının hazırlanması ve sayısı Şartlandırmadan sonra, deney numunelerinden her biri 55 mm çapında üç deney numunesi parçası hazırlanmalıdır.deney numuneleri plastik bir torba içerisinde otoklavda sterili hale getirilir Petri kaplarının hazırlanması Bir malt (%3)- agar (%1.5) besiyeri otoklavda steril hale getirilir; daha sonra besiyeri, C a kadar soğutulur ve aseptik koşullar altındaki her bir steril Petri kabına 20 şer ml boşaltılır Stok kültürlerin ve alt kültürlerin hazırlanması Alt kültürler, taze hazırlanmış agar eğik kültür ortamına bir stok kültürden elde edilen spor maddesinin aşılanmasıyla elde edilir ve spor süspansiyonun hazırlanmasında kullanılır. Bu alt kültürlerden yeterli sayıda ilave alt kültürler Sayfa 3 / 6

4 türetilebilir. Aşılamadan sonra alt kültürler iyi bir sporlanma başarılıncaya kadar (24±2) C ta inkübe edilir. Bu işlem, deney için kullanılan mantar türlerine bağlı olarak, 3 gün- 7 gün gerektirebilir. Alt kültürler buzdolabı koşullarında 3 ay süreyle muhafaza edilebilir Spor süspansiyonunun hazırlanması Spor süspansiyonunun hazırlanması için iyi sporlanmış alt kültür kullanılır. Bu alt kültüre 5 ml steril damıtık su ilave edilir. Sporlar platin öze yardımıyla eğik agarlardan aşağı yönde dikkatlice yıkanır, hidrofil pamuklu bir steril cam huniden süzülür ve steril bir cam şişede toplanır Aşılama ve İnkübasyon Kaplamalı ve kaplamasız deney numunelerine ilaveten sadece besleyici agar ortamı içeren ilave üç petri kabı daha aşılanır.steril deney numuneleri steril pens kullanılarak kültür ortamının yüzeyinin ortasına yerleştirilir. Deney numunelerinin kaplanmış yüzeyi yukarıya bakmalı deney numuneleri ve kültür ortamının yüzeyi arasında hava kabarcıkları bulunmayacak şekilde tam temas sağlanmalıdır. Not- Kaplama, süzgeç kağıdının kıvrılmasına yol açmamalı; kağıt düzgün kalmalı ve uygun araçla agarla yakın teması sağlanmalıdır.aksi taktirde, farklı bir taban malzeme kullanılabilir. Deney koşulları altında taban malzemenin seçilen her deney organizmasının büyümesini engellemediği kontrol edilmelidir. Deney numuneleri, bir güvenlik kabininideki aseptik koşullar altında, uygun bir pipet kullanılarak her karışık spor süspansiyonunun 0,2 ml si ile tekdüze olarak aşılanır. Yüzeyinde düzgün bir dağılım sağlamak için ilave olarak 0,8 ml ye kadar sayreltici kullanılmasına izin verilebilir. Daha sonra süspansiyon drigalski spatülü ile agar plakasının üzerine yayılır. Bu işlem sırasında deney numunesinin yüzeyi agar ortamından uzak tutulmalıdır. Aşılamadan sonra agar plakaları (24±2) C ta inkübe edilir. Sayfa 4 / 6

5 03.8. Kullanılan Mantar Kültürleri Kültür karışımı olarak aşağıda belirtilen mikroorganizmalar kullanılmıştır. Aspergillus versicolor Aspergillus niger Alternaria alternate Rhodotorula rubra Penicillium purpurogenum ATCC Malt Extract Agar ATCC 1015 Potato Dextrose Agar ATCC Potato Dextrose Agar ATCC Saboroud Dextrose Agar ATCC Potato Dextrose Agar 04. DEĞERLENDİRME VE ANALİZ RAPORU Aşağıdaki ölçek kullanılarak, aşılamadan sonraki 7.gün, 14.gün ve 21.gündeki mantar üremesi değerlendirilir. DERECE GÖRÜNÜŞ 0 Deney numunesinin yüzeyinde miselyum yok, 1 Deney numunesinin yüzeyinde %10 a kadar üreme, 2 Deney numunesinin yüzeyinde %10 dan fazla %30 a kadar üreme 3 Deney numunesinin yüzeyinde %30 dan fazla %50 ye kadar üreme 4 Deney numunesinin yüzeyinde %50 den fazla %100 e kadar üreme 7.GÜN Sayfa 5 / 6

6 14.GÜN 21.GÜN Sayfa 6 / 6