BACTEC S.I.R.E. Drug Kit

BACTEC S.I.R.E. Drug Kit PP118JAA 2007/06 Türkçe KULLANIM AMACI BACTEC S.I.R.E. İlaç Kiti (BACTEC S.I.R.E. Drug Kit), Mycobacterium tuberculosis in test edilmesi için BACTEC 12B Ortamı ile kullanılacak antimikrobiyal maddeleri içerir. Temel olarak, BACTEC 460TB cihazıyla birlikte kullanılmak üzere tasarlanmıştır. BACTEC S.I.R.E. İlaçlarının (Streptomisin, İsoniazid, Rifampin ve Etambutol) kültürden alınan M. tuberculosis in duyarlılığının kalitatif olarak test edilmesi için BACTEC 12B Kültür Ortamına eklenmesi önerilir. ÖZET VE AÇIKLAMA Mikobakterlerin ilaç duyarlılığı testi için BACTEC prosedürü, geleneksel yöntemde kullanılan temel prensiple genel olarak aynıdır; ancak, bu yöntemde sıvı besiyeri kullanılmaktadır ve kolonilerin 3 hafta sonra sayılması yerine, gelişim radyometrik olarak izlenmekte ve sonuçlar 4 ila 12 gün içinde raporlanabilmektedir. BACTEC ilaç duyarlılığı geleneksel oran yönteminin modifiye edilmiş bir türevi kullanılarak belirlenmektedir. 1 Tüm anti tüberküloz ilaçları için kritik direnç oranı %1 olarak alınmaktadır. Bu, test mikobakteriyel popülasyonunun %1 i veya daha fazlasının dirençli olması durumunda, kültürün laboratuvar raporlaması için dirençli kabul edilebileceği anlamına gelmektedir. Direnç, kontrol flakonundaki ve test ilacını içeren 12B Ortamı flakonlarındaki gelişme hızının karşılaştırılmasıyla belirlenir. PROSEDÜR İLKELERİ Mikobakterler için BACTEC radyomatrik duyarlılık testinin temel prensibi, birincil izolasyon prosedüründe kullanılanla benzerdir. Mikobakter, 14 C-işaretli substrat içeren 7H12 ortamında geliştiğinde, substratı kullanır ve 14 CO 2 üretilir. Tespit edilen 14 CO 2 miktarı, flakondaki gelişim hızı ve miktarını gösterir ve Gelişme Endeksi (GI) cinsinden ifade edilir. Ortama anti tüberküloz ilacı eklendiğinde, test organizması duyarlıysa gelişim baskılanır. Gelişimdeki bu baskılanma, günlük GI değeri kontrolle karşılaştırıldığında görülen bir azalma veya çok küçük bir artışla tespit edilir. Ancak, organizmalar dirençliyse, çok az baskılanma görülebilir veya baskılanma görülmez. %1 lik direnç oranını belirlemek için, kontrol flakonunda kullanılan bakteriyel inokulum ilaç içeren flakonda kullanılandan yüzde bir oranında daha az olmalıdır. İlaç ve kontrol flakonları, inokülasyon sonrasında günlük olarak test edilir. GI daki artış oranı veya bir önceki güne göre değişim miktarı (delta [Δ] GI olarak adlandırılır), kontrol flakonu ve ilaç içeren flakonlarla karşılaştırılır. İlaç flakonundaki günlük GI artışı kontrol flakonundakine eşit veya daha fazlaysa, test organizmalarının ilaca dirençli olduğu kabul edilir. Duyarlı bir popülasyonunda, kontrol için günlük GI artışı ilaç flakonundakinden daha yüksektir. Örneğin, mikobakteriyel popülasyonun %1 i isoniazide (INH) dirençliyse, organizmaların %99 u INH tarafından inhibe edilecek ve sadece %1 i ilaç flakonunda gelişebilecektir. İlaç flakonundaki gelişim oranı, ilaç flakonunun sadece 1/100 ü kadar orijinal bakteriyel inokulum içeren kontrol flakonundakine benzer olacaktır. REAKTİFLER BACTEC S.I.R.E. İlaç flakonları işlemden önce şu aktif bileşenleri içerir: Liyofilize antimikrobiyaller, her flakon: Streptomisin...1,2 mg Isoniazid...0,02 mg Rifampin...0,4 mg Etambutol...1,5 mg Uyarılar ve Önlemler: In vitro Diyagnostik Kullanım içindir. Bu ürün kuru doğal kauçuk içerir. Klinik örneklerde hepatit virüsleri ve İnsan İmmün Yetmezlik Virüsü de dahil olmak üzere patojenik mikroorganizmalar bulunabilir. Kan veya diğer vücut sıvılarıyla kontamine olan tüm öğelerle çalışılırken, Standard Precautions (Standart Önlemler) 2-5 ve kurumsal düzenlemeler takip edilmelidir. Kullanılmadan önce her flakon; hasar, kontaminasyon veya bozulma belirtileri açısından incelenmelidir. Kontaminasyon belirtisi gösteren flakonları KULLANMAYIN. Hasar belirtisi gösteren flakonlar atılmalıdır. Bazı durumlarda cam şişe çatlamış olabilir ve çevir-aç kapak çıkarılırken veya kullanım sırasında kırılabilir. 1

Pozitif 12B Ortamı kültür flakonlarını alt kültür hazırlama ve boyama işlemleri vs için örneklemeden önce, mikrobiyal metabolizma sonucu oluşabilecek gazın serbest bırakılması gerekir. Daima aseptik teknikler ve mikrobiyal tehlikelere karşı belirlenen önlemler uygulanmalıdır. Prosedürler, CDC tarafından önerilen şekilde, uygun bir havalandırma sistemi bulunan biyolojik güvenlik kabininde gerçekleştirilmelidir. 6 Örneklerle ve patojen içerme olasılığı bulunan kültürlerle çalışırken, uygun koruyucu önlük, maske ve eldivenleri kullanın. CDC ve OSHA önerilerini uygulayın. İnokülasyon sırasında gerçekleşebilecek sızıntıları en aza indirgemek için, kalıcı iğneleri veya uygun şekilde sabitlenmiş Luer-Lok uçları bulunan şırınga kullanın. Geleneksel duyarlılık testlerinde kullanılan ilaç konsantrasyonları laboratuvarlar arasında değişiklik gösterebilir. İki yöntemle elde edilen sonuçlar karşılaştırılacaksa, BACTEC duyarlılık testi için test ilacının eş değer konsantrasyonunun seçilmesi son derece önemlidir. Kültür ortamına test ilacından doğru miktarda eklenmesi duyarlılık testi için önemli bir adımdır. Saklama Talimatları BACTEC S.I.R.E. İlacı flakonları kuru ve güneş ışığı almayan serin bir yerde (2 8 C de) saklanmalıdır. Sulandırıldıktan sonra 2 8 C de en fazla 3 gün; -20 C veya daha düşük sıcaklıklarda dondurulmuş olarak ise altı aya kadar saklanabilir. Küçük alikotlar halinde dondurun. Tekrar dondurup çözündürmeyin. Son kullanma tarihi, önerilen şekilde saklanan açılmamış şişeler için geçerlidir. ÖRNEK TOPLAMA Duyarlılık testinde izole edilen saf, aktif olarak gelişen kültürler kullanılır. Ayrıntılı bilgi için 12B Ortamı Ambalajının Ekli Sayfasına (PP116JAA) ve BACTEC 460TB Sistemi Ürün ve Prosedür Kılavuzu na (MA-0029) bakın. PROSEDÜR Sağlanan Malzemeler: BACTEC S.I.R.E. İlaç Kiti. Gerekli Fakat Sağlanmamış Malzemeler: BACTEC 12B Ortamı, BACTEC 460TB Cihazı, BACTEC Seyreltim Sıvısı, 5 ml lik şırınga, destile / deiyonize su, kalıcı iğne takılı tüberkülin şırınga, dezenfektan çözeltisi, %70 izopropil alkol. Test Prosedürü BACTEC S.I.R.E. İlaçları (Streptomisin, İsoniazid, Rifampin ve Etambutol) liyofilize formda temin edilir. Standart prosedür ve ilaç konsantrasyonları uygulanmalıdır. 5 ml steril destile/deiyonize suyla sulandırıldıktan ve (uygun şekilde) seyreltildikten sonraki ilaç konsantrasyonları şu şekildedir: İlaç Sulandırılmış Seyreltim Faktörü Konsantrasyon/mL 12B Ortamına eklenen miktar 12B Ortamı/mL deki Son Konsantrasyon Streptomisin 5 ml 240 µg 0,1 ml 6,0 µg Streptomisin 5 ml 1:3 seyreltim 80 µg 0,1 ml 2,0 µg* Isoniazid 5 ml 4 µg 0,1 ml 0,1 µg* Rifampin 5 ml 80 µg 0,1 ml 2,0 µg* Etambutol 5 ml 300 µg 0,1 ml 7,5 µg Etambutol 5 ml 1:3 seyreltim 100 µg 0,1 ml 2,5 µg* *CDC tarafından önerilen kritik konsantrasyonlara denktir. Birincil ve ikincil ilaçlar için geleneksel ortama eşdeğer konsantrasyon örnekleri, BACTEC 460TB Ürünü ve Prosedür Kılavuzu nun Bölüm IV ünde bulunabilir. İstenen ilaç konsantrasyonunu (yukarıya bakın) elde etmek için seyreltim yapılması gerekiyorsa, steril destile/deiyonize suda aseptik olarak seyreltin. İyice çalkalayın. İlaç Ortamının Hazırlanması: Yeni hazırlanmış ilaç çözeltisini kullanın veya dondurulmuş stok ilaç çözeltisini çözündürün. 1 ml lik tek kullanımlık şırınga kullanarak, 4 ml lik BACTEC 12B Ortamı flakonuna tam olarak 0,1 ml ekleyin. Her ilaç için farklı bir şırınga kullanın. Şırıngada hava kabarcığı oluşmamasına ve şırınganın son 0,1 ml lik kısmının kullanılmamasına dikkat edilmelidir Testte kullanılan 12B Ortamı flakonlarının tümü BACTEC 460TB cihazında önceden test edilerek flakonda CO 2 atmosferi elde edilmeli ve GI değeri 20 veya daha yüksek olan flakonlar ayrılmalıdır. Bakteriyel İnokülumun Hazırlanması: Duyarlılık testinin gerçekleştirilmesi için 12B Ortamında veya katı besiyerinde aktif olarak gelişen M. tuberculosis kültürleri kullanılır. BACTEC 12B flakonu okunduğunda 10 sonucu veriyorsa, tekrar inkübe edin ve testi her gün tekrarlayın. Duyarlılık testini ne zaman gerçekleştirebileceğinizi görmek için aşağıdaki tabloya bakın. 2

GÜNLÜK OKUMA SONUCU EYLEM GI 300 499 Bir gün daha inkübe edin ve daha sonra testi gerçekleştirin. GI 500 799 Testi aynı gün gerçekleştirin. GI 800 1 ml seyreltim sıvısı kullanarak 1:2 oranında seyreltin ve testi gerçekleştirin. Duyarlılık testini ertelemeniz gerekiyorsa, 12B flakonunu buzdolabında saklayın. Bu durumda, duyarlılık testi bir hafta içinde gerçekleştirilmelidir. Ortamı kalıcı iğne takılı tek kullanımlık şırınga ile çekerek ve iğneyi flakonun septumundan çekmeden flakona birkaç kez boşaltarak homojen bir bakteriyel inokulum hazırlayın. Bu inokulum ilaç duyarlılık testi için doğrudan kullanılır. Katı Besiyeri Kültürü: Katı besiyerindeki birkaç koloniden oluşan homojenize bir süspansiyon hazırlayın. Kültür en fazla 4 5 haftalık olmalıdır. Günlük programı kullanıyorsanız, süspansiyonu McFarland No. 1,0 a; hafta sonunu içermeyen programı kullanıyorsanız 0,5 e ayarlayın. Kültürün canlılık durumu veya yaşı belirsizse, taze gelişim elde etmek için 12B Ortamında alt kültürünü hazırlayın. İnokülasyon: 12B Ortamı flakonlarını bir yuvaya yerleştirin ve uygun şekilde etiketleyin (genellikle kontrol, Streptomisin, İsoniazid, Rifampin, Etambutol). Her ilaç konsantrasyonu için bir falkona ve kontrol için de bir flakona ihtiyacınız olacaktır. (Karton nakil tablaları yuva olarak kullanılabilir.) Plastik eldiven takarak ve biyolojik güvenlik kabininde çalışarak, ilaç içeren her bir BACTEC 12B Ortamı flakonuna 0,1 ml bakteriyel süspansiyon inoküle edin. Bu inokülasyon işlemi için kalıcı iğne takılı tek kullanımlık tüberkülin şırınga kullanın. Kontrol flakonu için, süspansiyonu doğrudan inoküle etmeyin; ilk olarak 0,1 ml süspansiyonu 9,9 ml özel Seyreltim Sıvısına aktararak 1:100 oranında seyreltin. İyice karıştırıp, en az 10 kez ters çevirdikten sonra, bu seyreltimin 0,1mL sini kontrol 12B Ortamı flakonuna (ilaç içermeyen) inoküle edin. İnoküle edilen her flakonun kapağını uygun bir dezenfektana batırılan gazlı bezle swablayın ve daha sonra %70 alkol swabıyla temizleyin. 37 C ± 1 C de inkübe edin. Okuma Programı: Günlük Test Programı: Flakonları kontrol flakonundaki GI değeri 30 veya daha fazla olana kadar BACTEC 460TB de her gün yaklaşık olarak aynı saatte (± 2 saat) günlük olarak (hafta sonları ve tatiller de dahil olmak üzere) test edin. En az 4, en fazla 12 gün boyunca test edin. Bu test programını kullanarak, haftanın herhangi bir gününde ilaç duyarlılık testi gerçekleştirilebilir. Hafta sonunu Kapsamayan Program: Prosedür yukarıda açıklanan günlük test programıyla şu farklılıklar dışında aynıdır: 7 (a) Tüm pozitif kültürleri yığın olarak saklayın ve duyarlılık testlerini sadece Cuma günü gerçekleştirin. Daha önce açıklanan prosedürleri uygulayın. (b) Pozitif bir BACTEC flakonu kullanıldığında aşağıdaki tabloya bakın. Hafta sonunu atlayarak inoküle edilen flakonları test etmeye Pazartesi günü başlayın. Flakonlar en azından Pazartesi, Salı ve Çarşamba günleri (inokülasyon tarihinden itibaren en az 5 en fazla 12 gün) her gün yaklaşık olarak aynı saatte (± 2 h) test edilmelidir. Direkt İlaç Duyarlılık Testi: Smear örneğinin AFB sonucu pozitifse, genellikle 12B Ortamında ilaç duyarlılık testi gerçekleştirmek için yeterli mikobakter sayısına sahiptir. Prosedür indirekt duyarlılıktakiyle aynıdır. Prosedür farklılıkları şunlardır: Örnek işlendikten sonra, kültür ortamını inoküle edin ve AFB boyama için smear hazırlayın. Konsantre örneğin kalanını buzdolabında saklayın. AFB smear örneğini inceleyin. Ziehl-Neelsen veya florokrom yöntemiyle pozitif sonuç veriyorsa, duyarlılık testini aynı gün gerçekleştirin. İlaç içeren ve içermeyen (kontrol) flakonlarının tümüne BACTEC PANTA ekleyin. İlaç içeren flakonlara 0,1 ml iyice karıştırılmış konsantre örnek ekleyin. Konsantre örneği 1:10 oranında seyreltin ve kontrol flakonuna 0,1 ml inoküle edin. 37 C de inkübe edin ve flakonları BACTEC 460TB Sistemi cihazında en fazla 21 gün boyunca her 2 ila 3 günde bir test edin. Smear sonucu yüksek pozitif olan örnekler için günlük olarak test edin. Kontrolün GI değeri 20 veya daha fazla olduğunda sonuçları yorumlayın. Sonuçları indirekt duyarlılık testi ile doğrulayın. M. tuberculosis tanımlaması BACTEC NAP testi veya diğer testlerle doğrulandıktan sonra sonuçları raporlayın. Kalite Kontrolü Son kullanma tarihi geçen flakonları KULLANMAYIN. Herhangi bir çatlak veya hasar görülen flakonları KULLANMAYIN; flakonu uygun şekilde atın. Her S.I.R.E. İlacı Kitinde Kalite Kontrolü Sertifikaları bulunmaktadır. Kalite Kontrolü Sertifikalarında bu ürün tipi için kullanılan test organizmaları gösterilir. 3

Kullanıcı tüm flakonları kullanmadan önce bozulma belirtileri açısından incelemelidir. Bulanıklık, kontaminasyon veya renk değişimi (rengin koyulaşması) gözlenen flakonlar kullanılmamalıdır. Nemlendiği gözlenen (yumuşak görünümün kaybolması) S.I.R.E. İlaç flakonları kullanılmamalıdır. İlaçların performansı, duyarlılık testi her gerçekleştirildiğinde bir veya daha fazla kalite kontrol organizmasının duyarlılığı test edilerek kontrol edilebilir. ATCC No. Suş 27294 M. tuberculosis, H37Rv S.I.R.E. İlaçlarına Duyarlı 35820 M. tuberculosis, H37Rv Streptomisine dirençli 35822 M. tuberculosis, H37Rv Isoniazide dirençli 35837 M. tuberculosis, H37Rv Etambutole dirençli 35838 M. tuberculosis, H37Rv Rifampine dirençli ATCC 27294 H37Rv her zaman teste dahil edilmeli ve duyarlı sonuç vermelidir. Bu kültür herhangi bir ilaca direnç gösterirse veya herhangi bir kültürün duyarlılık testinin kontrolünde gelişme gözlenmezse (12 gün içinde) sonuçları raporlamayın. Testi tekrar edin. Günlük bakım programının bir parçası olarak, Performans Testi Flakonları (BACTEC Performans Testi Kiti) BACTEC cihazında test edilmelidir. Okuma sonuçlarının düşük olması, Performans Testi Flakonları doğru şekilde test edilmişse, olası cihaz sorunlarının göstergesi olabilir (BACTEC PTK ambalajının ek sayfasına, PP046JAA, bakın). Gerekli kalite kontroller ilgili yerel, devlet ve/veya federal düzenlemeler veya akreditasyon gerekliliklerine ve laboratuvarınızın standart Kalite Kontrol prosedürlerine uygun olarak gerçekleştirilmelidir. Kullanıcının, uygun Kalite Kontrol uygulamaları için ilgili CLSI (daha önceden NCCLS olan) yönergelerine ve CLIA düzenlemelerine uyması önerilir. SONUÇLARIN YORUMLANMASI Kontrol flakonu sonuçlarının GI değeri 30 veya daha yüksek olursa, sonuçlar aşağıdaki şekilde yorumlanmalıdır: ilaç flakonundaki ΔGI kontrolden düşükse, popülasyon duyarlıdır; yüksekse dirençlidir. ΔGI (Kontrol) > ΔGI (ilaç) duyarlı ΔGI (Kontrol) < ΔGI (ilaç) dirençli ΔGI (Kontrol) ΔGI (ilaç) sınır Aşağıdaki tabloda, katı besiyerinde gelişen ve BACTEC duyarlılık yöntemi kullanılarak test edilen M. tuberculosis den elde edilen veriler sunulmuştur. Benzer veriler başlangıçta 12B Ortamında gelişen M. tuberculosis için de elde edilmiştir. Ancak, inokulumda az sayıda hücre bulunması nedeniyle, başlangıç okuma sonuçları daha düşük olabilir. Günlük GI Okuma Sonuçları Gün Kontrol Streptomisin Isoniazid Rifampin Etambutol 1 5 40 50 38 76 2 11 20 100 19 100 3 24 12 250 10 100 4 65 14 500 12 91 ΔGI +41 +2 +250 +2-9 Sonuçlar Duyarlı Dirençli Duyarlı Duyarlı PROSEDÜRÜN KISITLI OLDUĞU ALANLAR İnokülumun hazırlanması sırasında gerçekleşen farklılıklar, özellikle de kontrol flakonunda büyük pıhtıların varlığı veya uygun olmayan 1:100 lük seyreltim, duyarlılık testi sonuçlarını etkileyebilir. Kontrol flakonundaki gelişim yetersizse, test tekrarlanmalıdır. Kontaminasyon BACTEC 12B flakonuna inokülasyon sırasında kontaminasyonu önlemek için özen gösterilmelidir. Kontamine olan bir örnek pozitif okuma sonucu verir, ancak geçerli bir klinik örnek değildir. Bu tür bir değerlendirme, geri kazanılan organizma türü, aynı organizmanın çoklu kültürlerde görülme sıklığı, hastanın klinik geçmişi, uygun ekipman kontrolleri gibi faktörlerin kullanıcı tarafından değerlendirilmesiyle gerçekleştirilebilir. Kontaminasyon BACTEC iğne ve tüplerine uygun olmayan şekilde bakım yapılmasından, septumun yetersiz şekilde temizlenmesinden veya BACTEC iğne ısıtma birimindeki bir arızadan da kaynaklanabilir (TB Aspiratörünün Kullanım ve Bakım Kılavuzuna bakın). Ortam ürünlerinde bulunan biyolojik materyallerin doğası ve mevcut organizma çeşitliliği nedeniyle, kullanıcı belirli organizmaların geri kazanımındaki olası değişken sonuçların farkında olmalıdır. 4

BEKLENEN DEĞERLER Popülasyon duyarlıysa, genellikle birkaç gün içinde Rifampin, Streptomisin ve İsoniazid için GI değerlerinde keskin bir düşüş görülür. Etambutolde ise, GI değerleri düşmeye başlamadan önce GI da genellikle küçük bir artış gözlenir. GI düşüş hızı, ilacın etkinlik oranına ve bakterinin duyarlılığına bağlıdır. Bir M. tuberculosis kültürü karışık bir duyarlı ve dirençli organizma popülasyonu içeriyorsa, zamana bağlı ΔGI değerleri duyarlı popülasyonun yüzdesine bağlı olarak değişir. Direkt duyarlılık testinin genel başarısı ve raporlanması için gereken süre smear örneğinin pozitivitesine bağlıdır. Ortalama 10 12 gün içinde geleneksel test sonuçlarıyla büyük oranda benzerlik gösteren sonuçlar alınabildiği raporlanmıştır. 8,9 PERFORMANS ÖZELLİKLERİ Yayınlanan çeşitli çalışmalarda, BACTEC duyarlılık testiyle elde edilen sonuçların geleneksel oran yöntemiyle (7H10/7H11 ortamları kullanılan) veya direnç oranı yöntemiyle (Lowenstein-Jensen yumurta ortamı kullanılan) karşılaştırılabildiği raporlanmıştır. 1,10-15 BACTEC duyarlılık yönteminin doğruluğu ve tekrarlanabilirliği de değerlendirilmiş ve genellikle 4 6 gün içinde sonuç alınabilmiştir. 16-20 Huang ve ark. tarafından gerçekleştirilen ve BACTEC 460TB Sisteminin oranlar yöntemiyle karşılaştırıldığı bir çalışmada şu sonuçlar elde edilmiştir: 21 Tablo 1. 47 M. tuberculosis izolatı kullanılarak BACTEC 460TB sistemiyle belirlenen antimikrobiyal duyarlılık testi sonuçlarının ve diyagnostik performans indislerinin agar seyreltim yöntemiyle karşılaştırılması. Belirli sonuçlara sahip izolat sayısı Diagnostik performans indisi İlaç, yöntem ve ilaç konsantrasyonug Her İkisi de S= Her İkisi de R= Agar S BACTEC R= Agar R BACTEC S= Özgünlük (%) Duyarlılık (%) STR BACTEC 2,0 µg/ml 36 9 0 2 100 81,8 INH BACTEC 0,1 µg/ml 16 29 1 1 94,1 96,7 RMP BACTEC 2,0 µg/ml 30 14 1 2 96,8 87,5 EMB BACTEC 2,0 µg/ml 35 2 4 6 89,7 25 G= Agar seyreltim yönteminde, ilaçlar aşağıdaki konsantrasyonlarda seyreltilmiştir: STR, 2 µg/ml; INH, 0,2 µg/ml; RMP, 1,0 µg/ml ve EMB, 5 µg/ml. S = duyarlı; R = dirençli. Bemer ve ark. tarafından gerçekleştirilen bir çalışmada BACTEC 460TB S.I.R.E. sistemi, BACTEC MGIT 960 S.I.R.E. sistemiyle karşılaştırılmıştır. Test edilen yüz on suş %93,5 oranında genel benzerlik göstermiştir. BACTEC 460TB S.I.R.E. için sonuç alma süreleri 4,0 ila 10,0 gündür; medyan 7,0 gündür. 22 Tablo 2. M. tuberculosis klinik suşlarının BACTEC MGIT 960 ve BACTEC 460TB sistemleriyle tespit edilen ilaç duyarlılık sonuçları. Şu aralıktaki sonuç sayısı Test Her iki MGIT 960 deki R; MGIT 960 deki S; Her iki sayısı= testteki S= 460TB deki S= 460TB deki R= testteki R INH (0,1) 110 81 4 25 96,4 INH (0,4) 29 5 3 21 89,7 RIF (2,0) 110 92 1 17 99,1 EMB (2,5) 110 93 3 1 13 96,4 EMB (7,5) 17 7 3 7 82,4 STR (2,0) 110 76 9 25 91,8 STR (6,0) 34 12 10 12 70,6 Toplam test 520 366 33 1 120 93,5 S, duyarlı; R, dirençli. İlaç (µg/ml cinsinden kons.) Benzerlik (%) Bergmann ve Woods tarafından gerçekleştirilen bir çalışmada BACTEC 460TB S.I.R.E. ilaçları olan etambutol ve streptomisin, oranlar yöntemiyle karşılaştırılmıştır. Sonuçlar aşağıdaki tabloda gösterilmiştir: 23 5

Tablo 3. BACTEC ve oran yöntemiyle elde edilen başlangıç etambutol ve streptomisin duyarlılık testi sonuçları. Şu aralıktaki sonuç sayısı İlaç BACTEC sistemi MOP İzolat sayısı Etambutol S S 63 R R 8 S R 3 Streptomisin S S 59 R R 14 R S 1 Kısaltmalar: MOP, oranlar yöntemi; S, duyarlı; R, dirençli. Başka bir çalışmada Bergmann ve Woods BACTEC 460TB S.I.R.E. ilaçları olan isoniazid ve streptomisini de incelemiş ve oranlar yöntemiyle karşılaştırmıştır: 24 Tablo 4. M. tuberculosis klinik izolatlarının oran yöntemi ve BACTEC 460TB ile elde edilen duyarlılık testi sonuçları. Şu sonuçlara sahip izolat sayısı a : İlaç ve sonuç MOP BACTEC 460TB Isoniazid (düşük b ) Duyarlı 16 16 Dirençli 4 4 Isoniazid (yüksek c ) Duyarlı 19 18 Dirençli 1 2 Rifampin Duyarlı 17 17 Dirençli 3 3 a MOP, oranlar yöntemi. b Düşük, oran yöntemi için 0,2 µg/ml ve BACTEC 460TB için 0,1 µg/ml. c Yüksek, oran yöntemi için 1,0 µg/ml ve BACTEC 460TB için 0,4 µg/ml. TİCARİ TAKDİM ŞEKLİ Kat. No. Açıklama 442102 BACTEC S.I.R.E. Drug Kit, 2 flakon liyofilize Streptomisin, 2 flakon liyofilize İsoniazid, 2 flakon liyofilize Rifampin, 2 flakon liyofilize Etambutol. 442146 BACTEC Isoniazid, 1 flakon liyofilize İsoniazid. 442004 BACTEC 12B Medium, 4 ml, 100/kutu. REFERANSLAR: 1. Canetti, G. et al. Advances in techniques of testing mycobacterial drug susceptibility, and the use of sensitivity test in tuberculosis programmes. Bull. W.H.O. 1969, 41:21-43. 2. National Commitee for Clinical Laboratory Standards. 2001. Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, PA. 3. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 4. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC) 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 5. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 6

6. Kent, P.T. et al. Public health mycobacteriology, a guide for the level III laboratory. Centers for Disease Control, Division of Laboratory Training and Consultation. Atlanta, GA, 1985. 7. Hawkins, J.E. Non-weekend schedule for BACTEC susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis. J. Clin. Microbiol. 23:934-937, 1986. 8. Libonati, J.P. et al. Identification and direct drug susceptibility testing of mycobacteria by the radiometric method. Abstract C300, A.S.M. Annual Meeting, St. Louis, MO, 1984. 9. Stager, C.E. et al. Identification and susceptibility testing of M. tuberculosis by direct inoculation of smearpositive specimens into BACTEC 12A media. Abstract, C301, A.S.M. Annual Meeting, St. Louis, MO, 1984. 10. Bannister, E.R. et al. Comparison of detection, identification and drug susceptibility testing of mycobacteria by using the BACTEC radiometric method and conventional methods. Abstract C260, A.S.M. Annual Meeting, Las Vegas, 1985. 11. Roberts, G.D. et al. Evaluation of BACTEC radiometric method for recovery of mycobacteria and drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis from acid-fast smear-positive specimens. J. Clin. Microbiol. 18:689-696, 1983. 12. Siddiqi, S.H. et al. Evaluation of a rapid radiometric method for drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis. J. Clin. Microbiol. 1981, 13:908-912. 13. Siddiqi, S.H. et al. Interlaboratory drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis by a radiometric procedure and two conventional methods. J. Clin. Microbiol. 1985, 22:919-923. 14. Vincke, G. et al. Rapid susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis by a radiometric technique. J. Antimicrobiol. Chemother. 1982, 10:351-354. 15. Snider, Jr., D.E. et al. Rapid drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis. Am. Rev. Respir. Dis. 123:402-406, 1981. 16. Good, R.C. et al. Reproducibility of drug susceptibility tests with M. tuberculosis. Abstract U5, A.S.M. Annual Meeting, St. Louis, MO, 1984. 17. Siddiqi, S.H. et al. Accuracy and reproducibility of the BACTEC drug susceptibility testing of M. tuberculosis. Abstract 1041, I.C.A.A.C. Annual Meeting, Las Vegas, NV, 1983. 18. Terrand, J.J. et al. Evaluation of the BACTEC radiometric method for detection of 1% resistant populations of Mycobacterium tuberculosis. J. Clin. Microbiol. 1985, 21:941-946. 19. Woodley, C.L. Evaluation of streptomycin and ethambutol concentrations for susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis by radiometric and conventional procedures. J. Clin. Microbiol. 1986, 23:385-386. 20. Heifets, L.B. "Drug susceptibility in the chemotherapy of mycobacterial infection." C.R.C. Press, Inc., Boca Raton, FL, 1991. 21. Huang, T., H. Tu, S. Lee, W. Huang and Y. Liu. 2002 Antimicrobial susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis to first-line drugs: comparisons of the MGIT 960 and BACTEC 460 systems. Ann. Clini. Lab. Sci. 32:142-147. 22. Bemer, P., F., Palicova, S., Rüsch-Gerdes, H., Drugeon, and G., Pfyffer, 2002. Multicenter evaluation of fully automated BACTEC Mycobacteria Growth Indicator Tube 960 System for susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis. J. Clin. Microbiol. 40:150-154. 23. Bergmann, J.S., and G.L. Woods. 1997. Reliability of mycobacteria growth indicator tube for testing susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to ethambutol and streptomycin. J. Clin. Microbiol. 35:3325-3327. 24. Bergmann, J.S., and G.L. Woods. 1998. Evaluation of the ESP culture system II for testing susceptibilities of Mycobacterium tuberculosis isolates to four primary antituberculosis drugs. J. Clin. Microbiol. 36:2940-2943. 7

Use by / Spotøebujte do / Anvendes før / Houdbaar tot / Kasutada enne / Viimeinkäyttöpäivä / A utiliser avant / Verwendbar bis / Çìåñïìçßá ëþîçò / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Naudokite iki / Brukes før / Stosowaæ do / Utilizar em / Použite do / Usar antes de / Använd före / Използвайте до / A se utiliza pânã la / Son kullanma tarihi / YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec mìsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) / JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) VVVV-KK-PP / VVVV-KK (kuukauden loppuun mennessä) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) / JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) / ÅÅÅÅ-ÌÌ-ÇÇ / ÅÅÅÅ-ÌÌ (ÌÌ = ôýëïò ôïõ ìþvá) / ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) / MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mënesio pabaiga) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesi¹ca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) aaaa-mm-dd / aaaa-mm (mm = fin del mes) / ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet på månaden) / ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) AAAA-LL-ZZ / AAAA-LL (LL = sfârºitul lunii) YYYY-AA-GG / YYYY-AA (AA = ayın sonu) Authorized Representative in the European Community / Autorizovaný zástupce pro Evropskou unii / Autoriseret repræsentant i EU / Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Valtuutettu edustaja Euroopan yhteisössä / Représentant agréé pour la C.E.E. / Autorisierte EG-Vertretung / ÅîïõóéïäïôçìÝíïò áíôéðñüóùðïò óôçí ÅõñùðáúêÞ Êïéíüôçôá / Hivatalos képviselet az Európai Unióban / Rappresentante autorizzato nella Comunità europea / Ágaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej / Representante autorizado na União Europeia / Autorizovaný zástupca v Európskom spoloèenstve / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Auktoriserad representant i EU / Оторизиран представител в ЕС / Reprezentant autorizat în Comunitatea Europeanã / Avrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi Manufacturer / Výrobce / Producent / Fabrikant / Tootja / Valmistaja / Fabricant / Hersteller / ÊáôáóêåõáóôÞò / Gyártó / Ditta produttrice / Gamintojas / Producent / Fabricante / Výrobca / Tillverkare / Производител / Producãtor / Üretici Batch Code (Lot) / Kód (èíslo) šarže / Batch kode (Lot) / Chargenummer (lot) / Partii kood / Eräkoodi (LOT) / Code de lot (Lot) / Chargencode (Chargenbezeichnung) / Êùäéêüò ðáñôßäáò (Ðáñôßäá) / Tétel száma (Lot) / Codice del lotto (partita) / Partijos numeris (Lot) / Batch-kode (Serie) / Kod partii (seria) / Código do lote (Lote) / Kód série (šarža) / Código de lote (Lote) / Satskod (parti) / Код (Партида) / Numãr lot (Lotul) / Parti Kodu (Lot) In Vitro Diagnostic Medical Device / Lékaøské zaøízení urèené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Lääkinnällinen in vitro -diagnostiikkalaite / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medizinisches In-vitro- Diagnostikum / In vitro äéáãíùóôéêþ éáôñéêþ óõóêåõþ / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medico diagnostico in vitro. / In vitro diagnostikos prietaisas / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urz¹dzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Dispositivo médico de diagnóstico in vitro / Medicinsk anordning för in vitro-diagnostik / Медицински уред за диагностика ин витро / Aparaturã medicalã de diagnosticare in vitro / In Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz Temperature limitation / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperatuurlimiet / Temperatuuri piirang / Lämpötilarajoitus / Température limite / Zulässiger Temperaturenbereich / ¼ñéï èåñìïêñáóßáò / Hõmérsékleti határ / Temperatura limite / Laikymo temperatûra / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limitação da temperatura / Ohranièenie teploty / Limitación de temperatura / Temperaturbegränsning / Температурни ограничения / Limitare de temperaturã / Sıcaklık sınırlaması Catalog number / Katalogové èíslo / Katalognummer / Catalogusnummer / Kataloogi number / Tuotenumero / Numéro catalogue / Bestellnummer / Áñéèìüò êáôáëüãïõ / Katalógusszám / Numero di catalogo / Katalogo numeris / Numer katalogowy / Número do catálogo / Katalógové èíslo / Número de catálogo / Каталожен номер / Numãr de catalog / Katalog numarası Consult Instructions for Use / Prostudujte pokyny k použití / Læs brugsanvisningen / Raadpleeg gebruiksaanwijzing / Lugeda kasutusjuhendit / Tarkista käyttöohjeista / Consulter la notice d emploi / Gebrauchsanweisung beachten / Óõìâïõëåõôåßôå ôéò ïäçãßåò ñþóçò / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l'uso / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja u ytkowania / Consulte as instruções de utilização / Pozri Pokyny na používanie / Consultar las instrucciones de uso / Se bruksanvisningen / Направете справка в инструкциите за употреба / Consultaþi instrucþiunile de utilizare / Kullanım Talimatları'na başvurun Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland 21152 USA 800-638-8663 BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon, County Clare, Ireland Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46 ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, BACTEC, MGIT, PANTA and Luer-Lok are trademarks of Becton, Dickinson and Company. 2007 BD. 8