ÜREAZ. HAZIRLAYANLAR: Muhammed BEKTAŞ ( ) İlyas Ramazan KARATAŞ ( ) Sedat SARICA ( )

Transkript

1 ÜREAZ HAZIRLAYANLAR: Muhammed BEKTAŞ ( ) İlyas ÇELİK ( ) Ramazan KARATAŞ ( ) Sedat SARICA ( ) Prof. Dr. Figen ERKOÇ Gazi Eğitim Fakültesi GAZİ ÜNİVERSİTESİ

2 Ürenin yapısal formülü

3 Üreaz enziminin moleküler yapısı

4 1926 yılında y James B. Summer,ilk kez üreaz enziminin kristallerini elde ederek, molekülün n büyük b bir kısmk smının n protein olduğunu unu göstermig stermiştir. tir. Bağı ğırsak bakterileri tarafından salınır. En çok bilinen örnek Helicobacter pylori dir dir. Üreaz enzimi ph 4-10 arası aktifdir. Optimum ph : 7.4 Özgül l enzimdir. Sadece üreye etki eder.

5 Üreyi amonyak ve karbondioksite hidrolize eden üreaz, bakteriyel lümen l metabolizmasında kritik öneme sahip nikel bağı ğımlı bir enzimdir. Üreaz enzimi varlığı ığında ortamdaki üre amonyak ve bikarbonata dönüşerek ortamın ph sını yükseltir. ph nın yükselmesi portal kana amonyak absorbsiyonunu hızlandırmakta, ph nın düşüşü ise absorbsiyonu azaltmaktadır. Ayrıca bu bazik ortam negatif feed-back etkiyi ortadan kaldırarak, G hücrelerinden h Gastrin salınmas nmasını uyarır r ve artan asit sekresyonu ile gastrit oluşumuna umuna katkıda bulunur.

6 Günlük k olarak üretilen toplam ürenin yaklaşı şık k % i i bu yolla hidrolize edilir. H. Pylori midede antruma yerleşerek erek yaşar ar ve mukus içerisinde koloniler yapar. Üreaz enzimi ile üreyi amonyağa çevirip, çevresinde bazik bir ortam oluşturmak suretiyle kendisini mide asidinin zararlı etkisinden korur. NH2CONH CONH2 CO2+2NH3 H2CO3+2NH3

7 Üreaz ın etki mekanizması NH2 üreaz C O + 2H2O O 2NH3+ + CO +H2O CO2- +H NH2 (Üre) solunumla CO2çıkması H2CO3+2NH3

8 The urea cycle ng&width=800&s=600x600

9 H. pylori,, salgılad ladığı üreaz enzimiyle CO 2 ve NH 4 oluşturur. Bu, bakteriyi mide sıvısıs içindeki indeki düşük d ph dan korur. Öte yandan NH3,, mide epitel hücreleri için i in toksiktir; ; hücreler h arası tutunmayı azaltır r ve etkenin salgılad ladığı sitotoksinlerin etkisini artırır. r. Gastrit oluşumu, umu, özellikle de bu oluşumun umun kronikleşmesi, ülser oluşumunu umunu provake eder.

10 (Klebsiella aerogenes bakterisindeki üreaz enzimi) (Bacillus pasteurii bakterisindeki üreaz enzimi) (Helicobacter pylori bakterisindeki üreaz enzimi) Bakteri üreazlarının yapılarındaki benzerlikler (H: alfa kıvrımları, S: beta tabakası) C. Follmer / Phytochemistry 69 (2008) 18 28

11 Klebsiella aerogenes bakterisindeki üreaz enziminin aktif bölgeleri. b Buradaki yapılar: His134,His136, His246, His272, Lys217 ve Asp360. His246 ve His272 ve bir su molekülü nikel 1`e bağlı iken; His134, His136, Asp360 ve bir su molekülü de nikel 2`e bağlı oluyor. C. Follmer / Phytochemistry 69 (2008) 18 28

12 Nikel yüksek bitkilerde üreaz ve hidrogenaz gibi önemli enzimlerin yapısında ve aktivitesinde yer alır, nitrojen metabolizması için gereksinim duyulan bir metaldir. Fasulye, domates, biber, maydanoz, patates ve buğday gibi bir çok bitkinin büyüme-gelişmesi ile verimi üzerine olumlu etkileri tespit edilmiştir. Nikel bitki kökleri tarafından kolayca absorbe edilip yüksek konsantrasyonlarında kök büyümesini ve sürgün gelişimini sınırlamaktadır.

13 Helicobacter pylori nin Mikrobiyolojik teşhisit Hızlı üreaz testi Endoskopi sırasında alınan antral biyopsi örneklerine uygulanan hızlı üreaz testi hem ucuz hem de kolay bir tekniktir. Helicobacter pylori üreaz aktivitesi ile ortamdaki üreyi amonyak ve bikarbonat a parçalar alar ve ortamın ph sını yükselterek ph indikatörü ile ortamın rengini değiştirir tirir. Pozitif sonuçlar ların %90 ı ilk yarım saatte görülür ve geri kalanlar da ertesi gün okunmay mayı gerektirir. Ticari veya laboratuvarda hazırlanm rlanmış hızlı üreaz testleri bulunmaktadır.

14 Üre nefes testi Bu testte oral yoldan C 13 veya C 14 (radyoaktif karbon) işaretli üre alımını takiben,, dakika sonra teneffüs edilen hava örnekleri toplanır ır.. Örnekler daha sonra spektrometrik olarak veya sintillasyon cihazlarında radyoaktivite bakımından sayılmaktad lmaktadır. İşaretli aretli üre H. pylori ile infekte kişilerde ilerde, bakterinin üreaz enzimi ile parçalan alanır. Oluşan CO 2 solunum havasında tespit edilir. Duyarlılığı ığı ve özgüllüğü çok yüksektir. Test, yalancı negatif sonuçlardan kaçınmak üzere antibiyotik veya omeprazol tedavisi sırasında uygulanmamalı, tedavi bitiminden en az bir ay sonra uygulanmalıdır.

15 Helicobacter pylori infeksiyonunun varlığı ığını göstermek içinin kullanılan lan testler Test Duyarlılık (%) Özgüllük (%) Histoloji Endoskopi gerekliliği Evet (%) gereklili 98 Evet Yorum Çok sayıda antral biyopsi örneği gerekir, özel boyalarduyarlılığı ığı arttırır. Kültür Evet Hızlı üreaz testi Evet C 13 -UBT* Hayır Antibiyotik duyarlılık testleri içinin ve ayrınt ntılı tiplendirme içinin gerekir. Endoskopik işlem sırasında tanı içinin kullanılır. Canlı bakteri ve infeksiyon varlığı ığını gösterir, tedavi takibinde yararlıdır. C -UBT** Hayır C -UBT ile benzer mekanizma, düşük dozda radyoaktif madde alınımı var, kısa dönemde antibiyotik tedavisinin takibinde kullanılmaz lmaz, epidemiyolojik çalışmalar içinin idealdir. Seroloji Hayır Kısa dönemde antibiyotik tedavisinin takibinde kullanılmaz lmaz, epidemiyolojik çalışmalar içinin idealdir. PCR yöntemleri Evet (biyopsi) H. pylori DNA sının varlığı ığını gösterir, ancak ölü Hayır (tükürük) bakterilerde pozitif sonuç verir, H. pylori suşlar larının farklılığı ığını belirlemede kullanılır. Dışkı antijen Hayır testleri (monoklonal) İnvaziv olmaması bir avantajdır. * Üre soluk testi (UBT-Urea Urea Breath Test). Karbon 13 ile işaretlenmiş üre. ** Üre soluk testi (UBT-Urea Urea Breath Test). Karbon 14 ile işaretlenmiş üre.

16 REFERANSLAR Yılmaz,, Y.A. (2004). Helicobacter pylori: mikrobiyolojik tanı Yöntemleri, Hacettepe Tıp Dergisi, 35: : / %20.pdf

17 Follmer,, G. (2008). Insights into the role and structure of plant ureases. Phytochemistry 69, geoweb.princeton.edu/.edu/research/biocomplexity/collier.html brenda- enzymes.org/.org/php/result_flat.php4?ecno= & = &Suchword=urur eas&organism organism%5b%5d=& %5B%5D=&show_tm=0