Tuz Stresi Altındaki Mitotik İndeks ve Kromozom Anormallikleri Üzerine Triakontanol Ön Uygulamasının Etkileri

Transkript

1 Biyoloji Bilimleri Araştırma Dergisi 1 (1): 11-15, 2008 ISSN: , Tuz Stresi Altındaki Mitotik İndeks ve Kromozom Anormallikleri Üzerine Triakontanol Ön Uygulamasının Etkileri Selma TABUR *, Kıymet DEMİR Süleyman Demirel Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyoloji Bölümü, Isparta/TÜRKİYE * Sorumlu Yazar Geliş Tarihi: 15 Nisan 2008 e-posta: taburs@gmail.com Kabul Tarihi: 05 Şubat 2008 Özet Bu çalışmada tuzlu koşullar altında çimlendirilen arpa (Hordeum vulgare L. cv. Bülbül 89 ) tohumlarının kök uçlarında mitotik indeks ve kromozom davranışları üzerine triakontanol () ön uygulamasının etkileri araştırılmıştır. Konsantrasyon artışına paralel olarak tuzun, önemli derecede mitotik indeksi azalttığı ve kromozom anormalliklerine sebep olduğu gözlenmiştir. ön uygulanası tuz stresinin mitotik indeks üzerindeki engelleyici etkisini hafifletmekte başarılı olamamasına karşın, kromozom anormalliklerinin büyük ölçüde azaltmıştır. Elde edilen veriler istatistiksel açıdan değerlendirilmiştir. Anahtar Kelimeler: Arpa, kromozom anormallikleri, mitotik indeks, triacontanol, tuz stresi. Effects of Triacontanol Pretreatment on Mitotic Index and Chromosome Abnormalities under Salt Stress Abstract In this study, effects of triacontanol () pretreatment on mitotic index and chromosome abnormalities in root tips of barley seeds (Hordeum vulgare L. cv. Bülbül 89 ) germinated under salinity conditions were investigated. It was observed that salt significantly decreased mitotic index and caused chromosome abnormalities, in parallel with concentration rise. Although pretreatment were unsuccessful to alleviate the preventive effect of salt stress on the mitotic index, it reduced chromosome abnormalities on a large scale. The data obtained were evaluated statistically. Key Words: Barley, chromosome abnormalities, mitotic index, triacontanol, salt stress. GİRİŞ Çeşitli çevresel streslerin hücre bölünmesi ve mitotik indeks üzerinde önemli derecede azalmaya ve kromozom anormalliklerine yol açtığı bilinmektedir [1]. Çevresel streslerin en önemlilerinden biri olan tuzluluk, kurak ve yarı kurak iklim bölgelerinde, tarımsal üretimin başladığı çağlardan beri üreticiler için büyük bir sorun olmuştur. Dünya genelinde yağışların yıldan yıla azalması ve her yıl 10 milyon hektar arazinin tuzlanma nedeni ile elden çıkması, sorunun boyutunu daha iyi gözler önüne sermektedir [2]. Tuzlu topraklar çeşitli tuz tipleri içermektedir ve bunların her biri bitki büyüme ve gelişmesi üzerinde farklı derecede etkili olmaktadır. Sodyum klorür (NaCl) ise en yaygın rastlanılan ve çözünürlüğünün çok yüksek olmasından dolayı toksik etkisi en fazla olan tuz tipidir [3, 4, 5]. Tuzun, tohum çimlenmesi [6, 7, 8, 9], fide büyümesi [9, 10, 11], enzim aktivasyonu [12], DNA, RNA ve protein sentezi [13] ve mitoz bölünmeyi [14] engellemek suretiyle bitki büyüme ve gelişmesi üzerinde olumsuz etki yaptığı bilinmektedir yılında bulunup [15] ancak 1970 lerin [16] sonlarına doğru kimyasal özellikleri tanımlanmaya başlayan ün mısır, çeltik ve ayçiçeği tohumlarının normal koşullar altındaki çimlenmesini konsantrasyonuna bağlı olarak teşvik ettiğinin ileri sürülmesine karşılık [17] marul tohumlarını çimlenmesini engellediği de rapor edilmiştir [18]. Birçok araştırıcı ün bitki büyüme ve gelişmesi üzerinde engelleyici veya teşvik edici rol oynadığı konusunda henüz bir fikir birliğine varamamışlardır [19, 20]. Yapılan literatür taraması sonucunda ün tuzlu koşullar altındaki mitotik indeks ve kromozom anormallikleri üzerindeki rolü ile ilgili bir bilgiye rastlanmamıştır. Bu çalışmada, tuz stresinin mitotik indeks ve kromozom anormallikleri üzerindeki olumsuz etkisinin, ün tohumlara çimlenme öncesinde uygulanmasıyla ne derece etkili olabileceğini açıklığa kavuşturmak amaçlanmıştır. MATERYAL VE METOT Deneylerde kullanılan arpa (Hordeum vulgare L. cv. Bülbül 89 ) tohumları Ankara Tarla Bitkileri Araştırma Enstitüsü Müdürlüğü nden sağlanmıştır. Çimlendirme deneyleri sabit sıcaklıkta (20 C), sürekli karanlıkta ve etüvde yapılmıştır. Yeterli sayıda, dolgun görünüşlü, sağlam ve az çok benzer büyüklükte olan arpa tohumları seçilerek, 50 ml hacimdeki saf su (kontrol, K) ve 10 μm lık de 24 saat oda sıcaklığında ön uygulamaya tabi tutulmuşlardır. Bu ön uygulama sonunda çözeltiler süzülüp tohumlar vakumda kurutulmuştur [21]. Her uygulamaya ait tohumlar, tabanı, iki tabaka filtre kağıdı ile kaplı ve 7 ml çeşitli konsantrasyonlarda NaCl ( m) çözeltileri içeren, önceden otoklavda sterilize edilmiş petriler içine hilumları altta olacak şekilde düzenli olarak dizilmiştir. Daha sonra bu petriler 20 C ye ayarlı etüve çimlenmek üzere yerleştirilmiştir.

2 12 S. Tabur ve K. Demir / Bibad, 1 (1): 11-15, 2008 Çimlendirilen tohumlardan çıkan ve 1-1,5 cm uzunluğa ulaşan kök uçları kesilerek paradiklorbenzen ile ilk işleme tabi tutulmuş ve asetik alkol (1:3) tespit çözeltisinde 24 saat bekletilmiştir. Tespit işleminden sonra kök uçları preparat hazırlanması ve incelenmesi aşamalarında kullanılmak üzere % 70 lik alkol içerisinde buzdolabında (4 C) depolanmıştır. Alkolden çıkarılan kök uçları birkaç kez musluk suyu ile yıkanmış ve 1 N HCl içerisinde 60 ºC ye ayarlanmış etüvde, gruplara göre değişen sürelerde (15-18 dk) sıcak hidroliz yapılmıştır. Ayrıca yüksek tuz konsantrasyon grupları için 26 o C de, 5 N HCl kullanılarak soğuk hidroliz yapılmıştır [22]. Hidroliz işlemi sonrası kök uçları 1-1,5 saat kadar Feulgen ile boyanmıştır. Boyanan kök uçlarından ezme preparatlar hazırlanarak alkol buharı değiş-tokuş yöntemi ile devamlı hale getirilmişlerdir [23]. Hazırlanan preparatlar mikroskopta 100X büyütmede incelenmiş ve her konsantrasyon ve uygulama için 3 tekrar yapılarak yaklaşık hücre sayılmıştır. Daha sonra mitoz bölünmedeki hücreler sayılıp mitotik indeks ve kromozom anormallik yüzdeleri belirlenmiştir. Tüm parametrelerle ilgili istatistiksel değerlendirme SPSS 14.0 programı kullanılarak Duncan s multiple range testine göre gerçekleştirilmiştir. BULGULAR Normal ve tuzlu koşullarda ün mitotik indeks üzerine etkileri 10 μm, saf su ortamında çimlendirilen arpa tohumlarının mitotik indeksi üzerinde, kontrole (K) göre engelleyici bir etki göstermiştir. Diğer bir ifadeyle; kontrol tohumlarının mitotik indeksinin (0.16), ön uygulamalı (0.04) tohumlara göre daha yüksek olduğu tespit edilmiştir. Tuzlu koşullarda yapılan deneyler sonucunda ise; tuzun, konsantrasyon artışına paralel olarak, kontrol ve uygulama gruplarında arpa tohumlarının mitotik indeksini azalttığı görülmüştür. Örneğin; saf su ortamında çimlendirilen arpa tohumlarının mitotik indeksi 0.16 iken, 0.30 m tuzlulukta bu değer, 0.06; 0.35 m da 0.03; 0.40 m da 0.02 olmuştur ve 0.40 m da ön uygulaması tuz stresinin mitotik indeks üzerindeki olumsuz etkisini hafifletmede başarılı olamamıştır (Çizelge 1). Normal ve tuzlu koşullarda ün kromozom davranışlarına etkileri Saf su ortamında çimlendirilen kontrol grubu arpa tohumlarının kromozom yapılarında herhangi bir anormalliğe rastlanılmamasına karşın (Şekil 1 a- d), çalışılan ön uygulamasında çeşitli tiplerde kromozom anormallikleri tespit edilmiştir (Şekil 1 e- j). Çizelge 1. Ön Uygulamasından Sonra 20 C de Saf Su ve Çeşitli Konsantrasyonlardaki (m) NaCl lü Ortamda Çimlendirilen Arpa Tohumlarındaki Mitotik İndeks Değerleri ve Kromozom Anormallik Yüzdeleri. NaCl (m) Büyüme Düzenleyisi Mitotik İndeks Kromozom Anormallikleri (%) 0.16±0.02 d 0.0±0.0 a 0.04±0.0 bc 1.78±0.01 f 0.06±0.0 c 1.33±0.0 d 0.03±0.0 ab 0.50±0.0 b 0.03±0.01 ab 1.57±0.0 e 0.02±0.01 ab 1.23±0.0 c 0.02±0.0 a 3.90±0.0 g - - *Her bir parametre sütununda aynı harfle gösterilen değerler arasındaki fark (p < 0,05) düzeyinde önemsizdir. - işaretli tuz konsantrasyonlarında çimlenme gerçekleşmediğinden çalışılmamıştır. Tuzlu koşullarda yapılan deneyler sonucunda ise; tuzun, konsantrasyon artışına paralel olarak kromozom anormallik yüzdesinde artışa neden olduğu tespit edilmiştir. tohumlarında, 0.30 m tuzlulukta 1.33, 0.35 m tuzlulukta 1.57 ve 0.40 m tuzlulukta 3.90 oranında kromozom anormalliği belirlenmiştir. Bununla birlikte; ön uygulaması, 0.30 m ve 0.35 m tuz konsantrasyonlarında tuzun kromozom anormalliklerini artırıcı yöndeki olumsuz etkisini hafifletmede başarılı olmuşlardır. Ancak ön uygulamasından sonra 0.40 m tuz konsantrasyonundaki tohumlar, çimlenme gerçekleşmediğinden çalışılamamıştır (Çizelge 1). Gerek çalışılan tuz seviyelerinde gerekse ön uygulamasında rastlanılan kromozom anormalliklerinin çoğu; mikronükleus, düzensiz metafaz, düzensiz anafaz, anafazda kromozom köprüleri, telofazda yanlış kutuplaşma şeklindedir (Şekil 1 e-j). TARTIŞMA VE SONUÇ Bu çalışmada, ün gerek normal gerekse tuz stresi koşullarındaki tohum çimlenmesi esnasında mitotik indeks ve kromozom anormallikleri üzerine etkileri araştırılmıştır. Stresin bulunmadığı normal koşullarda tohum çimlenmesinde dışarıdan herhangi bir büyüme düzenleyicisi tatbikine ihtiyaç yoktur. Ancak ün gerek stresli ve gerekse stressiz koşullarda tohum çimlenmesi ve dolaylı olarak mitotik indeks ve kromozom anormallikleri üzerine oynadığı roller hemen hemen hiç çalışılmamıştır. Bu nedenle tuz stresi koşullarındaki mitotik indeks ve kromozom anormallikleri araştırmalarına geçmeden önce optimum sıcaklık ve saf su ortamında ün adı geçen parametreler üzerine etkilerinin araştırılması uygun görülmüştür.

3 S. Tabur ve K. Demir / Bibad, 1 (1): 11-15, Stressiz koşullarda ün mitotik indeks ve kromozom davranışlarına etkisi Bulgular bölümünde de görüldüğü gibi ile muamele edilmemiş (kontrol, K) arpa tohumlarının mitotik indeks değeri 0.16 iken, 0.04 mitotik indeks değeri ile ön uygulaması kontrol tohumlarının ulaştığı bu değere ulaşmayı başaramamıştır (Bkz. Çizelge 1). Diğer yandan yapılan sitolojik incelemeler sonucunda, saf su ortamında çimlendirilen arpa tohumlarında kromozom anormallikleri gözlenmemesine karşın (0.00), ön uygulamalı tohumlarda oldukça yüksek bir oranda (1.78) ve çeşitli tiplerde kromozom anormalliklerine rastlanılmıştır (Bkz. Çizelge 1; Şekil 1). Bu durum dışarıdan stimülatör büyüme düzenleyicisi uygulamalarının stresin olmadığı normal koşullarda faydasız ve hatta olumsuz etkilere yol açabileceğini kanıtlamaktadır. GA 3, Kin, BA gibi büyüme düzenleyicilerinin hücre bölünmesindeki rolleri herkes tarafından bilinmesine karşın, yapılan literatür araştırmalarında ün hücre bölünmesi üzerine etkileri ile ilgili çalışmaların yetersiz olduğu görülmüştür. Dışarıdan gibberellin [24], sitokinin [25] ve triakontanol [26] uygulamalarının normal koşullar altındaki tohum çimlenmesi esnasında hücre bölünmesini ve dolayısıyla mitotik indeksi teşvik ettikleri rapor edilmiştir. Direkt mitotik indeks ve kromozom anormallikleri ile ilgili olmamakla birlikte, ile ilgili literatürlerde farklı raporlar vardır. Bazı araştırıcılar ün tohum çimlenmesini konsantrasyona bağlı olarak teşvik ettiğini [17] bazıları engellediğini [9, 18] ve bazıları da etkisiz kaldığını [27] ileri sürmektedirler. ün kromozom davranışları üzerine etkileri ile ilgili olarak herhangi bir çalışmaya rastlanmamıştır. Ancak bu çalışmada; ön uygulamalı tohumların mikronükleus, düzensiz metafaz, düzensiz anafaz, anafazda kromozom köprüleri, telofazda yanlış kutuplaşma gibi birçok anormallik gösterdiği tespit edilmiştir (Bkz. Şekil 1). Stresli koşullarda ün mitotik indeks ve kromozom davranışlarına etkisi Toprak tuzluluğu, bitki büyüme ve gelişimini olumsuz yönde etkilemektedir. Dünya tarım alanlarının yaklaşık % 20 si tuzlanma tehlikesi altındadır [28]. Tuzlu koşullarda genellikle çimlenme engellenmekte, büyüme hızı yavaşlamakta ve verim azalmaktadır. Bazı durumlarda bitki, hayat devresini tamamlayamadan ölmektedir. Bu konuyla ilgili günümüze kadar pek çok araştırma yapılmış, ancak tuzluluğun etki mekanizması tam olarak açıklığa kavuşturulamamıştır [29, 30]. Yaptığımız çalışmada da görüldüğü gibi tuzluluk, konsantrasyona artışına bağlı olarak arpa tohumlarının mitotik indeksini azaltmıştır (Bkz. Çizelge 1). Tuzun mitotik indeksi engelleyici etkisi herkes tarafından bilinen bir gerçektir [31, 32]. Tuzun bilinen, mitoz bölünmeyi engelleyici etkisi [14] bu çalışma ile bir kez daha doğrulanmıştır. Tuz, hücre bölünmesi üzerindeki engelleyici etkisini doğrudan yapabileceği gibi, bu etkiyi arpa tohumlarında yol açtığı içsel absisik asit (ABA) artışı kanalı ile de gerçekleştirebilir [33, 34]. ün, tuz stresinin mitotik indeks üzerindeki inhibisyonunu hafifletmede yeterince başarılı olamadığı tespit edilmiştir (Bkz. Çizelge 1). Mitotik indeks üzerindeki tuz engellemesini yenemeyen, çimlenme üzerindeki tuz engelini başka yollarla; örneğin tuzun ozmotik etkisini yenerek [35] veya tuzun, hücre uzamasını engelleyici etkisini yenerek [36] başarılı olmuş olabilir. ün bu başarısızlığı, tohum çimlenmesi üzerindeki tuz stresinin yenilmesinde kullanılacak her stimülatörün başarılı olamayabileceğini, bu nedenle uygulanacak stimülatörün ve konsantrasyonun ön çalışmalarla Şekil 1. Normal Mitoz Safhaları ve Ön Uygulamalarından Sonra 20 C de Saf Su ve Çeşitli Konsantrasyonlardaki NaCl lü Ortamda Çimlendirilen Arpa Tohumlarındaki Kromozom Anormallikleri, a-d) Normal Profaz, Metafaz, Anafaz, Telofaz; e)erken Profazda Mikronükleus; f) Metafazda Mikronükleus; g) Düzensiz Metafaz; h) Düzensiz Anafaz; i) Anafazda Kromozom Köprüleri; j) Telofazda Yanlış Kutuplaşma.

4 14 S. Tabur ve K. Demir / Bibad, 1 (1): 11-15, 2008 belirlenmesi gerektiğine işaret eder. Gerçekten tohum çimlenmesinde tuz stresinin yenilmesinde stimülatörlerin tipi ve konsantrasyonunun türden türe değişebileceği çeşitli araştırmalarla gösterilmiştir [37, 38]. Öte yandan tuzluluğun artan seviyelerinin, arpa tohumlarındaki kromozom davranışları üzerinde oldukça olumsuz etki gösterdiği tespit edilmiştir. Tuz seviyesinin kromozom anormalliği üzerine etkileri yeterince çalışılmamış olmasına rağmen, Tajbakhsh vd. [39] arpa tohumları ile yaptıkları çalışmada tuzluluğun artan seviyelerinin anafaz safhasında kromozom anormalliklerine sebep olarak hücre bölünmesini geciktirdiğini belirtmişlerdir. Yaptığımız çalışmada tuzluluğun; profazda ve metafazda mikronükleus oluşumu, düzensiz metafaz, düzensiz anafaz, anafazda kromozom köprüleri ve telofazda yanlış kutuplaşma gibi anormalliklere neden olduğu tespit edilmiştir (Bkz. Şekil 1). ün, tuz stresinin kromozom anormallikleri üzerindeki olumsuz etkisini hafifletmede oldukça başarılı olduğu görülmüştür. Örneğin; kromozom anormallik yüzdesi 0.30 m tuzlulukta 1.33 iken, bu değer ön uygulamalı tohumlarda 0.50, 0.35 m tuzlulukta 1.57 iken 1.23 e düşmüştür m tuzlulukta en yüksek kromozom anormallik yüzdesi (3.90) elde edilmesine rağmen, bu tuz konsantrasyonunda ön uygulamalı tohumlar çimlenmediğinden kromozom anormallik yüzdesi belirlenememiştir (Bkz. Çizelge 1). Görüldüğü gibi ün normal ve stres koşulları altındaki mitotik indeks ve kromozom davranışları üzerine rolleri hem yeterince araştırılmamış, hem de fikir birliğine varılmamıştır. Bu nedenle sözü edilen büyüme düzenleyicisinin etki mekanizmalarının açıklığa kavuşabilmesi için daha ayrıntılı çalışmalara ihtiyaç vardır. Bu araştırmamızın gelecek çalışmalara ışık tutacağı kanısındayız. TEŞEKKÜR Tezi 1167-YL-05 No lu Proje ile destekleyen Süleyman Demirel Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Yönetim Birimi Başkanlığı na teşekkür ederiz. KAYNAKLAR [1] Avalbaev AM, Bezrukova MV, Kildibekova AR, Fatkhutdinova RA. and Shakirova FM Wheat germagglutinin restores cell division and growth of wheat seedlings under salinity. Bulg. J. Plant Physiol., Special Issue [2] Kwiatowski J Salinity Classification, Mopping and Management in Alberta. İnternetten alınan bilgi: (Erişim Tarihi: ). [3] Redmann RE Osmotic and specific ion effect on the germination of alfalfa. Canadian Journal of Botany 52: [4] Hardegree SP. and Emmerich WE Effect of polyethylene glycol exclusion on the water potential of solution-saturated filter paper. Plant Physiology. 92: [5] Tobe K, Zhang L. and Omasa K Alleviatory effects of calcium on the toxicity of sodium, potassium and magnesium chlorides to seed germination in three nonhalophytes. Seed Science Research. 13: [6] Kabar K Alleviation of salinity stress by plant growth regulators on seed germination, J. Plant Physiol. 128: [7] Al-Karaki GN Germination, sodium and potassium concentration of barley seeds as influenced by salinity. J. Plant Nutr. 24: [8] Dash M. and Panda SK Salt stress induced changes in growth and enzyme activities in germinating Phaseolus muingo seeds. Biol. Plant. 44: [9] Çavuşoğlu, K, Kılıç, S. and Kabar, K Tuzlu (NaCl) koşullar altındaki tohum çimlenmesi, fide büyümesi ve yaprak anatomisi üzerine triakontanol ön uygulamasının etkileri. SDÜ Fen Edebiyat Fakültesi Fen Dergisi (E- Dergi). 2 (2): [10] Mutlu F. and Bozcuk S Tuzlu koşullarda ayçiçeği tohumların çimlenmesi ve erken büyüme üzerine dışsal spermin in etkileri. Turkish Journal of Biology. 24: [11] Ashraf MY, Sarwar G, Ashraf M, Afaf R. and Sattar A Salinity induced changes in a-amylase activity during germination and early cotton seedling growth. Biologia Plantarum. 45 (4): [12] Prakash L. and Prathapasenan G Effect of NaCl salinity and putrescine on shoot growth, tissue ion concentration and yield of rice. J. Agronomy & Crop Science. 160: [13] Anuradha S. and Rao SSR Effect of brassinosteroids on salinity stress induced inhibition of seed germination and seedling growth of rice (Oryza sativa L.). Plant Growth Regulation. 33 (2): [14] Bozcuk S Domates (Lycopersicum esculentum Mill.), arpa (Hordeum vulgare L.) ve pamuk (Gossypium hirsitum L.) bitkilerinin büyüme ve gelişmesinde tuzkinetin etkileşimi üzerinde araştırmalar. Doçentlik tezi, Hacettepe Üniversitesi Fen Fakültesi Botanik Bölümü. Ankara. [15] Chibnal AC, Williams FF, Latner AL. and Piper SH The isolation of n-triacontanol from Lucerna wax. Journal of Biochemistry. 27: [16] Reis SK, Wert VF, Sweeley CC. and Leavitt RA Triacontanol: A naturally occurring plant growth regulator. Science. 195: [17] Niranjana SR, Pandit A, Prakash HS. and Shetty HS Effect of triacontanol on the seed quality of maize, paddy and sunflower. Seed Science and Tecnology. 27: [18] Stanislaw L. and Elbieta S Interaction of triacontanol with gibberellin in control of lettuce seed germination. Physiologia Plantarum. 55 (2): [19] Somen CK. and Seethalakshmi KK Growth response of seedling of Acacia, Ailanthus and Casuarina

5 S. Tabur ve K. Demir / Bibad, 1 (1): 11-15, to triacontanol. Indian Journal of Forestry. 14 (1): [20] Kumaravelu G, David Livingstone V. and Ramanujam MP Triacontanol-induced changes in the growth, photosynthesis pigments, cell metabolites, flowering and yield of green gram. Biologia Plantarum. 43 (2): [21] Braun JW. and Khan AA Alleviation of salinity and high temperature stress by plant growth regulators permeated into lettuce seeds via acetone. Journal of the American Society for Horticultural Science. 101: [22] Fox DP Some Characteristic of The Cold Hydrolysis Technique for Staining Plant Tissues by The Feulgen Reaction. J. Histo Cytochem. 17: 266. [23] Elçi Ş Sitogenetikte Gözlemler ve Araştırma Yöntemleri. Fırat Üniversitesi Fen Edebiyat Fakültesi Yayınları. 3: Elazığ. [24] Besnard-Wibant C, Noin M. and Zeevaart JAD Mitotic activities and levels of nuclear DNA in the apical meristem of Silene armeria (strain SI.2) following application of gibberellin A3. Plant and Cell Physiology. 24: [25] Tomaszewska-Sowa M, Drozdowska L. and Szota M Effect of cytokinins on in vitro morphogenesis and ploidy of pepper Capsicum annuum L. Electronic Journal of Polish Agricultural Universities, Agronomy. 5, Issue 1. [26] Knowles NR. and Ries SK Rapid Growth and Apparent Total Nitrogen Increases in Rice and Corn Plants following Applications of Triacontanol. Plant Physiol. 68 (6): [27] Hoagland RE Effects of triacontanol on seed germination and early growth. Botanical Gazzette. 141: [28] Zhu JK Over expession of a delta-pyroline-5- carboxylate synthetase gene and analysis of tolerance to water and salt stres in transgenic rice. Trends Plant Science. 6: [29] Gill K S. and Singh OS Effect of salinity on carbohydrate metabolism during paddy (Oryza sativa) seed germination under salt stress condition. J. Exp. Biol. 23: [30] Schmidhalter U. and Oertli JJ Germination and seedling growth of carrots under salinity and moisture stres. Plant and Soil. 132: [31] Katsuhara M. and Kawasaki T Salt stress induced nuclear and DNA degradation in meristematic cells of barley roots. Plant and Cell Physiology. 37: [32] Lutsenko EK, Marushko EA, Kononenko NV. and Leonova TG Effects of fusicoccin on the early stages of sorghum growth at high NaCl concentrations. Russian Journal of Plant Physiology. 52: [33] Rao VS, Sankhla N. and Khan AA Additiveergistic effects of kinetin and ethrel on germination, thermodormancy and polyribosome formation in lettuce seeds. Plant Physiol. 56: [34] Khan AA Incorporation of bioactive chemicals into seeds to alleviate. environmental stres. Acta Hort. 83: [35] Zapata PJ, Serrano M, Pretel AT, Amoros A. and Botella MA Polyamines and ethylene changes during germination of different plant species under salinity. Plant Sci. 167: [36] Scott TK Hormonal regulation of development. II the functions of hormones from the level of the cell to whole plant. In Encyclopaedia of Plant Physiology. New Series. Berlin: Springer-Verlag, [37] Palavan-Ünsal N, Zehir Z. and Sağlam S Inhibition of alpha-amylase release from germinating wheat embryos by abcisic acid cyclohexylammonium, polyamines and ethylene. In: FLORES HE. ARTECA RN. SHANNON JC. (Eds.) Biochemistry, Physiology and Interactions. American Society of Plant Physiologist [38] Mirza JI. and Bagni N Effects of exogenous polyamines and difluoromethylornithine on seed germination and root growth of Arabidopsis thaliana. Plant Growth Regulation, 10: [39] Tajbakhsh M, Zhou MX. Chen ZH. and Mendham NJ Physiological and cytological response of salt-tolerant and non-tolerant barley to salinity during germination and early growth. Australian Journal of Experimental Agriculture. 46 (4):

6