BİNGÖL İLİNDE YETİŞEN BAZI Achillea L. (ASTERACEAE) TAKSONLARININ UÇUCU YAĞ KOMPOZİSYONLARININ ARAŞTIRILMASI. Ahmet Vecdi ÇAKICI. Yüksek Lisans Tezi

Transkript

1 BİNGÖL İLİNDE YETİŞEN BAZI Achillea L. (ASTERACEAE) TAKSONLARININ UÇUCU YAĞ KOMPOZİSYONLARININ ARAŞTIRILMASI Ahmet Vecdi ÇAKICI Yüksek Lisans Tezi Biyoloji Anabilim Dalı Danışman: Yrd. Doç. Dr. Alpaslan KOÇAK Nisan 2014

2 T.C. BİNGÖL ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİNGÖL İLİNDE YETİŞEN BAZI Achillea L. (ASTERACEAE) TAKSONLARININ UÇUCU YAĞ KOMPOZİSYONLARININ ARAŞTIRILMASI YÜKSEK LİSANS TEZİ Ahmet Vecdi ÇAKICI Enstitü Anabilim Dalı : BİYOLOJİ ANABİLİM DALI Tez Danışmanı : Yrd. Doç. Dr. Alpaslan KOÇAK Nisan 2014

3 T.C. BİNGÖL ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİNGÖL İLİNDE YETİŞEN BAZI Achillea L. (ASTERACEAE) TAKSONLARININ UÇUCU YAĞ KOMPOZİSYONLARININ ARAŞTIRILMASI YÜKSEK LİSANS TEZİ Ahmet Vecdi ÇAKICI Enstitü Anabilim Dalı : BİYOLOJİ ANABİLİM DALI Bu tez tarihinde aşağıdaki jüri tarafından oy birliği ile kabul edilmiştir. Prof. Dr. Yrd. Doç. Dr. Yrd. Doç. Dr. Lütfi BEHÇET Alpaslan KOÇAK Bülent KAYA Jüri Başkanı Üye Üye Yukarıdaki sonucu onaylarım Doç. Dr. İ. Yasin ERDOĞAN Müdürü

4 ÖNSÖZ Tez çalışmamın her aşamasında, yardımlarını esirgemeyen derin bilgi ve tecrübesinden yararlandığım danışmanım sayın Yrd. Doç. Dr. Alpaslan KOÇAK a saygı ve şükranlarımı sunarım. Laboratuvar imkanlarından faydalanmamda kolaylıklar sağlayan ve bitkilerin teşhislerini yapan Fen Edebiyat Fakültesi Dekanı sayın Prof. Dr. Lütfi BEHÇET e saygı ve teşekkürlerimi sunarım. Tez çalışmamda finansal yardımlar sağlayan Bingöl Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projesi Koordinatörlüğü Birimi ne (Proje No: BAP ) teşekkür ederim. Tez çalışmalarım süresince manevi desteklerini esirgemeyen aileme teşekkürlerimi sunarım. Ahmet Vecdi ÇAKICI BİNGÖL 2014 ii

5 İÇİNDEKİLER ÖNSÖZ... ii İÇİNDEKİLER... iii SİMGELER VE KISALTMALAR LİSTESİ... iv ŞEKİLLER LİSTESİ... v TABLOLAR LİSTESİ... vi ÖZET... vii ABSTRACT... vii 1. GİRİŞ Kemotaksonomi ve Kimyasal Verilerin Kemoaksonomide Kullanımı Uçucu Yağların Genel Özellikleri Achillea Cinsi Üyelerinin Halk Arasında Geçmişten Günümüze Kullanımı ve Biyolojik Etkileri Asteraceae Familyası Asteraceae Familyasının Betimi Achillea L. Cinsinin Betimi Çalışmanın Amacı MATERYAL VE METOT Bitki Örneklerinin Toplanması Kimyasal Analizler Uçucu Yağların Elde Edilmesi Uçucu Yağların Kimyasal Analizi BULGULAR Kimyasal Bulgular TARTIŞMA VE SONUÇ KAYNAKLAR ÖZGEÇMİŞ iii

6 SİMGELER VE KISALTMALAR LİSTESİ A. : Achillea Afan. : C.S. Afanassiev dak. : Dakika FID : Alevde İyonlaştırma Detektörü GC : Gaz Kromatografisi Kotschy. : Carl(Karl) Georg Theodor Kotschy L. : Linnaeus Lam. : Jean-Baptiste Pierre Antoine de Monet de Lamarck MS : Kütle Spektrometresi o C Poir. RRI Sin. subsp. Trin. UV vd α β δ v/w ml g : Santigrat derece : Jean Louis Marie Poiret : Bağıl alıkonma zamanı : Sinonim : Alt tür : Carl Bernhard von Trinius : Ultraviyole : ve diğerleri : Alfa : Beta : Delta : Gama : volume/weight : Mililitre : Gram iv

7 ŞEKİLLER LİSTESİ Şekil 2.1. Çalışılan Achillea L. türlerinin araziden toplandığı Bingöl haritası.. 13 Şekil 3.1. A.vermicularis in fotoğrafı Şekil 3.2. A. vermicularis in uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı Şekil 3.3. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium un fotoğrafı.. 20 Şekil 3.4. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Karlıova) un uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı. 20 Şekil 3.5. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Yedisu) un uçucu ağının GC - FID - MS kromatogramı Şekil 3.6. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ekinyolu) un uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı Şekil 3.7. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ilıcalar) un uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı Şekil 3.8. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Sancak) un uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı. 22 Şekil 3.9. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Genç) un uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı. 23 Şekil Achillea filipendulina nın fotoğrafı 25 Şekil Achillea filipendulina nın uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı 25 Şekil Achillea coarctata nın fotoğrafı. 27 Şekil Achillea coarctata nın uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı 27 Şekil Achillea arabica nın fotoğrafı 29 Şekil Achillea arabica nın uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı v

8 TABLOLAR LİSTESİ Tablo 3.1. Tablo 3.2. Tablo 3.3. Tablo 3.4. Tablo 3.5. Achillea vermicularis uçucu yağının GC-FID-MS analizleri ve yüzde oranları Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium uçucu yağlarının GC - FID - MS analizleri ve yüzde oranları.. 24 Achillea filipendulina Lam. uçucu yağının GC-FID-MS analizleri ve yüzde oranları Achillea coarctata uçucu yağının GC-FID-MS analizleri ve yüzde oranları Achillea arabica uçucu yağının GC-FID-MS analizleri ve yüzde oranları vi

9 ÖZET Anahtar Kelimeler: Achillea, Asteraceae, GC-MS, 1,8-sineol, 1,3-pentadien, Uçucu yağ. Bu çalışmada, Bingöl ilinde doğal olarak yetişen bazı Achillea L. taksonlarının (Asteraceae) uçucu yağları analiz edilerek fitokimyasal yönden değerlendirilmiştir. Achillea örneklerinden su distilasyonu ile elde edilen uçucu yağlar GC-FID-MS ile analiz edildi. Bitkilerin 100 g kuru örneğinden 0,2 0,6 ml/g uçucu yağ elde edildi. Çalışılan taksonların toplam uçucu yağlarının % 90,61 ile % 96,70 i tanımlandı. Bu çalışmada kullanılan Achillea taksonlarında ana bileşenler olarak 1,8-sineol, endo-bornilasetat, piperiton, α-pinen, β-pinen, trans-krizantenon, sabinen, siklohekzanol, 1,3,6-oktatrien, β- bisabolenepoksit, β-tuyon, borneol, cis-sabinenhidrat ve kamfor olduğu tespit edildi. Çalışılan Achillea taksonlarının kemotiplerinin, A. vermicularis, A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium, A. coarctata ve A. arabica (Sin: A. biebersteinii) de 1,8- sineol olduğu, A. filipendulina da ise 1,3-pentadien olduğu tespit edildi. Elde edilen bu veriler kullanılarak Achillea cinsi içerisindeki fitokimyasal ilişkiler tartışılmıştır. vii

10 INVESTIGATION OF ESSENTIAL OILS OF SOME Achillea L (ASTERACEAE) TAXA NATURALLY GROWN IN BINGOL PROVİNCE ABSTRACT Keywords: Achillea, Asteraceae, GC-MS, 1,8-sineol, 1,3-pentadien, Essential oil In this study, essential oils of some Achillea (Asteraceae) taxa, naturally grown in Bingol province were analyzed and evaluated phytochemically. The essential oil composition of Achillea samples obtained by hydro-distillation were analyzed by GC-FID-MS. Oil yields of plants in 100 g dry sample were determined in the range of (v/w). The total essential oils of studied taxa were described as %. The main compounds of Achillea taxa used in this study determined as 1,8-cineole, endo-bornylacetate, piperitone, α-pinene, β-pinene, trans-chrysantenon, sabinene, cyclohexanol, 1,3,6-octatriene, β- bisaboleneepoksite, β-thujone, borneol, cis-sabinenehydrate and camphor. Chemotypes of Achillea taxa were described as 1,8-cineole in A. vermicularis, A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium, A. coarctata and A. arabica (Sin: A. biebersteinii); 1,3- pentadien in A. filipendulina. phytochemical relationships within Achillea genus were discussed by obtained data. viii

11 BÖLÜM 1. GİRİŞ Ülkemiz, özellikle tohumlu bitkiler açısından bulunduğu iklim kuşağı göz önüne alındığında, bitki türleri açısından oldukça zengindir. Türkiye de 241 i kültür, tarım ve yabancı bitkiler olmak üzere, vasküler bitki takson sayısı ye ulaşır. Bu taksonların 3649 u endemik olup, Türkiye ve Doğu Ege adaları florasının % 31,82 sini oluşturmaktadır (Davis, 1975; 1988; Özhatay vd 2003; Özhatay vd 2009; Özhatay vd 2011). Endemik alanların oluşmasına çeşitli etkenlerin sebep olduğu ve bu sebeplerin; mutasyon, genetik rekombinasyon, tabii seleksiyon, izolasyon ve ekolojik sebepler (kuraklık, buzullaşma) olduğu bildirilmiştir (Rustaiyan vd 1998). Cinsler arasında tür sayısı bakımından çok az takson içeren cinsler yüksek endemizm oranına sahiptirler. Bunlar; Ebenus Rumph. ex Burm.(Fabaceae), Cochlaria L. (Brassicaceae), Hyacinthella Schur (Liliaceae), Bolanthus (ser.) Rchb. (Caryophyllaceae), Ricotia L. (Brassicaceae), Ballota L. (Lamiaceae), Sempervivum L. (Crassulaceae) dir. Türkiye ve Doğu Ege adaları florasında yer alan sadece Türkiye ye has endemik cinsler; Leucocyclus Boiss. (Asteraceae), Olymposciadium H. Wolff (Apiaceae), Crenosciadium Boiss. & Heldr. (Apiaceae), Microsciadium Boiss. (Apiaceae), Necranthus Gilli (Orobanchaceae), Pseudophleum Doğan (Poaceae), Neotchihatchewia Rauschert (Brassicaceae), Physocardamum Hedge (Brassicaceae), Thurya Boiss. & Balansa (Caryophyllaceae), Phryna (Boiss.) Pax & K.Hoffm. (Caryophyllaceae), Kalidiopsis Aellen (Chenopodiaceae), Cyathobasis Aellen (Chenopodiaceae), Sartoria Boiss. (Fabaceae), Nephelochloa Boiss. (Poaceae), Ekimia H. Duman & MFWatson (Apiaceae) dır (Erik ve Tarıkahya 2004). Ülkemizde endemik türler çok dar alanlarda olabildiği gibi, bölge ve ülke çapında da olabilmektedir (Akman 1993). Türkiye Florası nda Asteraceae familyasına ait toplam 1484 tür kaydedilmiştir. Asteraceae familyanın Türkiye Florası nda 143 cins ve toplam 1484 türü bulunmaktadır.

12 2 Bu türlerin 474 ü endemik olup, endemizm oranı yaklaşık % 38 dir. Takson sayısı bakımından familyalar arasında ilk sırada yer alır ve cins sayısı bakımından Türkiye Florası nın ikinci büyük familyasını temsil eder (Davis vd 1975; 1988; Güner vd 2000; Erik ve Tarıkahya 2004; Özhatay ve Kültür, 2006; Özhatay vd 1994; 1999; 2009; 2011). Achillea cinsi üyeleri genellikle kuzey yarım kürede yayılış gösteren çok yıllık otsu bitkilerdir (Davis, 1975). Achillea cinsi yeryüzünde 100 den fazla, ülkemizde ise son yıllarda yapılan çalışmaya göre, Türkiye Florasında adı geçen ama "Türkiye Bitkileri Listesi (Damarlı Bitkiler)" ismli kitapta yayılışı itibarı ile anakarada yani Anadolu'da bulunmayan (Doğu Ege Adalarında yayılışı olan) türler ile sinonim olan taksonlar bu listeden çıkarılmıştır. Bu çalışma dikkate alındığında ise Türkiye de Achillea cinsinin 43 ü tür, 13 ü alttür ve 2 si varyete ile toplam 58 taksonla temsil edildiği, endemik takson sayısının ise 30 takson olduğu bildirilmiştir ve bu cinsin endemizim oranının % 51,72 olduğu tespit edilmiştir (Güner vd 2012). Bitkiler üzerinde yapılan araştırmalarda bitkilerin, ekosistemle olan ilişkisinde, çevresel koşullara uyumunda, savunma, korunma, hayatta kalma ve nesillerini sürdürme gibi önemli olaylarda çeşitli avantajlar sağlayan ve sekonder metabolit olarak tanımlanan kimyasal maddeler içerdikleri saptanmıştır (Bougaund vd 2001). Charwood ve Rhodes (1990) e göre bitkiye çeşitli avantajlar sağlayan sekonder metobolitler bitkiyi patojenlere karşı koruyan antibakteriyel, antifungal, antiviral maddeler (fitoaleksinler), çimlenmeyi önleyici maddeler, doğal yaşamda rekabet gücünü (allelopati) artıran ve toksik maddeler, çevresel etmenler olarak; UV ışınlar, tuzluluk, kuraklık gibi zararlı çevresel etmenlerin neden oldugu stres koşullarında direnç arttırıcı metabolitler ki bunlarda zararlı hayvanlar ve otlara karşı korumayı sağlayan insektisit, herbisitler ve tozlaşma ile tohum dağılımını sağlamak üzere hayvanları cezbeden renkli ve güzel kokulu metabolitler bitkinin kök ve toprak üstü kısımlarında bulunmaktadır. Modern bilimlerin gelişmesiyle beraber biyoloji, kimya, farmakoloji, toksikoloji gibi disiplinlerin birlikte çalışmasıyla, halk ilacı olarak kullanılan birçok bitkinin, yapısında bulunan doğal bileşiklerin fitokimyasal yapıları aydınlatılmakta ve biyolojik aktiviteleri saptanabilmektedir (Baykal, 1997; Dülger vd 1999; Tadeg vd 2005). Ayrıca alternatif

13 3 tedavi alanında son yıllarda bitkilere olan ilginin artmasıyla, tedavi amacıyla bitkilerin daha fazla araştırılmasına başlanmıştır (Nakipoglu ve Otan, 1992). Dünyada ve Anadolu da geniş yayılım gösteren Asteraceae familyasına ait birçok türün farmakolojik aktivite gösterdiği belirlenmiştir. Bu familyadaki bitkiler, diterpen ve flavanoidlerin yanı sıra ağırlıklı olarak, antibakteriyel, antifungal, antihelmintik, antienflamatuar, insektisit, antitümör gibi pek çok biyolojik aktiviteye sahip seskiterpen lakton metabolitlerini içermektedirler (Picman, 1986; Ertürk, 2003). Achillea taksonlarından üretilen ilaçların içeriğinde % 0,2 ile % 1 arasında uçucu yağ bulunduğu rapor edilmiştir (Wichtl, 1994). Achillea cinsine ait türlerin uçucu yağları üzerine yapılmış pek çok çalışma vardır. A. wilhelmsii çoğunlukla gastrointestinal hastalıkların tedavisinde kullanıldığı (Maffei vd 1989; Brunke vd 1986), A.millefolium un ise dahilen bitki çayı, haricen losyon ve merhem olarak kullanıldığı bildirilmiştir (Chatzopoulou vd 1992). Ayrıca A. millefolium ekonomik önemi ve tedavi edici özelliğinden dolayı çok geniş çapta çalışılmıştır (Figueiredo, 1974; Hanlidou vd 1992). A. millefolium un, solucan düşürücü, iltihap giderici, sinir yatıştırıcı, antiviral, gebelik önleyici, idrar söktürücü, terletici, kadınlarda adet düzenleyici, ateş düsürücü, barsak fonksiyonlarını düzenleyici, uyarıcı, baş ve boğaz ağrılarında, panik atakta, romatizma ve mide ülserinde kullanıldığı rapor edilmiştir (Duke, 1986; Fritz, 1994). A. ageratum L. un çiçeklerinin, gastrointestinal hastalıklarda kullanıldığı ve toprak üstü kısımlarının sitotoksik aktiviteye sahip oldugu, A. pannonica Scheele dan elde edilen germakren türevli bir maddenin iltihap giderici etkiye sahip olduğu ayrıca A. chrysocoma Friv. nın güçlü bir antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu yine A. ptarmica L. rizomlarının boşaltım sistemi enfeksiyonları nın, romatizmanın, baş ağrılarının ve gaz giderici olarak mide hastalıklarının tedavisinde kullanıldığı rapor edilmiştir (Duke, 1986; Smic vd 2000). Yine bazı Achillea türlerinin uçucu yağları, antibakteriyel, iltihap giderici, sitotoksik ve kanamayı durdurucu ajanlar olarak da kullanıldığı bildirilmiştir (Küsmenoğlu vd 1997; Duke, 1986; Fritz, 1994; Gomez vd 2001; Sosa vd 2001; Simic vd 2000). Achillea cinsinin infragenerik sınıflamalarında zorluklar olduğu, uçucu yağ karakterlerinin türlerin ayrılmasında önemli ilave karakter olarak kemotaksonomik

14 4 amaçlı olarak kullanılabileceği rapor edilmiştir (Figueiredo, 1974; Falk vd 1974). Uçucu yağlarda ki, -pinen, -pinen, sabinen, 1,8-sineol, kamfor, karyofillen ve kamazulen in nispi miktarlarının bu ayırıcı kriterleri oluşturduğu rapor edilmiştir (Figueiredo, 1974; Falk vd 1974). Achillea türlerinin Türkiye de çok sayıda olması ve kayda değer oranda endemizm göstermesi nedeniyle bu çalışmada, Bingöl ili ve çevresinden farklı altı lokaliteden toplanan A. millefolium subsp. milefolium var. millefolium taksonuna ait örneklerle beraber toplam beş farklı Achillea taksonun ve uçucu yağ kompozisyonları tespit edilerek değerlendirilmiştir Kemotaksonomi ve Kimyasal Verilerin Taksonomide Kullanılması Kemotaksonomi, sınıflandırma amacıyla kimyasal delillerin kullanılmasına ait prensipleri ve işlemleri kapsayan bir bilim dalı olarak tanımlanmıştır. Kimyasal sistematik ise, organizmalar arasındaki ve akrabalıklarındaki farklılıkların gösterdiği kimyasal varyasyonun çalışılması olarak tanımlanabilir (Simith, 1976). Kemotaksonominin gelişmesinin üç ana sebebi vardır. 1- bitki ürünlerinin analizlerini çok çabuk yapan ve aynı zamanda daha önce kullanılanlardan çok daha az bitki materyaline gereksinim gösteren birçok yeni tekniklerin (kromatografi, elektroforez, vb.) gelişmesi, 2- birçok hayatsal biyokimyasal olayların bütün bitkilerde bulunmasının yanı sıra daha az hayatsal olayların taksonlar arasında çok büyük korelasyonun olduğunun anlaşılması ve 3- bitki sınıflamalarında delillerin mümkün olduğu kadar çok kaynaklardan kullanılması gerektiği inancıdır (Tanker vd 1998). Taksonların sınırlarını tayin etmek ve onları hiyerarşik sınıflamalarda uygun yerlere yerleştirmek, taksonomistlerin en önemli amaçlarından ikisidir. Organik kimya, biyokimya ve moleküler çalışmalar hep birlikte morfolojiden sonra günümüz taksonomisinde diğer bir veri kaynağı olarak kullanılmaktadır. Genelde kemotaksonomideki bu gelişmeler önce cins ve cins altı seviyedeki taksonların tanım ve taksonomik sınırlarının belirtilmesinde ve sonra da cins seviyesi yukarısındaki taksonların filetik problemlerine ışık tutması bakımlarından çok faydalı veriler ortaya

15 5 koymuştur. Morfolojik karakterlere dayanarak teşhis edilmeleri zor olan melezlerde kimyasal verilerin, teşhis çalışmalarında çok faydalı oldukları görülmüştür (Tanker vd 1998). Morfolojik ve anatomik verilerin, doğal bir sınıflama yapmaya yeterli olmadığı zamanlarda cins ve oymak seviyelerinde kimyasal veriler çok faydalı olmaktadır. Bu gibi çalışmalar kemotaksonominin, taksonomik hiyerarşisinin yukarı katlarındaki uygulamalarına büyük katkılar sağlamaktadır. Bu yüzden taksonomistler arasında geleneksel taksonomik karakterlere dayandırılarak oldukça yapay sınıflandırılmış yüksek kategorilerin kimyasal bileşik dağılımlarını gözden geçirip onların daha doğal bir şekilde yeniden sınıflandırması çalışmaları yapılmaktadır. Benzeri çalışmalara, Bate-Simith in fenolik bileşiklere dayanarak Geranium L. cinsinin sınıflamasını kontrol etmeleri örnek olarak verilebilir (Bate-Simith, 1973) Uçucu Yağların Genel Özellikleri İlaçlarda selüloz, nişasta, pektin, protein, şeker gibi tedavi yönünden etkisiz maddeler yanında çok az miktarlarda bile olsa, farmakolojik etkilere sahip bileşikler bulunmaktadır. Bu bileşiklere etkili madde ismi verilmektedir (Baytop, 1999). Bu maddelerden esans olarak bilinen uçucu yağlar, esas itibariyle terpenlerden oluşmuş karışımlardır. Oda sıcaklığında sıvı, bazen donabilen uçucu, kuvvetli kokulu ve yağımsı karışımlardır. Su buharı ile sürüklenir, suda çözünmez, organik çözücülerde kolaylıkla çözünürlern (Tanker vd 1990). Uçucu yağlar bitkinin yoğunlukla çiçek ve meyvelerinde bulunmakla beraber bitkinin diğer organlarından da elde edilebilirler. Bu amaçla bunların eldesinde su buharı distilasyonu veya organik çözücüler ile ekstraksiyon yöntemleri kullanılmaktadır (Baytop ve Başer, 1995). Uçucu yağlar ya bitkinin belirli organlarında örnegin taç yaprak, yaprak, meyve, kabuk, meyve sapı, odunsu doku gibi ya da bitkinin tüm organlarında ayrıca bazen bir organın belirli dokularında da bulunabilirler. Bu yağlar bitkilerin bağlı bulunduğu familyalara göre salgı tüyünde, salgı ceplerinde, salgı kanallarında veya salgı hücrelerinde de bulunabilmektedir (Ceylan, 1987). Bugüne kadar uçucu yağlarda 2000 den fazla kimyasal bileşenlerin bulunduğu gösterilmiştir ki, bunların en önemlileri

16 6 terpenler, fenilpropanlar vs. dir. Ayrıca çok sayıda su buharında uçucu olan azot ve kükürt içeren bileşiklerin varlığı da görülmüştür. Bu maddelerin fizyolojik etkileri nedeni ile bazen tek tek veya bazen de karışım şeklinde terapide kullanıldığı rapor edilmiştir (Kubeczka, 1979). Uçucu yağlar eski çağlardan günümüze kadar tedavide kullanılan ilaçlar arasında yer almaktadırlar (Sarer, 1991). Halk tıbbında kullanılma amaçları esas alınarak bu ilaçlar üzerinde yapılan farmakolojik araştırmalar sonucunda bazı biyolojik etkileri bilimsel olarak da açıklanmıştır (Kıvanç ve Akgül, 1986; Sarer, 1991). Dünyada her organın ve organizmanın gözle görülemeyen ve ölçülemeyen bir enerjisi vardır. Bitkilerde ise bu enerji, onların uçucu yağlarında saklıdır. Yağ özleri bitkilerin hormonu sayılır ve bizim vücudumuzdaki hormonlara eş değerde bir görev üstlenir (canlandırıcı, ateşleyici). Bu uçucu yağ özleri bitkinin içinde dolaşarak ve hormonlarını şekerli ortamda birbirine bağlayarak, bitkinin bütün yaşamı boyunca, çok az miktarda üretilirler. Uçucu yağ özleri, elde edildikleri bitkilerin yapısına göre insan vücudunda iyileştirici etki yapar. Bu etkinin doğru elde edilmesi için gerekli miktarlarda ve uygun yöntemlerle uygulanması gerekir. Terapide kullanılan uçucu yağlar, kan dolaşımı yolu ile arzu edilen bölgeye ulaşırlar. Örnegin, baş ağrısı için kullanılan bir ağrı kesici ilacın, kan dolaşımı yolu ile sinir sistemine ulaşıp ağrıyı kesmesi gibi, aroma yağları da aynı etkiyi yaratır. Buradaki tek fark, aroma yağlarının sinirleri yatıştırmak yerine, ağrıya neden olan dengesizliğin düzelmesi için gerekli ortamı sağlamasıdır. Uçucu yağlar doğal ürünlerdir ve yan etkileri çok azdır, doğru kullanılırsa farmakolojik ilaçlardan faydalıdırlar. Uçucu yağlar, oda sıcaklığında sıvı halde olan, kolaylıkla kristalleşebilen genellikle renksiz veya açık sarı renkli, uçucu, kuvvetli kokulu, doğal bir üründür. Güzel kokulu olmasından dolayı esans ya da eterik yağ da denilmektedir. Su ile karışmadıkları için yağ olarak tanımlansalar da sabit yağlardan farklı oldukları bildirilmiştir (Ceylan, 1983). Kimyasal yapılarında en büyük grubu terpenler oluşturmaktadır. Bununla birlikte az miktarda alkoller, aldehitler, esterler, fenoller, azot ve kükürt içeren bileşiklerde bulunmaktadır. Terpenlerin oksitlenmesi ile meydana gelen oksijenli türevler koku, tat ve terapik özellikteki maddelerdir. Sudan hafif olan uçucu yağların kırılma indisleri genellikle yüksek olup, optikçe aktif özelliktedirler. Işık ve oksijenin etkisi ile reçineleştikleri için uzun süreli saklamalarda koyu renkli şişelerde ağzı kapalı olarak muhafaza edilmelidirler (Likens ve Jakson, 1997).

17 7 Son yıllarda alternatif tıbbın bir dalı olarak görülen aroma terapiye karşı duyulan ilgi, uçucu yağ kullanımını da artırmıştır. Eterik yağlar, terapilerde uygulanan masajlarda ya da rahatlatıcı banyolarda kullanılmaktadır. Bunun dışında uçucu yağlar yaygın olarak parfüm, kozmetik, gıda ve içecek sanayilerinde, ev temizlik ürünlerinde kullanılmaktadır. Bazı yağlar (örn; sedir ve lavanta) ise böcek kovucu özelliği ile dikkat çekmektedir. Uçucu yağlar sıvı veya yarı katı halde bulunabilen, suyla karışmayan, uçucu özellige sahip, kokulu, aromatik uçucu madde karışımlarıdır. Uçucu yağlar aromatik olan veya fermantasyon sonucu kokulu hale getirilmiş bitkisel materyalden, sıkma, su ve buhar distilasyonu gibi çeşitli yöntemlerle elde edilirler (Baytop, 1999). Uçucu yağlar sabit yağlara görünüş olarak benzedikleri için yağ denilmektedir; oysa sabit yağlarla ilgileri yoktur. Uçucu yağlar su buharı ile sürüklenebilir ve süzgeç kâğıdında leke bırakmazlar. Sabit yağlar ise su buharı ile sürüklenemez ve süzgeç kâğıdında leke bırakırlar. Uçucu yağlara eteri yağ, eterik yağ, kokulu yağ, esans yağı, esans, ruh gibi isimler de verilmektedir. En belirgin ayırt edici özellikleri, uçucu ve kokulu olmalarıdır. Uçucu yağların bitkide neden ve nasıl oluştukları hakkında çesitli teoriler vardır. Bunlar bitkide herhangi bir biyolojik olaya katılmak için oluşmuş değillerdir. Böcekleri, tozlaşmayı sağlamak amacıyla cezb etmek veya zararlıları kaçırmak, metabolitlerin atılmasını sağlamak ve bitkiyi korumak bu teorilerden bazılarıdır. Kural olarak uçucu yağlar, su ile karışmayan ürünler ise de, kokularının suya geçmesine yetecek kadar suda çözünürler. Aromatik sular, uçucu yağların bu özelliğine dayanarak hazırlanırlar. Bitkilerden elde edilen uçucu yağlar genellikle taze elde edildikleri zaman renksizdir, fakat uzun süre beklediklerinde oksitlenebilir, reçineleşebilir ve renkleri koyulaşabilir (Tanker vd 1990) Achillea Cinsi Üyelerinin Halk Arasında Geçmişten Günümüze Kullanımı ve Biyolojik Etkileri Bitkisel ilaçları alternatif tıpta kullanabilmek veya ekonomik anlamda değerlendirebilmek için onların botaniğinin, kimyasının, farmakolojisinin, toksikolojisinin ve klinik etkilerinin iyi bir şekilde ortaya konulması gerekmektedir (Çubukçu vd 2002). Achillea cinsi üyeleri Türkiye de yaygın olarak civanperçemi ismi ile bilinmesine karşın; değişik yörelerde akbaşlı, barsamotu, binbiryaprakotu, marsamaotu, kandilçiçeği ve baytaran isimleri ile de bilinirler (Arabacı, 2006). A. millefolium dünyanın birçok yerinde kültürü yapılan ve bitkisel çay olarak oldukça

18 8 yaygın kullanılan bir türdür yine yanısıra merhem, bitki tendürü ya da oturma banyoları şeklinde de kullanılmaktadır (Arabacı, 2006). Uçucu yağlar uzun yıllardan beri etnobotanik anlamda tedavi amaçlı kullanılan önemli bitki kimyasalları arasında yer almaktadır. Dünyada ve ülkemizde geniş yayılım gösteren Compositae familyasına ait bazı Achillea türlerinin toprak üstü kısımlarının, uçucu yağları ve ekstraktları farmakolojide, kozmetikte, solunum, sindirim, üreme, boşaltım ve dolaşım sistemleri düzensizliklerinde kullanıldığı bildirilmiştir (Magiatis vd 2002). Achillea cinsine ait türlerin Türkiye de halk arasında ilaç olarak; kronik hazımsızlık, gastrit ve duodenal ülser, anoreksia (kilo kaybı), gibi sindirim sistemi düzensizliklerinde, sindirim sistemi mukozası için genel bir tonik ve gaz giderici olarak, kan basıncını düşürücü olarak; kasların etrafındaki damarların rahatlamasında, damarlarda meydana gelen şekil bozukluklarının ve damar tıkanıklıklarının giderilmesinde, varisli ve kan dolaşımının yavaşladığı toplardamarların iyileştirilmesinde ve inatçı hipertansiyonların tedavisinde, mensurasyon periyodunun düzenlenmesinde, kadın üreme sisteminde meydana gelen iltihapların tedavisinde, hatta fibroid ve uterus tümörlerinde, üriner sistemde meydana gelen tüm enfeksiyonlarda, böbrek ve mesanede antiseptik olarak ayrıca hemoroit tedavisinde, soğuk algınlıgı ve grip gibi üst solunum yolu enfeksiyonlarında, öksürük, ateş ve fazla mukus salgılanmasının giderilmesinde ayrıca bunların yanında iltihaplı ağır yaraların iyileştirilmesinde ve enfeksiyon veya kaşıntı gibi bazı durumlarda göz gibi organların temizlenmesinde cilt yıkayıcı olarak kullanıldığı literatürlerde bildirilmiştir (Acartürk, 1997; Glasl vd 2001) Asteraceae Familyası Asteraceae familyası üyeleri yeryüzünün hemen hemen her yerinde yayılış göstermektedir. Özellikle Amerika nın güneybatısı ve Meksika, Brezilya nın güneyi, And Dağları boyunca, Akdeniz Bölgesi, Güneybatı Asya, Orta Asya, Güney Afrika ve Avustralya da yoğun olarak bulunmaktadır (Bremer, 1994). Asteraceae familyasının coğrafik orijini ile ilgili çeşitli çalışmalar bulunmaktadır. Bazı araştırmacılar Güney Amerika nın kuzeyini, bazıları da And Dağları nın kuzeyini orijinmerkezi olarak göstermektedirler (Raven ve Axelrod, 1974; Turner vd 1977). Barnadesioideae alt familyasının esas yayılış alanının And Dağları olması ve Güney Amerika da da yayılış göstermesi bu hipotezi desteklemektedir (Jansen vd 1991). Bremer tarafından 1993

19 9 yılında yapılan kladistik çalışmalara göre ise Asteraceae familyasının orijin merkezinin Güney Amerika ve Pasifik olduğu ileri sürülmüştür (Bremer, 1993). Achillea cinsinin de içinde yer aldığı ve Angiospermlerin en geniş familyalarından birisi olan Asteraceae familyası son yapılan sınıflandırmalara göre Dünya üzerinde 12 alt familya ve 43 oymak altında toplanmış, yaklaşık 1600 cins ve civarında türden oluşmaktadır (Funk vd 2009). Dünyada ve Anadolu da geniş yayılım gösteren Asteraceae familyasına ait birçok türün farmakolojik aktivite gösterdiği bildirilmiştir (Tanker vd 1998) Asteraceae Familyasının Betimi Asteraceae familyası; tek yıllık, iki yıllık ya da çok yıllık otsu ya da bazen çalı, nadiren küçük ya da orta büyüklükte ağaç şeklinde, tüysüz ya da çoğu zaman çeşitli şekillerde salgılı ya da salgısız tüylü. Yaprakları alternat ya da bazen karşılıklı, nadiren dairesel, stipülsüz, (nadiren stipüllü), basit ve tam ya da dişliden çeşitli şekillerde parçalanmış, bileşik. Çiçek durumu 1-birçok sık baş şeklinde birkaç ya da çok sayıda sapsız çiçeklerin çiçek tablası üzerinde dizilip, hemen hemen her zaman 1-birkaç sıralı fillariden (involukral brakte) oluşan koruyucu bir involukrum tarafından çevrilen kapitulum şeklinde kümelenmiştir; kapitulum bazen ikincil bir kapitulum benzeri baş şeklinde kümeleşmiştir (yalancı baş). Reseptakulum çıplak ya da palealı, uzun tüylü ya da kılçıklı. Çiçekler (çiçekçikler) epigin, sinpetal, tam ya da bazıları dişi ya da nötr ya da işlev bakımından erkek. Kaliks ovaryumun ucunda papus denilen tüyler, kıllar, pullar ya da kılçıklar ya da ± devamlı korona (taç) ile temsil edilmektedir; bazen papus tamamen yoktur. Korolla tüp şeklinde (huni şeklinde ya da tabanda silindirik, üste doğru çan şeklinde), filiform, dilsi ya da nadiren iki dudaklı, genellikle 3 ya da 5 dişli; nadiren bulunmaz. Stamenler (4-)5, filamentler korolla tüpüne bağlı, anterler kenarlarından birleşerek stilusu silindir şeklinde sarar (singenezis), nadiren serbest; iç yüzeylerinden açılır. Ovaryum alt durumlu, tek gözlü, tabanda bir adet anatrop ovullü; stilus genellikle yukarı doğru 2 kola bölünmüş, çoğu zaman disk çiçeklerin stilusları anterlerdeki poleni yakalayacak şekilde fırça tüylü. Meyve aken (sipsela), genellikle kalıcı ya da düşücü papuslu, papus sapsız ya da gaga benzeri bir uzantının (rostrum) ucundan çıkar. Kapitulumlar ya homogam (kapitulumdaki tüm çiçekler iki eşeyli) ya da heterogamdır

20 10 (kenardaki çiçekler pistillat ya da steril, içtekiler ise iki eşeyli). Bazen kapitulumlar tek eşeylidir. Bu durumda, bir kapitulumda yalnız dişi (pistillat) ya da erkek çiçek (staminat) bulunur (Seçmen vd 1998; Thorne, 2000; Arabacı, 2006) Achillea Cinsinin Betimi Çok yıllık otsu ya da yarı çalımsı bitki, kalın ya da ince odunsu rizomlu, rizomlar bazen sürünücü. Gövde dik ya da yükselici, silindirik ya da köşeli, düz, boyuna çizgili ya da derin oluklu. Yapraklar tamdan 3-4 pinnatipartite kadar, alternat. Kapitula heterogam, radiate, saplı ya da sapsızca, küçük ya da orta büyüklükte, genellikle uç kısımda korimbus şeklinde düzenlenmiş, çok nadiren tek, bazen basit şemsiye. İnvolukrum oblong-silindirik, ovoid, yarı küremsi ya da genişçe yarı küremsi. Fillariler 3-4 sıralı, dıştakiler içtekilere göre daha küçük, dar ya da genişçe şeffaf kenarlı. Çiçekler beyaz ya da sarı, bazen pembe; dilsi çiçekler dişi, tek bir daire halinde, laminanın uç kısmı ± loblu; tüpsü çiçekler hermafrodit, düzenli 5-dişli, korolla tüpü ± basık, tabanı akenin tepesini saran bir torba şeklinde. Reseptakulum ± düz ya da konveks, palealı, palea lanseolat ya da oblong, zarsı, paleanın ucuna kadar uzamayan orta damarlı. Aken oblong, oblanseolat ya da oblong-obovat, tüysüz, lineolat, lineat ya da subrobikulat, sırttan basık, kanatsız, ucu nispeten daha geniş, bazen kalın dudak şeklinde kanatlı, kahverengimsi-beyaz. Papus bulunmaz. Achillea türlerinde çiçek rengi önemli bir ayırtedici karakterdir. Fakat çiçeklerin rengi arazide geç evrede solmaktadır (Davis, 1975; Arabacı, 2006) Çalışmanın Amacı Bu çalışmada, Achillea (Asteraceae) cinsine ait Bingöl ilinde yetişen bazı taksonlarının uçucu yağ analizleri gerçekleştirildi. Taksonların uçucu yağ kompozisyonları kalitatif ve kantitatif olarak tayin edilerek, tür içi ve türler arası ilişkilerin ortaya konmasına çalışıldı. Çalışma ile kimyasalları bakımından değerli olan Achillea cinsi üyelerinden elde edilen ve birçok alanda kullanılan uçucu yağ kompozisyonlarının belirlenmesiyle, yenilenebilir doğal kaynakların değerlendirilmelerine önemli katkılar sağlanacağına inanılmaktadır. Taksonların uçucu yağlarından elde edilen kalitatif ve kantitatif veriler değerlendirildi ve bu taksonlar arasındaki ilişkiler Türkiye ve dünya örnekleriyle karşılaştırılarak cins içi ve taksonlar arası kemotaksonomik ilişkiler geniş anlamda tartışılmaya çalışıldı. Araştırma,

21 11 klasik ve modern yöntemlerin kullanılmasıyla, fitokimyasal alanda yapılmış bir çalışma olma özelliğindedir.

22 2. MATERYAL VE METOT 2.1. Bitki Örneklerinin Toplanması Bu çalışmada, Bingöl ilinde doğal olarak yetişen Achillea cinsine ait örnekler doğal habitatlarından alındı. Bitki örnekleri Bingöl il merkezi, Solhan, Yedisu, Kiğı ve Genç ilçelerinden toplanmıştır. Bitkilerin çiçekli formları araziden toplandı ve teşhisleri yapıldı. Ayrıca her taksona ait fotoğraflar herbaryum örnekleri hazırlanarak çekilip şekil 2-6 da gösterilmiştir. Bitkiler Bingöl Üniversitesi Herbaryumunda (BIN) saklanmaktadır. I. Achillea vermicularis Trin.: Bingöl, Sancak köyü, jipsli yamaçlar (1600 m, 10.VII.2012, Herb No: BIN-234) II. A. millefolium L. subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Karlıova- Kaynarpınarı köyü, yol kenarı, tarla, 2000 m, 10.VII.2012, Herb No: BIN-238 III. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Elmalı Köyü- Yedisu arası, tarla, 1520 m, 11.VII.2012, Herb No: BIN-239 IV. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Ilıcalar, Alatepe Köyü, tarla, 1200 m, 13.VI.2012, Herb No: BIN-241 V. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Bingöl-Muş karayolu Bingöl çıkışı, yol kenarı, step yamaçlar, 1150 m, 12.VI.2012, Herb No: BIN-240 VI. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Bingöl-Sancak arası, Su Düğünü Köyü, yol kenarı, jipsli yamaçlar, 1650 m, 11.VII.2012, Herb No: BIN-242 VII. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium: Bingöl, Genç-Çayırtepe Köyü arası, yol kenarı, tarla, 1200 m, 13.VI.2012, Herb No: BIN-243 VIII. Achillea filipendulina Lam.: Bingöl, Bingöl-Muş karayolu Bingöl çıkışı, yol kenarı, step yamaçlar, 1150 m, 12.VI.2012, Herb No: BIN-236

23 13 IX. Achillea coarctata Poir.: Bingöl, Solhan-Muş karayolu 15.km, step yamaçlar, 1200 m, 25.VI.2012, Herb No: BIN-237 X. Achillea arabica Kotschy. (Sin.: A. biebersteinii Afan.): Bingöl, Bingöl- Sancak arası Su Düğünü Köyü, yol kenarı, tarla, 1650 m,11.vii.2012, Herb No: BIN-235 Şekil 2.1. Çalışılan Achillea türlerinin araziden toplandığı Bingöl İl Haritası 2.2. Kimyasal Analizler İncelenen Achillea cinsine ait örneklerin kimyasal analizleri Agilent Technologies 7890A GC sistemi kullanılarak yapıldı. Bitki örneklerinin GC - FID - MS analiz sonuçları Tablo 1-5 de verildi.

24 Uçucu Yağların Elde Edilmesi Toplanan Achillea cinsine ait bitki örneklerinin toprak üstü organlarından uçucu yağlar elde edildi. Uçucu yağlar her bir takson için, 100 g kuru bitki örneğinden su distilasyonu yöntemiyle elde edildi. Bu amaçla Clevenger apareyi kullanılmış olup, kısaca mekanizma şöyledir; bitki materyali su ile birlikte distilasyon kabına konulur, materyal ve su karışımının ısıtılmasıyla, suyun kaynamasını takiben oluşan buharın soğutucu yüzeyde yoğunlaşması sonucu uçucu yağ ve su ayırma kabında toplanır. Yoğunluk farkından ötürü uçucu yağ suyun üzerinde yüzer ve böylece uçucu yağ elde edilmiş olur. Uçucu yağların verimi 100 g kuru bitki örneği üzerinden su distilasyonu yöntemi kullanılarak elde edilen % miktarı şeklinde ifade edildi Uçucu Yağların Kimyasal Analizi Uçucu yağın kompozisyonu kalitatif ve kantitatif anlamda belirlemek amacıyla, B.Ü Merkezi Araştırma Laboratuvarında bulunan GC - FID - MS (Gaz kromatografisi- Kütle spekrometrisi) cihazı kullanıldı. Kromatografik islemler Agilent Technologies 5975C insert MSD with Triple-Axis Detector sistemi, Agilent Technologies 7890A GC sistemi kullanılarak yapıldı. HP 88 kolon (60 m x 0,25 mm iç çaplı 0,25 μm) ve taşıyıcı gaz olarak Helyum kullanıldı; enjektör sıcaklığı 250 o C, split akış hızı 1,3 ml/dk., GC nin sıcaklığı 50 o C de 2 dk. ve 5 o C /dk. artışla 150 o C de ulaşıldı daha sonra 150 o C de 15 dk. bekletildi, 4 o C/dk ısınarak 240 o C ye ulaşıldı 240 o C de 15 dk. beklendi ve çalışma tamamlandı. Her bir bitki için GC-FID-MS cihazının çalıştırılma süresi toplam 74,5 dakikadır. Uçucu yağlardaki bileşenlerin karakterizasyonu elektronik kütüphaneler (WILEY, NIST) kullanılarak yapıldı.

25 3. BULGULAR 3.1. Kimyasal Bulgular Bingöl ilinde doğal yayılış gösteren altısı farklı lokaliteden toplanan A. millefolium. subsp. millefolium var. millefolium ait olan ve beş farklı Achillea taksonunun toplam on uçucu yağ analiz sonucu Tablo 1-5 de verilmiştir. Bitki örneklerinin taşımış oldukları uçucu yağ kompozisyonları ve gösterdiği varyasyonları da GC - FID - MS ile analiz edilerek tür içi ve türler arası kemotaksonomik ilişkilerin belirlenmesinde kullanıldı. Achillea cinsi Türkiye Florasında A, B ve C olmak üzere üç gruba ayrılmış olup, toplanılan örneklerden A. arabica, A. coarctata, A. filipendulina ve A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium B grubu; A. vermicularis ise C grubunda yer almaktadır. Bu taksonların tür içi ve türler arası ilişkileri uçucu yağ kompozisyonları belirlenerek taksonlar arasındaki varyasyon ve kemotaksonomik ilişkiler değerlendirilmiştir. İncelenen Achillea taksonlarına ait uçucu yağların GC - FID - MS kromatogramları Şekil 3.2, 4-9, 11, 13, 15 de verildi. Çalışılan bitkilerin 100 g kuru örneklerinden elde edilen uçucu yağ verimleri sırasıyla; A. vermicularis 0,6 ml; A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium un farklı lokalitelerindeki örneklerde Karlıova da 0,4 ml; Yedisu da 0,5 ml; Ilıcalar da 0,2 ml; Ekinyolu nda 0,3 ml; Sancak da 0,3 ml; Genç de 0,2 ml; A. filipendulina 0,2 ml; A. coarctata 0,2 ml ve A. arabica 0,4 ml olarak tespit edildi. A. vermicularis den elde edilen uçucu yağda toplam 22 bileşen tanımlandı ve bunlar da toplam yağın % 92,26 sını oluşturduğu tespit edildi. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 35,32) en yüksek miktarda olduğu ve bunu sırasıyla, endo-bornilasetat (% 13,75); piperiton (% 12,19) ve siloksipentan (% 8,42) ın takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 69,68 ini oluşturduğu görüldü.

26 16 A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Karlıova) dan elde edilen uçucu yağda toplam 29 bileşen analiz edildi ve bunlarında toplam yağın % 92,61 ini oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 28,88) en yüksek miktarda olduğu ve bunu da sırasıyla, trans-krizantenon (% 13,31), α-pinen (% 7,16), β-pinen (% 6,43) ve borneol (% 5,44) ün takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 61,22 sini oluşturduğu saptandı. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Yedisu) dan elde edilen uçucu yağda toplam 29 bileşen analiz edildi ve bu bileşenlerin toplam yağın % 95,90 ını oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, -sineol ün (% 24,33) en yüksek miktarda olduğu ve bu bileşeni sırasıyla, siklohekzanol (% 15,36), α-pinen (% 11,24), sabinen (% 10,18) ve endo-bornilasetat (% 8,81) ın takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 69,92 sini oluşturduğu belirlendi. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ilıcalar) dan elde edilen uçucu yağda toplam 31 bileşen tanımlandı ve tanımlanan bu bileşenlerin toplam yağın % 92,15 ini oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 33,28) en yüksek miktarda olduğu ve bunu sırasıyla, β-pinen (% 8,83), α-pinen (% 5,83) ve sabinen (% 5,56) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 53,50 sini oluşturduğu görüldü. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ekinyolu) dan elde edilen uçucu yağda toplam 28 bileşen analiz edildi ve bu bileşenlerin toplam yağın % 90,61 ini oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 31,18) en yüksek miktarda olduğu ve bunu da sırasıyla, β-bisabolenepoksit (% 8,51), 1,3,6-oktatrien (% 7,44), krizantenilasetat (% 4,34) ve sabinen (% 4,25) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 55,72 sini oluşturduğu saptandı. A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Sancak) dan elde edilen uçucu yağda toplam 26 bileşen analiz edildi ve bunların toplam yağın % 92,93 ünü oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, -sineol ün (% 23,86) en yüksek miktarda olduğu ve bu maddeyi sırasıyla, β-tuyon (% 23,46), sabinen (% 8,92), endo-bornilasetat (% 5,13) ve α- pienen (% 4,73) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % unu oluşturduğu belirlendi.

27 17 A. millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Genç) dan elde edilen uçucu yağda toplam 28 bileşen tanımlandı ve bu bileşenlerin toplam yağın % 95,26 sını oluşturduğu tespit edildi. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 25,31) en yüksek miktarda olduğu ve bunu da sırasıyla, sabinen (% 20,25), endo-bornilasetat (% 7,29), β-pinen (% 5,39), α-terpineol (% 4,46) ve α-pinen (% 4,21) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 66,91 ini oluşturduğu görüldü. A. filipendulina dan elde edilen uçucu yağda toplam 25 bileşen analiz edildi ve bunlarında toplam yağın % 95,94 ünü oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, 1,3- pentadien in (% 25,64) en yüksek miktarda olduğu ve bunu sırasıyla, 1,8-sineol (% 19,11), endo-bornilasetat (% 12,21), borneol (% 10,39), kamfen (% 5,84) ve santolinatrien (% 4,80) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 77,99 unu oluşturduğu saptandı. A. coarctata dan elde edilen uçucu yağda toplam 27 bileşen analiz edildi ve bunlarında toplam yağın % 92,53 ünü oluşturduğu belirlendi. Bu analizde, -sineol ün (% 34,22) en yüksek miktarda olduğu ve bunu da sırasıyla, kamfor (% 9,24), cis-sabinenhidrat (% 8,35), karyofillenoksit (% 7,59), borneol (% 7,20) ve α-terpineol (% 4,92) ün takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 71,52 sini oluşturduğu belirlendi. A. arabica dan elde edilen uçucu yağda toplam 26 bileşen tanımlandı ve bunlar da toplam yağın % 96,70 ini oluşturdu. Bu analizde, 1,8-sineol ün (% 42,33) en yüksek miktarda olduğu ve bu bileşeni sırasıyla, trans-krizantenon (% 12,71), α-pinen (% 8,29), β-simen (% 5,42) ve kamfen (% 5,10) in takip ettiği ve bu ana bileşenlerinde toplam yağın % 73,85 ini oluşturduğu görüldü.

28 18 Şekil 3.1. Achillea vermicularis in fotoğrafı A b u n d a n c e 1. 2 e T I C : A V C 1. D \ d a t a. m s 1. 1 e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.2. Achillea vermicularis uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı

29 19 Tablo 3.1. Achillea vermicularis uçucu yağının GC FID - MS analizleri ve yüzde oranları Achillea vermicularis No Madde RRI % Oran 1 α-pinen 948 1,01 2 Kamfen ,98 3 Sabinen ,51 4 -terpinen ,71 5 1,8-sineol ,32 6 β-simen ,36 7 1,3,5- trimetilbenzen ,46 8 Siloksipentan ,42 9 Artemisia alkol , thuyanol ,86 11 Filifolon ,70 12 Krizantenilasetat ,08 13 Endo-bornilasetat ,75 14 Kamfor ,85 15 Borneol ,99 16 E-osimenol ,42 17 Piperiton ,19 18 Verbenon ,16 19 Naftalen , Siklohekzen-1-on ,33 21 Spathulenol ,30 22 Krizantenon ,92 Toplam 92,26

30 20 Şekil 3.3. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium un fotoğrafı A b u n d a n c e T I C : A V C 4. D \ d a t a. m s 1. 3 e e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.4. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Karlıova) uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı

31 21 A b u n d a n c e 1. 1 e T I C : A V C 6. D \ d a t a. m s e e e e e e e e e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.5. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Yedisu) uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı A b u n d a n c e T I C : A V C 7. D \ d a t a. m s 1. 2 e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.6. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ekinyolu) uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı

32 22 A b u n d a n c e 8. 5 e T I C : A V C 8. D \ d a t a. m s 8 e e e e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.7. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Ilıcalar) uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı A b u n d a n c e T I C : A V C 9. D \ d a t a. m s 8 e e e e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.8. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Sancak) uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı

33 23 A b u n d a n c e T I C : A V C 1 0. D \ d a t a. m s 9. 5 e e e e e e e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil 3.9. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium (Genç) uçucu yağının GC - FID - MS kromatogramı Tablo 3.2. Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium uçucu yağlarının GC FID - MS analizleri ve yüzde oranları Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium No Madde RRI Karlıova Yedisu Ekinyolu Ilıcalar Sancak Genç % Oran % Oran % Oran % Oran % Oran % Oran 1 α-pinen 948 7,16 11,24 5,83 3,91 4,73 4,21 2 Kamfen ,30-0, ,64 3 β-pinen ,43 1,66 8,83 1,52 1,75 5,39 4 1,3,6-oktatrien ,44 1, karen , Sabinen ,27 10,18 5,56 4,25 8,92 20,25 7 α-terpinen ,57-1, ,93 8 Cis-osimen , ,6-oktadien , terpinen ,24-2,16-0,91 1, ,8-sineol ,88 24,33 33,28 31,18 23,86 25,31 12 β-simen ,97 3,28 3,47 1,95 1,97 3,39 13 Artemisiaketon , ,4-hekzadien , okten-3-ol ,73-0,40 0,80-0,54 16 Nonanal ,19-0, Artemisaalkol , thuyanol ,26 1,77 3,25 1,56 1,58 2,33 19 Trans-krizantenol , ,60-20 Linalool , ,09-21 Butanoik asid , β-thuyone ,46 -

34 24 Tablo 3.2. (Devam) Achillea millefolium subsp. millefolium var. millefolium uçucu yağlarının GC - FID - MS analizleri ve yüzde oranları 23 Artemisiaalkol , Krizantenilasetat ,73 1,87 0,82 4,34 1,25-25 Karyofillen ,45 2,33 0,85-1,53 26 Cis-sabinenhidat ,93 1,63-1,35-1,74 27 Lavandulolasetat , ,18-28 Benzaldehit ,32-0,63 0,35-0,26 29 Endo-bornilasetat ,57 8,81 3,96 1,78 5,13 7, thuyen ,33-31 Cis-verbanol , Kamfen , ,57-33 Kamfor ,48 3,92 1,90 1,47 2,80 34 Trans-krizantenon , , Bisiklo(2,2,1) heptan-3- one , Germakren-D , ,43 37 β-bisabolenepoksit , Siklohekzanol , butenal , siklohekzen-1-metanol , α-terpineol ,05 2,62 6,25 7,19 2,64 4,46 42 Endo-borneol , Mirtenal , Borneol ,44 0, ,87 2,97 45 α-fellandren-8-ol , Mirtenal , Karen ,26 48 E-osimenol ,21 49 Artemisia trien ,57 0,46 1, Mirtenol ,78 0,51-0, Cis-karveol ,34 0,32 0, siklohekzen-1-ol , Piperiton , ,15 54 Verbenon , β-bisabolen , ,45-56 Siklohekzen , himashalen , ,12 58 α-kopaen , ,03-59 α-kubeben , Karyofillen oksit ,92 1,51 0,20 0,95 0,64 0,98 61 Farnesol , Fenol , Spathulenol , ,30 0,55 64 Krizantenon , Siklohekzen ,24 66 Bisabolenoksit ,35-67 Azulen , naftalen metanol ,72-69 Adamanten ,52-0,16 0, Dehidroaromadendren ,27 0,24 0,51 0,74-0, siklohekzen-1-on ,11 0,71 TOPLAM 92,61 95,90 90,61 92,11 92,93 95,26

35 25 Şekil Achillea filipendulina nın fotoğrafı A b u n d a n c e T I C : A V C 5. D \ d a t a. m s 1. 1 e e e e e e e e e e e T im e - - > Şekil Achillea filipendulina uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı

36 26 Tablo 3.3. Achillea filipendulina uçucu yağının GC-FID-MS analizleri ve yüzde oranları Achillea filipendulina No Madde RRI % Oran 1 α-pinen 948 1,33 2 Santolinatrien 972 4,80 3 Kamfen ,84 4 β-pinen ,77 5 α-terpinen ,65 6 -terpinen ,46 7 1,8-sineol ,11 8 β-simen ,22 9 Trans-epoksiosimen , ,3-pentadien ,64 11 Artemisiaalkol , thuyanol ,44 13 Butanoikasit ,38 14 Cis-sabinenhidrat ,34 15 Endo-bornilasetat ,21 16 Borneol ,39 17 Karen ,43 18 Cis-karveol ,27 19 Trans-siklohekzen ,22 20 Verbenon ,24 21 α-kubeben , okten-4-on ,31 23 Spathulenol ,26 24 Siklooktanon ,08 25 Dehidroaromadendren ,18 Toplam 95,94

37 27 Şekil Achillea coarctata nın fotoğrafı A b u n d a n c e 7 e T I C : A V C 3. D \ d a t a. m s 6. 5 e e e e e e e e e e e e T i m e - - > Şekil Achillea coarctata uçucu yağının GC-FID-MS kromatogramı