Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay

Transkript

1 Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay TAM KAN, SERUM VEYA PLAZMA ÖRNEKLERİ İÇERİSİNDEKİ FARKLI ANTİKORLARIN, HIV-1 ve HIV-2'YE ONAYLANMASI VE AYRIŞTIRILMASI İÇİN KALİTATİF BİR TESTTİR /01

2 İçindekiler 1. KULLANIM AMACI TESTİN ÖZETİ VE AÇIKLAMASI PROSEDÜRÜN PRENSİBİ REAKTİFLER UYARILAR VE ÖNLEMLER ÖRNEKLER PROSEDÜR TESTİN KISITLAMALARI PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ BIBLIYOGRAFI VE REFERANSLAR

3 1. KULLANIM AMACI Bio-Rad Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay, parmaktan alınan tam kan, venöz tam kan, serum veya plazma örnekleri içindeki farklı antikorların İnsan İmmün Yetmezliği Virüsü Tip 1 ve 2'ye (HIV-1 ve HIV-2) onayı ve ayrıştırılması için tek kullanımlık immünokromatografik testtir. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay'in, tarama prosedürlerinde sürekli olarak reaktif oldukları tespit edilen örneklerde HIV-1 ve HIV-2 antikorlarının varlığını onaylayacak ek bir test olarak da kullanılması amaçlanmıştır. 2. TESTİN ÖZETİ VE AÇIKLAMASI İlk kez 1983 yılında ortaya çıkan İnsan İmmün Yetmezliği Virüsü (HIV), Edinilmiş Bağışıklık Sistemi Bozukluğu (AIDS) için etiyolojik ajan olarak tanımlanan bir retrovirüstür. AIDS hastalığı, immün savunma sisteminde kilit bir rol oynayan T-hücre lenfosit popülasyonundaki değişiklikler ile karakterize edilir. Virüs enfekte olan bireyde T hücrelerin bir alt popülasyonu olan T yardımcı hücrelerin tükenmesine neden olarak bu hastaları fırsatçı enfeksiyonlara ve bazı habisliklere karşı korumasız bırakır. Virüsün temel bulaşma yolları cinsel temas, kan veya kan ürünleri tarafından kontaminasyon ve anneden yeni doğmuş bebeğe geçmesidir yılında dünyada HIV/AIDS ile yaşayan yaklaşık 34 milyon insan vardı. Bu sayı 2001 rakamlarından %17 fazladır yılında 2,7 milyon [2,4-2,9] yeni HIV vakası ortaya çıkmıştır ve bunlardan [ ] vaka çocuklardır. Bu vaka sayısı 2001'den %15 daha azdır ve salgının tepe noktası olan 1997'nin %21 daha altındadır. HIV virüsü, bir kapsül ve bir kılıf içerisindeki genomik RNA molekülünden oluşmaktadır, ancak humoral antikor tepkimesinin ana hedefi HIV kılıfıdır. Virüsün varlığı hastalarda immün sisteminin HIV antikorları üretmesine neden olur. Bu antikorların tespit edilmesi bir tanı vasıtası olarak kullanılabilir. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay bir hızlı immünokromatografik testtir ve kullanımı basit ve kolaydır. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay serum, plazma veya tam kan örneklerinde HIV-1 ve HIV-2 antikorlarının tespit edilmesinde immobilize antijenlerden yararlanır. 3. PROSEDÜRÜN PRENSİBİ Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay konjugat olarak koloidal altın partiküllerine konjuge olan antikora bağlanan protein A ile membran solid fazlarına bağlanan HIV-1 (p31, gp160, p24, gp41) ve HIV-2 antijenleri kullanır (gp36, gp140). Örnek, SAMPLE + BUFFER çukurcuğuna uygulanır. Örnek ve tampon test şeridine taşındıktan sonra BUFFER çukurcuğuna ilave tampon eklenir. Tampon, serbest bırakılan ürünlerin gecikmeli akışını sağlar ve antikorların antijenlere bağlanmasını teşvik eder. Tepki veren bir örnekte HIV antikorları, TEST bölgesinde (bant 1 ila 6 arası) immobilize olmuş antijenler tarafından yakalanır: Koloidal altın protein A yakalanan antikorlara bağlanarak pembe/mor çizgiler ortaya çıkartır. HIV antikorlarının olmadığı durumda TEST bölgesinde pembe/mor çizgiler yoktur. Her iki durumda da örnek membran boyunca taşınmaya devam ettikçe, protein A'nın immobilize olduğu KONTROL'de (C) pembe/mor çizgiler oluşturur. Örnekteki immünoglobin G, membran solid fazın (C) bölgesinde immobilize olan protein A'ya bağlanır ve pembe/mor çizgi oluşturur. Bu Kontrol çizgisi örneklerin ve reaktiflerin doğru olarak uygulandığını ve cihaz içerisinden taşındığını gösterir. 1

4 Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay kaseti bir Kontrol bandı (C) ve altı (6) test çizgisine sahiptir ve bunlar kaset üzerinde aşağıda gösterildiği şekilde numaralanmıştır: Bant 1: gp36 (HIV-2, kılıf peptid) HIV-2 ENV Bant 2: gp140 (HIV-2, kılıf peptidler) HIV-2 ENV Bant 3: p31 (HIV-1, polimeraz peptid) HIV-1 POL Bant 4: gp160 (HIV-1, kılıf rekombinant protein) HIV-1 ENV Bant 5: p24 (HIV-1, çekirdek rekombinant protein) HIV-1 GAG Bant 6: gp41 (Grup M ve O) (HIV-1, kılıf peptidler) HIV-1 ENV CTRL bandı: Protein A 4. REAKTİFLER 4.1 Açıklama Etiket üzerindeki tanıtıcı Açıklama Sunum Cihaz TEST bölgesinde HIV-1 ve HIV2 antijenleri içeren nitroselüloz membran, KONTROL bölgesinde protein A ve 20 x 1 Kullanıma hazır BUFFER çukurcuğu bölgesinde koloidal protein A Buffer Koruyucu içeren tampon damlalığı (sodyum azit < %0,1, 1 x 5 ml Mikrotüp 15 µl gentamisin sülfat %0,125, streptomisin sülfat %0,125) 15 µl kapiler plastik pipetli mikrü tüp (antikoagülan içermez, parmak ucu protokolü için) Kullanıma hazır 1 x 20 Kullanıma Hazır 4.2 Saklama ve kullanma için gerekenler Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay (Cihaz ve Tampon), kit üzerinde belirtilen son kullanma tarihine kadar 2 C ila 30 C arasında saklanmalıdır. Dondurmayın. Test yapılıncaya kadar poşeti açmayın. Tampon ilk rutin kullanımdan sonra üzerinde yazılı son kullanım tarihine kadar stabildir. 2

5 5. UYARILAR VE ÖNLEMLER Yalnız in vitro teşhis içindir. Yalnız sağlık profesyonelleri tarafından kullanılmak içindir. 5.1 Sağlık ve Güvenlik önlemleri Bu test kiti sadece yeterli eğitime sahip personel tarafından kullanılmalıdır. Uygun kıyafetler, eldivenler ve göz/yüz koruma kullanın ve İyi Laboratuar uygulamaları kurallarına uygun şekilde çalışma yapın. Bu test kiti insan kanı bileşenleri içerir. Bilinen hiçbir test yöntemi enfeksiyona yol açan maddelerin yokluğunu tam garanti edemez. Bu nedenle tüm insan kanı türevleri, reaktifler ve insan kanı örnekleri, enfeksiyon hastalık bulaştırma kapasitesine sahip olarak yerel, bölgesel ve ulusal yönetmeliklerde tanımlanmış önlemler alınarak kullanılmalıdır. Biyolojik döküntüler: İnsan kaynaklı malzemeler döküldüğünde, potansiyel bulaşıcı oldukları kabul edilmelidir. Asit içermeyen döküntüler derhal kontaminasyondan arındırılmalıdır: Döküntü gerçekleşen bölge, malzemeler ve kontaminasyona maruz kalan yüzeyler ve ekipmanlar, dökülen numunelerin içerebileceği potansiyel biyolojik tehlikeler üzerinde etkili olan uygun bir kimyevi dezefektan (1:10 seyreltilmiş çamaşır suyu, %70-80 Etanol veya İzopropanol ve iodofor [örn. %0,5 Wescodyne Plus, vd.]) ile kontaminasyondan arındırılmalı, ardından silinerek kurulanmalıdır. NOT: Çamaşır suyu içeren çözeltileri otoklava koymayın. Tüm örnekleri ve test için kullanılan malzemeleri enfeksiyon unsuru içeriyormuşçasına bertaraf edin. Laboratuar kimyasalları ve biyolojik olarak tehlikeli atıklar yerel, bölgesel ve ulusal yönetmeliklere uygun şekilde atılmalıdır. Bu test kitinde bulunan kimyasal komponentlerle ilgili tehlikeler ve bunlardan korunma yöntemleri konusunda öneriler için lütfen etiketler üzerinde bulunan ve ayrıca bu kullanım talimatlarının sonunda yer alan resimli grafiklere başvurun. Güvenlik Veri Sayfası adresinde bulunabilir. 5.2 Prosedüre ilişkin önlemler Hazırlama Test kitini kullanmadan önce ürün prospektüsünün tamamını okuyun. Talimatlara dikkatle uyun; aksi takdirde hatalı sonuçlar elde edilebilir. Bu test kitinin, bu cihaz ile kullanılması onaylanmış örnek türleri dışındaki örneklerle kullanılması, sonuçların hatalı olmasına yol açabilir. Bu test 18 C ila 30 C ısı aralığında yapılmalıdır. Reaktifler soğukta saklanıyorsa, kullanım öncesinde oda ısısına stabilize olmaları için 30 dakika bekleyin. Cihazın poşetinde nem alıcı paket bulunmuyorsa, test cihazını KULLANMAYIN. Test cihazını atın ve poşetten içerisinde nem alıcı bulunan başka bir cihaz çıkartın. Poşet hasarlıysa test cihazını KULLANMAYIN. Her cihaz sadece tek kullanımlıktır. Son kullanma tarihi geçmiş test cihazını veya kiti kullanmayın. Test öncesinde son kullanma tarihini her zaman kontrol edin. Farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri karıştırmayın. Test sonuçlarının okunması için yeterli aydınlatmaya gerek vardır. 3

6 Eğer test kiti saklama aralığı olan 2 C ila 30 C dışında saklandıysa veya çalışma ısısı olan 18 C ila 30 C dışında kullanıldıysa, test performansının doğruluğunu Geenius HIV 1/2 Confirmatory Controls, Ref: ile kontrol edin İşleme Cihaz, içinde bulunduğu kapalı torba açıldıktan sonra 60 dakika içerisinde kullanılmalıdır. Test prosedürünü değiştirmeyin. 6. ÖRNEKLER Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay, venöz veya parmak ucundan alınmış tam kan, serum veya plazma örnekleri üzerinde uygulanabilir. 6.1 Örnek türleri Damardan Tam Kan Laboratuvarın venöz kan alma prosedürünü uygulayarak kanı alın. Örneği içerisinde sitrat, heparin veya EDTA bulunan bir örnek tüpüne alın. Örnek ile çalışmadan önce tüpteki kanı iyice karıştırın. Laboratuar pipeti kullanarak 15 µl kanı geri alın. Test Prosedürü talimatlarına uygun şekilde derhal test uygulayın. Parmak Ucu Tam Kan Kanı alınacak kişinin parmak ucunu antiseptik bez ile silin. Parmağın iyice kurumasını bekleyin veya steril bir gazlı bezle kurulayın. Steril bir lanset kullanarak parmağı ortasına yakın bir yerden delin ve ilk çıkan damlayı steri gazlı bezle alın. Parmağı sıkarak kan çıkışını hızlandırmayın; bu işlem kanın doku sıvısı ile aşırı sulanmasına neden olabilir. İkinci damladan başlayarak15 µl örnek alın; aşağıdaki prosedürü uygulayarak kit içindeki tek kullanımlık Miktotüp pipetini kana dokundurun ve pipeti doldurun. Test Prosedürü talimatlarına uygun şekilde derhal test uygulayın. Serum veya Plazma Laboratuvarın serum veya plazma örneği alma prosedürünü uygulayarak kanı alın. Serum örneklerini pıhıtlaşma ajanı içeren tüplerin içerisine alın; bu tüplerde antikoagülan (serum) olmamalıdır. Plazma örneklerini içerisinde sitrat, heparin veya EDTA bulunan örnek tüplerine alın. Standart laboratuar prosedürlerini uygulayarak örneği temiz bir kap içerisine alın. Örnek ile çalışmadan önce tüpteki serum veya plazmayı iyice karıştırın. Laboratuar pipeti kullanarak 5 µl örneği geri alın. Test Prosedürü talimatlarına uygun şekilde derhal test uygulayın. 6.2 Örneklerin Kullanılması Parmak ucu tam kan toplandıktan hemen sonra test edilmelidir. Venöz tam kan derhal test edilebilir veya toplandıktan sonra test edilmeden 2 C ila 8 C ısıda 3 gün süreyle saklanabilir. TAM KANI DONDURMAYIN Damardan alınmış serum ve plazma örnekleri derhal test edilebilir veya toplandıktan sonra test edilmeden 2 C ila 8 C ısıda 7 gün süreyle saklanabilir. Uzun süreli saklama gerekiyorsa serum ve plazma numuneleri dondurulmalıdır (-20 C veya daha altında). Örnekler 5'den fazla dondurma çözme döngüsüne maruz kaldıysa kullanılmamalıdır. Örnekleri çözüldükten sonra nazikçe ama iyice karıştırın ve oda ısısına getirin. İçerisinde 200 mg/l bilirubin bulunan örneklerde veya 33 g/l triolein bulunan lipemik örneklerde veya 2 g/l hemoglobin bulunan hemolize örneklerde hiçbir etkileşim gözlemlenmemiştir. Anormal yüksek albuminemi veya proteinemi (120 g/l) bulunan örneklerde de etkileşim görülmemiştir. 4

7 6.3 Örneklerin taşınması Örneklerin taşınması gerekiyorsa, bunlar etiyolojik ajanların taşıması için belirlenmiş olan yönetmeliklere uygun şekilde paketlenmeli ve nakledilmelidir. Venöz tam kan örnekleri soğuk paketler veya ıslak buz içerisinde soğutularak nakledilmelidir. Serum ve plazma örnekleri kuru buz ile dondurularak nakledilmelidir. 7. PROSEDÜR 7.1 Gerekli olan malzemeler Sağlanan malzemeler Her kit içerisinde Cihaz (20 ünite), Tampon Damlalığı (1 x 5 ml) ve Mikrotüpler 15 µl (1 x 20). Bkz. 4.1 Açıklama. Gerekli olan ve ayrıca temin edilen malzemeler Geenius HIV 1/2 Confirmatory Controls, Ref: Gerekli olan ama sağlanmamış malzemeler Saat veya benzer bir zaman tutma cihazı. 5 µl (serum/plazma) ve 15 µl (venöz kan) numunesi taşıyabilecek pipetleyici. Tek kullanımlık eldivenler. Biyolojik atık kapları. 7.2 Reaktif hazırlama Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay'in tüm bileşenleri takdim edildikleri durumda kullanıma hazırdır. 7.3 Test Prosedürü Tam Kan için PROSEDÜR 1. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay cihazını poşetinden çıkartın ve yassı bir yüzeye yerleştirin (kurutucunun poşetten çıkatılması gerekmez). NOT: Poşette kurutucu paketi bulunmuyorsa KULLANMAYIN. Test cihazını atın ve yeni bir test cihazı kullanın. Test cihazını hasta kodu veya tanımlayıcı numara ile etiketleyin (bakınız şekil 1, aşağıda). Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay'in Test alanında altı (6) adet renkli çizgi bulunmaktadır (Control alanında mavi çizgi yoktur); Bu 6 renkli çizgiden herhangi biri eksikse test cihazını KULLANMAYIN. Test cihazını atın ve yeni bir test cihazı kullanın. Şekil 1 5

8 Venöz Tam Kan Örnek hazırlamak için lütfen 6.1 Örnek türleri bölümüne bakın. Parmak Ucu Tam Kan Örnek hazırlamak için lütfen 6.1 Örnek türleri bölümüne bakın. Adım 1: 15µL Mikrotüpü yatay olarak tutun ve ucu ile kan damlasına dokundurun. Kapiler hareket otomatik olarak dolum çizgisine kadar örnek çeker ve durur. Adım 2: Örneği çıkartmak için tüpün ucunu örnek hedefi ile hizalayın ve pompayı sıkın. Örnek çıkmıyorsa tüpü dik tutun ve hava deliğinin üzerine parmağınızı tutun. Ardından uç ile örnek hedefi hizalayın ve pompayı sıkın. 2. Cihazdaki SAMPLE + BUFFER 1 Kuyucuğunun merkezine 15 µl tam kanı dağıtın (bkz. Şekil 2, aşağıda). Venöz tam kan için laboratuar pipeti kullanın. Parmak ucu tam kan için kit içerisindeki 15 µl Mikrotüp protokolünü uygulayın (bkz adım 1 ve 2, yukarıda). 3 Örneğin eklenmesinden hemen sonra Tampon damlalığını kullanarak SAMPLE + BUFFER kuyucuğu 1 içine 2 damla Tampon ekleyin (bkz. Şekil 3, aşağıda). Şekil 2 Şekil 3 6

9 Şekil dakika bekleyin, mavi renkli 6 TEST çizgisi dört köşeli TEST alanından kaybolmuş olmalıdır. Kaybolmadıysa test cihazını atın ve prosedürü yeni bir test cihazı kullanarak tekrarlayın. NOT: Membran üzerinde hafif bir mavimsi veya yeşilimsi bir renk kalabilir. Ancak bu noktada renkli çizgilerin hiçbiri görülüyor olmamalıdır. Tampon damlalığını kullanarak BUFFER Kuyucuğu 2 içine 5 damla tampon (150 µl) ekleyin (beyaz kapak) (bkz. Şekil 4, aşağıda). 5. BUFFER kuyucuğu 2 içine Tampon ekledikten 20 ila 30 dakika sonra test sonuçlarını okuyun. 30 dakikadan sonra sonuçları okumayın Sonuçları aydınlık bir yerde okuyun. NOT: Kullanılmış pipet uçlarını, test cihazını ve diğer tüm test malzemelerini biyolojik atık kabına atın. Serum veya Plazma PROSEDÜRÜ Örnek hazırlamak için lütfen 6.1 Örnek türleri bölümüne bakın. 1. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay cihazını poşetinden çıkartın ve yassı bir yüzeye yerleştirin (kurutucunun poşetten çıkatılması gerekmez). NOT: Poşette kurutucu paketi bulunmuyorsa KULLANMAYIN. Test cihazını atın ve yeni bir test cihazı kullanın. Test cihazını hasta kodu veya tanımlayıcı numara ile etiketleyin (bakınız şekil 1, aşağıda). Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay Test alanında altı (6) adet renkli çizgi bulunmaktadır (Control alanında mavi çizgi yoktur); Bu 6 renkli çizgiden herhangi biri eksikse test cihazını KULLANMAYIN. Test cihazını atın ve yeni bir test cihazı kullanın. Şekil 1 7

10 2. Bir laboratuar pipeti kullanarak cihazdaki SAMPLE + BUFFER Kuyucuğu 1 içerisine 5 µl tam serum/plazma dağıtın (bkz. Şekil 2, aşağıda). 3 Örneğin eklenmesinden hemen sonra seyreltici damlalığını kullanarak SAMPLE + BUFFER Kuyucuğu 1 içine Tampon damlalığından 2 damla (60µl) Tampon ekleyin (bkz. Şekil 3, aşağıda). Şekil 2 Şekil dakika bekleyin.mavi renkli 6 TEST çizgisi dört köşeli TEST alanından kaybolmuş olmalıdır. Kaybolmadıysa test cihazını atın ve prosedürü yeni bir test cihazı kullanarak tekrarlayın. NOT: Membran üzerinde hafif bir mavimsi veya yeşilimsi bir renk kalabilir. Ancak bu noktada renkli çizgilerin hiçbiri görülüyor olmamalıdır. Seyreltici damlalığını kullanarak BUFFER Çukurcuğu 2 içine 5 damla (150 µl) tampon ekleyin (yeşil kapak) (bkz. Şekil 4, aşağıda). Şekil 4 BUFFER kuyucuğu 2 içine Tampon ekledikten 20 ila 30 dakika sonra test sonuçlarını okuyun dakikadan sonra sonuçları okumayın Sonuçları aydınlık bir yerde okuyun. NOT: Kullanılmış pipet uçlarını, test cihazlarını ve diğer tüm test malzemelerini biyolojik atık kabına atın. 7.4 Kalite Kontrol Bütünleşik kalite kontrol özelliği Kontrol çizgisi bütünleşik bir dahili kontrol işlevi görür ve örnek ekleme ve düzgün test performansının onaylanmasını sağlar. Test doğru şekilde gerçekleştirildiyse ve cihaz düzgün çalışıyorsa KONTROL (C) alanında pembe/mor bir çizgi görülür (Lütfen bakınız: Test Sonuçlarının Yorumlanması) Dış Kalite Kontrol Geenius HIV 1/2 Confirmatory Controls, Ref: ayrı olarak temin edilir ve Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay ile kullanılır. 8

11 Geenius HIV 1/2 Confirmatory Controls'in aşağıdaki koşullarda yapılması tavsiye edilir: Yeni bir test kiti lotunu açarken. Yeni test kiti partisi alındığında. Test kiti saklama ısısı 2 C ila 30 C aralığının dışında kaldıysa. Test kiti saklama ısısı 18 C ila 30 C aralığının dışında kaldıysa. Kullanıcının tesisi için belirlenmiş düzenli aralıklarla. 7.5 Test Doğrulama Kriterleri BANT reaktivitesi Tüm görülebilen bantlar, silik de olsalar, reaktif olarak kabul edilmelidir. Doğrulama kriterleri GEÇERLİ: Bir test, TEST çizgisi alanında bir çizgi görülüp görülmemesine bakılmaksızın, ancak KONTROL (C) alanında pembe/mor bir çizgi görülürse geçerlidir. (Kontrol Bandı koyu olmalıdır: Kontrol Bandının soluk renk olması kabul edilmez) GEÇERSİZ: KONTROL (C) alanında belirgin bir pembe/mor çizgi yoksa (soluk bant da dâhil), test GEÇERSİZ kabul edilir. GEÇERSİZ test yorumlanamaz. Örnek testinin yeni bir cihaz ile tekrarlanması gereklidir. 7.6 Sonuçların Yorumlanması Aşağıdaki açıklamalar Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay tarafından HIV-1 ve/veya HIV-2 antikorlarının varlığını tespit etmek için kullanılan kriterleri tanımlamaktadır. Kullanıcı daha sonra her test için, aşağıdaki Sonuçların Yorumlanması Tablosuna uygun olarak kombine tip spesifik bant profillerini analiz etmelidir Yorumlama kriterleri HIV-1 Yorumlama kriteri Yorum POZİTİF NEGATİF BELİRSİZ Bio-Rad kriteri 1 ENV - gp160 (Bant 4) veya gp41 (Bant 6) dâhil 4 HIV-1 test çizgilerinin en az 2 bandı Bant yok 1ENV (Bant 4 veya 6) 1GAG (Bant 5) 1POL (Bant 3) 1GAG ve 1POL (Bant 5 ve 3) HIV-2 Yorumlama kriteri Yorum POZİTİF NEGATİF Bio-Rad kriteri 2 HIV-2 bantı görülmelidir: gp36 ve gp140 (Bant 1 ve 2) Bant yok BELİRSİZ 1 ENV: gp36 (Bant 1) veya gp140 (Bant 2) 9

12 gp36 (Bant 1) tek başına gp140 (Bant 2) tek başına GLOBAL HIV-1/HIV-2 Yorumlama kriterleri Aşağıdaki Sonuçların Yorum tablosu, Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay'in her test için gözlemlenen kombine tip spesifik bant desenlerini yorumlama kriterlerini tanımlamaktadır. HIV-2 SONUÇ HIV-1 SONUÇ GLOBAL TEST YORUMLAMA Negatif Negatif HIV NEGATİF Belirsiz Negatif HIV-2 BELİRSİZ Negatif Belirsiz HIV-1 BELİRSİZ Belirsiz Belirsiz HIV BELİRSİZ Negatif Pozitif HIV-1 POZİTİF Belirsiz Pozitif HIV-1 POZİTİF Pozitif Negatif HIV-2 POZİTİF Pozitif Belirsiz HIV-2 POZİTİF Pozitif Pozitif durum 1 = 1 ENV HIV-1 (gp 160 veya gp41) + GAG veya POL durum 2 = 2 ENV HIV-1 (gp 160 ve gp41) +/- GAG ve/veya +/-POL HIV-2 POZİTİF (HIV-1 çapraz reaktiviteli) HIV POZİTİF TİPLENDİRİLEMEYEN 10

13 8. TESTİN KISITLAMALARI 8.1 Genel Kısıtlamalar 1. Görsel olarak okuma iki farklı teknisyen veya iki farklı test arasındaki nihai sonuçların değişkenlik göstermesine neden olabilir: Bu fark görsel değerlendirmenin öznelliğiyle ilişkilendirilebilir. 2. Reaktif bir sonuç elde edildiğinde test çizgilerinin yoğunluğu, her zaman örnekte antikor titresi bulunduğu anlamına gelmez. 3. HIV-1 Pozitif veya HIV-2 Pozitif olduğu onaylanmış bir kişinin virüs tarafından enfekte edildiğini varsayılabilir. Ancak HIV aşısı araştırmalarında yer alan bir kişi aşıya karşı antikorlar geliştirmiş olabilir ve HIV virüsü ile enfekte edilmiş veya edilmemiştir. 4. HIV-1 ve/veya HIV-2 ile enfekte olmuş ve yüksek derecede aktif antiretroviral tedavi (HAART) görmekte olan bireyler yalancı negatif sonuç verebilir. 5. HIV-1 (grup M ve grup O) ve HIV-2 virüslerinin değişkenliği, yalancı negatif reaksiyonların olasılığını ortadan kaldırmaz. Bilinen hiçbir test yöntemi HIV virüsünün bulunmadığının garantisini sunamaz. 6. Reaktif olmayan bir sonuç HIV virüsüne maruz kalınmadığı veya HIV enfeksiyonu olmadığı anlamına gelmez. Virüse yakın zamanda maruz kalındıysa antikor tepkisinin ortaya çıkması ve tespit edilebilir seviyeye gelmesi aylar sürebilir. Enfeksiyonun ilk aşamasında pozitif bir tarama testi ile ilişkili onay testi negatif çıkabilir; bu negatif sonuç ise test edilen örnekte Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay tarafından tespit edilebilecek anti-hiv antikorların bulunmadığını gösterir. Ancak, böylesi bir sonuç yakın zamanda HIV-1/HIV-2 enfeksiyonu gerçekleştiği ihtimalini ortadan kaldırmaz. Daha sonra yeni bir örnek test edilmelidir. 7. Belirsiz bir sonuç HIV virüsüne maruz kalınmadığı veya HIV enfeksiyonu olmadığı anlamına gelmez. Virüse yakın zamanda maruz kalındıysa antikor tepkisinin ortaya çıkması ve tespit edilebilir seviyeye gelmesi aylar sürebilir. Enfeksiyonun ilk aşamasında pozitif bir tarama testi ile ilişkili onay testi belirsiz çıkabilir; bu belirsiz sonuç ise test edilen örnekte Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay tarafından tespit edilebilecek anti-hiv antikorların bulunabileceğini gösterir. Ancak, böylesi bir sonuç yakın zamanda HIV-1/HIV-2 enfeksiyonu gerçekleştiği ihtimalini ortadan kaldırmaz. Daha sonra yeni bir örnek test edilmelidir. 8. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay, HIV-1 ve/veya HIV-2 enfeksiyonu teşhisine yardımcı olarak kulanım amaçlıdır. HIV ve AIDS ile ilişkili durumlar ve klinik sendromlar ve bunların teşhisi yalnız klinik olarak gerçekleştirilebilir. 9. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay YALNIZ kapiler kan, tam venöz kan, serum veya plazma ile kullanılmalıdır. Başka tür örnekler kullanarak veya içerisinde sitrat, heparin veya EDTA haricinde bir antikoagülan bulunan tüp içindeki venipunktür tam kan örnekleri üzerinde test uygulanması, doğru sonuç elde edilmesini engeller. 10. Geenius HIV 1/2 Confirmatory Assay doğru sonuç elde etmek için ürünün prospektüsünde belirtilen talimatlara uygun şekilde kullanılması gerekir. 11. Test sonuçlarının, BUFFER kuyucuğu 2 içerisine Yürütme Tamponu eklenmesinin ardından 20 dakika geçmeden veya 30 dakikayı aştıktan sonra okunması hatalı sonuçlar alınmasına neden olabilir. 8.2 Test Yorumlama kısıtlamaları "Belirsiz" profil aşağıdaki durumlardan birinin olmadığını kanıtlamaz: serokonversiyon veya başka retrovirüslerle çapraz reaksiyon. HIV-1 ve HIV-2 virüsleri arasındaki homoloji, HIV-2 ve HIV-1 virüslerine karşı, hem anti-hiv-1 hem de anti-hiv-2 antikorları arasında çapraz reaktiviteye neden olabilir. HIV-1 pozitif kriterlerine uyan örnekler, bazı ender vakalarda HIV-2 Zarf bantlarından biri üzerinde çapraz reaktivite sergileyebilir. Çoğu vakada, tek HIV-1 enfeksiyonunu onaylayan böylesi bir profil, çok ender vakalarda olası bir sekonder HIV-2 serokonversiyonu (surenfeksiyon) olasılığını hariç tutamaz. 11

14 HIV-2 pozitif kriterini karşılayan örnekler bir veya daha fazla HIV-1 bandında çapraz reaktivite sergileyebilir. Çoğu vakada bir HIV-2 pozitif profili ile ilişkilendirilen bir HIV-1 belirsiz profili, tek bir HIV-2 enfeksiyonunu onaylar. Ancak, sekonder HIV-1 serokonversiyon (Surenfeksiyon) olasılığını hariç tutmaz. HIV-1 ve HIV-2 pozitif kriterlerinden her ikisini de karşılayan örnekler, genellikle tespit edilmiş yalnız tek bir zarf bandı (gp160 veya gp41) bulunduğunda çapraz reaktivite gösteren HIV-2 pozitif örneklerdir. Bu profiller ender rastlanan HIV-1 ve HIV-2 birlikte enfeksiyon olasılığını hariç tutmaz. 4 zarf bandının tamamının tespit edildiği HIV tiplendirilemeyen örnekler (HIV-1 env tamamı ve HIV-2 env) çoğu durumlarda, HIV-1 reaktivitesinden görsel olarak ayırt edilemeyen HIV-2 reaktivitesine sahip HIV-2 pozitif örneklerdir. Böyle profiller HIV1 ve HIV2 enfeksiyon olasılığını hariç tutmaz. HIV-1 ve HIV-2 pozitif kriterlerinin her ikisini de karşılayan örnekler, ender vakalarda HIV-2 çapraz reaktivitesi gösteren HIV-1 pozitif örneklerdir. 9. PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ 9.1 Hassasiyet Çalışması Farklı HIV durumlarında sahip (HIV negatif, HIV-1 pozitif, HIV-2 pozitif), 3 serum ve 3 tam kan örneğinden oluşan bir doğruluk paneli (N=6) test edilmiştir. Her hassasiyet çalışması ve panel üyesi için, örnek durumu ile karşılaştırıldığında doğru olarak tanımlanan tepkime sayısı olarak, bir uzlaşma yüzdesi belirlenmiştir Tekrarlanabilirlik Hassasiyet paneli aynı çalışma sırasında 10 tekrar ile test edilmiştir. Tekrarlanabilirlik ölçümü HIV negatif, HIV-1 pozitif ve HIV-2 pozitif için %100 uyumlu olarak bulunmuştur. Panel üyesi Serum için tekrarlanabilirlik sonuçları Tam kan için tekrarlanabilirlik sonuçları N NEG BELİRSİZ POZ uyum N NEG BELİRSİZ POZ uyum HIV NEG % % HIV-1 POZ % % HIV-2 POZ % % Ara hassasiyet Çalışma ve Günlere yayılan hassasiyet Serum hassasiyet paneli, 10 gün süreyle, günde 2 kez çalışarak ve her çalışma iki kez tekrarlanarak test edilmiştir; tam kan hassasiyeti 3 gün süreyle, günde iki kez çalışarak ve her çalışma üç kez tekrarlanarak test edilmiştir. Çalışmadan çalışmaya ve günden güne hassasiyet, HIV negatif, HIV-1 pozitif ve HIV-2 pozitif örnekler için %100 uyum yüzdesiyle bulunmuştur. Panel üyesi Serum için çalışma ve gün hassasiyet sonuçları Tam kan için çalışma ve gün hassasiyet sonuçları N NEG BELİRSİZ POZ uyum N NEG BELİRSİZ POZ uyum HIV NEG % % HIV-1 POZ % % HIV-2 POZ % % Lot ve Operatör hassasiyeti Hassasiyet paneli 3 gün süreyle günde 1 kez 3 operatör tarafından 2 reaktif lotunda ikişer kez test edilmiştir. Operatör içi ve parti içi hassasiyet, HIV negatif, HIV-1 pozitif ve HIV-2 pozitif örnekler için %100 uyum yüzdesiyle bulunmuştur. 12

15 Panel üyesi Serum için Lot ve Operatör hassasiyet Tam Kan için Lot ve Operatör hassasiyet sonuçları sonuçları N NEG BELİRSİZ POZ Uyum N NEG BELİRSİZ POZ Uyum HIV NEG % % HIV-1 POZ % % HIV-2 POZ * 100% % * 2 tekrarlı HIV-1 çapraz reaktivite vermiştir 9.2. Klinik performans Teşhis Spesifikliği Kan donörleri Seçilmemiş ve ilk kez donör olan 300 kişiden alınan 400 örnek (serum, plazma venöz kan), bir kan bankası tesisinde Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile test edilmiştir. Test sonucunda 398 örnek negatif ve 2 örnek belirsiz sonuç vermiştir. Toplam örneklerin 0.5% (2/400) ini temsil eden belirsiz sonuçlar yalnış pozitif olarak kabul edilmemiştir. Genel spesifite (doğru negative/doğru negative + yalnış pozitif) 95% [99.1; 100.0] güven aralığı ile 398 örnek üzerinden 100.0% (398/398) dür. Kan Donörleri spesifikliği Serum (SSTII Gel sep) Plazma (*) (EDTA-K2) Tam venöz kan (EDTA-K2) TOPLAM 300 donör Toplam örnek sayısı Negatif Belirsiz Pozitif (**) (**) 0 (*) tam venöz kan ile eşleştirilmiş plazma örnekleri aynı 100 donörden alınmıştır (**) Belirsiz sonuçların yanlış pozitif/ileri araştırmalara gerekliliği dikkate alınmamıştır. Spesifiklik (%) (98/98) (100/100) (200/200) (398/398) 95 CI (%) [ ] [ ] [ ] [ ] Hastanede yatan hastalar ve hamile kadınlar Hastanede yatmakta olan toplam 326 hastadan alınan 508 örnek Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile 2 farklı tesiste test edilmiştir. Bu hastalar arasında 99 yalnız serum örnekleme, 100 yalnız tam kan örnekleme, 72 serum ve tam kan örneklemenin her ikisi sw, 30 serum, plazma ve tam kan örneklemenin üçü de ve 25 serum, plazma ve kapiler kan örneklemenin üçü de uygulanmıştır. Hamile kadınlardan alınan 30 serum da 2 tesiste test edilmiştir. Venöz tam kan ve plazma örnekleri EDTA-K2 tüplerinde ve serum örnekleri jel ayırıcılı SSTII tüplerinde toplanmıştır. Kapiler kan toplamak için antikoagülan kullanılmamıştır. 529 örnek negatif 9 örnek belirsiz test sonucu vermiştir. Toplam örneklerin 1.7% (9/538) ini temsil eden belirsiz sonuçlar yalnış pozitif olarak kabul edilmemiştir. Genel spesifite (doğru negative/doğru negative + yalnış pozitif) 95% [99.3; 100.0] güven aralığı ile 529 örnek üzerinden 100.0% (529/529) dür. 13

16 Tesis Hasta Taze Serum (SSTII Gel) Taze Plazma (EDTA- K2) Taze Venöz Kan (EDTA-K2) Taze Kapiler Kan Toplam örnek Merkez / / / / / 100 / 100 / 100 Merkez / 72 / 144 / / 90 / / / 75 Merkez 5 / / / / Toplam Negatif Belirsiz / 5(*)(***) 1(*)(***) 1(*)(***) 0 7 (***) 2 (***) 9 (***) Pozitif Spesifiklik / (%) (221/221) (54/54) (201/201) (25/25) (501/501) (28/28) (529/529) 95 CI [ [ [ [ / [ ] N/A(**) N/A(**) (%) 100.0] 100.0] 100.0] 100.0] (*) 1 hasta serum, venöz tam kan ve plazma için belirsiz sonuç vermiştir. (**) toplam sayı N<30 olduğunda uygulanamaz (***)Belirsiz sonuçların yanlış pozitif/ileri araştırmalara gerekliliği dikkate alınmamıştır. Tesis Hasta Tarama sırasında yalancı pozitif veren kan donörleri HIV ELISA tarama testi ile yalancı pozitif sonuçlar veren donörlerden toplanan toplam 275 serum örneği Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile iki farklı klinik tesiste test edilmiştir. 258 örnek negatif 17 örnek belirsiz test sonucu vermiştir. Toplam örneklerin 6.2% (17/275) ini temsil eden belirsiz sonuçlar yalnış pozitif olarak kabul edilmemiştir. Genel spesifite (doğru negative/doğru negative + yalnış pozitif) 95% [98,6; 100.0] güven aralığı ile 258 örnek üzerinden 100.0% (258/258) dir. Kan Donörleri spesifikliği Toplam örnek sayısı Negatif Belirsiz Pozitif TOPLAM (*) donör (*)Belirsiz sonuçların yanlış pozitif/ileri araştırmalara gerekliliği dikkate alınmamıştır. Spesifiklik (%) 100,0 (258/258) 95 CI (%) [98,6-100,0] Teşhis Duyarlılığı HIV-1 ile enfekte olmuş hastalar 2 farklı tesisteki 263 hastadan alınmış HIV-1 ile enfekte olmuş ( tesis 1'den 155 hasta ve tesis 2'den 108 hasta) toplam 599 örnek Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile test edilmiştir Tesis 1'de, 108 taze serum ve eşleşmiş plazma, 5 taze serum ve 50 genotipleştirilmiş HIV-1 suşu (2 CRF01, 5 CRF02, 1 CRF05, 1 CRF06, 2 CRF09, 1 CRF11, 1 CRF12, 1 CRF13, 1 CRF14, 1 CRF15, 1 CRF18, 1 CRF19, 1 CRF22, 1 CRF27, 1 CRF30, 1 CRF36, 1 CRF42, 4 alt tip A, 5 alt tip B, 2 alt tip C, 2 alt tip D, 2 alt tip F, 2 alt tip G, 2 alt tip H, 2 alt tip J, 1 alt tip K, 5 grup O) örnekleri test edilmiştir. İkinci tesiste 108 hasta arasından 82 hasta taze kan, serum ve plazma örnekleri, 20 hasta tam kan, kapiler tam kan, serum ve plazma örnekleri ve 6 hasta kapiler tam kan, serum ve plazma örnekleri temin etmiştir. Venöz tam kan ve plazma örnekleri EDTA-K2 tüplerinde ve serum örnekleri jel ayırıcılı SSTII tüplerinde toplanmıştır. 599 örneğin tamamı HIV-1 pozitif olarak test edilmiş ve bu da toplam duyarlılı %100,0% (599/599), güven aralığını %95 [99,4-100,0] olarak vermiştir. Hastalardaki HIV-1 duyarlılığı %100 (263/263) olmuştur. Toplam 599 örnek arasından 3 örneğin HIV-1 pozitif yerine HIV tiplendirilemeyen olarak bulunmuştur. Bu nedenle Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay'in HIV-1/2 ayırt edebilme kapasitesi %99,5 (596/599) güven aralığı %95 [98,5-99,9] olmuştur. 14

17 Tesis Hasta Taze Serum (SSTII Gel) Genotipleştirilmiş serum Taze Plazma (EDTA-K2) Taze Venöz Kan (EDTA-K2) Taze Kapiler Kan Toplam örnek Merkez / / / 200 N= / / / / 5 50 / 50 / / / 50 Merkez / / 246 N= / / 6 / 6 18 Toplam HIV-1 Pozitif HIV tiplendirilemeyen 0 1 1(*) 1(*) 0 Hassasiyet (%) 100,0 (113/113) 100,0 (50/50) 100,0 (208/208) 100,0 (202/202) 95 CI [98,2 - [97,8-100,0] (%) 100,0] (*) venöz kan ile eşleştirilmiş plazma örnekleri aynı HIV-1 ile enfekte olmuş hastadan alınmıştır (**) toplam sayı N<30 olduğunda uygulanamaz 100,0 (26/26) [98,2-100,0] N/A(**) 100,0 (599/599) [99,4-100,0] HIV-2 ile enfekte olmuş hastalar 172 hastadan alınmış HIV-2 ile enfekte olmuş toplam 283 örnek (serum, plazma, venöz kan ve kapiler kan, aynı hastalardan toplanmış bazı eşleştirilmiş örneklerle birlikte) Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile üç klinik tesiste test edilmiştir. 66 serum örneği iki klinik tesisin örnek kolleksiyonundan temin edilmiştir. Geri kalan örnekler hastalardan taze olarak toplanmıştır. Venöz tam kan ve plazma örnekleri EDTA-K2 veya EDTA-K3 tüplerinde ve toplanan serum örnekleri jel ayırıcılı SSTII tüplerinde veya kuru tüplerde toplanmıştır. 281 örnek HIV pozitif olarak ve 2 örnek HIV-2 belirlenemez olarak test edilmiştir. Aynı hastadan toplanan serum ve tam kan içinde iki HIV-2 belirsiz sonuç (gp140 tespit edilemedi) elde edilmiştir ve aynı hastadan toplanan tam kan, CE işaretli bir HIV I/II onay testi ile gp105 negatif bulunmuştur. Toplam örneklerin 0.7% (2/283) ini temsil eden belirsiz sonuçlar yalnış pozitif olarak kabul edilmemiştir. Genel spesifite (doğru negative/doğru negative + yalnış pozitif) 95% [98,7; 100.0] güven aralığı ile 281 örnek üzerinden 100.0% (281/281) dir. 283 örnekten 172 tanesi doğru şekilde HIV-2 pozitif (HIV-1 çapraz reaktivitesine sahip olarak veya olmayarak) veya HIV-2 belirlenemez olarak ve 111 HIV tiplendirilemeyen olarak bulunmuştur. Bu nedenle Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ayırt edebilme kapasitesi %60,8 (172/283), güven aralığı %95 [54,8-66,5] olarak bulunmuştur. 15

18 Tesisler Hasta Taze Serum (SSTII Gel) Donmuş serum Taze Plazma (EDTA-K2) Taze Venöz Kan (EDTA-K2 veya K3) Taze Kapiler Kan Toplam örnek Merkez / / 16 / / / 16 Merkez 2 50 / 50 / / / 50 Merkez / / 101 / 202 Toplam HIV-2 Pozitif HIV-2 pozitif HIV-1 reaktivite ile HIV tiplendirilemeyen Belirsiz 1(*)(***) 0 0 1(*)(***) 0 2 (***) Hassasiyet (%) (171/171) (5/5) (102/102) 100,0 (3/3) 95 CI (%) (*) tam kan örneği ile eşleştirilmiş serum aynı HIV-2 ile enfekte olmuş hastadan alınmıştır (**) toplam sayı N<30 olduğunda uygulanamaz (***)Belirsiz sonuçların yanlış pozitif/ileri araştırmalara gerekliliği dikkate alınmamıştır (281/281) [ ] N/A** [ ] N/A** [98,7-99,9] HIV-1/HIV-2 birlikte enfekte hastalar 15 hastadan alınan HIV-1/ HIV-2 birlikte enfekte oldukları onaylı (13 serum, 2 plazma ve aynı 7 hastadan toplanmış eşleştirilmiş tam venöz kan) toplam 22 örnek Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile iki farklı klinik tesiste test edilmiştir. Altı serum ve 2 plazma örneği bir klinik tesisin kolleksiyonundan ve eşleştirilmiş yedi serum-tam venöz kan başka bir klinik tesisin hastalarından taze olarak toplanmıştır. Toplamda duyarlılık %100 (22/22) (serum ve tam venöz kan) olmuş ve belirsiz sonuç alınmamıştır. Birinci girişimde tüm örnekler, bir tam kan ve bir serum örneği haricinde, doğru şekilde HIV tiplendirilemeyen (HIV-1 iki zarf tespiti ve HIV-2 pozitif) olarak bulunmuştur. Tam kan yakın zamandaki sürenfeksiyon nedeniyle hatalı şekilde HIV-2 pozitif olarak bulunmuştur. Birkaç hafta sonra bu hasta geri çağrılmış ve doğru şekilde HIV tiplendirilemeyen olarak bulunmuştur. Serum hatalı şekilde, HIV tiplendirilemeyen yerine HIV-1 reaktiviteli HIV-2 pozitif olarak bulunmuştur. Ancak, CE işaretli HIV ayırt etme testleri ile de hatalı şekilde HIV-2 pozitif (HIV-1 rekativitesi olmadan) olarak bulunmuştur. Bir hasta geri çağırma sonrasında 22 örnekten 21'i doğru şekilde HIV tiplendirilemez olarak bulunmuştur. Böylece Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay'in HIV-1+2 ayırt edebilme kapasitesi %95,5 (21/22) olmuştur. HIV-1 serokonversiyon örnekleri Geenius TM HIV1/2 Confirmatory Assay'in duyarlılığı 32 serokonverter panel ile tahmin edilmiştir (154 örnek). Geenius TM HIV1/2 Confirmatory Assay ile %41,6 (64/154) pozitif bulunmuşken, CE işaretli Western Blot Testi ile %12,3 (19/154) pozitif bulunmuştur. Her Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile ilk pozitif kanama noktasının tespiti ortalama olarak 1,4 (44/32) zaman noktasından erken olmuştur. Geenius HIV1/2 Confirmatory Assay ile 83 erken serokonversiyon örneği test edildiğinde (Western Blot ile negatif veya belirlenemeyen) %10,8 (9/93) pozitif bulunmuştur. Klinik tesiste test edilen 10 serokonversiyon örnek temel alındığında ve aynı Western blot testi referansı ile karşılaştırıldığında, Geenius HIV1/2 Confirmatory Assay gp41 antikorlarının tespitinde daha fala hassasiyet sergilemiştir ve benzer hassasiyeti gp160 antikorlarının tespitinde de sergilemiştir. Geenius HIV1/2 Confirmatory Assay, HIV serokonversion panelleri ile yapılan tahminlerin duyarlılığı konusunda en gelişmiş teknolojilerle uyumludur. 16

19 9.3 Analitik Spesifiklik Çapraz Reaktivite Aşağıdaki işaretçiler için pozitif test sonucu veren 29 farklı hastalığı / durumu temsil eden 251 çapraz reaktivite sergileme potansiyeline sahip örnek, Geenius TM HIV 1/2 Confirmatory Assay ile farklı klinik tesislerde test edilmiştir. HTLV I/ II (20), Hepatit C (10 HCV), Hepatit B (10 anti-hbs) ve Hepatit A (10 HAV IgG); Sitomegalovirüs (10 CMV IgG), Epstein-Barr (10 EBV IgG),Herpes Simplex (10 HSV), Rubella IgG (10), Toksoplazmosis IgG (5), Sifilis IgG (10), Kandida (10), Malaria (Sıtma) (26), Dengue (2), Leishmaniosis (2), Vaccinia (10), Influenza aşısı (5 Grip), Dializ (10), HAMA (10), Romatiod faktör (10), Multi-transfüzyon (10), Myeloma (5) Hemofilia (10), Systemic Lupus Erythemateous olarak Otoimmün (12 SLE), Scleroderma (2), Sjogrens (2), Karışık bağlantılı doku (2 MCTD), anti-nükleer antikor (3 ANA), Kanser (5), Siroz (5) ve Multipar (doğurgan) kadınlar (5). Toplam 251 zor örnekten 245 i negatif ve 6 sı belirsiz (HIV-1 Western Blot ile belirlenemez ve Malaria için pozitif sonuç verdiler) olarak test edildi. Toplam örneklerin 2.4% (6/251) ümü temsil eden belirsiz sonuçlar yalnış pozitif olarak kabul edilmemiştir. Genel spesifite (doğru negative/doğru negative + yalnış pozitif) 95% [98,5; 100.0] güven aralığı ile 245 örnek üzerinden 100.0% (245/245) dür. 9.4 Kanca etkisi Olası hook etkisi 2 HIV-1 ve 2 HIV-2 yüksek titre numune seyreltilemeden ve seyreltilmiş olarak test edilmiştir. Seyreltilmemiş yüksek titre HIV-1 ve HIV-2 pozitif örnekler, seyreltilmiş formları (1:10 ila 1: ) ile karşılaştırıldığında negatif veya düşük yoğunluklu sonuçların hiçbiri gözlemlenmemiştir. Seyreltilmemiş ve seyreltilmiş örnekler arasındaki sonuçların denkliği, hook etkisinin yokluğunu göstermektedir. 10. Bibliyografi ve referanslar. 1. Barre-Sinoussi, F., Chermann, J.C., Rey, F., et al.: Isolation of T-lymphotropic retroviruses from a patient at risk for acquired immune deficiency syndrome (AIDS). Science 1983, 220: Gallo, R.C., Salahuddin, S.Z., Popovic, M., et al.: Frequent detection and isolation of cytophatic retrovirus (HTLV-III) from patients with AIDS and at risk for AIDS. Science 1984, 224: Clavel, F., Guetard, D., Brun-Vézinet, F.: Isolation of a new human retrovirus from West African patients with AIDS. Science 1986, 233: Rey, F., Salaun, D., Lesbordes, J.L. et al.: Evidence for HIV-1 and HIV-2 double infection in Central African Republic. Lancet, II, 1986, Gnann, J., McCormick, J.B., Mitchell, S., Nelson, J., Oldstone, M.: Synthetic peptide Immunoassay distinguishes HIV Type 1 and HIV Type 2 Infections. Science 1987, 237: De Cock, K.M., Brun-Vézinet, F., Soro, B: HIV-1 and HIV-2 infections and AIDS in West Africa. AIDS 1991, 5(Suppl 1):S Simon, F., Souquiere, S., Damond, F., Kfutwah, A., Makuwa, M., et al.: Synthetic peptide strategy for the detection of and discrimination among highly divergent primate lentiviruses. AIDS Res Hum Retroviruses 2001, 17: Rouet, F., Ekouevi, D.K., Inwoley, A., Chaix, M.L., Burgard, M., et al.: Field evaluation of a rapid human immunodeficiency virus (HIV) serail serologic testing algorithm for diagnosis and differentiation of HIV type 1 (HIV-1), HIV-2, and dual HIV-1-HIV-2 infections in West African pregnant women. J Clin Microbiol 2004, 42: HIV-2 Infection surveillance-united States, MMWR 2011, 60(29): Ciccaglione, A.R., Miceli, M., Pisani, G., et al.:i mproving HIV-2 detection by a combination of serological and nucleic acid amplification tests assays. J Clin Microbiol 2010, 48(8): Association of Public Health Laboratories, HIV testing algorithms: A status report. Accessed 4 August Update on HIV Diagnostic Testing Algorithms. J Clin Virol 2011, 52(1). 17

20 18

21 EUH 208: Gentamisin içerir. Allerjik reaksiyona neden olabilir. 19

22 Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette France Tel.: +33 (0) Fax : +33 (0) /