ADLİ DNA ANALİZLERİ A N K A R A

Transkript

1 ADLİ DNA ANALİZLERİ İ B R A HIM S E M İ Z O Ğ LU E K İ M A N K A R A

2 ADLİ BİLİMLER Locard ın değişim prensibi: «Her temas bir iz bırakır.» Locard a göre, suçlu olan kişi bir obje veya kişi ile temas ettiğinde, olay ile ilgili kanıt olabilecek iz bırakır. Suçlu kişi olay yerinden, olayla bağlantı oluşturabilecek iz leri (toz ve partükül vb.) taşır.

3 ADLİ BİLİMLER Adli bilimler terimi adli konularda çoğu özel uzmanlık eğitimini ve bilgisini gerektiren incelemeleri yapan bilim dallarının oluşturduğu kümeyi ifade eder.

4 ADLİ BİLİMLER ADLİ DNA ANALİZLERİ Olay yerinde tespit edilen deliller ile olaya dahil olan kişilerin irtibatının sağlanarak suç olaylarının aydınlatılması için biyolojik delillerden elde edilen DNA molekülü üzerinde yapılacak olan bilimsel çalışmaları kapsar.

5 TARİHÇE İNGİLTERE; 1988 yılında, DNA ilk defa tek başına delil olarak kabul edildi. 15 yaşlarındaki 2 genç kızın (Lynda Mann Dawn Ashworth) katilinin (Colin Pitchfork) bulunmasında kullanıldı. ABD; 1987 de DNA delil olarak kabul edildi, 1988 de 4 kadının tecavüz edilerek öldürülmesi olaylarının failinin aynı kişi olduğu tespit edildi. Mahkum elektrikli sandalyede idam edildi.

6 TARİHÇE

7 ORGANİZASYON BAŞBAKANLIK Üniversiteler Adalet Bakanlığı İçişleri Bakanlığı Adli Tıp Anabilim Dalları Adli Tıp Kurumu (Ankara, Istanbul, Izmir) KPL (Ankara, Istanbul ) JKL (Ankara)

8 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

9 DELİL İNCELEME Canlıların vücutlarından kopan, düşen veya akan her türlü bulguya BİYOLOJİK DELİL denir.

10 DELİL İNCELEME MAKROSKOBİK UV IŞIK MİKROSKOBİK LUMİNOL TANIMLAMA NUMUNE ALMA

11 UV IŞIK İNCELEMESİ

12 UV IŞIK İNCELEMESİ

13 LUMİNOL

14 TANIMLAMA İhtimali Test Reaktifleri Doğrulama Testleri

15 İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ KAN; Katalitik testlerdir. Hemoglobinin hem grubunun peroksidaz benzeri bir aktivite göstererek, hidrojen peroksiti (H 2 O 2 ) parçalaması temeline dayanır. Bu tepkimede oluşan yükseltgenmiş (okside) türler çeşitli substralar ile tepkimeye girerek gözle görülebilen bir renk değişimi meydana getirir.

16 KAN; İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ İhtimali Kan Testleri Test Orijinal Makale Yazarı ve yılı Guaiacum / Van Deen's'Test Van Deen, 1862 Day's Test Day, 1867 Aloin Klunge, 1882 Phenolphthalin / Kastle-Meyer Test Kastle & Shedd, 1901; Meyer, 1903; Utz, 1903; Higaki and Philp, 1976 Benzidine / Adlers' Test Adler & Adler, 1904 Leucomalachite Green Adler & Adler, 1904 o-tolidine Ruttan & Hardisty, 1912 o-toluidine Gershenfeld, 1939 o-dianisidine Owen et al., 1958 Tetramethylbenzidine (TMB) Holland et al., 1974; Garner et al., 1976 Luminol Specht, 1937 Fluorescin Lee et al., 1979 Confirmatory Crystal Tests Reagent and/or Name of Test Original Author(s), Year * Hematin halide / Teichmann's Test Teichmann, 1853 Pyridine hemochromogen / Takayama, 1912 Takayama's Test Acetone Chlorhemin / Modified Teichmann Wagenaar, 1935 Confirmatory Anti-Human Hemoglobin Tests Klein, 1905; Hektoen & Schulhof, 1923; Heidelberger & Landsteiner, 1923; Baxter & Rees, 1974

17 İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ MENİ; Katalitik testlerdir. Asit Fosfataz enziminin naftil fosfatın fosfat grubunu parçalaması temeline dayanır.

18 İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ TÜKÜRÜK; Alfa Amilaz enziminin aktivitesi temeline dayanır.

19 DOĞRULAMA TESTLERİ Antijen - Antikor Hibridizasyonu temeline dayanır.

20 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

21 DNA İZOLASYONU Patlat-Ayır-Geri al KİMYASAL YÖNTEMLER KOLON YÖNTEMLERİ MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMLERİ

22 KİMYASAL YÖNTEMLER Fenol Kloroform Yöntemi (Organik Yöntem)

23 KİMYASAL YÖNTEMLER CHELEX Yöntemi

24 KOLON YÖNTEMİ

25 MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMİ

26 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

27 DNA MİKTAR TAYİNİ PCR TEMELLİ OLMAYAN YÖNTEMLER PCR TEMELLİ YÖNTEMLER

28 DNA MİKTAR TAYİNİ PCR Temelli Olmayan Yöntemler Spektrofotometre Agaroz Jel Elektroforezi Kemiluminisans ve Fotometrik

29 DNA MİKTAR TAYİNİ PCR Temelli Yöntemler Real Time PCR AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti

30 AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti

31 Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti

32 QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti

33 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

34 PCR

35 MULTİPLEKS PCR

36 PCR

37 MULTİPLEKS PCR Ülkemizde Yaygın Olarak Kullanılan STR Multipleks Kitler AB AmpFlSTR Identifiler Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti Promega PowerPlex 16 HS Multipleks Amplifikasyon Kiti QIAGEN İnvestigator ESSplex Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti

38 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

39 ELEKTROFOREZ Kapiller Elektroforez

40 ELEKTROFOREZ Yürütme işlemi 15 kv da ( V) ve 60 C de yaklaşık 45 dakikada tamamlanır. Tampon olarak kullanılan 1 X TBE (Tris-borat-EDTA) yüksek voltajda hızlı bir elektroforez için tercih edilmektedir. POP4 polimeri, %4 DMA (poly [N,N-dimetilakrilamid=DMA], 8M üre, %5 2-pirolidinon ve 100 mm N- Tris-metil-3-aminopropan-sülfonik asid (TAPS) dan oluşur. POP4 polimeri içinde bulunan yüksek üre miktarı elektroforez sırasında PCR ürünlerindeki denatürasyon durumunun devamını da sağlar.

41 ELEKTROFOREZ

42 ELEKTROFOREZ

43 ELEKTROFOREZ

44 ELEKTROFOREZ

45 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

46 TİPLENDİRME Allelik Ladder; İnsan populasyonuna özgü STR bölgelerinin ortak allellerin olduğu yapay bir karışımdır. Her bir allel için referans DNA büyüklüğünün belirlenmesinde kullanılır. Bu allelik ladderlar, her STR lokusu için bir ölçme birimine benzer standart vazifesini görmektedir.

47 TİPLENDİRME

48 TİPLENDİRME Size Marker; Büyüklüğü bilinen yapay DNA parçacıklarıdır. Her bir örnek için bilinmeyen DNA parçacıklarının büyüklüklerinin belirlenmesinde kullanılır. (ILS 600,LIZ 500,ROX 350)

49 TİPLENDİRME

50 TİPLENDİRME

51 TİPLENDİRME

52 TİPLENDİRME

53 TİPLENDİRME

54 ADLİ DNA ANALİZLERİ DELİL İNCELEME DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ PCR ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR

55 RAPOR

56

57 Teşekkür ederim.