1834338 Kullanım Talimatları MBT Sepsityper IVD Kit IVD MALDI Biotyper sistemi kullanılarak pozitif işaretlenmiş kan kültürlerinden mikroorganizmaların tanımlanması için kit CARE ürünleri, dünya çapındaki müşterilerimize yüksek kalitedeki sarf malzemeleri, aksesuarlar ve özgül aparatlar ile destek vermek üzere tasarlanmaktadır. CARE ürün yelpazesi, tüm Bruker Daltonics sistemleriyle kullanım için özellikle optimize edilmiş ve belgelendirilmiştir. www.bruker.com/care Dil: tr Revizyon D (Eylül 2016)
1 Kullanım amacı 2 2 Ürün açıklaması 2 3 Denetleme, saklama ve stabilite 3 3.1 Varışta denetim 3 3.2 İlk açma öncesi ve sonrası saklama 3 4 Risk ve güvenlik bilgileri 4 4.1 Biyolojik riskler 4 4.2 Prosedürün sınırlamaları 4 5 Gerekli kimyasallar ve materyaller 5 5.1 Kimyasallar 5 5.2 Ekipman ve sarf malzemeleri 5 5.3 Kan kültürü sıvısı toplamak için önerilen materyaller 6 6 MBT Sepsityper IVD numune hazırlama prosedürü 6 6.1 MBT Sepsityper IVD uygulama eğitimi 7 7 Üretici 8 1 Kullanım amacı MBT Sepsityper IVD Kit, IVD MALDI Biotyper kullanılarak hazırlanmış pozitif işaretli kan kültürlerinden mikroorganizmaların tanımlanması için in vitro tanı amaçlı bir numune hazırlama kitidir. Örneğin kan dolaşımı enfeksiyonunun erken tanısına yardımcı olarak diğer klinik ve tanı amaçlı prosedürlerle birlikte kullanılır. 2 Ürün açıklaması Klinik uygulamada örneğin bir kan enfeksiyonu olduğundan şüphelenilen bir hastadan kan kültürü çoğaltma şişelerine kan (yaklaşık 10 ml) alınır. Şişeler, numunede bakteri, maya veya mantarların varlığını gösteren bir otomatik algılama sisteminde inkübe edilir. MBT Sepsityper IVD Kit, seçici olarak kan hücrelerini yok eder ve pozitif işaretlenmiş bir kan kültüründen gelen mikroorganizmaları zenginleştirir. Ortaya çıkan ekstraktlar IVD MALDI Biotyper sistemi kullanılarak analiz için uygundur. MBT Sepsityper IVD Kit, IVD MALDI Biotyper kullanılarak ilgili mikroorganizma türlerinin 30 dakika için yüksek olasılıkla tanımlanmasına olanak tanır. Pek çok durumda tür tanımlandığında mikroorganizmanın geniş bir antibiyotik yelpazesine duyarlılığı tahmin edilebilir. Bu kit, bir in-vitro tanısal cihazdır. Sayfa 2 / 8 MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Revizyon D
Kit bileşenleri MBT Sepsityper IVD Kit aşağıdaki bileşenleri içerir: Lysis Buffer Washing Buffer 1,5 ml mikrosantrifüj tüpleri (50 paket) Etiketler Hızlı Kılavuz MBT Sepsityper IVD Kit Sipariş Bilgileri Ürün Parça Numarası 50 numune için MBT Sepsityper IVD Kit # 1834338 3 Denetleme, saklama ve stabilite 3.1 Varışta denetim Varışta MBT Sepsityper IVD Kit i kontrol edin. Ambalaj hasar görmüşse, içindeki tüpleri/şişeleri kontrol edin. Tüpler/şişeler hasar görmüşse, MBT Sepsityper IVD Kit kullanılmamalıdır. Ürünün Malzeme Güvenlik Veri Sayfasında özetlenen yönergeleri izleyerek MBT Sepsityper IVD Kit i (tüpler/şişeler ve ambalajı) atın ve değiştirme için Bruker ile irtibat kurun. 3.2 İlk açma öncesi ve sonrası saklama +20 C +25 C İlk açma öncesi MBT Sepsityper IVD Kit in çökelti içerip içermediğini kontrol edin. Çökeltiler varsa, Lysis Buffer ı oda sıcaklığında (20-25 C) en az bir saat bekletin ve ilk açmadan önce içeriği çalkalayın. İlk açma sonrası MBT Sepsityper IVD Kit oda sıcaklığında (20-25 C) üç aya kadar stabildir. MBT Sepsityper IVD Kiti ambalaj etiketinde yazılı son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Revizyon D MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Sayfa 3 / 8
4 Risk ve güvenlik bilgileri Lysis Buffer zararlı bir kimyasal olarak sınıflandırılmıştır: TEHLİKE (H: 315, 318) 1 Daha fazla bilgi için, www.bruker.com/msds adresinden indirebileceğiniz Malzeme Güvenlik Veri Sayfasını okuyun. İlave kimyasallar ve malzemeler, bu Kullanım Talimatlarında tarif edilen prosedürler için gerekli olabilir. Tedarikçi tarafından sağlanan tüm uyarı, talimat veya Malzeme Güvenlik Veri Sayfalarını dikkatlice okuyun ve kimyasalları, biyo-tehlikeli malzemeleri veya diğer malzemeleri ele alırken genel emniyet düzenlemelerine uyun. 4.1 Biyolojik riskler MBT Sepsityper IVD Kit ve IVD MALDI Biotyper sistemi potansiyel olarak tehlikeli biyolojik malzemelerle çalışır. Bu sistemler ile çalışan herkes, gerekli tüm sağlık ve güvenlik önlemlerini okumak ve uygulamakla sorumludur. Tüm hasta numuneleri ve kültürleri olası bulaşıcı olarak değerlendirilmelidir. Sadece kalifiye laboratuvar personelinin MBT Sepsityper IVD Kit ve IVD MALDI Biotyper sistemiyle çalışmasına izin verilir ve bu çalışanlar potansiyel olarak bulaşıcı malzemeyle çalışırken tüm gerekli önlemleri almak ve uygulamaktan sorumludur. Her zaman uygun kişisel koruyucu ekipman kullanılması çok önemlidir. Bu bir laboratuvar önlüğü, koruyucu eldivenler ve koruyucu gözlük anlamına gelir. Kişisel koruyucu ekipmanınızın her zaman iyi durumda olduğundan emin olun. MBT Sepsityper IVD iş akışı sırasında bazı reaktifler mikroorganizmalarla ve sonuç olarak olası tehlikeli biyolojik materyalle karıştırılır. Ayrıca, kullanılan aksesuarların ve sarf malzemelerin bazıları mikroorganizmalarla temas edecektir. İlgili maddeleri, aksesuarları ve sarf malzemeleri ulusal veya bölgesel güvenlik mevzuatlarına göre dikkatli bir şekilde ele almak, doğru bir şekilde atmak ve dekontamine etmek kullanıcının sorumluluğundadır. 4.2 Prosedürün sınırlamaları Çoklu mikrobiyal enfeksiyonların veya kontaminasyonların (karışık kültürler) biyokimyasal yöntemler ile tanımlanması yanlış sonuçlara yol açabilir. MBT Sepsityper IVD Kiti kullanırken, belirsiz sonuçlar oluşabilir. Böyle durumlarda tipik olarak sadece bir mikroorganizma tanımlanır, tanımlama yapılamaz veya bir karışık kültür ipucu oluşturulur (sadece MBT Sepsityper IVD Module ile). 1 H315: Cilt tahrişine neden olur; P264: Kullandıktan sonra ellerinizi iyice yıkayın; P280: Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruması/yüz koruması kullanın; P302+P352: CİLT İLE TEMAS EDERSE: Su ve sabunla yıkayın; P321: Özel tedavi (Malzeme Güvenlik Veri Sayfasında İlk yardım önlemlerine bakın); P332+P313 Cilt tahrişi oluşursa: Tıbbi tavsiye/yardım alın; P362+P364: Kontamine olmuş giysileri çıkarın ve tekrar kullanmadan önce yıkayın. H318: Ciddi göz hasarına neden olur; P280: Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruması/yüz koruması kullanın; P305+P351+P338: GÖZ İLE TEMAS EDERSE: Gözlerinizi birkaç dakika boyunca dikkatlice yıkayın. Varsa ve kolaylıkla çıkıyorsa kontak lenslerinizi çıkarın, yıkamaya devam edin; P310: Derhal ZEHİR DANIŞMA MERKEZİNİ veya doktoru arayın. Sayfa 4 / 8 MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Revizyon D
Not Karışık kültür ipucu oluşturulması bir numunenin bir organizma karışımı içerdiğinin güçlü bir göstergesidir, ancak onayı değildir. Aksine, bir organizma karışımı içeren bir numune karışık kültür ipucu oluşturmayabilir. Bunun sonucu olarak, diğer tüm MALDI Biotyper analizlerinde olduğu gibi Sepsityper numunelerinin nihai sonuçları klinik mikrobiyoloji alanında deneyimli bir profesyonel tarafından değerlendirilmelidir. Pozitif kan kültürlerinde karışık kültürlerin varlığını kontrol etmek için her bir kan kültürü numunesine bir agar plakası (saflık plakası) üzerinde alt çoğaltma uygulamak yaygın mikrobiyoloji uygulamasıdır. Saflık plakasındaki koloniler ertesi gün incelenir. Heterojen kolonilerin varlığı numunede birden fazla mikroorganizma türü olduğunu gösterir. MBT Sepsityper IVD Kiti kullanılarak tanımlanmış her kan kültürü saflık plakası üzerindeki kolonilerin homojen olduğu kontrol edilerek onaylanmalıdır ve IVD MALDI Biotyper sistemi kullanılarak tüm koloni morfolojisi doğrulanmalıdır. 5 Gerekli kimyasallar ve materyaller 5.1 Kimyasallar MBT Sepsityper IVD numune hazırlama iş akışını gerçekleştirmek için MBT Sepsityper IVD Kit bileşenleri Lysis Buffer ve Washing Buffer a ek olarak aşağıdaki kimyasallar ve materyaller gereklidir. En iyi sonuçlar için, mevcut olan en yüksek saflıkta taze olarak hazırlanmış çözeltileri kullanın (örneğin, HPLC saflığında su veya CHROMASOLV LC-MS çözücüleri). Etanol, absolut Formik asit Asetonitril HPLC saflığında su IVD Bakteriyel Test Standardı (IVD BTS, # 8290190, Bruker Daltonik GmbH) IVD Matrix HCCA-portioned ( IVD HCCA, # 8290200, Bruker Daltonik GmbH) Sigma- Aldrich ten Standart çözelti (%50 asetonitril, %47,5 su ve % 2,5 trifloroasetik asit) (# 19182) veya VWR International GmbH tan SOLUTION OS (# PRLS89449.230, 250 ml): Bruker Daltonik GmbH tarafından test edilmiştir ve IVD BTS ve IVD HCCA çözünürleştirme için önerilir. 5.2 Ekipman ve sarf malzemeleri İş akışınız için seçilmiş olan tipte MALDI hedef plakası Vorteks karıştırıcı Tezgah üstü santrifüj Tüp rafları Pipetler Pipet uçları Revizyon D MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Sayfa 5 / 8
5.3 Kan kültürü sıvısı toplamak için önerilen materyaller BD 1 Vacutainer Kan Alma Tüpü (8,5 ml), BD # 367953 BD Vacutainer Eclipse Kan Alma İğnesi, BD # 368650 BD Vacutainer İğne Tutucu, BD # 364815. Not Diğer kan alma yöntemleri kullanılabilir. Tedarikçi tarafından sağlanan tüm uyarı, talimat veya Malzeme Güvenlik Veri Sayfalarını dikkatlice okuyun ve kimyasalları, biyo- tehlikeli malzemeleri veya diğer malzemeleri ele alırken genel emniyet düzenlemelerine uyun. 6 MBT Sepsityper IVD numune hazırlama prosedürü Kan kültürü sıvısı toplama 1. Kan kültürü şişesinin septumunu %70 etanol veya benzeri ile dezenfekte edin. 2. Yeterli kan kültürü sıvısı alın. MBT Sepsityper IVD Kit kullanarak numune hazırlama Not Etkinleştirilmiş karbon içeren biomérieux kan kültürü şişeleri kullanıldığında gerçekleştirilmesi gereken ek prosedür adımları italik olarak basılmıştır. 3. 1 ml kan kültürü sıvısını bir Eppendorf tüpe aktarın. 4. 200 µl Lysis Buffer ekleyin ve 10 (± 5) saniye süreyle vorteks ile karıştırın. a. Bu karışımın 800 µl sini bir SigmaPrep döndürme sütununa (Sigma-Aldrich SC1000-1KT) ekleyin. b. 2 dakika süreyle 2.000 dev./dk da santrifüjleyin ve filtreyi atın. c. Adım 6 ile devam edin. 5. Tüpü 2 dakika süreyle 13.000-15.000 dev./dk da santrifüjleyin. 6. Süpernatantı pipetleyerek ayırın ve atın. 7. 1 ml Washing Buffer ekleyin ve peleti yukarı aşağı pipetleyerek yeniden süspansiyon haline getirin. 8. Tüpü 1 dakika süreyle 13.000-15.000 dev./dk da santrifüjleyin. 9. Süpernatantı pipetleyerek ayırın ve atın. Ekstraksiyon yöntemi ve bir MALDI hedef plakası üzerine numunelerin hazırlanması 10. 300 µl HPLC saflığında su ekleyin ve peleti yukarı aşağı pipetleyerek yeniden süspansiyon haline getirin. 11. 900 µl etanol ekleyin ve süspansiyonu karıştırın. 12. Tüpü 2 dakika süreyle 13.000-15.000 dev./dk da santrifüjleyin. 13. Süpernatantı pipetleyerek ayırın ve atın. 14. Tüpü 2 dakika süreyle 13.000-15.000 dev./dk da santrifüjleyin. 15. Artık etanolü pipetleyerek ayırın ve atın. 1 Becton, Dickinson and Company Sayfa 6 / 8 MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Revizyon D
16. Peletin oda sıcaklığında 5 (±1) dakika kurumasına izin verin. 17. 2-50 μl 1 %70 formik asit ekleyin ve peleti yukarı aşağı pipetleyerek yeniden süspansiyon haline getirin. 18. Eşit hacimde asetonitril ekleyin ve karışımı iki üç kez yukarı aşağı pipetleyerek karıştırın. 19. Tüpü 2 dakika süreyle 13.000-15.000 dev./dk da santrifüjleyin. 20. 1 µl süpernatantı bir MALDI hedef plakası konumuna yerleştirin. 21. IVD sisteminin validasyonu için 1 µl sulandırarak hazırlanmış IVD BTS çözeltisini 2 en az bir MALDI hedef plakası konumuna ekleyin. DİKKAT EDİN: Gecikmiş / Eksik / Olası Tanımlama Sonuçları Yok Bir numune kuruduktan sonra IVD HCCA matris solüsyonu 30 dakika içinde eklenmelidir. Kuruduktan 30 dakika sonra IVD HCCA matris solüsyonu ile kaplanan numunelerden gelen sonuçlar göz ardı edilmelidir. Bu numunenin hazırlanması kullanılmamış bir numune konumunda veya farklı, temiz bir MALDI hedef plakasında tekrarlanmalıdır. 22. Numunelerin oda sıcaklığında kurumasını sağlayın. 23. Her numunenin üzerine 1 µl sulandırarak hazırlanmış IVD HCCA matris solüsyonu ekleyin 3. 24. Matrisle kaplanmış numunelerin oda sıcaklığında kurumasını sağlayın. 25. Test mikroorganizmasının numunesi artık tanımlama işleminden geçmeye hazırdır. MALDI hedef plakasını MALDI- TOF kütle spektrometresine yerleştirin ve iş akışını bu kullanıcı el kitabında anlatıldığı şekilde uygulayın. 6.1 MBT Sepsityper IVD uygulama eğitimi MBT Sepsityper IVD Kit ile numune hazırlamanın güvenilirlik ve başarı oranını iyileştirmeye yönelik özel bir MBT Sepsityper IVD uygulama eğitimi mevcuttur. 1 Pelete eklenen formik asit ve asetonitril hacimleri pelet boyutuna oranlı olmalıdır. Çok küçük peletler için hacim pelet başına 2 μl ye kadar azaltılabilir. 2 IVD Bacterial Test Standard Kullanım Talimatlarında anlatıldığı şekilde hazırlanmıştır 3 IVD Matrix HCCA-portioned Kullanım Talimatlarında anlatıldığı şekilde hazırlanmıştır Revizyon D MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Sayfa 7 / 8
7 Üretici Bruker Daltonik GmbH Fahrenheitstraße 4 28359 Bremen Almanya Destek E-posta: biotyper.support@bruker.com Telefon: +49 (421) 2205-1401 Faks: +49 (421) 2205-106 Satış Bilgileri E-posta: care@bruker.com Telefon: +49 (421) 2205-1402 Web: www.bruker.com/care # 1834338 Açıklamalar ve teknik şartnameler, önceki tüm bilgilerin yerine geçer ve bildirim olmaksızın değişime tabidir. Copyright 2016 Bruker Daltonik GmbH Sayfa 8 / 8 MBT Sepsityper IVD Kit Kullanım Talimatları Revizyon D