MAX Extended Enteric Bacterial Panel

MAX Extended Enteric Bacterial Panel 443812 In Vitro Diyagnostik Kullanım İçindir P0221(02) BD MAX System ile kullanım içindir 2017-06 Türkçe 4 I KULLANIM AMACI BD MAX System'da gerçekleştirilen BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel (BD MAX Genişletilmiş Enterik Bakteriyel Panel), enterik bakteri patojenlerinin doğrudan kalitatif tespiti ve ayrıştırılması için otomatik in vitro tanı testidir. 4 ek Ünitize Reaktif Stribine opsiyonel Master Mix ilavesi olarak BD MAX Enteric Bacterial Panel ile birlikte kullanılır. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel nükleik asitleri aşağıdakilerden tespit eder: Plesiomonas shigelloides Vibrio (V. vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae) Enterotoksijenik Escherichia coli (ETEC) ısıya duyarlı enteretoksin (LT)/ ısıya dayanıklı enterotoksin (ST) genler Yersinia enterocolitica Test, şüpheli akut gastroenteritisi, enteritisi veya koliti olan semptomatik hastalardan alınmış korunmayan yumuşak ila diyarel veya Cary-Blair korunmuş dışkı örnekleri üzerinde gerçekleştirilir. Doğrudan örnek üzerinde yapılan bu testte ilgili gen hedef DNA'sı amplifikasyonu için gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kullanılır. Testte amplifiye DNA'nın saptanması için florojenik gene özgü hibridizasyon probları kullanılır. Bu testin, Plesiomonas shigelloides, Vibrio (V. vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae) Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) LT/ST ve Yersinia enterocolitica enfeksiyonlarının ayırıcı tanısında yardımcı olarak klinik sunum, laboratuvar bulguları ve epidemiyolojik bilgiler ile birlikte kullanılması amaçlanmıştır. Bu testin sonuçları, tanıda, tedavide veya diğer hastaların yönetimiyle ilgili kararlarda tek dayanak olarak ele alınmamalıdır. Pozitif test sonuçları, bu testle saptanmamış diğer organizmaların varlığında gelişen koenfeksiyon olasılığını ortadan kaldırmaz ve hastalığın tek veya ayırıcı nedeni olmayabilir. Gastroenterit ile uyumlu klinik hastalık varlığında elde edilen negatif test sonuçları, bu testle saptanmamış patojenlerin oluşturduğu bir enfeksiyondan veya ülseratif kolit, irritabl bağırsak sendromu veya Crohn hastalığı gibi bulaşıcı olmayan nedenlerden kaynaklanabilir. PROSEDÜRÜN ÖZETİ VE AÇIKLAMASI Enterik hastalıklara neden olan organizmalar dünya genelinde morbidite ve mortalitenin önemli bir nedenini oluşturmaktadır. Enterik patojenler vücuda gastrointestinal yolla girer veya genellikle kontamine gıda ve su aracılığıyla ya da kusmuk veya dışkı ile temas yoluyla yayılır. Centers for Disease Control and Prevention (CDC - Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri), Birleşik Devletler de her yıl 128.000 i hastaneye yatma ve 3.000 i ölümle sonuçlanan 48 milyon gıda kaynaklı hastalık vakası otaya çıktığını tahmin etmektedir. 1 Gelişmekte olan dünyada, bu hastalıklar yıllık yaklaşık 2 milyon küçük çocuğuna neden olmaktadır. 2 Sebep olan ajanların her biri karın krampları veya karın ağrısı, iştah kaybı, bulantı veya kusma da dahil olmak üzere kısmen farklı semptomlara sebep olabilir; ancak tümü diyareye neden olur. 3 Tekrarlanan diyare nöbetleri ve dirençli diyare hastalığı bağırsak işlevini ve emilimi bozabilir, potansiyel olarak çocukluk zafiyeti ve büyümenin gecikmesine yol açabilir. 4 Her ne kadar en yaygın gram negatif enterik bakteriyel ajanlar antikorla taşınan lateral akışla toksin tespiti ile standart selektif ve diferansiyel besiyerinde kolaylıkla kültive edilebilse de izolasyonu ve tanımlanması zaman almaktadır. Tanı birkaç gün sürebilir ve bu da tedavi edilmeyen enfeksiyon nedeniyle hastaları tehlikeye sokar ve enfeksiyonun başkalarına yayılması riski taşır. Alternatif olarak empirik antibakteriyel tedavi, hastaları, ilaçla ilişkili advers olay riskine sokabilir. Antibiyotiklerin uygunsuz kullanımı, antimikrobiyal direncin oluşmasına katkı verir ve sınırlı kaynakların gereksiz şekilde harcanmasını getirir. BD MAX Extended Bacterial Panel, BD MAX Enteric Bacterial Panel ile birlikte kullanılması gereken tek bir Master Mix'ten oluşur. BD MAX System üzerinde gerçekleştirilen BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel prosedürü, hem BD MAX Enteric Bacterial Panel hem de BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hedefleri için 48 ila 96 saat sürebilen geleneksel kültür yöntemlerine kıyasla, yaklaşık olarak 3 saatte 24 örnek için sonuç sağlayabilir. BD MAX Extended Bacterial Panel, Plesiomonas shigelloides, Vibrio (V. vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae), Enterotoksijenik E. coli (ETEC) LT/ST ve Yersinia enterocolitica kaynaklı gastroenteritisten sorumlu patojenleri eş zamanlı olarak tespit eder. Bu test dahili bir Örnek İşleme Kontrolü içerir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, örneğin BD MAX System'a yerleştirilmesinden sonuçların çıkmasına kadar kullanıcı müdahalesini en aza indirerek test sürecini otomatikleştirir. 1

Yumuşak ila diyareli dışkı örneği toplanır ve laboratuvar gönderilir, homojenize edilip bir BD MAX Enteric Bacterial Panel Sample Buffer Tube'e (BD MAX Enterik Bakteriyel Panel Örnek Tampon Tüpü) aktarılır. Örnek Tampon Tüpü BD MAX System'a yerleştirilince buradaki otomatik prosedür oluşur: Bakteriyel hücreler lizise uğratılır; DNA manyetik boncuklardan ekstrakt ve konsantre edilir; son olarak da, varsa, BD MAX PCR Cartridge'teki (BD MAX PCR Kartuş) genetik hedefleri amplifiye etmek için kullanılan gene özgü primerlerin bulunduğu ayrılan DNA alikotu PCR reaktiflerine eklenir. Bu testte de Örnek İşleme Kontrolü vardır. İnhibitör maddeler, enstrüman veya reaktif hatası işlemini izlemek için Örnek İşleme Kontrolü Ekstraksiyon Tüpünde kalır ve ekstraksiyon, konsantrasyon ve amplifikasyon adımlarını uygular. İnhibitör maddeler, enstrüman veya reaktif hatası işlemini izlemek için Örnek İşleme Kontrolü Ekstraksiyon Tüpünde kalır ve ekstraksiyon, konsantrasyon ve amplifikasyon adımlarını uygular. BD MAX System'a klinik örnek, BD MAX Unitized Reagent Strip (Ünitelendirilmiş Reaktif Stribii) ve BD MAX PCR Cartridge'i (Kartuş) yüklendikten sonra operatör müdahalesi gerekmez. BD MAX System örnek lizisi, DNA ekstraksiyonu ve konsantrasyonu, reaktif rehidrasyonu, nükleik asit amplifikasyonu ve gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kullanılarak hedef nükleik asit sekansının saptanmasını otomatik olarak gerçekleştirir. Amplifiye hedefler, sönmüş floroforlarla etiketlenmiş hidroliz problarıyla algılanır. Sinyallerin amplifikasyonu, saptanması ve yorumlanması BD MAX System tarafından otomatik olarak yapılır. PROSEDÜR İLKELERİ Dışkı örnekleri hastalardan alınır ve temiz bir kapta koruyucu olmadan veya Cary-Blair taşıma ortamında koruyucu ile laboratuvara gönderilir. Bir 10 µl öze, özenin derinliğine kadar örneğe yerleştirilir ve bir döndürme hareketiyle BD MAX Extended Bacterial Panel setindeki BD MAX Sample Buffer Tube e akıtılır. Sample Buffer Tube bir septum kapağıyla kapatılır, vortekslenir ve BD MAX System'a aktarılır. İş listesi oluşturulup örnek, BD MAX Enteric Bacterial Panel Unitized Reagent Strip ve PCR Cartridge ile birlikte BD MAX cihazına yüklendikten sonra, çalışma başlatılır ve daha fazla kullanıcı müdahalesi gerekmez. BD MAX System hedef organizma lizisi, DNA ekstraksiyonu ve konsantrasyonu dahil örnek hazırlanmasını, reaktif rehidrasyonu, hedef nükleik asit sekansının amplifikasyonu ve gerçek zamanlı PCR kullanılarak saptanmasını otomatik olarak gerçekleştirir. Sinyalin yorumlanması BD MAX System tarafından otomatik olarak yapılır. Bu test ayrıca Ekstraksiyon Tüpünde bulunan ve ekstraksiyon, konsantrasyon ve amplifikasyon adımlarına tabi olan bir Numune İşleme Kontrolü içerir. Örnek İşleme Kontrolü; potansiyel inhibe edici maddelerin ve sistem veya reaktif arızalarının varlığını izler. Yüksek bir sıcaklıkta enzimatik bakteriyel lizis sonrasında serbest kalan nükleik asitler manyetik afinite boncuklarıyla yakalanır. Bağlı nükleik asitlerin bulunduğu boncuklar yıkanır ve nükleik asitler elüsyona uğratılır. Elüsyona uğratılmış DNA nötralize edilir ve PCR reaktiflerinin rehidrasyonu için Master Mix (Ana Karışım) tüpleri içine aktarılır. Rehidrasyon sonrasında, BD MAX System BD MAX PCR Cartridge'a PCR için sabit bir hazır solüsyon hacmi verir. BD MAX PCR Cartridge'daki mikrovalfler PCR başlamadan önce amplifikasyon karışımını sınırlamak ve böylece buharlaşma ve amplikon kontaminasyonu önlemek için sistem tarafından mühürlenir. Amplifiye DNA hedefleri bir uçta söndürücü kısım ve öteki uçta bir floresan raportör boya (florofor) ile etiketlenmiş hidroliz (TaqMan) problarıyla saptanır. Farklı floroforlarla etiketlenmiş problar; bakteriyel hedeflerin (Plesiomonas shigelloides, Vibrio (V. vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae), Enterotoksijenik Escherichia coli (ETEC) LT/ST ve Yersinia enterocolitica) amplikonlarının ve Örnek İşleme Kontrolü amplikonlarının BD MAX System'daki beş farklı optik kanalında saptanmasında kullanılır. Problar doğal durumundayken florofor floresanı söndürücüye yakınlığı nedeniyle söndürülür. Ancak hedef DNA varlığında problar tamamlayıcı sekanslarına hibridize olur ve DNA polimerazın, cdna şablonu boyunca yeni oluşan iplikçiği sentezlerken 5 3 ekzonükleaz aktivitesi ile hidrolize uğrar. Bunun sonucunda floroforlar söndürücü moleküllerden ayrılır ve floresan yayılır. BD MAX System bu sinyalleri her döngüde izler ve program sonunda verileri son sonuçları raporlamak üzere yorumlar. REAKTİFLER İçindekiler BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Master Mix (D8) DNA polimeraz, nükleotidler, hedefe ve Örnek İşleme Kontrolüne özgü problar ve primerler içeren Kurutulmuş PCR Master Mix. Miktar 24 test (2 x 12 tüp) GEREKLİ FAKAT SAĞLANMAMIŞ EKİPMAN VE MALZEMELER BD MAX Enteric Bacterial Panel (BD Diagnostic Systems Katalog no. 442963) BD MAX PCR Cartridges (BD MAX PCR Kartuşları) (BD Diagnostic Systems Katalog no. 437519) VWR Çoklu Tüp Vorteksleyici veya muadili (VWR, Kat. No. 58816-115) Vortex Genie 2 veya muadili (VWR, Kat. No. 58815-234) Nalgene Cryogenic Vial Holder (Kriyojenik Flakon Tutucu) (VWR, Kat. No. 66008-783) Çok tüplü vorteks karıştırıcı ile uyumlu rak (örn. Kriyojenik Flakon Tutucu veya eşdeğeri) Tek Kullanımlık 10 µl inoculating loops (inokülasyon özeleri) (BD Diagnostic Systems Katalog no. 220216) Laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenler, tek kullanımlık Kronometre veya süre ölçer dışkı örneği türü için: Sıvı veya yumuşak gaita örnekleri toplamak için kuru, temiz kaplar. Korunan dışkı örneği türü için: Cary-Blair aktarım besiyeri (15 ml). Kontrol İzolatlarının Kültivasyonu için Önerilen Besiyeri (Kalite Kontrol bölümüne başvurun): BD Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood (%5 Koyun Kanı ile BD Triptikaz Soya Agarı) (Plesiomonas shigelloides, Vibrio (V. vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae), ETEC ve Yersinia enterocolitica için) (ör., BD BBL Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood %5 Koyun Kanı ile BD BBL Triptikaz Soya Agarı) [TSA II], BD Diagnostic Systems Katalog No. 221292) 2

UYARILAR VE ÖNLEMLER BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel yalnızca in vitro diyagnostik kullanım içindir. Bildirilebilir hastalıkların bildirimine yönelik yerel, bölgesel ve federal kurallar ve yönetmelikler sürekli olarak güncellenmektedir ve gözetim ile salgın araştırmaları için önemli pek çok organizma içerir. 5,6 Laboratuarlar, kendi devlet ve/veya yerel yönetmeliklerden sorumludur ve izolat ve/veya klinik örnek gönderim yönergeleri konusunda kendi yerel ve/veya devlet kamu sağlığı laboratuvarlarına danışmalıdır. Bu ürün yalnızca BD MAX System üzerinde, BD MAX Enteric Bacterial Panel ile birlikte kullanılabilir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, herhangi bir BD MAX Enteric Bacterial Panel lotuyla kullanılabilir. Son kullanma tarihi geçmiş reaktifler ve/veya materyalleri kullanmayın. Varışıyla birlikte dış kartonu mühürleyen etiket bozulmuşsa kiti kullanmayın. Koruyucu poşetler geldiklerinde açık veya yırtıksa reaktifleri kullanmayın. Reaktifleri reaktif poşetleri içinde kurutucu yoksa veya açılmışsa kullanmayın. Reaktif poşetlerinden kurutucuyu çıkarmayın. Reaktifin koruyucu poşetini her kullanımdan sonra fermuar şeklinde kapanan mühürle hemen kapatın. Mühürlemeden önce varsa poşetlerdeki fazla havayı giderin. Reaktifleri ısıya ve neme karşı koruyun. Neme uzun süre maruziyet ürün performansına etki edebilir. Reaktifleri folyo bozulmuş veya hasarlıysa kullanmayın. Farklı poşetler ve/veya kitler ve/veya lotlardan reaktifleri karıştırmayın. Kontaminasyon oluşacağından ve test sonuçlarını olumsuz etkileyebileceğinden kapakları birbirleriyle değiştirmeyin veya tekrar kullanmayın. Ünitelendirilmiş Reaktif Stripleri uygun sıvı dolumu için kontrol edin (sıvıların tüplerin alt kısmında olmasını sağlayın [bkz. Şekil 1]). Tüm pipet uçlarının var olduğundan emin olmak için Ünitelendirilmiş Reaktif Striplerini kontrol edin (bkz. Şekil 1). Master Mix ve Ekstraksiyon tüpü barkod okunabilirliği bozulabileceğinden kimyasal solüsyonları kullanırken dikkatli davranın. Bu testin düzgün yapılması için uygun laboratuvar tekniği şarttır. Testin yüksek analitik duyarlılığı nedeniyle tüm malzeme ve reaktiflerin saflığını korumak için büyük dikkat gösterilmelidir. Diğer PCR testlerinin laboratuvarda aynı alanlarda gerçekleştirilmesi durumunda, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, test için gereken herhangi bir ek reaktifin ve BD MAX System'in kontamine olmamasına dikkat edilmelidir. Her zaman reaktiflerin mikrobiyal ve deoksiribonükleaz (DNase) kontaminasyonunu önleyin. Reaktifler ve kartuşlar kullanılmadan önce eldivenler değiştirilmelidir. Herhangi hedef amplikonlara sahip ortamın kontaminasyonunu önlemek için, kullandıktan sonra BD MAX PCR Cartridge'ı parçalarına ayırmayın. BD MAX PCR Cartridges'teki mühürler kontaminasyonu önleyecek şekilde tasarlanmıştır. Çapraz kontaminasyon riskinin en aza indirilmesi için laboratuvarda rutin olarak çevrenin izlenmesi gerekmektedir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel'in örnek taşıması ve saklanması için önerilen süre ve sıcaklık aralıklarının dışına çıkması geçersiz sonuçlara neden olabilir. Belirtilen süre ve sıcaklık aralığı içinde yapılmayan testler tekrarlanmalıdır. Yerel, eyalet, bölgesel ve/veya federal veya sertifikasyon sağlayan kurumların gereklilikleri veya kılavuz ilkelere göre ek kontroller test edilebilir. Örnekleri daima bulaşıcı olabilirlermiş gibi ve CLSI Belgesi M29 7 'da ve Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 8 te tanımlandığı şekilde güvenli laboratuvar prosedürlerine göre kullanın. Tüm reaktifleri kullanırken koruyucu giysiler ve tek kullanımlık eldivenler kullanın. Testi yaptıktan sonra ellerinizi iyice yıkayın. Ağzınızla pipetlemeyin. Numunelerin veya kit reaktiflerinin kullanıldığı yerlerde sigara içmeyin ve bir şey yemeyin ve içmeyin. Kullanılmamış reaktifleri ve atıkları ulusal, bölgesel ve yerel yönetmeliklere göre atın. Ek uyarılar, önlemler ve işlemler için BD MAX System Kullanıcı El Kitabına 9 başvurun. SAKLAMA VE STABİLİTE Koruyucu olmayan veya 15 ml Cary-Blair taşıma ortamında koruyucu içeren toplanan örnekler taşıma sırasında 2 C ila 25 C arasında saklanmalıdır. Aşırı sıcağa maruz kalmaya karşı koruyun. Örnekler test yapılmasından önce 2 8 C'de 120 saate kadar veya 2 25 C'de 24 saate kadar saklanabilir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Master Mix, 2 25 C'de belirtilen son kullanma tarihine kadar stabildir. Son kullanma tarihi geçmiş bileşenleri kullanmayın. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Master Mix Tüpleri mühürlenmiş poşetlerde sağlanır. Ürünü nemden korumak için açtıktan hemen sonra tekrar mühürleyin. Master Mix tüpleri, poşetin ilk açılışından ve tekrar mühürlenmesinden sonra 2 25 C'de 14 güne kadar stabildir. Rekonstitüsyon Yapılmamış Master Mix tüpleri koruyucu poşetinden çıkarıldıktan sonra 24 saate kadar 2 25 C sıcaklıkta stabildir. 3

KULLANIM TALİMATLARI Örnek Toplama/Taşıma Yeterli bir örnek almak için örnek toplama işlemi yakından izlenmelidir. Kuru, temiz bir kap kullanılarak sıvı veya yumuşak gaita örnekleri şu işleme göre toplanır: 1. örnekler: Sıvı veya yumuşak dışkı örneklerini kuru, temiz bir kaba aktarın. Su veya idrar ile kontaminasyondan kaçının ve örneğin tuvalet kağıdı veya sabun ile karışmasından kaçının. Kabı etiketleyin ve laboratuvara kurumun standart işletim prosedürlerine göre taşıyın ( Saklama ve Stabilite kısmına bakın). 2. Cary-Blair koruyucu içeren örnekler: Sıvı veya yumuşak dışkı örneğini üreticinin talimatları uyarınca 15 ml taşıma aygıtına aktarın. Su veya idrar ile kontaminasyondan kaçının ve örneğin tuvalet kağıdı veya sabun ile karışmasından kaçının. Kabı etiketleyin ve laboratuvara kurumun standart işletim prosedürlerine göre taşıyın ( Saklama ve Stabilite kısmına bakın). Örnek Hazırlama NOT: Her bir numune ve External Control'ün (Harici Kontrol) test edilmesi için bir (1) Örnek Tampon Tüpü, bir (1) Septum Kapağı, iki (2) Master Mix Tüpü [bir tanesi BD MAX Enteric Bacterial Panel (B5) ve diğeri de BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel'inden (D8)], bir (1) Ekstraksiyon Tüpü (B2) ve bir (1) Ünitize Reaktif Stribi gereklidir. Gereken sayıda malzemeyi koruyucu poşetlerinden veya kutularından çıkarın. Açılmış Master Mix veya Ekstraksiyon Tüpü torbalarını saklamak için fazla havayı çıkarın ve poşetleri fermuar şeklinde kapanan mührü kullanarak kapatın. 1. Barkodlanmış BD MAX Sample Buffer Tube'ü (saydam kapak) uygun örnek tanımlaması ile etiketleyin. 2B barkodu gizlemeyin, üzerine yazmayın veya etiket yapıştırmayın. 2. Koruyucu içermeyen veya Cary-Blair koruyucu içeren örnekleri 15 saniye boyunca yüksek hızda vorteksleyin. 3. Saydam kapağı Sample Buffer Tube'ten çıkarın ve aşağıdaki gibi inoküle edin: a. Tüm öze kısmı örneğe batana dek 10 μl tek kullanımlık bir inokülasyon özesi yerleştirin. Mil üzerindeki fazla dışkı PCR reaksiyonunu aşırı yükleyebileceği için özeden ötesini sokmayın; b. Yüklü özeyi Sample Buffer Tube e yerleştirin ve döndürme hareketi ile örneği çıkarın. NOT: Tüm örneğin özeden çıkarılmasına gerek yoktur. Ortaya çıkan Sample Buffer Tube çözeltisi renkli süzgeçten geçirilmelidir. 4. Septum Kapağı kullanarak inoküle edilen Sample Buffer Tube'ü tekrar kapaklayın. 5. Varsa, Sample Buffer Tube ü çok tüplü vorteks karıştırıcı ile uyumlu raka yerleştirin. (örn. kriyojenik flakon tutucu veya eşdeğeri). 6. Varsa test için ek örnekleri Adım 1 5'i tekrarlayarak hazırlayın. Ek örnekleri elinize almadan önce eldivenlerin temiz olduğundan emin olun. 7. Tüm hazırlanmış örnekleri aynı anda çoklu tüp vorteks karıştırıcı ile bir (1) dakika boyunca maksimum hızda vorteksleyin. 8. BD MAX System'da BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel i test etmek için BD MAX System'ın Çalışması bölümüne ilerleyin. BD MAX System'ın Çalışması NOT: Ayrıntılı talimatlar için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu'na 9 bakın ( Çalıştırma bölümüne bakın). NOT: BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel in testi yukarıdaki vorteksleme adımından hemen sonra yapılmalıdır (Örnek Hazırlama, Adım 7'ye bakın). Yeniden test etmek gerekirse örnekleri yeniden vorteksleyin. 1. BD MAX System'ın gücünü açın (daha önce yapılmadıysa) ve <user name> (kullanıcı adı) ve <password> (şifre) girerek oturum açın. 2. Reaktifler ve kartuşlar kullanılmadan önce eldivenler değiştirilmelidir. 3. BD MAX Enteric Bacterial Panel kitinden gerekli sayıda Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi çıkarın. Her Ünitize Reaktif Stribini, tüm sıvıların tüplerin alt kısmında olmasını sağlayacak şekilde sert bir yüzeye hafifçe vurun. 4. Gereken sayıda malzemeyi koruyucu poşetlerinden çıkarın: a. BD MAX Enteric Bacterial Panel setindeki Ekstraksiyon ve Master Mix tüpleri. b. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel setindeki Master Mix tüpleri. 5. Fazla havayı çıkarın ve poşetleri fermuar şeklinde kapanan mühür ile kapatın. 6. Test edilecek her örnek için bir (1) Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi BD MAX System Rack'a, Rak A Pozisyon 1 ile başlayarak yerleştirin. 7. Bir (1) Ekstraksiyon Tüpünü (B2) (beyaz folyo) Şekil 1'de gösterildiği gibi her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribinde Pozisyon 1 içine tıklatarak oturun. 8. Bir (1) BD MAX Enteric Bacterial Panel Master Mix tüpünü (B5) (yeşil folyo) Şekil 1'de gösterildiği gibi her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribinde Pozisyon 2 içine tıklatarak oturun. 9. Bir (1) BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Master Mix tüpünü (D8) (mavi folyo) Şekil 1'de gösterildiği gibi her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribinde Pozisyon 4 içine tıklatarak oturun. 4

Şekil 1: BD MAX Enteric Bacterial Panel Ekstraksiyon tüpleri ve BD MAX Enteric Bacterial Panel ile BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Master Mix tüplerini Unitized Reagent Strip'lerine tıklatarak oturtun. 10. Run (Çalıştır) sekmesine ve ardından Inventory (Envanter) alt sekmesine tıklayın ve BD MAX Enteric Bacterial Panel için kit lot numarasını ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için ana karışım lot numarasını, barkodu tarayıcı ile tarayarak veya manuel olarak girin (lot izlenebilirliği için). NOT: Adım 10'i her yeni kit lotu kullanıldığında tekrarlayın. NOT: Bu test için 2000 Numune Modunun kullanılması zorunludur. Set lot numarası ile ana karışım lot numarasının Configuration/System (Yapılandırma/Sistem) sekmesinde seçili olduğundan emin olun. 11. Worklist'te (Çalışma Listesi) gezinin. Aşağı açılan menüyü kullanarak <BD MAX EX ENT BAC 26> öğesini seçin. 12. Açılır menüden uygun set lot numarasını (BD MAX Enteric Bacterial Panel'in dış kutusunda yazan) ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için ana karışım lot numarasını seçin. 13. Worklist'e (Çalışma Listesi) BD MAX Enteric Bacterial Panel Örnek Tampon tüpü Kimliği, Hasta Kimliği ve Erişim Numarasını (varsa) barkodu tarayıcıyla tarayarak veya manuel olarak girin. 14. Geriye kalan tüm Örnek Tampon Tüpleri için adım 13'ü tekrarlayın. 15. Örnek Tampon Tüplerini adım 6 ila 9'de belirtildiği gibi ilgili Ünitelendirilmiş Reaktif Striplerine karşılık gelen BD MAX System Rack'ler içine yerleştirin. NOT: Örnek Tampon Tüplerini, 1D barkod etiketleri dışarıya bakacak şekilde (böylece örnek kaydedilirken Örnek Tampon Tüpleri daha kolay taranabilir) örnek rafına yerleştirin. 16. BD MAX System'a gerekli sayıda BD MAX PCR Cartridge yerleştirin (bkz. Şekil 2). BD MAX Enteric Bacterial Panel ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel aynı anda kullanılırken: Her bir MD MAX PCR Cartridge toplam 12 örnek için 12 adede kadar 1 çalışmayı alır. BD MAX System, her çalışma için BD MAX PCR Cartridge'da pozisyon ve sırayı otomatik olarak seçer. BD MAX PCR Kartuşları çalışmaya göre VE raka göre temelinde kullanılır (kartuş başına 1 çalışma ve raf başına 1 kartuş). BD MAX PCR Kartuşlarının kullanımını maksimuma çıkarmak için, 2000 Sample Mode'u kullanarak, şerit atamaları için Worklist (Çalışma listesi) sekmesinin altında Run Wizard'ı (Sihirbazı Yürüt) seçin. Daha fazla ayrıntı için BD MAX System Kullanıcı El Kitabına 9 başvurun. Şekil 2: BD MAX PCR Cartridge'larını Yükleyin 5

17. Rakı/rakları BD MAX System'e yükleyin (bkz. Şekil 3). A Tarafı B Tarafı Şekil 3: Rafı/rafları BD MAX System'a yükleyin. 18. BD MAX System kapağını kapatın ve işleme başlamak için <Start > (Başlat) öğesine tıklayın. 19. Çalışma sonunda, sonuçları hemen kontrol edin veya Sample Buffer Tube leri 2 8 C'de 5 güne (120 saate) kadar VEYA 25 ± 2 C'de sonuçlar kontrol edilinceye kadar maksimum 48 saat saklayın. NOT: Bir çalışma sırasında bir septum kapağı hasar görmüşse örneği saklamadan önce yenisiyle değiştirin. NOT: Hazırlanmış BD MAX Enteric Bacterial Panel Örnek Tampon Tüpleri, 2 8 C'de maksimum 120 saat (5 gün) VEYA 25 ± 2 C'de maksimum 48 saat saklanabilir. Bir IND (Belirsiz), UNR (Çözümlenmemiş) veya INC (Eksik) sonuç elde edildiğinde veya bir External Control (Harici Kontrol) hatası oluştuğunda bu zaman çerçevesi içinde hazırlanan Sample Buffer Tube'ten bir test tekrarı yapılmalıdır ( Tekrar Test Prosedürü kısmına bakın). KALİTE KONTROLÜ Kalite kontrol prosedürleri test performansını izler. Laboratuvarlar, tüm analitik sürecin etkililiğini izlemek için yerel, bölgesel, eyalet, ulusal ve/veya ülke yönetmeliklerinin ya da sertifikasyon sağlayan kurumların kılavuz ilkelerine veya gerekliliklerine göre kontrol malzemelerinin sayısını, türünü ve test edilme sıklığını ortaya koymalıdır. Genel Kalite Kontrolü rehberliği için, kullanıcı Klinik Laboratuvar Standartları Enstitüsü belgeleri MM3 10 ve EP12'ye. 11 başvurmak isteyebilir 8 9. 1. External Control (Harici Kontrol) materyallerini BD sağlamaz. BD MAX System yazılımında örnek test sonucunu yorumlamak amacıyla Harici Pozitif veya Negatif Kontroller kullanılmaz. External Control'ler (Harici Kontroller) hasta örnekleriymiş gibi ele alınır. (External Control (Harici Kontrol) test sonuçlarının yorumlanması için bkz. Tablo 2.) 2. Bir (1) Harici Pozitif Kontrol ve bir (1) Harici Negatif Kontrol her bir laboratuvar düzeninde BD MAX System'de yeterli işlem doğrulama elde edilinceye kadar en azından günlük olarak çalışılmalıdır. Kontrol testinin azaltılmış sıklığı ilgili yönetmeliklere uygun olmalıdır. 3. Harici Pozitif Kontrol, önemli reaktif hatalarını izlemek üzere tasarlanmıştır. Harici Negatif Kontrol hedef nükleik asitlerle ayıraç veya çevresel kontaminasyonu (veya taşımayı) saptamak üzere tasarlanmıştır. 4. Kullanıcının laboratuvar kalite kontrol programı için en uygun kontrolü seçmesini mümkün kılmak üzere çeşitli tiplerde harici kontroller önerilir. a. Harici Negatif Kontrol: Ticari olarak temin edilebilir kontrol malzemesi veya negatif olduğu bilinen önceden karakterize edilen örnek. BD, kontrol preparatının sonucu olarak kontaminasyon potansiyelini azaltmak için Harici Negatif Kontrol'ün Harici Pozitif Kontrol'den önce hazırlanmasını önerir. b. Harici Pozitif Kontrol: Aşağıda listelenen (Tablo 1'e başvurun) ATCC suşları gibi ticari olarak temin edilebilir kontrol malzemeleri veya pozitif olduğu bilinen önceden karakterize edilen örnekler. Harici Pozitif Kontrol Suşu Yersinia enterocolitica (ATCC 9610) Vibrio cholerae (ATCC 14033) Vibrio parahaemolyticus (ATCC 17802) ETEC (ATCC 35401) Plesiomonas shigelloides (ATCC 14029) Tablo 1: Harici Pozitif Kontrol için Ticari Olarak Temin Edilebilir Suşlar Kültür Koşulu Triptikaz Soya Agarı %5 Koyun Kanı ile 35 C'de 18 24 saat 0.5 McFarland Son Seyreltimi (1x10 8 CFU/mL) 1,1 x 10 5 CFU/mL 1,3 x 10 5 CFU/mL 6,2 x 10 4 CFU/mL 6,9 x 10 4 CFU/mL 1,3 x 10 5 CFU/mL 6

External Control (Harici Kontrol) süspansiyonunun hazırlanması için, izolatların salin solüsyonda 0.5 McFarland (~1 x 10 8 CFU/mL) turbiditede yeniden süspanse edilmesi önerilir. Tablo 1'de belirtilen konsantrasyonda bir süspansiyon elde etmek için salin çözeltisi içerisinde seri seyreltimler gerçekleştirin. Bakteriyel süspansiyonun 10 μl'si ilgili Örnek Tampon Tüpüne inoküle edin. Örnek gibi işleme koyun ve test edin (Örnek Hazırlama ve BD MAX System'ın çalışma kısımlarına bakın). 5. Tüm External Control'ler (Harici Kontroller) beklenen sonuçları vermeli (Harici Pozitif Kontrol için pozitif, Harici Negatif Kontrol için negatif) ve hiç başarısız harici kontrol olmamalıdır (Çözümlenmemiş, Belirlenmeyen veya Eksik sonuçlar). 6. Pozitif test sonucu veren bir Harici Negatif Kontrol örnek kullanımına ve/veya kontaminasyon olayına işaret eder. Karışmayı ve/ veya kontaminasyonu engellemek için örnek kullanım tekniğini gözden geçirin. Negatif bir sonuç veren bir Harici Pozitif Kontrol bir numune muamelesi/hazırlık problemine işaret eder. Örnek kullanım/hazırlık tekniğini gözden geçirin. 7. Çözümlenmemiş, Belirsiz veya Eksik test sonucu veren bir External Control (Harici Kontrol), bir reaktif veya BD MAX System hatasına işaret eder. BD MAX System monitörünü herhangi bir hata mesajı açısından kontrol edin. Uyarı ve hata kodlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı El Kitabında 9 Sistem Hata Özeti kısmına başvurun. Problem devam ederse açılmamış bir poşetten reaktifler kullanın veya yeni bir BD MAX Enteric Bacterial Panel ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel setleri kullanın. 8. Her BD MAX Enteric Bacterial Panel Ekstraksiyon Tüpü bir sentetik hedef DNA dizisi içeren bir plazmid olan bir Örnek İşleme Kontrolü içerir. Testin öngörüsünü sağlayarak, işlenen numunede bulunan DNA ile birlikte Örnek İşleme Kontrolü çıkarılır, yerleştirilir ve amplifiye edilir. Örnek İşleme Kontrolü, örnek işleme adımları sırasında DNA yakalama, yıkama ve DNA elüsyonunun etkinliğini ve ayrıca PCR analizi sırasında DNA hedef amplifikasyonu ve saptamanın etkinliğini izler. Sample Processing Control (Örnek İşleme Kontrolü) sonucu kabul kriterlerini karşılayamazsa, örnek sonucu Çözülmemiş olarak rapor edilir; ancak, tüm pozitif (POS) test kiti sonuçları rapor edilir ve hiçbir hedef negatif (NEG) olarak adlandırılmaz. Bu Master Mix başına rapor edilecektir. Çözümlenmemiş bir sonuç örnekle ilişkili inhibisyon veya reaktif hatasına işaret eder. Çözümlenmemiş olarak bildirilen herhangi bir örneği aşağıdaki Tekrar Test Prosedürü kısmına göre tekrarlayın. SONUÇLARIN YORUMLANMASI Sonuçlar BD MAX System monitöründe <Results> (Sonuçlar) penceresinde <Results> (Sonuçlar) sekmesinde bulunur. BD MAX System yazılımı otomatik olarak test sonuçlarını yorumlar. Sonuçlar analitlerin her biri için ve Örnek İşleme Kontrolü için raporlanır. Bir test sonucu hedef ve Örnek İşleme Kontrolünün amplifikasyon durumu temelinde NEG (negatif), POS (pozitif) veya UNR (çözümlenmemiş) olarak belirtilebilir. IND (Belirsiz) veya INC (Eksik) sonuçlar BD MAX System hatasından kaynaklanır. Kısmi UNR durumunda, bir veya daha fazla hedef bir POS sonucuna sahip olduğunda ve diğer hedefler UNR sonucuna sahip olduğunda, hiçbir hedef NEG olarak adlandırılmaz. Bu Master Mix başına rapor edilecektir. Sonuçlarının yorumlanması için BD MAX Enteric Bacterial Panel Prospektüsüne bakın. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sonuç yorumlama aşağıda Tablo 2 de açıklanmaktadır. Tablo 2: BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sonuç yorumlama BİLDİRİLEN TEST SONUCU SONUCUN YORUMLANMASI Plesio POS Plesiomonas shigelloides DNA saptandı Vibrio POS Vibrio (V. vulinificus, V. parahaemolyticus ve/veya V. cholerae) DNA saptandı ETEC POS Enterotoksijenik E. coli (ETEC) Isıya duyarlı ve/veya ısıya dayanıklı (LT/ST) DNA saptandı Yersi POS Yersinia enterocolitica DNA saptandı Plesio NEG Plesiomonas shigelloides DNA'sı saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptandı Vibrio NEG Vibrio (V. vulinificus, V. parahaemolyticus ve V. cholerae) DNA'sı saptanmadı Örnek İşleme Kontrolü saptandı ETEC NEG Enterotoksijenik E. coli (ETEC) Isıya duyarlı ve/veya ısıya dayanıklı (LT/ST) DNA saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptandı Yersi NEG Yersinia enterocolitica DNA'sı saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptandı Plesio UNR Plesiomonas shigelloides DNA'sı saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptanmadı (inhibitör örnek veya reaktif başarısızlığı göstergesi) Vibrio UNR Vibrio (V. vulinificus, V. parahaemolyticus ve V. cholerae) DNA'sı saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptanmadı (inhibitör örnek veya reaktif başarısızlığı göstergesi) ETEC UNR Enterotoksijenik E. coli (ETEC) Isıya duyarlı ve/veya ısıya dayanıklı (LT/ST) DNA saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptanmadı (inhibitör örnek veya reaktif başarısızlığı göstergesi) Yersi UNR Yersinia enterocolitica DNA'sı saptanmadı ve Örnek İşleme Kontrolü saptanmadı (inhibitör örnek veya reaktif başarısızlığı göstergesi) Belirsiz (IND) BD MAX System başarısızlığı nedeniyle belirsiz (Uyarı veya Hata Kodları ile a ) Eksik (INC) Tamamlanmamış Çalışma (Uyarı veya Hata Kodları ile a ) a Uyarı ve hata kodlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu'nun 9 Sorun Giderme kısmına başvurun. 7

TEKRAR TEST PROSEDÜRÜ NOT: Örnek hacmi nedeniyle, Sample Buffer Tube'ten bir tekrar testi yapılması için yeterli hacim mevcuttur. 25 ± 2 C'de saklanan Sample Buffer Tube ler için tekrar test örnekle ilk Sample Buffer Tube inokülasyonunun ardından 48 saat içinde yapılmalıdır. Alternatif olarak 2 8 C'de saklanan Sample Buffer Tube ler için tekrar test örnekle ilk Sample Buffer Tube inokülasyonunun ardından 120 saat (5 gün) içinde yapılabilir. Kalan gaita örneği de 2 8 C'de saklanırsa alındıktan sonraki 5 gün veya 2 ± 25 C'de saklanırsa 120 saat (5 gün) içinde tekrar test için kullanılabilir. NOT: Yeni örnekler tekrar örneklerle aynı çalışmada test edilebilir. Çözümlenmemiş Sonuç Çözümlenmemiş sonuçlar, örnekle ilişkili inhibisyon veya reaktif başarısızlığı, uygun hedef veya Örnek İşleme Kontrolü amplifikasyonunu önlerse alınabilir. Örnek İşleme Kontrolü belirginleşmezse, örnek Çözümlenmemiş olarak rapor edilir, tüm pozitif (POS) test kiti sonuçları rapor edilir ve tüm diğer hedefler UNR olarak adlandırılır. BD MAX System her bir hedef için sonuçları ayrı ayrı raporlar ve bir veya daha fazla BD MAX Enteric Bacterial Panel veya BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hedefi için UNR sonucu edinilebilir. Eksiksiz bir UNR durumunda, tüm hedefler bir UNR sonucuna sahip olduğunda, testin tekrarlanması gereklidir. Kısmi BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel UNR sonucu durumunda, bir veya daha fazla hedef bir POS sonucuna sahip olduğunda ve diğer tüm hedefler UNR sonucuna sahip olduğunda, testin yukarıda açıklandığı gibi tekrarlanmalıdır. Kısmi BD MAX Enteric Bacterial Panel UNR sonucu durumunda, bir veya daha fazla hedef bir POS sonucuna sahip olduğunda ve diğer tüm hedefler UNR sonucuna sahip olduğunda, testin BD MAX Enteric Bacterial Panel Prospektüsü nde açıklandığı gibi tekrarlanmalıdır. Nadir durumlarda, tekrarlanan bir test ilk olarak POS olarak bildirilmiş hedefler için yürütüldüğünde tutarsız sonuçlar gözlemlenebilir. Bu durumda herhangi pozitif sonuç tutulabilir. Örnekler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Örnek Tampon Tüpleriyle tekrarlanabilir. Örneği/örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX System'ın Çalışması kısmını izleyerek tekrar başlayın. Kalan gaita örneği, yukarıda belirtilen zaman çerçeveleri içinde yeni bir Sample Buffer Tube ile tekrar test için de kullanılabilir. Örnek Hazırlama kısmından tekrar başlayın. Belirsiz Sonuç Belirsiz sonuçlar, bir Sistem hatası olması durumunda alınabilir. Örnekler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Örnek Tampon Tüpleriyle tekrarlanabilir. Örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX System'ın Çalışması bölümünü izleyerek tekrar başlayın. Kalan gaita örneği, yeni bir Sample Buffer Tube ile yukarıda belirtilen zaman çerçeveleri içinde tekrar test için de kullanılabilir. Örnek Hazırlama kısmından tekrar başlayın. Uyarı veya hata kodu mesajlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu'na 9 bakın ( Sorun Giderme bölümüne başvurun). Eksik Sonuç Eksik sonuçlar, Örnek Hazırlama veya PCR tamamlanamazsa alınabilir. Örnekler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Örnek Tampon Tüpleriyle tekrarlanabilir. Örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX System'ın Çalışması kısmını izleyerek tekrar başlayın. Kalan gaita örneği, yeni bir Sample Buffer Tube ile yukarıda belirtilen zaman çerçeveleri içinde tekrar test için de kullanılabilir. Örnek Hazırlama kısmından tekrar başlayın. Uyarı veya hata kodu mesajlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu'na 9 bakın ( Sorun Giderme bölümüne başvurun). External Control (Harici Kontrol) Hatası External Control'ler (Harici Kontroller) test edildiklerinde beklenen sonuçlar vermelidir. Örneklerin hatalı bir Harici Kontrol sonucu nedeniyle tekrarlanması gerekirse, Örnek Tampon Tüplerinden taze hazırlanmış Harici Kontroller ile birlikte yukarıda tanımlanan zaman çerçeveleri içinde tekrarlanmaları gerekir. Örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX System'ın Çalışması bölümünü izleyerek tekrar başlayın. ÖRNEKLERDEN KÜLTÜR ALINMASI Pozitif örneklerden organizmaların kültürü ve tanımlanması laboratuvar prosedürleri uyarınca yapılmalıdır. PROSEDÜRÜN KISITLI OLDUĞU ALANLAR Bu ürün yalnızca BD MAX System üzerinde ve BD MAX Enteric Bacterial Panel ile birlikte kullanılmalıdır. BD MAX Enteric Bacterial Panel e özel kısıtlamalar için BD MAX Enteric Bacterial Panel Prospektüsüne bakın. Bu ürün sadece koruyucu içermeyen ve Cary-Blair koruyucu içeren insan dışkı örnekleri ile kullanılmak içindir. Rektal swablardan veya sabit dışkılardan alınan dışkı örnekleri BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile valide edilmemiştir. Hatalı sonuçların nedeni uygunsuz örnek toplama, muamele, saklama, teknik hata, örnek karışması veya örnekteki organizma sayısının testin analitik duyarlılığının altında olması olabilir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sonucu IND, INC veya UNR (bir veya daha fazla hedef için) ise, bu durumda test tekrar edilmelidir. Bir BD MAX Extended Bacterial Panel pozitif sonucu canlı organizmaların mutlaka bulunduğu anlamına gelmez. Ancak hedef DNA varlığına işaret eder. Primer veya prob bağlayıcı bölgelerdeki mutasyonlar veya polimorfizmler yeni veya bilinmeyen hedef varyantlarının saptanmasını etkileyebilir ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testi ile yalancı negatif bir sonuç verebilir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel eş zamanlı olarak Vibrio vulnificus, V. parahaemolyticus, ve V. cholerae saptar ve türler arasında ayrıştırma yapmaz. Tüm PCR tabanlı testlerde olduğu gibi testin LoD (Saptama Sınırı) altında çok düşük hedef düzeyleri saptanabilir ama sonuçlar tekrar edilemeyebilir. 8

Yanlış negatif sonuçlar örneklerin yetersiz toplanması, taşınması veya saklanması sonucunda nükleik asit kaybı veya yetersiz bakteriyel bakteriyel lizis nedeniyle oluşabilir. Örnek İşleme Kontrolü teste PCR amplifikasyonu inhibitörleri içeren örneklerin tanımlanmasına yardımcı olmak üzere, bir bütün halinde reaktif entegrasyonu ve test sisteminin kontrolü olarak eklenmiştir. Örnek İşleme Kontrolü nükleik asidin örneklerin yetersiz toplanması, taşınması veya saklanması nedeniyle kaybedilip kaybedilmediğini veya bakteriyel hücrelerin yetersiz lizise uğrayıp uğramadığını belirtmez. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sonuçları doktorun elindeki diğer bilgiler ve klinik gözlemlerle birlikte kullanılmalıdır. Tüm in vitro diyagnostik testlerle olduğu gibi pozitif ve negatif prediktif değerler prevalansa yüksek ölçüde bağlıdır. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel performansı prevalansa ve test edilen popülasyona göre değişebilir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sonuçları hedef varlığını azaltabilecek eş zamanlı tıbbi tedaviden etkilenebilir veya etkilenmeyebilir. Sample Buffer Tube organizmanın canlılığını desteklemek üzere tasarlanmamıştır. Kültür gerekliyse orijinal örnekten gerçekleştirilmelidir. Bu testin performansı Yersinia enterocolitica, Plesiomonas shigelloides, ETEC LT/ST, Vibrio cholerae, V. parahaemolyticus veya V. vulnificus enfeksiyonlarının izlenmesi için tesis edilmemiştir. Bu test kalifiye bir testtir ve kuantitatif değerler sağlamaz veya mevcut organizmaların miktarını göstermez. Bu testin performansı immünolojik olarak engelli kişiler için veya gastrointertinal enfeksiyon semptomu olmayan hastalar için değerlendirilmemiştir. Müdahale eden maddelerin etkisi yalnızca bu etikette listelenenler için değerlendirilmiştir. Olası interferans, İnterferans bölümünde açıklanan maddeler hariç diğer maddeler için değerlendirilmemiştir. Aşağıdaki interferans bölümünde açıklanan maddeler hariç diğer maddelerin interferansı hatalı sonuçlar doğurabilir. İnsanlarda enfeksiyonla ilişkili V. mimicus ve bir kategorize edilmemiş Vibrio türü, yani Vibrio HENC'nin BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile çapraz reaksiyona girme potansiyeli olduğu gösterilmiştir. Analitik Spesifite bölümünde listelenenler dışındaki organizmalarla çapraz reaktivite değerlendirilmemiştir. BEKLENEN DEĞERLER BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel çalışmasındaki bildirilebilir sonuçlar, coğrafi olarak farklı altı (6) klinik merkezden elde edilmiştir. Çalışma, iki gaita örneği türüyle yapılmıştır; Cary-Blair korumalı ve korumasız. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel çalışmasında belirlendiği şekliyle hedef başına pozitif vakaların sayısı ve yüzdesi Tablo 3'te sunulmuştur. Tablo 3. Çalışma Merkezi başına BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Pozitivitesi Örnek Türü Tesis Vibrio P. shigelloides Y. enterocolitica ETEC Cary-Blair Korunan 1 %0,3 (1/302) %0,0 (0/302) %0,3 (1/302) %1,0 (3/302) 2 %0,5 (3/635) %0,2 (1/635) %0,2 (1/635) %0,3 (2/635) 3 %6,7 (1/15) %6,7 (1/15) %6,7 (1/15) %0,0 (0/15) 4 %0,5 (2/413) %0,2 (1/413) %0,0 (0/413) %1,9 (8/413) 1 %0,0 (0/58) %0,0 (0/58) %0,0 (0/58) %0,0 (0/58) 3 %0,3 (1/295) %0,0 (0/295) %0,0 (0/295) %1,0 (3/295) 4 %0,0 (0/1) %0,0 (0/1) %0,0 (0/1) %0,0 (0/1) 5 %0,3 (1/301) %0,3 (1/301) %0,0 (0/301) %3,0 (9/302) 6 %0,0 (0/217) %0,0 (0/217) %0,0 (0/217) %2,3 (5/217) PERFORMANS ÖZELLİKLERİ BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel in klinik performans özellikleri çok merkezli bir araştırma çalışmasında belirlenmiştir. Çalışma, dışkı örneklerinin rutin hasta bakımının parçası olarak toplandığı, deneye katıldığı ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile test edildiği, coğrafi olarak farklı, toplam altı (6) klinik merkezi içermiştir. Örnekler dışkı kültürünün bir sağlık hizmetleri sağlayıcısı tarafından istendiği, akut bakteriyel gastroenterit, enterit veya kolitten şüphelenilen pediyatrik veya yetişkin hastalardan alınmıştır. Taze ve dondurulmuş prospektif örneklerde Yersinia enterocolitica, Vibrio ve Plesiomonas shigelloides tanımlaması için referans yöntem, görünüşe ve alternatif PCR testi ve kesin tanı için potansiyel koloniler üzerinde yapılan çift yönlü sekanslama işlemiyle devam eden oksidaz testine dayanan potansiyel kolonileri tanımlamak için kültür besiyerinde büyütülür. ETEC için karşılaştırma yöntemi, dışkı örnekleri üzerinde uygulanan iki alternatif PCR testi ve ardından çift yönlü sekanslamadır. Retrospektif örnekler için, geçmiş sonuçları toplama tesisinde kaydedilmiştir. Geçmiş sonuçları alternatif PCR testi ve hedef DNA nın varlığını onaylamak üzere kompozit karşılaştırma yönteminin parçası olarak iki yönlü sekanslama kullanılarak onaylanmıştır. Kaydolan toplam 2.410 örnek arasından 2.264 prospektif örnek (882 korunmayan ve 1.382 Cary-Blair korunan) ve 146 retrospektif örnek (87 korunmayan ve 59 Cary-Blair korunan) klinik değerlendirmeye katılmıştır. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ve karşılaştırma yönteminden alınan tüm test sonuçları tek sonuçlardı; hiç ko-enfeksiyon tespit edilmemişti. Tablo 4'te toplamda 2.403 uygun örnek için hasta yaşına ve örnek türüne göre katılan uyumlu örneklerin sayısı açıklanmaktadır. Tablo 5 ila 13 boyunca klinik deney sırasında gözlemlenen, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel'in performans özellikleri açıklanmaktadır. 9

Tablo 4. Yaş Grubuna ve Örnek Tipine Göre Uyumlu Klinik Deney Kayıt Özeti Yaş Grubu Cary-Blair korunan Toplu 0 1 ay 6 0 6 1 aydan 2 yıla 250 66 316 2 12 311 164 475 13 18 141 85 226 19 21 44 23 67 21 Üzeri 671 621 1.292 Unknown (Bilinmeyen) 16 5 21 Toplam 1.439 964 2.403 Vibrio Performans Sonuçları Cary-Blair korunan örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sırasıyla % ve %99,6 Vibrio prospektif pozitif ve negatif örnek, ve % retrospektif pozitif ve negatif örnek tanımlamıştır. örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Vibrio negatif örneklerin %99,8'ini tanımlamıştır. Vibrio için herhangi bir korunmayan prospektif pozitif bulunmamıştır, dolayısıyla performans tahmini yapılmamıştır. Retrospektif pozitif ve negatif örneklerin sırasıyla %'ü ve %97,8'i tanımlanmıştır (bkz. Tablo 5). Vibrio prevalansı düşük olduğundan, çalışmada toplanan verileri desteklemek için, bulunan örneklerin değerlendirmesi yapılmıştır. Bunlar, negatif dışkı matriksinde BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile saptanan her bir Vibrio türü için 4 farklı suşun güçlendirilmesiyle hazırlanmıştır. Suşlar, çeşitli klinik olarak önemli yüklerde güçlendirilmiş ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testi için üç (3) klinik çalışma tesisi arasında rastgele dağıtılmıştır. Test edilen yükler arasında % pozitif benzerlik elde edilmiştir. Sonuçlar Tablo 6 de gösterilmiştir. Tablo 5. Vibrio Genel Performansı Örnek Türü Örnek Kökeni BD MAX Cary-Blair korunan Cary-Blair korunan Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Referans Yöntem Negatif Toplam P 2 5 7 N 0 1.351 1.351 Toplam 2 1.356 1.358 Pozitif Yüzde Anlaşması : % (%34,2, %) Negatif Yüzde Anlaşması : %99,6% (%99,1, %99,8) Retrospektif (Dondurulmuş) P 2 0 2 N 0 16 16 Toplam 2 16 18 Pozitif Yüzde Anlaşması : % (%34,2, %) Negatif Yüzde Anlaşması : %% (%80,6, %) Prospektif (Taze+Dondurulmuş) P 0 2 2 N 0 866 866 Toplam 0 868 868 Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması : %99,8 (%99,2, %99,9) Retrospektif (Dondurulmuş) P 2 1 3 N 0 45 45 Toplam 2 46 48 Pozitif Yüzde Anlaşması : % (%34,2, %) Negatif Yüzde Anlaşması : %97,8 (%88,7, %99,6) BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel V. paraheamoliticus, V. cholerae ve V. vulnificus türlerini saptamak için tasarlanmışken, panel, sonuçları tür seviyesine bildirmez. Vibrio tür tanımlaması, referans yöntemi varsayılan pozitif izolat varlığından yapılan alternatif PCR testinin sekanslamasıyla elde edilmiştir. Çalışma sırasında eşit sayıda V. cholerae ve V. parahaemoliticus elde edilmiş olup hiç V. vulnificus elde edilmemiştir. Üç (3) V. parahaemoliticus ve (3) V. cholerae elde edilmiştir. 10

Tablo 6. Örnek Tipi Başına Vibrio için Bulunan Örnek Sonuçları Örnek Türü Cary-Blair korunan BD MAX Pozitif Beklenen Sonuç Negatif Toplam P 48 0 48 N 0 144 144 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%92,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%97,4, %) P 48 0 48 N 0 144 144 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%92,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%97,4, %) Plesiomonas shigelloides Performans Sonuçları Cary-Blair korunan örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, Plesiomonas shigelloides prospektif negatif örneklerinin %99,9'unu ve retrospektif pozitif ve negatif örneklerin %'ünü tanımlamıştır. Cary-Blair prospektif pozitif P. shigelloides tanımlanmamıştır, dolayısıyla performans tahmini yapılmamıştır. örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel P. shigelloides negatif örneklerin %99,9'unu tanımlamıştır. Prospektif pozitif P. shigelloides tanımlanmamıştır, dolayısıyla performans tahmini yapılmamıştır. Retrospektif pozitif ve negatif örneklerin sırasıyla %'ü ve %97,9'i tanımlanmıştır (bkz. Tablo 7). P. shigelloides prevalansı düşük olduğundan, çalışmada toplanan verileri desteklemek için, bulunan örneklerin değerlendirmesi yapılmıştır. Bunlar, 12 farklı P. shigelloides suşu negatif dışkı matrikslerinde güçlendirilerek hazırlanmıştır. Suşlar, çeşitli klinik olarak önemli yüklerde güçlendirilmiş ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testi için üç (3) klinik çalışma tesisi arasında rastgele dağıtılmıştır. Test edilen yükler arasında % pozitif benzerlik elde edilmiştir. Sonuçlar Tablo 8 de gösterilmiştir. Tablo 7. Plesiomonas shigelloides Genel Performans Örnek Türü Örnek Kökeni BD MAX Cary-Blair Korunan Cary-Blair Korunan Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması: %99,9 (%99,5%, %) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%51, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%90,8, %) Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması: %99,9 (%99,3%, %) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%43,9, %) Negatif Yüzde Anlaşması: %97,9 (%88,9, %99,6) Pozitif Referans Yöntem Negatif Toplam P 0 2 2 N 0 1.355 1.355 0 1.357 1.357 P 4 0 4 N 0 38 38 4 38 42 P 0 1 1 N 0 863 863 0 864 864 P 3 1 4 N 0 46 46 3 47 50 11

Tablo 8. Örnek Tipi Başına Plesiomonas shigelloides için Bulunan Örnek Sonuçları Örnek Türü Cary-Blair Korunan BD MAX Pozitif Beklenen Sonuç Negatif Toplam Pozitif 48 0 48 Negatif 0 144 144 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%92,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%97,4, %) Pozitif 48 1 a 49 Negatif 0 143 143 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%92,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: %99,3 (%96,2, %99,9) a Örnek XW0007C başlangıçta Plesiomonas shigelloides için pozitif bulunmuş ancak SBT'den (Örnek Tampon Tüpü) tekrar test edildiğinde (Tutarsız analiz) bu hedef için negatif bulunmuştur. Yersinia enterocolitica Performans Sonuçları Cary-Blair korunan örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, Yersinia enterocolitica prospektif negatif örneklerinin %99,9'unu ve retrospektif negatif örneklerin %'ünü tanımlamıştır. Cary-Blair prospektif pozitif ve retrospektif pozitif Y. enterocolitica tanımlanmamıştır, dolayısıyla performans tahmini yapılmamıştır. örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Y. enterocolitica negatif prospektif örneklerin %'unu tanımlamıştır. Prospektif pozitif Y. enterocolitica tanımlanmamıştır, dolayısıyla performans tahmini yapılmamıştır. Retrospektif pozitif ve negatif örneklerin %'ü tanımlanmıştır (bkz. Tablo 9). Y. enterocolitica prevalansı düşük olduğundan, çalışmada toplanan verileri desteklemek için, bulunan örneklerin değerlendirmesi yapılmıştır. Bunlar, 12 farklı Y. enterocolitica suşu negatif dışkı matrikslerinde güçlendirilerek hazırlanmıştır. Suşlar, çeşitli klinik olarak önemli yüklerde güçlendirilmiş ve BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testi için üç (3) klinik çalışma tesisi arasında rastgele dağıtılmıştır. %97,9 anlaşma elde edilen klinik yükteki bir Cary-Blair korunan örnek tipi hariç test edilen yüklerde % pozitif anlaşma elde edilmiştir (Sonuçlar Tablo 10'da verilmiştir). Tablo 9. Yersinia enterocolitica Genel Performans Örnek Türü Örnek Kökeni BD MAX Cary-Blair Korunan Cary-Blair Korunan Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması: %99,9 (%99,6%, %) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması: % (%89,3%, %) Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması Hesaplaması için Veri Yok Negatif Yüzde Anlaşması: % (%99,6%, %) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%70,1, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%92,4, %) Pozitif Referans Yöntem Negatif Toplam P 0 1 1 N 0 1.341 1.341 0 1.342 1.342 P 0 0 0 N 0 32 32 0 32 32 P 0 0 0 N 0 863 863 0 863 863 P 9 0 9 N 0 47 47 9 47 56 12

Tablo 10. Örnek Tipi Başına Yersinia enterocolitica için Bulunan Örnek Sonuçları Örnek Türü Cary-Blair Korunan BD MAX Pozitif Beklenen Sonuç Negatif Toplam Pozitif 47 0 47 Negatif 1 a 144 145 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: %97,9 (%89,1, %99,6) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%97,4, %) Pozitif 48 0 48 Negatif 0 144 144 Toplam 48 144 192 Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%92,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%97,4, %) a Örnek XW0351C başlangıçta Yersinia enterocolitica için negatif bulunmuş ancak SBT'den tekrar test edildiğinde (Tutarsız analiz) bu hedef için pozitif bulunmuştur. Enterotoxigenic E. coli (ETEC LT/ST) Performans Sonuçları Cary-Blair korunan örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sırasıyla % ve %99,8 ETEC prospektif pozitif ve negatif örnek, ve % retrospektif pozitif ve negatif örnek tanımlamıştır. örnek tipi için, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel sırasıyla % ve %99,9 ETEC prospektif pozitif ve negatif örnek, ve sırasıyla %90 ve %96,3 retrospektif pozitif ve negatif örnek tanımlamıştır (Tablo 11'e bakın). Tablo 11. Enterotoksijenik E. coli (ETEC LT/ST) Genel Performans Örnek Türü Örnek Kökeni BD MAX Cary-Blair Korunan Cary-Blair Korunan Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%72,2, %) Negatif Yüzde Anlaşması: %99,8 (%99,3, %99,9) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%56,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: % (%87,9, %) Prospektif (Taze+Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: % (%80,6, %) Negatif Yüzde Anlaşması: %99,9 (%99,3, %) Retrospektif (Dondurulmuş) Pozitif Yüzde Anlaşması: %90 (%59,6, %98,2) Negatif Yüzde Anlaşması: %96,3 (%81,7, %99,3) Karşılaştırıcı Yöntemi P N Toplam P 10 3 13 N 0 1.348 1.348 10 1.351 1.361 P 5 0 5 N 0 28 28 5 28 33 P 16 1 17 N 0 818 818 16 819 835 P 9 1 10 N 1 26 27 10 27 37 ETEC için referans yöntemi, dışkı örnekleri üzerinde uygulanan iki alternatif PCR testi ve çift yönlü sekanslamadır (Bkz. Tablo 12). BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel aşağıda açıklanan toksin tiplerini saptamak için tasarlanmışken, panel, sonuçları türlere veya toksin seviyesine bildirmez. 13

Örnek Türü Cary-Blair Korunan ETEC Tablo 12. Klinik Deney Sırasında Gözlemlenen Toksin Başına ETEC Performansı Örnek Kökeni Prospektif Retrospektif Prospektif Retrospektif LT Pozitif Yüzde Anlaşması (PPA) Tahmini Yüzde,0 (4/4) (51,0,,0),0 (4/4) (51,0,,0),0 (4/4) (51,0,,0),0 (7/7) (64,6,,0) a ETEC toksini saptandı ancak belirli türler tanımlanmadı ST ST STp STh Pozitif Yüzde Anlaşması (PPA) Tahmini Yüzde,0 (5/5) (56,6,,0),0 (5/5) (56,6,,0),0 (7/7) (64,6,,0) 80,0 (4/5) (37,6, 96,4) Pozitif Yüzde Anlaşması (PPA) Tahmini Yüzde,0 (2/2) (34,2,,0),0 (4/4) (51,0,,0),0 (3/3) (43,9,,0),0 (2/2) (34,2,,0) Pozitif Yüzde Anlaşması (PPA) Tahmini Yüzde,0 (1/1) (20,7,,0) Unknown (Bilinmeyen) a Pozitif Yüzde Anlaşması (PPA) Tahmini Yüzde,0 (3/3) (43,9,,0) 0 0,0 (2/2) (34,2,,0),0 (2/2) (34,2,,0),0 (7/7) (64,6,,0) Tutarsız Sonuçlar Klinik deneyde on dokuz (19) tutarsız sonuç vardı. On sekiz (18) yanlış pozitif (FP) ve bir (1) yanlış negatif (FN) sonuç. Bir (1) ETEC FN, bir (1) ETEC FP ve bir (1) Vibrio FP olmak üzere üç (3) retrospektif örnek sınırlı örnek hacmi nedeniyle tutarsızlık analizde test edilmedi. Test edilen on altı (16) FP tutarsız örneği içinde, yedi (7) FP Vibrio, dört (4) P. shigelloides, bir (1) Y. enterocolitica ve dört (4) ETEC vardı. Yedi (7) Vibrio tutarsız örneğinden beşi (5) hem BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hem de karşılaştırma yöntemi açısından negatifti. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile pozitif durum elde eden kalan iki (2) Vibrio FP örneği uyumsuzluk çalışmasındaki referans yöntem testinde negatif durumla eşleşti. Dört (4) P. shigelloides tutarsız sonucundan biri (1) hem BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hem de karşılaştırma yöntemi için negatifti. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile pozitif durum elde eden iki (2) örnek uyumsuzluk çalışmasındaki karşılaştırma yöntemi testinde negatif durumla eşleşti. Sırasıyla BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, ETEC ve Y. enterocolitica için bir başka hedefte de pozitiflerdi. Bir (1) Retrospektif örnek, çalışmada gerçek Vibrio pozitif ve P. shigelloides FP idi. Tutarsızlık analizinde bu örnek karşılaştırma yöntemi için P. shigelloides negatif idi ve Vibrio and P. shigelloides için pozitif idi (1/3). Y. enterocolitica FP örneği hem BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hem de tutarsızlık analizinde karşılaştırma yöntemi için negatifti. Altı (6) ETEC FP den biri (1) hem BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel hem de karşılaştırma yöntemi için negatifti. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile pozitif durum elde eden iki (2) ETEC örneği uyumsuzluk çalışmasındaki RM testinde ETEC pozitif durumla eşleşti. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile pozitif durum elde eden bir (1) ETEC örneği uyumsuzluk çalışmasındaki karşılaştırma yöntemi testinde negatif durumla eşleşti. Bildirilemez Oranı Başlangıç çözümlenemeyen oranı, hem BD MAX Enteric Bacterial Panel hem de BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testleri göz önünde bulundurularak hesaplanmıştır. İlk olarak değerlendirilen 2.264 örnekten Cary-Blair korunan örneklerin %3,1'i ve korunmayan örneklerin %3,9'u başlangıçta çözümlenmemiş olarak bildirilmiştir. Geçerli bir tekrar testi takiben çözümlenmemiş oranı, yalnızca BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel göz önünde bulundurularak hesaplandığında prospektif Cary-Blair korunan örneklerin yalnızca %0,1'i ve prospektif korunmayan örneklerin %0,3'ü çözülmemiş olarak kalmıştır. Hem BD MAX Enteric Bacterial Panel hem de BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testleriyle ilk olarak değerlendirilen tüm örneklerde, Cary-Blair korunan örneklerin %1,0'i ve korunmayan örneklerin %1,5'i başlangıçta Belirsiz olarak bildirilmiştir. Geçerli bir tekrar testinin ardından, Cary-Blair korunanların %0,1'i Belirsiz kalırken korunmayan örneklerin hiçbiri Belirsiz kalmamıştır. Bu çalışma sırasında hiçbir eksik bildirimi yapılmamıştır (bkz. Tablo 13). Tablo 13. Bildirilemez Oranları (Toplam) 0 Örnek Türü Cary-Blair korunan Toplam Başlangıç xebp 2,4 35/1.430 (1,8, 3,4) 2,2 21/958 (1,4, 3,3) 2,3 56/2.388 (1,8, 3,0) Çözümlenmemiş Oranı Belirsiz Oran Eksik Oranı Toplam Oran Başlangıç EBP+xEBP 3,1 44/1.430 (2,3, 4,1) 3,9 37/958 (2,8, 5,3) 3,4 81/2.388 (2,7, 4,2) Son xebp 0,1 1/1.427 (0,0, 0,4) 0,3 3/958 (0,1, 0,9) 0,2 4/2.385 (0,1, 0,4) Başlangıç EBP+xEBP 1,0 15/1.430 (0,6, 1,7) 1,5 14/958 (0,9, 2,4) 1,2 29/2.388 (0,8, 1,7) Son xebp 0,1 1/1.427 (0,0, 0,4) 0,0 0/958 (0,0, 0,4) 0,0 1/2.385 (0,0, 0,2) Başlangıç EBP+xEBP 0,0 0/1.430 (0,0, 0,3) 0,0 0/958 (0,0, 0,4) 0,0 0/2.388 (0,0, 0,2) Son EBP+xEBP 0,0 0/1.427 (0,0, 0,3) 0,0 0/958 (0,0, 0,4) 0,0 0/2.385 (0,0, 0,2) Başlangıç xebp 3,5 50/1.430 (2,7, 4,6) 3,7 35/958 (2,6, 5,0) 3,6 85/2.388 (2,9, 4,4) Başlangıç EBP+xEBP 4,1 59/1.430 (3,2, 5,3) 5,3 51/958 (4,1, 6,9) 4,6 110/2.388 (3,8, 5,5) Son xebp 0,1 2/1.427 (0,0, 0,5) 0,3 3/958 (0,1, 0,9) 0,2 5/2.385 (0,1, 0,5) 14

Analitik Dahil Olma Bu çalışmaya, bir dizi BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel testi hedef suşu dahil edilmiştir. Suş seçimi kriterleri prevalans, serotip ve uygun olduğunda coğrafi konumu kapsar. Altmış dokuz (69) suş test edilmiş ve bunlara iyi karakterize edilmiş klinik izolatlar ve halka açık koleksiyonlar dahil edilmiştir. Dahil etme testine 10 Plesiomonas shigelloides suşu, 10 Yersinia enterocolitica suşu, 36 Vibrio (cholerae, parahaemolyticus ve vulnificus) suşu ve 13 ETEC LT/ST suşu dahil edilmiştir. Suşlar, ilgili korunmayan dışkı matriksinin < 3 LoD (Saptama Sınırı) seviyesinde test edilmiştir. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel, ilk testten sonra, test edilen 69 suşun 68'ini doğru şekilde tanımlamıştır. Bir ETEC ST/LT (CCUG 38088) suşu kabul kriterlerini karşılamamış ve daha fazla değerlendirmeye tabi tutulmuştur. Bu suş saptama için gerekli minimum konsantrasyonu belirlemek üzere titre edilmiş ve test edilmiştir. Tekrardan sonra, ETEC ST/LT'nin CCUG 38088 suşu 10 x LoD'de saptanmıştır. Analitik Duyarlılık BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için analitik hassasiyet (Saptama Limiti veya LoD) şu şekilde belirlenmiştir: Her bir hedef organizma bu çalışmaya dahil edilmeden önce kültürden hazırlanmış ve kantifiye edilmiştir. Bağımsız inokülasyon özeleri her bir organizma preparatına batırılmıştır ve her bir inokülasyon özesi sonrasında BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel tarafından tüm hedefler için negatif olarak önceden belirlenmiş halihazırda fekal matris içeren bir Sample Buffer Tube e aktarılmıştır (korunan veya korunmayan). Her organizma her örnek tipinde minimum 24 replikat ile (korunan veya korunmayan) 2 kullanıcı tarafından 3 farklı BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel üretim lotu kullanarak çalışılmıştır. Belirli bir organizma için LoD, belirlenen LoD konsantrasyonun en az 24 ek replikat test edilerek onaylanmıştır. Tüm replikatların %95 inden fazlasındaki en düşük konsantrasyon olarak tanımlanan analitik hassasiyetin (LoD) korunmayan örnekler için 34 ila 534 CFU/SBT ve 3.434 ila 53.852 CFU/mL (dışkıda) arasında tüm suşlar için değişirken korunan örnekler için 79 ila 257 CFU/SBT ve 7.860 ila 25.712 CFU/mL (dışkıda) arasında değişmesi beklenir. (bkz. Tablo 14). Hedef organizma Tablo 14: Bireysel Hedefler için BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Saptama Sınırı (1. suş) (2. suş) Cary-Blair Koruyucu İçeren (1. suş) LoD a (CFU/SBT) LoD a (dışkıda CFU/mL) LoD a (CFU/SBT) LoD a (dışkıda CFU/mL) LoD a (CFU/SBT) LoD a (dışkıda CFU/mL) Plesiomonas shigelloides ATCC 14029 b ; 458 45.752 155 15.481 257 25.712 ATCC 14030 c Yersinia enterocolitica ATCC 9610 b ; 209 20.900 311 31.099 227 22.723 CCUG 4588 c ETEC ST/LT ATCC 35401 b ; 34 3.434 534 53.852 137 13.706 CCUG 47194 c Vibrio cholerae ATCC 14033 b ; 149 14.942 43 4.344 252 25.238 ENF 9786 c Vibrio parahaemolyticus ATCC17802 b ; 207 20.708 80 8.031 124 12.424 ENF 5887 c Vibrio vulnificus ATCC 27562 b 2; 131 13.093 80 7.959 79 7.860 ENF 10727 c a Hücre/SBT ve hücre/ml cinsinden ifade edilen Vibrio hariç LoD konsantrasyonları CFU/SBT ve CFU/mL olarak ifade edilmiştir. b 1. suş c 2. suş Analitik Özgünlük (Çapraz Reaktivite ve Hariç Tutma) BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel örneklerinde bulunması muhtemel diğer organizmalar (parazitler, bakteriler, virüsler, parazitler, maya) veya filogenetik olarak ilgili örnekleri içeren örneklerle yapılmıştır. Bakteriyel hücreler, mayalar ve virüsler Sample Buffer Tube da 10 6 CFU da, dışkıda hücre veya genom eşdeğeri/ml, veya dışkıda 10 5 PFU/mL de ya da dışkıda TCID50/mL test edilmiştir. Toplam 184 organizma test edilmiştir ve bu organizmalar Tablo 15'da listelenmiştir. Test edilen bakteriyel suşların, maya, parazit ve virüslerin çoğu BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile negatif sonuçlar üretmiştir. İnsan hastalığıyla ilişkili iki (2) Vibrio mimicus suşu, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile pozitif sonuçlar üretmiştir. İnsanlardaki enfeksiyonlarla ilişkili OLMAYAN ve dolayısıyla insan dışkısında karşılaşılma olasılığı düşük olan aşağıdaki 8 Vibrio türü BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile saptanmıştır: V. brasiliensis, V. campbellii, V. harveyi, V. hispanicus, V. nereis, V. pacini, V. rotiferianus ve V. tubiashii. Yapılan in silico analize göre aşağıdaki Vibrio türleri BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile saptanabilir: 2 İnsanlardaki enfeksiyonlarla ilişkili OLMAYAN ve dolayısıyla insan dışkısında karşılaşılma olasılığı düşük olan Vibrio türleri: V. coralliilyticus and Moritella marina (eski adıyla Vibrio marinus). İnsanlardaki enfeksiyonlarla ilişkili bir (1) kategorize edilmemiş Vibrio türü; Vibrio HENC. 15

Tablo 15. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Özgüllüğünü Belirlemek İçin Test Edilen Organizmalar Organizmalar Abiotrophia defectiva Clostridium tetani Peptostreptococcus anaerobius Acinetobacter baumannii Collinsella aerofaciens Photobacterium damselae-underart damselae Acinetobacter lwoffii Corynebacterium genitalium Porphyromonas asaccharolytica Adenovirus 11 Slobitski Cryptosporidium hominis Prevotella melaninogenica Adenovirus, type 1 Cryptosporidium parvum Proteus mirabilis Adenovirus, type 14 Cytomegalovirus Proteus penneri Adenovirus, type 18 Desulfovibrio piger Proteus vulgaris Adenovirus, type 2 Edwardsiella tarda Providencia alcalifaciens Adenovirus, type 3 Eggerthella lenta Pseudomonas aeruginosa Adenovirus, type 31 Encephalitozoon cuniculi Rotavirus Adenovirus, type 4 Encephalitozoon hellum Ruminococcus bromii Adenovirus, type 40 Entamoeba dispar Salmonella bongori Adenovirus, type 41 Entamoeba gingivalis Salmonella enterica-underart arizonae Adenovirus type 5 Adenoid 75 Entamoeba invadens Salmonella enterica-underart enterica Adenovirus, type 8 Entamoeba ranarum Salmonella enterica -underart enterica serovar enteriditis Aeromonas caviae Enterobacter aerogenes Serratia fonticola Aeromonas hydrophila Enterobacter cloacae-underart. cloacae Serratia liquefaciens Aeromonas schubertii Enterococcus faecalis Serratia marcescens-underart marcescens Aeromonas sobria Enterococcus faecium Shewanella algae Aeromonas veronii Enterovirus 68 Shigella boydii Alcaligenes faecalis/underart faecalis Enterovirus type 69 Shigella dysenteriae Anaerococcus tetradius Escherichia fergusonii Shigella flexneri Arcobacter butzleri Escherichia hermannii Shigella sonnei Arcobacter cryaerophilus Escherichia vulneris Shimwellia blattae Astrovirus, type 4 Fusobacterium varium Staphylococcus aureus-underart aureus Bacillus cereus Gardnerella vaginalis Staphylococcus epidermidis Bacteroides caccae Gemella morbillorum Stenotrophomonas maltophilia Bacteroides fragilis Giardia lamblia Streptococcus agalactiae Bacteroides stercoris Giardia muris Streptococcus intermedius Bacteroides thetaiomicron Haemophilus influenzae Streptococcus pyogenes Bacteroides vulgatus Hafnia alvei Streptococcus salivarius-underart salivarius Bifidobacterium adolescentis Helicobacter fennelliae Streptococcus suis Bifidobacterium bifidum Helicobacter pylori Trabulsiella guamensis Bifidobacterium longum subsp. longum Hepatitis A-virus Trichomonas vaginalis Blastocystis hominis Herpes Simplex-virus, type 1 Veillonella parvula Bovine enterovirus, type 6 Human adenovirus 22 Vibrio alginolyticus Bovine parvovirus Human Adenovirus 50 Vibrio brasiliensis Campylobacter coli Human Coxsackievirus A 9 Vibrio campbellii Campylobacter fetus-underart fetus Human Coxsackievirus B 1 Vibrio comitans Campylobacter hyointestinalis Human Coxsackievirus B 3 Vibrio diazotrophicus Campylobacter jejuni-art jejuni Human echovirus 1 Vibrio fluvialis Campylobacter lari Human herpesvirus 2 Vibrio harveyi Campylobacter mucosalis Human rhinovirus 1A Vibrio hispanicus Campylobacter showae Klebsiella oxytoca Vibrio mimicus Campylobacter sputorum biovar sputorum Klebsiella pneumoniae-underart pneumoniae Vibrio natriegens Campylobacter ureolyticus Lactobacillus acidophilus Vibrio nereis Cedecea davisae Lactobacillus reuteri Vibrio pacinii Chlamydia trachomatis Lactococcus lactis-underart lactis Vibrio rotiferianus Citrobacter amalonaticus Leminorella grimontii Vibrio sinaloensis Citrobacter freundii Listeria monocytogenes Vibrio tubiashii Citrobacter koseri Megamonas hypermegale Yersinia bercovieri Citrobacter sedlakii Megasphaeara elsdenii Yersinia frederiksenii Clostridium difficile Morganella morganii-underart morganii Yersinia intermedia Clostridium histolyticum Neisseria gonorrhoeae Yersinia kristensenii Clostridium novyi Norovirus gruppe I Yersinia mollaretii Clostridium perfringens Norovirus gruppe II Yersinia rohdei Clostridium ramosum Parabacteroides merdae Clostridium septicum Pentatrichomonas hominis Clostridium sordellii Peptoniphilus asaccharolyticus 16

İnterferans Yapan Maddeler BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile potansiyel enterferans açısından dışkı örneklerinde bazen bulunabilen on dokuz (19) biyolojik ve kimyasal madde değerlendirilmiştir. Bu çalışmaya, aynı anda test edilen 8 farklı antibiyotikten kombinasyonundan oluşan bir Antibiyotik Karışımı dahil edilmiştir (her antibiyotik, dışkı örneğinde bulunabilecek konsantrasyonda kullanılmıştır). Nistatin kreminin 3,1 mg/ml'nin üzerindeki seviyelerde interferans yaptığı bulunmuştur. Spremisidal yağ ve hidrokortizon kreminin 2,5 mg/ml'nin üzerindeki seviyelerde interferans yaptığı bulunmuştur. Vagilin 0,92 mg/ml'nin üzerindeki seviyelerde interferans yaptığı bulunmuştur. Sonuçlar test edilen herhangi bir maddeyle bildirilebilir enterferans göstermemiştir (Tablo 16'ya bakın). Ayrıca, BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile potansiyel enterferans açısından dışkı örneklerinde endojen bulunabilen mikroorganizmalar değerlendirilmiştir. Yüksek konsantrasyonda on (10) organizma test edilmiştir (2 > 10 6 CFU/mL dışkı). Sonuçlar test edilen herhangi bir mikroorganizmayla bildirilebilir enterferans göstermemiştir (Tablo 17'ya bakın). Tablo 16. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile Test Edilen Endojen ve Ticari Olarak Eksojen Maddeler Marka Adı veya Açıklama Sonuç Marka Adı veya Açıklama Sonuç Fekal Yağ NI Spermisidal Yağlayıcı P İnsan DNA sı NI Bebek Bezi Pişik Kremi NI Mukus NI Vagisil* P Tam İnsan Kanı NI Laksatif NI Hidrokortizon Krem P Anti Diyare (sıvı) NI Antiseptik Islak Mendil NI Anti Diyare (hap) NI Lavman NI Antibiyotik Karışım NI Hemoroid Jeli NI Antasid NI Nistatin Krem P Steroid Olmayan Anti Inflamatuvar (NSAID) NI Topik Antibiyotik P: Yüksek konsantrasyonlarda BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile potansiyel enterferans. NI: BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Sonuç İle Raporlanabilir Enterferans Yok. NI Tablo 17. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel ile Enterferans için İçin Test Edilen Mikroorganizmalar Mikroorganizma Salmonella typhimurium Shigella sonnei Campylobacter coli Escherichia coli (stx1/stx2) Citrobacter amalonaticus Proteus vulgaris Bacteroides thetaiotaomicron Ruminococcus bromii Enterococcus faecalis Peptostreptococcus anaerobius NI: BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Sonuç İle Raporlanabilir Enterferans Yok. Sonuç NI NI NI NI NI NI NI NI NI NI Karışık Enfeksiyon / Kompetitif İnterferans Karışık enfeksiyon/kompetitif interferans çalışması, yüksek konsantrasyonlarda diğer hedeflerin mevcudiyetinde düşük pozitif sonuçları saptamak için BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel becerisini değerlendirmek amacıyla tasarlanmıştır. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Sample Buffer Tube içerisinde düşük hedefler olarak davranmaları için 4 organizmanın (Plesiomonas shigelloides, Yersinia enterocolitica, ETEC ST/LT ve Vibrio cholerae) 3'ünden oluşan, kendi LoD'lerinin 2 katından daha düşük seviyede bir karışım hazırlanmıştır. Dördüncü BD MAX Enteric Bacterial Panel analiti (düşük hedeflerin karışımında bulunmayan) 10 μl korunmayan dışkı ile birlikte 1 x 10 6 CFU/mL konsantrasyonda (yüksek yüklü hedefi temsilen) Sample Buffer Tube içerisinde güçlendirilmiştir. Yüksek konsantrasyonda Plesiomonas shigelloides ( 1 x 10 6 CFU/mL) ve Vibrio cholerae ( 1 x 10 6 hücre/ml) bulunduğunda kendi uyarılmış karışık enfeksiyon preparatlarına ait 3 organizmanın tamamı da BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel tarafından saptanmıştır. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel tarafından 3 düşük hedef organizmalarının başarılı şekilde saptanması, 1,0 x 10 4 CFU/mL konsantrasyonda Yersinia enterocolitica ve 9,44 x 10 2 CFU/mL konsantrasyonda ETEC ST/LT varlığında sağlanmıştır. Kesinlik BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için laboratuvar içi kesinlik, merkezde değerlendirilmiştir. Test, günde iki çalıştırmayla (2 operatör tarafından birer tane) 12 gün içerisinde, toplamda 24 çalıştırmayla gerçekleştirilmiştir. Bu çalışma için panel üyeleri oluşturmak için farklı konsantrasyonlarda dört özel hedef organizma kullanılmıştır. Panelde Vibrio cholerae, Plesiomonas shigelloides, ETEC ve Yersinia enterocolitica yer almıştır. 17

Aşağıdaki değerler her bir panel üyesinde bulunan hedef organizmalar için güçlendirme düzeyi olarak kullanılmıştır. Orta Pozitif (OP): 2 ila 3x LoD Düşük Pozitif (DP): 1 ila <2x LoD Yüksek Negatif (YN): C 20-80 LoD Gerçek Negatif (GN): Hedef yok Panelde yer alan her bir üye negatif korunmasız dışkı matriksiyle güçlendirilmiştir. Gerçek negatif örnekler hiç hedef içermiyordu. Yüksek negatif örnekler testin analitik LoD sinin altında hedef organizmalarla güçlendirilmiştir; ancak, HN örneklerinin PCR testlerinin doğal duyarlılığı nedeniyle tekrarların yaklaşık %20 ila %80 inde pozitif sonuç vermesi beklenmekteydi. Sonuçları Tablo 18 deki hedef ve konsantrasyon ile özetlenmiştir. Tablo 18. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel in bir lot kullanılarak yapılan kesinlik çalışması sonucu Kategori Vibrio TN a 96/96 (96,2, ) HN a 58,3 28/48 (44,3, 71,2) LP MP 48/48 (92,6, ) 48/48 (92,6, ) Beklenen Sonuçlarla Benzerlik P. shigelloides 96/96 (96,2, ) 45,8 22/48 (32,6, 59,7) 48/48 (92,6, ) 48/48 (92,6, ) Y. enterocolitica 96/96 (96,2, ) 41,7 20/48 (28,8, 55,7) 97,9 47/48 (89,1, 99,6) 48/48 (92,6, ) ETEC 96/96 (96,2, ) 47,9 23/48 (34,5, 61,7) 48/48 (92,6, ) 97,9 47/48 (89,1, 99,6) a Gerçek Negatif (TN) ve Yüksek Negatif (HN) kategoriler için beklenen test sonucunun negatif olduğu kabul edilmiştir. Bu nedenle yüzde anlaşma negatif sonuçlar için hesaplanmıştır. Tekrarlanabilirlik Çalışma Yerinden Çalışma Yerine Tekrarlanabilirlik çalışması, bir (1) reaktif lotu kullanılarak üç (3) klinik çalışma yerinde yapılmıştır. İki (2) operatör, günde 2 çalışma gerçekleştirerek, beş (5) farklı günde (ardışık veya değil) toplam 30 çalışmayla testi gerçekleştirmiştir. Kullanılan paneller yukarıdaki Hassasiyet başlığında açıklananla aynıdır. Çalışma yerinden çalışma yerine tekrarlanabilirlik yüzde anlaşmaları tüm hedeflerde TN için %'dü ve HN, LP ve MP kategorileri için %30,0 ila %48,9, %97,8 ila % ve %98,9 ila % aralığında değişmiştir. Sonuçlar Tablo 19'da özetlenmiştir. Çalışma yerleri arasında ve hedefe göre kantitatif tekrarlanabilirlik sonuçları Tablo 20'de gösterilmiştir ve son test sonucunu belirlemek için kullanılan Ct.Score (Ct.Puanı) ve Cycle EP (Döngü Uç Noktası) dahili kriteri, test tekrarlanabilirliğini değerlendirmek için seçilmiştir. Varyans bileşenleri (SD (standart sapma) ve %KV (katsayı varyasyonu)) ile ortalama Ct.Puanı ve Cycle EP değerleri Tablo 20'de gösterilmiştir. Kategori Tablo 19. Bir Lot BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel Kullanılarak Çalışma Yerinden Çalışma Yerine Tekrarlanabilirlik Çalışma Sonuçları Vibrio TN a 180/180 (97,9, ) HN a 48,9 44/90 (38,8, 59,0) LP MP 90/90 (95,9, ) 90/90 (95,9, ) Beklenen Sonuçlarla Benzerlik P. shigelloides 180/180 (97,9, ) 30,0 27/90 (21,5, 40,1) 98,9 89/90 (94,0, 99,8) 98,9 89/90 (94,0, 99,8) Y. enterocolitica 180/180 (97,9, ) 35,6 32/90 (26,4, 45,8) 90/90 (95,9, ) 98,9 89/90 (94,0, 99,8) ETEC 180/180 (97,9, ) 46,7 42/90 (36,7, 56,9) 97,8 88/90 (92,3, 99,4) 90/90 (95,9, ) a Gerçek Negatif (TN) ve Yüksek Negatif (HN) kategoriler için beklenen test sonucunun negatif olduğu kabul edilmiştir. Bu nedenle yüzde anlaşma negatif sonuçlar için hesaplanmıştır. 18

PCR Metrik Ct. Puanı Cycle EP Parameter (Parametre) Tablo 20. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için Kantitatif Çalışma Yerinden Çalışma Yerine Tekrarlanabilirlik Çalışma Sonuçları Vibrio P. shigelloides Y. enterocolitica ETEC SPC HN LP MP HN LP MP HN LP MP HN LP MP TN N 46 90 90 63 89 89 58 90 89 48 88 90 90 Ortalama 36,9 32,1 31,7 36,0 31,5 30,7 36,3 32,9 32,7 36,8 33,7 32,4 27,2 SD 1,18 0,45 0,56 1,50 0,90 0,74 1,06 0,78 0,64 1,37 0,80 0,72 0,40 %CV 3,2 1,4 1,8 4,2 2,9 2,4 2,9 2,4 2,0 3,7 2,4 2,2 1,5 N 46 90 90 63 89 89 58 90 89 48 88 90 90 Ortalama 805,1 2.725,7 3.076,6 596,5 2.349,7 2.320,9 599,6 1.191,1 1.264,2 976,0 2.049,6 2.640,0 6.020,7 SD 350,40 812,29 485,26 284,02 416,36 630,12 296,66 317,31 388,98 577,46 529,33 598,65 688,74 %CV 43,5 29,8 15,8 47,6 17,7 27,1 49,5 26,6 30,8 59,2 25,8 22,7 11,4 Lottan lota tekrarlanabilirlik çalışması, üç (3) reaktif lotu kullanılarak bir (1) çalışma yerinde yapılmıştır. İki (2) operatör, günde 2 çalışma gerçekleştirerek, beş (5) farklı günde (ardışık veya değil) toplam 30 çalışmayla testi gerçekleştirmiştir. Kullanılan paneller yukarıdaki Hassasiyet başlığında açıklananla aynıdır. 5 günlük doğruluk ve hassasiyet çalışmalarından elde edilen sonuçlar Lotlar arası çalışma için reaktiflerin bir lotundan toplanan verileri karşılaştırmak için kullanılmıştır. Genel lottan lota tekrarlanabilirlik yüzde anlaşmaları TN için %'dü ve HN, LP ve MP kategorileri için %23,3 ila %41,1, %97,8 ila % ve %98,9 ila % aralığında değişmiştir. Sonuçlar Tablo 21'de özetlenmiştir. Lotlar arasında ve hedefe göre kantitatif sonuçlar Tablo 22'de gösterilmiştir ve son test sonucunu belirlemek için kullanılan Cycle EP dahili kriteri, kantitatif test tekrarlanabilirliğini değerlendirmek için seçilmiştir. Varyans bileşenleri (SD (standart sapma) ve %KV (katsayı varyasyonu)) ile ortalama Ct.Puanı ve Cycle EP değerleri Tablo 22'de gösterilmiştir. Kategori Tablo 21. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için Lottan Lota Tekrarlanabilirlik Sonuçları Vibrio TN a 180/180 (97,9, ) YN a 41,1 37/90 (31,5, 51,4) DP OP 90/90 (95,9, ) 90/90 (95,9, ) Beklenen Sonuçlarla Benzerlik P. shigelloides 180/180 (97,9, ) 28,9 26/90 (20,5, 39,0) 90/90 (95,9, ) 90/90 (95,9, ) Y. enterocolitica 180/180 (97,9, ) 23,3 21/90 (15,8, 33,1) 90/90 (95,9, ) 98,9 89/90 (94,0, 99,8) ETEC 180/180 (97,9, ) 41,1 37/90 (31,5, 51,4) 97,8 88/90 (92,3, 99,4) 90/90 (95,9, ) a Gerçek Negatif (GN) ve Yüksek Negatif (YN) kategoriler için beklenen test sonucunun negatif olduğu kabul edilmiştir. Bu nedenle yüzde anlaşma negatif sonuçlar için hesaplanmıştır. PCR Metrik Ct. Puan Cycle EP Tablo 22. BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel için Kantitatif Lottan Lota Tekrarlanabilirlik Sonuçları Parameter (Parametre) Vibrio P. shigelloides Y. enterocolitica ETEC SPC YN DP OP YN DP OP YN DP OP YN DP OP GN N 53 90 90 64 90 90 69 90 89 53 88 90 90 Ortalama 36,6 32,2 31,9 35,8 31,3 30,7 36,1 32,4 32,3 37,0 33,6 32,4 27,2 SD 1,18 0,51 0,64 1,42 0,61 0,90 1,29 0,94 0,93 1,06 0,78 0,87 0,30 %CV 3,2 1,6 2,0 4,0 2,0 2,9 3,6 2,9 2,9 2,9 2,3 2,7 1,1 N 53 90 90 64 90 90 69 90 89 53 88 90 90 Ortalama 931,1 3.124,7 3.033,5 686,9 2.444,1 2.428,7 731,3 1.339,7 1.370,3 838,3 2.056,8 2.244,2 5.544,7 SD 369,81 242,75 236,53 337,36 491,79 416,43 296,44 158,41 165,73 332,37 419,99 458,59 633,70 %CV 39,7 7,8 7,8 49,1 20,1 17,1 40,5 11,8 12,1 39,6 20,4 20,4 11,4 19

Bulaşma / Çapraz Kontaminasyon BD MAX Extended Enteric Bacterial Panel'de yüksek bakteriyel yüklü örnekleri işlerken çalışma içi bulaşma ve çalışmalar arası bulaşmayı araştırmak üzere bir çalışma yapılmıştır. Bir hedef organizma içeren bir yüksek pozitif üye ve bir negatif üyeden oluşan bir panel çok sayıda örnek hazırlamak için kullanılmıştır. Yüksek pozitif panel üyesini temsil etmek için enterotoksijenik Escherichia coli suşu kullanılmıştır (~1 x 10 6 CFU/mL SBT). Negatif üye herhangi bir hedef analit içermemiştir. Yüksek pozitif panel üyesinden on iki (12) replikat ve negatif panel üyesinden 12 replikat, her çalışmada negatif ve pozitif örnekler sırasıyla kullanılarak test edilmiştir. Üç (3) operatör, 24 örnek içeren toplam 9 çalışma olmak üzere 3 BD MAX cihazında arka arkaya 3 çalışma yapmıştır. Bu çalışmada test edilen 108 negatif örnekten bir tanesi pozitif ETEC ST/LT sonucu oluşturmuştur. REFERANSLAR 1. CDC: Estimates of Foodborne Illness in the United States, Located at: http://www.cdc.gov/foodborneburden/2011-foodborne- estimates.html 2. Kosek et al. Bulletin of the World Health Organization (2003) 81:197 204. 3. NIH: Bacterial Gastroenteritis, Located at: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/000254.htm 4. Petri WA, Miller M, Binder HJ, Levine MM, Dillingham R, and Guerrant RL. Enteric infections, diarrhea, and their impact on function and development. J. Clin. Invest. (2008) 118:1277 1290 5. Summary of Notifiable Diseases. available at <http://www.cdc.gov> 6. CIFOR Analysis of State Legal Authorities. available at <http://www.cifor.us/> 7. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections; Approved Guideline. Document M29 (Refer to the latest edition). 8. Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. Chosewood L.C. and Wislon D.E. (eds) (2009). HHS Publication No. (CDC) 21 1112. 9. BD MAX System User s Manual (refer to the latest version) BD Life Sciences, Sparks, MD 21152 USA. 10. Clinical and Laboratory Standards Institute. Molecular Diagnostic Methods for Infectious Diseases; Approved Guideline, document MM3 (Refer to the latest edition). 11. Clinical and Laboratory Standards Institute. User Protocol for Evaluation of Qualitative Test performance; Approved Guideline, Document EP12 (Refer to the latest edition). 20

Manufacturer / Производител / Výrobce / Fabrikant / Hersteller / Κατασκευαστής / Fabricante / Tootja / Fabricant / Proizvođać / Gyártó / Fabbricante / Атқарушы / 제조업체 / Gamintojas / Ražotājs / Tilvirker / Producent / Producător / Производитель / Výrobca / Proizvođač / Tillverkare / Üretici / Виробник / 生产厂商 Use by / Използвайте до / Spotřebujte do / Brug før / Verwendbar bis / Χρήση έως / Usar antes de / Kasutada enne / Date de péremption / 사용기한 / Upotrijebiti do / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Дейін пайдалануға / Naudokite iki / Izlietot līdz / Houdbaar tot / Brukes for / Stosować do / Prazo de validade / A se utiliza până la / Использовать до / Použite do / Upotrebiti do / Använd före / Son kullanma tarihi / Використати до\line / 使用截止日期 YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec měsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) ΕΕΕΕ-MM-HH / ΕΕΕΕ-MM (MM = τέλος του μήνα) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fin del mes) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj mjeseca) ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) ЖЖЖЖ-АА-КК / ЖЖЖЖ-АА / (АА = айдың соңы) YYYY-MM-DD/YYYY-MM(MM = 월말 ) MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mėnesio pabaiga) GGGG-MM-DD/GGGG-MM (MM = mēneša beigas) JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesiąca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) AAAA-LL-ZZ / AAAA-LL (LL = sfârşitul lunii) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = конец месяца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj meseca) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet av månaden) YYYY-AA-GG / YYYY-AA (AA = ayın sonu) РРРР-MM-ДД / РРРР-MM (MM = кінець місяця) YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = 月末 ) Catalog number / Каталожен номер / Katalogové číslo / Katalognummer / Αριθμός καταλόγου / Número de catálogo / Katalooginumber / Numéro catalogue / Kataloški broj / Katalógusszám / Numero di catalogo / Каталог нөмірі / 카탈로그번호 / Katalogo / numeris / Kataloga numurs / Catalogus nummer / Numer katalogowy / Număr de catalog / Номер по каталогу / Katalógové číslo / Kataloški broj / Katalog numarası / Номер за каталогом / 目录号 Authorized Representative in the European Community / Оторизиран представител в Европейската общност / Autorizovaný zástupce pro Evropském společenství / Autoriseret repræsentant i De Europæiske Fællesskaber / Autorisierter Vertreter in der Europäischen Gemeinschaft / Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Représentant autorisé pour la Communauté européenne / Autorizuirani predstavnik u Europskoj uniji / Meghatalmazott képviselő az Európai Közösségben / Rappresentante autorizzato nella Comunità Europea / Европа қауымдастығындағы уәкілетті өкіл / 유럽공동체의위임대표 / Įgaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Pilnvarotais pārstāvis Eiropas Kopienā / Bevoegde vertegenwoordiger in de Europese Gemeenschap / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo we Wspólnocie Europejskiej / Representante autorizado na Comunidade Europeia / Reprezentantul autorizat pentru Comunitatea Europeană / Уполномоченный представитель в Европейском сообществе / Autorizovaný zástupca v Európskom spoločenstve / Autorizovano predstavništvo u Evropskoj uniji / Auktoriserad representant i Europeiska gemenskapen / Avrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi / Уповноважений представник у країнах ЄС / 欧洲共同体授权代表 In Vitro Diagnostic Medical Device / Медицински уред за диагностика ин витро / Lékařské zařízení určené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medizinisches In-vitro-Diagnostikum / In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medicinska pomagala za In Vitro Dijagnostiku / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medicale per diagnostica in vitro / Жасанды жағдайда жүргізетін медициналық диагностика аспабы / In Vitro Diagnostic 의료기기 / In vitro diagnostikos prietaisas / Medicīnas ierīces, ko lieto in vitro diagnostikā / Medisch hulpmiddel voor in-vitro diagnostiek / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Dispozitiv medical pentru diagnostic in vitro / Медицинский прибор для диагностики in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Medicinski uređaj za in vitro dijagnostiku / Medicinteknisk produkt för in vitro-diagnostik / İn Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz / Медичний пристрій для діагностики in vitro / 体外诊断医疗设备 Temperature limitation / Температурни ограничения / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperaturbegrenzung / Περιορισμοί θερμοκρασίας / Limitación de temperatura / Temperatuuri piirang / Limites de température / Dozvoljena temperatura / Hőmérsékleti határ / Limiti di temperatura / Температураны шектеу / 온도제한 / Laikymo temperatūra / Temperatūras ierobežojumi / Temperatuurlimiet / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limites de temperatura / Limite de temperatură / Ограничение температуры / Ohraničenie teploty / Ograničenje temperature / Temperaturgräns / Sıcaklık sınırlaması / Обмеження температури / 温度限制 Batch Code (Lot) / Код на партидата / Kód (číslo) šarže / Batch-kode (lot) / Batch-Code (Charge) / Κωδικός παρτίδας (παρτίδα) / Código de lote (lote) / Partii kood / Numéro de lot / Lot (kod) / Tétel száma (Lot) / Codice batch (lotto) / Топтама коды / 배치코드 ( 로트 ) / Partijos numeris (LOT) / Partijas kods (laidiens) / Lot nummer / Batch-kode (parti) / Kod partii (seria) / Código do lote / Cod de serie (Lot) / Код партии (лот) / Kód série (šarža) / Kod serije / Partinummer (Lot) / Parti Kodu (Lot) / Код партії / 批号 ( 亚批 ) Contains sufficient for <n> tests / Съдържанието е достатъчно за <n> теста / Dostatečné množství pro <n> testů / Indeholder tilstrækkeligt til <n> tests / Ausreichend für <n> Tests / Περιέχει επαρκή ποσότητα για <n> εξετάσεις / Contenido suficiente para <n> pruebas / Küllaldane <n> testide jaoks / Contenu suffisant pour <n> tests / Sadržaj za <n> testova / <n> teszthez elegendő / Contenuto sufficiente per <n> test / <п> тесттері үшін жеткілікті / <n> 테스트가충분히포함됨 / Pakankamas kiekis atlikti <n> testų / Satur pietiekami <n> pārbaudēm / Inhoud voldoende voor n testen / Innholder tilstrekkelig til <n> tester / Zawiera ilość wystarczającą do <n> testów / Conteúdo suficiente para <n> testes / Conţinut suficient pentru <n> teste / Достаточно для <n> тестов(а) / Obsah vystačí na <n> testov / Sadržaj dovoljan za <n> testova / Innehåller tillräckligt för <n> analyser / <n> test için yeterli malzeme içerir / Вистачить для аналізів: <n> / 足够进行 <n> 次检测 Consult Instructions for Use / Направете справка в инструкциите за употреба / Prostudujte pokyny k použití / Se brugsanvisningen / Gebrauchsanweisung beachten / Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης / Consultar las instrucciones de uso / Lugeda kasutusjuhendit / Consulter la notice d emploi / Koristi upute za upotrebu / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l uso / Пайдалану нұсқаулығымен танысып алыңыз / 사용지침참조 / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Skatīt lietošanas pamācību / Raadpleeg de gebruiksaanwijzing / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja użytkowania / Consultar as instruções de utilização / Consultaţi instrucţiunile de utilizare / См. руководство по эксплуатации / Pozri Pokyny na používanie / Pogledajte uputstvo za upotrebu / Se bruksanvisningen / Kullanım Talimatları na başvurun / Див. інструкції з використання / 请参阅使用说明 Do not reuse / Не използвайте отново / Nepoužívejte opakovaně / Ikke til genbrug / Nicht wiederverwenden / Μην επαναχρησιμοποιείτε / No reutilizar / Mitte kasutada korduvalt / Ne pas réutiliser / Ne koristiti ponovo / Egyszer használatos / Non riutilizzare / Пайдаланбаңыз / 재사용금지 / Tik vienkartiniam naudojimui / Nelietot atkārtoti / Niet opnieuw gebruiken / Kun til engangsbruk / Nie stosować powtórnie / Não reutilize / Nu refolosiţi / Не использовать повторно / Nepoužívajte opakovane / Ne upotrebljavajte ponovo / Får ej återanvändas / Tekrar kullanmayın / Не використовувати повторно / 请勿重复使用 Serial number / Сериен номер / Sériové číslo / Serienummer / Seriennummer / Σειριακός αριθμός / Nº de serie / Seerianumber / Numéro de série / Serijski broj / Sorozatszám / Numero di serie / Топтамалық нөмірі / 일련번호 / Serijos numeris / Sērijas numurs / Serie nummer / Numer seryjny /Número de série / Număr de serie / Серийный номер / Seri numarası / Номер серії / 序列号 21

For IVD Performance evaluation only / Само за оценка качеството на работа на IVD / Pouze pro vyhodnocení výkonu IVD / Kun til evaluering af IVD ydelse / Nur für IVD-Leistungsbewertungszwecke / Mόνο για αξιολόγηση απόδοσης IVD / Sólo para la evaluación del rendimiento en diagnóstico in vitro / Ainult IVD seadme hindamiseks / Réservé à l évaluation des performances IVD / Samo u znanstvene svrhe za In Vitro Dijagnostiku / Kizárólag in vitro diagnosztikához / Solo per valutazione delle prestazioni IVD / Жасанды жағдайда «пробирка ішінде»,диагностикада тек жұмысты бағалау үшін / IVD 성능평가에대해서만사용 / Tik IVD prietaisų veikimo charakteristikoms tikrinti / Vienīgi IVD darbības novērtēšanai /Uitsluitend voor doeltreffendheidsonderzoek / Kun for evaluering av IVD-ytelse / Tylko do oceny wydajności IVD / Uso exclusivo para avaliação de IVD / Numai pentru evaluarea performanţei IVD / Только для оценки качества диагностики in vitro / Určené iba na diagnostiku in vitro / Samo za procenu učinka u in vitro dijagnostici / Endast för utvärdering av diagnostisk användning in vitro / Yalnızca IVD Performans değerlendirmesi için / Тільки для оцінювання якості діагностики in vitro / 仅限 IVD 性能评估 For US: For Investigational Use Only Lower limit of temperature / Долен лимит на температурата / Dolní hranice teploty / Nedre temperaturgrænse / Temperaturuntergrenze / Κατώτερο όριο θερμοκρασίας / Límite inferior de temperatura / Alumine temperatuuripiir / Limite inférieure de température / Najniža dozvoljena temperatura / Alsó hőmérsékleti határ / Limite inferiore di temperatura / Температураның төменгі руқсат шегі / 하한온도 / Žemiausia laikymo temperatūra / Temperatūras zemākā robeža / Laagste temperatuurlimiet / Nedre temperaturgrense / Dolna granica temperatury / Limite minimo de temperatura / Limită minimă de temperatură / Нижний предел температуры / Spodná hranica teploty / Donja granica temperature / Nedre temperaturgräns / Sıcaklık alt sınırı / Мінімальна температура / 温度下限 Control / Контролно / Kontrola / Kontrol / Kontrolle / Μάρτυρας / Kontroll / Contrôle / Controllo / Бақылау / 컨트롤 / Kontrolė / Kontrole / Controle / Controlo / Контроль / kontroll / Контроль / 对照 Positive control / Положителен контрол / Pozitivní kontrola / Positiv kontrol / Positive Kontrolle / Θετικός μάρτυρας / Control positivo / Positiivne kontroll / Contrôle positif / Pozitivna kontrola / Pozitív kontroll / Controllo positivo / Оң бақылау / 양성컨트롤 / Teigiama kontrolė / Pozitīvā kontrole / Positieve controle / Kontrola dodatnia / Controlo positivo / Control pozitiv / Положительный контроль / Pozitif kontrol / Позитивний контроль / 阳性对照试剂 Negative control / Отрицателен контрол / Negativní kontrola / Negativ kontrol / Negative Kontrolle / Αρνητικός μάρτυρας / Control negativo / Negatiivne kontroll / Contrôle négatif / Negativna kontrola / Negatív kontroll / Controllo negativo / Негативтік бақылау / 음성컨트롤 / Neigiama kontrolė / Negatīvā kontrole / Negatieve controle / Kontrola ujemna / Controlo negativo / Control negativ / Отрицательный контроль / Negatif kontrol / Негативний контроль / 阴性对照试剂 Method of sterilization: ethylene oxide / Метод на стерилизация: етиленов оксид / Způsob sterilizace: etylenoxid / Steriliseringsmetode: ethylenoxid / Sterilisationsmethode: Ethylenoxid / Μέθοδος αποστείρωσης: αιθυλενοξείδιο / Método de esterilización: óxido de etileno / Steriliseerimismeetod: etüleenoksiid / Méthode de stérilisation : oxyde d éthylène / Metoda sterilizacije: etilen oksid / Sterilizálás módszere: etilén-oxid / Metodo di sterilizzazione: ossido di etilene / Стерилизация әдісі этилен тотығы / 소독방법 : 에틸렌옥사이드 / Sterilizavimo būdas: etileno oksidas / Sterilizēšanas metode: etilēnoksīds / Gesteriliseerd met behulp van ethyleenoxide / Steriliseringsmetode: etylenoksid / Metoda sterylizacji: tlenek etylu / Método de esterilização: óxido de etileno / Metodă de sterilizare: oxid de etilenă / Метод стерилизации: этиленоксид / Metóda sterilizácie: etylénoxid / Metoda sterilizacije: etilen oksid / Steriliseringsmetod: etenoxid / Sterilizasyon yöntemi: etilen oksit / Метод стерилізації: етиленоксидом / 灭菌方法 : 环氧乙烷 Method of sterilization: irradiation / Метод на стерилизация: ирадиация / Způsob sterilizace: záření / Steriliseringsmetode: bestråling / Sterilisationsmethode: Bestrahlung / Μέθοδος αποστείρωσης: ακτινοβολία / Método de esterilización: irradiación / Steriliseerimismeetod: kiirgus / Méthode de stérilisation : irradiation / Metoda sterilizacije: zračenje / Sterilizálás módszere: besugárzás / Metodo di sterilizzazione: irradiazione / Стерилизация әдісі сәуле түсіру / 소독방법 : 방사 / Sterilizavimo būdas: radiacija / Sterilizēšanas metode: apstarošana / Gesteriliseerd met behulp van bestraling / Steriliseringsmetode: bestråling / Metoda sterylizacji: napromienianie / Método de esterilização: irradiação / Metodă de sterilizare: iradiere / Метод стерилизации: облучение / Metóda sterilizácie: ožiarenie / Metoda sterilizacije: ozračavanje / Steriliseringsmetod: strålning / Sterilizasyon yöntemi: irradyasyon / Метод стерилізації: опроміненням / 灭菌方法 : 辐射 Biological Risks / Биологични рискове / Biologická rizika / Biologisk fare / Biogefährdung / Βιολογικοί κίνδυνοι / Riesgos biológicos / Bioloogilised riskid / Risques biologiques / Biološki rizik / Biológiailag veszélyes / Rischio biologico / Биологиялық тәуекелдер / 생물학적위험 / Biologinis pavojus / Bioloģiskie riski / Biologisch risico / Biologisk risiko / Zagrożenia biologiczne / Perigo biológico / Riscuri biologice / Биологическая опасность / Biologické riziko / Biološki rizici / Biologisk risk / Biyolojik Riskler / Біологічна небезпека / 生物学风险 Caution, consult accompanying documents / Внимание, направете справка в придружаващите документи / Pozor! Prostudujte si přiloženou dokumentaci! / Forsigtig, se ledsagende dokumenter / Achtung, Begleitdokumente beachten / Προσοχή, συμβουλευτείτε τα συνοδευτικά έγγραφα / Precaución, consultar la documentación adjunta / Ettevaatust! Lugeda kaasnevat dokumentatsiooni / Attention, consulter les documents joints / Upozorenje, koristi prateču dokumentaciju / Figyelem! Olvassa el a mellékelt tájékoztatót / Attenzione: consultare la documentazione allegata / Абайлаңыз, тиісті құжаттармен танысыңыз / 주의, 동봉된설명서참조 / Dėmesio, žiūrėkite pridedamus dokumentus / Piesardzība, skatīt pavaddokumentus / Voorzichtig, raadpleeg bijgevoegde documenten / Forsiktig, se vedlagt dokumentasjon / Należy zapoznać się z dołączonymi dokumentami / Cuidado, consulte a documentação fornecida / Atenţie, consultaţi documentele însoţitoare / Внимание: см. прилагаемую документацию / Výstraha, pozri sprievodné dokumenty / Pažnja! Pogledajte priložena dokumenta / Obs! Se medföljande dokumentation / Dikkat, birlikte verilen belgelere başvurun / Увага: див. супутню документацію / 小心, 请参阅附带文档 Upper limit of temperature / Горен лимит на температурата / Horní hranice teploty / Øvre temperaturgrænse / Temperaturobergrenze / Ανώτερο όριο θερμοκρασίας / Límite superior de temperatura / Ülemine temperatuuripiir / Limite supérieure de température / Gornja dozvoljena temperatura / Felső hőmérsékleti határ / Limite superiore di temperatura / Температураның руқсат етілген жоғарғы шегі / 상한온도 / Aukščiausia laikymo temperatūra / Augšējā temperatūras robeža / Hoogste temperatuurlimiet / Øvre temperaturgrense / Górna granica temperatury / Limite máximo de temperatura / Limită maximă de temperatură / Верхний предел температуры / Horná hranica teploty / Gornja granica temperature / Övre temperaturgräns / Sıcaklık üst sınırı / Максимальна температура / 温度上限 Keep dry / Пазете сухо / Skladujte v suchém prostředí / Opbevares tørt / Trocklagern / Φυλάξτε το στεγνό / Mantener seco / Hoida kuivas / Conserver au sec / Držati na suhom / Száraz helyen tartandó / Tenere all asciutto / Құрғақ күйінде ұста / 건조상태유지 / Laikykite sausai / Uzglabāt sausu / Droog houden / Holdes tørt / Przechowywać w stanie suchym / Manter seco / A se feri de umezeală / Не допускать попадания влаги / Uchovávajte v suchu / Držite na suvom mestu / Förvaras torrt / Kuru bir şekilde muhafaza edin / Берегти від вологи / 请保持干燥 Collection time / Време на събиране / Čas odběru / Opsamlingstidspunkt / Entnahmeuhrzeit / Ώρα συλλογής / Hora de recogida / Kogumisaeg / Heure de prélèvement / Sati prikupljanja / Mintavétel időpontja / Ora di raccolta / Жинау уақыты / 수집시간 / Paėmimo laikas / Savākšanas laiks / Verzameltijd / Tid prøvetaking / Godzina pobrania / Hora de colheita / Ora colectării / Время сбора / Doba odberu / Vreme prikupljanja / Uppsamlingstid / Toplama zamanı / Час забору / 采集时间 Peel / Обелете / Otevřete zde / Åbn / Abziehen / Αποκολλήστε / Desprender / Koorida / Décoller / Otvoriti skini / Húzza le / Staccare / Ұстіңгі қабатын алып таста / 벗기기 / Plėšti čia / Atlīmēt / Schillen / Trekk av / Oderwać / Destacar / Se dezlipeşte / Отклеить / Odtrhnite / Oljuštiti / Dra isär / Ayırma / Відклеїти / 撕下 Perforation / Перфорация / Perforace / Perforering / Διάτρηση / Perforación / Perforatsioon / Perforacija / Perforálás / Perforazione / Тесік тесу / 절취선 / Perforacija / Perforācija / Perforatie / Perforacja / Perfuração / Perforare / Перфорация / Perforácia / Perforasyon / Перфорація / 穿孔 Do not use if package damaged / Не използвайте, ако опаковката е повредена / Nepoužívejte, je-li obal poškozený / Må ikke anvendes hvis emballagen er beskadiget / Inhal beschädigter Packungnicht verwenden / Μη χρησιμοποιείτε εάν η συσκευασία έχει υποστεί ζημιά. / No usar si el paquete está dañado / Mitte kasutada, kui pakend on kahjustatud / Ne pas l utiliser si l emballage est endommagé / Ne koristiti ako je oštećeno pakiranje / Ne használja, ha a csomagolás sérült / Non usare se la confezione è danneggiata / Егер пакет бұзылған болса, пайдаланба / 패키지가손상된경우사용금지 / Jei pakuotė pažeista, nenaudoti / Nelietot, ja iepakojums bojāts / Niet gebruiken indien de verpakking beschadigd is / Må ikke brukes hvis pakke er skadet / Nie używać, jeśli opakowanie jest uszkodzone / Não usar se a embalagem estiver danificada / A nu se folosi dacă pachetul este deteriorat / Не использовать при повреждении упаковки / Nepoužívajte, ak je obal poškodený / Ne koristite ako je pakovanje oštećeno / Använd ej om förpackningen är skadad / Ambalaj hasar görmüşse kullanmayın / Не використовувати за пошкодженої упаковки / 如果包装破损, 请勿使用 Keep away from heat / Пазете от топлина / Nevystavujte přílišnému teplu / Må ikke udsættes for varme / Vor Wärme schützen / Κρατήστε το μακριά από τη θερμότητα / Mantener alejado de fuentes de calor / Hoida eemal valgusest / Protéger de la chaleur / Držati dalje od izvora topline / Óvja a melegtől / Tenere lontano dal calore / Салқын жерде сақта / 열을피해야함 / Laikyti atokiau nuo šilumos šaltinių / Sargāt no karstuma / Beschermen tegen warmte / Må ikke utsettes for varme / Przechowywać z dala od źródeł ciepła / Manter ao abrigo do calor / A se feri de căldură / Не нагревать / Uchovávajte mimo zdroja tepla / Držite dalje od toplote / Får ej utsättas för värme / Isıdan uzak tutun / Берегти від дії тепла / 请远离热源 Cut / Срежете / Odstřihněte / Klip / Schneiden / Κόψτε / Cortar / Lõigata / Découper / Reži / Vágja ki / Tagliare / Кесіңіз / 잘라내기 / Kirpti / Nogriezt / Knippen / Kutt / Odciąć / Cortar / Decupaţi / Отрезать / Odstrihnite / Iseći / Klipp / Kesme / Розрізати / 剪下 22

Collection date / Дата на събиране / Datum odběru / Opsamlingsdato / Entnahmedatum / Ημερομηνία συλλογής / Fecha de recogida / Kogumiskuupäev / Date de prélèvement / Dani prikupljanja / Mintavétel dátuma / Data di raccolta / Жинаған тізбекүні / 수집날짜 / Paėmimo data / Savākšanas datums / Verzameldatum / Dato prøvetaking / Data pobrania / Data de colheita / Data colectării / Дата сбора / Dátum odberu / Datum prikupljanja / Uppsamlingsdatum / Toplama tarihi / Дата забору / 采集日期 µl/test / µl/тест / µl/test / µl/εξέταση / µl/prueba / µl/teszt / µl/ 테스트 / мкл/тест / µl/tyrimas / µl/pārbaude / µl/teste / мкл/аналіз / µl/ 检测 Keep away from light / Пазете от светлина / Nevystavujte světlu / Må ikke udsættes for lys / Vor Licht schützen / Κρατήστε το μακριά από το φως / Mantener alejado de la luz / Hoida eemal valgusest / Conserver à l abri de la lumière / Držati dalje od svjetla / Fény nem érheti / Tenere al riparo dalla luce / Қараңғыланған жерде ұста / 빛을피해야함 / Laikyti atokiau nuo šilumos šaltinių / Sargāt no gaismas / Niet blootstellen aan zonlicht / Må ikke utsettes for lys / Przechowywać z dala od źródeł światła / Manter ao abrigo da luz / Feriţi de lumină / Хранить в темноте / Uchovávajte mimo dosahu svetla / Držite dalje od svetlosti / Får ej utsättas för ljus / Işıktan uzak tutun / Берегти від дії світла / 请远离光线 Hydrogen gas generated / Образуван е водород газ / Možnost úniku plynného vodíku / Frembringer hydrogengas / Wasserstoffgas erzeugt / Δημιουργία αερίου υδρογόνου / Producción de gas de hidrógeno / Vesinikgaasi tekitatud / Produit de l hydrogène gazeux / Sadrži hydrogen vodik / Hidrogén gázt fejleszt / Produzione di gas idrogeno / Газтектес сутегі пайда болды / 수소가스생성됨 / Išskiria vandenilio dujas / Rodas ūdeņradis / Waterstofgas gegenereerd / Hydrogengass generert / Powoduje powstawanie wodoru / Produção de gás de hidrogénio / Generare gaz de hidrogen / Выделение водорода / Vyrobené použitím vodíka / Oslobađa se vodonik / Genererad vätgas / Açığa çıkan hidrojen gazı / Реакція з виділенням водню / 会产生氢气 Patient ID number / ИД номер на пациента / ID pacienta / Patientens ID-nummer / Patienten-ID / Αριθμός αναγνώρισης ασθενούς / Número de ID del paciente / Patsiendi ID / No d identification du patient / Identifikacijski broj pacijenta / Beteg azonosító száma / Numero ID paziente / Пациенттің идентификациялық нөмірі / 환자 ID 번호 / Paciento identifikavimo numeris / Pacienta ID numurs / Identificatienummer van de patiënt / Pasientens ID-nummer / Numer ID pacjenta / Número da ID do doente / Număr ID pacient / Идентификационный номер пациента / Identifikačné číslo pacienta / ID broj pacijenta / Patientnummer / Hasta kimlik numarası / Ідентифікатор пацієнта / 患者标识号 Fragile, Handle with Care / Чупливо, Работете с необходимото внимание. / Křehké. Při manipulaci postupujte opatrně. / Forsigtig, kan gå i stykker. / Zerbrechlich, vorsichtig handhaben. / Εύθραυστο. Χειριστείτε το με προσοχή. / Frágil. Manipular con cuidado. / Õrn, käsitsege ettevaatlikult. / Fragile. Manipuler avec précaution. / Lomljivo, rukujte pažljivo. / Törékeny! Óvatosan kezelendő. / Fragile, maneggiare con cura. / Сынғыш, абайлап пайдаланыңыз. / 조심깨지기쉬운처리 / Trapu, elkitės atsargiai. / Trausls; rīkoties uzmanīgi / Breekbaar, voorzichtig behandelen. / Ømtålig, håndter forsiktig. / Krucha zawartość, przenosić ostrożnie. / Frágil, Manuseie com Cuidado. / Fragil, manipulaţi cu atenţie. / Хрупкое! Обращаться с осторожностью. / Krehké, vyžaduje sa opatrná manipulácia. / Lomljivo - rukujte pažljivo. / Bräckligt. Hantera försiktigt. / Kolay Kırılır, Dikkatli Taşıyın. / Тендітна, звертатися з обережністю / 易碎, 小心轻放 Bu ürün lisansla satılır ve bu ürünün satın alınması belirli kan ve doku izleme uygulamalarında ya da belirli endüstriyel uygulamalarda kullanım hakkını içermez. Bu ürünün satın alınması satın alan kişiye insan in vitro diyagnostik bilgisi sağlamak amacıyla nükleik asit dizilerinin amplifikasyonu ve saptanması için kullanılmasına izin verir. Bu satın almayla bu spesifik kullanım hakkı dışında herhangi bir genel patent veya başka herhangi bir türde lisans verilmez. B Teknik Desteği: yerel BD temsilcinizle temasa geçin veya www.bd.com adresine başvurun. GeneOhm Sciences Canada, Inc. 2555 Boul. du Parc Technologique Québec, QC, G1P 4S5, Canada Benex Limited Pottery Road, Dun Laoghaire Co. Dublin, Ireland Australian Sponsor: Becton Dickinson Pty Ltd. 4 Research Park Drive Macquarie University Research Park North Ryde, NSW 2113 Australia Made in Canada. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. TaqMan is a trademark of Roche Molecular Systems, Inc. Nalgene is a trademark of ThermoFisher Scientific. *Trademarks are the property of their respective owners. 2017 BD. BD, the BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company. 23