Prospektüs. Yüksek Duyarlı C-Reaktif Protein (Hs-CRP) Test. (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için)

Transkript

1 Yüksek Duyarlı C-Reaktif Protein (Hs-CRP) Test (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için) Versiyon No 2.0 Yayın tarihi 10/23/2010 Kullanım amacı The ReLIA TM Hs-CRP test, enfeksiyon ve enflamasyon tespit etmek için kardiyovasküler hastalıklar (CVD) tanısına yardımcı olarak serum/plazma/insan tam kanında CRP konsantrasyonunu ölçmek için tasarlanmış bir in vitro diagnostik testtir. Özet ve Açıklama C-reaktif protein (CRP) interlökin-6 (IL-6) yanıtı olarak karaciğer tarafından sentezlenir ve klasik akut faz reaktantlarından biri ve iltihabın bir işareti olarak iyi bilinir. Vücutta genel olarak bulaşıcı ve diğer akut inflamatuar olaylara spesifik olmayan tepkiler sırasında serum CRP düzeyi <0.5mg/L ile 500mg/L in normal bir düzeyinde artış gösterebilir. Bazen, kandaki CRP konsantrasyonu ölçümü romatoid artrit gibi otoimmün hastalıklar ve bulaşıcı hastalıkların izlenmesi için bir klinik araç olarak kullanıldı. 1,2 Son zamanlarda iltihaba neden olan bir etklen olarak kabul edilmiştir. Serum kolesterol ile birlikte, CRP aterosklerozun gelişme ve ilerlemesinde kritik bir bileşen olabilir. 3,4 Koroner kalp hastalığı, iskemik inme ve akut miyokard infarktüsü gibi kardiyovasküler hastalıklar veya bir bölümünün oluşması, kronik şekilde düşük seviyeli CRP in damar endotelinde mevcut olmasından dolayıdır. 5,6 Yüksek hassasiyet (Hs-CRP) testi ile CRP ölçüm (HS-CRP) testi ateroskleroz ve CVD için güçlü ve bağımsız tahmini risk faktörü olarak ortaya çıkmaktadır. 7,8 Test prensibi ReLIA Hs-CRP testi çift antikor sandviç formatında çift yönlü lateral flow immunoassaydir. Test sırasında, port 2 e numune eklendiğinde buffer-a daha önceden ıslatılmış strip için port 1 e eklenir, numunede analit anti-crp-immunogold konjugat ile konjugat bandı üzerinde reaksiyona girer ve nitroselüloz üzerinde ilerleyerek immun kompleks oluşturur. İmmunogold kompleks test bandı ile reaksiyona girdiğinde, nitroselüloz üzerine kaplanmış anti-crp antikor ile reaksiyona girer ve nitroselülozun test bandı üzerine bağlanır. CRP düzeyinin kanda daha yüksek olması, daha fazla immunogold kompleksi test bandına bağlar. Test yapılırken kontrol konjugat, kolloid altın etiketli DNP BSA, kromotografi tarafından numuneli nitroselüloz üzerinde ilerler. DNP BSA altın, kontrol bandı 1 ve kontrol bandı 2 de nitroselüloz üzerine kaplı anti-dnp ile reaksiyona girer ve sonra kontrol bandına bağlanır. Koloidal altın kırmızı renk olduğu için, anti-dnp a bağlı DNP BSA altının immün kompleksi nitroselüloz üzerinde kontrol bandı 1 ve kontrol bandı 2 de kırmızı bir renk olarak görünür. CRP yokluğunda, 1

2 sadece kontrol bandı 1 ve kontrol bandı 2 var olacaktır. Ayrıca, CRP varlığında, kırmızı bir test bandı var olacaktır. Reaksiyon tamamlandığında, ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2) bantların DR sını (yansıma yoğunluğu) analiz eder ve RI ları (test ve kontrol bantlarının relatif şiddeti) hesaplar. Sonra, cihaz programlanan standart eğriye dayalı analitin konsantrasyonunu belirler ve sonucu (mg/l) görüntüler. Test band Control band Test type CRP3 CRP2 CRP1 C Hs-CRP Port 1 Port 2 Port 1 Port 2 Assay window Barcode Sağlanan Kit Bileşenleri Test Kasetleri 20 Dilusyon Tüpü (Buffer içerir) 20 Buffer A 1 (3,5 ml) 80 µl pipet 20 Ürün eki 1 Gerekli fakat sağlanmayan materyaller 1. Tek kullanımlık polipropilen pipet uçlu 20µL hacimli hassas pipetörler. 2. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazı (SSJ-2). Uyarılar ve Önlemler 1. Bu test in vitro diagnostik kullanım içindir. 2. Bu test sadece profesyonel kullanım içindir. 3. Yoğun hemolizli veya lipemi veya ciddi sarılıklı numunelerin kullanılmasına izin verilmez. 4. Zarar görmüş veya etiketi belli olmayan veya son kullanım tarihi geçmiş olan kasetleri kullanmayınız. 5. Operatör SSJ-2 cihazının ekran üzerindeki talimatlarını ve bu ürünün prospektüsü izlemelidir. Test bir kez başladığında durdurmayın. Aksi takdirde, teste devam edilemez. Eğer teste yeniden başlanacaksa, yeni bir kaset kullanılmalıdır. 6. Geçersiz sonuç veren numuneler tekrar test edilmelidir. 2

3 7. Her bir ürün için test tablosu güncellenmelidir. Aksi takdirde yeni lotlu kasetler cihaz tarafından kabul edilmez. 8. Kaset sadece tek bir kullanım içindir. Kullanılan kasetler ve numuneler potansiyel olarak biyo-tehlikeli maddeler olarak ele alınmalıdır. 9. Folyo torbasındaki kurutucuyu yemeyin. 10. Her örnek için tek kullanımlık pipet uçları ve numune şişeleri kullanın. Pipet uçları ve numune şişeleri tek kullanımlık olmalıdır. 11. ReLIA Hs-CRP testi kardiovasküler hastalığın mutlak delili olarak kullanılmamalıdır. CRP düzeyi klinik bulgular ve diğer tanısal testler ile birlikte yorumlanmalıdır. Kit saklama ve ürün raf ömrü Kuru bir yerde oda sıcaklığında (15-30 C ya da F) saklayın. Direk güneş ışığına maruz bırakmayın. Raf ömrü 18 aydır. (son kullanım tarihi için üretici tarihi) Örnek için gerekenler 1. Sadece serum veya heparinize ve EDTA.. K 2 plazma / tam kan test edilebilir. 2. Numuneler uygun bir kan toplama cihazında toplanmalıdır. Kontamine olmuş numuneler kullanılmamalıdır. 3. Numuneler toplandıktan sonra hemen test edilmelidir. Serum veya plazma numuneleri hemolizi önlemek için en kısa sürede toplandıktan sonra ayrılmalıdır. Hemolizi yoğun olan numuneler kullanılmamalıdır. 4. Eğer hemen test edilmezse, tam kan numuneleri 2-8 C de ve en fazla 24 saat saklanabilir. 5. Eğer buzdolabında 2-8 C 'de muhafaza edilirse, serum / plazma numuneleri 3 gün saklanabilir. Uzun depolama için, serum / plazma numunelerini 20 C den daha düşük sıcaklıkta saklayın. Analit bozulması numunelerin donma çözülme döngüsünün min. sayısına bağlıdır. 6. Kullanmadan önce oda sıcaklığına (20-26 C) gelmesi için numuneleri bekletin. 7. Yoğun hemoliz veya lipemi veya bilirubin yüksek düzeyli numunelerin kullanılmasına izin verilmez. Test prosedürü Dikkat: Lütfen dikkatle ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazının (SSJ-2) kullanım kılavuzununu ve testin ürün eklerini okuyun. 1. Numuneler kullanıma başlamadan önce oda sıcaklığına getirilir. 2. ReLIA cihazına (SSJ-2) bağlı bilgisayarı açın, sonra cihazı açın ve kullanım kılavuzunda açıklanan ReLIA yazılımını başlatın. 3

4 3. ReLIA Hs-CRP test kasetlerini folyo paketlerinden çıkarın. Kaset tepsisini çıkarmak için testi çalıştırmak istiyorsanız bilgisayar ekranında modül simgesini tıklayın (veya modülün düğmesine basın). Sonra, tepsi içine kaseti yerleştirin. (Dikkat: Kullanımdan hemen önce ReLIA Hs-CRP test kasetleri koruyucu folyo paketinde kapalı tutun. Kasetler açıldığında 1 saat içinde kullanılmalıdır. Eğer sıcaklık 30 C den yüksekse ya da yüksek nem koşulları altında ise bir kez folyo paketi açıldığında hemen kullanılmalıdır) 4. Numune hakkındaki giriş bilgileri için yazılım istemlerini izleyin. (serum / plazma ya da tam kansa). 5. Kaset tepsisi otomatik olarak dışarı açıldığında, bilgisayar port 1 e 25μL Buffer-A eklemesi için operatörü uyaracaktır. 6. Kaset tepsisi otomatik olarak dışarı açıldığında, bilgisayar port 2 e 80μL dilüent sample (Serum/Plazma/WB) eklemesi için operatörü uyaracaktır. Sonra, kaset tepsisi 15 dakika inkübasyon süresi için cihazın içine geri çekilir. (Dikkat: Test için, dilüsyon tüpüne 20 µl numune ( serum/plazma/tam kan) ekleyin ve yavaşça karıştırın ve sonra port 2 e 80 µl dilüe numune ekleyin.) 7. Test tamamlandığında, cihaz otomatik olarak sonucu yorumlar ve ekranda sonuçlar görüntülenir. Atık Biyo-tehlikeli maddelerinin atıkları kurumun uygulamalarına göre atılmalıdır. Tüm malzemeler güvenli ve kabul edilebilir bir şekilde ve tüm federal, eyalet ve yerel gereksinimlere uyularak atılmalıdır. Beklenen değer Tespit Aralığı: mg/l. 327 sağlıklı bireyin yüzde 99 inde CRP konsantrasyonu 3 mg/l bulunmuştur. Klinik önem Amerikan Kalp Derneği (AHA) ve Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi (CDC) C-reaktif protein (CRP) düzeyini kullanarak kardiyovasküler risk ve bulaşıcı hastalıkların bir değerlendirmesini yayınladı. Bir kardiyovasküler risk değerlendirmesi: Düşük risk: < 1.0 mg/l Ortalama risk: mg/l Yüksek risk: > 3.0 mg/l Bulaşıcı hastalıklar değerlendirmesi: Viral veya zayıf bakteriyel enfeksiyon: mg/l 4

5 Genel bakteriyel enfeksiyon: Ciddi bakteriyel enfeksiyon: Prospektüs mg/l > 50 mg/l Sonuçların yorumlanması 1. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2), otomotik olarak CRP düzeylerini hesaplar ve mg/l olarak ekranda CRP konsantrasyonunu gösterir. 2. Test son kullanım tarihini aştığında, cihaz direk olarak Test Süresi bildirecek ve kaseti reddedilecektir. 3. Kontrol bant sonuçları ürün özelliklerine uymadığında, cihaz Geçersiz raporu verecektir. Prosedürün limitleri 1. Trigliserit/kolesterol, bilirubin veya hemoglobin (hemolizden kaynaklanan) in yüksek konsantrasyonları nitroselüloz üzerinde kolloidal altın konjugatı ve numunenin kromatografisini etkileyebilir ve hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu nedenle, ciddi lipemili (trigliseritin konsantrasyonu > 15mmol / L veya kolesterolun konsantrasyonu > 400 mg / ml) ya da yoğun hemolizli (hemoglobinin konsantrasyonu > 600g / L ) ya da ciddi sarılıklı (bilirubinin konsantrasyonu > 40 mg / ml) numunelerin test edilmesine izin vermez. 2. Antikor-antijen reaksiyonları çalıştıran immunotestlerin belli sınırlamaları vardır. Bu testin sonucunu CRP in konsantrasyonunu sadece tam kan / serum / plazmada gösterir ve klinik diagnostik için tek bir kriter olarak kullanılmamalıdır. Performans özellikleri 1. Duyarlılığı: Ürünün 3 lotu ve lot başına 20 kez tekrarlanması sonucuyla hesaplanan ReLIA TM Hs-CRP testinin fonksiyonel duyarlılığı 0.25 mg/l dir. 2. Özgüllüğü: Troponin Complex (I-T-C) (100ng/mL), CK-MB (100ng/mL), ve Myoglobin (500ng/mL) in çapraz-reaktivitesi test edildi. Bu maddelerin tespit edilen CRP düzeyleri < 1 mg/l dir. 3. Hassasiyet: Lot hassasiyeti içinde, konsantrasyon başına 10 test. CRP (mg/l) Ortalama SD CV % % % 4. Lineerlik: Bir CRP standardı seri olarak 50 den 0.25 mg/l e dilute edildi. Her konsantrasyon üç kez test edildi. Regresyon çizgisinin korelasyon katsayısı 0.99 den yüksek bulundu. 5

6 Referanslar 1. Pepys, MB and Hirschfield, GM, C-reactive protein: a critical update. J Clin Invest; 2003; 111: Volanakis, JE, Human C-reactive protein: expression, structure, and function. Mol immunol; 2001;38: Koenig, W,Sund, M, Frohlich, M, et al, Creactive protein, a sensitive marker of inflammation, predicts future risk of coronary heart disease in initially healthy middle-aged men. Circulation; 1999; 99: Rifai, N, Ridker, PM, Proposed Cardilvascular Risk Assessment Algorithm Using High-Sensitivity C-Reactive Protein and Lipid Screening. Clin Chem; 2001; 47: Rifai, N, Ridker, PM, High-Sensitivity C-Reactive Protein: A novel and Promising Marker of Coronary Heart Disease. Clin Chem; 2001; 47(3): Biasucci, LM, Liuzzo, G, Grrillo, RL, et al., Elevated levels of C-reactive protein at discharge in patients with unstable angina predict recurrent instability. Circulation; 1999; 99: Taubes, G, Does inflammation cut to the heart of the matter? Science; 2002; 296: Ridker, PM, Hennekens, CH, Buring, JE, and Rifai, N, C-reactive protein and other markers of inflammation in the prediction of cardiovasculare cardiovascular disease in women. N Engl J Med; 2000; 342 (12): Brooks, DE, Devine, DV, Harris, PC, et al., RAMP (TM): A rapid, quantitative whole blood immunochromatographic platform for point-of-care testing. Clin Chem; 1999; 45: Oh, SW, Moon, JD, Park, SY, et al., Evaluation of fluorescence hs-crp immunoassay for point-of care testing. Clin Chim Acta; 2005; 356: Merkez: ReLIA Diagnostic Systems, Inc. Address: 1700 Owens Street San Francisco, CA 94158, USA Tel: Fax: Website: ReLIA Biotechnologies (Shenzhen), Inc. Address: 4 th Floor in Building 7, Nanshui Industry Village, 5 th Industrial Road, Shekou, Shenzhen, P. R. CHINA Tel: Fax:

7 Website: Prospektüs Wellkang Ltd t/a Wellkang Tech Consulting Address: Suite B, 29 Harley Street, LONDON W1G 9QR, England, United Kingdom Tel: , Fax: Website: Sembol Açıklama Üretici Yetkili temsilci In Vitro Diagnostik Medikal Cihaz Lot Kodu Yıl-Ay-Gün formatında son kullanım tarihler Sıcaklık Sınırı CE Mark Katalog numarası Kullanım sonrası potansiyel biyolojik zarar içerir Tekrar kullanmayın Üretim Tarihi <n> sayısında yeterli testler içerir 7