Ürün eki. N-Terminal pro-brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP) Test (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için)

Transkript

1 N-Terminal pro-brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP) Test (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için) Versiyon No 1.0 Yayın tarihi 02/12/2009 Kullanım amacı The ReLIA TM NT-proBNP test, akut koroner sendromun ve konjestif kalp yetmezliğin tedavi etkinliğinin ve prognozun değerlendirilmesine ve tanısına yardımcı olarak serum/ plazma/ insan tam kanında NT-proBNP konsantrasyonunu ölçmek için tasarlanmış bir in vitro diagnostik testtir. NT-proBNP test sonuçları, ancak, diğer kabul edilen tıbbi tanı yöntemlerinin yerini alamaz (ultrason elektrokardiyogram gibi, LVEF). Özet ve Açıklama NT-proBNP özellikle ventriküler hücrelerde bulunur. Konjestif kalp yetmezliğinde, sol ventrikül hacmi artıp ve ejeksiyon fraksiyonu azaldığında, pro-hormon ProBNP kan dolaşımı içine salgılanır ve biyolojik aktif 32 amino asid C-terminal kısmı (BNP) ve biyolojik inaktif 76 amino asid N-terminal kısmı (NT-proBNP) şeklinde bölünür. Klinik olarak hem NT-proBNP ve hem de BNP akut koroner sendromu ve konjestif kalp yetmezliği ile ilgili bir kalp hasarı sonucu olarak yükselmiş olarak görünmektedir 2,3,5,7-15,18,19. Kan dolaşımından NT-proBNP in klerensi BNP ye göre daha yavaştır. NT-proBNP (~1-2 saat) in yarı ömrü BNP den (~20 dak) daha uzundur. Kan dolaşımında NT-proBNP in bağıl konsantrasyonu genellikle BNP in katıdır 16, 20. NT-proBNP serum veya plazmada BNP ye göre daha stabildir, oda sıcaklığında 7 gün ve -20 o C de aylarca saklandıktan sonra ölçüm değerleri etkilenmemiştir. 4,16. Kalp yetmezliği teşhisi: Klinik çalışmalar gösterdi ki NT-proBNP sol ventrikül disfonksiyonunun çok hassas bir markerıdır. NT-proBNP konsantrasyonu kanda kalp yetmezliği derecesi ile yakından ilgilidir ve konjestif kalp yetmezliği riskinin sınıflandırılması ve SCD in beklentileri klinik olarak önemlidir. Kalp yetmezliğine 15 sahip olmayan solunum güçlükleri çeken hastaların en az % 50 sinde NT-proBNP testi ayırt edici kardiyojenik ve non-cardiogentic akut dispne sağlar ancak kalp yetmezliği hastası olarak tedavi edilebilir 3,10,12,15. Tedavi ve prognoz değerlendirilmesi: NT-proBNP testi kalp yetmezliği hastalarının prognozu ve tedavinin etkinliğini değerlendirmek için yararlıdır 1,2,3,7,10. Çalışmalar göstermektedir ki tedavi kalp yetersizliği çeken hastalar için iyi bir prognoz gösterdikten sonra NT-proBNP i % 30 düşürür 18. 1

2 Test prensibi ReLIA NT-proBNP testi çift antikor sandviç formatında çift yönlü lateral flow immunoassaydir.test sırasında stripi ıslatmak amacıyla Port 1 e buffer A eklenir. Port 2 ye numune eklendiğinde numune içindeki analit konjugat pat üzerindeki anti-nt-probnp immunogold konjugat ile reaksiyona girer ve immunokompleks oluşturur sonra nitroselüloz bant üzerinde ilerler. İmmunogold kompleks test bandına ulaştığında önceden nitroselüloz üzerine sabitlenmiş anti-nt-probnp antikorları ile reaksiyona girer. Kandaki NT-proBNP miktarı arttıkça test bandına daha fazla immunogold kompleks bağlanır. Test yapılırken kontrol konjugat, kolloid altın etiketli DNP-BSA, kromatografi tarafından numune ile nitroselüloz üzerine de akıtılacaktır. DNP-BSA altın kontrol band 1 ve kontrol band 2 in yerlerinde nitroselüloz üzerine kaplı anti-dnp antikor ile reaksiyona girer, sonra kontrol bantları için sabitlenir. Kolloidal altın kırmızı renk olduğu için, DNP BSA altının immün kompleksi kontrol band 1 de anti-dnp e bağlanır ve nitroselüloz üzerinde kontrol band 2 kırmızı renk olarak görünür. NT-proBNP yokluğunda, sadece kontrol bant 1 ve kontrol bant 2 olacak. NT-proBNP varlığında, kırmızı bir test bandı da olacaktır. Reaksiyon tamamlandığında, ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2) bantların DR sını (yansıma yoğunluğu) analiz eder ve RI ları (test ve kontrol bantlarının relative şiddeti) hesaplar. Sonra, cihaz içinde programlanan standart eğriye dayalı analitin konsantrasyonu cihaz tarafından belirlenir ve sonucu (pg/ml) görüntülenir. Test band Control band 2 Control band 1 Test type C 2 NTproBNP C 1 NT-proBNP Port 1 Port 2 Port 1 Port 2 Assay window Barcode Sağlanan Kit Bileşenleri Test Kasetleri 20 Buffer-A 1 (3.5mL) Ürün eki 1 Buffer-A zararlı olmayan kimyasal bir reaktiftir. Gerekli fakat sağlanmayan materyaller 1. Tek kullanımlık polipropilen pipet uçlu 40μL ve 120μL hacimli hassas pipettörler. 2

3 2. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazı (SSJ-2). Uyarılar ve Önlemler 1. Bu test in vitro diagnostik kullanım içindir. 2. Bu test sadece profesyonel kullanım içindir. 3. Yoğun hemolizli veya lipemi veya ciddi sarılıklı numunelerin kullanılmasına izin verilmez. 4. Zarar görmüş veya etiketi belli olmayan veya son kullanım tarihi geçmiş olan kasetleri kullanmayın. 5. Operatör SSJ-2 cihazının ekran üzerindeki talimatlarını ve bu ürünün ekleri izlemelidir. Test bir kez başladığında durdurmayın. Aksi takdirde, teste devam edilemez. Eğer teste yeniden başlanırsa, yeni bir kaset kullanılmalıdır. 6. Geçersiz sonuç veren numuneler tekrar test edilmelidir. 7. Her bir ürün için test tablosu güncellenmelidir. Aksi takdirde yeni lotlu kasetler cihaz tarafından kabul edilmeyecektir. 8. Kaset sadece tek bir kullanım içindir. Kullanılan kasetler ve numuneler potansiyel olarak biyo-tehlikeli madde olarak ele alınmalıdır. 9. Folyo torbasındaki kurutucuyu yemeyin. 10. Her örnek için tek kullanımlık pipet uçları ve numune şişeleri kullanın. Pipet uçları ve numune şişeleri tek kullanımlık olmalıdır. 11. ReLIA NT-proBNP test sonucu koroner hastalığının yüksek olasılıklı mutlak kanıtı olarak kullanılmamalıdır. NT-proBNP düzeyi klinik bulgular ve diğer tanısal testler ile birlikte yorumlanmalıdır. Kit saklama ve ürün raf ömrü 1. Kuru bir yerde oda sıcaklığında (15-30 C or F) saklayın. Direk güneş ışığına maruz bırakmayın. 2. Raf ömrü 18 aydır. (son kullanım tarihi için üretici tarihi) Örnek için gerekenler 1. Sadece serum veya heparinize ve EDTA.. K 2 plazma / tam kan test edilebilir. 2. Numuneler uygun bir kan toplama cihazında toplanmalıdır. Kontamine olmuş numuneler kullanılmamalıdır. 3. Numuneler toplandıktan sonra hemen test edilmelidir. Serum veya plazma numuneleri hemolizi önlemek için en kısa sürede toplandıktan sonra ayrılmalıdır. Hemolizi yoğun olan numuneler kullanılmamalıdır. 4. Eğer hemen test edilmezse, tam kan numuneleri 2-8 C de en fazla 24 saat süreyle saklanabilir. 5. Uzun depolama için, serum / plazma numunelerini 20 C altında saklayın. Analit bozulması 3

4 numunelerin donma çözülme döngüsünün min. sayısına bağlıdır. 6. Kullanmadan önce oda sıcaklığında (20-26 C) ulaşması için numuneleri bekletin. 7. Yoğun hemoliz veya lipemi veya bilirubin yüksek düzeyli numunelerin kullanılmasına izin verilmez. Test prosedürü Dikkat: Lütfen dikkatle ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazının (SSJ-2) kullanım kılavuzununu ve testin ürün eklerini okuyun. 1. Numuneler kullanıma başlamadan önce oda sıcaklığına getirilir. 2. ReLIA cihazına (SSJ-2) bağlı bilgisayarı açın, sonra cihazı açın ve kullanım kılavuzunda açıklanan ReLIA yazılımını başlatın. 3. ReLIA NT-proBNP test kasetlerini folyo paketlerinden çıkarın. Kaset tepsisini çıkarmak için testi çalıştırmak istiyorsanız bilgisayar ekranında modül simgesini tıklayın (veya modülün düğmesine basın). Sonra, tepsi içine kaseti yerleştirin. (Dikkat: Kullanımdan hemen önce ReLIA NT-proBNP test kasetleri koruyucu folyo paketinde kapalı tutun. Kasetler açıldığında 1 saat içinde kullanılmalıdır. Eğer sıcaklık 30 C den yüksekse ya da yüksek nem koşulları altında ise bir kez folyo paketi açıldığında hemen kullanılmalıdır) 4. Numune hakkındaki giriş bilgileri için yazılım istemlerini izleyin, sonra "onayla yı tıklayın. (Dikkat: Test tam kansa, bilgisayar ekranında tam kan" seçeneğini seçin.) 5. Kaset tepsisi otomatik olarak dışarı açıldığında, bilgisayar port 1 e 40μL buffer-a eklemesi için operatörü uyaracaktır saniye sonra, kaset tepsisi cihazdan dışarı doğru açılacak ve bilgisayar 100μL serum / plazma veya port 2 e 120μL tam kan numunesi eklemek için operatörü uyaracaktır. Sonra, Kaset tepsisi 20 dakika inkübasyon süresi için cihazın içine geri çekilir. 7. Test tamamlandığında, cihaz otomatik olarak sonucu yorumlayacak ve ekranda sonuçlar görüntülenecektir. Atık Biyo-tehlikeli maddelerinin atıkları kurumun uygulamalarına göre atılmalıdır. Tüm malzemeler güvenli ve kabul edilebilir bir şekilde ve tüm federal, eyalet ve yerel gereksinimlere uyularak atılmalıdır. Beklenen değer Tespit Aralığı: ,000 pg/ml. 395 sağlıklı bireyin yüzde 99.5 inde NT-proBNP konsantrasyonu < 250 pg/ml den düşük bulunmuştur. Klinik önem ReLIA NT-proBNP tarafından belirlenen kandaki NT-proBNP düzeyinin korelasyonu ile NYHA 4

5 tarafından konjestif kalp yetmezliği (CHF) aşağıdaki gibi sınıflandırılmıştır: NYHA Sınıflandırma ReLIA NT-proBNP (pg/ml) Normal <250 Sınıf I 250~450 Sınıf II 450~1,700 Sınıf III 1,700~4,200 Sınıf IV 4,200 Sonuçların yorumlanması 1. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2), otomotik olarak NT-proBNP düzeylerini hesaplar ve pg/ml olarak ekranda NT-proBNP konsantrasyonunu gösterir. 2. Test son kullanım tarihini aştığında, cihaz direk olarak Test Süresi bildirecek ve kaseti reddedecektir. 3. Kontrol bant 1 ve kontrol bant 2 sonuçları ürün özelliklerine uymadığında, cihaz Geçersiz raporu verecektir. Prosedürün limitleri 1. Trigliserit/kolesterol, bilirubin veya hemoglobin (hemolizden kaynaklanan) in yüksek konsantrasyonları nitroselüloz üzerinde kolloidal altın konjugat ve numunenin kromatografisini etkileyebilir ve hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu nedenle, ciddi lipemili (trigliseritin konsantrasyonu > 15mmol / L veya kolesterolun konsantrasyonu > 4 mg / ml) ya da yoğun hemolizli (hemoglobinin konsantrasyonu > 6g / L ) ya da ciddi sarılıklı (bilirubinin konsantrasyonu > 4 mg / ml) numunelerin test edilmesine izin vermez. 2. Antikor-antijen reaksiyonları çalıştıran immunotestlerin belli sınırlamaları vardır. Bu testin sonucunu NT-proBNP in konsantrasyonunu sadece tam kan/serum/plazmada gösterir ve klinik diagnostik için tek kriter olarak kullanılmamalıdır. Performans özellikleri 1. Duyarlılığı: Ürünün 3 lotu ve lot başına 20 kez çoğaltılması sonuçlarıyla hesaplanan ReLIA TM NT-proBNP testinin fonksiyonel duyarlılığı 200pg/mL dir. 2. Özgüllüğü Troponin Kompleks (I-T-C) (100ng/mL), CK-MB (100ng/mL), ve Miyoglobin (500ng/mL) in çapraz-reaktivitesi test edildi. Bu maddelerin tespit edilen NT-proBNP düzeyi < 200 pg/ml dir. 3. Hassasiyet: Lot hassasiyeti içinde, konsantrasyon başına 10 test. NT-proBNP (pg/ml) Ortalama SD CV % 1,000 1, % 10,000 9, % 5

6 4. Lineerlik: Bir NT-proBNP standardı seri olarak 10,000 den 200pg/mL e dilute edildi. Her konsantrasyon üç kez test edildi. Regresyon çizgisinin korelasyon katsayısı 0.99 dur. Referanslar 1. Bettencourt, P, Azevedo, A, Pimenta, J, Friǒes, F and Ferreira, S, N-terminal-pro-brain natriuretic peptide predicts outcome after hospital discharge in heart failure patients. Circulation; 2004; 1102: Kragelund, C, Gronning, B, Kober, L, Hildebrandt, P and Steffensen, R, N-terminal pro-b-type natriuretic peptide and long-term mortality in stable coronary heart disease. N Engl J Med; 2005; 352: Januzzi JL, Kimmenade R, Lainchbury, J, Bayes-Genis, A, Ordones, J, Santalo-Bel, M, Pinto, YM and Richards, M, NT-proBNP testing for diagnosis and short-term prognosis in acute destabilized heart failure: an international pooled analysis of 1256 patients. European Heart Journal; 2006; 27: Muller, T, Gegenhuber, A., Dieplinger, BA, Poelz, W and Haltmayer, M Long-term stability of endogenous B-type natriuretic peptide(bnp) and amino terminal probnp (NT-proBNP) in frozen plasma samples. Clin Chem Lab Med; 2004; 42(8): Xu, Guo-bin and Shi, Xiao-min., N-terminal pro-b-type natriuretic peptide and N-terminal pro-b-type natriuretic peptide in clinical use. Chin J Lab Med; 2006; 29(1). 6. Pan, Bai-shen, Cai, Nai-sheng, Li, Qing, et al., NT-proBNP concentration in Chinese apparently healthy individuals. Chin J Lab Med; 2006; 29(1). 7. Shi, Xiao-min, Xu, Guo-bin and Xia, Tie-an, Prognostic value of N-terminal B-type natriuretic peptide in patients with chronic heart failure. Chin J Lab Med; 2006; 29(1). 8. Zhang, Chun-ling, Kang, Jin-suo, Chen, Xi, et al., Plasma NT-proBNP level and its clinical significance in patients with cardiovascular disease. Chin J Lab Med; 2006; 29(1). 9. Wang, Lan-lan, Cai, Bei, Liu, Xing-bin et al., Clinical application and evaluation of N-terminal pro-brain natriuretic peptide quantitative detection in heart failure laboratory diagnosis. Chin J Lab Med; 2006; 29(1). 10. Richards A.M. et al., Plasma N-terminal pro-brain natriuretic peptide and adrenomedullin. New neurohormonal predictors of left ventricular dysfunction and prognosis after myocardial infraction. Circulation; 1998 ; 97: Richards A.M. et al., Plasma N-terminal pro-brain natriuretic peptides and adrenomedullin: Prognosis utility and prediction of benefit from carvedilol in chronic ischemic left ventricular dysfunction. J Am Coll Cardiol; 2001; 37: Costello-Boerrigter, LC, et al., NT-proBNP is superior to BNP in detection of LV systolic dysfunction in the community. J Cardiac Failure; 2004; 10(4): Suppl Mueller, T, Gegenhuber, A, Poelz W, Haltmayer M, Biochemical diagnosis of impaired left ventricular ejection fraction--comparison of the diagnostic accuracy of brain natriuretic peptide (BNP) and amino terminal probnp (NT-proBNP). Clin Chem Lab Med; 2004; 42(2):

7 14. Sudoh, T, Kangawa, K., Minamnino, N, et al., A natriuretic peptide in porcine brain. Nature; 1998; 322: Zhao, Yu-sheng, Tian, Ya-ping, Gao, Wei, et al., Correlations between plasma concentration of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and cardiac function in patients with cardiovascular diseases. Chinese Circulation Journal; 2004; 19: Baggish, AL, Roland, RJ, van Kimmenade, J and Januzzi, JL, Amino-terminal pro B-type natriuretic peptide testing and prognosis in patients with acute dyspnea, including those with acute heart failure. Am J Cardiol; 2008; 101[suppl]: 49A 55A. 17. Jordi Ordonez-Llanos, J, Collinson, PO and Christenson, RH Amino-terminal pro B-type natriuretic peptide: analytic considerations. Am J Cardiol; 2008;101[suppl]: 9A 15A. 18. Martinez-Rumayor, A, Richards, AM, Burnett, JC and Januzzi, Jr. JL, Biology of the natriuretic peptides. Am J Cardiol; 2008; 101[suppl]: 3A 8A. 19. Bettencourt, P, James, L, and Januzzi Jr., JL, Amino-terminal pro B-type natriuretic peptide testing for inpatient monitoring and treatment guidance of acute destabilized heart failure. Am J Cardiol; 2008; 101[suppl]: 67A 71A. 20. Januzzi Jr., JL, Tournoux, AA, and Moe, D., Amino-terminal pro B-type natriuretic peptide testing for the diagnosis or exclusion of heart failure in patients with acute symptoms. Am J Cardiol 2008; 101[suppl]: 29 38A. 21. Taylor, JA, Christenson, RH, Rao, K, Jorge, M and Gottlieb, SS, B-type natriuretic peptide and N-terminal pro B-type natriuretic peptide are depressed in obesity despite higher left ventricular end diastolic pressures. Am Heart J; 2006; 152: Merkez: ReLIA Diagnostic Systems, Inc. Adres: 1700 Owens Street San Francisco, CA 94158, USA Tel: Fax: Website: ReLIA Biotechnologies (Shenzhen), Inc. Adres: 4 th Floor in Building 7, Nanshui Industry Village, 5 th Industrial Road, Shekou, Shenzhen, P. R. CHINA Tel: Fax: Website: Wellkang Ltd t/a Wellkang Tech Consulting Adres: Suite B, 29 Harley Street, LONDON W1G 9QR, 7

8 England, United Kingdom Tel: , Fax: Website: Sembol Açıklama Üretici Yetkili temsilci In Vitro Diagnostik Medikal Cihaz Lot Kodu Yıl-Ay-Gün formatında son kullanım tarihler Sıcaklık Sınırı CE Mark Katalog numarası Kullanım sonrası potansiyel biyolojik zarar içerir Tekrar kullanmayın Üretim Tarihi <n> sayısında yeterli testler içerir 8