(Sadece in vitro Diagnostik kullanım için)

Transkript

1 D-Dimer Test (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için) Versiyon No 1.0 Yayın tarihi 02/12/2009 Kullanım amacı The ReLIA TM D-Dimer test, derin ven trombozu (DVT), pulmoner emboli (PE), venöz tromboemboli (VTE) ve D-dimer indeksinin ölçümü gibi trombotik hastalığın tanısına yardımcı olarak serum / plazma/ insan tam kanında D-Dimer konsantrasyonunu ölçmek için tasarlanmış bir in vitro diagnostik testtir. Özet ve Açıklama Koagülasyon işlemi sırasında, enzim trombin, fibrinopeptide A ve B formu fibrinojeni böler ve çözünebilir fibrini fibrinojene dönüştürür. Çözünebilir fibrin bu işlem sırasında kendiliğinden polimerize olarak faktör XIIIa ile D bölgesinde kovalent çapraz bağ oluşturur 11. Doku onarımı ardından, pıhtı fibrinolitik yol boyunca bozulur. Bu işlem sırasında, plazmin çapraz bağlı fibrinin kimyasal bağlarını ayırır ve D-dimer dahil fibrin yıkım ürünlerini (FDPs) serbest bırakır. D-Dimer çapraz bağlı iki fragman D moleküllerinden oluşur. Dolaşım sisteminde D-dimer miktarı venöz tromboemboli (VTE) 6 pulmoner emboli (PE) 1-4,7,8,10 ve derin ven trombozu (DVT) 3,5,9 olan hastalarda yüksek olarak gösterir. Test prensibi Relia CK-MB testi çift antikor sandviç formatında çift yönlü lateral flow immunoassaydir. Test sırasında port 1 e kan numunesi eklenir. Sonra numune, nitroselüloz üzerine kaplanmış antikor bulunan test bandında ilerler. Eğer kan numunesinde D-Dimer varsa, test bandında anti-d-dimer antikorları ile reaksiyona girer ve immun kompleks oluşturur. Port 2 ye Buffer-A eklendiğinde, konjugat pet üzerine kaplanmış koloidal atlın etiketli DNP-BSA ve koloidal altın etiketli anti-d-dimer antikoru çözünür. İki konjugat sonra nitroselüloz üzerinde buffer ile ilerler. Anti-D-Dimer-immunogold konjugat önceki test bandında ilerlediğinde, kırmızı bir renk formu oluşturmak için test bandı üzerine tutulmuş D-Dimere bağlanır. Test yapılırken kontrol konjugat, kolloid altın etiketli DNP-BSA, kontrol band 1 ve kontrol band 2 in bulunduğu yerde nitroselüloz üzerine kaplı anti-dnp antikoruna bağlanır. Kolloidal altın kırmızı renk olduğu için, DNP BSA altının ve anti-dnp in immün kompleksi nitroselüloz üzerinde kontrol band 1 ve kontrol band 2 de kırmızı bir renk olarak görünür. D-Dimer yokluğunda, sadece kontrol band 1 ve kontrol band 2 vardır. D-Dimer varlığında, kırmızı bir test bandı da vardır. Reaksiyon tamamlandığında, ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2) bantların DR sını (yansıma yoğunluğu) analiz eder ve RI ları (test ve kontrol bantlarının relative şiddeti) hesaplar. Sonra, cihaz programlanan standart eğriye dayalı analitin konsantrasyonunu belirler ve sonucu (ng/ml) görüntüler. 1

2 Test Band Control band 2 Control band 1 Test type C 2 D-dimer C 1 D-Dimer Port 1 Port 2 Port 1 Port 2 Assay window Barcode Sağlanan Kit Bileşenleri Test Kasetleri 20 Buffer-A 1 (3.5mL) Dilusyon Tüpü (Buffer içerir) 20 Ürün eki 1 Buffer-A zararlı olmayan kimyasal bir reaktiftir. [Gerekli fakat sağlanmayan materyaller 1. Tek kullanımlık polipropilen pipet uçlu 70μL ve 120μL hacimli hassas pipettörler. 2. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazı (SSJ-2). Uyarılar ve Önlemler 1. Bu test in vitro diagnostik kullanım içindir. 2. Bu test sadece profesyonel kullanım içindir. 3. Yoğun hemolizli veya lipemi veya ciddi sarılıklı numunelerin kullanılmasına izin verilmez. 4. Zarar görmüş veya etiketi belli olmayan veya son kullanım tarihi geçmiş olan kasetleri kullanmayınız. 5. Operatör, SSJ-2 cihazının ekran üzerindeki talimatlarını ve bu ürünün insörtlerini izlemelidir. Test bir kez başladığında durdurmayın. Aksi takdirde, teste devam edilemez. Eğer teste yeniden başlanacaksa, yeni bir kaset kullanılmalıdır. 6. Geçersiz sonuç veren numuneler tekrar test edilmelidir. 7. Her bir ürün için test tablosu güncellenmelidir. Aksi takdirde yeni lotlu kasetler cihaz tarafından kabul edilmez. 8. Kaset sadece tek bir kullanım içindir. Kullanılan kasetler ve numuneler potansiyel olarak biyo-tehlikeli maddeler olarak ele alınmalıdır. 2

3 9. Folyo torbasındaki kurutucuyu yemeyin. 10. Her örnek için tek kullanımlık pipet uçları ve numune şişeleri kullanın. Pipet uçları ve numune şişeleri tek kullanımlık olmalıdır. 11. ReLIA D-Dimer testi oluşan trombozin mutlak delili olarak kullanılmamalıdır. D-Dimer düzeyi klinik bulgular ve diğer tanısal testler ile birlikte yorumlanmalıdır. Kit saklama ve ürün raf ömrü 1. Kuru bir yerde oda sıcaklığında (15-30 C or F) saklayın. Direk güneş ışığına maruz bırakmayın. 2. Raf ömrü 18 aydır. (son kullanım tarihi için üretici tarihi) Örnek için gerekenler 1. Sadece serum veya heparinize ve EDTA.. K 2 plazma / tam kan test edilebilir. 2. Numuneler uygun bir kan toplama cihazında toplanmalıdır. Kontamine olmuş numuneler kullanılmamalıdır. 3. Numuneler toplandıktan sonra hemen test edilmelidir. Serum veya plazma numuneleri hemolizi önlemek için en kısa sürede toplandıktan sonra ayrılmalıdır. Hemolizi yoğun olan numuneler kullanılmamalıdır. 4. Eğer hemen test edilmezse, tam kan numuneleri 2-8 C de ve en fazla 24 saat saklanabilir. 5. Eğer buzdolabında 2-8 C 'de muhafaza edilirse, serum / plazma numuneleri 3 gün saklanabilir. Uzun depolama için, serum / plazma numunelerini 20 C den daha düşük sıcaklıkta saklayın. Analit bozulması numunelerin donma çözülme döngüsünün min. sayısına bağlıdır. 6. Kullanmadan önce oda sıcaklığına (20-26 C) gelmesi için numuneleri bekletin. 7. Yoğun hemoliz veya lipemi veya bilirubin yüksek düzeyli numunelerin kullanılmasına izin verilmez. Test prosedürü Dikkat: Lütfen dikkatle ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazının (SSJ-2) kullanım kılavuzununu ve testin ürün eklerini okuyun. 1. Numuneler kullanıma başlamadan önce oda sıcaklığına getirilir. 2. ReLIA cihazına (SSJ-2) bağlı bilgisayarı açın, sonra cihazı açın ve kullanım kılavuzunda açıklanan ReLIA yazılımını başlatın. 3. ReLIA D-Dimer test kasetlerini folyo paketlerinden çıkarın. Kaset tepsisini çıkarmak için testi çalıştırmak istiyorsanız bilgisayar ekranında modül simgesini tıklayın (veya modülün düğmesine basın). Sonra, tepsi içine kaseti yerleştirin. (Dikkat: Kullanımdan hemen önce ReLIA D-Dimer test kasetleri koruyucu folyo 3

4 paketinde kapalı tutun. Kasetler açıldığında 1 saat içinde kullanılmalıdır. Eğer sıcaklık 30 C den yüksekse ya da yüksek nem koşulları altında ise bir kez folyo paketi açıldığında hemen kullanılmalıdır) 4. Numune hakkındaki giriş bilgileri için yazılım istemlerini izleyin, sonra "onayla yı tıklayın. (Dikkat: Test tam kansa, bilgisayar ekranında tam kan" seçeneğini seçin.) 5. Kaset tepsisi otomatik olarak dışarı açıldığında, bilgisayar port 1 e 70μL serum/plazma eklemesi için operatörü uyaracaktır. (Dikkat: Tam kan çalışmak için dilüsyon tüpüne 70 µl tam kan içeren 70 µl buffer ekleyin ve yavaşça karıştırın ve sonra port 1 e 70 µl dilüsyon edilmiş numuneyi ekleyin.) saniye cihaz içinde kaldıktan sonra kaset tepsisi cihazdan dışarı doğru açılır. Bilgisayar port 2 ye 120μL buffer-a eklemek için operatörü uyaracaktır. Sonra, Kaset tepsisi 20 dakika inkübasyon süresi için cihazın içine geri çekilir. 7. Test tamamlandığında, cihaz otomatik olarak sonucu yorumlar ve ekranda sonuçlar görüntülenir. Atık Biyo-tehlikeli maddelerinin atıkları kurumun uygulamalarına göre atılmalıdır. Tüm malzemeler güvenli ve kabul edilebilir bir şekilde ve tüm federal, eyalet ve yerel gereksinimlere uyularak atılmalıdır. Beklenen değer Tespit Aralığı: 500 5,000ng/mL. 365 sağlıklı bireyin yüzde 97.5 inde D-Dimer konsantrasyonu < 1,500ng/mL den düşük bulunmuştur. [Klinik önem ReLIA D-Dimer diagnostik, VTE, PE veya DVT hastaları için cut off değerini 1,500ng/mL olarak belirlemiştir. Diğer in vitro diagnostik testlerde olduğu gibi, her laboratuar hastanın D-Dimer sonuçlarını diagnostik değerlendirmek için kendi referans aralığını belirlemelidir. Sonuçların yorumlanması 1. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2), otomotik olarak D-Dimer düzeylerini hesaplar ve ng/ml olarak ekranda D-Dimer konsantrasyonunu gösterir. 2. Test son kullanım tarihini aştığında, cihaz direk olarak Test Süresi bildirecek ve kaseti reddedilecektir. 3. Kontrol bant 1 ve kontrol bant 2 sonuçları ürün özelliklerine uymadığında, cihaz Geçersiz raporu verecektir. 4

5 Prosedürün limitleri 1. Trigliserit/kolesterol, bilirubin veya hemoglobin (hemolizden kaynaklanan) in yüksek konsantrasyonları nitroselüloz üzerinde kolloidal altın konjugatı ve numunenin kromatografisini etkileyebilir ve hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu nedenle, ciddi lipemili (trigliseritin konsantrasyonu > 15mmol / L veya kolesterolun konsantrasyonu > 4 mg / ml) ya da yoğun hemolizli (hemoglobinin konsantrasyonu > 6g / L ) ya da ciddi sarılıklı (bilirubinin konsantrasyonu > 4 mg / ml) numunelerin test edilmesine izin vermez. 2. Antikor-antijen reaksiyonları çalıştıran immunotestlerin belli sınırlamaları vardır. Bu testin sonucunu D-Dimer in konsantrasyonunu sadece tam kan / serum / plazmada gösterir ve klinik diagnostik için tek bir kriter olarak kullanılmamalıdır. Performans özellikleri 1. Duyarlılığı: Ürünün 3 lotu ve lot başına 20 kez çoğaltılması sonuçlarıyla hesaplanan ReLIA TM D-Dimer testinin fonksiyonel duyarlılığı 500ng/mL dir. 2. Özgüllüğü :Fibrinojenin in çapraz-reaktivitesi test edildi ve fibrinojenin tespit edilen D-Dimer düzeyi <1,000 ng/ml di. 3. Hassasiyet: Lot hassasiyeti içinde, konsantrasyon başına 10 test. D-Dimer (ng/ml) Ortalama SD CV 1,500 1, % 3,000 3, % 5,000 4, % 4. Lineerlik: Bir D-Dimer standartı seri olarak 5,000 den 500ng/mL e dilute edildi. Her konsantrasyon üç kez test edildi. Regresyon çizgisinin korelasyon katsayısı 0.99 dur. Referanslar 1. Goldhaber, SZ Pulmonary Embolism. New Engl J Med; 1998; 339: Fedullo, PF and Tapson, VF The evaluation of suspected pulmonary embolism. New Engl. J Med; 2003; 349: Ramzi, DW and Leeper, KV, DVT and pulmonary embolism: Part I Diagnosis American Family Physician; 2004; 69(12): Kline, JA, Mitchell, AM, Kabrhel, C, Richman, PB, and Courtney, DM, Clinical criteria to prevent unnecessary diagnostic testing in emergency department patients with suspected pulmonary embolism. Journal of Thrombosis and Haemostasis; 2004; 2(8): Wells, PS, Anderson, DR, Rodger, M et al. Evaluation of D-Dimer in the diagnosis of suspected deep-vein thrombosis. New Engl J Med; 2003; 349:

6 6. Kelly, J and Hunt, B, A Clinical Probability Assessment and D-Dimer Measurement Should Be the Initial Step in the Investigation of Suspected Venous Thromboembolism. CHEST; 2003; 124: Wells, PS, Anderson, DR, Rodger, M et al., Excluding pulmonary embolism at the bedside without diagnostic imaging: management of patients with suspected pulmonary emblolism presenting to ED by using a simple clinical model and D-Dimer. Annals of Internal Medicine; 2001; 135: Humphreys, CW, Moores, LK, and Shorr, AF; Cost minimization analysis of two algorithms for diagnosing acute pulmonary embolism. Thrombosis Research; 2004; 113(5) ACEP Clinical Policy; Critical Issues in the Evaluation and Management of Adult Patients Presenting with Suspected Lower-extremity Deep Vein Thrombosis. Annals of Emergency Medicine; 2003; 41: ACEP Clinical Policy; Critical Issues in the Evaluation and Management of Adult Patients Presenting with Suspected Pulmonary Embolism. Annals of Emergency Medicine; 2003; 41(2): Davie EW and Ratnoff OD, Waterfall sequence for intrinsic blood clotting. Science; 1964; 145: Goodnight, Jr., SH & Hathaway, WE, Disorders of Hemostasis and Thrombosis (2nd ed), New York, McGraw-Hill, 2001, ISBN Cesarman-Maus G, Hajjar KA. Molecular mechanisms of fibrinolysis. Br J Haematol; 2005; 129: Kumar V, Fausto, N and Abbas A, Robbins and Cotran: Pathologic Basis of Disease (7th ed), Philadelphia, Elsevier Saunders, 2005 ISBN Walker JB and Nesheim ME, The molecular weights, mass distribution, chain composition, and structure of soluble fibrin degradation products released from a fibrin clot perfused with plasmin. J Biol Chem; 1999; 274: Merkez: ReLIA Diagnostic Systems, Inc. Adres: 1700 Owens Street San Francisco, CA 94158, USA Tel: Fax: Website: ReLIA Biotechnologies (Shenzhen), Inc. Adres: 4 th Floor in Building 7, Nanshui Industry Village, 5 th Industrial Road, Shekou, Shenzhen, P. R. CHINA Tel:

7 Fax: Website: Wellkang Ltd t/a Wellkang Tech Consulting Adres: Suite B, 29 Harley Street, LONDON W1G 9QR, England, United Kingdom Tel: , Fax: Website: Sembol Açıklama Üretici Yetkili temsilci In Vitro Diagnostik Medikal Cihaz Lot Kodu Yıl-Ay-Gün formatında son kullanım tarihler Sıcaklık Sınırı CE Mark Katalog numarası Kullanım sonrası potansiyel biyolojik zarar içerir Tekrar kullanmayın Üretim Tarihi <n> sayısında yeterli testler içerir 7