CEQAL, Standardizasyon Programlarını ve Matrikse Duyarlı Olmayan (Matrix- Insensitive) Kimya DKK programlarını destekleyici referans değer hedefler atamak üzere kullanılan aşağıdaki Referans Metodlarını işletmektedir. Referans değer hedefli analitler ikonu ile gösterilmektedir. Apolipoprotein A1 ve Apolipoprotein B Bu tahliller, Seattle, WA daki Washington Üniversitesi Northwest Lipid Metabolizma ve Diyabet Araştırma Laboratuarlarında yapılmaktadır. Siemens-Behring BNII nefelometre apolipoprotein A1 için WHO/ IFCC Uluslar arası Referans Materyalleri SP1-01 ve apolipoprotein B için SP3-07 ye izlenebilir olan kurum içi kalibrasyon materyalleri kullanılarak kalibre edilmektedir. Deneme kesinliği, düşük, orta ve yüksek Apo A1 ve Apo B seviyeleri için kurum içi IQC kullanarak izlenmekte ve değerler WHO/ IFCC referans materyallerine göre atanmaktadır. Marcovina SM, Albers JJ, Henderseon WH. Apolipoproteinlerin ölçümü için Uluslararsı Klinik Kimya Federasyonu standardizasyon projesi. III ortak referans materyal kullanımı ile apo A-1 değerlerinin karşılaştırılabildiği. Clin Chem 1993; 39: 773-778 Marcovina SM, Albers JJ, Kennedy H ve diğerleri. A-1 ve B apolipoproteinlerin ölçümü için Uluslar arası Klinik Kimya Federasyonu standardizasyon projesi. IV: Uluslar arası referans materyalleri kullanılarak apo B değerlerinin karşılaştırılabildiği. Clin Chem 1994; 40:586-592. Bilirubin (Total) CHEM463 CHEM433 NEOB435 Bu referans metodu Doumas ve diğerleri tarafından geliştirilen Jedrassik- Grof prensibine dayanmaktadır. Metod ve materyaller Uluslararası Klinik Laboratuar Referans Sistemi, Ulusal Klinik Laboratuar Standartları Komitesi sertifika ve onayına sahiptir (Belge RS6-A). Doumas BT, Perry BW, Bayse DD ve diğerleri. Serumda bilirubin tespiti, transfer edilebilirlik testi için kullanılan bir aday referans metodu. Clin Chem 1983; 29:297-301. Doumas BT, Kwok-Cheung PP, Perry BW ve diğerleri. Serumda total bilirubin tespiti için aday referans metodu: Gelişim ve doğrulama. Clin Chem 1985; 21:1779-1789. 1 6
Klorid CHEM463 CHEM433 Gümüş iyonlarının kolorimetrik oluşumu ve endpoint amperometrik göstergesi (Cotlove method) referans metoda dayanak oluşturur. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır (Document RS10-P). Total Kolesterol CHOL726 Center for Disease Control and Prevention tarafından tadil edilmiş Abell, Levy, Brodie ve Kendall metodu referans metodun kaynağıdır. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır (Document RS3-A). Serum Kreatinin GFRB716 GFRM733 GFRR733 Serum kreatinin bilinen bir izotopun dilüsyon gaz kromotografi, kütle spektrometri yöntemi kullanılarak insan serumunda ölçülür. Ölçüm kabul görmüş bir laboratuarda yapılmıştır. BCR (Community Bureau of Reference of the Commission of the European Communities) tarafından CRM (Certified Reference Method) için önerilen yöntemdir. 2 6
Glukoz CHEM463 CHEM433 Glucose Committee of the American Association for Clinical Chemistry ve The Centers for Disease Control and Prevention tarafından geliştirilen hekzokinaz/glukoz-6-fosfatdehidrogenaz referans metodun kaynağıdır. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır (Document RS1-A). Glikolize Hemoglobin GHGB433 Glikolize Hemoglobin hedef değerleri Diabetis Diagnostic Laboratory at the University of Missouri tayin edilmiştir. Aynı laboratuar, Diabetis Control and Complications Trial (DCCT) de Glikolize hemoglobin ölçümü yapılan laboratuar ve NGSP nin de (National Glycohemoglobin Standardization) referans laboratuarıdır. HDL Kolesterol (Belirlenmiş Karşılaştırma Yöntemi) Üreticiler için Bu yöntemde dextran sülfat (molekül ağırlığı 50,000 Dalton) çöktürücü gibi kullanılır. Yüksek yoğunluklu lipoprotein kolesteroller hariç tüm lipoproteinler çöktürülür. Yüksek yoğunluklu lipoproteinler Abell- Kendall kolesterol referans yöntemi ile ölçülür. Bu yöntem Hastalığı Kontrol ve Önleme Merkezinin yüksek yoğunluklu lipoprotein kolesterol için ultrasantrifirüj referans metodu ile izlenebilir. 3 6
HDL Kolesterol (Ultrasantrifüjleme) Ultrasantrifüjleme neticesinde çok düşük yoğunluktaki lipoprotein ve chylomicrons kaldırılır ve HDL ölçülür. LDL kolesterol heparinmanganez kullanılarak çöktürülür ve süpernatanttaki kolesterol miktarı Abell-Kendall kolesterol referans metodu ile ölçülür. Yöntem, Centers for Disease Control and Prevention tarafından insan kaynaklı serum havuzunda HDL hedef değerinin tespiti için kullanılır. Yöntem, HDL Kolesterolün, kalibrasyon, rutin metotların doğruluğunun tayininde nihai yöntem olarak kabul edilir. LDL Kolesterol β-miktar Tayini Düşük yoğunluktaki lipoprotein kolesterol ultrasantrifüjleme neticesinde HDL (High Density Lipoprotein) kolestrolde anlatıldığı gibi tayin edilir. Infranatant ta bulunan kolesterol içeriği (HDL ve LDL içeren) ölçülür. Önce HDL kolesterol ölçülür aradaki fark hesaplanarak LDL kolesterol içeriği tayin edilir. Yöntem Centers for Disease Control and Prevention beta Quantifation referans metodudur. Potasyum Potasyumun serumdaki referans ölçüm yöntemi, National Institue Standarts ve Technology and the Center for Disease Control tarafından ortaklaşa geliştirilmiştir. Yöntem serumda potasyum seviyesini flame atomik emisyon spektrometri kullanarak ölçmektedir. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır. 4 6
Total Protein CHEM463 CHEM433 Referans metodu biüre reaksiyonuna dayanmakta ve Doumas et al tarafından geliştirilmiş, geçerliliği onaylanmış ve aktarılabilirliği test edilmiştir. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır. Sodyum Sodyumun serumdaki referans ölçüm yöntemi, National Institute Standarts ve Technology and the Center for Disease Control tarafından ortaklaşa geliştirilmiştir. Yöntem serumda potasyum seviyesini alev emisyon spektrometri kullanarak ölçmektedir. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır. İlaç Düzeyleri THDM463 THDM433 Tüm ilaç düzeyleri gravimetrik olarak hedeflenmiştir. Yöntem, rutin kullanımdaki metotlardan daha hassas ve kesin sonuç verdiği bilinmesine rağmen akreditasyona tabi değildir. Total ve Net Trigliserit (Yükselen Sırasıyla Metod) Net trigliserit tayini gliserol fosfat oksidaz (GPO) reaksiyonu ile iki aşamalı ölçülür. Lipaz dahil ve hariç olmak üzere. Bu yöntem tüm CRMLN üyeleri tarafından kullanılmakta ve CDC tarafından referans metodu olarak kabul edilmektedir. CDC referans metodunda trigliserit organik olarak ekstrakte edildikten sonra gliserol kimyasal olarak tayin edilir. Serbest gliserol tayininin referans metodu olmayıp, serbest gliserol düzeyi standat olmayan bir enzimatik yöntem ile ölçülür. (CDC izotop dilüsyon gaz kromotografi- kütle spektrometri metodu). Bu referans metodunda Total Glycerides in GC-IDMS analizinde CDC değistirmistir. CRMLN nin enzimatik metodu CDC de halen bahsedilir. 5 6
Üre CHEM463 CHEM433 URCR435 URCR432 Referans metodu, üreaz ve glutamat dehidrogenazın ikili enzim reaksiyonuna dayanır. Yöntem geliştirilmiş, onaylanmış ve transfer edilebilirliği test edilmiştir. Metot ve materyal National Reference System for the Clinical Laboratory, National Committee for Clinical Laboratory Standarts tarafından kabul görmüş ve onaylanmıştır (Document RS11-P). 6 6