KULLANIM TALİMATI ANCA. Standard Ref. Açıklama Test Sayısı ANCA Etanol (12 kuyucuklu) Demo

Benzer belgeler
Rev.: 011: Sayfa: 1 / 12 KULLANIM KILAVUZU. ndna (Crithidia Luciliae) Standart Ref. Açıklama Testler 53,100 ndna (10 kuyucuk) 100

Rev.: 011: Sayfa: 1 / 12 KULLANIM KLAVUZU. ndna (Crithidia Luciliae) Standard Ref. Açıklama Test ndna (10 kuyucuk) 100

KULLANIM KAVUZU. EMA (Endomysium)

AESKULISA Parietal cell Ref 3511

Döküman: KULLANIM KALAVUZU. Rodent TISSUES (rat/mouse/lk/lks)

AESKULISA Intrinsic Factor Ref 3512

ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ DR. NİLGÜN KAŞİFOĞLU

AESKULISA SS-A-60 Ref 3108

AESKULISA dsdna-a Ref 3141

AESKULISA Nucleo-h Ref 3130

AESKUBLOT Vasculitis Pro Ref 4002

AESKULISA Cardiolipin-A Ref 3203

AESKULISA Borrelia-M Ref 3803

AESKULISA Protein C Ref 3901

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Muhafaza ve Raf Ömrü Kullanım Önlemleri...

AESKUBLOT Vasculitis Pro Ref 4002

AESKULISA Protein S Ref 3902

KULLANIM KLAVUZU. ANA-HEp-2. Döküman.: AESKUSLIDES ANA-HEp-2 Rev.: 011: Sayfa: 1 / 17

AESKULISA ENA-6Pro Ref 3103

AESKULISA MPO Ref 3303

AESKULISA PR3 sensitive Ref 3302

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Muhafaza ve Raf Ömrü Kullanım Önlemleri...

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Saklama Koşulları ve Raf Ömrü... 2

AESKULISA 2-Glyco-Check Ref 3215

ANCA Saptanması ve Değerlendirme Kriterleri. Dr. Gözde Öngüt

AESKULISA dsdna-g Ref 3142

AESKULISA CCP Ref 3166

AESKUBLOT Liver Pro Ref 4004

AESKULISA a-tg Ref 3400

Laboratuvar sonuçları ve sorunlar: IFA. Dr. Derya Mutlu Akdeniz Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı

AESKULISA DANA-Pro Ref 3116

AESKULISA SS-B Ref 3110

AESKUBLOT Borrelia-G/-M Ref 4006 / 4007

AESKUBLOT Liver Pro Ref 4004

Serin Prothrombin-A REF 3227

AESKULISA Glia-A Ref 3501

RTA JEL / PZR Saflaştırma Kiti

Kullanım Kılavuzu Giriş

AESKUBLOT Gastro Pro Ref 4005

RTA DNA qpcr Probe Master Mix

AESKULISA Serine-Prothrombin-Check Ref 3223

MAIA Pesticide MultiTest

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Kullanım Kılavuzu Giriş

QMS TOPIRAMAT. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları TOPIRAMATE KONTROLLERİ

Brusellozda laboratuvar tanı yöntemleri

AESKULISA ttg-a New Generation Ref 3503

IFA TESTLERİNDE KALİTE VE GÜVENİLİRLİK. Dr. Derya Mutlu Akdeniz Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı

BRCA 1/2 DNA Analiz Paneli

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

attomol apo B-100 quicktype

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Mitokondrial DNA Analiz Paneli

KÖSTER ASOFALT-42 Asfalt Boyası

KULLANIM TALİMATLARI

Kullanım Kılavuzu Giriş

attomol HLA-B*27 Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir! 1.Giriş 2. Genel Açıklamalar

RTA Kandan Genomik DNA İzolasyon Kiti

İMMUNOLOJİK TANI YÖNTEMLERİ

RTA Bakteriden Genomik DNA İzolasyon Kiti

IMMUN FLORESAN TESTİ

Cevaplara bir kan damlasından ulaşabiliriz. TEST PROSEDÜRLERİ & SORUN GİDERME

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

IMMUN PEROKSİDAZ TESTİ (PEROXİDASE LİNKED ANTİBODY ASSAY-PLA)

AESKULISA DGP-A Ref 3513

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Kistik Fibrozis DNA Analiz Paneli

WEİL-FELİX TESTİ NEDİR NASIL YAPILIR? Weil Felix testi Riketsiyozların tanısında kullanılır.

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

(Alerjenik bileşim için ekteki uygun sertifikaya bakın)

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

M47 MICROGEN STREP MICROGEN

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

QMS LAMOTRIGINE. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları LAMOTRİGİN KONTROLLERİ

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

RTA Plazmid DNA İzolasyon Kiti

i laboratuarda bulunan otomatik i 500 i ml

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Analiz Süresi: C'de 48 saat

INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents

RICKETTSIA CONORII IFA SLIDE

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

RTA Mayadan Genomik DNA İzolasyon Kiti

RTA Dokudan ve Parafine-Gömülü Dokudan Genomik DNA İzolasyon Kiti

Petrifilm Maya ve Küf Sayım Plakalarında maya ve küf kolonilerini birbirinden ayırmak için aşağıda belirtilen genel özelliklere dikkat edin: MAYA

DİCLE ÜNİVERSİTESİ TIP FAKÜLTESİ DÖNEM I HÜCRE BİLİMLERİ 2 KOMİTESİ. İmmunohistokimya teknikleri ve Kullanım Alanları. Doç.Dr.

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Yasemin Budama Kılınç1, Rabia Çakır Koç1, Sevim Meşe2, Selim Badur2,3

KULLANMA TALİMATI. VITAMIN A-POS 250 I.U./g göz merhemi. Yalnızca göz kapağı içine uygulanır.

Bimes Biyomedikal Sistemler ve Sağlık Hizmetleri Tic. Ltd. Şti Çetin Emeç Bulvarı 6. Cad. 64/ A.Öveçler ANKARA Tel: (0 312) Fax: (0

Çiğ, işlenmiş ve karışık et, süt ve plazmada tür içeriğinin kalitatif tespiti için F.A.S.T. IMMUNOSTICK ET TÜRLERİ TARAMA KİTİ

Avian Flu Screening&Typing H5, H7

Bimes Biyomedikal Sistemler ve Sağlık Hizmetleri Tic. Ltd. Şti Çetin Emeç Bulvarı 6. Cad. 64/ A.Öveçler ANKARA Tel: (0 312) Fax: (0

QMS LAMOTRIGINE. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları LAMOTRİGİN KALİBRATÖRLERİ

STERINaF [18F] 250 MBq/ml enjeksiyonluk çözelti içeren flakon Damar içine uygulanır.

VAN HALK SAĞLIĞI LABORATUVAR A AİT SARF MALZEME TEKNİK ŞARTNAMESİ BİRİM DEĞERİ TALEP EDİLEN MİKTAR

attomol lactose intolerance C>T quicktype

AESKUBLOT ANA-17 Pro Ref 4001

KULLANMA TALİMATI. NETİRA göz damlası 5 ml Göze uygulanır. Etkin madde :

RTA Viral DNA İzolasyon Kiti Kullanma Kılavuzu Yayın Tarihi

Transkript:

Doc.: AESKUSLIDES Page: 1 / 12 KULLANIM TALİMATI Standard Ref. Açıklama Test Sayısı 54.100 Etanol (12 kuyucuklu) 120 54.100.Demo Etanol (12 kuyucuklu) Tanıtım 24 kiti 54.101 Formalin (12 kuyucuklu) 120 54.101.Demo Formalin (12 kuyucuklu) Tanıtım Kiti 24

Doc.: AESKUSLIDES Rev.: 001:2011-03-29 Page: 2 / 12 Ref. Description Tests 54.100 Ethanol (12 kuyucuklu) 120 54.100.Demo Ethanol (12 kuyucuklu) Tanıtım kiti 54.101 Formalin (12 Kuyucuklu) 120 54.101.Demo Formalin (12 Kuyucuklu) 24 Tanıtım Kiti 24 1. KULLANIM AMACI AESKUSLIDES insan serumunda anti-nötrofil sitoplazmik antikorlarının () indirect immünofloresans yöntemi ile saptanması için kullanılır. Bu test kiti Polianjitis (Wegener), mikroskobik Polianjitis ve Churg- Strauss sendromu ile granülomatozis gibi ileilişkili vaskülitlerin ayırıcı tanısında (AAV) için bir araçtır KLİNİK UYGULAMA (anti-nötrofil sitoplazmik otoantikorlar) nötrofil granülosit ve monosit farklı bileşenlerine karşı bir grup antikor olarak açıklanır.s tespiti için, etanol-sabit nötrofiller üzerindeki indirekt immunfloresan testi şimdiye kadar kullanılmış yöntemdir.diğer etanol sabit nötrofiller üzerindeki bir perinükleer deseni (P-s) oluştururken bazı s belirgin bir sitoplazmik floresans deseni (dolayısıyla C-s denir) oluşturur. Her iki desen antijenleri tam olarak, immunofloresan vaskülit için tatmin edici bir ayırıcı tanı olarak yeterli değildir, bu yüzden her immunfloresan testi (IFT) spesifik ELISA testleri ile doğrulanmalıdır Yapılan bazı çalışmalarda anti-nükleer antikorun(ana) oluşturduğu yapı, etanol ile sabitlenmiş s nötrofillerinin ayırt edilmesini zorlaştırır ve atipik bir floresan görüntü oluşturur. Doğru ayırımın yapılabilmesi için formalin ile tespit edilmiş nötrofiller kullanılmalıdır. Etanol ile sabitlenmiş nötrofiller boyanırken formalin ile tespit edilmiş nötrofil s substratı kullanıldığında P-/A- sitoplazmik desen gösterir ve patern negatif olur. Bu durumda Hep2 hücreleri ile ANA testi yapılmalıdır. Miyeloperoksidaz (MPO) büyük P- antijeni (MPO-) olarak saptanmıştır. Ancak Laktoferrin, Kathepsin, Lizozim ve Elastaz gibi diğer perinükleer hücresel bileşenler P- grubuna dahil edilmiştir. Ancak özel ve AAVs ile ilişkili olmayan non-vaskülit hastalıkların ayırıcı tanısında önemli bir rol oynar. Karşılaştırıldığında, Proteinase 3 C-s (PR3-). 1 nın hedef antijenidir. is the major target antigen of the Another antigen that may produce a C- is the BPI (bactericidal/permeability-increasing protein). 2 1 Gross WL, Csernok E, Helmchen U. Antineutrophil cytoplasmic autoantibodies, autoantigens, and systemic vasculitis. APMIS 1995; 103: 81-97. 2 Zhao MH, Jones SJ, Lockwood CM. Bactericidal/permeability-increasing protein (BPI) is an important antigen for anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies () in vasculitis. Clin Exp Immunol 1995; 99: 49-56.

Doc.: AESKUSLIDES Rev.: 001:2011-03-29 Page: 3 / 12 s Mikroskobik polyangiitis (60% MPO-, 30% PR3-) ve Churg-Strauss sendromu (30% MPO-, 30% PR3-). 3 hastalarında görülür. PR3 otoantikoru polyangiitis granülomatosizi (Wegener's) için spesifik serolojik markırdır. PR3-50% (localize hastalık) to 95% (genel hastalık) görülür. Antijen Karakterizasyonu: Ethanol veya formalin ile sabitlenmiş insan nötrofilleri(granülositler Çapraz Reaksiyonlar: Klinik uygulama bölümünde de açıklandığı gibi ANA pozitifliği P- /C- gibi fluoresans görüntü verebilir. Aksi taktirde çapraz reaksiyon mümkün değildir. 2. KİT PROSEDÜRÜ Genel manuelde bulunan bölüm 11 sayfa 10 daki test listesinden prosedürü inceleyin. kiti için izlenmesi gereken detaylar; Counter staining süresi: 30 ila 90 saniye Önerilen tarama titresi: 1:20 3. YORUM Anti-nötrofil sitoplasmik antikor () vasküler hikayesi bulunan hastaların değerlendirilmesinde büyük önem taşır. Hasta serumunda 1:20 dilüsyonda elde edilen fluoresan boyanma pozitifliği gösterir. 1:20 ile 1:80 dilüsyon arasında görülen zayıf pozitiflikler aynı yöntemle kontrol edilmelidir. Böyle bir durum oluştuğunda 3 hafta aralıklarla alınacak yeni örneklere benzer test yöntemi uygulanmalıdır. 1:20 25µL Serum + 475µL Örnek/Yıkama tamponu 1:40 20µL Serum + 780µL Örnek/Yıkama tamponu (sırasıyla 1:2 ve 1:20 -Dilüsyon) 1:80 10µL Serum + 790µL Örnek/Yıkama tamponu (sırasıyla 1:2 ve 1:40 -Dilüsyon) 1:160 10µL Serum + 1590µL Örnek/Yıkama tamponu (sırasıyla 1:2 ve 1:80 -Dilüsyon) a.s.o. Klasik C- paterni nükleer bölgede minimal granüler homojen sitoplasmik boyanma şeklinde görülür. P- paterni net şekilde perinükleer boyanma (ethanol ile fikse edilmiş nötrofil) veya C- sitoplasmik patern (formalin ile fikse edilmiş nötrofil) şeklinde olur. 3 Bosch X, Guilabert A, Font J. Antineutrophil cytoplasmic antibodies. Lancet 2006; 368: 404-418.

4. SONUÇ YORUMLAMA TABLOSU Date: Lot.: Fiksasyon Slide No.: Kullanıcı: etanol: formalin: Kuyu No. Kimlik Dilüsyon faktörü 1 F.I. nükleoplazma sitoplazma otoantikor Açıklama 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Doc.: AESKUSLIDES EMA Page: 5 / 12 5. STANDART KİT İÇERİĞİ 5.1 STANDART KİTLER SLIDES (Her kutuda 10 adet) KONJUGAT (4 ml Şişe) POZİTİF KONTROL (Her kutuda 1x 0.5ml şişe) Kit Ref. 54.100 54.101 Kit Açıklaması Ref. Kuyu sayıs ı Etanol (12 kuyu) Formalin (12 kuyu) s54.100 12 s54.101 12 Kaplı materyal Miktar Ref. Açıklama Ref. Açıklama Insan nötrofilleri (etanol ile sabitlenmiş) Insan nötrofilleri (formalin ile sabitlenmiş) 1x C54.100 1x C54.100 IgG (H+L Zincir) Mavi kapaklı şişe: açık mavi renkli solüsyon. İçerik: BSA, Fluoresan ile (FITC) işaretlenmiş Anti-human IgG (H+L Zincir) Mavi kapaklı şişe: açık mavi renkli solüsyon. İçerik: BSA, Fluoresan ile (FITC) işaretlenmiş Anti-human PC54.100 PC54.101 PC54.100 PC54.101 pattern kontrol C- Kırmızı kapaklı: renksiz solüsyon. İçerik: İnsan serumu (dilue), sodium azide <0.1% (kaplama) pattern kontrol C- Kırmızı kapaklı: renksiz solüsyon. İçerik: İnsan serumu (dilue), sodium azide <0.1% (kaplama) pattern kontrol P- Kırmızı kapaklı: renksiz solüsyon. İçerik: İnsan serumu (dilue), sodium azide <0.1% (kaplama) pattern kontrol P- Kırmızı kapaklı: renksiz solüsyon. İçerik: İnsan serumu (dilue), sodium azide <0.1% (kaplama)) 5.2 DEMO KITS xxx.demo kit içerisinde tüm komponentler aynıdır. Yanlızca 10 slayt yerine 2 slayt bulunur Örnek olarak ref 54.100.Demo = ref 54.100 sadece 2 slayt içerir.

Doc.: AESKUSLIDES Page: 6 / 12 AESKUSLIDES ORTAK MANUEL Aşağıda yazılı bulunan yönergeler tüm AESKUSLIDES ürünleri için geneldir. Lütfen parametreye spesifik bilgiler için her kitin içerisindeki orjinal talimatları okuyun. GENEL KİT İÇERİĞİ a. Genel Reaktifler Aşağıdaki reaktifler AESKUSLIDES ürünlerinde ortak olarak bulunur. Ref. Reaktif Sayı / Miktar NCIFA Negatif Kontrol 1x 0.5ml EBIFA Evans Blue 0.2% 1x 3ml MMIFA Mounting Medium 1x 12ml Açıklama Yeşil kapak: Renksiz solüsyon İçerik: İnsan serumu (dilue), sodium azide <0.1% (kaplama) Kapak rengi: Mavi renksiz solüsyon İçerik: PBS, Evans Blue. Dilue Evans Blue 0.2% 1:3000 in 1x SWBIFA HELMED cihazı için kullanımı doğrulanmıştır Kapak rengi: renksiz solüsyon İçerik: PBS, Gliserin. Kullanıma hazır EVET HAYIR EVET SWBIFA Örnek/Yıkama tamponu (10x) 1x 100ml Konsantre tampon distile su ile dilue edilmelidir (e.g.: 100 ml + 900 ml). İçerik: BSA PBS, sodium azide (kaplama). HAYIR b. Ayrıca sağlanması gereken malzemeler 1. Distile su 2. Örnek dilüsyonu için test tüpleri 3. Mezur 4. Volumetrik pipet 5. Zaman sayacı 6. FITC sistemi ile çalışan fluoresan mikroskop, (490nm excitation filtresi, 510nm bariyer filtresi) 7. İnkübasyon kabı 8. Boyama kabı 9. Pipet ucu 10. Lamel (24x60 mm) Kullanilacak malzemenin doğru, sağlam olduğundan emin olun

Doc.: AESKUSLIDES Page: 7 / 12 8. SAKLAMA VE RAF ÖMRÜ Tüm reaktifleri 2 C-8 C/35-46 F derecede saklayın, yoğun ışıktan koruyun. Tüm reaktifler etiket üzerinde yazılı olan son kullanma tarihine kadar tüketilmelidir.son kullanma tarihinde sonar kullanmayın. Tüm reaktif ve slaytlar 2-8 C/35-46 F derecede, orjinal ambalajlarında saklanmalıdır.ilk defa sulandırılan reaktifler 2-8 C/35-46 F derecede 1 hafta saklanabilir. 9. KULLANIM ÖNLEMLERİ a. Sağlık tehdidi ile ilgili veriler BU ÜRÜNLER SADECE TANI İÇİN KULLANILIR. Bu ürünler sadece yetkili personel tarafından tanı için kullanılmalıdır. Kullanım sırasında,toksik yada tehlikeli etkilere karşı maksimum güvenlik tedbirleri uygulanarak kullanılmalıdır. Öneriler ve Önlemler Bu kit potansiyel tehlikeli material içerir. Gözde ve ciltte tahrişe sebep olabileceğinden eldiven giyilerek, göz ve cilt temasından sakınılarak kullanılmalıdır. Kit içerisinde kullanılan materyallerin (kontrol vs.),hbsag,hepatit C ve HIV testlerinin negative olduğu geçerli test metodları ile test edilmiştir. Yinede kullanılan materyallerin viral antijenleri içermediği garanti edilemez. Bu kit ulusal ihtiyaçlara gore hayvansal kaynaklı materyaller içerir.(bsa,imminglobulin) Genel kullanım talimatları 1. Ağız yolu ile pipetleme yapmayın. Kit uygulaması sırasında sigara içmeyin, yiyecek içecek tüketmeyin. 2. Farklı lotlara ait kit komponentlerini birbirine karıştırmayın. Bunun yapılması farklı test sonuçları çıkmasına sebep olabilir.. 3. Bakteri kaynaklı bulaşmalara karşı kullandıktan sonar reaktif kapalklarını mutlaka kapatın. 4. Daima tüm reaktifleri yeni steril pipet uçları kullanarak pipetleyin. 5. Kit komponentlerini asla 37 C / 98,6 F derecenin üzerinde saklamayın 6. Çalışma sırasında slaytlar üzerinde bulunan çalışma kuyularının kurumasına izin vermeyin. 7. Slaytları asla dondurmayın. Her laboratuvar kendisine ait control grupları ve çalışma yçntemlerini oluşturmalıdır. Kesinleşmiş klinik tanı yanlızca test sonucuna gore yapılmamalı, diğer klinik bulgular ve test sonuçları göz önünde bulundurularak uzman hekim tarafından değerlendirilmelidir. Değerlendirme kriterlerine uymayan bir test sonucu oluştuğunda prosedürü içeren tüm çalışma akışı ve koşulları gözden geçirilmelidir.son kullanma tarihi, pipetleme, yıkama, mikroskobik inceleme,saklama koşulları gibi adımların doğru uygulandığından emin olunuz. Uyumsuz sonuç durumlarında mutlaka bölgesel satıcı ile bağlantıya geçiniz 10. ÖRNEKLERİN TOPLANMASI,KULLANILMASI VE SAKLANMASI Örneklerin hazırlanması:taze serum örneği toplanması gerekmektedir. Ulusal kurallar takip edilerek örnekler toplanmalıdır.kan örnekleri aseptik koşullarda toplanmalıdır. Lipemik,ikterik,hemolizli yada bakteriyel kontaminasyon olan örneklerin kullanılmasından kaçınılmalıdır. Serum örnekleri içerisinde partiküllerin kalmasını engellemek için kullanılmadan önce

Doc.: AESKUSLIDES Page: 8 / 12 düşük hızda /<1000 x g) santrifüj edilmelidir.. Kan örnekleri temiz,kuru boş tüpler içerisine toplanmalıdır. Serumlar ayrıldıktan sonar, eğer ilk 8 saat içerisinde kullanılmalı, eğer hemen kullanılmayacaksa ağzı kapalı olarak 2-8 C/35-46 F derecede 48 saat, -20 C/-4 F derecede daha uzun sure saklanabilir. Çözülmüş örnekler tekrar dondurulmamalıdır. TEST PROSEDÜRÜ a. Ön Hazırlık Tüm kit komponentleri oda sıcaklığına (20-26 C / 64-78,8 F) getirilmeli, uygun performansın sağlanması için uygun koşullarda iyice karıştırılmalıdır. 1. Örnek/Yıkama Tamponunun hazırlanması: Distile sui le 1:10 oranında sulandırın 2. Örneklerin sulandırılması: Hasta örneklerini 1x sample tamponu ile sulandırın(kit prosedüründe belirtilen tarama testi oranına göre). Bu oran HEp-2, ndna, rlks, EMA, vs. kit türlerine gore değişiklik gösterir. 3. Kontroller kullanıma hazırdır. 4. Protokolün hazırlanmasıl: Gerekli bilgi kartı Kit prosedürü içerisinde mevcuttur.

Doc.: AESKUSLIDES Page: 9 / 12 b. Test Prosedürü No. Adımların Açıklaması 1. Gerekli sayıda slaytı paketinden çıkararak numaralandırın.kuyulara dokunmayın.slaytların kurumamasına özen gösterin. 2. 3. 4. 1. İnkübasyon: Uygun miktarda dilüe edilmiş hasta serumu ve kullanıma hazır kontrolü kuyulara pipetleyin.pipet ucunun slaytların yüzeyine temas etmemesine özen gösterin. Pipetlenen materyalin, kuyuların yüzeyini tam kapladığından emin olun. Kaliteli bir test sonucu için bu çok önemlidir. Kuyular arasında taşmalar olmamasına dikkat edin. Oda sıcaklığında inkübasyon tepsisinde 30 dakika inkübe edin. Yıkama: İnkübasyon sonrasında Örnek/yıkama tamponu kullanarak slaytları pipet yardımı ile durulayın.örnek/yıkama tamponunun direkt kuyulara akmasına engel olun. NOT: Kuyular arasında bulaşmayı engellemek için durulama sırasında tamponu akıtmayın Yıkama tamponu kullanarak Yıkama kabı içerisinde 15 dakika yıkayın. İyi sonuç edilmesi için bu aşamanın 3x5 dakikalık periyotlarda, her periyot arasında yıkama tamponu değiştirilerek yapılması önerilir. Yıkama tamponu içerisinde boyanmanın bozulmasını engellemek için gerektiğinden daha uzun süre tutmayın ve yıkama kabı içerisinden dikkatli çıkarın. NOT: Bozuk bir yüzey oluşmaması için yıkama sonrası kurumaya engel olunması gerekir. Fluoresan antikor reaktifi uygulanmadan önce birkaç saniye bekleyin. Bu aşamada yüzeye dokunmayın yada yüeyi kurutmayın. 2.İnkübasyon:Yıkama sonrasında slaytları inkübasyon tepsisine yerleştirin. FITC_konjugatı uygun miktarda tüm yüzeyi kaplayacak şekilde pipet ucu yüzeye temas etmeden pipetleyin. Slaytları karanlık bir ortamda 30 dakika boyunca oda ısısnda inkübe edin. 5. 6. 7. Yıkama: İnkübasyon sonrasında Örnek/yıkama tamponu kullanarak slaytları pipet yardımı ile durulayın.örnek/yıkama tamponunun direkt kuyulara akmasına engel olun. Yıkama tamponu kullanarak Yıkama kabı içerisinde 10 dakika yıkayın. İyi sonuç edilmesi için bu aşamanın 2x5 dakikalık periyotlarda, her periyot arasında yıkama tamponu değiştirilerek yapılması önerilir Opsiyonel counterstain adımı: Sulandırılmış counterstain (Evans Blue) 1:3000 oranında Örnek/yıkama tamponu ile dilüe edilerek uygulanır ve inkübe edilir. Uygulama için kit prosedürünü inceleyin.evans blue spesifik olmayan background oluşmasını önler. İnkübasyon sonrasında yıkama tamponu kullanarak slaytları yıkayın.yıkama sonrasında slaytların kurumamasına dikkat edin. Mounting Medium: Uygun miktarda reaktifi kuyunun ortasına, pipet ucu temas etmeyecek şekilde pipetleyin. Tüm yüzeyi kaplamasına ve hava kabarcığı kalmamasına dikkat edin. 8. Okuma: Slaytları fluoresans mikroskopta 400-800 x büyütme ile okuyun (490 nm excitation(uyarma) filtresi, 510 nm bariyer filtresi).

Doc.: AESKUSLIDES Page: 10 / 12 c. Çalışma akışı 1. Sulandırılmış serumları ve kontrolleri pipetleyin. 2. Yıkama tepsisine az miktarda distile su koyun ve slaytları yerleştirin. 3. Slaytları oda ısısında (20-26 C/64-78,8 F) 30 dakika inkübe edin. 4. Slaytları inkübasyon tepsisinden alın ve yıkayın.yıkamayı 3x5 dakikalık periyotta yapın. 5. Slaytları tekrar inkübasyon tepsisine yerleştirin ve üzerleini tam kaplayacak şekilde FITC-konjugat ekleyin. 6. Slaytları oda ısısında (20-26 C/64-78,8 F) 30 dakika karanlıkta inkübe edin. 7. Slaytları inkübasyon tepsisinden alın ve yıkayın.yıkamayı 2x5 dakikalık periyotta yapın. 8. Counterstain (Evans Blue) yu 1:3000 dilüsyonda sulandırarak kuyulara pipetleyin. 9. İnkübe edin (*Kit prosedüründe belirtildiği şekilde uygulanmalıdır.). 10. İnkübasyon sonrasında Yıkama tamponu kullanarak yıkayın 11. Kuyuların ortasına mounting medium ekleyin. 12.Slaytları fluoresans mikroskopta 400-800 x büyütme ile okuyun (490 nm excitation(uyarma) filtresi, 510 nm bariyer filtresi).

Doc.: AESKUSLIDES Page: 11 / 12 11. SORUNLAR HATA OLASI NEDENLER ÇÖZÜM Düşük Hücre Yoğunluğu Hücreler deiyonize sui le uzun süreli temas ederek parçalanmıştır Yıkama tamponu direkt kuyuların üzerine dökülmüştür Proteolitik enzimler substratı parçalamıştır. Yıkama prosedürünü gözden geçirin Serumu inactive edin Dengesiz Fluoresans Diffüz görüntü Serum kuyuda kurumuş, fluoresan kenarlarda kuvvetli görüntü veriyor Serum kuyunun tüm yüzeyini kaplamamış Yanyana kuyularda çapraz reaksiyon var Yanlış kalem tipi ile slayt üzerinde işaretleme yapılmış Mikroskop ayarı yanlış Slide ambalajsız olarak buzdolabında bekletilmiş Fluoresan mikroskop kirli.mercekte çzilmeler olabilir Konjugat ve slaytlar dondurulmuş ve tekrar çözülmüş Her zaman nemli ortamda inkübe edin Test materyalini kuyunun tüm yüzeyini kapsayacak şekilde uygulayın Avoid running between the wells in the first incubation Balmumu içermeyen standart kalem kullanın UV lamba ayarlarını control edin Slide buzdolabında orjinal ambalajı ile veya paraffin balmumu ile kaplanarak saklanmalı Mikroskobu, talimatlarda belirtildiği şekilde temizleyin Konjugat ve slaytlar 2 C-8 C/35-46 F de saklanmalıdır. Fluoresan görüntü çok az yada hiç yok Kontrol örnekleri dilüe edilmiş Talimatları control edinkullanıma hazır control kullanın Konjugat veya örnekte bakteriyel kontaminasyon var Mikroskop uygun ayarda değil - Yıkama tamponu ph sı çok düşük (ph değeri 7.4 ± 0.2 olmalıdır) Uygunluğu control edin - FITC konjugat ışıkta bekletilmiş - Konjugat ışıktan korunarak saklanmalıdır Arka planda olumsuz Fluoresans var - Yanlış yıkama - Slide kurumuş - Lipemik yada hemolizli örnek - Mikroskop hatası - Yıkama talimatlarını control edin - Slaytın kurumasına engel olun - Taze örnek kullanın - Doğru filtre / objektiv kullanıldığını kontrol edin

Doc.: AESKUSLIDES Page: 12 / 12 XX - Diagnosi in vitro - For in vitro diagnostic use - Pour diagnostic in vitro - Para uso diagnóstico in vitro - Ιn Vitro Diagnostikum - In Vitro Διαγνωστικό μέσο - Para uso Diagnóstico in vitro Numero d ordine Cataloge number Référence Catalogue Numéro de catálogo Bestellnummer Αριθμός παραγγελίας Número de catálogo Descrizione lotto Lot Lot Lote Chargen Bezeichnung Χαρακτηρισμός παρτίδας Lote Conformità europea EC Declaration of Conformity Déclaration CE de Conformité Declaración CE de Conformidad Europäische Konformität Ευρωπαϊκή συμφωνία Déclaracão CE de Conformidade Rispettare le istruzioni per l uso See instructions for use Voir les instructions d utilisation Ver las instrucciones de uso Gebrauchsanweisung beachten Λάβετε υπόψη τις οδηγίες χρήσης Ver as instrucões de uso Da utilizzarsi entro Use by Utilise avant le Utilizar antes de Verwendbar bis Χρήση μέχρι Utilizar antes de Conservare a 2-8 C Store at 2-8 C (35-46 F) Conserver à 2-8 C Conservar a 2-8 C Lagerung bei 2-8 C Φυλάσσεται στους 2-8 C Conservar entre 2-8 C Prodotto da Manufactured by Fabriqué par Fabricado por Hergestellt von Κατασκευάζεται από Fabricado por Colorante Blue-Evans Evans-Blue Dye coloration au Bleu Evans Colorante Azul de Evans Evans-Blue Färbelösung Evans Blue Evans Blue Controllo positivo Positive Control Contrôle Positif Control Positivo Positiv Kontrolle Θετικός ορός ελέγχου Controlo positivo Controllo negativo Negative Control Contrôle Négatif Control Negativo Negativ Kontrolle Αρνητικός ορός ελέγχου Controlo negativo Mezzi di montaggio Mounting media milieu de montage Medio de montaje Mounting Medium Μέσο μονιμοποίησης Meio de montagem Coniugato Conjugate Conjugé Conjugado Konjugat Σύζευγμα Conjugado Vetrino per microscopio Microscope slide lame de microscope Portaobjetos Objektträger Αντικειμενοφόρο πλακίδιο Lâmina Tampone di lavaggio/campione Sample/Wash Buffer Tampon de Lavage/Echantillons Solucão de lavagem/muestras Wasch/Probenpuffer Ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης/δειγμάτων Solución de lavado/muestras XX determinazioni XX tests XX tests XX pruebas XX Bestimmungen XX προσδιορισμοί XX Testes