RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae IgA, IgG, IgM Makale no:k4311 (IgA) K4321 (IgG) K4331 (IgM) R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D-64297 Darmstadt, Almanya Telefon: +49 61 51 81 02-0 / Fax: +49 61 51 81 02-20
1. Kullanım amacı İn vitro diagnostik kullanım içindir. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae testleri insan serumundaki Mycoplasma (M.) pneumoniae karşı IgA, IgG veya IgM antikorlarının yarı-kantitatif tespiti için enzim immunoassaylerdir (EIA). Bu testler Mycoplasma pneumoniae ile enfeksiyondan şüphelenildiğinde veya bağışıklık durumunu netleştirmek için onay amaçlı kullanılmalıdır. 2. Özet ve testin açıklaması M. pneumoniae ile enfeksiyon sonrası, spesifik antikorlar bağışıklık sisteminden yanıtın sonucu olarak patojene karşı oluşturulur. İmmunolojik metodlar kullanılarak serumda antikorları tespit etmek mümkündür. Kullanılan test yöntemi ve patojen-spesifik antijenin seçimi testin anlamlılığı üzerinde öneme sahiptir. Enzim immunoassayde her bir immunoglobulin sınıfını arasında ayırım yapmak mümkün olduğundan başka serolojik metodlara dayananlara göre hastanın immunolojik durumu hakkında daha kesin ifadeler söylenebilir (hemaglutinasyon inhibisyon testi veya kompleman fiksasyon reaksiyon testi). 3. Test prensibi Saflaştırılmış antijenler mikrokuyu plağa kaplanır. Hasta örneklerindeki antikorlar antijenlere bağlanır ve enzim-etiketli anti-insan antikorları (konjugat) kullanılarak ikinci inkübasyon aşaması esnasında tespit edilir. Enzim mavi son ürün için renksiz substrata (H2O2/TMB) dönüşür. Bu enzim reaksiyonu sülfürik asit eklenmesiyle durdurulur ve aynı zamanda karışımın rengi maviden sarıya değişir. Son ölçüm referans dalgaboyu 620 nm kullanılarak bir fotometrede 450 nm de yapılır. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 2
4. Sağlanan reaktifler Tablo 1: Paket içeriği (paket içinde 96 tespit için yeterli reaktif vardır) K4311 IgA K4321 IgG K4331 IgM Plak 96 tespit Mikrokuyu plak; strip tutucuda 12 mikrokuyu strip (bölünebilen); M. pneumoniae antijeniyle kaplı SeroPP 110 ml Örnek buffer, kullanıma hazır; fosfat-buffered NaCl solüsyonu; sarı renkli; SeroWP 100 ml Yıkama buffer, 10-kat konsantre; tris-buffered NaCl solüsyonu; 0.2% bronidox-l ve 0.5% tween 20 içerir Kontrol IgA + Mavi kapak 2.5 ml Standart kontrol IgA, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; mavi renkli; Kontrol IgG + Yeşil kapak 2.5 ml Standart kontrol IgG, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; yeşil renkli; Kontrol IgM + Kırmızı kapak 2.5 ml Standart kontrol IgM, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; kırmızı renkli; Kontrol IgA Renksiz kapak 1.2 ml Negatif kontrol IgA, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; Kontrol IgG Renksiz kapak 1.2 ml Negatif kontrol IgG, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; Kontrol IgM Renksiz kapak 1.2 ml Negatif kontrol IgM, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu; Kontrol IgA A Mavi kapak Kontrol IgA B Mavi kapak 1.2 ml Kontrol A IgA, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu 1.2 ml Kontrol B IgA, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu Kontrol IgG A Yeşil kapak Kontrol IgG B Yeşil kapak 1.2 ml Kontrol A IgG, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu 1.2 ml Kontrol B IgG, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu Kontrol IgM A Kırmızı kapak Kontrol IgM B Kırmızı kapak 1.2 ml Kontrol A IgM, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu 1.2 ml Kontrol B IgM, kullanıma hazır; seyreltilmiş insan serumu RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 3
SeroA LD Mavi kapak 12 ml Anti-insan IgA konjugat (keçi);kullanıma hazır; stabilize protein solüsyonunda peroksidaz konjuge antikorlar; 10 ppm proclin, 0.01% methylisothiazolinon, 0.01% bromonitrodioxan içerir, SeroG HD Yeşil kapak 12 ml Anti-insan IgG konjugat (tavşan); kullanıma hazır; stabilize protein solüsyonunda peroksidaz konjuge antikorlar; 10 ppm proclin, 0.01% methylisothiazolinon, 0.01% bromonitrodioxan içerir SeroM HD Kırmızı kapak 12 ml Anti-insan IgM konjugat (tavşan); kullanıma hazır; stabilize protein solüsyonunda peroksidaz konjuge antikorlar; 10 ppm proclin, 0.01% methylisothiazolinon, 0.01% bromonitrodioxan içerir SeroSC 12 ml Substrat; H2O2/tetrametilbenzidin; kullanıma hazır SeroStop 12 ml Durdurma reaktifi 0.5 M sülfürik asit; kullanıma hazır 5. Saklama talimatları Bu test kiti 2-8 o C de saklanmalıdır ve etiketteki son kullanma tarihine kadar kullanılabilir. Seyreltilmiş yıkama buffer 2-8 o C de saklandığında maksimum 4 hafta veya oda sıcaklığında saklandığında (20-25 C) 1 hafta kullanılabilir. Son kullanma tarihinden sonra kalite garantisi artık geçerli değildir. Mikrokuyu plak içeren alüminyum çanta klip contası parçalanmayacak şekilde açılmalıdır. Herhangi mikrokuyu stribinin hemen alüminyum çanta içine geri koyulması ve 2 8 C de saklanması gerekli değildir. Reaktiflerin kontamine olmasına izin verilmemelidir ve renksiz substrat doğrudan ışığa maruz kalmaktan korunmalıdır. 6. Ek olarak gerekli reaktifler ve gerekli ekipman 6.1. Reaktifler distile veya deiyonize su 6.2. Aksesuarlar 37 C de inkübatör Test tüpleri Vorteks karıştırıcı 10-100 µl ve 100-1000 µl kapasite için mikropipetler Ölçüm silindiri (1000 ml) Durdurma saati RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 4
* Mikroplak yıkayıcı veya çok kanallı pipet * Mikroplak okuyucu (450 nm, referans dalgaboyu 620 nm) * Filtre kağıdı (laboratuvar havlusu) * 0.5 % sodyum hipoklorit solüsyonu içeren atık konteyneri 7. Kullanıcılar için önlemler Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir. Bu test sadece eğitimli laboratuvar personeli tarafından yapılmalıdır. Medikal laboratuvarlardaki çalışma kuralları takip edilmelidir ve testi yapmak için talimatlara sıkıca bağlı kalınmalıdır. Örnekler veya reaktifler için ağızla pipetleme yapılmamalıdır ve aralanmış cilt veya mukozal membranlarla temas önlenmelidir. Örnekleri kullanırken tek kullanımlık eldivenler kullanın ve test bittiğinde ellerinizi yıkayın. Örnekler veya test reaktiflerinin kullanıldığı alanlarda sigara içmeyin veya birşey yiyip içmeyin. Kit içindeki kontrol serumları (standart kontrol ve negatif kontrol, kontrol A ve kontrol B) HbsAg yanısıra HIV- ve HCV-Ab için negatif sonuçlarla test edilmiştir. Yine de onlar ve temas ettikleri diğer tüm materyaller hasta örnekleri gibi aynı şekilde olası bulaşıcı gibi işlenmelidirler ve ilgili ulusal güvenlik düzenlemeleri ile uyumlu olarak kullanılmalıdırlar. Standart kontrol ve negatif kontrol, kontrol A ve kontrol B ve örnek buffer koruyucu olarak 0.01 % thimerosal içerir. Bu maddenin cilt veya mukoz membranı ile teması önlenmelidir. Yıkama buffer koruyucu olarak 0.2 % Bronidox-L içerir. Bu maddenin cilt veya mukoz membranı ile teması önlenmelidir. H2O2 (substrat) yanıklara neden olabilir. Dikkatli kullanın. Durdurma reaktifi 0.5 M sülfürik asit içerir. Cilt ve giysilerle temasından kaçının. Cilt durdurma reaktifiyle kontamine olursa su ile durulayın. Olası bulaşıcı maddelerle temas eden tüm reaktifler ve materyaller uygun dezenfektanlarla işlenmeli veya en az 1 saat 121 C de otoklavlanmalıdır. DİKKAT: Zehirli gazların oluşumunu önlemek için durdurma reaktifi içeren herhangi sıvı atık hipoklorit solüsyonu eklenmeden önce nötralize edilmelidir. 8. Numune toplama ve saklama Bu test insan serum örneklerini test etmek için geliştirildi. Kan toplama sonrası serum hemolizi önlemek için mümkün olduğunca en kısa sürede kan pıhtılarından ayrılmalıdır. Örnekler test edilene kadar soğuk veya dondurulmuş saklanmalıdır. Örneklerin tekrar tekrar dondurulup çözdürülmesi ve mikrobiyel kontaminasyonu her ne pahasına olursa olsun önlenmelidir. Isı ile RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 5
inaktive edilmiş, lipemik, hemolitik, ikterik veya bulanık örneklerin kullanılması yanlış sonuçlara yol açabilir. Tablo 2: Örnek saklama Seyreltilmemiş serum Seyreltilmiş serum 2 8 C -20 C 2 8 C 1 hafta >1 hafta 7 saat 9. Test prosedürü 9.1. Genel bilgi Tüm reaktifler ve mikrokuyu plak kullanımdan önce oda sıcaklığına (20-25 C) getirilmelidir. Mikrokuyu stripler oda sıcaklığına erişene kadar alüminyum çantadan çıkartılmamalıdır. Bu reaktifler kullanımdan hemen önce iyice karıştırılmalıdır. Kullanımdan sonra kit hemen 2 ve 8 C arasında geri saklamaya konmalıdır. Sadece test prosedürü için gereken miktarda reaktif hacmi alın. Reaktif kontaminasyonu oluşabileceğinden reaktifleri şişelere geri dökmeyin. Mikrokuyu stripler birden fazla kullanılamaz. Bu reaktifler ve mikrokuyu stripler paketleme hasarlıysa veya şişelerde sızıntı varsa kullanılmamalıdır. Kitteki bazı reaktifler teste özgü değildir. Sero etiketli reaktifler (SeroPP gibi) ayrıca ilgili reaktiflerle başka RIDASCREEN Sero EIA ile kullanılabilir. Kontrol serumları lot ile ilişkilidir. Farklı lot numaralarına sahip kitlerden kontrol serumları değiştirilemez. RIDASCREEN Sero ELISA kontrolleri A ve B ilgili RIDASCREEN Sero ELISA test kitlerine ek bileşenler olarak sağlanır. Ek kalite kontrol amaçlı bu kontroller isteğe bağlı kullanılabilir. Farklı antikor konsantrasyonlarına sahip insan kontrol serumu içerirler. 9.2. Yıkama buffer hazırlama 1 kısım yıkama buffer konsantre SeroWP 9 kısım distile suyla karıştırılır. Bunu yapmak için 1000 ml ölçüm silindirinde 100 ml konsantre koyun ve distile suyla 1000 ml için solüsyon yapın. Konsantre içindeki herhangi kristal 37 o C de su banyosunda ısıtılarak önceden çözülmelidir. Seyreltilmiş yıkama buffer 2 8 C de saklandığında maksimum 4 hafta veya oda sıcaklığında saklanırsa (20 25 C) 1 hafta için kullanılabilir. 9.3. Örnekleri hazırlama Teste başlamadan önce örnek buffer SeroPP ile test edilecek serum örneklerini seyreltin 1:100 RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 6
ör. 10 µl Serum + 990 µl SeroPP IgM tespitleri için testlerden önce serumların IgG absorpsiyonuna tutulması önerilir (ör. RIDA RF-Absorbanlarıyla, Makale no. Z0202). Bundan sonra örnek buffer ile testte gerekli dilüsyon için ayarlanmaları gerekir. Not: Negatif kontrol ve standart kontrol, kontrol A ve kontrol B kullanıma hazırdır ve SEYRELTİLMEMELİDİR veya ABSORBE EDİLMEMELİDİR. 9.4. İlk inkübasyon Çerçeve içine yeterli sayıda kuyu yerleştirdikten sonra, 100 µl seyreltilmiş serumları ve 100 µl kullanıma hazır kontrolü Pozisyon A1 (reaktif blank değeri) boş bırakarak ilgili kuyuların her birine pipetleyin. Negatif kontrol Kontrol IgA -, Kontrol IgG - veya Kontrol IgM - bir kez ve standart kontrol Kontrol IgA +, Kontrol IgG + veya Kontrol IgM + iki kez ekleyin. Kontrol A ve kontrol B birkez ekleyin. Plağı kapatın ve inkübatörde 30 dakika 37 C de inkübe edin. Bu süreç boyunca kuyuların dipleri ısı iletken materyallerle temas etmemelidir. Mikrokuyu plak inkübasyon boyunca kapalı olmalıdır. Tespite karşılık gelen kontroller (IgA, IgG veya IgM) kullanılmalıdır. A1 Reaktif blank değeri B1 Negatif kontrol C1 Standart kontrol D1 Standart kontrol E1 Kontrol A F1 Kontrol B G1, H1 Hasta serumu 1 ve 2 vb. Not: Mikrokuyu plak inkübasyon esnasında 37 C ye ulaşan soğuk inkübasyon konteynerine konulmamalıdır. Konteynerin sıcaklığı önceden 37 C ye ayarlanmış olmalıdır. 9.5. Yıkama Kuyular dezenfeksiyon için hipoklorit solüsyonu içeren atık konteynerine boşaltılmalıdır. Sonra kalan sıvıyı uzaklaştırmak için emici kağıda karşı başaşağı plağa hafifçe vurun. Bundan sonra her defasında 300 µl yıkama buffer kullanarak 4 kez plağı yıkayın. Her yıkamadan sonra emici kağıdın kullanılmamış kısmında onlara hafifçe vurarak kuyuların tamamen boşaltıldığından emin olun. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 7
Mikroplak yıkayıcı kullanıldığında, makinenin kullanılan plağın tipine doğru şekilde uyduğundan emin olun. Yıkama sonrası, herhangi kalan sıvıyı uzaklaştırmak için temiz emici kağıda karşı başaşağı plağa hafifçe vurun. 9.6. İkinci inkübasyon İlgili kuyulara 100 µl konjugat SeroA LD, SeroG HD veya SeroM HD ekleyin (A1 dahil). Sonra, plağı kapatın ve inkübatörde 30 dakika 37 C de inkübe edin (Kısım 9.4 bakın). 9.7. Yıkama Kısım 9.5 uygun olarak 4 kez yıkayın. 9.8. Üçüncü inkübasyon Her kuyuya 100 µl substrat SeroSC ekleyin. Sonra plağı kapatın ve nem odası/inkübatörde 30 dakika 37 C de inkübe edin. Bundan sonra her kuyuya 100 µl durdurma reaktifi SeroStop ekleyerek reaksiyonu durdurun. Dikkatlice karıştırdıktan sonra (plağın kenarına hafifçe vurarak), plak fotometrede 450 nm de (referans dalgaboyu 620 nm) absorbans ölçün. Sıfır için reaktif blank değerini (Pozisyon A1) kalibre edin. Not: Mikrokuyu plağın alt kısmı ölçüm yapılmadan önce yoğunlaşma suyunu uzaklaştırmak için silinmelidir. 10. Kalite kontrol ve instabilite veya bozulma belirtileri Kalite kontrol amaçları için standart kontrol (iki kez) ve negatif kontrol her test yapıldığında kullanılmalıdır. Test, 450/620 nm de standart kontrol için ortalama absorbans ekteki veri sayfasında belirtilen aralığın içindeyse doğru yapılmıştır. İki ayrı ölçüm %20 den fazla ortalamadan saparsa test tekrarlanmalıdır. 450/620 nm de negatif kontrol için absorbans < 0.3 olmalıdır. RIDASCREEN Sero ELISA kontrolleri A ve B isteğe bağlı olarak kullanılabilen kalite kontrol amaçlı ek kontrollerdir. Hedef değerler ekteki, lot-spesifik kalite güvence sertifikasında belirtilir. Elde edilen değerler (U/ml, IU/ml veya miu/ml) akredite laboratuvarlarda kalite güvencesi için referans değerler olarak önerilir. Değerler olması gerekenden farklıysa, reaktif bulanıksa veya substrat kuyulara eklenmeden önce maviye dönmüşse bu reaktiflerin son kullanma tarihinin geçtiğini gösterebilir. Öngörülen değerler karşılanmazsa aşağıdaki noktalar testi tekrarlamadan önce kontrol edilmelidir: RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 8
* Kullanılan reaktiflerin son kullanma tarihi * Kullanılmakta olan ekipmanın işlevselliği (ör. kalibrasyon) * Doğru test prosedürü * Kontaminasyon veya sızıntılar açısından kit bileşenlerinin görsel kontrolü - maviye dönen substrat solüsyonu kullanılmamalıdır. Testi tekrarlamadan sonra şartlar hala yerine getirilmediyse lütfen yerel R-Biopharm distribütörünüzle temasa geçin. 11. Değerlendirme ve yorumlama Bu test üç farklı yöntem kullanılarak değerlendirilebilir: 1. Kit içinde verilen standart eğri kullanılarak 2. Değerler tablosu kullanılarak (kit içinde verilen veri kağıdında bakın) 3. 4-parametre metodu veya metodu kullanılarak matematiksel olarak Reaktif blank değeri değerlendirme öncesi her ölçülen değerden çıkarılmalıdır. 11.1 Kit içinde verilen standart eğri kullanılarak değerlendirme Standart eğri kullanarak değerlendirme yapmak için, bir günden sonrakine oluşabilen herhangi dalgalanmaları dikkate almak ilk standart kontrol için ortalama değer için bir düzeltme yapılmalıdır. Düzeltme faktörü F standart kontrol ve onun hedef değeri için mevcut ölçülen ortalama değerden hesaplanır. Lota bağlı olan bu hedef değer ekteki veri kağıdına kaydedilir. F = standard control target value standard control measured average value Örnekler için tüm OD değerleri faktör F ile çarpılmalıdır. İlgili U/ml değerleri sonra düzeltilen değerler kullanılarak standart eğri okunur. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 9
11.2. Değerler tablosu kullanılarak değerlendirme U/ml Standart kontrol için değerler aralığı 0.84-0.88 - < 23.0 < 0.30? 23.0-31.0 0.30-0.38 31.1-70.0 0.39-0.69 70.1-120.0 0.70-0.98 + 120.1-200.0 0.99-1.32 200.1-400.0 1.33-1.86 400.1-1000.0 1.87-2.69 > 1000.0 > 2.69 Şekil 1: IgG tespit örneği (lot-spesifik veri kağıdından ekstrakte) Standart kontrol için absorbans, mevcut ölçüme uygulanan, değerler aralığı ile tablodaki kolonu tanımlamak için kullanılır. Örnek için ölçülen absorbans değerlerin uygun aralığına verilir ve sonra U/ml cinsinden titre tabloda sola doğru ikinci kolondan okunur. Örneğin, belli bir ölçüm için standart kontrol için absorbans 0.86 dır. Bu durumda 0.84-0.88 aralığa sahip tablodaki kolon sonuçları belirlemek için tek kullanılandır. 0.65 absorbansa sahip hasta örneği bu nedenle 31.1-70.0 U/ml titre aralığına denk gelir. (Belirtilen değerler sadece örnek olarak değerlendirilir ve veri kağıdındaki mevcut değerlerden farklı olabilir) Belirlenen sonuçların değerlendirilmesi (pozitif (+), negatif (-) veya şüpheli (?)) değerler tablosunun ilk kolonundan alınmalıdır. 11.3. Matematiksel değerlendirme 4-parametre metodu veya -metoduna göre matematiksel değerlendirme için gereken değerler ekteki veri kağıdına kaydedilir. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 10
11.4. Test sonucu Tablo 3: Belirlenen birimlerin değerlendirilmesi IgA IgG IgM negatif < 39 U/ml < 23 U/ml < 50 U/ml şüpheli 39-50 U/ml 23-31 U/ml 50-71 U/ml pozitif > 50 U/ml > 31 U/ml > 71 U/ml 12. Metod sınırlamaları RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae EIA, Mycoplasma pneumoniae karşı IgA, IgG veya IgM antikorlarını tespit eder. Bu test belirlenen nesil tükenmesi ve ciddi klinik semptomların oluşumu arasında bir ilişki elde etmek için kullanılamaz. Elde edilen sonuçlar her zaman klinik tablo ile birlikte yorumlanmalıdır. Negatif bir sonuç illede Mycoplasma enfeksiyonu olmadığı anlamına gelmez. Enfeksiyonun erken aşamaları esnasında antikorların sayısı onlar için negatif sonuç gösterecek kadar hala çok küçük olabilir. Bu durumda klinik nedenlerden dolayı enfeksiyon şüphesi varsa test 2-4 hafta sonra toplanan serumun ikinci örneği üstünde tekrarlanmalıdır. Serumların iki ardışık örneği her zaman bir hastadan toplanmalıdır ve tanı kalitesini artırmak amacıyla serolojil teste tabi tutulmalıdır. Titre gelişimi bulguları yorumlama için önemlidir. IgA antikorları M. pneumoniae ile mukoz membranlarının olası kolonizasyonu hakkında bilgi verir. Yüksek IgA titresi bu nedenle akut enfeksiyonu belirtir. İzole durumlarda, IgA titreleri ayrıca uzun süre boyunca devam edebilir. Pozitif IgM bulgusu genellikle sadece patojenle ilk temastan sonra bulunur. Sürekli IgM titreleri ayrıca gözlenmiştir. Pozitif bir sonuç hastalığın sebebi olarak başka bulaşıcı patojen varlığını ekarte etmez. RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 11
13. Performans özellikleri Tablo 4: Inter- test varyasyonu (n = 5) Inter- test varyasyonu IgA IgG IgM OD CV OD CV OD CV Serum 1 0.196 4.5% 0.334 4.1% 0.642 6.2% Serum 2 0.417 3.7% 0.588 5.1% 1.039 4.8% Serum 3 0.829 6.0% 0.998 4.8% 1.499 4.6% Tablo 5: Intra- test varyasyonu (n = 24) Intra- test varyasyonu IgA IgG IgM OD CV OD CV OD CV Serum 1 0.180 4.7% 0.346 4.4% 0.587 5.0% Serum 2 0.391 5.0% 0.639 4.1% 0.931 6.7% Serum 3 0.874 4.4% 1.118 5.0% 1.415 4.6% Tablo 6: İki başka ticari ELISA ile kıyaslamada duyarlılık ve özgüllük IgA IgG IgM Duyarlılık 95.8% 95.0% 100.0% Özgüllük 95.2% 100.0% 97.9% RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 12
Tablo 7: Almanya da bir kan donör merkezinden alınan 212 kan-donör serumunun test edilmesiyle sonuçlar 212 kan donör serumu IgA IgG IgM negatif 95.8% 78.8% 99.0% şüpheli 1.9% 6.1% 0.5% pozitif 2.4% 15.1% 0.5% RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 13
Referanslar 1. Ansorg, R.: Isolierung und Identifizierung von Mycoplasmen und Chlamydien [Isolation and identification of mycoplasmae and chlamydia]. Zbl. Bakt. Hyg. A 270, 470-486 (1989) 2. Blenk, H., Zotz, R. B.: Mycoplasmeninfektionen. In: Gsell, O., Krech, U., Mohr, W., eds. Klinische Virologie [Clinical virology]. Stuttgart: Urban und Schwarzenberg, 337-353 (1986) 3. Rudd, P. T., Brown, M. B., Cassell, G. H.: A prospective study of mycoplasma infection in the preterm infant. Isr. J. Med. Sci. 20, 899-901 (1984) RIDASCREEN Mycoplasma pneumoniae 11-05-05 14