Antijene Dayal nvaziv Olmayan Bir Testle Helicobacter pylori nfeksiyonunun Tan s

Göztepe T p Dergisi 18: 3439, 2003 ISSN 1300526X KL N K ARAfiTIRMA nfeksiyon Antijene Dayal nvaziv Olmayan Bir Testle Helicobacter pylori nfeksiyonunun Tan s Gülay BEKLER (*), Nail ÖZGÜNEfi (**), Celal ULAfiO LU (***) ÖZET Baz gastrointestinal hastal klarla iliflkisi olan Helicobacter pylori, insanlarda s k görülen bir patojendir. H pylori infeksiyonunun tan s için tart fl lan yeni noninvaziv tekniklerin araflt r lmas kapsam nda, gaitadaki H pylori antijeni tespitinde kullan lan bir EIA y (HpSA) de erlendirdik. Bu prospektif çal flmada gastroskopi yap lan 46 hastadan (23 kad n, 23 erkek; yafl aral 1870, ortalama 42) al nan gaita örnekleri HpSA ile, endoskopik biyopsi örnekleri h zl üreaz testi ve histolojik olarak incelendi. Histoloji ve üreaz test pozitif olanlar Helicobacter pylori pozitif, negatif olanlar ise H pylori negatif olarak tan mland. Belirlenen kriterlere göre H pylori infeksiyonu bulunan 33 hastan n 30 u HpSA ile pozitif bulundu (duyarl l k % 90.9). nfeksiyon saptanmayan 13 hastan n 11 i HpSA ile negatif bulundu (özgüllük % 84.62). Anahtar kelimeler: HpSA, Helicobacter pylori SUMMARY Diagnosis of Helicobacter Pylori Infection With a New NonInvasive Test Helicobacter pylori is a common human patogen implicated in certain gastrointestinal diseases. In the search for new noninvasive techniques to diagnose H. Pylori infection, we evaluated an EIA for H. Pylori antigen in stool (HpSA). In this prospective study, stool specimens from 46 patients (23 women, 23 men; age range 1870 years, mean 42) undergoing gastroscopy were tested with HpSA, endoscopic biopsies were tested rapid urease test and histological. Patients were defined as positive for Helicobacter pylori if histology and urease test were positive, as negative if histology and urease test were negative. Of 33 patients with H pylori infection by the predefined criteria, 30 were positive by HpSA (sensitivity 90.9 %). Of 13 patients without infection, 11 were negative by HpSA (specifity 84.62 %). Key words: HpSA, Helicobacter pylori Helicobacter pylori, dünyan n bütün bölgelerindeki insanlardan izole edilmifltir. Do al rezervuar insand r. Fekaloral ya da oraloral geçebilir. Kirlenmifl su ve besinlerin kaynak olabilece i düflünülmüfl ise de, henüz do ada H pylori saptanmam flt r. Difl plaklar n n H pylori için rezervuar oldu una dikkat çekilmektedir. Bu flekilde baflkalar n infekte etme ve reinfeksiyon flans vard r (1,2). Pek çok çal flma, gastroendoskopiyi gerektiren semptomatik kiflilerde H pylori nin varl n ortaya koymakla beraber, klinik belirti göstermeyen kiflilerin araflt r lmas infeksiyon prevalans n n da kesin tespitini sa layacakt r. Normal kiflilerde de izole edilebilmektedir (36). Geliflmifl ülkelerde eriflkinlerin yar s, geliflmekte olan ülkelerde % 8090 bu bakteri ile infekte olmaktad r. Geliflmekte olan ülkelerde infeksiyon etkeni yaflam n ilk y llar nda al nmakta ve hayat boyu devam etmektedir. Bu ülkelerde nüfusun % 80 i 20 yafl na kadar infekte olmaktad r. Türkiye de ayn durumdad r (1,7,8). Geliflmifl ülkelerde, belirtisiz kiflilerin 30 yafl alt nda olanlar nda % 20, ileri yafltaki flah slar n oluflturdu u gruplarda, H pylor infeksiyonu % 4060 olarak bulunmaktad r (4,6). H pylori infekte etti i tüm kiflilerde gastrit oluflturur, ancak aç klanmas gereken niçin büyük ço unlukta asemptomatik iken, bir grubunda dispepsi, ülser, MALT (Mucosa associated lenfoid tissue) lenfoma gelifliyor olmas d r. Bütün bu sorular n tam olarak cevab bulunamam flt r. MALT lenfoma, konakç ya ait bir patoloji olarak gözükmektedir. Uzun süreli inflamasyon, lokal hücre proliferasyonunu art rmakta ve DNA replikasyonunda hata riskini art rmaktad r (9,10). SSK Göztepe E itim ve Araflt rma Hastanesi Klinik Mikrobiyoloji ve Enfeksiyon Hastal klar Klini i Uz. Dr.*; fief Dr.**; Dahiliye Klini i Uz Dr.*** 34

G. Bekler ve ark., Antijene Dayal nvaziv Olmayan Bir Testle Helicobacter pylori nfeksiyonunun Tan s H pylori infeksiyonu kronik olup tedavi edilmedikçe hayat boyu devam eder. Normalde di er bakteri infeksiyonlar nda do ufltan veya sonradan kazan lm fl ba fl kl k yoluyla bakteri elimine edildi i halde H pylori nin bu mekanizmalara dirençli olmas nedeniyle vücuttan elimine edilmesi mümkün de ildir. Tedavi edilmeyen H pylori infeksiyonu kronikleflir. Kronik atrofik gastritli olgular n büyük ço unlu unda H pylori etyolojik rol oynar. Kronik inflamasyonun devam halinde gastrik nonhodgkin lenfoma riski artar (11). Multidisipliner yaklafl m n gerekli oldu u H pylori infeksiyonu tan s nda çok say da invaziv ve noninvaziv yöntem kullan lmaktad r. Mevcut testlerin tümünün kendine özgü avantaj ve dezavantajlar mevcuttur. Duyarl l k ve özgüllü ü yüksek testler gelifltirmek için çal flmalar devam etmektedir. Kan testleri hariç di er bütün testler için; hastan n son bir hafta içinde omeprazol, son bir ay içinde antibiyotik veya peptobismol, son 24 saat içinde ranitidin ve nizatidin kullanmam fl olmas gereklidir. Tan da invaziv ve non invaziv testler kullan l r (12). nvaziv testler; üreaz testi, kültür, histopatoloji, moleküler yöntemlerdir. Üreaz testi oldukça kolay ve çabuk sonuç veren, rutin olarak uygulanabilecek bir testtir (13). Günümüzde Christensen besiyeri ve bunun de ifltirilmifl flekilleri, CLO (Campylobacter like organism test) ve gelifltirilmifl h zl üreaz testleri midenin özellikle antrum bölgesinden al nan biyopsi örneklerinden H pylori nin çabuk tan m için çok özgül olmamakla birlikte kullan lmaktad r (12,14). Biyopsi örne inin üreli bir ortama konmas ile H pylori nin yapt üreaz n üreyi parçalamas sonucu NH3 ve bikarbonat oluflur. Ortam n ph yükselir ve bunun ph de iflikli i bir renk indikatörü ile gösterilir. Testin duyarl l ve özgüllü ü % 90 n n üzerindedir. Proton pompa inhibitörü ile sa alt lan kiflilerde bu test yararl sonuçlar vermemektedir. Üreaz yapan baflka bakterilerin varl nda da yalanc pozitif sonuçlar ortaya ç kabilir (12). Bakterinin üreaz aktivitesi ile ortam alkalilefltirmesi, indikatör fenol k rm z s n n portakal renginden eflatuna dönmesine neden olur (8,15). Kültür, H pylori tan s için en özgül yöntemdir, ancak duyarl l düflüktür. Bakterinin kültürde üretilmesi ile kesin tan konmas yan s ra, antibiyotiklere duyarl l k, moleküler tiplendirme yap labilir. H pylori için kantitatif kültür yöntemleri de gelifltirilmifltir (12). Üreme yoksa H pylori yoktur demek do ru de ildir. Özgüllü ü % 100, duyarl l % 7792 dir (1). Biyopsinin yan s ra f rça sitolojiden toplanan örnekler ile de iyi sonuçlar al nmaktad r (12). Endoskopik biyopsi örne i d fl nda hastan n d flk örne inin de kültürü yap l r. D flk floras aras ndan H pylori yi izole etme flans oldukça düflüktür. Özgüllü ü % 100, duyarl l % 3050 dir (1). Histoloji en yayg n yöntemdir, yaln zca H pylori yi tan s için de il ayn zamanda inflamasyonun flekli, lenfoid art fl, intestinal metaplazi gibi di er parametreler için de yararl d r (12). WarthinStarry gümüfl boyas nda bakteri sar zemin üzerinde siyah renkte görünür, ancak fiyat, boyama tekni inin zorlu u, s k olarak meydana gelen afl r zemin çökeltileri ve renginin solmas nedeniyle pek seçilen bir yol de ildir. Giemza ise kolayl kla yap labilen, ucuz bir boyamad r. Biyopsilerden elde edilen smear preparasyonlarda H pylori nin çabuk tan m amac yla gram boyas kullan lmakta ve iyi sonuçlar vermektedir (17,18). Histopatoloji, yüksek duyarl l olan (% 98) bir yöntemdir. Ancak, kesitlerde bakterinin saptanmas incelemeyi yapan kifliden etkilenir. Bu nedenle, en iyi sonuç histopatoloji ile birlikte di er tan yöntemlerinden birinin birlikte uygulanmas ile elde edilir (12). Non invaziv testler; serolojik testler, üre solunum testi, HpSA EIA testidir. H pylori infeksiyonunda serokonversiyon yaklafl k 2233 gün sonra geliflir. Serolojik tan da aglütinasyon, kompleman fiksasyon, ELISA, Western blot, immünfloresan yöntemler kullan lmaktad r. Serolojik testlerde yalanc pozitif ve yalanc negatif sonuçlar al nabilir. Atrofik gastriti olan ve daha önce sa alt m alan hastalarda yalanc pozitiflik görülebilir. Sa alt m alanlarda ortaya ç kan pozitiflikler, nonspesifik immünglobulinlere veya çapraz reaksiyonlara ba l d r. fiu ana kadar tüm sufllar için herkeste antikor yan t n oluflturacak tek bir antijen saptanamam flt r. H pylori nin infeksiyonu kronik bir infeksiyon olup spontan olarak iyileflme göstermedi inden serolojik testler ile genellikle IgG antikorlar araflt r l r. Son 2 y lda H pylori için sa alt m almayan bir kiflide yüksek titrelerin saptanmas aktif bir infeksiyon olarak de erlendirilmelidir. Sa alt m sonras titrenin % 50 düflmesi sa alt m n etkin oldu unu gösterir. Serolojik testler epidemiyolojik çal flmalar için daha uygundur. Yap lan çal flmalar n ço unda bu testlerin ucuz, uygulanmas kolay ve h zl sonuçlar verdi i konusunda fikir birli i olmas na ra men bu testlerin güvenilirli i konusunda ayn görüfller paylafl lmamaktad r (12,1923). Üre solunum testlerinin invaziv testlere göre avantaj, tüm mide mukozas n n araflt r labilmesidir. Sa alt m etkinli inin izlenmesinde de yararl d r, bu amaçla ilaçlar n kesilmesinden 4 hafta sonra uygulanmal d r. Testin temelinde 35

Göztepe T p Dergisi 18: 3439, 2003 oral yolla al nan 13 C veya 14 C iflaretli ürenin H pylori nin yapt üreaz enzimi ile parçalanmas sonucu aç a ç kan CO 2 nin ekspiryum havas nda saptanmas esas na dayan r. Bu metoda dayal iki solunum testi tan mlanm flt r (8,24). Üreaz pozitif baflka mikroorganizmalar n varl nda veya aklorhidri de yalanc pozitif sonuçlar al nabilmektedir. Yak n zamanda antibiyotik, antiasid, bizmut ve antisekretuar ajan alanlarda yalanc negatif sonuçlar al nabilir. Bu nedenle üre solunum testi uygulanacak kiflilerin testten 15 gün önce ilac kesmeleri önerilmektedir (12,25). HpSA (Helicobacter Pylori Stool Antigen) EIA testi, H pylori infeksiyonunun tan s için tart fl lan yeni non invaziv tekniklerin araflt r lmas kapsam nda, gaitadaki H pylori antijeni tespitinde kullan lan bir ELISA yöntemidir. HpSA, H pylori infeksiyonunun tan s için güvenilir ve kullan m kolay bir yöntemdir. Tedaviden k sa bir süre sonra bile test do ru sonuç verir (26). Non invaziv H pylori testinin dispepsisi bulunan hastalardaki altta yatan nedenin önceden tahmin edilmesinde yararl oldu u gösterilmifltir. Birkaç çal flma, pozitif bir H pylori test sonucuna sahip olan dispeptik hastalar n % 2050 sinde altta yatan bir ülser ya da duodenit ile ilgili kan t bulunaca n göstermifltir. Tam tersine, negatif bir test sonucuna sahip olan dispeptik hastalar n % 5 inden daha az bir k sm nda, altta yatan ülser hastal ile ilgili kan t bulunmaktad r. Kötü semptomlar bulun mayan ve nonstereoid antiinflamatuar ilaç almayan daha genç yafltaki dispeptik hastalar n tedavilerinin düzenlenmesini belirlemek üzere, endoskopi yerine non invaziv H pylori testinin kullan lmas gerekti ini gösteren sa lam kan tlar bulunmaktad r (27). H pylori tan s nda kullan lan baz testler Tablo 1 de gösterilmifltir. Bu çal flmadaki amaç, H pylori infeksiyonunun tan s nda kullan lan bu yeni testin (HpSA EIA testi) duyarl l n ve özgüllü ünü belirlemektir. MATERYAL ve METOD Çal flma grubu SSK Göztepe E itim Hastanesi gastroenteroloji poliklini ine baflvuran dispeptik flikayetleri olan olgulardan seçildi. NisanA ustos 2001 tarihleri aras nda gastroenteroloji poliklini ine baflvuran dispetik olgulardan flu özelliklere sahip olanlar çal flmaya kabul edildi; Son 4 hafta içinde herhangi bir antibiyotik tedavisi almam fl olmas, son 4 ay içinde proton pompa inhibitörü ile veya bizmut içeren bilefliklerle tedavi almam fl olmas, mide operasyonu geçirmemifl olmas, ek hastal n bulunmuyor olmas, histopatolojik sonuç ve CLO test sonucunun uyumlu olmas. Baflvuran hastalara endoskopi uyguland, 3 adet biyopsi örne i al nd. 2 adet biyopsi örne i (antrum ve korpusdan al nan) histopotolojik inceleme için patoloji laboratuvar na gönderildi. Bir adet biyopsi örne i h zl üreaz testine (CLO test) tabi tutuldu. CLO test sonuçlar olumsuz olan olgular n CLO testleri 24 saat sonunda tekrar de erlendirildi. Olgular n histopatoloji sonuçlar ve test sonuçlar karfl laflt r ld. HpSA testi için, bu iki testin uyumlu olanlar çal flmaya al nd. Histopatoloji sonucu ve CLO test sonucu pozitif ise H. pylori pozitif, her ikisi de negatif ise H. Tablo 1. HP tan s nda kullan lan baz testler (8). Örnek Endoskopi Gereklili i Duyarl l k (%) Özgüllük (%) Örnek Histopatoloji Mide mukozas 9399 9599 Basit ve h zl d r. Ayr ca gastrit tan s na da olanak verir. Kültür Mide mukoza D flk 7292 3050 100 100 zolasyon zor ve zaman al c fakat antibiyotik duyarl l k testi için gereklidir. Üreaz testi (CLO) Mide mukozas 8998 9598 Endoskopiden sonra h zl sonuç veren basit ve güvenilir test Üre solunum testi Soluk 90100 89100 C 13 ve C 14 ile iflaretli üre kullan l r. C 13 de radyasyon yok ve pahal. C 14 basit ve ucuz Serolojik testler Serum, mide s v s 88100 8695 HA, Ag, KF, IFA, EL SA kullan l r. EL SA tercih edilir ve duyarl l % 100 dür. Epidemiyolojik araflt rma ve tedavi takibinde kullan l r. PCR D flk Mide mukozas Mide s v s Difl kiri 9599 9599 Yalanc pozitif reaksiyonlar duyarl l k ve özgüllü ü azalt r. Tedavi sonras takip, için çok uygun 36

G. Bekler ve ark., Antijene Dayal nvaziv Olmayan Bir Testle Helicobacter pylori nfeksiyonunun Tan s pylori negatif kabul edildi. Histopatoloji ve CLO test sonuçlar uyumlu olan 46 olgunun gaita örnekleri HpSA EIA testine tabii tutuldu. 46 olgunun 33 tanesi histopatoloji ve CLO test pozitif, 13 tanesi histopatoloji ve CLO test negatifti. H pylori negatif olan 13 olgu kontrol grubu olarak belirlendi. Endoskopi ile efl zamanl olarak hastalardan gaita örne i al nd ve test öncesine dek 20 C de sakland. Tablo 1. Tan tiplerine göre da l m. Antral gastrit Pan gastrit Duodenal ulkus Hasta Grubu 7 (% 70.0) 12 (% 66.7) 14 (% 77.8) Kontrol Grubu 3 (% 30.0) 6 (% 33.3) 4 (% 22.2) Toplam 10 (% 100) 18 (% 100) 18 (% 100) Çal flmada kullan lan materyaller; Premier Platinum HpSA EIA testi Meridian Diagnostic, Cincinati USA (SN 11256) Mikroplate EIA yöntemi ile insan d flk s nda H. pylori antijenlerinin kalitatif tayini amac yla kullan lmaktad r, test kuyucuklar H. pylori ye karfl oluflan poliklonal antikorlar içerir, testte kullan lan konjugat; H. pylori için spesifik tavflan poliklonal antikorlar konjugat, substrat ise; üre peroksidaz ve tetrametilbensidindir. Mikroplate spektrofotometre cihaz (450 nm), mikropipetler, vortex cihaz, temiz test tüpleri, kurutma ka tlar, inkübatör (25 C). Gaita örneklerine ELISA laboratuvar nda, kullan m k lavuzuna uygun olarak, HpSA EIA uyguland. Çal flmaya bafllamadan önce gaita örnekleri oda s s na getirildi. S v olan d flk lardan 100 ml, kat olan d flk lardan 56 mm çap nda örnek temiz test tüplerine konuldu ve 200 ml örnek suland r c ile kar flt r ld. 15 saniye, vortex kullan larak homojen kar fl m oluflturuldu. HpSA elisa kitinin 1. kuyucu u pozitif kontrol, 2. kuyucu u negatif kontrol ve di erleri gaita örnekleri için kullan ld. Suland r lm fl d flk örneklerinden 50 ml kuyucuklara konuldu. Her bir kuyucu a 1 er damla enzim konjugat eklendi. 1 saat 25 C de inkübe edildi. nkübasyon sonras nda kuyucuklar 5 kez washbuffer ile y kand. Y kama ifllemi tamamland ktan sonra her bir kuyucu a 2 damla substrat eklendi. Oda s s nda 10 dakika inkübe edildi. nkübasyon sonras nda sonuçlar de erlendirmeye al nd. Sonuçlar görsel olarak ve spektrofotometrede (450 nm) de erlendirildi. Pozitif reaksiyonlarda bafltaki mavi rengin koyu sar renge dönüfltü ü ve negatif reaksiyonlarda renksizden hafif sar renge dönüfltü ü gözlendi. Spektrofotometrik ölçümde ki de erlere göre Negatif sonuç: OD<140, belirsiz sonuç OD <140 ve <160, pozitif sonuç OD <160 kabul edildi ve olgular n sonuçlar belirlendi. BULGULAR Çal flma grubuna al nan 46 olgunun yafl ortalamas 42.78±14.87 idi. Kontrol grubunda bu ortalama 47.61 ±14.18, hasta grubunda ise 40.87±13.94 bulundu. Kontrol grubunun 5 i erkek, 8 i kad n, hasta grubunun 18 i erkek, 15 i kad nd. Kad n ve erkek say lar toplam 46 olguda eflit tespit edildi. Endoskopi tan lar na göre antral gastrit, pangastrit, duodenal ulkus olarak üçe ayr lm fl da l m Tablo 1 de gösterilmifltir. Hasta ve kontrol grubu CLO test histopatoloji sonuçlar göz önüne al narak HpSA EIA testinin duyarl l, özgüllü ü, pozitif ve negatif öngörü de eri hesaplanm fl ve s ras yla flu flekilde bulunmufltur; (% 90.9, % 84.62, % 93.75, % 78.57). Histopatoloji ve CLO test sonuçlar na göre HpSA EIA testinin de erlendirilmesi Tablo 2 de gösterilmifltir. Hasta vke kontrol gruplar nda endoskopik tan tiplerine göre istatistiksel olarak anlaml farkl l k gözlenmemifltir (p=0.753; p>0.05). Tablo 5. Patoloji ve CLO test sonuçlar na göre HpSA ELISA testi sonuçlar n n de erlendirilmesi. HpSA pozitif HpSA negatif TARTIfiMA Hasta grubu (histoloji ve CLO test pozitif olgular) 30 3 Kontrol grubu (histoloji ve CLO test negatif olgular) 2 11 Duyarl l k: 90,90 Özgüllük: 86,62 Pozitif öngörü de eri: 93,75 Negatif öngörü de eri: 78,57 Avrupa da çok merkezli bir çal flma ile HpSA ve 13C üre solunum testi, H pylori infeksiyonu tan s nda ve tedaviden k sa süre sonraki takipte, karfl laflt r lm fl, çal flmaya kabul edilen 501 hastan n 279 unda H pylori pozitif bulunmufl ve bu hastalara eradikasyon rejimi verilmifl. Tedaviden 4 hafta sonra kontrole ça r lan hastalardan 235 i kontrole gelmifl ve 162 hastaya endoskopi, HpSA EIA, 13C üre solunum testi uygulanm fl, 73 hastaya ise sadece HpSA EIA ve üre solunum testi uygulanabilmifltir. Endoskopiyi kabul eden 162 hastan n sonuçlar na göre HpSA EIA testinin duyarl l % 93.8, özgüllü ü % 96.9, üre solunum testinin duyarl l % 9.6, özgüllü ü % 99.2 bulunmufltur. HpSA testinin, tedavi sonras H pylori testi olarak uygun bir metod oldu u gözlenmifltir (31). Bir baflka çal flmada; 26 erkek, 15 kad n hastaya kültür, CLO test, histopatolojik tan ve HpSA EIA uygulanm fl, HpSA EIA testinin duyarl l % 87.1, özgüllü ü % 100 olarak tespit edilmifltir (32). Ohkura ve ark., 348 hasta ile çal flm fllar. Bunlar n 40 histopatoloji, h zl üreaz testi ve üre solunum testi aras ndaki uyumsuzluk nedeni ile çal flma grubundan ç kar lm flt r. 115 i erkek, 32 tanesi kad n toplam 147 hastan n yafl ortalamas 53.3±10.9 dur. 147 hastada bu üç test sonuçlar pozitif olarak bulunmufltur. Geri kalan 162 hastan n ise 129 u erkek, 33 ü kad nd r ve yafl ortalamas 54±10.5 dir ve üç testte de H pylori negatif olarak tespit edilmifltir. Kanda H pylori pozitif hastalar n 144 ünde HpSA EIA sonucu pozitif, 162 H pylori 37

Göztepe T p Dergisi 18: 3439, 2003 negatif hastan n 141 inde HpSA EIA sonucu negatif bulunmufl. HpSA n n duyarl l % 97, özgüllü ü % 87 olarak gösterilmifltir (33). Fanti ve ark. n n yapt klar bir çal flmada, HpSA EIA testinin duyarl l % 98.2, özgüllü ü % 93.1, negatif öngörü de eri % 96.4, pozitif öngörü de eri ise % 96.4 olarak tespit edilmifltir (34). Vaira ve ark.,n n 235 hastada yapt bir çal flmada, eradikasyon tedavisinden sonra HpSA n n tan de eri araflt r lm flt r. Tedavi sonras 162 hastada endoskopi tekrarlanm fl, HpSA ve 13C üre solunum testinin duyarl l ve özgüllü ü biyopsi sonuçlar na göre de erlendirilmifl (eradikasyon oran % 80). 73 hasta endoskopiyi reddetmifl ve bunlara sadece HpSA ile 13C üre solunum testi uygulanm flt r. HpSA n n duyarl l ve özgüllü ü, alt n standart olan üre solunum testi göz önünde bulundurularak de erlendirilmeye al nm flt r. Endoskopiyi kabul eden 162 hastada HpSA EIA n n duyarl l % 93.8, özgüllü ü % 96.9, 13C üre solunum testi duyarl l % 90.6, özgüllü ü % 99.2 dir. Tüm populasyonda HpSA EIA n n (üre solunum testine göre) duyarl l % 95.6, özgüllü ü % 94.7, pozitif öngörü de eri % 81.1, negatif öngörü de eri % 98.9 olarak tespit edilmifltir (35). H pylori infeksiyonu pozitif 112 peptik ülserli hastada yap lan çal flmada (82 hasta erkek, 30 hasta kad n; yafllar 2281), 4 haftal k eradikasyon tedavisi sonras nda gaita örnekleri toplanm fl ve HpSA EIA ile test edilmifltir. HpSA n n tan sal do rulu u 13C üre solunum testi ile karfl laflt r larak incelendi inde, HpSA EIA testinin duyarl l % 90, özgüllü ü % 98, pozitif öngörü de eri % 82, negatif öngörü de eri % 99 olarak tespit edilmifltir. HpSA n n 4 haftal k eradikasyon tedavisi sonunda H pylori infeksiyonunun tan s için kullan labilir oldu u düflünülmüfltür (36). Braden ve ark n n 46 s erkek, 44 ü kad n ve yafllar 18 82 aras nda olan 90 hasta üzerinde yapt bir çal flmada H pylori infeksiyonunun tan ve tedavi sonras izleminde HpSA EIA ve 13C üre solunum testi karfl laflt r lm flt r. Duyarl l k % 91.3, özgüllük % 94.6 olarak tespit edilmifl (37). Oderda ve ark n n çocuklar üzerinde yapt klar çal flmada (97 erkek, 106 k z, ortalama yafl 7) Histopatoloji, HpSA EIA, kültür ve üre solunum testi karfl laflt r lm flt r. 146 çocuk H pylori negatif, 52 si ise H pylori pozitif bulunmufltur (49 çocukta üreaz testi ve histopatoloji pozitif, 2 çocukta üre solunum testi ve kültür pozitif, 1 inde ise histoloji ve üre solunum testi pozitif). 5 olguda test sonuçlar ndan biri pozitif bulunmufl. HpSA test sonucunda ise duyarl l k % 98, özgüllük % 99 tespit edilmifltir (38). Bir baflka çal flmada üreaz testi, kültür ve histopatolojiye dayanarak H pylori pozitif 15 çocuk ve negatif 39 çocukta gaitalar HpSA EIA testi ile araflt r lm flt r. H pylori pozitif çocuklara 7 gün eradikasyon tedavisi verilmifl ve 10 gün boyunca çocuklardan her gün d flk örne i toplanm fl, 70 C de saklanm flt r. Tedaviden önce H pylori pozitif çocuklardan al nan gaitalar n hepsinde HpSA EIA pozitif bulunmufl, kontrol grubunda ise bir çocuk d fl nda di erleri negatif bulunmufltur. H pylori antijen profili antibiyotik tedavisinin bafllang c ndan sonraki 2. ve 3. günlerde antijen konsantrasyon piki göstermifl, 4. ve 5. günlerde negatifleflmifltir (39). Dispeptik semptomlar olan H pylori infeksiyonu biyopsi (kültür, histopatoloji, h zl üreaz testi) ve 13C üre solunum testi ile ortaya konulan bir çal flmada 7 gün H pylori eradikasyon tedavisi olarak ranitidin, bizmut sitrat veya omeprazolklaritromisinamoksisilin veya metranidazol kullan lm flt r. 54 hasta çal flmaya al nm fl ve tedavi bafllang ç günü 0. gün kabul edilmifltir. 1, 3, 5, 7, 9, 15, 22, 29, 42. günlerde taze d flk örnekleri toplanm flt r. lk 3 günün sonununda H pylori antijen düzeylerinin h zla düfltü ü görülmüfl olup 5. günde 5 hasta d fl ndaki hastalarda HpSA seviyeleri cutoff de erinin alt nda bulunmufltur. Tedavide baflar s z olan hastalar n HpSA testi seviyeleri, tedavi bitiflinden 15 gün sonra, cutoff de erinin üzerine ç km flt r (40). Yafl ortalamas 54.5 olan (42 kad n, 30 erkek) bir grup hastada Püspok ve ark n n yapt çal flmada; histopatolojiye göre 52 hasta H pylori negatif, 20 hasta ise pozitif bulunmufltur. Rutin histopatolojik incelemede 6 hastada farkl sonuç bulunmufl olup, rutin histopatolojinin bu konuda duyarl l % 90, özgüllü ü % 92 olarak tespit edilmiflir. H pylori stool antijen testi sonuçlar na göre duyarl l k, özgüllük, pozitif ve negatif öngörü de eri s ras yla gösterilmifltir; % 80, % 98, % 94, % 93, (42). H pylori infeksiyonunu tespit etmek için kullan lan çok say da geçerli metod oldu u halde flu andaki testlerin düzenlenmesine ve yeni testlerin gelifltirilmesine devam edilmektedir. Artan say da hasta kendi pratisyen hekimi taraf ndan tedavi edilmekte olup tedavi takibi nedeni ile h zl, basit, do ru bir hasta testine ihtiyaç duyulmaktad r. Antibiyotik dirençli mikroorganizmalar, belirlemek için moleküler tekniklerin gelifltirilmesine h z verilmifltir. Tan sal testlerdeki geliflimin flu anda esas olanlar, invaziv olmayan, tükrük antikorlar n kulla 38

G. Bekler ve ark., Antijene Dayal nvaziv Olmayan Bir Testle Helicobacter pylori nfeksiyonunun Tan s n m, fekal antijen testleri, h zl antikor testleri, gaitada antibiyotik direncini gösteren DNA immunoassay testleridir (41). H pylori infeksiyonunun tespiti gastroenterologlara gönderilen hastalar n tedavisi için en önemli basamak haline gelmifltir. Noninvaziv bir tarama testi, endoskopiye olan ihtiyac ortadan kald rmamakla beraber, kesin sonuç veren bir tarama yöntemi kullan labildi i taktirde baz endoskopik ifllemler ekarte edilebilir. Yeni HpSA EIA testi, çeflitli avantajlara sahiptir. Sadece küçük bir gaita örne i yeterlidir. Ayr ca, pahal ekipmana, teknisyene, hemflireye gerek kalmamaktad r. Bu yeni test iyi bir duyarl l k ve özgüllü e sahiptir. Birçok çal flmada, HpSA testi ile tedavi kesildikten 4 hafta sonra, yine noninvaziv bir test olan 13C üre solunum testi ile eflde er sonuçlar al nm flt r. H. pylori IgG antikor titresindeki düflüflün tespit edilmesi için, serolojik testler 612 ay geçmesine gereksinim duyarken, HpSA ve üre solunum testi tedaviden k sa süre sonra kullan labilir. Çal flmam zda pek çok yay ndaki duyarl l k ve özgüllük de erlerine yak n sonuçlar elde edilmifltir (% 90.9, % 84.62). Çal flma s ras nda HpSA EIA testinin kullan m kolayl n yak ndan gözlemledik: Hasta gaita örne i vermek d fl nda bir iflleme al nm yordu, testin toplam inkübasyon süresi 70 dakika ve pahal ekipman gerektirmiyordu, test tek kifli ile k sa sürede yap labiliyordu. HpSA EIA testi fliddetli semptomlar olmayan genç eriflkinlerde tarama testi olarak ya da tedavi sonras infeksiyonu de erlendirmede kullan labilir. KAYNAKLAR 1. Ustaçelebi fi, Mutlu G, mir T, Cengiz T, Tümbay E, Mete Ö: Temel ve Klinik Mikrobiyoloji.Günefl kitabevi, Ankara; 53641, 1999. 2. Goodwin CS, Armstrong JA, Chilvers T, et al: Transfer of Campylobacter pylori and Campylobacter mustalae to Helicobacter gen.nov as H.pylori comb. nov. and H. mustalae comb. nov int. J System Bacteriol 39:397, 1989. 3. Barthel JS, Westblom TU, Havey AD, et al: Gastritis and Campylobacter pylori in healthy asemptomatic volunteers. Arch Intern Med 148:1149, 1988. 4. Dodey CP, Fitzgibbons P, Cohen H, et al: Prevalance and distribution of Campylobacter pylori in an asemptomatic population. Gastroenterology 94:102, 1988. 5. Rauuws EAJ, Langenberg W, Houthaft HJ, et al: Campylobacter pyloridisassociated chronic active antral gastritis: A prospective study of its prevalance and the effects of antibacterial and antiulcer treatment. Gastroenterology 94:102, 1988. 6. Blazer MJ: Epidemiology and pathophysiology of campylobacter pylori infections. Rewiev of Infectious Disease 1:99, 1990. 7. Marshall BJ, Mc Gechie DB, Francis GJ, et al: Pyloric campylobacter serology. Lancet 2:281, 1984. 8. Göksoy E, Uzunismail H: Gastrointestinal Sistem Hastal klar 1922, 2001. 9. Bilgehan Hakk : Temal mikrobiyoloji ve ba fl kl k bilimi; 8. bask ; Bar fl yay. zmir 308, 1996. 10. Karasu Z, Akarca US: Helicobacter Pylori ve gastrik kanser patogenezindeki rolü. Güncel Gastroenteroloji 411:818, 2000. 11. Örmeci N: Helicobacter Pylori infeksiyonunda klinik tablo ve tedavi. 9. Türk Mikrobiyoloji ve nfeksiyon Hastal klar Kongresi 5661, 1999. 12. K l ç SS: Helicobacter pylori: Tan, epidemiyoloji, korunma. 9. Türk Mikrobiyoloji ve nfeksiyon Hastal klar Kongresi 6368, 1999. 13. Vahabo lu MH, Ar kan E, Gezer LM, et al: Mide antrum biyopsi materyallerinden Campylobacter pylori izolasyonu ve erken üreaz testinin de erlendirilmesi. nfeksiyon Dergisi 4(3):51922, 1990. 14. Barthel J, Westblom TU, Gonsales F, et al: The preductive value of simple rapid ürease tests for C.pylori in symptomatic volunteers. Am J Gastroenterol 81:852, 1986. 15. Nichols L, Sughayer M, Pada MD, et al: Evaluation of diagnostic methods for Helicobacter pylori gastritis. Am J Clin Pathol 95:76973, 1991. 16. Queiroz MR, Mendes EN, Rocha GA: Indicator medium for isolation of Campylobacter pylori. J Clin Microbiol 25:2378, 1987. 17. Gustausson S, Philips SF, Malagelado JR, et al: Assesment of campylobacter like organisms in the postoperative stomach iatrogenic gastritis, and chronic gastroduedenal disease: preliminary observations. Mayo Clin Proc 62:269, 1987. 18. Humphreys H, O Morain C: Culture of the organisms and Histochemical identification. Scand J Gastroenterol 142:16, 1988. 19. Jones DM, Elgridge J, Fox AJ, et al: Antibody to the campylobacter like organism clinical correlations and distribution in the normal population. J Med Microbiol 22:57, 1986. 20. Jones DM, Lessels AM, Elgridge J: Campylobacter like organisms on the gastric mucosa culture, histological and serological studies. J Clin Pathol 37:1002, 1984. 21. Evans DJ, Evans DG, Graham DV, et al: Asensitive and spesific serological test for detection of Campylobacter pylori infection. Gastroenterology 96:1004, 1989. 22. Özgenç O, Boldemir A, Tafltan A, et al: Semptomatik ve asemptomatik populasyonlarda Helicobacter pylori antikorlar n n araflt r lmas. nfeksiyon Dergisi 6(3):1936, 1992. 23. Mitchell HM, Lee A, Berkowicz J, et al: The use of serology to diagnose active Campylobacter pylori infection. Med J 149: 6049, 1988. 24. Graham DY, Evans DJ, Albert KC, et al: Campylobacter pylori detected noninvasively by the 13C Uea breath test. Lancet 1:1174, 1987. 25. Ormand EI, Nicholas MD, Talley J: Helicobacter pylori: Contraverises and an approach to management: Mayo Clin Proc 65:41426, 1990. 26. Vaira D, Malfetheiner P, Megraud F, et al: Diagnosis of Helicobacter pylori infection eith a new noninvasive antigenbased assay. Lancet 354:303, 1999. 27. McColl K: Sould Noninvasive Helicobacter pylori testing replase endoscopy in investigation of dyspepsia: Helicobacter 5:1115, 2000. 28. Jones DM, Elgridge J, Fox AJ, et al: Antibody to the gastric campylobacter like organism clinical correlations and distribution in the normal population. J Med Microbiol 22:57, 1986. 29. Rolleson TP, Stone J, Rhodes JM: Spiral organisms in endoscopic biopsies of the human stomach. J Clin Pathol 37:23, 1984. 30. Gisbert JP, Pajares JM: Helicobacter pylori Test and Scope strategy for dyspeptic patients. Helicobacter 5:5768, 2000. 31. Vaira D, Malfertheiner P, Megraud F, et al: Noninvasive antigenbased assay for assessing Helicobacter pylori eradication: A European multicentre study: The American Journal of Gastroenterology 95(4):9259, 2000. 32. Kim SP, Lee J, Pai SH, et al: Detection of Helicobacter pylori antigen in stool by EIA Gastroenterology 1:116, 1999. 33. Ohkura R, Miwa H, Mural T, et al: Usefulness of a novel enzyme immunoassay for the detection of Helicobacter pylori in feces: Scand J Gastroenterol (1):4953, 2000. 34. Fanti L, Mezzi G, Cavalla A, et al: A new simple immunassay for detecting Helicobacter pylori infection: Antigen in stool specimens: Digestion 60:456460, 1999. 35. Viara D, Malfertheiner P, Maegraund F, et al: Stool test versus urea breath test for assening Helicobacter pylori eradication, Europen multicentre study: Gut 45(5):a71, 1999. 36. Ishihara S, Kaji T, Kawamura A, et al: Diagnostic accuracy of a new non invasive enzyme immunoassay for detected Helicobacter pylori in stools after eradication therapy: Aliment Pharmacol Ther 14:611614, 2000. 37. Braden B, Teuber G, Diefrich CF, et al: Comparison of a new faecal antigen test with 13C uica breath test for detecing Helicobacter pylori infection and monitoring eradication treatment: prospective clinical evaluation: BMJ 320:148149, 2000. 38. Oderda G, Rapa A, Ronchi B, et al: Detection of Helicobacter pylori in stool specimens by noninvasive antigen enzyme immunoassay in children: Multicentre talian Study. BMJ 145(5):120, 2000. 39. Regero P, Caracelli F, Corno G, et al: Helicobacter pylori in stool specimens: Evaluation of sensitivity, spesificity, antigen profile during one week treatment and eradication. Gut 145(5):120, 1999. 40. Hoff BWM, Vaira D, Gasbarrini G, et al: A noninvasive test to assess Helicobacter pylori shortly after eradicating treatment. Gut 45(5):A176, 1999. 41. Vaira D, Holton J, Menegatti M, et al: New immunological assays for the diagnosis of Helicobacter pylori infection. Gut 45(1):123127, 1999. 42. Püspak A, Barok S, Oburhuber G: A new, noninvasive method for detection of Helicobacter pylori: Validity in the routine clinical setting: European Journal of Gastroenterology and Hepatology 11(10):11391143, 1999. 39