Sadece İn vitro Diyagnostik Kullanım İçindir BD MAX System ile kullanım içindir Türkçe 4 I

Transkript

1 MAX MRSA Sadece İn vitro Diyagnostik Kullanım İçindir P0133(07) BD MAX System ile kullanım içindir Türkçe 4 I KULLANIM AMACI BD MAX System de (BD MAX Sistemi) gerçekleştirilen BD MAX MRSA testi, nazal kolonizasyon riski olan hastalardan alınan nazal swablarda Metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) DNA sının doğrudan saptanmasına yönelik otomatik kalitatif in vitro diyagnostik bir testtir. Bu testte, MRSA DNA sının amplifikasyonunda gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve amplifiye DNA nın saptanmasında florojenik, hedefe özel hibridizasyon probları kullanılır. BD MAX MRSA testinin sağlık bakımı ortamlarında MRSA enfeksiyonlarının önlenmesi ve kontrolüne yardımcı olması amaçlanmıştır. MRSA enfeksiyonlarına tanı koyması, rehberlik yapması veya enfeksiyonları izlemesi amaçlanmamıştır. Negatif bir sonuç nazal kolonizasyonu önlemez. Eş zamanlı kültürler epidemiyolojik tipin belirlenmesi amacıyla organizmaların elde edilmesi veya daha ileri duyarlılık testleri için gereklidir. PROSEDÜRÜN ÖZETİ VE AÇIKLAMASI MRSA, sağlık hizmeti verilen ortamdan edinilmiş enfeksiyonların temel bir nedenidir. Çoğu bulaşma, sağlık çalışanlarının ellerinden kontaminasyon sonucu veya MRSA taşıyan hastalardan kontamine olmuş sağlık hizmeti verilen ortamda gerçekleşir. MRSA püstüllerden sepsis veya ölüme 1 kadar gidebilen klinik bulguları olan enfeksiyonlara yol açarken, sağlıklı kişilerin de (asemptomatik taşıyıcılar) burnunda veya cildinde bulunabilir. MRSA enfeksiyonlarının tedavisi geniş aralıkta antimikrobiyel ajanlara dirençli suşların ortaya çıkmasıyla önemli bir konu haline gelmiştir. Metisiline dirençli Staphylococcus aureus suşları sıklıkla sağlık bakımı ortamlarında bulunur ve bazı Kuzey Amerika hastanelerinde hastaneden elde edilen Staphylococcus aureus izolatlarının %50 sinden fazlasını temsil eder. 2 Sağlık hizmeti veren ortamlarda MRSA bulaşma risk faktörleri arasında hastanede uzun süreli kalma, MRSA enfeksiyonu veya kolonizasyonu olan hastalara yakınlık, Vankomisine dirençli enterokoklar (VRE) ve Clostridium difficile gibi diğer dirençli organizmalarla kolonizasyon, çok sayıda ve/veya uzun bir süre geniş spektrumlu antibiyotik tedavilerine maruz kalma, sağlık hizmeti veren tesiste yüksek MRSA prevalansı bölgelerine maruz kalma ve önceki MRSA nazal enfeksiyonu veya taşıması bulunmaktadır. Nazal MRSA taşıyan hastaların erken tanımlanması MRSA için etkili bir enfeksiyon önleme programının bir parçası olabilir. MRSA nın kültür temelli saptanması saf kolonilerin izolasyonu ve sonrasında Oksasilin veya Sefoksitin duyarlılık testi, meca geninin saptanması veya meca geninin kodladığı penisilin bağlayıcı proteinin (PBP2a) saptanmasını içerir. Kültür temelli işlem minimum 24 saat sürerken MRSA yı tanımlamak için sonuca kadar geçen medyan süre yaklaşık 48 saattir. MRSA enfeksiyonlarının özellikle taşıyıcıların sık görüldüğü sağlık hizmeti verilen ortamlarda hızla yayılabilmesi nedeniyle nazal MRSA taşımanın sonuçlarının temin edilmesi numunenin alındığı aynı günde yapılabilmesi enfeksiyon önleme programları için bir avantaj sağlamaktadır. Bir nazal örnek alınır ve önerilen swab kullanılarak laboratuvara gönderilir (Gerekli Fakat Sağlanmamış Ekipman ve Malzemeler kısmına bakın). Swab, BD MAX MRSA Sample Buffer Tube a (BD MAX MRSA Örnek Tampon Tüpü) yerleştirilir. Hücreleri swab dan tampona bırakmak için Örnek Tampon Tüpü vortekslenir. Örnek Tampon Tüpü BD MAX System e yerleştirilince buradaki otomatik prosedür oluşur: bakteriyel hücreler lizise uğratılır, DNA manyetik boncuklardan ekstrakt ve konsantre edilir, son olarak da, varsa, genetik hedefi amplifiye etmek için kullanılan SA ya ve MRSA ya spesifik primerlerin bulunduğu ayrılan DNA alikotu PCR reaktiflerine eklenir. Bu testte de Örnek İşleme Kontrolü vardır. İnhibitör maddeler ve enstrüman kaynaklı yetersizlik veya reaktif hatası işlemini izlemek için Örnek İşleme Kontrolü Ekstraksiyon tüpünde kalır ve ekstraksiyon, konsantrasyon ve amplifikasyon adımlarını uygular. BD MAX Sistemi ne örnek, BD MAX Unitized Reagent Strip (Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi) ve BD MAX PCR Cartridge i (Kartuş) yüklendikten sonra operatör müdahalesi gerekmez. BD MAX Sistemi örnek lizisi, DNA ekstraksiyonu ve konsantrasyonu, reaktif rehidrasyonu, nükleik asit amplifikasyonu ve gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kullanılarak hedef nükleik asit sekansının saptanmasını otomatik olarak gerçekleştirir. Amplifiye hedefler, sönmüş floroforlarla etiketlenmiş hidroliz problarıyla algılanır. Sinyallerin amplifikasyonu, saptanması ve yorumlanması BD MAX System tarafından otomatik olarak yapılır. 1

2 PROSEDÜR İLKELERİ BD MAX Sistemi, hücre lizisi ve DNA ekstraksiyonu gerçekleştirmek üzere litik ve ekstraksiyon reaktiflerinin bir kombinasyonunu kullanır. Yüksek bir sıcaklıkta enzimatik hücre lizisi sonrasında serbest kalan nükleik asitler manyetik afinite boncuklarıyla yakalanır. Bağlı nükleik asitlerin bulunduğu boncuklar yıkanır ve nükleik asitler Elüsyon Tamponunda ısıyla elüsyona uğratılır. Elüsyondan geçmiş DNA, Nötralizasyon Tamponuyla nötralize edilir ve PCR reaktiflerinin rehidrasyonu için Ana Karışım Tüpüne aktarılır. Rekonstitüsyon yapılmış amplifikasyon reaktifi BD MAX PCR Kartuşuna dağıtılır. BD MAX PCR Cartridge daki (BD MAX PCR Kartuşu) mikrovalfler PCR başlamadan önce buharlaşma ve amplifikasyon kontaminasyonu önlemek için sistem tarafından mühürlenir. Amplifiye DNA hedefleri bir uçta söndürücü kısım ve öteki uçta bir floresan raportör boya (florofor) ile etiketlenmiş hidroliz (TaqMan) problarıyla saptanır. Farklı floroforlarla etiketlenmiş problar BD MAX Sisteminin iki farklı optik kanalında MRSA ve Örnek İşleme Kontrolü amplikonlarını saptamak üzere kullanılır: MRSA amplikonları FAM kanalında saptanır ve Örnek İşleme Kontrolü amplikonları ROX kanalında saptanır. Problar doğal durumundayken florofor floresansı söndürücüye yakınlığı nedeniyle söndürülür. Ancak hedef DNA varlığında problar tamamlayıcı sekanslarına hibridize olur ve DNA polimerazın, DNA şablonu boyunca yeni oluşan iplikçiği sentezlerken 5ꞌ 3ꞌ ekzonükleaz aktivitesi ile hidrolize uğrar. Bunun sonucunda floroforlar söndürücü moleküllerden ayrılır ve floresan yayılır. BD MAX MRSA testi için kullanılan iki optik kanalda saptanan floresans miktarı doğrudan hidrolize uğrayan, karşılık gelen prob miktarıyla orantılıdır. BD MAX Sistemi bu sinyalleri her amplifikasyon döngüsünün sonunda ölçer ve verileri sonuç sağlamak üzere yorumlar. REAKTİFLER REF İçindekiler Miktar BD MAX MRSA Master Mix (A1) (Ana Karışım) Polimeraz, nükleotidler ve MRSA ya spesifik moleküler prob ve primerlerle birlikte Örnek İşleme Kontrolüne spesifik moleküler prob içeren kurutulmuş PCR Master Mix. BD MAX MRSA Reagent Strips (Reaktif Stripleri) Örnek işleme ve DNA ekstraksiyonu için gerekli tüm sıvı reaktifler ve tek kullanımlık pipet uçlarını içeren Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi. BD MAX MRSA Extraction Tube (A2) (Ekstraksiyon Tüpü) DNA manyetik afinite boncukları, Akromopeptidaz ve Örnek İşleme Kontrolü içeren Dondurularak kurutulmuş pellet BD MAX MRSA Sample Buffer Tube (Örnek Tampon Tüpü) (25 septum kapağıyla) GEREKLİ FAKAT SAĞLANMAMIŞ EKİPMAN VE MALZEMELER BD BBL CultureSwab Liquid Stuart tek veya çift swab (Becton Dickinson katalog no veya ), Copan (Venturi) Transystem Liquid Stuart tek veya çift swab (Copan, katalog no. 141C veya 139C) veya BD BBL CultureSwab Liquid Amies tek veya çift swab (Becton Dickinson katalog no veya ), Copan (Venturi) Transystem Liquid Amies tek veya çift swab (Copan, katalog no. 140C veya 138C) BD BBL CHROMagar Staph aureus (BD Diagnostic Systems katalog no ), BD BBL CHROMagar MRSA (BD Diagnostic Systems katalog no ), Mannitol Salt Agar (MSA) (BD Diagnostic Systems katalog no veya ) veya eşdeğer ortam (isteğe bağlı) VWR Multi-Tube Vortexer (VWR katalog no ) NALGENE Cryogenic Vial Holder (Sirojenik Flakon Tutucu) (VWR, katalog no ) Gram boyama reaktifi (isteğe bağlı) BD BBL Trypticase Soy Broth (5 ml) with 6.5% NaCl (%6,5 NaCl eklenmiş BD BBL Trypticase Soy Broth) (BD katalog no ) (isteğe bağlı) %5 koyun kanı agar plakası [örn. BBL Trypticase Soy Agar (TSA II) with 5% Sheep Blood, BD Diagnostic Systems katalog no veya ) (isteğe bağlı) Tek kullanımlık eldivenler, pudrasız Steril makas (isteğe bağlı) Steril Gazlı Bez Kronometre veya süre ölçer BD MAX PCR Cartridges (BD MAX PCR Kartuşları) (BD Diagnostic Systems katalog no ) UYARILAR VE ÖNLEMLER BD MAX MRSA testi, in vitro Diyagnostik Kullanım içindir. Son kullanma tarihi geçmiş reaktifler ve/veya materyalleri kullanmayın. Geldiğinde dış kartonu mühürleyen etiket bozulmuşsa kiti kullanmayın. Koruyucu poşetler geldiklerinde açık veya yırtıksa reaktifleri kullanmayın. Reaktifleri reaktif poşetleri içinde kurutucu yoksa veya açılmışsa kullanmayın. Kurutucuyu reaktif poşetlerinden çıkarmayın. Reaktiflerin koruyucu poşetini her kullanımdan sonra fermuar şeklinde kapanan mühürle kapatın. Mühürlemeden önce varsa poşetlerdeki fazla havayı çıkarın. Reaktifleri ısıya ve neme karşı koruyun. Neme uzun süre maruziyet ürün performansına etki edebilir. Folyo bozulmuş veya hasarlıysa reaktifleri kullanmayın. 24 test 24 test 24 test 24 test 2

3 Farklı poşetler ve/veya kitler ve/veya lotlardan reaktifleri karıştırmayın. Kontaminasyon oluşacağından ve test sonuçlarını olumsuz etkileyebileceğinden kapakları birbirleriyle değiştirmeyin veya tekrar kullanmayın. Ünitelendirilmiş Reaktif Stripleri uygun sıvı dolması için kontrol edin (sıvıların tüplerin alt kısmında olmasını sağlayın) (bkz. Şekil 1). Tüm pipet uçlarının var olduğundan emin olmak için Ünitelendirilmiş Reaktif Striplerini kontrol edin (bkz. Şekil 1). Master Mix ve Ekstraksiyon Tüpü barkod okunabilirliği bozulabileceğinden kimyasal solüsyonları kullanırken dikkatli davranın. Bu testin düzgün yapılması için uygun laboratuvar tekniği şarttır. Testin yüksek analitik hassasiyeti nedeniyle tüm malzeme ve reaktiflerin saflığını korumak için büyük dikkat gösterilmelidir. Laboratuvarın aynı genel alanında diğer PCR testlerinin yapıldığı durumlarda BD MAX MRSA testi, test için gereken herhangi bir ek reaktif ve BD MAX Sisteminin kontamine olmamasına dikkat edilmelidir. Her zaman reaktiflerin mikrobiyal ve deoksiribonükleaz (DNase) kontaminasyonundan kaçının. Reaktifler ve kartuşlar kullanılmadan önce eldivenler değiştirilmelidir. MRSA amplikonlu ortamların kontaminasyonunu önlemek için kullanım öncesinde BD MAX PCR Kartuşlarını açmayın. BD MAX PCR Cartridges mühürleri kontaminasyonu önleyecek şekilde tasarlanmıştır. Çapraz kontaminasyon riskinin en aza indirilmesi için laboratuvarda rutin olarak çevrenin izlenmesi gerekmektedir. BD MAX MRSA testinin örnek taşınması ve saklanması için tavsiye edilen süre ve sıcaklık aralıklarının dışına çıkılarak uygulanması geçersiz sonuçlara neden olabilir. Belirtilen süreler içinde yapılmayan testler tekrarlanmalıdır. Yerel, bölgesel ve/veya ulusal yönetmelikler veya sertifikasyon sağlayan kurumların gereklilikleri veya kılavuz ilkelere göre ek kontroller test edilebilir. Örnekleri her zaman bulaşıcı olabilirlermiş gibi ve CLSI Belgesi M29 3 de ve Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories de tanımlandığı şekilde güvenli laboratuvar prosedürlerine göre kullanın. 4 Tüm reaktifleri kullanırken koruyucu giysiler ve tek kullanımlık eldivenler kullanın. Testi yaptıktan sonra ellerinizi iyice yıkayın. Ağzınızla pipetlemeyin. Örneklerin veya kit reaktiflerinin kullanıldığı yerlerde sigara içmeyin, bir şey içmeyin, çiğnemeyin ya da yemeyin. Kullanılmamış reaktifleri ve atığı yerel, bölgesel, eyalet ve/veya federal yönetmeliklere göre atın. Ek uyarılar, önlemler ve prosedürler için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu na 7 başvurun. SAKLAMA VE STABİLİTE Örnekler taşıma sırasında 2 C ile 25 C arasında tutulmalıdır. Donmaya veya aşırı sıcağa maruz kalmaya karşı koruyun. Örnekler test yapılmasından önce 25 C de maksimum 48 saate kadar veya 2 8 C de maksimum 120 saate kadar (5 gün) saklanabilir. BD MAX MRSA testi reaktifleri ve bileşenleri 2 25 C de belirtilen son kullanma tarihine kadar stabildir. Son kullanma tarihi geçmiş bileşenleri kullanmayın. BD MAX MRSA Master Mix (Ana Karışım) ve Extraction Tubes (Ekstraksiyon Tüpleri) mühürlenmiş poşetlerde sağlanır. Ürünü nemden korumak için açtıktan hemen sonra tekrar mühürleyin. Reaktif tüpleri, poşetin ilk açılışından ve tekrar mühürlenmesinden sonra 2 25 C de 7 güne kadar stabildir. Rekonstitüsyon Yapılmamış Ekstraksiyon ve Ana karışım reaktif tüpleri koruyucu paketinden çıkarıldıktan sonra 3 saate kadar 2 25 C sıcaklıkta stabildir. KULLANIM TALİMATLARI Numune Toplama/Nakil Önerilen swab taşıma cihazının kullanılması (Gereken Ama Sağlanmayan Ekipman ve Materyaller kısmına bakın), nazal örnekler kurumsal ve laboratuvar standardı çalışma prosedürlerine ve/veya aşağıdakilere göre toplanmalıdır: 1. Swab ları iki damla (yaklaşık 50 µl) steril fizyolojik salinle nemlendirin veya kuru olarak kullanın. 2. Swab ları dikkatle hastanın burun deliğine yerleştirin (swab ucu burun kanadının kenarından 2,5 cm (1 inç) mesafeye kadar yerleştirilmelidir). 3. Swab ları ikinci burun deliğinde 5 kez mukozayla yuvarlayın. 4. Aynı swab ları ikinci burun deliğine yerleştirin ve 2. ve 3. adımları tekrarlayın. 5. Swab ları kendi taşıma tüpüne yerleştirin. 6. Taşıma tüpünü etiketleyin. 7. Swab ları laboratuvara kurumun standart işletim prosedürlerine göre taşıyın (Saklama ve Stabilite kısmına bakın). Numune Hazırlama NOT: Test edilecek her numune ve her Harici Kontrol için bir (1) Örnek Tampon Tüpü, bir (1) Septum Kapağı, bir (1) Ana Karışım (A1), bir (1) Ekstraksiyon Tüpü (A2) ve bir (1) Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi gereklidir. NOT: BD MAX MRSA testi yapmadan önce klinik numunelerden kültür alma ayrıntıları için Klinik Numunelerden Kültür Alınması kısmına bakın. 1. Örnek ve çalıştırılacak Harici Kontrol sayısına karşılık gelen Örnek Tampon Tüpü (şeffaf kapak) sayısını koruyun. 2. Barkodların net olduğundan, üzerine yazılmadığından veya etiketlenmediğinden emin olarak her Örnek Tampon Tüpünü uygun hasta kimliğiyle etiketleyin. 3. Örnek Tampon Tüpünün kapağını çıkarın. 3

4 4. Örnek taşıma tüpünden swab ı çıkarıp karşılık gelen Örnek Tampon Tüpüne yerleştirin. 5. Swab ı Örnek Tampon Tüpünün kenarına yakın olarak sapından tutun (kontaminasyon riskini en aza indirmek için steril gazlı bez kullanın). Swab ı, Örnek Tampon Tüpünün en dibinden yaklaşık bir (1) cm kaldırın ve kırmak için tüpün kenarına doğru bükerek kırın. Alternatif yöntem: sapı kesmek için steril bir makas kullanın. 6. Örnek Tampon Tüpünü bir septum kapağıyla kapatın. 7. Örnek Tampon Tüpünü NALGENE Kriyojenik Flakon Tutucuya yerleştirin ve Çoklu Tüp Vorteksleyici ile bir (1) dakika boyunca maksimum hızda vorteksleyin. Çoklu Tüp Vorteksleyici ile aynı anda en çok 24 örnek vortekslenebilir. BD MAX Sisteminin Çalışması NOT: Ayrıntılı talimat için BD MAX System Kullanıcı El Kitabına 7 başvurun (Çalıştırma kısmı). NOT: BD MAX MRSA testinin test edilmesi yukarıdaki vorteksleme adımından hemen sonra yapılmalıdır (Numune Hazırlama, Adım 7). Yeniden test etmek gerekirse örnekleri yeniden vorteksleyin. 1. BD MAX Sisteminin gücünü açın (daha önce yapılmadıysa) ve <user name> (kullanıcı adı) ve <password> (şifre) girerek oturum açın. 2. Reaktifler ve kartuşlar kullanılmadan önce eldivenler değiştirilmelidir. 3. BD MAX MRSA kitinden gerekli sayıda Ünitelendirilmiş Reaktif Stripleri çıkarın. Her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribini, tüm sıvıların tüplerin alt kısmında olmasını sağlayacak şekilde sert bir yüzeye hafifçe vurun. 4. Gerekli sayıda Ekstraksiyon Tüpü/Tüpleri ve Master Mix Tüpü/Tüplerini koruyucu poşetlerinden çıkarın. Fazla havayı çıkarın ve poşetleri fermuar şeklinde kapanan mühür ile kapatın. 5. Test edilecek her örnek için bir (1) Ünitelendirilmiş Reaktif Stribi BD MAX System Rack a, Rak A Pozisyon 1 ile başlayarak yerleştirin. 6. Bir (1) Ekstraksiyon Tüpünü (beyaz folyo) Şekil 1 de gösterildiği gibi her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribinde Pozisyon 1 içine tıklatarak oturun. 7. Bir (1) Master Mix Tube ü (yeşil folyo) Şekil 1 de gösterildiği gibi her Ünitelendirilmiş Reaktif Stribinde Pozisyon 2 içine tıklatarak oturun Atık Pipet Uçları Tamponlar Ekstraksiyon Tüpü Master Mix Tüpü Şekil 1: BD MAX MRSA Extraction Tubes ve Master Mix Tubes ü (Ekstraksiyon Tüpleri ve Ana Karışım Tüpleri) Ünitelendirilmiş Reaktif Striplerine tıklatarak oturtun. 8. Run (Çalıştır) simgesine tıklatın ve barkodu tarayıcıyla tarayarak veya manuel giriş yaparak (lot izlenebilirliği için) BD MAX MRSA testi için kit lot numarasını girin. NOT: Adım 8 i her yeni kit lot kullanıldığında tekrarlayın. 9. Çalışma Listesi nde gezinin. Aşağı açılan menüyü kullanarak <BD MAX MRSA> öğesini seçin. 10. Çalışma Listesine Örnek Tampon Tüpü Kimliği, Hasta Kimliği ve Erişim Numarasını (varsa) barkodu tarayıcıyla tarayarak veya manuel olarak girin. 11. Aşağı açılan menüden uygun kit lot numarasını seçin (dış kutuda bulabilirsiniz). 12. Geriye kalan tüm Sample Buffer Tube leri için 9 11 e kadar olan adımları tekrarlayın. 13. Sample Buffer Tube lerini adım 5 ila 7 de belirtildiği gibi ilgili Ünitelendirilmiş Reaktif Striplerine karşılık gelen BD MAX System Rack(lar) içine yerleştirin. NOT: Sample Buffer Tube lerini, 1D barkod etiketleri dışarıya bakacak şekilde (böylece örnek kaydedilirken Sample Buffer Tube leri daha kolay taranabilir) örnek rafına/raflarına yerleştirin. 14. BD MAX System e gereken sayıda BD MAX PCR Cartridge(s) yerleştirin (bkz. Şekil 2). Her BD MAX PCR Cartridge en fazla 24 örnek barındırır. BD MAX System, her çalışma için BD MAX PCR Cartridge da pozisyon ve sırayı otomatik olarak seçer. BD MAX PCR Kartuşları tüm şeritler kullanılıncaya dek birden çok kez kullanılabilir. 4

5 BD MAX PCR Kartuşlarının kullanımını maksimuma çıkarmak için, 2000 Sample Mode u kullanarak, şerit atamaları için Worklist (Çalışma listesi) sekmesinin altında Run Wizard ı (Sihirbazı Yürüt) seçin. Daha fazla ayrıntı için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu na başvurun. Şekil 2: BD MAX PCR Cartridge larını yükleyin. 15. Rafı/rafları BD MAX System üzerine yükleyin (bkz. Şekil 3). A Tarafi A A Tarafi B Şekil 3: Rakı/Rakları BD MAX Sistemi ne yükleyin. 16. BD MAX Sistemi kapağını kapatın ve işleme başlamak için <Start> (Başlat) öğesine tıklayın. 17. Çalışma sonunda, sonuçları hemen kontrol edin veya Sample Buffer Tube leri 2 8 C de 5 güne kadar VEYA 25 ± 2 C de sonuçlar kontrol edilinceye kadar maksimum 36 saat saklayın. NOT: Bir çalışma sırasında bir septum kapağı hasar görmüşse örneği saklamadan önce yenisiyle değiştirin. NOT: Hazırlanmış BD MAX MRSA Sample Buffer Tube leri (Örnek Tampon Tüpleri), örnek, Örnek Tampon Tüpüne eklendikten sonra 2 8 C de maksimum 120 sa (5 gün) VEYA 25 ± 2 C de maksimum 36 sa saklanabilir. Bir IND (Belirsiz), UNR (Çözümlenmemiş) veya INC (Eksik) sonuç elde edildiğinde veya bir Harici Kontrol hatası oluştuğunda bu zaman çerçevesi içinde hazırlanan Sample Buffer Tube ten bir test tekrarı yapılmalıdır ( Tekrar Test Prosedürü kısmına bakın). KALİTE KONTROLÜ Kalite kontrol prosedürleri test performansını izler. Laboratuvarlar, tüm analitik sürecin etkililiğini izlemek için yerel, bölgesel, eyalet, ulusal ve/veya ülke yönetmeliklerinin ya da sertifikasyon sağlayan kurumların kılavuz ilkelerine veya gerekliliklerine göre kontrol malzemelerinin sayısını, türünü ve test edilme sıklığını ortaya koymalıdır. Genel Kalite Kontrolü rehberliği için CLSI MM3 ve EP12. 5,6 kısımlarına bakabilirsiniz. 1. Harici Kontrol materyallerini BD sağlamaz. Örnek test sonucunu yorumlamak amacıyla BD MAX Sistemi yazılımı tarafından harici Pozitif veya Negatif Kontroller kullanılmaz. Harici kontroller hasta örnekleriymiş gibi ele alınır. (Harici Kontrol test sonuçlarının yorumlanması için Sonuçların Yorumlanması bölümündeki tabloya bakın.) 2. Bir (1) Harici Pozitif Kontrol ve bir (1) Harici Negatif Kontrol her bir laboratuvar düzeninde BD MAX Sistemi nde yeterli işlem doğrulama elde edilinceye kadar en azından günlük olarak çalışılmalıdır. Kontrol testinin azaltılmış sıklığı ilgili yönetmeliklere uygun olmalıdır. 3. Harici Pozitif Kontrol, önemli reaktif hatalarını izlemek üzere tasarlanmıştır. Harici Negatif Kontrol hedef nükleik asitlerle reaktif veya çevresel kontaminasyonu (veya taşımayı) saptamak üzere tasarlanmıştır. 5

6 4. Kullanıcının laboratuvar kalite kontrolü programı için en uygun kontrolü seçmesini mümkün kılmak üzere çeşitli tiplerde Harici Kontroller önerilir. a. Harici Negatif Kontrol: Ticari olarak temin edilebilir kontrol malzemesi [örn., Metisiline duyarlı Staphylococcus aureus suşu (ATCC 25923)] veya negatif olduğu bilinen önceden karakterize edilen örnek. BD, kontrol preparatının sonucu olarak kontaminasyon potansiyelini azaltmak için Harici Negatif Kontrol ün Harici Pozitif Kontrol den önce hazırlanmasını önerir. b. Harici Pozitif Kontrol: Ticari olarak temin edilebilir kontrol malzemesi [örn. bir referans MRSA suşu (ATCC 43300)] veya pozitif olduğu bilinen önceden karakterize edilen örnek. Harici Kontrol süspansiyonlarının hazırlanması için, izolatların salin solüsyonda 0.5 McFarland (~1 X 10 8 CFU/mL) turbiditede yeniden süspanse edilmesi önerilir. ~8,0 X 10 3 CFU/mL nihai süspansiyon elde edecek şekilde salin içinde seri dilüsyonlar gerçekleştirin. Seyreltilmiş bakteriyel süspansiyona bir swab daldırın, fazla sıvıyı çıkarın ve swab ı karşılık gelen Örnek Tampon Tüpüne yerleştirin. Örnek gibi işleme koyun ve test edin (Örnek Hazırlama ve BD MAX Sisteminin Çalışması kısımlarına bakın). 5. Tüm Harici Kontroller beklenen sonuçları vermeli (Harici Pozitif Kontrol için pozitif, Harici Negatif Kontrol için negatif) ve hiç başarısız harici kontrol olmamalıdır (Çözümlenmemiş veya Belirsiz sonuçlar). 6. Pozitif test sonucu veren bir Harici Negatif Kontrol bir örnek muamelesi ve/veya kontaminasyon olayına işaret eder. Karışma ve/veya kontaminasyondan kaçınmak için numune muamele tekniğini gözden geçirin. Negatif bir sonuç veren bir Harici Pozitif Kontrol bir numune muamelesi/hazırlık problemine işaret eder. Örnek muamelesi/hazırlık tekniğini gözden geçirin. 7. Bir Çözümlenmemiş, Belirsiz veya Eksik test sonucu veren bir Harici Kontrol, bir reaktif veya BD MAX Sistemi başarısızlığına işaret eder. BD MAX Sistemi monitörünü herhangi bir hata mesajı açısından kontrol edin. Uyarı ve hata kodlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı El Kitabında 7 Sistem Hata Özeti kısmına başvurun. Problem devam ederse açılmamış bir poşetten reaktifler kullanın veya yeni bir test kiti kullanın. 8. Her Ekstraksiyon Tüpü bir sentetik hedef DNA dizisi içeren bir plazmid olan bir Örnek İşleme Kontrolü içerir. Testin öngörüsünü sağlayarak, işlenen numunede bulunan DNA ile birlikte Örnek İşleme Kontrolü çıkarılır, yerleştirilir ve amplifiye edilir. Örnek İşleme Kontrolü, örnek işleme adımları sırasında DNA yakalama, yıkama ve DNA elüsyonunun etkinliğini ve ayrıca PCR analizi sırasında amplifikasyonu ve saptamanın etkinliğini izler. Örnek İşleme Kontrolü sonucu kabul kriterlerini karşılayamazsa, örnek sonucu Çözülmemiş olarak rapor edilir; ancak, tüm pozitif (POS) test kiti sonuçları rapor edilir ve hiçbir hedef NEG. olarak adlandırılmaz, Çözülmemiş bir sonuç numuneyle ilişkili inhibisyonun veya reaktif hatasının bir sonucudur. Çözümlenmemiş olarak bildirilen herhangi bir numuneyi aşağıdaki Tekrar Test Prosedürü kısmına göre tekrarlayın. SONUÇLARIN YORUMLANMASI Sonuçlar BD MAX Sistem monitöründe Results (Sonuçlar) penceresinde Results (Sonuçlar) sekmesinde bulunur. BD MAX Sistem yazılımı otomatik olarak test sonuçlarını yorumlar. Bir test sonucu hedef ve Örnek İşleme Kontrolünün amplifikasyon durumu temelinde NEG (negatif), POS (pozitif) veya UNR (çözümlenmemiş) olarak belirtilebilir. IND (belirsiz) veya INC (eksik) sonuçlar BD MAX Sistemi başarısızlığı nedeniyledir. Sonuçlar aşağıdaki karar algoritmasını temel alır: Bildirilen test sonucu MRSA POS MRSA NEG MRSA UNR Tablo 1: BD MAX MRSA Testi Sonuç Yorumlama 6 SONUCUN YORUMLANMASI MRSA DNA saptandı MRSA DNA saptanmadı Çözümlenmemiş inhibitör örnek veya reaktif başarısızlığı; hedef veya Örnek İşleme Kontrolü amplifikasyonu yok IND BD MAX Sistem arızasına bağlı Belirsiz sonuç (Uyarı veya Hata Kodlarıyla birlikte a ) INC Tamamlanmamış Çalışma (Uyarı veya Hata Kodları ile a ) a Uyarı ve hata kodlarının yorumlanması için BD MAX System Kullanıcı Kılavuzu nda Sorun Giderme 7 kısmına başvurun. TEKRAR TEST PROSEDÜRÜ NOT: Örnek hacmi nedeniyle, Sample Buffer Tube ten bir tekrar test yapılması için yeterli hacim mevcuttur C de saklanan Sample Buffer Tube ler için tekrar test örnekle ilk Sample Buffer Tube inokülasyonunun ardından 36 saat içinde yapılmalıdır. Alternatif olarak 2 8 C de saklanan Örnek Tampon Tüplerinden tekrar testi 120 saat (5 gün) içinde yapılmalıdır. NOT: Yeni örnekler tekrar örneklerle aynı çalışmada test edilebilir. Çözümlenmemiş Sonuç İnhibitör madde, hedef veya Örnek İşleme Kontrolü amplifikasyonunun düzgün bir şekilde yapılmaması durumunda çözülmemiş sonuçlar elde edilebilir. Numuneler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Numune Tampon Tüpleri yle tekrarlanabilir. Örneği/ örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX Sisteminin Çalışması bölümündeki bilgileri izleyerek tekrar başlayın. Belirsiz Sonuç Belirsiz sonuçlar, bir Sistem hatası olması durumunda alınabilir. Numuneler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Numune Tampon Tüpleri yle tekrarlanabilir. Örneği/örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX Sisteminin Çalışması bölümündeki bilgileri izleyerek tekrar başlayın. Uyarı veya hata kodu mesajlarının yorumlanması için BD MAX Kullanıcı El Kitabına 7 (Sorun Giderme kısmı) bakın. Eksik Sonuç Eksik sonuçlar, Örnek Hazırlama veya PCR tamamlanamazsa alınabilir. Numuneler, yukarıda tanımlanan zaman dilimlerinde ilgili Numune Tampon Tüpleri yle tekrarlanabilir. Örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX Sisteminin Çalışması kısmını izleyerek tekrar başlayın. Uyarı veya hata kodu mesajlarının yorumlanması için BD MAX Sistemi Kullanıcı El Kitabına 7 (Sorun Giderme kısmı) bakın.

7 Harici Kontrol Hatası Harici Kontroller test edildiklerinde beklenen sonuçlar vermelidir. Örneklerin hatalı bir Harici Kontrol sonucu nedeniyle tekrarlanması gerekirse, Örnek Tampon Tüplerinden taze hazırlanmış Harici Kontroller ile birlikte yukarıda tanımlanan zaman çerçeveleri içinde tekrarlanmaları gerekir. Örnekleri bir (1) dakika boyunca vorteksleyin ve BD MAX Sisteminin Çalışması bölümündeki bilgileri izleyerek tekrar başlayın. Klinik Örneklerden Kültür Alınması Antimikrobiyel duyarlılık veya epidemiyolojik tip belirleme amacıyla, numune hazırlama prosedürünü gerçekleştirmeden önce (Streak-Plate yöntemi kullanılarak) veya numune hazırlama prosedüründen sonra (Enrichment Broth yöntemi kullanılarak) klinik numuneler toplama cihazlarından (swab) kültün alabilir. Swab lar 2 8 C sıcaklıkta 36 saat, kültür alınmadan önce, hastane prosedürlerine göre Örnek Tampon Tüplerinde saklanabilir. PROSEDÜRÜN KISITLI OLDUĞU ALANLAR Bu ürün, Gerekli Fakat Sağlanmamış Ekipman ve Malzemeler kısmında listelenin numune toplama ve aktarma cihazları kullanılarak toplanan nazal swab numuneleriyle kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Bu ürün sadece BD MAX Sistemiyle kullanılmalıdır. Yanlış test sonuçlarının nedeni uygunsuz örnek toplama, muamele veya saklama, teknik hata, örnek karışması veya örnekteki organizma sayısının testin analitik duyarlılığının altında olması olabilir. Hatalı sonuçları önlemek için prospektüs talimatı ve BD MAX Sistemi Kullanıcı El Kitabına 7 dikkatle uymak gereklidir. Tarama belirli bir zamanda kolonizasyon durumunu gösterir. Kolonizasyon hastanın aldığı tedavi (örn., dekolonizasyon rejimi), hastanın durumu (örn., geçici MRSA kolonizasyonu) veya yüksek riskli ortamlara maruz kalma (örn., MRSA taşıyıcısıyla temas ve/veya uzun süreli hastanede yatma) gibi durumlarla değişebilir. Kolonizasyon durumu kurumsal politikalara göre izlenmelidir. BD MAX MRSA pozitif bir sonuç DNA varlığında devam edebileceğinden eradikasyon tedavisi başarısızlığını kesin olarak göstermez. Daha önceki bir pozitif test sonucundan sonraki negatif bir sonuç eradikasyon tedavisi başarısını gösterebilir veya aralıklı kolonizasyon nedeniyle olabilir. Pozitif bir test sonucu canlı organizmaların mutlaka bulunduğu anlamına gelmez. Pozitif bir sonuç, MRSA DNA varlığının bir göstergesidir. BD MAX MRSA testi, SCCmec kasetini (meca genini taşır) ve orfx geni içinde yer alan Staphylococcus aureus a spesifik bir diziyi aynı anda saptar. Literatürde farklı MRSA klinik izolatlarının SCCmec/orfX bileşkesinin dizi analizleri temelinde yirmi (20) MREJ genotipi (MREJ genotipi i xx) tanımlanmıştır. MREJ genotipi SCCmec tipiyle korelasyon göstermez yani bilinen SCCmec tipinin her biriyle farklı MREJ genotipleri ilişkili olabilir. BD MAX MRSA testi sadece MREJ genotipi i, ii, iii, iv, v ve vii saptamak üzere tasarlanmıştır; bu altı (6) MREJ genotipi bugüne kadar BD Diagnostics tarafından test edilen dünya çapındaki suşların %98 den fazlasını oluşturur. BD MAX MRSA testi diğer MREJ genotiplerini saptamayabilir ve yalancı negatif sonuçlara yol açabilir. Yeni bir meca varyantı olanmeca LGA251 gen mutasyonunu taşıyan Metisiline dirençli Staphylococcus aureus suşları, yanlış negatif sonuçlarla sonuçlanacak şekilde BD MAX MRSA testi tarafından saptanmayabilir. BD MAX MRSA testi meca genini ve bu genin kodladığı penisilin bağlayıcı proteini (PBP2a) saptamaz. Bir boş kaset Staphylococcus aureus varyantı mevcutsa yalancı pozitif bir MRSA sonucu oluşabilir. BD MAX MRSA testi, Sınırda Oksasiline Dirençli Staphylococcus aureus u (BORSA) saptamaz. BORSA suşlarındaki oksasilin direnci mekanizması meca genine değil, artan β laktamaz üretimine bağlıdır. BORSA suşları ABD de nadir görülür. BD MAX MRSA testinin modifiye Staphylococcus aureus un (MOD-SA) saptanmasındaki performansı, bu suşlar değerlendirilmediğinden bilinmemektedir. MOD-SA suşundaki oksasilin direnci mekanizması, penisilin bağlayıcı proteinlerinin afinitisinde değişiklik nedeniyle meca geni değildir. MOD-SA suşları ABD de nadir görülür. Analitik Spesifiklik çalışması sırasında test edilen 213 hedef dışı organizmadan, 5 suş ilk olarak yanlış pozitif bir sonuç vermiştir, ancak daha sonra kontaminasyon nedeniyle olduğu kanıtlanmıştır. Tekrarla birlikte, 5 suşun tümü beklenen negatif sonuçları oluşturmuştur. Tüm PCR tabanlı in vitro diyagnostik testlerde olduğu gibi testin LoD altında çok düşük hedef düzeyleri saptanabilir ama sonuçlar tekrar edilemeyebilir. Yüksek konsantrasyonda Tobramisin, BD MAX MRSA testinde hafif inhibisyon yapabilir (Daha fazla ayrıntı için Enterferans Yapan Maddeler kısmına bakınız). Yalancı negatif sonuçlar numunelerin yetersiz toplanması, taşınması veya saklanması sonucunda nükleik asit kaybı veya yetersiz bakteriyel hücre lizisi nedeniyle oluşabilir. Örnek İşleme Kontrolü teste PCR amplifikasyonu inhibitörleri içeren örneklerin tanımlanmasına yardımcı olmak üzere eklenmiştir. Örnek İşleme Kontrolü nükleik asidin örneklerin yetersiz toplanması, taşınması veya saklanması nedeniyle kaybedilip kaybedilmediğini veya bakteriyel hücrelerin yetersiz lizise uğrayıp uğramadığını belirtmez. BD MAX MRSA testi sonuçları bazen geçersiz Örnek İşleme Kontrolü nedeniyle çözümlenmemiş olabilir veya enstrüman arızası nedeniyle belirsiz veya eksik olabilir ve son sonuçların elde edilmesinde gecikmeye neden olabilecek şekilde tekrar test yapılmasını gerektirebilir. Primer veya prob bağlayıcı bölgelerdeki mutasyonlar veya polimorfizmler yeni veya bilinmeyen MRSA varyantlarının saptanmasını etkileyebilir ve BD MAX MRSA testi ile yalancı negatif bir sonuç verebilir. Tüm in vitro diyagnostik testlerle olduğu gibi pozitif ve negatif prediktif değerler prevalansa yüksek ölçüde bağlıdır. BD MAX MRSA testi performansı prevalansa ve test edilen popülasyona göre değişebilir. BD MAX MRSA testi, BD MAX Sisteminden yalnızca iki optik kanalın kullanımını gerektirir; sırasıyla FAM ve ROX floroforlarının saptanması için Yeşil ( nm) ve Turuncu ( nm). Kalan optik kanalların performansını bu test gerçekleştirmez. 7

8 BEKLENEN DEĞERLER BD MAX MRSA testi klinik çalışmasında coğrafi olarak ayrı 4 ABD klinik çalışma yerinde, Doğrudan/Zenginleştirilmiş kültür kullanılarak toplam numune test edilmiştir. Çalışma popülasyonu yatan hasta ve ayakta tedavi edilen hasta kategorileri şeklinde gruplandırılmıştır. Referans yöntemi ile belirlendiği şekliyle pozitif vakaların sayısı ve yüzdesi aşağıdaki tabloda sunulmuştur: Tablo 2: Hasta Grubuna göre Uyumlu Klinik Deney Katılım Özeti Doğrudan/Zenginleştirilmiş Kültür ile MRSA Grup Toplam Sayı Pozitif Sayı Negatif Sayı Yaygınlık a Yatan Hasta %9,0 (133/1.473) Ayakta Tedavi Edilen Hasta %6,0 (26/430) Toplam b %8,4 (159/1.903) a Yalnızca referans yöntem kullanılarak prevalans. b Uyumlu referans yöntemi sonuçlarına göre toplam numune. PERFORMANS ÖZELLİKLERİ Klinik Performans BD MAX MRSA testinin klinik performans özellikleri, çok merkezli bir prospektif araştırma çalışmasında belirlenmiştir. Çalışmaya dört (4) araştırma merkezi katılmıştır. Çalışmaya kaydolmak için hastaların, kurum politikaları doğrultusunda MRSA testine uygun olmaları gerekmiştir. Klinik çalışma yeri politikalarına göre hedeflenmiş tarama için uygunluk gereklilikleri arasında verilenlerle sınırlı olmamak üzere şunlar vardı: sağlık hizmeti veren belirli bir sisteme kabul edilen hastalar; Yoğun Bakım Ünitesine kabul edilen hastalar; Yoğun Bakım Ünitesine aktarılan hastalar; elektif cerrahi öncesindeki hastalar ve uzun dönemli bakım tesislerinden kabul edilen hastalar. Çalışmaya önceden kayıtlı hastalara ait numuneler dahil edilmemiştir. Karşılaştırmalı Referans Yöntemi doğrudan kültürden oluşur zenginleştirilmiş kültürle tamamlanır. Zenginleştirilmiş kültür analizi, doğrudan kültürle MRSA ile ilgili negatif olan tüm numuneler için tamamlanmıştır. Kanlı Agarda (BA) alt kültür oluşturmuş selektif (Staphylococcus aureus) kromojenik araçlarda varsayılan Staphylococcus aureus kolonileri gözlemlendi. Tanımlama bir aglütasyon testi ile yapılırken Metisilin direnci Sefoksitin diski (30 μg) difüzyon duyarlılık testiyle doğrulandı. Metisilin dirençli Staphylococcus aureus başlangıç yöntemiyle doğrulanmadığında %6,5 NaCl ile Triptik Soy Buyyon (%6,5 NaCl ile TSB) içinde geliştirme uygulandı. Turbid TSB %6,5 NaCl soya, ek kromojenik araçlar ve BA (Kanlı Agar) plaklarını inoküle etmek için kullanıldı; MRSA doğrulaması yukarıda tanımlandığı şekilde yapıldı bildirilebilir sonuç vardı (bkz. Tablo 3 ve 5); 106 nazal sürüntü numunesi klinik çalışma protokolüyle uyumlu olmadığı için performans analizinden hariç tutuldu. Referans Yöntemiyle (Doğrudan/Zenginleştirilmiş kültür) karşılaştırıldığında BD MAX MRSA testi, MRSA nın %93,0 ını pozitif numune, MRSA nın %95,9 unu de negatif numune olarak tanımladı (bkz. Tablo 4). Test edilen popülasyon için bu durum %99,3 Negatif Prediktif Değer (NPV), %67,3 Pozitif Prediktif Değere (PPV) karşılık gelmektedir. Tablo 3: BD MAX MRSA Testi ile Elde Edilen ve Referans Yöntemle Karşılaştırmalı Sonuçlar Tüm Çalışma Merkezleri BD MAX MRSA testi Referans Yöntem + - Toplam Toplam a a Referans ve PCR uyumlu olan numunelerin toplam sayısı Tablo 4: BD MAX MRSA Testiyle Elde Edilen Performansın Referans Yöntemiyle Karşılaştırılması Klinik Çalışma Merkezleri Yaygınlık a %95 GA ile hassasiyet b %95 GA ile özgüllük b Çalışma Merkezi 1 %5,6 (28/496) %100,0 (28/28) (%87,9, %100,0) %95,8 (435/454) (%93,6%, %97,3) Çalışma Merkezi 2 %4,6 (23/505) %91,3 (21/23) (%73,2, %97,6) %96,5 (465/482) (%94,4, %97,8) Çalışma Merkezi 3 %13,2 (55/417) %90,9 (50/55) (%80,4, %96,1) %95,8 (346/361) (%93,3, %97,5) Çalışma Merkezi 4 %10,9 (53/485) %92,2 (47/51) (%81,5, %96,9) %95,3 (407/427) (%92,9, %96,9) Genel c %8,4 (159/1.903) %93,0 (146/157) (%87,9, %96,0) %95,9% (1.653/1.724) (%94,8, %96,7) a Yalnızca referans yönteme dayalı prevalans b GA: Güven Aralıkları c numune referans yöntemle uyumludur Doğrudan kültürle karşılaştırıldığında, BD MAX MRSA testinde MRSA pozitif numunelerin %95,0 ı ve MRSA negatif numunelerin %95,2 si tanımlanmıştır (bkz. Tablo 6). 8

9 Tablo 5: BD MAX MRSA Testi ile Elde Edilen Sonuçların Doğrudan Kültürle Karşılaştırılması Tüm Çalışma Merkezleri BD MAX MRSA Testi Doğrudan kültür + - Toplam Toplam Tablo 6: BD MAX MRSA Testiyle Elde Edilen Performansın Doğrudan Kültürle Karşılaştırılması Klinik Çalışma Merkezleri %95 GA ya sahip Pozitif Benzerlik a %95 GA ya sahip Negatif Benzerlik a a GA: Güven Aralıkları Çalışma Merkezi 1 %100,0 (22/22) (%85,1, %100,0) %94,6 (435/460) (%92,1, %96,3) Çalışma Merkezi 2 %95,5 (21/22) (%78,2, %99,2) %96,5 (466/483) (%94,4, %97,8) Çalışma Merkezi 3 %94,1 (48/51) (%84,1, %98,0) %95,3 (348/365) (%92,7, %97,1) Çalışma Merkezi 4 %93,3 (42/45) (%82,1, %97,7) %94,2 (408/433) (%91,6, %96,1) Genel %95,0 (133/140) (%90,0, %97,6) %95,2 (1.657/1.741) (%94,1, %96,1) BD MAX MRSA testi ile test edilen uyumlu nazal sürüntü numunesi içinde 10 u (%0,5) ilk testten sonra Çözümlenmemiş olarak bildirildi (bkz. Tablo 7). Tekrar testinden sonra Çözümlenmemiş Oran numune sonucuna göredir (Başlangıç Çözümlenmemiş sonuçları ile 2 numune tekrar test edilmemiştir). Tekrar testinden sonra tüm numunelerin bildirilebilir sonuçları vardı. Klinik Çalışma Merkezleri Tablo 7: Çözümlenmemiş Oranlar %95 GA ile başlangıçta Çözümlenemeyen Oran a %95 GA ile Tekrar Sonrasında Çözümlenmemiş oranı a Çalışma Merkezi 1 %0,8 (4/484) (%0,3, %2,1) %0,0 (0/483) (%0,0, %0,8) Çalışma Merkezi 2 %0,0 (0/505) (%0,0, %0,8) %0,0 (0/505) (%0,0, %0,8) Çalışma Merkezi 3 %0,2 (1/416) (%0,0, %1,3) %0,0 (0/416) (%0,0, %0,9) Çalışma Merkezi 4 %1,0 (5/479) (%0,4, %2,4) %0,0 (0/478) (%0,0, %0,8) Genel %0,5 (10/1.884) b (%0,3, %1,0) %0,0 (0/1.882) (%0,0, %0,2) a GA: Güven Aralıkları b numune PCR yöntemiyle uyumludur BD MAX MRSA testi ile test edilen nazal swab numunesinden 24 ü (%1,3) başlangıç testinden sonra Belirsiz olarak bildirildi; tekrar testinden sonra 2 si (%0,1) Belirsiz kaldı. Yetmiş üç (%3,8) numune başlangıç testinden sonra Eksik olarak bildirildi; tekrar testinden sonra Eksik olarak bildirilen numune olmadı (%0,0). Analitik Duyarlılık BD MAX MRSA testi için analitik hassasiyet (Saptama Limiti veya LoD, Limit of Detection) şu şekilde saptanır: simüle edilen pozitif örnekler 6 MREJ genotipini (i, ii, iii, iv, v ve vii) ve 4 SCCmec tiplerini (I, II, III, IV) temsil eden 6 MRSA suşundan oluşan kültürlerden hazırlanmış ve kantifiye edilmiş çok çeşitli MRSA bakteriyel süspansiyonlarına swab ların batırılmasıyla hazırlanmıştır. Swab lar daha sonra biriktirilen negatif klinik nazal matrikse yerleştirilmiştir. Her MRSA suşu her konsantrasyonda 24 replikat olarak 2 farklı kullanıcı tarafından 3 farklı BD MAX MRSA testi üretim lotu kullanarak çalışılmıştır. Replikatların %95 inin pozitif test edildiği en düşük konsantrasyon olarak tanımlanan analitik hassasiyet (LoD), swab başına 273 ile 645 CFU aralığında değişmiştir (bkz. Tablo 8). a GA: Güven Aralıkları Tablo 8: BD MAX MRSA Testinin Saptama Limiti MRSA Suşu MREJ Genotipi SCCmec Tipi LoD Konsantrasyonu [CFU/swab (%95 GA a )] 1 tip i I 645 (314, 1.326) 2 tip ii II 400 (237, 678) 3 tip iii III 346 (197, 608) 4 tip iv III 490 (264, 908) 5 tip v IV 273 (148, 504) 6 tip vii II 357 (215, 594) 9

10 Analitik Dahil Olma Analitik dahil etme çalışması, bir dizi Metisilin dirençli Staphylococcus aureus suşları kullanılarak, coğrafi çıkışı, MREJ genotipi, SCCmec tipi, puls alan jel elektroforezi (PFGE) tipi, temporal çeşitlilik ve duyarlılık paterni dikkate alınarak gerçekleştirilmiştir. Bu çalışmada kamu koleksiyonlarından ve iyi karakterize edilmiş klinik izolatlardan örnek Vankomisine dirençli Staphylococcus aureus (VRSA) ve Vankomisin ara Staphylococcus aureus (VISA) suşları dahil olmak üzere 30 ülkeden yetmiş yedi (77) suş dahil edilmiştir. BD MAX MRSA testi, test edilen i, ii, iii, iv, v ve vii (vahşi ve mutant) MREJ tiplerinin tümünü düşük bakteriyel yükte (2 3 x LoD) saptamıştır. BD MAX MRSA testi 2 3 x LoD da MRSA SCCmec tipleri I, II, III, IV, V ve VI, VII ve VIII ve ayrıca MRSA PFGE tipleri USA 100 ila 800, ve ü saptamıştır. Metisiline ek direnç gösteren tüm Staphylococcus aureus suşları (VRSA ve VISA) da saptanmıştır. İyi Karakterize Edilmiş bir Karşılaştırma Suşu Panelinin Değerlendirilmesi Aşağıdakileri içeren iyi düzenlenmiş karşılaştırma suşu panelini kullanarak BD MAX MRSA testinin analitik performansını değerlendirmek için ek bir analitik çalışma gerçekleştirilir: PFGE tipleri USA 100, 300 ve 400 dahil yüksek ve düşük Oksasilin minimum inhibitör konsantrasyonlarıyla (MIC ler) MRSA suşları BORSA suşları (sınırda Oksasiline dirençli Staphylococcus aureus u suşları). Metisiline duyarlı Staphylococcus aureus (MSSA) suşları Metisiline dirençli Staphylococcus epidermidis (MRSE) suşları Bu çalışmada kullanılan karşılaştırma paneli 17 MRSA, 4 BORSA, 1 MRSE ve 5 MSSA suşundan oluşmaktadır. Test edilen tüm MRSA suşları (PFGE tipleri USA 100, 300 ve 400 dahil) düşük bakteriyel yükte (2 3 x LoD) test edildiğinde pozitif sonuçlar göstermiştir. Tüm BORSA, MSSA ve MRSE suşları yüksek bakteriyel yüklerde test edildiğinde negatif sonuçlar vermiştir. Analitik Özgüllük BD MAX MRSA testi, MRSA saptamaları amacıyla testin özgüllüğünü belirtmek için BD MAX Sistemini kullanarak hedef olmayan organizmaları içeren örneklerde gerçekleştirilmiştir. En az 10 6 CFU/mL konsantrasyonda test edilen stafilokoksik olmayan çeşitli 57 suşun eli yedisi (57) BD MAX MRSA testi ile negatif sonuç vermiştir. 29 numuneyi temsil eden kırk beş (45) Koagülez Negatif stafilokoksik suşu (CoNS) ve Koagülez Pozitif stafilokoksik suşu BD MAX MRSA testi ile 0.5 McFarland konsantrasyonunda test edilmiştir. BD MAX MRSA testi ile test edilen 45 suşun kırk beşi (45) negatif sonuç göstermiştir. Aşırı derecede yüksek konsantrasyonlarda (> 10 6 CFU/swab) test edilmiş 111 MSSA suşunun yüz on biri (111) BD MAX MRSA testi ile negatif sonuç vermiştir. 12 farklı viral numunede temsil edilen on yedi (17) virüs 10 5 PFU/mL de test edilmiştir. BD MAX MRSA testi ile 17 virüsün hepsi negatif sonuç vermiştir. Etkileşen Maddeler BD MAX MRSA testi ile potansiyel enterferans açısından burun kanatlarında kullanılan veya nazal swab numunelerinde bulunan yirmi (20) biyolojik ve kimyasal madde değerlendirilmiştir (Tablo 9). MRSA negatif numuneleri ve MRSA pozitif numuneleri 2 3 x LoD değerinde örnek alma bölgesinde veya nazal swab numunesinde bulunması muhtemel olan her bileşenin en yüksek miktarı test edilmiştir. Sonuçlar, BD MAX MRSA testinde inhibisyon gösteren Tobramisin dışında bildirilecek enterferans belirtmemiştir, ancak, beklenen test sonuçlar hala elde edilmiştir. Tablo 9: BD MAX MRSA Testi ile Test Edilen Endojen ve Ticari Olarak Eksojen Maddeler Madde Sonuç a Madde Sonuç a Mucin, sığır çene altı bezlerinden NI Rhinocort aqua* NI Deksametazon Sodyum Fosfat Oftalmik Solüsyon USP, %0,1 Deksametazon Fosfat Eşdeğeri NI Nasonex* NI Chloraseptic* NI Flutikazon Propiyonat NI Taro-Mupirocin, Mupirocin Merhem USP, %2 NI Luffeel* NI Dayanıklı Dristan* Nazal Buhar NI Zicam* Damlamayan Sıvı* Nazal Jel* Uç Konjesyon Tahliyesi Neo-Synephrine* NI Relenza* NI Otrivin* Eksiksiz Nazal Bakım* NI Tobramisin b Beconase AQ* NI Kan NI Flunisolid Nazal Solüsyon USP, %0,025 NI MSSA (ATCC 29213) NI Nasacort* AQ NI CNS (ATCC 35983) NI a NI: BD MAX MRSA testi ile bildirilebilir enterferans yok. b Tobramisin BD MAX MRSA testinde hafif inhibisyon göstermiş (İkinci Derivativ Tepe Apsisinin gecikmesi), ancak beklenen test sonuçları yine de elde edilmiştir. NI 10

11 Kesinlik Laboratuvar içi kesinlik bir (1) çalışma yerinde BD MAX MRSA testi için değerlendirilmiştir. Kesinlik paneli, LoD yakınındaki 4 numune kategorisinden oluşmuştur. Her örnek simüle edilmiş nazal flora içermekteydi [Staphylococcus epidermidis (ATCC 14990)]. İki MRSA suşu aşağıdaki 4 kategorinin her birinde test edilmiştir: Orta Pozitif (MP): 2 5 x LoD Düşük Pozitif (LP): 1 2 x LoD Yüksek Negatif (HN) 1:10: 1 x LoD nin 10 kat dilüsyonu Yüksek Negatif (HN) 1:100: 1 x LoD nin 100 kat dilüsyonu Beşinci bir kategori negatif (Neg) örneklerden oluşmuştur (simüle edilmiş nazal flora, MRSA yok). Testler ikili olarak 12 gün boyunca günde 2 çalışmayla 2 teknisyen tarafından yapılmıştır. Neg, LP ve MP örnekleri için kesinlik çalışması sonuçları sırasıyla %98,6, %100 ve %100 anlaşma göstermiştir. HN1:100 ve HN1:10 için kesinlik çalışması sonuçları sırasıyla %80,6 ve %37,5 anlaşma göstermiştir. Tekrarlanabilirlik Üretkenlik yukarıda tanımlandığı şekilde, Kesinlik Çalışması için aynı örnek kategorileri kullanılarak yapılmıştır. Her kategorideki örnekler 5 ayrı günde üçlü olarak test edilirken her gün 2 panel 2 teknisyen tarafından 3 klinik çalışma yerinde 1 reaktif lotu kullanılarak test edilmiştir (Çalışma Yerinden Çalışma Yerine). Bu klinik çalışma merkezlerinden biri (1), 2 ek reaktif lotunun test edildiği genişletilmiş bir çalışmaya katılmıştır (Lottan Lota). Sonuçlar her bir numune kategorisi için, birleştirilmiş MRSA suşlarından elde edilen verilerle gösterilmektedir. Çalışma Yerinden Çalışma Yerine Tekrarlanabilirlik için genel anlaşma yüzdesi MP, LP ve Neg kategorileri için %100, HN1:100 ve HN1:10 kategorileri için sırasıyla %82,2 ve %31,1 negatif anlaşma olmuştur (bkz. Tablo 10). Lottan Lota Tekrarlanabilirlik için genel anlaşma yüzdesi MP, LP ve Neg kategorileri için %100, HN1:100 ve HN1:10 kategorileri için sırasıyla %83,3 ve %34,4 negatif anlaşma olmuştur (bkz. Tablo 11). Son test sonucunu belirlemek üzere kullanılan bir dahili kriter olan İkinci Derivativ Tepe Apsisi (SDPA) test tekrarlanabilirliğini değerlendirmenin ek bir yolu olarak seçilmiştir. Tablo 10 ve 11 varyans bileşenleri ile (SD [= Standard Deviation, Standart Sapma) ve %CV [= Coefficient of Variation, Varyasyon Katsayısı]) genel ortalama SDPA değerlerini göstermektedir. Kategori Tablo 10: BD MAX MRSA Testinin Bir Lotunu Kullanarak Çalışma Yerinden Çalışma Yerine Tekrarlanabilirlik Çalışma Sonuçları TESİS Çalışma Merkezi 1 Çalışma Merkezi 2 Çalışma Merkezi 3 Yüzde Anlaşma Yüzde Anlaşma Yüzde Anlaşma Toplam Yüzde Anlaşması SDPA Değerleri a Genel Ortalama Neg 30/30 %100,0 30/30 %100,0 30/30 %100,0 %100,0 (%95,9, %100,0) 31,8 0,47 1,5 HN1:100 b 22/30 %73,3 27/30 %90,0 25/30 %83,3 %82,2 (%73,1, %88,8) 32,1 0,85 2,7 HN1:10 b 12/30 %40,0 3/30 %10,0 13/30 %43,3 %31,1 (%22,5, %41,3) 31,8 0,45 1,4 LP 60/60 %100,0 60/60 %100,0 60/60 %100,0 %100,0 (%97,9, %100,0) 31,7 0,66 2,1 MP 30/30 %100,0 30/30 %100,0 30/30 %100,0 %100,0 (%95,9, %100,0) 30,4 0,73 2,4 a Neg kategorisi için, bildirilen SDPA değerleri Örnek İşleme Kontrolü içindir. Diğer kategoriler için, bildirilen SDPA değerleri MRSA hedefi içindir. b Yüksek Negatif kategoriler için beklenen test sonucunun negatif olduğu kabul edilmiştir. Bu nedenle yüzde anlaşma negatif sonuçlar için hesaplanmıştır. SD %CV Kategori Tablo 11: Üç Lot BD MAX MRSA Testi kullanılarak Lottan Lota Tekrarlanabilirlik Çalışma Sonuçları LOT Lot 1 Lot 2 Lot 3 Toplam Yüzde Anlaşması SDPA Değerleri a Yüzde Anlaşma Yüzde Anlaşma Yüzde Anlaşma Genel Ortalama SD %CV Neg 30/30 %100,0 30/30 %100,0 30/30 %100,0 %100,0 (%95,9, %100,0) 31,2 0,75 2,4 HN1:100 b 26/30 %86,7 24/30 %80,0 25/30 %83,3 %83,3 (%74,3, %89,6) 31,4 0,79 2,5 HN1:10 b 6/30 %20,0 12/30 %40,0 13/30 %43,3 %34,4 (%25,4, %44,7) 31,6 0,71 2,2 LP 60/60 %100,0 60/60 %100,0 60/60 %100,0 %100,0 (%97,9, %100,0) 31,6 0,73 2,3 MP 30/30 %100,0 30/30 %100,0 30/30 %100,0 %100,0 (%95,9, %100,0) 30,5 0,66 2,2 a Neg kategorisi için, bildirilen SDPA değerleri Örnek İşleme Kontrolü içindir. Diğer kategoriler için, bildirilen SDPA değerleri MRSA hedefi içindir. b Yüksek Negatif kategoriler için beklenen test sonucunun negatif olduğu kabul edilmiştir. Bu nedenle yüzde anlaşma negatif sonuçlar için hesaplanmıştır. Bulaşma / Çapraz Kontaminasyon BD MAX MRSA testinde yüksek MRSA bakteriyel yüklü örnekleri işlerken çalışma içi bulaşma ve çalışmalar arası bulaşmayı araştırmak üzere bir çalışma yapılmıştır. Bir yüksek pozitif üye ve bir negatif üyeden oluşan bir panel çok sayıda örnek hazırlamak için kullanılmıştır. Bir MREJ tipi v MRSA suşu yüksek pozitif MRSA panel üyesi için kullanılmıştır (8 x 10 7 CFU/swab). Negatif üye herhangi bir hedef analit içermemiştir. Yüksek pozitif panel üyesinden on iki (12) replikat ve negatif panel üyesinden 12 replikat, negatif ve pozitif örnekler sırasıyla kullanılarak test edilmiştir. Üç (3) kullanıcı 24 örnekte toplam 9 çalışma olacak şekilde arka arkaya 3 çalışma yapmıştır. Bulaşma kontaminasyonu nedeniyle yalancı pozitif sonuç bulunmamıştır. 11

12 REFERANSLAR 1. Centers for Disease Control and Prevention. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus skin or soft tissue infection in a state prison. Mississippi, MMWR 2001; 50: National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report, data summary from January 1992 to June 2002, issued August Am J Infect Control. 2002; 30: Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections; Approved Guideline. Document M29 (Refer to the latest edition). 4. Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. Chosewood L.C. and Wislon D.E. (eds) (2009). HHS Publication No. (CDC) Clinical and Laboratory Standards Institute. Molecular Diagnostic Methods for Infectious Diseases; Approved Guideline. Document MM3 (Refer to the latest edition). 6. Clinical and Laboratory Standards Institute. User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline, Document EP12 (Refer to the latest edition). 7. BD MAX System User s Manual (refer to the latest version) BD Life Sciences, Sparks, MD USA. 12

13 Manufacturer / Производител / Výrobce / Fabrikant / Hersteller / Κατασκευαστής / Fabricante / Tootja / Fabricant / Proizvođać / Gyártó / Fabbricante / Атқарушы / 제조업체 / Gamintojas / Ražotājs / Tilvirker / Producent / Producător / Производитель / Výrobca / Proizvođač / Tillverkare / Üretici / Виробник / 生产厂商 Use by / Използвайте до / Spotřebujte do / Brug før / Verwendbar bis / Χρήση έως / Usar antes de / Kasutada enne / Date de péremption / 사용기한 / Upotrijebiti do / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Дейін пайдалануға / Naudokite iki / Izlietot līdz / Houdbaar tot / Brukes for / Stosować do / Prazo de validade / A se utiliza până la / Использовать до / Použite do / Upotrebiti do / Använd före / Son kullanma tarihi / Використати до\line / 使用截止日期 YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec měsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) ΕΕΕΕ-MM-HH / ΕΕΕΕ-MM (MM = τέλος του μήνα) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fin del mes) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj mjeseca) ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) ЖЖЖЖ-АА-КК / ЖЖЖЖ-АА / (АА = айдың соңы) YYYY-MM-DD/YYYY-MM(MM = 월말 ) MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mėnesio pabaiga) GGGG-MM-DD/GGGG-MM (MM = mēneša beigas) JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesiąca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) AAAA-LL-ZZ / AAAA-LL (LL = sfârşitul lunii) ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = конец месяца) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) GGGG-MM-DD / GGGG-MM (MM = kraj meseca) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet av månaden) YYYY-AA-GG / YYYY-AA (AA = ayın sonu) РРРР-MM-ДД / РРРР-MM (MM = кінець місяця) YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = 月末 ) Catalog number / Каталожен номер / Katalogové číslo / Katalognummer / Αριθμός καταλόγου / Número de catálogo / Katalooginumber / Numéro catalogue / Kataloški broj / Katalógusszám / Numero di catalogo / Каталог нөмірі / 카탈로그번호 / Katalogo / numeris / Kataloga numurs / Catalogus nummer / Numer katalogowy / Număr de catalog / Номер по каталогу / Katalógové číslo / Kataloški broj / Katalog numarası / Номер за каталогом / 目录号 Authorized Representative in the European Community / Оторизиран представител в Европейската общност / Autorizovaný zástupce pro Evropském společenství / Autoriseret repræsentant i De Europæiske Fællesskaber / Autorisierter Vertreter in der Europäischen Gemeinschaft / Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Représentant autorisé pour la Communauté européenne / Autorizuirani predstavnik u Europskoj uniji / Meghatalmazott képviselő az Európai Közösségben / Rappresentante autorizzato nella Comunità Europea / Европа қауымдастығындағы уәкілетті өкіл / 유럽공동체의위임대표 / Įgaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Pilnvarotais pārstāvis Eiropas Kopienā / Bevoegde vertegenwoordiger in de Europese Gemeenschap / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo we Wspólnocie Europejskiej / Representante autorizado na Comunidade Europeia / Reprezentantul autorizat pentru Comunitatea Europeană / Уполномоченный представитель в Европейском сообществе / Autorizovaný zástupca v Európskom spoločenstve / Autorizovano predstavništvo u Evropskoj uniji / Auktoriserad representant i Europeiska gemenskapen / Avrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi / Уповноважений представник у країнах ЄС / 欧洲共同体授权代表 In Vitro Diagnostic Medical Device / Медицински уред за диагностика ин витро / Lékařské zařízení určené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medizinisches In-vitro-Diagnostikum / In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medicinska pomagala za In Vitro Dijagnostiku / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medicale per diagnostica in vitro / Жасанды жағдайда жүргізетін медициналық диагностика аспабы / In Vitro Diagnostic 의료기기 / In vitro diagnostikos prietaisas / Medicīnas ierīces, ko lieto in vitro diagnostikā / Medisch hulpmiddel voor in-vitro diagnostiek / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Dispozitiv medical pentru diagnostic in vitro / Медицинский прибор для диагностики in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Medicinski uređaj za in vitro dijagnostiku / Medicinteknisk produkt för in vitro-diagnostik / İn Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz / Медичний пристрій для діагностики in vitro / 体外诊断医疗设备 Temperature limitation / Температурни ограничения / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperaturbegrenzung / Περιορισμοί θερμοκρασίας / Limitación de temperatura / Temperatuuri piirang / Limites de température / Dozvoljena temperatura / Hőmérsékleti határ / Limiti di temperatura / Температураны шектеу / 온도제한 / Laikymo temperatūra / Temperatūras ierobežojumi / Temperatuurlimiet / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limites de temperatura / Limite de temperatură / Ограничение температуры / Ohraničenie teploty / Ograničenje temperature / Temperaturgräns / Sıcaklık sınırlaması / Обмеження температури / 温度限制 Batch Code (Lot) / Код на партидата / Kód (číslo) šarže / Batch-kode (lot) / Batch-Code (Charge) / Κωδικός παρτίδας (παρτίδα) / Código de lote (lote) / Partii kood / Numéro de lot / Lot (kod) / Tétel száma (Lot) / Codice batch (lotto) / Топтама коды / 배치코드 ( 로트 ) / Partijos numeris (LOT) / Partijas kods (laidiens) / Lot nummer / Batch-kode (parti) / Kod partii (seria) / Código do lote / Cod de serie (Lot) / Код партии (лот) / Kód série (šarža) / Kod serije / Partinummer (Lot) / Parti Kodu (Lot) / Код партії / 批号 ( 亚批 ) Contains sufficient for <n> tests / Съдържанието е достатъчно за <n> теста / Dostatečné množství pro <n> testů / Indeholder tilstrækkeligt til <n> tests / Ausreichend für <n> Tests / Περιέχει επαρκή ποσότητα για <n> εξετάσεις / Contenido suficiente para <n> pruebas / Küllaldane <n> testide jaoks / Contenu suffisant pour <n> tests / Sadržaj za <n> testova / <n> teszthez elegendő / Contenuto sufficiente per <n> test / <п> тесттері үшін жеткілікті / <n> 테스트가충분히포함됨 / Pakankamas kiekis atlikti <n> testų / Satur pietiekami <n> pārbaudēm / Inhoud voldoende voor n testen / Innholder tilstrekkelig til <n> tester / Zawiera ilość wystarczającą do <n> testów / Conteúdo suficiente para <n> testes / Conţinut suficient pentru <n> teste / Достаточно для <n> тестов(а) / Obsah vystačí na <n> testov / Sadržaj dovoljan za <n> testova / Innehåller tillräckligt för <n> analyser / <n> test için yeterli malzeme içerir / Вистачить для аналізів: <n> / 足够进行 <n> 次检测 Consult Instructions for Use / Направете справка в инструкциите за употреба / Prostudujte pokyny k použití / Se brugsanvisningen / Gebrauchsanweisung beachten / Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης / Consultar las instrucciones de uso / Lugeda kasutusjuhendit / Consulter la notice d emploi / Koristi upute za upotrebu / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l uso / Пайдалану нұсқаулығымен танысып алыңыз / 사용지침참조 / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Skatīt lietošanas pamācību / Raadpleeg de gebruiksaanwijzing / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja użytkowania / Consultar as instruções de utilização / Consultaţi instrucţiunile de utilizare / См. руководство по эксплуатации / Pozri Pokyny na používanie / Pogledajte uputstvo za upotrebu / Se bruksanvisningen / Kullanım Talimatları na başvurun / Див. інструкції з використання / 请参阅使用说明 Do not reuse / Не използвайте отново / Nepoužívejte opakovaně / Ikke til genbrug / Nicht wiederverwenden / Μην επαναχρησιμοποιείτε / No reutilizar / Mitte kasutada korduvalt / Ne pas réutiliser / Ne koristiti ponovo / Egyszer használatos / Non riutilizzare / Пайдаланбаңыз / 재사용금지 / Tik vienkartiniam naudojimui / Nelietot atkārtoti / Niet opnieuw gebruiken / Kun til engangsbruk / Nie stosować powtórnie / Não reutilize / Nu refolosiţi / Не использовать повторно / Nepoužívajte opakovane / Ne upotrebljavajte ponovo / Får ej återanvändas / Tekrar kullanmayın / Не використовувати повторно / 请勿重复使用 Serial number / Сериен номер / Sériové číslo / Serienummer / Seriennummer / Σειριακός αριθμός / Nº de serie / Seerianumber / Numéro de série / Serijski broj / Sorozatszám / Numero di serie / Топтамалық нөмірі / 일련번호 / Serijos numeris / Sērijas numurs / Serie nummer / Numer seryjny /Número de série / Număr de serie / Серийный номер / Seri numarası / Номер серії / 序列号 For IVD Performance evaluation only / Само за оценка качеството на работа на IVD / Pouze pro vyhodnocení výkonu IVD / Kun til evaluering af IVD ydelse / Nur für IVD-Leistungsbewertungszwecke / Mόνο για αξιολόγηση απόδοσης IVD / Sólo para la evaluación del rendimiento en diagnóstico in vitro / Ainult IVD seadme hindamiseks / Réservé à l évaluation des performances IVD / Samo u znanstvene svrhe za In Vitro Dijagnostiku / Kizárólag in vitro diagnosztikához / Solo per valutazione delle prestazioni IVD / Жасанды жағдайда «пробирка ішінде»,диагностикада тек жұмысты бағалау үшін / IVD 성능평가에대해서만사용 / Tik IVD prietaisų veikimo charakteristikoms tikrinti / Vienīgi IVD darbības novērtēšanai /Uitsluitend voor doeltreffendheidsonderzoek / Kun for evaluering av IVD-ytelse / Tylko do oceny wydajności IVD / Uso exclusivo para avaliação de IVD / Numai pentru evaluarea performanţei IVD / Только для оценки качества диагностики in vitro / Určené iba na diagnostiku in vitro / Samo za procenu učinka u in vitro dijagnostici / Endast för utvärdering av diagnostisk användning in vitro / Yalnızca IVD Performans değerlendirmesi için / Тільки для оцінювання якості діагностики in vitro / 仅限 IVD 性能评估 For US: For Investigational Use Only Lower limit of temperature / Долен лимит на температурата / Dolní hranice teploty / Nedre temperaturgrænse / Temperaturuntergrenze / Κατώτερο όριο θερμοκρασίας / Límite inferior de temperatura / Alumine temperatuuripiir / Limite inférieure de température / Najniža dozvoljena temperatura / Alsó hőmérsékleti határ / Limite inferiore di temperatura / Температураның төменгі руқсат шегі / 하한온도 / Žemiausia laikymo temperatūra / Temperatūras zemākā robeža / Laagste temperatuurlimiet / Nedre temperaturgrense / Dolna granica temperatury / Limite minimo de temperatura / Limită minimă de temperatură / Нижний предел температуры / Spodná hranica teploty / Donja granica temperature / Nedre temperaturgräns / Sıcaklık alt sınırı / Мінімальна температура / 温度下限 Control / Контролно / Kontrola / Kontrol / Kontrolle / Μάρτυρας / Kontroll / Contrôle / Controllo / Бақылау / 컨트롤 / Kontrolė / Kontrole / Controle / Controlo / Контроль / kontroll / Контроль / 对照 Positive control / Положителен контрол / Pozitivní kontrola / Positiv kontrol / Positive Kontrolle / Θετικός μάρτυρας / Control positivo / Positiivne kontroll / Contrôle positif / Pozitivna kontrola / Pozitív kontroll / Controllo positivo / Оң бақылау / 양성컨트롤 / Teigiama kontrolė / Pozitīvā kontrole / Positieve controle / Kontrola dodatnia / Controlo positivo / Control pozitiv / Положительный контроль / Pozitif kontrol / Позитивний контроль / 阳性对照试剂 Negative control / Отрицателен контрол / Negativní kontrola / Negativ kontrol / Negative Kontrolle / Αρνητικός μάρτυρας / Control negativo / Negatiivne kontroll / Contrôle négatif / Negativna kontrola / Negatív kontroll / Controllo negativo / Негативтік бақылау / 음성컨트롤 / Neigiama kontrolė / Negatīvā kontrole / Negatieve controle / Kontrola ujemna / Controlo negativo / Control negativ / Отрицательный контроль / Negatif kontrol / Негативний контроль / 阴性对照试剂 13