1 Histoloji Çalışma Metotları PROF. İ.Ü. CERRAHPAŞA TIP FAKÜLTESİ HİSTOLOJİ VE EMBRİYOLOJİ ANABİLİM DALI
Histoloji 2 Yunanca Logos Histo Ağ veya Doku Çalışma Dokuların Çalışılması Hücreler Hücreler dışı Ortam MATRİKS
Neleri İçerir? 3 Eğer Gözün Görme Sınırı İçinde İse Anatomi Sınır = 0.1 mm (100 μm)
Neleri İçerir? 4 Eğer Bir Büyüteç Aracılığı ile İse Mikroskopik Anatomi
Yapı ve Fonksiyon 5 Yapının İncelenmesi Fonksiyonun Anlaşılmasında Fonksiyonun Bilinmesi Yapının Tahmin Edilebilmesinde
Anormali Anlamak 6 Normalin Bilinmesi Gerekir Yapı Fonksiyon Böylece Patoloji Anlaşılabilir Anormal: Yapı Fonksiyon
7 İki Mühim Metodik Düşünce Limitler Uygun Seçim Hangi Mikroskop? Hangi Mikro-teknik?
Histolojinin Gelişebilmesi 8 Şu Gelişimlere Bağlıdır: Mikroskoplar Kimya Fizyoloji İmmünoloji Patoloji
Bilim Sahalarının Etkileşimi 9 Histo-kimya Histo-fizlyoloji İmmüno-sito-kimya Histo-patoloji
Araçlar ve Metodlar 10 Ölçü Üniteleri Doku Hazırlıkları Mikroskopi Histokimya Doku Kesitlerinin Yorumu
Araçlar ve Metodlar 11 Radioautografi Canlı Doku ve Hücrelerin İncelenmesi In Vitro Saf Hücre Kültürleri Hücre Fonksiyonu
Ölçü Üniteleri 12 Micrometre μm 0.001 mm 0.000 001 m ( 10-6 m ) Nanometre nm 0.001 μm 0.000 000 001 m ( 10-9 m )
Dokunun Hazırlanması 13 İnce Doku Örnekleri Işık Geçirgenliği İnce Saydam Kesit
Dokunun Hazırlanması 14 Çok İnce Örnek Kesit Alma Yok Doku Tabakaları Saydam Membranlar Işığı Geçiren Mezanterler Kurbağa Larva Kuyruğu Hamster in Yanak Poşu Duvarı
Dokunun Hazırlanması 15 Çok İnce Örnek İncelenebilinir Uzun Sürede Değişen Ortamlarda Fizyolojik Deneysel
Dokunun Hazırlanması 16 Kalıcı Örnekler Doku Örnekleri
Dokunun Tespiti 17 Otolizi Önlemek Doku Sindirimi Enzimler Bakteri
Tespit 18 Dokuyu Koruyabilmek İçin Kullanılan Kimyasal Maddeler Kimyasal Yöntem? (Henüz Çok İyi Anlaşılamamıştır) Komplike
Rutin IM İçin En İyi Tespit Eriyiği 19 İzotonik Solüsyon da Tamponlanmış 4% Formol aldehit
De-kalsifiye Edilmemiş 20 Kemik ve Diş İçin En İyi Tespit Eriyiği 70% ALKOL
Popüler Fiksatifler 21 Formol aldehit Glutar aldehit Proteinlerle Reaksiyona Girer (Amine Grupları ile (Nh 2 )) Proteinler Arasıda Çapraz Bağlar Kurabilir
Fiksatifler ve Yüksek Rözülüsyon 22 Çift Fiksasyon Yöntemi (EM) Ultrasütrüktürü Koruyabilmek İçin Tamponlanmış Glutaraldehit Tamponlanmış Osmium Tetroxit Lipid ve Proteinleri Korur Lipid ve Proteinleri Boyar
Dehidratasyon (Suyun Giderilmesi) 23 Gömmek İçin Gerekli Suyun Giderilmesi Yükselen Serilerde Etanol ve Su 70% 100%
Impregnasyon (Şeffaflaştırma) 24 Etanol ün Yerini Alma Gömme Ortamı İle Karışabilme Xylene, Parafine Gömme Doku, Işığı Geçirir Hale Gelir (Şeffaflaşır)
Gömme 25 Kesit Alma İçin Gerekli İnce Kesitlerin Alınabilmesi Yumuşak Dokunun Sert Hale Getirilmesi Gömme Ortamları Parafin (IM Rutin) Plastik Rezinler (IM & EM) Büzüşmeyi Engeller Boşlukları Doldurur
Parafine Gömme 26 Etüvde Erimiş Parafin Isı 58-60 o C Şeffaflaştıran Maddeyi Buharlaştırır İnfiltrasyon Kalıplara gömme
Mikrotomlar 27 Kesit Alma Bıçaklar Çelik Elmas Cam Kesit Kalınlığı (1-10 μm)
Dondurma Mikrotomları 28 Lipidlerin Kaybolması Xylene Lipid Kaybını Engelleme Doku Düşük Isılarda Sertlaştirilir Gerekli Sertlik Elde Edilir Kesit Alınır
Dondurma Mikrotomları 29 Kısa Sürede Kesit Alınabilir Gömme İşlemi Yoktur Parçaların Süratle İncelenebilmesi Sağlanır Cerrrahi Müdahaleler Sırasında Teşhise Gitme
Dondurma Mikrotomları 30 Histokimyasal Çalışmalarda Çok Hassas Enzimler Küçük Moleküller Pek Çok Enzim Dondurma İle Etkisiz Hale Gelmez
Dokunun Hazırlanması 31 Kalıcı Hazırlık Mikroskop Altında İnceleme
Boyalar 32 Seçici Olarak Doku Kısımlarını Boyarlar Asid Bileşenler Bazik Bileşenler Doku Bileşenleri Boyanır Bazik Boyalar İle (Bazofilik) Asid Boyolar İle (Asidofilik)
Basik Boyalara Örnekler: 33 Toluidine Blue Methylene Blue Hematoxylin Dokunun Basokilik Kısımlarını Boyar Nucleoproteinleri Glycosaminoglykanları Asid Glikoproteinleri
Asid Boyalara Örnekler: 34 Orange G Eosin Asid Fuksin Dokunun Asidofilik Kısımlarını Boyar Mitokondrileri Sekretuar Granülleri Kollajen
35 Hematoxylin ve Eosin (H&E) En sık Kullanılan Boyalar Hematoxylin Maviye Boyar Nüveyi Sitoplazmanın RNA - zengin Kısımlarını Eosin Pembe - Kırmızı Sitoplazma Kırmızı Kollajen Pembe
Metaller ile Impregnasyon 36 Gümüş Altın
İdeal Doku Hazırlığı 37 Uygun Kimyasal Maddeler Lam Üzerindeki ince Kesitler Orjinal Hallerini Korumalı: Morfolojisini Moleküler İçeriğini
Artefakt lar 38 Orijinali Koruma: Morfoloji Moleküler Muhteviyat
Dokunun Çok Şüratli Tespiti 39 Morfolojinin Korunması Perfüzyon
40 Surfaktant ın Morfolojik Demonstrasyonu Fiksasyon Vaskülar Perfüzyon Skop Elektron Mikroskop
IM 41 Doku Yapıtaşları İle Fotonların Etkileşeme Im Faz Kontrast Mikroskobi Polorize Mikroskobi Konfokal Mikroskobi Floresans Mikroskobi
Işik Mikroskobu Kısımları 42 Mekanik Optik
IM Optik Kısımları 43 Kondansatör Işığı Toplar Ve Odaklar Koni Şeklinde Bir Işık Kaynağını Meydana Getirir İncelenecek Parçayı Aydınlatır
IM Optik Kısımları 44 Objektif Büyütür Işığın İzini Odaklar
IM Optik Kısımları 45 Oküler İmajı Dahada Büyütür İmajı Odaklar İzleyicinin Retinasına Fotoğraf Plakasına
Rezülüsyon 46 Birbirinden ayrı olarak algılanabilen İki Partikül Arasıdaki En Küçük Mesafe
47 Mikroskobun Çözüm Gücü Elde Edilebilen Kritik Faktörler Temiz Detaylı Mikroskop Tan Elde Edilebilen
48 IM Maksimum Çözüm Gücü ~0.1 μm Büyütmelerde İyi Görünüm Verir X 1000-1500 Rözülüsyon =< 0.1 μm
Büyütme ve Rözülüsyon 49 CözümGücüSınırlıdır Işığın Dalgaboyu ile
50 Lütfen Hangi! Biliniz Mikroskobu Kullanacağınızı Hangi Mikrotekniği
Observasyon ve Enterperatasyon 51 Gross Anatomi 3 Boyutlu Yapılar Histoloji Parçadan Alınan Kesitler 2 Boyutlu Seri Kesitlerden Nihayi Sonuca Gidilebilme