Antimikrobik duyarl k testine yönelik EUCAST disk difüzyon yöntemi. Sürüm 5.0 Ocak 2015



Benzer belgeler
De erlendirme. Antimikrobik duyarl k testine yönelik EUCAST disk difüzyon yöntemi. Sürüm 4.0 Haziran 2014

Antimikrobik duyarlılık testine yönelik EUCAST disk difüzyon yöntemi. Sürüm 3.0 Ocak 2014

Değerlendirme kılavuzu

Antimikrobik duyarl k testine yönelik EUCAST disk difüzyon yöntemi

EUCAST tarafından önerilen rutin iç kalite kontrol Sürüm 3.1, geçerlilik tarihi

Avrupa Antimikrobik Duyarlılık Testleri Komitesi

Avrupa Antimikrobik Duyarlılık Testleri Komitesi

Avrupa Antimikrobial Duyarlılık Testi Komitesi

HACETTEPE ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK FAKÜLTESİ PUREZONE CİHAZI TEST RAPORU

Kullanılan Standartlar ve Farkları (CLSI, EUCAST)

Karadeniz Teknik Üniversitesi Orman Fakültesi. Orman Endüstri Mühendisliği Bölümü PROJE HAZIRLAMA ESASLARI

SÜREÇ YÖNETİMİ VE SÜREÇ İYİLEŞTİRME H.Ömer Gülseren > ogulseren@gmail.com

GRAM POZİTİF BAKTERİ ANTİBİYOGRAMLARI

Evrak Ekle. Kurum İçi Giden Evrak Ekleme. Kırmızı renker; doldurulması zorunlu alanları ifade etmektedir. İleri Geri tarihli işlem yapılamamaktadır.

DEZENFEKSİYON TEKNİK TEBLİĞİ

En İyi Uygulamalar ve Kullanım Kılavuzu

YEDİNCİ KISIM Kurullar, Komisyonlar ve Ekipler

K.S.Ü. MÜHENDİSLİK MİMARLIK FAKÜLTESİ TEKSTİL MÜHENDİSLİĞİ BÖLÜMÜ BİTİRME ÖDEVİ / BİTİRME PROJESİ DERSLERİ İLE İLGİLİ İLKELER

MasterFlow 920 AN (Eski Adı Masterflow 920 SF)

Veri Toplama Yöntemleri. Prof.Dr.Besti Üstün

Kurumsal Yönetim ve Kredi Derecelendirme Hizmetleri A.Ş. Kurumsal Yönetim Derecelendirmesi

YAŞLI ve ENGELLİLERİ DE TAŞIYAN ASANSÖRLERİN ÖZELLİKLERİ

Araştırma Notu 15/177

Kullanım Kılavuzu. İçindekiler 1 o Cihaz Tanımı ve Aksesuarlar 2 o Cihaz Tanımı 3 o Güvenlik notları 3. Kireçlenme hakkında önemli hatırlatmalar 8

Kurumsal Yönetim ve Kredi Derecelendirme Hizmetleri A.Ş. Kurumsal Yönetim Derecelendirmesi

DİCLE ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK FAKÜLTESİ STAJ UYGULAMA ESASLARI 1. GENEL HUSUSLAR

VEZNE PROGRAMINDA POSTA ÜCRETİ İLE İLGİLİ YAPILAN DÜZENLEMELER (Vezne Sürüm: )

ÇALIŞAN SAĞLIĞI BİRİMİ İŞLEYİŞİ Hastanesi

Dell PowerVault MD3400/3420/3800i/3820i/3800f/3820f Depolama Dizileri Başlangıç Kılavuzu

İNSAN KAYNAKLARI YÖNETİMİ 6

Teknik sistem kataloğu Terminal kutuları KL

META TRADER 4 MOBİL İŞLEM PLATFORMLARI KULLANMA KILAVUZU 1. KURULUM

MAKÜ YAZ OKULU YARDIM DOKÜMANI 1. Yaz Okulu Ön Hazırlık İşlemleri (Yaz Dönemi Oidb tarafından aktifleştirildikten sonra) Son aktif ders kodlarının

ELEKTRİK ÜRETİM SANTRALLERİNDE KAPASİTE ARTIRIMI VE LİSANS TADİLİ

DOĞRUDAN FAALİYET DESTEĞİ PROGRAMI PROJE UYGULAMA EĞİTİMLERİ

ÇANAKKALE ONSEKİZ MART ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK MİMARLIK FAKÜLTESİ JEOFİZİK MÜHENDİSLİĞİ BÖLÜMÜ STAJ İLKELERİ

5510 sayılı SGK kanunu hakkında duyurular

BULUġ BĠLDĠRĠM FORMU/ GIDA

ÖĞRENME FAALĠYETĠ GELĠġMĠġ ÖZELLĠKLER

PATOLOJİ DERNEKLERİ FEDERASYONU ETİK YÖNERGE TASLAĞI. GEREKÇE: TTB UDEK kararı gereğince, Federasyon Yönetim

İÇİNDEKİLER. 1. Projenin Amacı Proje Yönetimi Projenin Değerlendirilmesi Projenin Süresi Projenin Kapsamı...

Performans Yönetimi Hakkında Ulusal Mevzuatın Avrupa Standartlarıyla Uyumlaştırılmasına Yönelik Tavsiyeler

Kılavuz Çekmek. Üretim Yöntemleri 15

ATH-SW Serisi yüzey montaj termostat

İÇİNDEKİLER. 1 Projenin Amacı Giriş Yöntem Sonuçlar ve Tartışma Kaynakça... 7

HT-02 HP KABLOLU ODA TERMOSTATI KULLANMA KILAVUZU

Kurumsal Yönetim ve Kredi Derecelendirme Hizmetleri A.Ş. Kurumsal Yönetim Derecelendirmesi

ELEKTRĐKLĐ OCAK TR. Kurulum Kullanım Bakım

Teknik sistem kataloğu Taşıyıcı kol sistemleri

Approved. Özellikler Test/Standart Tanım Hacimce katı madde ISO 3233 Parlaklık Derecesi (GU 60 ) ISO 2813

YÜKSEKÖĞRETİM KURUMLARI ENGELLİLER DANIŞMA VE KOORDİNASYON YÖNETMELİĞİ (1) BİRİNCİ BÖLÜM. Amaç, Kapsam, Dayanak ve Tanımlar

B02.8 Bölüm Değerlendirmeleri ve Özet

LABORATUVARIN DÖNER SERMAYE EK ÖDEME SİSTEMİNE ETKİSİ. Prof. Dr. Mehmet Tarakçıoğlu Gaziantep Üniversitesi

Döküm. Prof. Dr. Akgün ALSARAN

TEMİZ SU DALGIÇ POMPA

BQTEK SMS Asistan. Kullanım Kılavuzu. Doküman Versiyon: BQTEK

Kurumsal Yönetim ve Kredi Derecelendirme Hizmetleri A.Ş.

İŞLETMENİN TANIMI

İZMİR KÂTİP ÇELEBİ ÜNİVERSİTESİ ENGELSİZ ÜNİVERSİTE KOORDİNATÖRLÜĞÜ VE ENGELLİ ÖĞRENCİ BİRİMİ ÇALIŞMA USUL VE ESASLARI BİRİNCİ BÖLÜM

Analiz aşaması sıralayıcı olurusa proje yapımında daha kolay ilerlemek mümkün olacaktır.

Ç.Ü. GÜZEL SANATLAR FAKÜLTESİ İÇ MİMARLIK BÖLÜMÜ GÜZ YARIYILI İÇM PROJE 5 & DİPLOMA PROJESİ

Danışma Kurulu Tüzüğü

UCRETE DP UYGULAMA YÖNTEMİ

1 Semboller. 3 Kurallara Uygun Kullanım. 4 Önceden Görülebilen Hatalı Kullanım Şekli. 2 Emniyet ve Tehlikeler. 1.1 İkaz Bilgileri. 1.

MESLEKİ UYGULAMA ESASLARI YÖNETMELİĞİ DEĞİŞİKLİK KARŞILAŞTIRMA ÇİZELGESİ. Geçerli yönetmelik tarihi : MEVCUT MADDE ÖNERİLEN GEREKÇE

Enfeksiyon odaklarından izole edilen Gram negatif ve Gram pozitif bakterilerde antimikrobiyal duyarlılık sonuçları

BÖLÜM 7 BİLGİSAYAR UYGULAMALARI - 1

Teknik sistem kataloğu Masaüstü TFT monitörler için kumanda panelleri

Daptomisin: Laboratuvar Yaklaşım. Prof. Dr. Güner Söyletir Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi İstanbul

İçindekiler. 2. Zaman Verilerinin Belirlenmesi 47

Klimaanlage Klima Cihazı. Einbauanleitung Kurulum Talimatı CC /2009 Ident Nr A

ANKARA EMEKLİLİK A.Ş GELİR AMAÇLI ULUSLARARASI BORÇLANMA ARAÇLARI EMEKLİLİK YATIRIM FONU 3 AYLIK RAPOR

NAZİLLİ DEVLET HASTANESİ ECZANE İŞLEYİŞ PROSEDÜRÜ

Cerrahi Alan Enfeksiyonu Önleme Talimatı

Yoğun Bakım Ünitesi Enfeksiyon Kontrol Talimatı

SİRKÜLER. 1.5-Adi ortaklığın malları, ortaklığın iştirak halinde mülkiyet konusu varlıklarıdır.

ELITE A.G. KS100/HEFM SICAK-SOĞUK ETĐKET BOY KESME VE ĐŞARETLEME MAKĐNASI KULLANIM KILAVUZU

K12NET Eğitim Yönetim Sistemi

T.C. İSTANBUL TİCARET ÜNİVERSİTESİ STAJ ANA YÖNERGESİ

Mikobakteriyoloji Laboratuvarı: Sorular - Sorunlar

Yanık Ünitelerinde Dezenfeksiyon. 10.Sınıf Enfeksiyondan Korunma. Yanık Ünitelerinde Dezenfeksiyon. Yanık Ünitelerinde Dezenfeksiyon

ANKARA EMEKLİLİK A.Ş GELİR AMAÇLI ULUSLARARASI BORÇLANMA ARAÇLARI EMEKLİLİK YATIRIM FONU ÜÇÜNCÜ 3 AYLIK RAPOR

Üç-fazlı 480 volt AC güç, normalde-açık "L1", "L2" ve "L3" olarak etiketlenmiş vida bağlantı uçları yoluyla kontaktörün tepesinde kontak hale gelir

Yakıt Özelliklerinin Doğrulanması. Teknik Rapor. No.: 942/

Uzem Eğitmen Girişi. Şekil 1. Sisteme girdikten sonra Şekil 2 deki ekran karşımıza çıkacak. Bu ekrandaki adımları kısaca tanıyalım.

Mühendislikte Deneysel Metodlar I Dersi Deney Föyü

Mak-204. Üretim Yöntemleri II. Vida ve Genel Özellikleri Kılavuz Çekme Pafta Çekme Rayba Çekme

YÜZÜNCÜ YIL ÜNİVERSİTESİ SU ÜRÜNLERİ FAKÜLTESİ LABORATUAR, ÜNİTE VE ODA (SÜFLAB) KULLANIM YÖNERGESİ

RADYASYONDAN KORUNMA UZMANLARI DERNEĞİ (RADKOR) NİN

HP Color LaserJet CM2320 MFP Serisi Kağıt ve Yazdırma Ortamı Kılavuzu

Ek-1/B TÜRK STANDARTLARINA GÖRE TİCARİ KALİTE DENETİMİNE TABİ ÜRÜNLER Bitkisel Yemeklik Yağlar

a) Birim sorumluları: Merkez çalışmalarının programlanmasından ve uygulanmasından sorumlu öğretim elemanlarını,

İMZALAMA ARACI. Kullanım Kılavuzu. Nisan 2016 ANKARA. İmzalama Aracı Kullanım Kılavuzu Nisan 2016 Versiyon : 1.0 1/15

YÖNETMELİK. c) Merkez (Hastane): Selçuk Üniversitesi Sağlık Uygulama ve Araştırma Merkezini (Selçuklu Tıp Fakültesi Hastanesini),

KISITLI BİLDİRİM. ADTS grubunun hazırladığı Kısıtlı Bİldirim Tabloları ile ilgili olarak dikkat edilmesi gereken konular.

Globalleşen dünyada ticaretin sınır ötesi bir hal alması, uluslararası boyut kazanması; mevcut kanunun tüm kuruluşları kapsamaması; AB ve diğer

DİKKAT! SORU KİTAPÇIĞINIZIN TÜRÜNÜ "A" OLARAK CEVAP KÂĞIDINA İŞARETLEMEYİ UNUTMAYINIZ. SAYISAL BÖLÜM SAYISAL-2 TESTİ

PLASTİK MALZEMELERİN İŞLENME TEKNİKLERİ

ATAÇ Bilgilendirme Politikası

HÂKİMLER VE SAVCILAR YÜKSEK KURULU HUKUKİ MÜZAKERE TOPLANTILARI PROJE FİŞİ

Transkript:

Antimikrobik duyarl k testine yönelik EUCAST disk difüzyon yöntemi Sürüm 5.0 Ocak 2015

çindekiler Besiyerleri nokülum haz rl Plaklar n inoküle edilmesi Diskler nkübasyon Zonlar n de erlendirilmesi Yorumlama KK Hata analizi 2

EUCAST disk difüzyon yöntemi slayt gösterisi de iklikleri Sürüm Sürüm 5.0 Ocak 2015 Sürüm 4.0 Haziran 2014 Sürüm 3.0 Nisan 2013 De iklikler Slayt 20 ye enterokoklarda glikopeptidlerin uzat lm inkübasyonu hakk nda bilgi eklendi. E. coli ATCC 35218geni letilmi KK den rutin KK ye ta nd. DSM numaras ndaki yaz m hatas düzeltildi, slayt 31. H. influenzae NCTC 84682 in ç kar lmas na ili kin not eklendi added, slayt 32. H. influenzae ATCC 49766 rutin KK tablosuna eklendi, slayt 32. E. faecalis ATCC 51299 için belirtilen ATCC numaras ndaki yaz m hatas düzeltildi, slayt 33. -NAD nin safl hakk nda bilgi eklendi, slayt 6. Slayt 7 ve 20 ye Corynebacterium spp. eklendi. Slayt 10 a agar plaklar n saklanmas ve kullan lmas hakk nda bilgi eklendi. Slayt 14 e agar plaklar n kullan lmas hakk nda bilgi eklendi. Stafilokoklar ifadesi S. aureus olarak de tirildi, slayt 28. EUCAST Geni letilmi KK Tablolar için ba lant eklendi, slayt 30. Kontrol sonuçlar n okunmas ve de erlendirilmesi hakk nda bilgi eklendi, slayt 34. MH-F plaklar ndaki defibrine edilmi at kan hakk nda aç klama eklendi, slayt 5 ve 6. Slayt 6 ve 19 a Pasteurella multocida ve Campylobacter jejuni ve coli eklendi. Disk difüzyon testi için kolonilerin seçilmesi hakk nda aç klama eklendi; slayt 11 ve 12. Campylobacter jejuni ATCC 33560 eklendi, slayt 30. E. faecalis ATCC 51922 ye DSM ve CCUG numaralar eklendi, slayt 31. 3

EUCAST disk difüzyon yöntemi slayt gösterisi de iklikleri Sürüm Sürüm 2.1 ubat 2012 Sürüm 2.0 Ocak 2012 Sürüm 1.1 Haziran 2010 Sürüm 1.0 Aral k 2009 De iklikler Slayt 23 ve 25 te zonlar n de erlendirilmesi hakk nda aç klama eklendi. Slayt 6 ve 19 a yeni terminoloji (viridans grup streptokoklar) ve Listeria monocytogenes eklendi. Slayt 24 te zonlar n de erlendirilmesi için aç klama eklendi. Slayt 27 de zonlar n de erlendirilmesine ek istisnalar eklendi. Slayt 31 e K. pneumoniae ATCC 700603 ve E. faecalis ATCC 51299 eklendi. Slayt 7 de agar derinli i hakk nda aç klama eklendi. Slayt 30 ve 31 e spanyol Kültür Koleksiyonu numaralar eklendi. EUCAST disk difüzyon yöntemi slayt gösterisi EUCAST web sitesinde ilk kez yay nland. 4

Duyarl k testi besiyerleri 5

Duyarl k testi besiyerleri Sadece Mueller-Hinton agar (MH) kullan lmal r. Güç üreyen organizmalara yönelik besiyeri (MH-F, Mueller-Hinton Fastidious) %5 oran nda mekanik yöntemlerle defibrine edilmi at kan ve 20 mg/l -NAD (nikotinamid adenin dinükleotid) eklenmi MH dir. Safl k derecesi %98 olan -NAD kullan lmal r. 6

Farkl organizmalar için besiyerleri Organizmalar Enterobacteriaceae Pseudomonas spp. Stenotrophomonas maltophilia Acinetobacter spp. Staphylococcus spp. Enterococcus spp. Streptococcus pneumoniae Streptococcus grup A, B, C ve G Viridans grup streptokoklar Haemophilus spp. Moraxella catarrhalis Listeria monocytogenes Pasteurella multocida Campylobacter jejuni ve coli Corynebacterium spp. Di er güç üreyen organizmalar Besiyeri Mueller-Hinton agar Mueller-Hinton agar + %5 oran nda mekanik olarak defibrine edilmi at kan + 20 mg/l -NAD (MH-F) Ara rma sürecinde 7

Besiyerlerinin laboratuvar taraf ndan haz rlanmas Besiyerleri üreticinin talimatlar na uygun ekilde haz rlanmal r. Besiyerinin s cakl 42-45 C ye dü ene dek kan veya - NAD eklenmemeli (besiyeri haz rlay lar n do ru s cakl k ayarlar na sahip oldu undan emin olunmal r), iyice kar lmal ve besiyerleri derhal dökülmelidir. Besiyerleri 4.0 mm ± 0.5 mm lik e it bir derinlik sa layacak ekilde düz bir yüzeyde dökülmelidir. Tekrarlanan ölçümlerle derinli in tekrarlayan ekilde 4 mm nin alt nda veya üstünde oldu u gözlenirse, agar derinli i 3.5 4.5 mm aral nda olsa dahi hacim ayarlanmal r. kl kla kullan lan plak boyutlar 90 mm lik yuvarlak plak (~25 ml), 100 mm lik yuvarlak plak (~31 ml), 150 mm lik yuvarlak plak (~71 ml) ve 100 mm lik kare plakt r (~40 ml). 8

Mueller-Hinton agar n kalite kontrolü Tüm Mueller-Hinton serilerinin, bakteri-antimikrobik madde kombinasyonlar n tümü için kontrol rlar içinde oldu undan emin olunmal r. Belirgin problemler: Aminoglikozidler ve P. aeruginosa ATCC 27853 ile söz konusu olan inhibisyon zonlar n kalite kontrol s rlar n üzerinde/alt nda olmas, iki de erlikli katyonlar n konsantrasyonunun yüksek veya dü ük oldu una i aret edebilir. Trimetoprim-sülfametoksazol ve E. faecalis ATCC 29212 nin inhibisyon zonlar n kalite kontrol s rlar n alt nda olmas timin ve timidinin a miktarda mevcut oldu unu gösterebilir. 9

Agar plaklar n kurutulmas ve saklanmas Plaklar kullan rken agar yüzeyinde gözle görülür su damlalar bulunmamal r. Plaklar a kurutulmamal r. Laboratuvar taraf ndan haz rlanan besiyerlerine ili kin kurutma ve saklama ko ullar mevcut donan ma ba olacakt r ve yerel olarak belirlenmelidir. Ticari olarak haz rlanm besiyerleri için, üretici taraf ndan tan mlanm olan saklama artlar na uyulmal r. 10

nokülum Yöntem 0.5 McFarland standard na* e de er bir inokülum süspansiyonu gerektirmektedir. * E. coli için yakla k olarak 1-2 x 10 8 CFU/mL ye kar k gelmektedir. 11

Seçici olmayan besiyerinde bir gecelik üreme sonras nda izole koloniler seçilmelidir. 12

nokülum haz rl Atipik bir varyant seçmekten kaç nmak için (mümkünse) morfolojik olarak benzer olan birden fazla koloni kullan lmal ve 0.5 McFarland standard n yo unlu una e it, gözle görülür bulan kl k elde etmek için kolonilerden steril öze veya eküvyon ile serum fizyolojik içerisinde süspansiyon haz rlanmal r. stisna: Streptococcus pneumoniae için kanl agar pla ndaki üreme kullan yorsa 0.5 McFarland a, çikolata agar pla ndaki üreme kullan yorsa 1.0 McFarland a e de er süspansiyon haz rlan r. Yo unlu u 0.5 McFarland a ayarlamak için daha fazla bakteri veya serum fizyolojik çözeltisi ilave edilebilir, bu amaçla tercihen bir fotometrik cihaz kullan lmal r. 13

Plaklar n inoküle edilmesi En uygun kullan m için; inokülum süspansiyonu haz rlanmas n ard ndan 15 dakika içerisinde ve daima 60 dakika içerisinde kullan lmal r. Süspansiyona bir eküvyona bat lmal ve eküvyonu tüpün iç duvar na yaslanm halde çevirerek, eküvyondaki fazla s uzakla lmal r. Üç yönde inoküle ederek veya bir plak döndürücü kullan larak, inokülum yüzeyin tamam na e it ekilde yay lmal r. 14

Plaklar yo un ekilde inoküle etmekten kaç lmal r Plaklar n a ekilde inoküle edilmemesi önemlidir. Kontrol kökenlerine ili kin zon çaplar n normal aral k içerisinde oldu undan emin olunmal r. Yo un inokülumlar daha dar zon çaplar na neden olur. Plak inoküle edilmeden önce, eküvyon tüpün iç duvar na nazikçe bast p çevrilerek fazla s uzakla lmal r (ancak özelikle gram pozitif organizmalar için inokülum haz rlarken bu i lemde a ya kaç lmamal r). 15

Antimikrobik disklerinin saklanmas Disk stoklar üretici taraf ndan tavsiye edilen ko ullarda saklanmal r. Kullan mda olan diskler bir nem gidericiyle ve ktan korunarak, hava geçirmez ekilde kapat lm kaplarda 4-8 C de saklanmal r. Diskler üzerinde su yo mas meydana gelmesini önlemek için, kaplar aç lmadan önce disklerin oda cakl na gelmesi beklenmelidir. Gün içinde disklerin oda s cakl nda tutulmas, sürekli ekilde buzdolab na konup, geri al nmalar ndan daha iyidir. Diskler kutular n üzerinde yer alan üreticinin belirtti i son kullanma tarihinden sonra kullan lmamal r. 16

Antimikrobik disklerinin yerle tirilmesi Diskler inokülasyondan sonraki 15 dakika içerisinde yerle tirilmelidir. Diskler besiyeri yüzeyiyle s, e it bir temas halinde olmal r. Zonlar n üst üste binmesinin ve maddeler aras nda etkile im meydana gelmesinin önlenmesi için plak üzerindeki disk say rl olmal r. Zon çaplar n güvenilir ekilde ölçülebilmesi önem ta maktad r. 17

nokülasyon i leminin özeti Süspansiyon seçici olmayan besiyerinde bir gecelik inkübasyon sonras üreyen kültürden izole edilmi kolonilerden haz rlanmal r. Tercihen bir fotometrik cihaz kullan larak, yo unluk 0.5 McFarland a e de er bir yo unlu a ayarlanmal r. En uygunu, haz rlanan inokülumun 15 dakika içerisinde kullan lmas r. Süspansiyona steril bir eküvyon dald lmal ve eküvyonu tüpün iç k sm na yaslanm halde çevirerek fazla s uzakla lmal r. nokülum e it darbelerle agar yüzeyinin tamam na yay lmal r. Pla n inokülasyonundan sonra 15 dakika içerisinde antibiyotik diskleri yerle tirilmeli ve bunun ard ndan yine 15 dakika içerisinde inkübasyona ba lanmal r. 18

Plaklar n inkübasyonu Plaklar ters çevrilmeli ve diskler yerle tirildikten sonra 15 dakika içerisinde inkübe edilmelidir. Bu uygulama, geni inhibisyon zonu boyutlar na neden olabilecek ön difüzyonu s rlar. Plaklar n e it ekilde lmamas zon boyutlar etkileyebilece inden (inkübatörün verimlili ine ba olarak), üst üste yerle tirilen plak gruplar n say mümkün oldu u kadar az say da tutulmal r. MH normal atmosferde, MH-F ise %4-6 CO 2 içeren atmosferde inkübe edilmelidir. 19

Plaklar n inkübasyonu Organizma Enterobacteriaceae Pseudomonas spp. Stenotrophomonas maltophilia Acinetobacter spp. Staphylococcus spp. Enterococcus spp. Streptococcus grup A, B, C ve G Viridans grup streptokoklar Streptococcus pneumoniae Haemophilus spp. Moraxella catarrhalis Listeria monocytogenes Pasteurella multocida Campylobacter jejuni ve coli Corynebacterium spp. Di er güç üreyen organizmalar nkübasyon ko ullar 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, normal atmosfer, 16-20 saat (glikopeptidler için 24 saat) 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat 41±1 C, mikroaerop atmosfer, 24 saat (40-48 saat) 35±1 C, %4-6 CO 2 içeren atmosfer, 16-20 saat (40-48 saat) Ara rma sürecinde 20

15-15-15 dakika kural Plaklar a daki kurallara uyulabilecek ekilde haz rlanmal r: nokülum haz rlanmas n ard ndan 15 dakika içerisinde ve daima 60 dakika içerisinde kullan lmal r. Diskler, plaklar n inokülasyonundan sonraki 15 dakika içerisinde yerle tirilmelidir. Disklerin yerle tirilmesinin ard ndan 15 dakika içerisinde inkübasyona ba lanmal r. 21

nkübasyon sonras plaklar n incelenmesi Do ru bir inokülum ve tatmin edici ekilde ekilmi plaklar iyi bir üreme sa layacakt r. Düzgün dairesel (çentikli zon s gözlenmeyen) inhibisyon zonlar elde edilebilmesi için üreme plak üzerinde e it ekilde da m sergilemelidir (bir sonraki slayta bak z). E er tek tek koloniler görülebiliyorsa, inokülum yo unlu u çok azd r ve test tekrarlanmal r. 22

Üreme biti ik olmal ve plak üzerinde it ekilde yay m sergilemelidir Plaklar böyle görünmelidir......böyle GÖRÜNMEMEL R! 23

Zonlar n de erlendirilmesi Zon s rlar, plak gözden 30 cm uzakta tutularak, ç plak gözle bak ld nda, üremenin tam olarak inhibe oldu u nokta olarak de erlendirilmelidir. Örnekler: E. coli Siprofloksasin S. aureus Eritromisin KoNS Trimetoprim S. pneumoniae Rifampisin 24

Zonlar n de erlendirilmesi MH plaklar, yans yan kla ayd nlat lm koyu renkli bir zemin üzerinde, pla n tersinden de erlendirilmelidir. MH-F plaklar, kapaklar kar lm ve yans yan kla ayd nlat lm halde, pla n ön yüzünden de erlendirilmelidir. 25

Zonlar n de erlendirilmesi Aksi belirtilmedi i takdirde geçirgen k (plak a do ru tutularak) veya büyüteç kullan lmamal r (a ya bak z). Zon çaplar bir cetvel, çap ölçer (kumpas) veya bir otomatik zon ölçer ile ölçülmelidir. Zon içerisinde belirgin koloniler bulunmas durumunda koloniler pasajlanarak, kültürün safl kontrol edilmeli ve gerekli durumlarda test tekrar edilmelidir. 26

Zonlar n de erlendirilmesi istisnalar (1) Organizma Antimikrobik madde nhibisyon zonlar n de erlendirilmesi Proteus türleri Herhangi bir madde Yay lma göz ard edilmelidir. Streptococcus türleri Herhangi bir madde Hemoliz zonu de il, üremenin inhibisyonu de erlendirilmelidir. Herhangi bir organizma Staphylococcus türleri Trimetoprim Trimetoprim-sülfametoksazol Linezolid Belirgin s rlara sahip zon içerisindeki hafif puslu görünümlü üreme göz ard edilmelidir. (Plak a do ru tutularak) geçirgen kla incelenmelidir. Enterococcus türleri Vankomisin (Plak a do ru tutularak) geçirgen kla incelenmelidir. Enterobacteriaceae Ampisilin Baz MH agar serilerinde bir iç zon eklinde görülebilecek ince üreme göz ard edilmelidir. 27

Zonlar n de erlendirilmesi istisnalar (2) Organizma Antimikrobik madde nhibisyon zonlar n de erlendirilmesi E. coli Mesilinam nhibisyon zonu içerisindeki izole koloniler göz ard edilmelidir. S. aureus Benzilpenisilin (Plak a do ru tutularak) geçirgen kla zon s rlar dikkatli ekilde incelenmelidir. Stafilokoklar Sefoksitin nhibisyon zonu içerisindeki kolonileri tespit etmek için zonlar dikkatli ekilde incelenmelidir. 28

Zonlar n yorumlanmas Testleri yorumlamadan önce kontrol kökenlerine ili kin zon çaplar n kabul edilebilir aral klar içerisinde oldu undan emin olunmal r. Ölçülen zon çaplar (milimetre cinsinden en yak n uzunluk) EUCAST S r De er Tablolar 'na (www.eucast.org) uygun ekilde yorumlanarak duyarl k kategorilerine ayr r (S, I ve R). Alternatif olarak, EUCAST s r de erlerini içeren bir ablon kullan labilir. 29

Duyarl k testinin kontrolü Test performans izlemek için tavsiye edilen rutin kalite kontrol kökenleri kullan lmal r (bkz. EUCAST KK Tablolar ). Direnç tespit etme yeterlili inin do rulanmas için, tan mlanm direnç mekanizmalar na sahip kalite kontrol kökenleri kullan labilir (bkz. EUCAST KK Tablolar ). Kültür koleksiyonlar ndan veya ticari kaynaklardan kalite kontrol kökenleri sat n al nabilir. 30

EUCAST rutin kalite kontrol kökenleri Organizma Kültür koleksiyonu numaralar Özellikler E. coli ATCC 25922; NCTC 12241 CIP 7624; DSM 1103 CCUG 17620; CECT 434 E. coli ATCC 35218; NCTC 11954 CIP 102181; DSM 5923 CCUG 30600; CECT 943 P. aeruginosa ATCC 27853; NCTC 12903 CIP 76110; DSM 1117 CCUG 17619; CECT 108 S. aureus ATCC 29213; NCTC 12973 CIP 103429; DSM 2569 CCUG 15915; CECT 794 E. faecalis ATCC 29212; NCTC 12697 CIP 103214; DSM 2570 CCUG 9997; CECT 795 Duyarl, sokak tipi TEM-1 -laktamaz üreten köken Duyarl, sokak tipi Zay -laktamaz üreten köken Duyarl, sokak tipi 31

EUCAST rutin kalite kontrol kökenleri Organizma Kültür koleksiyonu numaralar Özellikler S. pneumoniae ATCC 49619; NCTC 12977 CIP 104340; DSM 11967 CCUG 33638 H. influenzae NCTC 8468*; CIP5494 CCUG 23946 H. influenzae ATCC 49766; NCTC 12975 CIP 103570; DSM 11970 CCUG 29539 Campylobacter jejuni ATCC 33560; NCTC 11351; CIP 702; DSM 4688 CCUG 11284 Benzilpenisiline azalm duyarl k Duyarl, sokak tipi Duyarl, sokak tipi Duyarl, sokak tipi * H. influenzae NCTC 8468 farkl üreme özellikleri göstermektedir ve 2016 dan itibaren ç kar lacakt r. 32

Özel direnç mekanizmalar n tespitine yönelik EUCAST kökenleri (geni letilmi KK) Organizma Kültür koleksiyonu numaralar Özellikler K. pneumoniae ATCC 700603; NCTC 13368 CCUG 45421; CECT 7787 S. aureus NCTC 12493 E. faecalis H. influenzae ATCC 51299; NCTC 13379 CIP 104676; DSM 12956 CCUG 34289 ATCC 49247; NCTC 12699 CIP 104604; DSM 9999 CCUG 26214 ESBL üreten köken (SHV-18) Oksasiline hetero-dirençli, meca pozitif Yükek-düzey aminoglikozid dirençli (YDAD) ve vankomisine dirençli (vanb pozitif) -laktamaz negatif, ampisiline dirençli (BLNAD) 33

Kültür Koleksiyonlar ATCC, American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, MD 20852, USA. NCTC, National Collection of Type Cultures, Health Protection Agency Centre for Infections, 61 Colindale Avenue, London NW9 5HT, UK. CIP, Collection de Institut Pasteur, 25 28 Rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15 France. DSMZ, Deutsche Stammsammlung für Mikroorganismen und Zellkulturen, Mascheroder Weg 16, D-38124 Braunschweig, Germany. CCUG, The Culture Collection University of Gothenburg. CECT. Colección Española de Cultivos Tipo. Universidad de Valencia. 46100. Burjassot. Valencia. Spain. 34

Genel performans de erlendirmek için rutin kalite kontrol kökenleri kullan lmal r Kontrol testleri, en az ndan rutin panellerin parças olan antibiyotikler için, her gün gerçekle tirilmeli ve sonuçlar kontrol edilmelidir. Sonuçlar klinisyene bildirilmeden önce kontrol test sonuçlar na bak lmal ve sonuçlar de erlendirilmelidir. Testlerin yap ld her gün, son 20 ard k testin sonuçlar incelenmelidir. Sonuçlar sürekli ekilde hedefin üstünde veya alt nda kalan zonlar ya da e ilimler aç ndan incelenmelidir. 20 test içinde iki veya daha fazla test aral n d nda oldu u takdirde sorunun sebebinin ara lmas gerekmektedir. 35

Test performans n izlenmesi Zon çap (mm) 25 20 15 10 5 Kontrol s rlar ndaki tek sonuçlar Tüm sonuçlar rlar içinde ancak hedefin tek taraf nda Aral n üst s Hedef Aral n alt s Hedefin ayn taraf nda rlar n d nda ard k sonuçlar 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Gün 36

KK sonuçlar aral k d nda oldu unda yap lmas gerekenler 20 teste ili kin zon çaplar içerisinde ard k olmayan iki kontrol zon çap kabul edilebilir aral n d nda oldu u takdirde, duyarl k testi sonuçlar bildirilmeli ancak durum ara lmal r. 20 teste ili kin zon çaplar içerisinde ard k iki kontrol zon çap kabul edilebilir aral n d nda oldu u takdirde, duyarl k testi sonuçlar bildirmeden önce durum ara lmal r. Testlerin tekrarlanmas gerekebilir. Ayn gün içinde birden fazla (>2) disk aral k d nda oldu u takdirde, duyarl k testi sonuçlar bildirmeden önce durum ara lmal r. Testlerin tekrarlanmas gerekebilir. Dirençli bir kontrol kökeninde direnç tespit edilmedi i takdirde, duyarl k testi sonuçlar bildirilmemeli, durum ara lmal ve test tekrarlanmal r. 37

Kontrol kökenlerine ili kin saklama ve pasaj i lemleri Kökenler biri kullan lan ve di eri ar iv olmak üzere iki stok besiyeri halinde, -70ºC de gliserol s besiyeri içeren boncuklarla saklanmal r. Alternatif olarak, dondurulmu kültürler veya ticari saklama sistemleri kullan lmal r. Her hafta, kullan mda olan stok besiyerinden, uygun seçici-olmayan besiyerine pasaj yap lmal ve kültürün safl kontrol edilmelidir. 7 güne dek her gün, saf olan plaktan pasaj yap lmal r. Güç üreyen organizmalar sadece 6 gün seri olarak pasajlanabilir. Kullan mda olan stok besiyeri tükendi inde, ar iv stok besiyerinden yap lan pasajla yeni bir kullan lan stok besiyeri haz rlanmal r. 38

Potansiyel hata kaynaklar (1) Besiyeri Test ko ullar Plaklar n saklanmas Talimatlara uygun ekilde haz rlanmamas Seriler aras nda de kenlik veya agar tedarikçisinde de iklik Katk maddeleri (seriler aras nda de kenlik, yanl miktar veya son kullanma tarihinin geçmesi) ph Agar derinli i/agar miktar Son kullanma tarihi 15-15-15 kural na ba kal nmamas (süspansiyonun 15 dakika içerisinde kullan lmas, disklerin 15 dakika içerisinde yerle tirilmesi ve inkübasyonun 15 dakika içerisinde ba lat lmas ) nkübasyon (s cakl k, atmosfer ve süre) Yanl inokülasyon (a az, a yo un veya e it olmayan) De erlendirme ko ullar Zon s rlar n de erlendirilmesi 39

Potansiyel hata kaynaklar (2) Diskler Kontrol organizmalar Yanl disk kullan lmas (maddenin veya disk içeri inin yanl olmas ) Diskin potansiyeli (yanl saklama, maddede karars zl k, son kullanma tarihi) Kaplar aç ld nda disklerin oda s cakl nda olmamas Plakta a miktarda disk bulunmas (maddeler aras nda etkile im) Yanl KK kökeni kullan lmas Mutasyon Kontaminasyon Kültürün eskili i 40

EUCAST web sitesi Yöntem, KK aral klar ve s r de erler konusundaki güncellemeler için EUCAST web sitesi düzenli olarak kontrol edilmelidir. www.eucast.org Lütfen tüm yorumlar ve önerilerinizi erika.matuschek@escmid.org adresine veya EUCAST sekreterli ine gönderin (web sitesine bak z). 41