INNOTEST HIV Antigen mab KEY-CODE: FRI24673 80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab 28697 v0 2013-09-12 p 1/8 Türkçe Tarafından üretildi: Fujirebio Europe N.V. Technologiepark 6 9052 Gent Belgium +32-9 329 13 29 BTW BE 0427.550.660 RPR Gent Tarafından dağıtıldı: Fujirebio Germany GmbH Hans-Böckler-Allee 20 30173 Hannover Germany +49-511-8573931 Fujirebio Italia S.r.l. Via Vaccareccia 39/A 00040 Pomezia (Roma) Italy +39-06 965 28 700 Fujirebio France SARL Les Conquérants, Bât. Le Kilimandjaro 8/10, avenue des Tropiques 91940 Les Ulis France +33-1 69 07 48 34 0459 Fujirebio Iberia S.L. Calle Tarragona 161, Planta 14 08014 Barcelona Spain +34-93 270 53 00 Fujirebio Europe N.V. Technologiepark 6 9052 Gent Belgium +32-9 329 13 29 Diğer dillere bakın / Autres langues voir / Andere Sprachen siehe / Altre lingue vedere / Ver otros idiomas / Outras línguas ver: www.e-labeling.eu/fri24673 EUROPE +800 135 79 135 GR 00 800 161 220 577 99 IS 800 8996 LT 880 030 728 RO 0800 895 084 SK 0800 606 287 TR 0800 142 064 866 LI +31 20 796 5692 MT +31 20 796 5693 non-europe +31 20 794 7071 US +1 855 236 0910 CA +1 855 805 8539 AR, BR, CO, UY, AU, NZ, RU +800 135 79 135 8:00 17:00 GMT+1 M T W T F S S Fujirebio Europe N.V.
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 2/8 İÇERİK TABLOSU Kullanılan Semboller... 2 Kullanım Amacı... 3 Test Prensibi... 3 Reaktifler... 3 Tanımlama,kullanım için hazırlama ve saklama koşulları...3 Kit içeriğinde olmayan gerekli materyaller... 4 Güvenlik ve Çevre Koşulları... 5 Örnekler... 5 Manipülasyon prosedürleri... 6 Yıkama Talimatı..... 6 Beyanat ve Önlemler... 6 Test Prosedürü... 6 Sonuçlar... 7 Kısaltmalar... 7 Validasyon... 7 Sonuçların Yorumlanması... 7 Sınırlamalar... 7 Test Performansı... 7 Duyarlılık... 7 Analitik duyarlılık...8 Özgünlük... 8 Kesinlik..... 8 Markalar... 8 Symbols used Üretici In vitro diagnostik medikal gereç Lot Numarası Kataog Numarası İle Kullanım Kullanım bilgileri Sıcaklık sınırlamaları < n > testi için yeterli miktarı içerir Konjugat 1 20x Konjugat 2 100x Konjugat Diluent 1 Konjugat Diluent 2 Negatif Kontrol Coated Plate NP40 Substrate TMB 100x
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 3/8 Substrate Buffer INNOTEST HIV Antijen mab (96T) için spesifik: Yıkama Solüsyonu 25x Pozitif Kontrol 2x Matrix INNOTEST HIV Antijen mab (480T) için spesifik: Kullanım Amacı Pozitif Kontrol INNOTEST HIV Antigen mab (96T and 480T) insan serum,plazma ya da hücre kültür supernatantlarında human immunodeficiency virus tip 1 (HIV-1), HIV-1 group O ve tip 2 (HIV-2) nin p24 core antijenlerinin kalitatif belirlemesi için enzim immunotesttir (EIA).. Test Prensibi Polistren mikrotiter pleytin kuyucukları HIV insan poliklonal antikorları ile kaplıdır. HIV antijen içeren test örnekleri, biotin işaretli anti-p24 monoklonal antikorlarının karışımı ile birlikte kuyucuklarda inkübe edilir. Biotin, peroxidase konjugatlı streptavidin ile bağlanır. Peroxidase substrat ve kromojen ile inkübasyon test kuyucuklarında mavi renk oluşumunu sağlar ve reaksiyonu durdurmak için sülfirik asit eklendiğinde sarıya döner. Örnekler HIV içermiyor ise, işaretli antikor HIV p24 antijenlerine spesifik olarak bağlanmaz ve sadece düşük arka plan renk gelişimi gözlenir. Reaktifler Tanımlama,kullanım için hazırlama ve saklama koşulları - Tüm test reaktifleri orjinal ambalajında, 2-8 C de saklanırsa son kullanma tarihine kadar bozulmaz. Son kullanım tarihi geçmiş reaktifleri kullanmayınız. Reaktifleri dondurmayınız. - Tüm reaktifler ve poşetlerindeki test kuyucukları kullanımdan yaklaşık 30 dakika önce oda sıcaklığına (18-30 C) getirilmiş olmalı ve kullanımdan hemen sonra buzdolabına (2-8 C) kaldırılmalıdır. - Reaktifleri orjinal şişelerinde kapalı olarak saklayın. - Fiziksel görünüşünde tahribata uğramış kit rekatifleri kararsızlık ya da bozulmalara neden olabilir. Herbir paket içeriği: 1. 1 poşet (96T) ya da 5 poşet (480T) bir pleyt çerçesi ile 12 x 8 insan anti-hiv poliklonal antikorları kaplı stripler ve kurtucu madde olarak silikajel torba. Stripleri içeren alüminyum folyo poşet açıldıktan sonra, kullanılmayan herbir test kuyucuğu, silikajel torba ile birlikte kapalı plastik minigrip poşette 2-8 C de 8 hafta saklanabilir. 2. 1 şişe 2.5 ml (96T) ya da 4.5 ml (480T) Negatif Kontrol (HIV-antijenleri için negatif insan serumu, koruyucu olarak 0.1% sodium azide içeren) içerir. 3. 1 şişe 10 ml (96T) ya da 40 ml (480T) NP40 (koruyucu olarak 0.05% Proclin 300 içeren, stabilizer olarak bovine casein ve proteaz inhibitor olarak bovine aprotinin içeren) içerir. 4. 2 şişe herbiri 4 ml (96T) ya da 4 şişe herbiri 9 ml (480T) Konjugat Diluent 1 (koruyucu olarak 0.05% Proclin 300 içeren phosphate bufferda 0.2% kümelenmiş insan IgG ve ısı ile inaktive edilmiş mouse serum) içerir, Konjugat 1 dilusyonu için kullanılır. 5. 1 şişe 0.4 ml (96T) ya da 2 ml (480T) konsantre Konjugat 1 (biotin işaretli murine anti-p24 monoklonal antikorlar, koruyucu olarak 0.049% Proclin 300, stabilizör olarak bovine albumin ve ısı ile inaktive edilmiş mouse serum) içerir, kullanılmadan önce Konjugat Diluent 1 ve NP40 ile 20x seyreltilmelidir. Tablo 1: Konjugat çalışma solusyonu 1 hazırlanması Test sayısı 8 16 32 64 96 192 288 384 480 Konjugat 1 (ml) 0.025 0.050 0.1 0.2 0.3 0.6 0.9 1.2 1.5 Konjugat Diluent 1 (ml) 0.475 0.950 1.9 3.8 5.7 11.4 17.1 22.8 28.5 NP40 (ml) 0.500 1 2 4 6 12 18 24 30 Konjugat çalışma solusyonu 1, 2-8 C de 1 hafta saklanabilir. 6. 1 şişe 30 ml (96T) ya da 150 ml (480T) Konjugat Diluent 2 (koruyucu olarak 0.05% Proclin 300, stabilizör olarak bovine casein ve proteaz inhibitor olarak bovine aprotinin içeren phosphate buffer), Konjugat 2 dilusyonu için kullanılır. 7. 1 şişe 0.3 ml (96T) ya da 1.5 ml (480T) Konjugat 2 (peroxidase konjugatlı streptavidin) kullanılmadan önce Konjugat diluent 2 ile 100 x seyreltilmelidir.
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 4/8 Tablo 2: Konjugat çalışma solusyonu 2 hazırlanması Test sayısı 8 16 32 64 96 192 288 384 480 Konjugat 2 (ml) 0.02 0.04 0.08 0.16 0.24 0.48 0.72 0.96 1.2 Konjugat Diluent 2 (ml) 1.98 3.96 7.92 15.84 23.76 47.52 71.28 95.04 118.8 Konjugat çalışma solusyonu 2 direk günışığından korunarak oda sıcaklığında (15-30 C) 24 saat saklanabilir. 8. 1 şişe 30 ml (96T) ya da 150 ml (480T) Substrat Buffer (0.006% hydrogen peroxide içeren phosphate-citrate buffer), Substrat TMB dilusyonu için kullanılır. 9. 1 şişe 0.3 ml (96T) ya da 1.5 ml (480T) konsantre Substrat TMB (DMSO içinde çözülmüş tetramethylbenzidin), kullanmadan önce Substrat buffer ile 100x seyreltilmelidir. Tablo 3: Substrat çalışma solusyonu hazırlanması Substrate TMB (ml) 0.02 0.04 0.08 0.16 0.24 0.48 0.72 0.96 1.2 Substrate buffer (ml) 1.98 3.96 7.92 15.84 23.76 47.52 71.28 95.04 118.8 Substrat solusyonu karanlıkta bekletilirse oda ısısında (15-30 C) 1 gün saklanabilir. konsantre TMB katılaşabilir ve kullanılmadan önce tamamen eritilmelidir (erime noktası 18 C). 10. 1 şişe 45 ml (96T) ya da 200 ml (480T) konsantre Yıkama Solusyonu (koruyucu olarak 0.15% Proclin 300 içeren phosphate buffer), kullanmadan önce distile ya da deiyonize su ile 25x seyreltilmelidir. Table 4: Yıkama solusyonu hazırlanması Test sayısı 8 16 32 64 96 192 288 384 480 Yıkama Solüsyonu (ml) 2 4 8 16 24 48 72 96 120 Su (ml) 48 96 192 384 576 1152 1728 2304 2880 Seyreltilmiş yıkama solusyonu 2-8 Cde 4 hafta saklanabilir. Yıkama Solusyonu 2-8 C de bekledikten sonra tuz kristalleri oluşabilir. Bu kristaller, seyreltme yapmadan önce 37 C de dağıtılmalıdırlar. Yıkama solusyonu kullanılırken oda ısısında (15-30 C) tutulabilir. 11. 8 (96T) veya 20 (480T) yapışkan plak kaplayıcı. 12. 1 (96T) veya 2 (480T) kullanılmayan striplerin saklanması için plastik torba. INNOTEST HIV Antijen mab (96T) için sfesifik komponentler: 13. 1 şişe 15 ml Matriks (koruyucu olarak 0.05% Proclin 300, stabilizör olarak bovine casein ve proteaz inhibitor olarak bovine aprotinin içeren phosphate buffer). 14. 1 şişe 2.5 ml Konsantre Pozitif Kontrol (matrikste seyreltilmiş rekombinant HIV-1 p24, koruyucu olarak 0.05% Proclin 300, stabilizör olarak bovine casein ve proteaz inhibitor olarak bovine aprotinin içeren). Standartların belirlenebilen konsatrasyonları şişelerin üzerindeki etiketlerde yazmaktadır. Pozitif kontrol hazırlamak için matriks ile standartı 2 defa seyreltin 8 kuyucuklu strip için 120 μl Pozitif kontrol hazırlayın. Birden fazla strip için, en az iki pozitif kontrol içeren yukarıdaki miktarın iki katını kullanın. Tablo 5: Pozitif Kontrol hazırlanması Test Sayısı 8 16-96 Konsantre pozitif kontrol (ml) 0.060 0.120 Matrix (ml) 0.060 0.120 INNOTEST HIV Antigen mab (480T) için spesifik: 13. 1 şişe 3 ml Pozitif Kontrol (phosphate bufferda seyreltilmiş rekombinant HIV-1 p24, koruyucu olarak 0.05% Proclin 300, stabilizör olarak bovine casein ve proteaz inhibitor olarak bovine aprotinin içeren). Zayıf pozitif kontrol:: Pozitif Kontrolü Negatif Kontrol ile 1/6 seyreltin. Stripin herbir pleyti için 240 μl zayıf pozitif kontrol hazırlayın. Tablo 6: Zayıf pozitif kontrol hazırlanması Test Sayısı 96 Pozitif kontrol (ml) 0.040 Negatif kontrol (ml) 0.200
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 5/8 Kit içeriğinde bulunmayan gerekli materyaller - Distile ya da deiyonize su. - 1-2 mol/liter aaralığında analitik grade sülfirik asit. - 20-200 μl ve 200-1000 μl pipetler ve tek kullanımlık pipet uçları. - Vorteks mikser. - 37 C inkübatör. - Emici dokular. - Fotometrik Okuyucu: 450 nm ve opsiyonel olarak 620 nm ya da 690 nm de okuma yapabilen mikroplate okuyucu. - Opsiyonel: Sulfurik asid, konjugat, substrat, yıkama solusyonu ve örnek diluent eklemek için pipet, tek kullanımlık şişeler. örnek ve reaktif eklenmesinden sonra miksin karışması için plate shaker. Mikroplate yıkayıcı. Güvenlik ve Çevre Koşulları Lütfen Material Safety Data Sheet (MSDS) ve potansiyel tehlikeli komponentler içeren işaretli ürün bilgilerini inceleyiniz.en son güncellenen MSDS versiyonu www.fujirebio-europe.com websitesinde yer almaktadır. Uyarı: SUBS TMB 100x H315 H319 H335 P280 P261 P362 P312 P302+P352 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one ve 2-methyl-2H-isothiazol-3-one karışımı içerir: YIKAMA SOLN 25x, KONJ DIL1, KONJ1 20x, KONJ DIL2, KONTROL + 2x, MATRIX, KONTROL + H317 P261 P280 P363 P333+P313 P302+P352 NP40 H319 H317 P280 P305+P351+P338 P363 P333+P313 P337+P313 P302+P352 Tehlike ifadeleri H315 Cilt tahrişine sebep olur. H317 Alerjik cilt reaksiyonuna sebep olabilir. H319 Ciddi göz tahrişine sebep olur. H335 Solunum tahrişine sebep olabilir. Önlem ifadeleri P261 Duman / buhar / spreyi solumaktan kaçının. P280 Koruyucu eldiven / koruyucu giysi / göz koruyucu / yüz koruyucusu kullanın. P302+P352 CİLTTE: Sabun ve bol su ile yıkayın. P305+P351+P338 GÖZLERDE: Birkaç dakika boyunca dikkatlice suyla durulayın. Varsa ve mümkünse kontak lensleri çıkarın. Durulamaya devam edin. P312 Kendinizi iyi hissetmiyorsanız bir ZEHİR MERKEZİ veya doktora / hekime başvurun. P333+P313 Ciltte tahriş veya kızarıklık olursa: Tıbbı tavsiye / bakım alın. P337+P313 Göz tahrişi devam ederse: Tıbbı tavsiye / bakım alın. P362 Kirlenmiş giysileri çıkartın ve tekrar kullanmadan önce yıkayın. P363 Tekrar kullanmadan önce kirlenmiş olan giysileri yıkayın. - Mikrotiter pleytin kuyucuklarında kaplı olan insan anti-hiv poliklonal antikorları inaktive edilmiş ve anti-hcv ve HBsAg için negatif bulunmuştur. Negatif kontrol ve Konjugat Diluent 1 içinde birleşmiş insan IgG, anti-hiv1, anti-hiv2, anti-hcv ve HBsAg için negatif bulunmuştur. - Örneklerin potansiyel enfeksiyon ajanı olduğu göz önüne alınarak kullanılmalıdır. Tüm biyolojik materyallerinin potansiyel enfeksiyon ajanı olduğu göz önüne alınarak kullanılmalıdır. Hiçbir test metodu kan ürünlerinin enfeksiyon ajanlarını geçirmeyeceğine dair garanti vermemektedir. Sadece yeterince tecrübesi olan personel bu testi çalışmalıdır. Tüm biyolojik materyaller güvenlik koşullarına uygun olarak atılmalıdır. 121 C de 15 dakika otklavlanmalıdır. Tek kullanımlık materyaller yakılmalıdır. Sodyum hipokloritli miks likit atıkların son konsantrasyonu ± 1% sodyum hipoklorit olmalıdır. Atmadan önce bir gece bekletiniz. ÖNLEM: asit içeren likitlere sodium hipoklorit eklemeden önce nötralize ediniz. - Tehlikeli ya da enfeksiyonlu ajanlar ile çalışılırken koruyucu giysiler; eldiven ve koruyucu gözlük kullanılması gereklidir. - Atıklar hastanelerin atılım talimatlarına göre yok edilmelidir. Kamusal ve çevresel düzenlemelere uyulmalıdır.
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 6/8 Örnekler - INNOTEST HIV Antijen mab serum, plazma (sitrat, heparin ve EDTA) ya da hücre kültür supernatantları ile kullanılmalıdır. - Isı ile inaktive olmuş örnekleri kullanmayın. - Örnekler mikrobiyal kontaminasyonlu olmamalıdır. - Test yapılmadan önce örneklerin çözülmemiş kısımları santrfüj ile ortadan kaldırılmalıdır. - Devamlı dondurup çözdürülmüş, lipemik ve hemolizli örnekler hatalı sonuçlara neden olabilir. - hücre kültür medyumu, hücrelerin ve debrilerin uzaklaştırılması için önce santrifüj edilmelidir. Test için supernatant kullanılır ve kontrol olarak bir HIV-nagatif hücre kültür süpernatantı kullanılmalıdır. - Örnekleri 2-8 C de saklayınız. 1 haftadan uzun süre saklamak için -20 C de küçük hacimlere ayırarak saklayınız. - Saklamadan önce, serum ya da plazmadan santrifüjle kan pıhtısı ve kan hücreleri ayrılmış olmalıdır. Manipulation procedures Yıkama Talimatı Uygun olmayan yıkama işlemi sonuçları olumsuz etkileyecektir. Yıkama solusyonu ve yıkayıcının kontaminasyonu ciddi problemlere yol açabilir. Bir problem oluştuğunda, yıkama şişesi ve yıkayıcıyı uygun dezenfeksiyon solusyonu ile gece boyu dezenfekte ediniz. Bu nedenle: - Seyreltilmiş yıkama solusyonunu 2-8 C de saklayınız. - Tercihen taze hazırlanmış yıkama solusyonu kullanın. - Seyreltilmiş yıkama solusyonu ile yıkayıcıya önyıkama yaptırınız. Aşağıda manual yıkama adımları bulunmaktadır: Aşağıda manual yıkama adımları bulunmaktadır. Her bir aspirasyondan sonra pleyti ters çevirin ve emici dokular üzerinde sertçe vurun. Kuyucukları 300 μl seyreltilmiş Yıkama Solusyonu ile doldurun. En az 30 saniye ıslanması için bekleyin ve sıvıyı aspire edin. Bu adımları 5 kez tekrarlayın. Beyanat ve Önlemler - Son kullanma tarihi geçmiş kitleri kullanmayınız. - Farklı lot numarasındaki reaktifleri birbirine karıştırmayınız. - Donmuş reaktifler hatalı sonuçlara neden olabilir! - Tüm kanallar Konjugat Çalışma Solusyonu ve Substrat Solusyonu hazırlanmasından sonra distile su ile iyice temizlenmelidir. - Kontaminasyonu önlemek için plate kenarlarına dokunmayınız. - Reaktiflerin mikrobiyal kontaminasyonundan kaçınınız. - Kullanmadan önce örnekler ve kontrollerin homojen olduğundan emin olun. - Herbir örnek için yeni bir pipet ucu kullanın. Kontaminasyonu önlemek için örnek ya da konjugat yüklerken kuyucukların kenarlarına pipet ucu ile değmeyiniz. - İnkübasyon ya da saklama sırasında Substrat Solusyonunu güçlü ışık altında açıkta bırakmayın. Substrat ile inkübasyon sırasında plate karanlıkta bekletilmelidir. Substrat Solüsyonu kullanılırken renksiz olmalıdır. Eğer solüsyon maviye dönerse değiştirilmelidir. - TMB, sulfurik asid ya da peroxide içeren solüsyonlar istenmeyen renk değişimlerini önlemek için metal veya metal iyonları ile temas etmemelidir. - Hava baloncuklarını pleyte hafifçe vurarak yok ediniz. - Eğer yıkamadan hemen sonra kuyucuklar konjugat ya da substrat ile hemen doldurulmayacak ise, 15 dakikadan uzun olmamak kaydı ile emici doku üzerinde başaşağı konulmalıdır. - Pleytler okutulmadan önce, pleytin tabanı kontrol edilmelidir. Pleyt tabanı temiz ve kuru olmalıdır. - Reaktif çalışma solüsyonlarını hazırlarken kan toplama tüplerini kullanmayınız.
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 7/8 Test Prosedürü Tüm test materyallerinin kullanmadan önce oda sıcaklığına (18 to 30 C) getirilmiş olduğundan emin olunuz. 1. Gerekli sayıda stribin üzerindeki koruyucuları alın, herbir strip içinbir negatif ve bir pozitif kontrol içerecek şekilde hazırlayın (Reaktif hazırlamaya bakın). Daha fazla strip için, herbir strip tutacağında en az iki negatif ve iki pozitif kontrol olacak şekilde ayarlayın. Test çalışması sırasında, stripler, pleyt çerçevesi içinde olmalı sıkıca tutturulmalıdır. 2. Herbir test kuyucuğuna 100 μl konjugat çalışma solusyonu 1 ekleyin. Uygun test kuyucuklarına 100 μl örnek ya da kontrollerden ekleyin. Plate dikkatlice sallanarak ya da plate shaker (1000 rpm) kullanılarak karıştırılmalıdır. Stripleri yapışkan kaplayıcı ile kapatın ve 37 C de 60 dakika inkübe edin. İnkübasyonun sonunda konjugat çalışma solusyonu 2 yi hazırlayın. 3. Herbir kuyucuğu 5 kez yıkayınız (Yıkama Talimatlarına bakınız). 4. Herbir test kuyucuğuna 200 μl konjugat çalışma solusyonu 2 ekleyin. Stripleri yapışkan kaplayıcı ile kapatın ve 37 C de 60 dakika inkübe edin. İnkübasyonun sonunda substrat solusyonu hazırlayın. 5. Herbir kuyucuğu 5 kez yıkayınız (Yıkama Talimatlarına bakınız). 6. Herbir test kuyucuğuna 200 μl substrat solusyonu ekleyin. Oda ısısında (15-30 C) 30 dakika inkübe edin. 7. Reaksiyonu durdurmak için, Substrat Solusyonu ile aynı sekansta ve aynı zaman aralığında herbir kuyucuğa 50 μl Stop Solusyonu ekleyiniz. Strip tutacağını miksin tam üzerini kapattığından emin olacak şekilde dikkatlice kapatınız. 8. 7. adımdan sonra 15 dakika içinde kuyucuklardaki solusyonların absorbanslarını 450 nmde mikroplate okuyucu da okutunuz. Ikili dalga boyu analizi için, 590 ve 690 nm arasında herhangi bir dalga boyu referans dalga boyu olarak kullanılabilir. Absorbans değerleri tek dalga boyu değerlerinden yaklaşık 50 mod (Optik Yoğunluk) farklı olacaktır. Bir örnek, Tablo 7'de verilmiştir. Tablo 7: Single ya da dual dalgaboyu analizi için absorbans değerleri örneği Single dalga boyu 450 mm Dual dalga boyu Farklılık 590-690 nm Poz.kontrol 1.175 1.123 0.052 Neg. kontrol 0.058 0.009 0.049 Sonuçlar Kısaltmalar N = negatif kontrollerin absorbanslarının ortalaması P = pozitif kontrollerin absorbanslarının ortalaması S = örneklerin absorbansı Validasyon - Negatif kontrollerin 450 nmde absorbansı 0.150 den düşük olmalıdır. - 0.150 den yüksek kontrolleri elimine ederek N hesaplayın. - Pozitif kontrollerin 450 nmde absorbansı 0.800 den yüksek olmalıdır. - 0.800 den düşük kontrolleri elimine ederek P hesaplayın. - Eğer kontrollerin yarısından fazlası elimine oluyorsa, test çalışması hatanın kaynağının dikkatlice araştırılmasından sonra tekrar edilmelidir. - Dual dalgaboyu, single dalgaboyundaki 50 mod den farklı absorbans değerinde analiz edilir. Sonuçların yorumlanması Cut-off değeri N + 0.050 hesaplayın. S < N + 0.050 ise örnek NON-REAKTİF tir. S N + 0.050 ise örnek REAKTİF tir. - Negatif kontrolün 450nm de beklenen absorbans aralığı 0.065 ± 0.010, sonuçlarda beklenen cut-off değeri: 0.065 ± 0.010 + 0.050 = 0.115 ± 0.010. - Pozitif kontrolün 450nm de beklenen absorbans aralığı 1.200 ± 0.400. - Tüm reaktif örnekler aynı test metodu kullanılarak son yorumlama için tekrar test edilmelidir. Tekrar edilen reaktif örnekler, INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents kullanılarak HIV antijenlerinin nötralizasyonu ile değerlendirilebilir. Nötralize olan örnekler HIV-antijen pozitif olarak değerlendirilir.
80563/80564 INNOTEST HIV Antigen mab / 28697 v0 / KEY-CODE: FRI24673 p 8/8 - Non-reaktif bir örnek, HIV ile enfeksiyona maruz kalmayacağına dair kesin bir kanıt olarak kullanılamaz. - Bir örneğin yapılmadığı durumlarda optik densite 0.250-0.4 arasında görülecektir. Sınırlamalar - INNOTEST HIV Antijen mab test prosedürü, plazma,serum ya da hücre kültür supernatantları için dizayn edilmiştir. Diğer vucüt sıvıları ile test performansı hakkında yeterli bilgi bulunmamaktadır. Bu nedenle, bu örneklerin çalışılması önerilmez. - INNOTEST HIV Antijen mab kiti ile negatif bulunan bir sonuç, p24 antijeni hastalığın mutlak fazlarında belirlenebilen konsantrasyonlarda görülmemiş olsa da HIV ile enfeksiyona maruz kalmayacağına dair kesin bir kanıt olarak kullanılamaz. - Serokonvesiyon sonrası, p24 antijeni antikorlar ile kompleks yapabilir ve belirlenemez olur. - Romatoid faktör seviyesi artmış olan örnekler, INNOTEST HIV Antijen mab ile yanlış pozitif sonuçlar verebilir. Bu durumda, INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents örneklerin yanlış pozitifliğini teyit eder. Test performansı Duyarlılık INNOTEST HIV Antigen mab belirleme limiti; insan serumunda seyreltilmiş standart, HIV 1 antijen (Sanofi Diagnostics Pasteur) kullanılarak üç farklı lotta ölçülmüştür. Ortalama belirleme limiti 10 pg/ml erişmiştir. Toplamda 82 klinik örnek, alternatif antijen testleri ile birlikte p24 antijeni için INNOTEST HIV Antijen mab testinde pozitif bulunmuştur. 82 örneğin tümü reaktif bulunmuş ve INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents kullanılarak %50 den fazlası nötralize edilebilmiştir. Toplamda 79 HIV-1 ve 2 HIV-2 hücre kültür süpernatantı test edilmiştir. Tüm süpernatantlar reaktif bulunmuş ve INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents kullanılarak nötralize edilebilmiştir. Toplamda 35 serokonversiyon paneli INNOTEST HIV Antijen mab ile ve alternatif antijen testleri ile test edilmiştir. Ortalama antijenemi görülme süresi, alternatif testler ile 14,9 gün olarak bulunurken INNOTEST HIV Antijen mab ile 18,5 gündür.bir BBI HIV Antijen Miks Titre paneli (PRA203) test edilmiştir ve tüm 18 pozitif örnek reaktif bulunmuştur. 35 seroconversion panellerinin yirmi dokuzu negatif bir kanama ile başlar ve hepsi dar kanama aralıklarına sahiptir. Analitik duyarlılık INNOTEST HIV Antijen mab analitik duyarlılığı 1st Uluslararası Referans Standartının birkaç dilüsyonu test edilerek in-house değerlendirildi (NIBSC kod 90/636). Yedi dilüsyon, matrix solüsyonda hazırlanan (kitte dahil), 5 IU/ml ve 0.25 IU/ml arasında, ve matrix solüsyon (0 IU/ml), nine-fold test edildi. Altı farklı grup üzerinde test edilmiş dilüsyon serisine dayanarak, analitik duyarlılık 2 IU/ml altındadır, Avrupa mevzuatı 2009/108/EC ile uyumludur. Tüm gruplar analitik duyarlılığı 0.71 IU/ml - 0.91 IU/ml aralığında gösterdi. Özgünlük Toplamda 2000 sağlıklı kan donoru test edilmiştir. Test sonucunda 7 tanesi reaktif bulunmuştur ve bunlardan 4 tanesi tekrar testi ile reaktif bulunmuştur. Bu örneklerin hepsi INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents ile nötralize edilmemiştir. Nötralizasyon sonrası sonuçların duyarlılığı 100%. Risk grubundan olan toplamda 300 seronegatif hasta örneği ve fırsatçı enfeksiyona sahip 122 seronegatif hasta örneği test edilmiştir. Test sonrasında, 10 örnek reaktif bulunmuştur. Bu 10 reaktif örneğin 8 tanesi INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents ile test edilmiş ve 8 örneğin hiçbiri pozitif olarak teyit edilmemiştir. Toplamda 179 potansiyel karışım örneği test edilmiştir. Bu örneklerin onüçü reaktif bulunmuş ve bunların 4 tanesi tekrar testinden sonra pozitif bulunmuştur. Bu 4 örnek toplamda 34 romatoid faktörlü hastanın dışında bulunmuştur. Bu örneklerin hiçbiri nötralize edilmemiştir. Kesinlik Çalışma-içi varyasyon, bir çalışmada 32 replikatta bir negatif örnek ve 2 (yüksek ve orta) pozitif örnek test edilerek belirlenmiştir. %VK negatif örnekler için 10.4%, yüksek pozitif örnekler için 2.3%, orta örnekler için 3.6% olarak bulunmuştur. Çalışmalar-arası varyasyon, 5 farklı günde 11 negatif ve 14 pozitif örnek ile test edilmiştir. %VK negatif örnekler için 6.5%-14.6% arasında değişkenlik gösterirken pozitif örnekler için 4.6%-10.2% arasındadır. Lotlar arası varyasyon 3 farklı lotta BBI p24 Antijen Miks Titre Performans paneli test edilmesi ile belirlenmiştir. %VK 1.5%-20.3% arasındadır. Markalar INNOTEST dünya çapında tescilli markadır Avrupa, ABD, Japonya, Çin gibi.