Rev.: 011: Sayfa: 1 / 12 KULLANIM KLAVUZU. ndna (Crithidia Luciliae) Standard Ref. Açıklama Test ndna (10 kuyucuk) 100

Benzer belgeler
KULLANIM KAVUZU. EMA (Endomysium)

Rev.: 011: Sayfa: 1 / 12 KULLANIM KILAVUZU. ndna (Crithidia Luciliae) Standart Ref. Açıklama Testler 53,100 ndna (10 kuyucuk) 100

Döküman: KULLANIM KALAVUZU. Rodent TISSUES (rat/mouse/lk/lks)

KULLANIM TALİMATI ANCA. Standard Ref. Açıklama Test Sayısı ANCA Etanol (12 kuyucuklu) Demo

KULLANIM KLAVUZU. ANA-HEp-2. Döküman.: AESKUSLIDES ANA-HEp-2 Rev.: 011: Sayfa: 1 / 17

AESKULISA Parietal cell Ref 3511

AESKULISA dsdna-a Ref 3141

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Muhafaza ve Raf Ömrü Kullanım Önlemleri...

AESKULISA Intrinsic Factor Ref 3512

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Muhafaza ve Raf Ömrü Kullanım Önlemleri...

AESKULISA dsdna-g Ref 3142

AESKULISA Nucleo-h Ref 3130

AESKULISA SS-A-60 Ref 3108

AESKULISA Cardiolipin-A Ref 3203

AESKULISA SS-B Ref 3110

AESKULISA Borrelia-M Ref 3803

AESKULISA Protein C Ref 3901

AESKULISA a-tg Ref 3400

AESKULISA CCP Ref 3166

AESKULISA Protein S Ref 3902

AESKULISA ENA-6Pro Ref 3103

AESKULISA Glia-A Ref 3501

AESKUBLOT Vasculitis Pro Ref 4002

AESKULISA DANA-Pro Ref 3116

Serin Prothrombin-A REF 3227

1. Kullanım Amacı Klinik Uygulamalar ve Tahlil Prensibi Kit İçeriği Saklama Koşulları ve Raf Ömrü... 2

AESKUBLOT Vasculitis Pro Ref 4002

AESKULISA 2-Glyco-Check Ref 3215

AESKUBLOT Gastro Pro Ref 4005

AESKUBLOT Liver Pro Ref 4004

AESKUBLOT Borrelia-G/-M Ref 4006 / 4007

AESKUBLOT Liver Pro Ref 4004

RTA JEL / PZR Saflaştırma Kiti

Kullanım Kılavuzu Giriş

AESKULISA PR3 sensitive Ref 3302

AESKULISA MPO Ref 3303

AESKULISA ttg-a New Generation Ref 3503

RTA DNA qpcr Probe Master Mix

AESKULISA Serine-Prothrombin-Check Ref 3223

AESKULISA DGP-A Ref 3513

MAIA Pesticide MultiTest

attomol apo B-100 quicktype

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

KULLANIM TALİMATLARI

attomol HLA-B*27 Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir! 1.Giriş 2. Genel Açıklamalar

RTA Kandan Genomik DNA İzolasyon Kiti

INNOTEST HIV Antigen mab Neutralization Reagents

QMS TOPIRAMAT. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları TOPIRAMATE KONTROLLERİ

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

ANTİNÜKLEER ANTİKOR. ANA Paterni İlişkili Antijen Bulunduğu Hastalık. Klinik Laboratuvar Testleri

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

RTA Mayadan Genomik DNA İzolasyon Kiti

Kullanım Kılavuzu Giriş

Cevaplara bir kan damlasından ulaşabiliriz. TEST PROSEDÜRLERİ & SORUN GİDERME

AESKUBLOT ANA-17 Pro Ref 4001

RTA Bakteriden Genomik DNA İzolasyon Kiti

QMS LAMOTRIGINE. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları LAMOTRİGİN KONTROLLERİ

Mitokondrial DNA Analiz Paneli

RTA Dokudan ve Parafine-Gömülü Dokudan Genomik DNA İzolasyon Kiti

(Alerjenik bileşim için ekteki uygun sertifikaya bakın)

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Brusellozda laboratuvar tanı yöntemleri

BRCA 1/2 DNA Analiz Paneli

QMS LAMOTRIGINE. İmmün testi. Simgelerin Açıklamaları LAMOTRİGİN KALİBRATÖRLERİ

Kullanım Kılavuzu Giriş

Avian Flu Screening&Typing H5, H7

ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ DR. NİLGÜN KAŞİFOĞLU

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

attomol lactose intolerance C>T quicktype

RTA Plazmid DNA İzolasyon Kiti

Protokolü PD S Reaksiyon

KÖSTER ASOFALT-42 Asfalt Boyası

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

DİCLE ÜNİVERSİTESİ TIP FAKÜLTESİ DÖNEM I HÜCRE BİLİMLERİ 2 KOMİTESİ. İmmunohistokimya teknikleri ve Kullanım Alanları. Doç.Dr.

Kistik Fibrozis DNA Analiz Paneli

Listeria Monocytogenes Real time PCR Tespit Kiti

SaMag Extraction kiti Kullanım Klavuzu

: LİCOPLAS DEKORATİF SIVA

HASTABAŞI TEST CİHAZI KULLANIMI VE BAKIMI. Dr Sibel DEVECİ Biyokimya Uzmanı

RIDASCREEN Leishmania Ab

M47 MICROGEN STREP MICROGEN

RIDASCREEN Echinococcus IgG

Kullanım Kılavuzu Giriş

BIOKITS RAPID 3-D Fındık Test Kat. No E

CROSS-MATCH & DAT Testler/Problemler

Test Circulating Tumor Cell Control Kit

TÜRK KIZILAYI KAN MERKEZLERİ ANTİ-A; ANTİ-B; ANTİ-AB; ANTİ- D SERUMU TEKNİK ŞARTNAMESİ

Klinik Mikrobiyoloji Testlerinde Doğrulama (verifikasyon) ve Geçerli Kılma (validasyon)

Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Hematoloji-İmmünoloji Bölümü

ANTİGLOBULİN TESTLER. Dr. Güçhan ALANOĞLU

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

WEİL-FELİX TESTİ NEDİR NASIL YAPILIR? Weil Felix testi Riketsiyozların tanısında kullanılır.

Ürün Güvenlik Bilgi Formu

9225 OCEAN KURULUM VE KULLANMA KILAVUZU.

MALZEME GÜVENLİK FORMU BS-5 ASFALT YAPIŞTIRICISI KISIM 1 MÜSTAHZAR VE İŞ TANIMI

Güvenlik Bilgi Formu EC Direktifi 91/155/EEC ye uygun Basım tarihi:

ÜRÜN KULLANIM KILAVUZU

Transkript:

TÜRKÇE

Sayfa: 1 / 12 KULLANIM KLAVUZU ndna (Crithidia Luciliae) Standard Ref. Açıklama Test 53.100 ndna (10 kuyucuk) 100

Sayfa: 2 / 12 ndna (Crithidia luciliae) Ref. Açıklama Test 53.100 ndna (10 kuyucuk) 100 53.100.Demo ndna (10 kuyucuk) Demo kit 20 1. KULLANIM AMACI (Crithidia luciliae),insan serumunda doğal çift sarmal DNA karşı IgG antikorlarının tespiti için indirect immunefloresan tahlilidir. 2. KLİNİK UYGULAMALAR DNA'ya bağlanan antikorlar, çeşitli otoimmün hastalıklarda gözlenen anti-nükleer antikorlar (ANA) grubuna aittir. Doğal çift sarmallı (ds) DNA ile reaksiyona giren antikorlar, sistemik lupus eritematoz (SLE) için spesifik olarak görülmektedir ve hastaların yaklaşık% 50-80'inde gözlenmiştir. dsdna karşı antikorları, SLE aktif fazlarında bulunmaktadır. Serum konsantrasyon miktarı, tam olarak hastalığın şiddeti ile ilişkilidir. Bu nedenle, bu otoantikorların tespiti SLE'nin tanısı ve klinik izlemesi için çok önemlidir. Dolayısıyla bu, SLE 11 ACR-kriterlerinden 1' i olarak belirlenmiştir. SLE hastalarının çoğunda, dsdna'nın karşı IgG sınıfı antikorları görülür. Bu antikorlar, lupus nefrit ile ilişkilidirler. Ayrıca, SLE hastalarının yaklaşık %30 unda IgA sınıfı anti-dsdna antikorları gelişir. Bu IgA sınıfı anti-dsdna antikorlarının mevcudiyeti, SLE hastalarının belirli bir alt kümesini belirlemek için fikir verebilirler. Nitekim çalışmalar, yüksek eritrosit sedimantasyon hızı ya da kompleman komponent C3 tüketimi, kutanöz vaskülit, akral nekroz ve eritem klinik parametreleri gibi hastalık aktivitesinin belirli parametreleriyle, bu alt sınıfın ilişkisini göstermiştir. Nefrit ve artrit için herhangi bir ilişki bulunmamıştır. IgM sınıfı anti-dsdna antikorları SLE li hastaların serumlarında %52 oranında bulunur. Buna karşılık IgG ve IgA sınıfı otoantikorları, alt sınıf IgM antikorları hastalık aktivitesiyle ilişkili değildirler. Ancak, kendi laboratuvar parametreleri de dahil olmak üzere, IgM anti-dsdna antikorları ve lupus nefrit arasında oldukça anlamlı bir negatif ilişki olduğu saptanmıştır. Bu nedenle IgM sınıfı anti-dsdna antikorları, nefrit gelişim riskine karşı korunmuş lupus hastalarının bir alt grubunu gösterebilir. Antijen Karakterizasyonu: Crithidia luciliae mitokondiriyal DNA (monoflagelate protozoa) Çapraz reaktivite : Çapraz reaktiviteler bilinmiyor. Antikorların tespiti indirekt immünfloresans tahlil prensibine dayanmaktadır(iifa). Cam mikroskop slaytları, doku kesitleri veya hücreler (HEp-2 hücreleri (ANA), Granülositler(ANCA) veya Crithidia luciliae (ndna) ) ile kaplıdır. Eğer hasta serumu spesifik antikorları içeriyorsa, ilk inkübasyon esnasında bağlanacaklardır. Yıkama aşamalarındaki bağlanmayan metaryallerin uzaklaştırılmasından sonra, bağlanan antikorlar ikinci inkübasyon esnasında Fluorescein konjuge anti-human immunoglobulinler vasıtasıyla tespit edilirler. Antijen-antikor kompleksinin spesifik yeşil floresan renklenmesi, bir floresan mikroskop yardımıyla gözlenebilir.

Sayfa: 3 / 12 3. KİT PROSEDÜRÜ Ayrıntılı talimatlar için Genel Talimatlarda listelenen Test Prosedürüne, Bölüm 11, bakınız. ndna kiti için, aşağıdaki ayrıntılar kullanılmalıdır: Boyama süresi sayacı: 30-90 saniye Önerilen tarama titresi: 1:10 4. YORUMLAMA Tarama titresi: 1:10 Crithidia luciliae, sadece dsdna içeren kinetoplast olarak da bilinen, çok büyük bir mitokondri içerir. ndna karşı antikorlarının varlığında, kinetoplast homojen floresan görünür veya flageluma yakın bazal cisim ve çekirdek arasında bulunan kinetoplast, çekirdek yerine görünür. Değerlendirilme, her zaman pozitif ve negatif kontroller ile yapılmalıdır. Numune,sadece flagellum orijinine veya nükleusa yakın olusan bazal cisim florasanı ise ndna negatif ve spesifik ndna antikorları yok olarak değerlendirilmelidir. Dilüsyon Örnekleri: 1:10 10µL Serum + 90µL Numune Tamponu 1:20 10µL Serum + 190µL Numune Tamponu 1:40 10µL Serum + 390µL Numune Tamponu 1:80 10µL Serum + 790µL Numune Tamponu Gibi. İmmunfloresans, yalnızca nükleus dsdna nükleer antikorsuz floresans iken anti-ds-dna varlığında karakteristik çift spot şablonu gösterir. (dsdna %95 lık özgünlükle SLE için oldukça önemli bir otoantijendir ). SLE hastalarında, nükleer antijen çeşitlerine karşı antikorlar gözlemlenebilir. Hastalık ile en güçlü ilişki, ndna-antikoru ve HEp-2 hücrelerinde benekli nükleer şablon olarak beliren Smantikoru (glikoprotein) tarafından gösterilir (HEp-2 hücrelerinde periferal veya homojen şablon). Doğal çift sarmallı DNA ya karşı olan antikorlar, SLE için son derece spesifiktir. ndna antikorunun düşük seviyeleri, Dermatomiyosit, Karma Bağ Dokusu Hastalığı (MCTD) ve Sjögren Sendromu gibi diğer hastalık sınıflarında gözlemlenmesine rağmen, yüksek titreli ndna antikorları, neredeyse sadece SLE. 1 'de tespit edilir. 1 Storch WB; Immunfluoreszenz-Fibel 2 nd Edition; Blackwell Wissenschaftsverlag 1997

Doküman: Sayfa: 4 / 15 5. VERİ YORUMLAMA SAYFASI ndna Tarih: Lot.: Slayt No.: Kullanıcı: Kuyucuk No. 1 ID Dilüsyon Faktörü F.I. Nucleus Kinetoplast Basalbody Antikorlar Düşünceler 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Sayfa: 5 / 12 6. STANDART KİT İÇERİĞİ 6.1 STANDART KİTLER SLAYTLAR (10x her kitte) KONJUGAT (1x 4 ml) POZİTİF KONTROL (1x 0.5ml) Kit Ref. Kit Açıklaması Ref. Kuyuc uklar 53.100 ndna (10 kuyucuk) s53.100 10 Kaplama metaryali Crithidia Luciliae hücreleri C53.100 Ref. Açıklama Ref. Açıklama IgG mavi kapaklı:açık mavi solüsyon. İçerik: BSA, Fluorescein (FITC) etiketlenmiş Anti-human Antibody PC53.100 ndna pozitif control CappKırmızı kapaklı:renksiz solüsyon İçerik: insan serumu (dilute), sodium azide <0.1% (koruyucu) NOT: Geri kalan kit bileşen içerikleri örn : ortak reaktifler (Neg kontr, ortam vasatı, v.s) aşağıda 7. kısımda ORTAK REAKTİF İÇERİKLERİNDE açıklanmıştır. 6.2 DEMO KITLERİ Demo kit içeriği için, karşılık gelen analiz sertifikasına bakın.

Sayfa: 6 / 12 7. ORTAK REAKTİF İÇERİKLERİ a. Ortak Reaktifler Ref. Reaktif Miktar/hacim Açıklama Kullanıma Hazır NCIFA Negatif Kontrol 1x 0.5ml * EBIFA Evans Mavisi 0.2% 1x 3ml MMIFA Ortam Vasatı 1x 8ml Yeşil kapaklı: renksiz solüsyon. İçerik: İnsan serumu(dilute), sodium azide <0.1% (koruyucu) Beyaz kapaklı: Mavi renkli solüsyon İçerik: PBS, Evans Mavisi. Dilute Evans Mavisi 1x WBIFA da0.2% 1:3000 HELMED Ile kullanım için valide edilmiştir Beyaz kapaklı: renksiz solüsyon içerik: PBS, Glycerin. EVET HAYIR EVET Beyaz kapaklı: renksiz solüsyon WBIFA Yıkama tamponu (10x) 1x 100ml Konsantre tamponu 1:10 oranında distile su ile dilüe edin. (örn.: 100 ml + 900 ml). içerik: BSA, PBS,sodium azide (koruyucu). HAYIR SBIFA Samplebuffer (1x) 1x 100ml Miktarlar kutu başınadır. (*)ayrı sipariş edilmelidir. Beyaz kapaklı: renksiz solüsyon Hasta serumunun dilüsyonu için içerik: BSA, PBS,sodium azide (koruyucu). EVET b. Kit ile sağlanmayan, gerekli malzemeler 1. Distile su 2. Numune dilüsyonu için tets tüpü 3. Küçük ölçüm şişesi 4. Volümetrik pipet 5. Kronometre 6. FITC sistemli Floresans mikroskobu, (490nm uyarı filtresi, 510nm bariyer filtesi) 7. İnkübasyon tepsisi 8. Boyama tablası 9. Pipet ucu 10. Lameller (24x60 mm) 11. Sıkılabilir yıkama şişesi Etiketleme dahil ürün bilgilerinin eksik veya yanlış olması halinde, lütfen üretici firmayla veya kit sağlayıcınızla irtibata geçiniz.

Sayfa: 7 / 12 8. MUHAFAZA VE RAF ÖMRÜ Bütün reaktifleri 2 C-8 C/35-46 Fde, yoğun ışıktan koruyarak muhafaza edin. Her bileşenin son kullanma tarihi, ilgili etiket üzerinde belirtilmiştir. Son kullanma tarihi geçen reaktifleri kullanmayın. Bütün reaktifleri ve slaytları kendi original kaplarında 2-8 C/35-46 F de muhafaza edin.açılmış ve sulandırılmış (işlem görmüş) solüsyonlar 2-8 C/35-46 F de en az bir hafta satabildir. Reaktifler ve slaytlar sadece her bir bileşenin belirtilen son kullanma tarihine içinde kullanılmalıdır. 9. KULLANIM ÖNLEMLERİ a. Sağlık Tehlike verileri BU ÜRÜN SADECE IN VITRO DIAGNOSTIC İÇİNDİR. Bu nedenle, kitin performansı için, sadece eğitimli personel ve özellikle in vitro diagnostic metodları, tavsiye edilir Bu ürün, amaçlanan kullanım koşullarında, özellikle toksik veya tehlikeli olarak kabul edilir olmasa da maksimum güvenlik için aşağıdakilere bakınız: Öneriler ve Önlemler Bu kit potansiyel tehlikeli bileşenler içerir. Kit reaktifleri her ne kadar göz ve cilt için tahriş edici olarak sınıflandırılmamış olsa da, reaktiflerin gözle temasından kaçınılması ve atılabilir eldiven giyilmesi önerilir. Kit içerisindeki tüm insan kaynaklı reaktifler (kontroller v.b) onaylı yöntemlerle test edilmiş ve HbsAg, Hepatit C ve HIV 1 için negatif sonuç bulunmuştur. Bununla beraber; hiçbir test bu tür malzemelerin içerisinde viral ajanların tamamen olmadığı garanti edemez. Bu nedenle, kontroller ve hasta numuneleri, ve bulaşıcı hastalıkları taşıma riskli olarak ele alınmalı ve ulusal düzenlemelere gore işlenmelidir Kit içerik tablosunda belirtilen hayvansal kaynaklı malzemeler (BSA immunoglobulin) ulusal düzelmemelere göre işlenmelidir. b. Genel Kullanım Talimatları 1. Ağzınızla pipetleme yapmayın. Kit çalışırken sigara içmeyin, herhangi bir şey yemeyin veya içmeyin. 2. Farklı lot numaralı reaktifleri karıştırmayın veya birbirinin yerine kullanmayın.bu sonuç farlılığına neden olabilir. 3. Bakteriyal kontaminasyonu önlemek için kullanım sonrası tüm şişeleri sıkıca kapatın. 4. Bütün solüsyonları yeni steril pipet uçlarıyla pipetleyin. 5. Bileşenleri 37 C / 98,6 F tan yüksek sıcaklığa maruz bırakmayın. 6. Tüm prosedür boyunca slayt kuyucuklarının kurumasına izin vermeyin. 7. Slaytları dondurmayın. Her laboratuar kendi normal aralıklarını, kendi prosedürlerine bağlı olarak, kendi kontrollerine, tekniklerine, techizatına ve hasta populasyona bağlı olarak oluşturmalıdır.

Sayfa: 8 / 12 Kesin klinik tanı, sadece yapılan test sonuçlarına dayandırlmamalı, tüm klinik ve laboratuvar bulguları bir hekim tarafından değerlendirilmiş olmalıdır. Tanının doğrulanması için farklı teşhis metodları kullanılmalıdır. Kontrol değerlerinin kriterlere uymadığı durumlarda test geçersizdir ve tekrarlanmalıdır. Aşağıdaki teknik konuların doğruluğu kanıtlanmış olmalıdır: Reaktiflerin (hazırlanmış) son kullanım tarihleri, muhafaza koşulları, pipetler, cihazlar, fotometre, inkübasyon koşulları ve yıkama yöntemleri. Test edilen öğeler, açıklanabilir bir sebep olmaksızın, anormal sonuçlar veya herhangi bir sapma gösteriyorsa, lütfen yerel temsilcimiz ile irtibata geçin. 10. NUMNE TOPLAMA, İŞLEME VE MUHAFAZA Numunelerin Hazırlanması: Tercihen yeni toplanmış( alınmış) serum örnekleri kullanın. Kan almada, Ulusal yönergeler takip edilmelidir.kan numunelerini, aseptik koşullarda toplayın. Lipemik, ikterik, hemolize veya mikrobiyal kontaminasyonu olan örnekler etkileşime neden olabilirler. Serumdaki partiküller düşük hızlı santrifüjleme ile (<1000 x g) giderilmiş olmalıdır. Kan örnekleri temiz, kuru ve boş tüpler ile toplanmalıdır. Santrifüj işleminden sonra serum numuneleri ilk 8 saat içerisinde kullanılmalıdır veya numuneler ayrı ayrı ve sıkıca kapatılarak, 48 saate kadar kullanım için 2-8 C/35-46 Fde muhafaza edilmeli, veya daha uzun süreli kullanımlar için -20 C/-4 F de dondurulmalıdır. Tekrar tekrar dondurup çözmekten kaçının. 11. TAHLİL PROSEDÜRÜ a. Pipetleme Öncesi Hazırlık Testin optimum performansı için, tüm bileşenleri kullanım öncesi oda sıcaklığına getirin (20-26 C / 64-78,8 F ), iyice karıştırın ve önerilen inkübasyon şemasını takip edin. 1. Yıkama tamponu hazırlanması: Konsantre tamponu 1:10 oranında distile su ile dilüe edin. 2. Numune hazırlanması: Hasta serumu (Tarama titresi için kullandığınız ürünün referansına göre yukarıdaki Kit Prosedür bölümüne bakın) 1x numune tamponu. HEp-2, ndna, rlks, EMA v.b arasında değişmektedir. 3. Kontroller kullanıma hazırdır. 4. Protokol hazırlığı: Veri yorumlama sayfaları kullandığınız ürünün referansına göre Kit Prosedürü bölümünde mevcuttur.

Sayfa: 9 / 12 b. Test Prosedürü No. 1. Basamak Açıklamaları Gereken slaytı(slaytları) torbasından (torbalarından) çıkarın ve işaretleyin.kuyucuklara dokunmayın. Slaytların kurumasına izin vermeyin. İnkübasyon tepsisinin hazırlanması: Küçük bir hacim deiyonize ya da distile suyu inkübasyon tepsisine yerleştirin ve slaytı (slaytları) destek üzerinde inkübasyon tepsisine yerleştirin. Slaytı (slaytları) nemli inkübasyon tepsisinde oda sıcaklığında 30 dakika± 10 inkübe edin. Konjugat için uygun inkübasyon sürelerini kullanın. 2. 3. 4. 5. 6. İlk İnkübasyon: Yeterli hacimlerde dilüe serumu ve kontrolleri (kontroller kullanıma hazırdır) uygun kuyucuklara pipetleyin, pipetin slayt yüzeyi ile direkt temasından kaçının. Her bir kuyucuğun uyan serum ile tamamiyle kaplanmış olduğundan emin olun. Kuyucukların tamamen kaplanması için gerekli test malzemesinin kullanılması önemlidir. Ancak kuyucuklar arasında bir bulaşma ya da benzer temasların olmasından kaçının, bu yalnış sonuçlara neden olabilir. Yıkama:İnkübasyon sonrası slaytları inkübasyon tepsisinden çıkartın ve sıkılabilir yıkama şişesi kullanarak yıkama tamponu ile kısaca durulayın. Tamponu direkt kuyucukların üstüne fışkıtmayın NOT: Slaytı eğerek ilk sıraya karşı, çapraz kontaminasyonu engelleyin ve yıkama tamponunu slaytın ortahattı boyunca dikkatlice akıtın, yıkama tamponunun slaytın alt kenarından çıkmasına izin verin. Sonra diğer sıraya doğru slaytı eğin ve bu prosedürü tekrarlayın ve artık yıkama tamponunun slaytın alt kenarından çıkmasına izin verin.slaytı (slaytları) slayt boyama tablası (tabağı) içinde 10 dakika yıkama tamponu ile yıkayın. Katı öğelerin substrat ile direkt temasından kaçının. Optimal sonuç için tampon solusyonunu 5 dakikadan sonra bir kez değiştirin. Slaytı (slaytları) boyama tablosundan dışarı çıkartın ve fazla yıkama tamponununu uzaklaştırın. NOT: Slaytın prosedür esnasında kurutmayın, bu önemlidir çünkü ; substaratın zarar görmesine yol açabilir. Lütfen slaytı herhangi bir şekilde kurutmayın ya da lekelendirmeyin, veya slaytın birkaç saniyeden uzun bir süre floresan antikor reaktifi olmadan durmasına izin verin. İkinci İnkübasyon: Yıkama prosedüründen sonra, slaytı hemen inkübasyon tepsisine döndürün ve herbir kuyucuğu yeterli hacimde FITC-konjugat ile kaplayın ve kuyucukların tamamiyle kaplanmış olduğundan emin olun. Slaytı(slaytları) karanlıkta oda sıcaklığında 30 dakika ± 10 dakika inkübe edin. Yıkama: İnkübasyon sonrası slaytları inkübasyon tepsisinden çıkartın ve sıkılabilir yıkama şişesi kullanarak yıkama tamponu ile kısaca durulayın. Tamponu direkt kuyucukların üstüne fışkıtmayın. Slaytı (slaytları) slayt boyama tablası (tabağı) içinde 10 dakika yıkama tamponu ile yıkayın. Optimal sonuç için tampon solusyonunu 5 dakikadan sonra bir kez değiştirin. *Opsiyonel boya sayıcı: Boya sayıcıyı (Evans mavisi) yıkama tamponunda 1:3000 oranında dilüe edin ve iyice karıştırın. Boyasayıcıyı boyama tablasında eğin slaytları içinde inkübe edin. Kullandığınız inkübasyon süresi detayları için kullandığınız ürünün referansına göre yukarıdaki Kit Prosedürü kısmına bakın. Evans Mavisi spesifik olmayan arka plan floresanını kapatır.

Sayfa: 10 / 12 İnkübasyon sonrası slaytları inkübasyon tepsisinden çıkartın ve yıkama tamponu ile kısaca durulayın. Fazla yıkama tamponununu uzaklaştırın. Lütfen slaytı herhangi bir şekilde kurutmayın ya da lekelendirmeyin 7. 8. Ortam vasatı: Her slaytın orta hattı boyunca yeterli hacimde ortam vasatını ekleyin. Baloncuk oluşumdan kaçınarak lameli dikkatlice pozisyonuna yerleştirin Okuma: Slaytı (slaytları) hemen 400-800x toplam büyütmeli bir florasan mikroskopta okuyun. (490 nm uyarı filtresi, 510 nm bariyer filtresi).

Sayfa: 11 / 12 c. İş Akışı

Sayfa: 12 / 12 12. SORUN GİDERME HATA OLABİLECEK SEBEPLER ÇÖZÜM Low cell density (Düşük hücre Yoğunluğu) Uneven fluorescence (Dengesiz floresan) Diffuse picture (yaygın, dağınık resim) Little or no fluorescence (az veya olmayan floresans) Backgraound fluorescence (Arka plan floresansı) - Deiyonize su ile uzun teması takip eden hücre çözünmesi. - Kuyucuktaki substrat üzerine doğrudan tampon sıçraması Proteolitik enzimler substrata saldırmış Serum kuyucuk içinde kurumuş, kenarda güçlü floresan Serum test kuyucuğunu kaplamamış Kuyucuklar arası çapraz reaksiyon Wax kalem ile işaretlenmiş slayt,slaytın üzerinde bir film üretir. Mikroskop yalnış ayarlanmış Slayt buzdolabında kapaksız inkübe edilmiş I.F. Microskop kirli. Lens üzerinde çizikler olabilir Konjugat ve slaytlar dondurulmuş ve çözülmüş Kontroller dilüe edilmiş -Serumun veya konjugatın bakteriyal kontaminasyonu -Mikroskop ayarlanmamış -Çok düşük yıkama tamponu ph-değeri (ph value 7.4 ± 0.2) Önerilen yıkama prosedürünü takip edin Inaktive serum Daima nemli ortamda inkübe edin. Test malzemesini uygun(yeterli) hacimde uygulayın İlk inkübasyonda kuyucuklar arasındaki kaçaklardan sakının. Standart kalem kullanın (wax olmayan) UV-lamba ayarını kontrol edin Slaytı parafin waxla yada tırnak cilasıyla kapatın Talimatlara ugyun olarak mikroskobu temizleyin Kontrol ve slaytları 2 C-8 C/35-46 F da muhafaza edin Talimatları kontrol edin, kit kontrolleri kullanıma hazırdır Koşulları kontrol edin Işığa maruz kalmış FITC konjugat Konjugatı ışıktan koruyarak muhafaza edin. - Yalnış yıkanma - Kurutulmuş slayt - Lipemik, hemolitik serum - Microskop hatası - Yıkama talimatlarını kontrol edin - Slaytın kurumasına izin vermeyin - Sadece taze serum kullanın - Doğru filtre/objektif olduğunu kontrol edin.

Sayfa: 13 / 12 - In vitro diagnostic kullanım ro diagnostic use XX - Pour diagnostic in vitro - Para uso diagnóstico in vitro - Ιn Vitro Diagnostikum - In Vitro ιαγνωστικό μέσο - Para uso Diagnóstico in vitro Katalog numarası Cataloge number Référence Catalogue Numéro de catálogo Bestellnummer Αριθμός παραγγελίας Número de catálogo lot Lot Lot Lote Chargen Bezeichnung Χαρακτηρισμός παρτίδας Lote EC uygunluk beyanı EC Declaration of Conformity Déclaration CE de Conformité Declaración CE de Conformidad Europäische Konformität Ευρωπαϊκή συμφωνία Déclaracão CE de Conformidade Rispettare le istruzioni per l uso See instructions for use Voir les instructions d utilisation Ver las instrucciones de uso Gebrauchsanweisung beachten Λάβετε υπόψη τις οδηγίες χρήσης Ver as instrucões de uso Da utilizzarsi entro Use by Utilise avant le Utilizar antes de Verwendbar bis Χρήση μέχρι Utilizar antes de 2-8 C de muhafaza Store at 2-8 C (35-46 F) Conserver à 2-8 C Conservar a 2-8 C Lagerung bei 2-8 C Φυλάσσεται στους 2-8 C Conservar entre 2-8 C imalatçı Manufactured by Fabriqué par Fabricado por Hergestellt von Κατασκευάζεται από Fabricado por Evans Mavisi boyası Evans-Blue Dye coloration au Bleu Evans Colorante Azul de Evans Evans-Blue Färbelösung Evans Blue Evans Blue pozitif kontrol Positive Control Contrôle Positif Control Positivo Positiv Kontrolle Θετικός ορός ελέγχου Controlo positivo Controllo negativo Negative Control negatif kontrol Control Negativo Negativ Kontrolle Αρνητικός ορός ελέγχου Controlo negativo ortam vasatı Mounting media milieu de montage Medio de montaje Mounting Medium Μέσο μονιμοποίησης Meio de montagem konjugat Conjugate Conjugé Conjugado Konjugat Σύζευγμα Conjugado mikroskop slaytı Microscope slide lame de microscope Portaobjetos Objektträger Αντικειμενοφόρο πλακίδιο Lâmina yıkama tamponu Wash Buffer Tampon de Lavage Solucão de lavagem Waschpuffer Ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης Solución de lavado numune tamponu Sample Buffer Tampon de Echantillons Solucão de Muestras Probenpuffer Ρυθμιστικό διάλυμα δειγμάτων Solución de Muestras XX test XX tests XX tests XX pruebas XX Bestimmungen XX προσδιορισμοί XX Testes