RIDASCREEN Giardia. Makale no.: C1101

Transkript

1 RIDASCREEN Giardia Makale no.: C1101 R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D Darmstadt, Almanya Telefon: +49 (0) / Fax: +49 (0)

2 1. Kullanım amacı İn vitro diagnostik kullanım içindir. RIDASCREEN Giardia insan dışkı örneklerinde Giardia lamblia kalitatif tespiti için enzim immunoassaydir. 2. Özet ve testin açıklaması Giardia lamblia giardia kistlerinin oral alımından sonra insanların ince bağırsaklarında enfeksiyonlara sebep olan flagellate parazitleridir. Dünya çapında bulunduğundan Giardia lamblia patojeni özellikle tıbbi durumlarda seyahatle ilgili kronik ishalin önemli nedenidir. Kontamine gıda veya su içindeki kistlerin alımından sonra enfeksiyon oluşur. ABD de Giardia lamblia patojeni su alımı ile bağlantılı olarak ishal ile hastalığın en sık nedenidir. Gelişmemiş ülkelerde giardia enfeksiyonu 10 yaş altı çocuklarda 15 20% prevalans ile hastalığın en sık nedenlerinden biridir. Giardiasis (lambliasis) akut veya kronik ishal olarak oluşur, böylece asemptomatik kişiler parazit kistleri salgılayabilir. İnkübasyon süresi 3 ile 42 gün arasında değişir. Akut enfeksiyon aşağıdaki belirtileri gösterir: sulu ishalin aniden ortaya çıkması (mide gazı ile birlikte sarı renk, köpüklü kıvamda ve hoş olmayan kokuya sahip sık dışkı), iştah kaybı, bulantı, uyuşukluk ve kilo kaybı. Geçmişte, kulanılan lambliasis tanısı için sık kullanılan bu yöntem kistleri tespit etmek için mikroskop altında dışkı örneklerini incelemek içindi ve bu deneyimli personel mevcudiyetini gerektirir. Kist salgısının sıklığı büyük ölçüde değişebileceğinden uzun süre boyunca bir dizi birden fazla dışkı örneğinde bu testleri yapmak gereklidir. 3. Test prensibi RIDASCREEN Giardia Test sandviç-tip yöntemde spesifik antikorlar kullanır. Guardia lamblia kistleri ve trofozoitlerinin spesifik antijenleri için guardia spesifik antikorlar mikrokuyu plağın kuyu yüzeyine bağlanır. Bir pipet oda sıcaklığında (20 25 C) inkübasyon için biyotinli anti-giardia antikorları (Konjugat 1) ile birlikte mikrokuyu plağın kuyusuna incelenecek kontrol numuneleri ve dışkı örneğinin bir süspansiyonunu yerleştirmek için kullanılır. Yıkama aşaması sonrası, streptavidin polyperoksidaz konjugat (Konjugat 2) eklenir ve tekrar oda sıcaklığında (20 25 C) inkübe edilir. Numunede Giardia lamblia antijen varlığıyla, hareketsiz antikor, Giardia lamblia antijen, ve konjuge antikor sandviç kompleksi oluşturur. Başka yıkama aşaması bağlanmamış streptavidin poly-peroksidaz konjugatı kaldırır. Substrat eklenmesinden sonra bağlanan enzim mikrokuyu plağın kuyularındaki önceden renksiz olan solüsyonun rengini eğer test pozitifse maviye dönüştürür. Durdurma reaktifinin eklenmesi rengi maviden sarıya dönüştürür. Ekstinksiyon numunedeki Giardia lamblia antijenlerinin konsantrasyonuyla orantılıdır. RIDASCREEN Giardia

3 4. Sağlanan reaktifler Kit içindeki reaktifler 96 tespit için yeterlidir. Plak Seyreltici 1 Yıkama 96 Mikrokuyu plak, strip tutucuda 12 mikrokuyu strip (bölünebilen); Giardia lamblia spesifik antijenleri için spesifik monoklonal antikorlarla kaplı 100 ml Örnek dilüsyon buffer, protein-buffered NaCl solüsyonu; kullanıma hazır;mavi renkli 100 ml Yıkama buffer, fosfat buffered NaCl solüsyonu (konsantre 10-kat); 0.1% thimerosal içerir Kontrol + Kontrol - Konjugat 1 Konjugat 2 2 ml 2 ml 13 ml 13 ml İnaktif Giardia lamblia antijen; kullanıma hazır Negatif kontrol (örnek dilüsyon buffer); kullanıma hazır Stabilize protein solüsyonunda Giardia lamblia spesifik antijenleri için biyotin-konjuge monoklonal antikorlar; kullanıma hazır, kırmızı renkte Stabilize protein solüsyonunda streptavidin poly- peroksidaz konjugat; kullanıma hazır; turuncu renkli Substrat Durdurma 13 ml Hidrojen peroksit/tmb; kullanıma hazır 8 ml Durdurma reaktifi; 1 N sülfürik asit;kullanıma hazır 5. Reaktifler ve onların saklanması Tüm reaktifler 2 8 C de saklanmalıdır ve etikette basılı tarihe kadar kullanılabilir. Seyreltilmiş yıkama buffer 2 8 C de saklanması şartıyla maksimum 4 hafta için kullanılabilir. Mikrobiyel kontaminasyon önlenmelidir. Son kullanma tarihinden sonra kalite garantisi artık geçerli değildir. Alüminyum çanta kilit parçalanmayacak şekilde makasla açılmalıdır. Gerekmeyen herhangi mikrokuyu strip hemen alüminyum çantaya konulmalı ve 2 8 C de saklanmalıdır. Renksiz substratın ayrışmasını veya oto-oksidasyon nedeniyle maviye dönmesini önlemek için direkt ışıktan korunmalıdır. Birkez substrat maviye dönmüşse kullanılmamalıdır. 6. Ek gerekli reaktifler ve gerekli ekipman 6.1. Reaktifler - Distile veya deiyonize su RIDASCREEN Giardia

4 6.2. Ekipman Test tüpleri Tek kullanımlık pipetler (Makale no.: Z0001) Vorteks karıştırıcı (isteğe bağlı, 9.3. bakın) µl ve 1 ml hacimleri için mikropipet Ölçüm silindiri (1000 ml) Kronometre Mikrokuyu plaklar veya çok kanallı pipetler için yıkama cihazı (300 µl) Mikrokuyu plaklar için fotometre (450 nm ve referans filtre nm) Filtre kağıdı (laboratuvar havlusu) 0.5% hipoklorit solüsyonu içeren atık kabı 7. Kullanıcılar için önlemler Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir. Bu test sadece eğitimli laboratuvar personeli tarafından yapılmalıdır. Medikal laboratuvarlardaki çalışma kuralları takip edilmelidir. Her zaman bu test için kullanıcı talimatlarına sıkıca bağlı kalın. Numuneler veya reaktifler ağızla pipetlenmemeli ve yaralı cilt veya mukoz membranlarıyla temas önlenmelidir. Numuneleri kullanırken kişisel koruyucu donanım (Uygun eldivenler, laboratuvar ceketi, koruyucu gözlük) giyin ve test bittikten sonra ellerinizi yıkayın. Örneklerin işlendiği alanlarda sigara içmeyin veya birşey yiyip içmeyin. Daha fazla detay için da Malzeme Güvenlik Bilgi Formuna (MSDS) bakın. Bu kit inaktif giardia antijeni içeren bir pozitif kontrol içerir. Hasta örnekleri gibi olası bulaşıcı materyal gibi işlenmeli ve uluslararası güvenlik düzenlemeleri ile uyumlu kullanılmalıdır. Yıkama buffer koruyucu olarak 0.1 % thimerosal içerir. Bu maddenin cilt veya mukoz membranlarıyla teması önlenmelidir. Kullanımdan sonra tüm reaktiflerin ve materyallerin uygun ve sorumlu şekilde atımını sağlayın. Atım için lütfen ulusal düzenlemelere bağlı kalın. 8. Numune toplama ve saklama Kullanılıncaya kadar test materyalini 2 8 C de saklayın. Eğer materyal üç gün içinde test için kullanılamıyorsa -20 C veya daha soğukta saklanmasını öneririz. Numunenin tekrar tekrar dondurulup çözdürülmesinden kaçının. Dışkı örnekleri ve rektal lekeler koruyucular, hayvan serumları, metal iyonlar, oksitleyici maddeler veya deterjanlar içeren taşıma ortamıyla taşıma kaplarında toplanmamalıdır, bunlar RIDASCREEN Giardia ELISA ya müdahale edebilir. RIDASCREEN Giardia

5 Rektal lekeler kullanılacaksa dışkı materyali hacminin test için yeterli olduğundan emin olun (yaklaşık 100 mg). Kontakt izleme asemptomatik taşıyıcıları belirlemek amacıyla klinik semptomlar göstermeyen kontakt kişilerden alınan dışkı örneklerini içermelidir. 9. Test prosedürleri 9.1. Genel bilgi Tüm reaktifler ve mikrokuyu plak kullanımdan önce oda sıcaklığına (20 25 C) getirilmelidir. Bu mikrokuyu stripler oda sıcaklığına erişene kadar alüminyum çantadan çıkartılmamalıdır. Bu reaktifler kullanımdan hemen önce iyice karıştırılmalıdır. Kullandıktan sonra mikrokuyu stripler (kapalı çantalarda yerleşik) ve reaktifler tekrar 2 8 C de saklanmalıdır. Birkez kullanıldığında mikrokuyu stripler tekrar kullanılmamalıdır. Bu reaktifler ve mikrokuyu stripler paketleme zarar görmüşse veya şişelerden sızıntı varsa kullanılmamalıdır. Çapraz kontaminasyonu önlemek için örneklerin kit bileşenleriyle direkt teması önlenmelidir. Bu test direkt güneş ışığında yapılmamalıdır. Buharlaşma kayıplarını önlemek için mikrokuyu plağın kaplanmasını veya üstüne plastik wrap yerleştirilmesini öneririz Yıkama buffer hazırlama 9 kısım distile suyla 1 kısım yıkama buffer konsantreyi Yıkama karıştırın. Konsantre içinde bulunan herhangi kristali 37 C de su banyosunda ısıtılarak önceden çözülmüş olmalıdır. 9.3 Örnekleri hazırlama 1 ml RIDASCREEN örnek dilüsyon buffer Seyreltici 1 ile etiketli bir test tüpünü doldurun. Sadece ikinci çıkıntının üstüne ince dışkı örneğini aspire etmek için (yaklaşık 100 µl) ve süspansiyon yapmak için test tüpünde buffera eklenmesi için tek kullanımlık bir pipet kullanın (makale no. Z0001). Katı dışkı örneklerini askıya almak için spatula veya tek kullanımlık aşılama döngüsü ile eşit miktarda örnek kullanın (yaklaşık mg). İçine aspirasyon ve tek kullanımlık pipetten ejeksiyon ile dışkı süspansiyonunu homojenize edin veya alternatif olarak Vorteks karıştırıcıda karıştırın. İri dışkı partiküllerinin çökelmesi için kısa süre (10 dakika) süspansiyonu beklemeye bırakın ve dışkı süspansiyonunun bu netleşmiş supernatantı testte direkt olarak kullanılabilir. Eğer test prosedürü otomatik ELISA sisteminde yapılıyorsa supernatant partikülsüz olmalıdır. Bu durumda 5 dakika 2,500 G da örneğin santrifüj edilmesi önerilir. Not: Seyreltici 1 içinde seyreltilen dışkı örnekleri Seyreltici 1 kullanılması şartıyla tüm RIDASCREEN ELISA içinde kullanılabilir. RIDASCREEN Giardia

6 9.4. İlk inkübasyon Strip tutucuda yeterli sayıda kuyunun yerleştirilmesinden sonra 100 µl pozitif kontrol Kontrol +, negatif kontrol Kontrol - veya dışkı örneği süspansiyonunu kuyulara ekleyin. Daha sonra 100 μl biyotin-konjugatlı antikor Konjugat 1 ekleyin ve karıştırın (plağın kenarına hafifçe vurarak); sonra oda sıcaklığında (20 25 C) 30 dk inkübe edin Yıkama Dikkatli yıkama doğru sonuçların elde edilmesi için önemlidir ve bu nedenle talimatlara göre ilerleyin. Kuyularda inkübe edilen madde atık kabına boşaltılmalı ve yerel düzenlemelere uygun olarak atılmalıdır. Bundan sonra kalan nemi uzaklaştırmak için emici kağıt üstüne plağa vurarak çıkartın. Sonra her defasında 300 µl yıkama buffer kullanılarak 5 kez plağı yıkayın. Emici kağıdın hala kuru ve kullanılmamış olan kısmında her yıkama sonrası vurup çıkartarak tamamen kuyuların boşaldığından emin olun. Mikroplak yıkayıcı veya tam otomatik ELISA kullanıyorsanız makinenin doğru şekilde ayarlandığından emin olun; gerekirse üreticiden ayarları isteyin. R-Biopharm tarafından verilen aletler valide ayarlar ve iş protokolleri ile zaten programlanmıştır. Yıkama iğnelerinin tıkanmasını önlemek için, sadece partikülsüz dışkı süspansiyonları dağıtılmaldır (bakın 9.3.,Önekleri hazırlama). Ayrıca tüm sıvının her yıkama aşamasında aspire edildiğinden emin olun İkinci inkübasyon Kuyulara 100 µl streptavidin poly-peroksidaz konjugat Konjugat 2 doldurmak için bir pipet kullanın sonra oda sıcaklığında (20 25 C) 15 dk inkübe edin Yıkama Kısım 9.5 de belirtildiği gibi yıkayın Üçüncü inkübasyon Tüm kuyuları 100 µl substrat Substrat ile doldurun. Sonra oda sıcaklığında karanlıkta (20 25 C) 15 dk plağı inkübe edin. Daha sonra reaksiyonu durdurmak için 50 µl durdurma reaktifi Durdurma ile tüm kuyuları doldurun. Plağın kenarına hafifçe vurarak dikkatlice karıştırdıktan sonra 450 nm de ekstinksiyon (isteğe bağlı: 450/620 nm) ölçün. Havada yani mikrokuyu plak olmadan sıfır noktasını ayarlayın. Not: Yüksek-pozitif hasta örnekleri substratın siyah renkli çökeltilerine sebep olabilir. RIDASCREEN Giardia

7 10. Kalite kontrol reaktif süresi bitiminin belirtileri Kalite kontrol amaçları için, testin doğru şekilde yapılmış olması ve reaktiflerin stabil olmasını sağlamak için pozitif ve negatif kontroller her test yapıldığında kullanılmalıdır. Negatif kontrol için ekstinksiyon oranı (OD) 450 nmde 0.2 den küçükse (450/620 nm de dan küçük) ve pozitif kontrol için ölçülen değer 450 nm veya 450/620 nm de 0.8 den büyükse test doğru yapılmıştır. Negatif kontrol için 0.2 den (0.160) büyük değer yıkamanın yetersiz olmuş olabileceğini gösterir. Olması gereken değerlerden sapma, bir bulanıklık veya kuyulara doldurulmadan önce renksiz substratın mavi renklenmesi reaktiflerin süresinin bittiğini gösterebilir. Öngörülen değerler karşılanmazsa, aşağıdaki noktalar testi tekrarlamadan önce kontrol edilmelidir: - Kullanılan reaktiflerin son kullanma tarihi - Kullanılan ekipmanın işlevselliği (ör. kalibrasyon) - Doğru test prosedürü - Kontaminasyon veya sızıntılar için kit bileşenlerinin görsel kontrolü maviye dönen substrat solüsyonu kullanılmamalıdır. Testi tekrarladıktan sonra hala şartlar yerine getirilmediyse, lütfen üretici veya yerel R-Biopharm distribütörünüzle temasa geçin. 11. Değerlendirme ve yorumlama Cut-off hesaplama Cut-off oluşturmak için 0.15 ekstinksiyon birimleri negatif kontrol için ölçülen ekstinksiyona eklenir. Cut-off = negatif kontrol için ekstinksiyon Test sonuçları Ekstinksiyon oranı hesaplanan cut-off değerinden %10 daha fazlaysa numunenin değerlendirilmesi pozitiftir. Ekstinksiyon oranı cut-off değerinden %10 az ve %10 fazlası aralığındaysa numunenin değerlendirilmesi marjinaldir. Tekrar taze dışkı örneğiyle yeniden inceleme giri bölge içine düşüyorsa örneğin değerlendirilmesi negatifdir. Hesaplanan cut-off altında %10 dan fazla ekstinksiyonlara sahip örnekler negatif düşünülmelidir. RIDASCREEN Giardia

8 12. Yöntem sınırlamaları RIDASCREEN Giardia Testi dışkı örneklerinde Giardia lamblia spesifik antijenlerini belirler. Klinik belirtilerin ortaya çıkması ya da şiddeti için ekstinksiyonun belirlenen seviyesiyle ilişkilendirmek mümkün değildir. Elde edilen sonuçlar her zaman klinik işaretler ve semptomlarla birlikte yorumlanmalıdır. Pozitif sonuç başka bulaşıcı patojenlerin varlığını ekarte etmez. Negatif sonuç giardiasis olasılığını ekarte etmez. Böyle bir sonuç parazitin aralıklı atılımından veya örnekteki antijen miktarının çok küçük olabilmesinden kaynaklanabilir. Hasta geçmişi Giardia lamblia enfeksiyon şüphesini destekliyorsa inceleme başka dışkı örneğiyle tekrarlanmalıdır. Marjinal sonuç dışkı örneğindeki parazitlerin homojen olmayan dağılımından kaynaklanabilir. Bu durumda inceleme aynı örnekten ikinci bir süspansiyonla veya incelenmesi gereken başka dışkı örneğiyle tekrarlanmalıdır. 13. Performans özellikleri Klinik kıyaslama çalışması Büyük Britanya'da klinik inceleme toplam 240 dışkı örneğiyle RIDASCREEN Giardia Testini değerlendirdi (prospektif ve körleştirilmiş retrospektif çalışmalar). Giardia için mikroskopinin belirlenmiş Britanya yöntemleri (salin emülsiyon ve iyodin lekesi) ve farklılaştırarak real-time PCR ile bir kıyaslama vardı. Bu çalışmanın sonuçları Tablo 1 de özetlenmektedir. Tablo 1: Mikroskop ve real-time PCR ile RIDASCREEN Giardia ELISA kıyaslaması Mikroskopi Real-time PCR # Pozitif Negatif Pozitif Negatif RIDASCREEN Giardia Pozitif Negatif Duyarlılık (CI): 85 % (55-98) 96 % (81-100) Özgüllük (CI): 93 % (89-96) 100 % (98-100) # İki dışkı örneğinde materyalin yetersiz miktarı CI: % cinsinden güven aralığı 13.2 Analitik duyarlılık RIDASCREEN Giardia ELISA analitik duyarlılığını belirlemek için giardia kistlerinin bilinen bir miktarı ile bir örnekten doğrusal dilüsyon serileri üretildi ve üç kez ölçüldü. Tespit sınırı (LoD) RIDASCREEN Giardia

9 tüm tekrralarda pozitif olarak değerlendirilecek son konsantrasyondur. Ölçümlerin sonuçları Tablo 2 de gösterilmektedir. Tablo 2: RIDASCREEN Giardia ELISA için analitik duyarlılık sonuçları Kistler / Reaksiyon MV [OD 450/620] Sonuçlar 2.5 x Pozitif 1.25 x Pozitif 6.25 x Pozitif 3.12 x Pozitif 1.56 x Negatif Negatif Negatif Kesinlik İntra-test tekrarlanabilirliğini bellirlemek için negatif-yüksek-pozitif aralığında tam ölçümü temsil ederek bu referansların 40 tekrarı test edildi. Ortalama değerler ve varyasyon katsayıları (VC) kitlerin üç lotu için belirlendi. İnter- test tekrarlanabilirliği için 10 farklı çalışma gününden elde edilen referanslar gün başına iki çalışmayla iki kez test edildi. Ölçümler kitlerin üç lotu için üç teknisyen tarafından belirlendi. İnter-lot tekrarlanabilirliği kitlerin tüm üç lotu için belirlendi. Çalışmanın sonuçları Tablo 3 de gösterilmektedir. Tablo 3: RIDASCREEN Giardia ELISA tekrarlanabilirliği/kesinliği Referans MV [OD 450/620] 1 Intra-test Inter-test Inter-lot VC (%) 5.67% 6.37% 12.03% 13.59% 11.04% 9.25% 11.85% MV [OD 450/620] VC (%) 5.02% 8.17% 7.35% 15.08% 15.52% 12.89% 15.07% MV [OD 450/620] VC (%) 9.52% 9.42% 20.29% 18.51% 12.92% 11.45% 15.30% MV [OD 450/620] VC (%) 7.43% 10.59% 7.07% 16.11% 13.29% 11.95% 14.59% RIDASCREEN Giardia

10 5 6 MV [OD 450/620] VC (%) 8.92% 13.43% 12.97% 21.12% 18.94% 20.21% 20.49% MV [OD 450/620] VC (%) 9.53% 16.41% 10.48% 22.22% 15.16% 21.00% 20.21% Çapraz reaktivite Bağırsak kanalından patojenik mikroorganizmaların çeşitliliği RIDASCREEN Giardia Testiyle incelendi ve çapraz reaktivite göstermedi. Bu çalışmalar ml başına organizma konsantrasyonları gösteren seyreltilmemiş bakteri veya virüs süspansiyonlarıyla yapıldı. Bu çalışmanın sonuçları Tablo 4 te listelenmektedir. Tablo 4: Patojenik mikroorganizmalarla çapraz reaktivite Organizma Köken MV [OD 450/620] Adenovirus Hücre kültür supernatant Aeromonas hydrophila Kültür Arcobacter butzleri Kültür Astrovirus Hücre kültür supernatant Bacillus cereus Kültür Bacteroides fragilis Kültür Campylobacter coli Kültür Campylobacter fetus subsp. Kültür Campylobacter jejuni Kültür Campylobacter lari subsp. Kültür Campylobacter upsaliensis Kültür Candida albicans Kültür Citrobacter freundii Kültür Clostridium bifermentans Kültür Clostridium difficile Kültür Clostridium novyi Kültür Clostridium perfringens Kültür Clostridium septicum Kültür Clostridium sordellii Kültür Clostridium sporogenes Kültür Cryptosporidium muris Kültür Cryptosporidium parvum Kültür E. coli (EPEC) Kültür E. coli (ETEC) Kültür E. coli (STEC) Kültür Entamoeba histolytica Kültür Enterobacter cloacae Kültür RIDASCREEN Giardia

11 Enterococcus faecalis Kültür Klebsiella oxytoca Kültür Proteus vulgaris Kültür Pseudomonas aeruginosa Kültür Rotavirus Hücre kültür supernatant Salmonella enteritidis Kültür Salmonella typhimurium Kültür Serratia liquefaciens Kültür Shigella flexneri Kültür Staphylococcus aureus Kültür Staphylococcus epidermidis Kültür Vibrio parahaemolyticus Kültür Yersinia enterocolitica Kültür Müdahale edici maddeler Aşağıdaki maddelerin belirlenen konsantrasyonlarda giardia pozitif ve giardia negatif dışkı örneklerine karıştırıldığında test sonuçlarına etkisi görülmedi: baryum sülfat (18.5% w/w), loperamid (antidiarrheal ilaç; 0.02% w/w), Pepto-Bismol (antidiarrheal ilaç, 6.6% v/w), mukinler (5.0% w/w), siklamat (yapay tatlandırıcı, 1.3% v/w), insan kanı (5.0% v/w), stearik asit ve palmitinik asit (karışım 1:1, 40.0% w/w), metronidazol (0.5) (antibiyotik 3.0% v/w), diklofenak (0.1% v/w). RIDASCREEN Giardia

12 Ek Teste özgü semboller: Plak Seyreltici 1 Yıkama Kontrol + Kontrol - Mikrokuyu plak Örnek dilüsyon buffer Yıkama buffer Pozitif kontrol Negatif kontrol Konjugat 1 Konjugat 1 Konjugat 2 Konjugat 2 Substrat Durdurma Substrat Durdurma reaktifi RIDASCREEN Giardia

13 Bibliyografi 1. Black, R. E. et al.: Giardiasis in day-care centers: Evidence of person-to-person transmission. Pediatrics 60 (No. 4), (1977). 2. Craun, G. F.: Waterborne Giardiasis in the United States: A review. Am. J. Pub. Health 69 (No. 8), (1979). 3. Nask, T. E. et al.: Experimental human infections with Giardia lamblia. J. Infect. Dis. 156 (No. 6), (1987). 4. Smith, H. V. et al.: Giardia and Giardiasis: What's in a name? Microbiol. Eur. 3 (No. 1), (1995). 5. Thompson, R. C. A., Reynoldson, J. A.: Giardia and Giardiasis. Adv. Parasitol. 32, (1993). 6. Xiao, L.: Giardia infection in farm animals. Parasitology today 10 (No. 11), (1994). 7. Schunk, M. et al.: Detection of Giardia lamblia and Entamoeba histolytica in stool samples by two enzyme immunoassays. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20, (2001) RIDASCREEN Giardia