07028148190 07028148500 300 cobas e 801 Türkçe Sistem bilgisi Kısa adı VITDT 2 10145 ACN (aplikasyon kod numarası) Kullanım amacı Bu test, insan serum ve plazmasında total 25 hidroksi D vitamininin kantitatif tayinine yöneliktir. Bu test, D vitamini yeterliliğinin değerlendirmesinde yardımcı olarak kullanılır. Elektrokemilüminesans bağlama testi cobas e 801 immünolojik test analizöründe kullanım amaçlıdır. Özet D Vitamini, çoğunlukla güneş ışığına maruziyetle deride üretilen, yağda çözünür bir steroid hormon prekürsörüdür. D Vitamini biyolojik olarak etkisizdir ve biyolojik olarak aktif 1,25 dihidroksi D vitamini haline gelmesi için karaciğer ve böbrekte iki ardışık hidroksilasyondan geçmesi gerekir. 1 D Vitamininin en önemli iki formu D 3 vitamini (kolekalsiferol) ve D 2 vitaminidir (ergokalsiferol). D 3 vitamininin aksine, insan vücudu takviye edilmiş gıdalarla veya gıda takviyeleriyle alınan D 2 vitaminini üretemez. İnsan plazmasında D 3 ve D 2 vitamini, D vitamini bağlayıcı proteine bağlanır ve karaciğere taşınır ve karaciğerde her ikisi de hidroksillenerek 25 hidroksi D vitaminini oluşturur. 25 hidroksi D vitamininin insan vücudunda D vitamininin ana depolanma formu olduğundan, genel D vitamini durumunu belirlemek için uygun metabolit olduğu yaygın olarak kabul edilir. D vitamininin dolaşımdaki bu birincil formu biyolojik olarak inaktiftir ve düzeyleri dolaşımdaki 1,25 dihidroksi D vitamininden yaklaşık 1000 kat daha fazladır. Dolaşımdaki 25 hidroksi D vitamininin yarı ömrü 2 3 haftadır. Serumda ölçülebilir 25 hidroksi D vitamininin çoğunluğu 25 hidroksi D 3 vitaminidir, 25 hidroksi D 2 vitamini yalnızca D 2 vitamini takviyesi alan hastalarda ölçülebilir düzeylere ulaşır. 2,3,4 D 2 vitamininin daha az etkili olduğu kabul edilir. 5 24 hidroksilaz (CYP24A1) ile 25 hidroksi D vitamini katabolizmasının en fazla bulunan ürünü 24,25 dihidroksi D vitaminidir. 6 Dolaşımdaki toplam 25 hidroksi D vitamininin % 2 20'sini oluşturur, yaklaşık 7 günlük yarı ömrü vardır ve serumda yaklaşık 10 nmol/l'ye kadar konsantrasyonlarda bulunur. 6,7,8 D vitamini kemik sağlığı için olmazsa olmazdır. Çocuklarda şiddetli eksikliği raşitizm olarak bilinen kemik malformasyonuna neden olur. Daha hafif derecelerde yetersizliğin besinle alınan kalsiyumun kullanımında düşük verimliliğe yol açtığına inanılmaktadır. 9 D vitamini eksikliği kas güçsüzlüğüne neden olur; yaşlılarda, düşme riski D vitamininin kas fonksiyonu üzerindeki etkisine bağlanmıştır. 10 D vitamini eksikliği, sekonder hiperparatiroidizmin yaygın bir nedenidir. 11,12 Özellikle D vitamini eksikliği olan yaşlı yetişkinlerde paratiroid hormon düzeylerinde yükselmeler osteomalazi, kemik döngüsünde artış, kemik kitlesinde azalma ve kemik kırıkları riskine yol açabilir. 13 Düşük 25 hidroksi D vitamini konsantrasyonları düşük kemik mineral yoğunluğuyla da ilişkilidir. 14 Diğer klinik verilerle birlikte, sonuçlar kemik metabolizmasının değerlendirilmesinde yardımcı olarak kullanılabilir. Şimdiye kadar D vitaminin 200'ün üzerinde farklı genin ekspresyonunu etkilediği gösterilmiştir. Yetersizliği diyabet, farklı kanser formları, kardiyovasküler hastalık, otoimmün hastalıklar ve doğuştan gelen bağışıklık ile ilişkilendirilmiştir. 2 testinde 25 hidroksi D 3 vitamini ve 25 hidroksi D 2 vitaminini bağlamak için yakalama proteini olarak rutenyum kompleksi a) ile işaretlenmiş D vitamini bağlayıcı bir protein (VDBP) kullanılmaktadır. 24,25 dihidroksi D vitamini ile çapraz reaktivite spesifik bir monoklonal antikor ile bloke edilir. a) Tris(2,2'-bipiridil)rutenyum(II)-kompleksi (Ru(bpy) ) Test prensibi Yarışma prensibi. Toplam test süresi: 27 dakika. 1. enkübasyon: Numunenin (12 µl) ön işlem reaktifi 1 ve 2 ile enkübe edilmesiyle, bağlı 25 hidroksi D vitamini, VDBP'den salınır. 2. enkübasyon: Ön işleme tabi tutulmuş numunenin rutenyumla işaretlenmiş D vitamini bağlayıcı proteinle enkübe edilmesiyle 25 hidroksi D vitamini ile rutenyumlanmış VDBP arasında bir kompleks oluşur. İşaretlenmemiş özel bir antikor, numunede bulunan 24,25 hidroksi D vitaminine bağlanır ve bu D vitamini metabolitiyle çapraz reaktiviteyi inhibe eder. 3. enkübasyon: Streptavidin kaplı mikropartiküller ve biotin ile işaretlenmiş 25 hidroksi D vitamininin eklenmesinin ardından, bağlanmamış, rutenyumla işaretlenmiş VDBP'ler dolu hale gelir. Rutenyumlanmış VDBP ve biotinlenmiş 25 hidroksi D vitamininden oluşan bir kompleks oluşur ve biotin ile streptavidinin etkileşimi aracılığıyla katı faza bağlanmış hale gelir. Reaksiyon karışımı ölçüm hücresine aspire edilir ve burada mikropartiküller manyetik olarak elektrodun yüzeyi üzerine yakalanır. Bundan sonra bağlanmamış maddeler ProCell II M ile uzaklaştırılır. Elektroda voltaj uygulanması, fotoçoğaltıcı ile ölçülen kemilüminesan emisyonunu başlatır. Sonuçlar, 2 noktalı kalibrasyonla cihaza özgü bir şekilde oluşturulan bir kalibrasyon eğrisi ve cobas link aracılığıyla sağlanan bir ana eğri ile belirlenir. Reaktifler - çalışma solüsyonları cobas e paketi (M, R1, R2) ve ön işlem reaktifleri (PT1, PT2) VITDT 2 olarak etiketlidir. PT1 Ön işlem reaktifi 1, 1 şişe, 9.1 ml: Ditiotreitol 1 g/l; ph 5.5. PT2 Ön işlem reaktifi 2, 1 şişe, 9.1 ml: Sodyum hidroksit 28 g/l. M R1 R2 Streptavidin kaplı mikropartiküller, 1 şişe, 12.4 ml: Streptavidin kaplı mikropartiküller 0.72 mg/ml; koruyucu madde. D vitamini bağlayıcı protein Ru/(bpy) (gri kapaklı), 1 şişe, 13.9 ml: Rutenyumla işaretlenmiş D vitamini bağlayıcı protein 100 µg/l; bis tris propan tamponu 100 mmol/l; albümin (insan) 40 g/l; ph 6.4; koruyucu madde. 25 hidroksi D vitamini~biotin, 1 şişe, 13.9 ml: Biotinlenmiş 25 hidroksi D vitamini 140 µg/l; bis tris propan tamponu 100 mmol/l; ph 8.6; koruyucu madde. Önlemler ve uyarılar İn vitro diagnostik kullanım içindir. Tüm laboratuvar reaktiflerinin kullanılmasında gerekli olan normal önlemleri uygulayın. Tüm atık malzemelerin atılması yerel yönetmeliklere göre olmalıdır. Talep edildiği takdirde profesyonel kullanıcılara güvenlik veri formu verilebilir. Bu kit 1272/2008 sayılı Düzenlemeye (EC) göre aşağıdaki şekilde sınıflandırılan bileşenler içerir: Tehlike H290 H314 Önleme: P280 Yanıt: Metallerde aşındırıcı olabilir. Ağır cilt yanıklarına ve gözlerde yaralanmaya neden olur. Koruyucu eldiven/koruyucu kıyafet/göz koruması/yüz koruması kullanın. 1 / 5
P301 + P330 + P331 P303 + P361 + P353 P304 + P340 + P310 P305 + P351 + P338 + P310 P390 YUTULDUĞUNDA: Ağzınızı çalkalayın. Kusturmaya ÇALIŞMAYIN. CİLDE BULAŞIRSA (veya saça): Kirlenmiş tüm giysilerinizi hemen çıkarın. Cildinizi su/duş ile durulayın. SOLUNDUĞUNDA: Zarar gören kişiyi temiz havaya çıkartın ve kolay biçimde nefes alması için rahat bir pozisyonda tutun. Hemen ULUSAL ZEHİR DANIŞMA MERKEZİNİN 114 NO.LU TELEFONUNU veya doktoru/hekimi arayın. GÖZ İLE TEMASI HALİNDE: Su ile birkaç dakika dikkatlice durulayın. Kontakt lens varsa ve çıkarması kolaysa, çıkarın. Durulamaya devam edin. Derhal bir ZEHİR TEDAVİ MERKEZİNE/doktora başvurun Materyal hasarını önlemek için dökülmeyi emdirin. Ürün güvenlik etiketi öncelikle AB GHS kılavuzlarına tabidir. İletişim telefon no.: tüm ülkeler: +49-621-7590 İnsanlardan elde edilmiş tüm maddeler potansiyel olarak bulaşıcı kabul edilmelidir. İnsan kanından elde edilen tüm ürünler sadece ayrı ayrı test edilmiş donörlerden alınan ve içinde HBsAg'nin ve HCV ile HIV'e karşı oluşan antikorların bulunmadığı gösterilmiş kandan hazırlanmıştır. Uygulanan test yöntemleri FDA onaylıdır veya Avrupa Direktifi 98/79/EC, Ek II, Liste A'ya uygun şekilde izinlidir. Ancak, hiçbir test yöntemi potansiyel enfeksiyon riskinin olmadığına dair mutlak kesinlik veremediği için, maddeler, hasta örneğiyle aynı dikkat seviyesinde kullanılmalıdır. Maruz kalma durumunda, sorumlu sağlık yetkililerinin direktifleri takip edilmelidir. 15,16 Tüm reaktifler ve numune tiplerinde (örnek, kalibratör ve kontrol) köpük oluşumunu engelleyin. Reaktif kullanımı Kit içindeki reaktifler, sökülemeyen kullanıma hazır bir ünite şeklinde monte edilmiştir. Doğru çalışma için gerekli tüm bilgilere cobas link aracılığıyla ulaşılabilir. Saklama ve stabilite 2 8 C'de saklayın. Dondurmayın. cobas e paketini kullanmadan önce otomatik karıştırma sırasında mikropartiküllerin tamamının kullanılabilmesini sağlamak için dik şekilde saklayın. Stabilite: açılmamış olarak 2 8 C'de cobas e 801 analizöründe belirtilen son kullanma tarihine kadar 12 hafta Örnek toplama ve hazırlama Sadece aşağıda listelenen örnekler test edilmiştir ve kabul edilebilir olarak bulunmuştur. Standart numune alma tüpleri veya ayırma jeli içeren tüpler kullanılarak alınan serum. Li heparin, K 2 EDTA ve K 3 EDTA'lı plazma. Ayırma jeli içeren plazma tüpleri kullanılabilir. Kriter: Eğim 0.9 1.1 + kesen ± 3 ng/ml dahilinde + korelasyon katsayısı 0.95. 20 25 C'de 8 saat, 2 8 C'de 4 gün, 20 C'de (± 5 C) 24 hafta stabildir. Sadece bir kez dondurun. testiyle bulunan 25 hidroksi D vitamininin stabilitesi D vitamini bağlayıcı protein testi ve kütle spektrometresinin kullanıldığı önceki çalışmalar ile uyumludur. 17 Listelenen numune tipleri test sırasında piyasada bulunan numune toplama tüplerinin bir kısmı ile test edilmiştir; bir başka deyişle, tüm üreticilerin mevcut tüm tüpleri test edilmemiştir. Çeşitli üreticilerden alınan numune toplama sistemleri bazı durumlarda test sonuçlarını etkileyebilecek farklı materyaller içerebilir. Numuneleri primer tüplerde (numune toplama sistemleri) işleme tabi tutarken tüp üreticisinin talimatlarına uyun. Testi yapmadan önce çökelti içeren numuneleri santrifüje tabi tutun. Isı ile inaktive edilmiş numuneleri kullanmayın. Azid ile stabilize edilmiş numuneler veya kontrolleri kullanmayın. Ölçümden önce numunelerin ve kalibratörlerin 20 25 C'de olduğundan emin olun. Olası buharlaşma etkilerinden dolayı, analizörlerdeki numuneler ve kalibratörler 2 saat içinde analiz edilmeli/ölçülmelidir. Kit içinde bulunan malzemeler Reaktifler için Reaktifler çalışma solüsyonları bölümüne bakın. Gerekli malzemeler (kit içinde bulunmayan) 07464240190, Vitamin D total II CalSet, 4 x 1.0 ml için 07464266190, PreciControl Vitamin D total II, 6 x 1.0 ml için 07299001190, Diluent Universal, 45.2 ml numune dilüenti Genel laboratuvar cihazları cobas e 801 analizörü cobas e 801 analizörü için aksesuarlar: 06908799190, ProCell II M, 2 x 2 L sistem solüsyonu 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L ölçüm hücresi temizleme solüsyonu 07485409001, Reservoir Cups, ProCell II M ve CleanCell M'nin sağlanması için 8 kap 06908853190, PreClean II M, 2 x 2 L yıkama solüsyonu 05694302001, Assay Tip/Assay Cup tepsisi, 6 kartuş x 6 kartuş rafı x 105 test ucu ve 105 test kabı, 3 atık torbası 07485425001, Liquid Flow Cleaning Cup, Liquid Flow Cleaning Detection Unit için ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean tedarik etmek için 2 adaptör kabı 07485433001, PreWash Liquid Flow Cleaning Cup, Liquid Flow Cleaning PreWash Unit için ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean tedarik etmek için 1 adaptör kabı 11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 ml sistem temizleme solüsyonu Test Çalışması Testin optimum performansı için, bu belgede ilgili analizör için verilen talimatlara uyun. Analizöre özgü test talimatları için uygun kullanıcı kılavuzuna bakın. Mikropartiküllerin yeniden süspansiyonu kullanımdan önce otomatik olarak gerçekleşir. Soğutulmuş (2 8 C'de saklanmış) cobas e paketini reaktif yöneticisine yerleştirin. Köpük oluşmasından kaçının. Sistem reaktiflerin sıcaklığını ve cobas e paketinin açılıp kapanmasını otomatik olarak düzenler. Kalibrasyon İzlenebilirlik: Bu yöntem ID LC MS/MS 25 hidroksi D vitamini RMP'ye göre izlenebilir dahili standartlar kullanılarak standardize edilmiştir. 18,19 ID LC MS/MS, Ulusal Standartlar ve Teknoloji Enstitüsü Standart Referans Materyal 2972'ye göre izlenebilir. 20 Önceden tanımlanmış ana eğri, ilgili CalSet kullanılarak analizöre adapte edilir. Kalibrasyon sıklığı: Kalibrasyon her yeni reaktif lotunda yeni reaktif kullanılarak yapılmalıdır (bir başka deyişle, cobas e paketi analizöre kayıt edildikten sonra 24 saatten daha uzun bir süre geçmeyecek şekilde). Aşağıdaki durumlarda kalibrasyonun tekrar yapılması önerilir: aynı reaktif lotu kullanılırken 12 hafta sonra analizörde aynı cobas e paketi kullanılırken 28 gün sonra gerektiğinde: örn. kalite kontrol sonuçları belirtilen sınırlar dışında olduğunda Kalite kontrol Kalite kontrol için, PreciControl Vitamin D total II kullanın. 2 / 5
Ayrıca, başka uygun kontrol materyali de kullanılabilir. Çeşitli konsantrasyon aralıkları için kontroller test kullanımdayken en azından 24 saatte bir, cobas e paketi başına bir kez ve her kalibrasyondan sonra ayrı ayrı çalışılmalıdır. Kontrol aralıkları ve sınırları her laboratuvarın kendi gereksinimlerine uyarlanmalıdır. Elde edilen değerler tanımlanan sınırlar içerisinde olmalıdır. Her laboratuvar, değerler tanımlanan sınırlar dışında olduğu takdirde alınacak düzeltici önlemleri belirlemelidir. Gerekirse, ilgili numunelerin ölçümlerini tekrar edin. Kalite kontrolü için geçerli resmi düzenlemelere ve yerel kılavuzlara uyun. Hesaplama Analizör her numunenin analit konsantrasyonunu (ng/ml veya nmol/l cinsinden) otomatik olarak hesaplar. Çevirme faktörleri: nmol/l x 0.40 = ng/ml ng/ml x 2.50 = nmol/l Sınırlamalar - etkileşim Aşağıdaki endojen maddelerin ve farmasötik bileşiklerin test performansı üzerindeki etkisi test edilmiştir. Etkileşimler, listelenen konsantrasyonlara kadar test edilmiştir ve sonuçlar üzerinde herhangi bir etki gözlenmemiştir. Endojen maddeler Bileşik Bilirubin Hemoglobin İntralipid Biotin Test edilen konsantrasyon 1129 µmol/l veya 66 mg/dl 0.373 mmol/l veya 600 mg/dl 300 mg/dl 123 nmol/l veya 30 ng/ml 20 ng/ml konsantrasyonlar için sapma 2.0 ng/ml'dir. > 20 ng/ml konsantrasyonlar için sapma % 10'dur. Yüksek dozda biotin (> 5 mg/gün) tedavi alan hastalarda son biotin uygulamasının ardından en az 8 saat geçmeden numune alınmamalıdır. Farmasötik maddeler Yaygın olarak kullanılan 16 farmasötik ürün üzerinde in vitro testler gerçekleştirilmiştir. Test ile hiçbir etkileşim bulunmamıştır. Ayrıca, aşağıdaki özel ilaçlar test edilmiştir. Test ile hiçbir etkileşim bulunmamıştır. Özel ilaçlar İlaç Test Edilen Konsantrasyon mg/l EinsAlpha (alfakalsidol) 0.003 ZEMPLAR (parikalsitol) 0.002 Rocaltrol (kalsitriol) 0.0017 Nadir durumlarda, analite özgü antikorlara, streptavidine veya rutenyuma karşı oluşan antikorların aşırı yüksek titreleri etkileşime neden olabilir. Bu etkiler uygun test tasarımıyla en aza indirilebilir. Tanı koyulurken sonuçlar mutlaka hastanın tıbbi hikayesi, klinik muayene ve diğer bulgularla birlikte değerlendirilmelidir. Sınırlar ve aralıklar Ölçüm aralığı 3 100 ng/ml veya 7.5 250 nmol/l (Saptama Sınırı ve ana eğrinin maksimumu ile tanımlanmıştır). Saptama Sınırının altındaki değerler < 3.0 ng/ml (< 7.5 nmol/l) şeklinde rapor edilir. Ölçüm aralığının üzerindeki değerler > 100 ng/ml (> 250 nmol/l) olarak veya 2 kat seyreltilmiş numunelerde 200 ng/ml'ye (500 nmol/l) kadar rapor edilir. Alt ölçüm sınırları Boş Sınırı, Saptama Sınırı ve Ölçüm Sınırı Boş Sınırı = 2 ng/ml (5 nmol/l) Saptama Sınırı = 3 ng/ml (7.5 nmol/l) Ölçüm Sınırı = 5 ng/ml (12.5 nmol/l) Boş Sınırı, Saptama Sınırı ve Ölçüm Sınırı CLSI (Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü) EP17 A2 gerekliliklerine göre belirlenmiştir. Boş Limiti, analit içermeyen numunelerin birkaç bağımsız seride n 60 ölçümünden 95. persentil değeridir. Boş Sınırı, altında analit içermeyen numunelerin % 95 olasılıkla bulunduğu konsantrasyona karşılık gelir. Saptama Sınırı, Boş Sınırına ve düşük konsantrasyonlu numunelerin standart sapmasına göre belirlenir. Saptama Sınırı saptanabilecek en düşük analit konsantrasyonuna karşılık gelir (% 95 olasılıkla, Boş Sınırının üzerindeki değer) Ölçüm Sınırı % 20'lik ara hassasiyet CV'siyle tekrar elde edilebilir şekilde ölçülen en düşük analit konsantrasyonudur. Dilüsyon 25 hidroksi D vitamini konsantrasyonları ölçüm aralığının üzerinde olan numuneler Diluent Universal ile seyreltilebilir. Önerilen dilüsyon 1:2'dir. Seyreltilen numunenin konsantrasyonu 40 ng/ml ( 100 nmol/l) olmalıdır. Dilüsyon analizör tarafından yapıldıktan sonra, yazılım numune konsantrasyonunu hesaplarken dilüsyonu otomatik olarak hesaba katar. Beklenen değerler Yöntemler arasındaki farklı standardizasyonlar nedeniyle, sonuç varyasyonu ortaya çıkabilir. Sonuçlar yorumlanırken klinik değerlendirme dikkate alınmalıdır. Sağlık tabanlı referans değerler (kullanımı önerilir): Şu anda optimum D vitamini durumuna ilişkin standart bir tanım bulunmamaktadır. Birçok uzman yaygın olarak kullanılan popülasyon tabanlı referans değerlerin çok düşük olduğunu düşünmektedir. Popülasyon tabanlı referans değerlerin yerine sağlık tabanlı referans değerlerin kullanılması önerilmektedir. 21 Çoğu uzman D vitamini eksikliğinin 20 ng/ml ( 50 nmol/l) 25 hidroksi D vitamini olarak tanımlanması gerektiğini kabul etmektedir. 22 D vitamini yetersizliği 21 29 ng/ml olarak kabul edilmiştir. 22 Benzer şekilde, ABD Ulusal Böbrek Vakfı < 30 ng/ml düzeylerini yetersiz veya eksik kabul etmektedir. 23 25 hidroksi D vitamini için tercih edilen düzey için şu anda birçok uzman tarafından 30 ng/ml ( 75 nmol/l) önerilmektedir. 22,24,25,26 Sağlıklı görünen popülasyonda ölçülen referans değerler: Cinsiyet, yaş, mevsim, coğrafi enlem ve etnik gruplar bakımından 25 hidroksi D vitamini düzeylerinde farkların olabileceği göz önünde bulundurulmalıdır. 22,24 Her laboratuvar beklenen değerlerin kendi hasta popülasyonuna aktarılabilirliğini araştırmalı ve gerekiyorsa kendine ait referans aralıkları belirlemelidir. Popülasyon bazlı referans aralıklar D vitamini takviyesi önermek veya bundan vazgeçirmek için klinik eşik olarak kullanılmamalıdır. Takviyeye yönelik kılavuzlar için yakın tarihli literatüre başvurulmalıdır. 22,23 Amerika Birleşik Devletleri'ndeki sağlıklı görünen donörlerden elde edilen numuneler kullanılarak bir referans aralık çalışması yapılmıştır. Yaz ve kış aylarında, güney, orta ve kuzeydeki merkezlerden numuneler toplanmıştır. Yaklaşık olarak eşit sayıda erkek ve kadın donör vardır ve donörlerin yaklaşık % 30'u koyu tenlidir. Yaş aralığı 21 ila 88 yaş olmuştur. Verilen değerler sadece bilgi amaçlıdır ve yayınlanmış diğer verilerden farklı olabilir. Tümü (n = 400) Yaz (n = 197) Mevsim Kış (n = 203) Birim ng/ml nmol/l ng/ml nmol/l ng/ml nmol/l Ortalama 25.7 64.3 28.9 72.3 22.6 56.5 2.5. persentil 7.61 19.0 11.1 27.8 5.65 14.1 97.5. persentil 55.5 139 60.3 151 52.3 131 Spesifik performans verileri Analizöre ait temsili performans verileri aşağıda verilmektedir. Ayrı ayrı laboratuvarlardan elde edilen sonuçlar farklılık gösterebilir. Hassasiyet Hassasiyet, CLSI'nin (Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü) bir protokolünde (EP05 A3) Elecsys reaktifleri, havuzlanmış insan serumları ve kontroller kullanılarak belirlenmiştir: 21 gün boyunca iki kopya halinde günde 2 çalışma (n = 84). Aşağıdaki sonuçlar elde edilmiştir: 3 / 5
Numune cobas e 801 analizörü Tekrarlanabilirlik Ortalama SD CV ng/ml nmol/l ng/ml nmol/l % HS b) 1 9.83 24.6 0.877 2.19 8.9 HS 2 29.2 73.0 0.899 2.25 3.1 HS 3 49.5 124 1.13 2.83 2.3 HS 4 88.4 221 1.40 3.50 1.6 HS 5 93.6 234 1.02 2.55 1.1 PC c) Vitamin D total II1 total II2 b) HS = insan serumu c) PC = PreciControl Numune 10.6 26.5 0.899 2.25 8.5 29.0 72.5 0.961 2.40 3.3 cobas e 801 analizörü Ara hassasiyet Ortalama SD CV ng/ml nmol/l ng/ml nmol/l % HS 1 9.83 24.6 1.06 24.6 10.8 HS 2 29.2 73.0 1.26 73.0 4.3 HS 3 49.5 124 1.44 124 2.9 HS 4 88.4 221 2.12 221 2.4 HS 5 93.6 234 2.03 234 2.2 total II1 total II2 10.6 26.5 0.972 26.5 9.2 29.0 72.5 1.30 72.5 4.5 Yöntem karşılaştırması testinin (y) CDC Doğrulama Numuneleri kullanılarak CDC D Vitamini Referans Laboratuvarı tarafından ID LC MS/MS (x) ile atanan konsantrasyonlar ile karşılaştırması aşağıdaki korelasyonları vermiştir (ng/ml): Ölçülen numune sayısı: 111 Deming 27,28 Passing Bablok 29 y = 0.985x + 0.606 y = 0.979x + 0.555 r = 0.980 τ = 0.921 Numune konsantrasyonları yaklaşık 5.6 ng/ml (14 nmol/l) ile 93 ng/ml (233 nmol/l) arasındadır. Analitik özgüllük Testin diğer D vitamini metabolitleriyle çapraz reaktivitesini değerlendirmek üzere CLSI EP07 A2 kılavuz alınarak bir çalışma yapılmıştır. Üç 25 hidroksi D vitamini konsantrasyonunda (25, 40 ve 60 ng/ml) çapraz reaktanları içeren numuneler hazırlanmıştır. Her numune için % çapraz reaktivite aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplanmış ve 25 hidroksi D 3 vitamini'ün çapraz reaktivitesine normalize edilmiştir. 30 % çapraz reaktivite = (saflığı bozulmuş numunenin ortalama konsantrasyonu - saflığı bozulmamış numunenin ortalama konsantrasyonu) saflığı bozulmuş konsantrasyon % 100 Çapraz reaktan Eklenen konsantrasyon ng/ml Ortalama çapraz reaktivite % 25-hidroksi D 3 vitamini 50 100 25-hidroksi D 2 vitamini 50 93.8 24,25-dihidroksi D 3 vitamini 100 13.7 3-epi-25-hidroksi D 3 vitamini 50 112.9 3-epi-25-hidroksi D 2 vitamini 50 91.5 1,25-dihidroksi D 3 vitamini 100 n. d. d) 1,25-dihidroksi D 2 vitamini 100 n. d. D 3 vitamini 1000 0.7 D 2 vitamini 1000 0.3 d) n. d. = saptanamaz Kaynaklar 1 Holick M. Vitamin D: the underappreciated D-lightful hormone that is important for skeletal and cellular health. Curr Opin Endocrinol Diabetes 2002;9(1)87-98. 2 Holick MF. Vitamin D deficiency. N Engl J Med 2007;357:266-281. 3 Houghton LA, Vieth R. The case against ergocalciferol (vitamin D2) as a vitamin supplement. Am J Clin Nutr 2006;84:694-697. 4 Hart GR, Furniss JL, Laurie D, et al. Measurement of vitamin D Status: background, clinical use and methodologies. Clin Lab 2006;52(7-8):335-343. 5 Armas LAG, Hollis BW, Heaney RP. Vitamin D2 is much less effective than Vitamin D3 in humans. J Clin Endocrinol Metab 2004;89(11):5387-5391. 6 Bosworth CR, Levin G, Robinson-Cohen C, et al. The serum 24,25-dihydroxyvitamin D concentration, a marker of vitamin D catabolism, is reduced in chronic kidney disease. Kidney Int 2012;82(6),693-700. 7 Glendenning P, Inderjeeth CA. Controversy and consensus regarding vitamin D: Recent methodological changes and the risks and benefits of vitamin D supplementation. Crit Rev Clin Lab Sci, 2015;1-16. 8 Berg AH, Powe CE, Evans MK, et al. 24,25-Dihydroxyvitamin d3 and vitamin D status of community-dwelling black and white Americans. Clin Chem 2015;61(6):877-884. 9 Steingrimsdottir L, Gunnarsson O, Indridason OS, et al. Relationship between serum parathyroid hormone levels, vitamin D sufficiency, and calcium intake. JAMA 2005 Nov 9;294(18):2336-2341. 10 Venning G. Recent developments in vitamin D deficiency and muscle weakness among elderly people. BMJ 2005;330:524-526. 11 Lips P. Vitamin D deficiency and secondary hyperparathyroidism in the elderly: consequences for bone loss and fractures and therapeutic implications. Endocr Rev 2001 Aug;22(4):447-501. 12 Souberbielle JC, Lawson-Body E, Hammadi B, et al. The use in clinical practice of parathyroid hormone normative values established in vitamin D-sufficient subjects. J Clin Endocrinol Metab 2003 Aug;88(8):3501-3504. 13 Willett AM. Vitamin D status and its relationship with parathyroid hormone and bone mineral status in older adolescents. Proceeding of the Nutrition Society 2005;64:193-203. 14 Kuchukk NO, van Schoor NM, Pluijm SM, et al. Vitamin D status, parathyroid function, bone turnover, and BMD in postmenopausal women with osteoporosis: global perspective. J Bone Miner Res 2009;24:693-701. 15 Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register. 16 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 17 Lewis JG, Elder PA. Serum 25-OH Vitamin D2 and D3 are Stable under Exaggerated Conditions. Clin Chem 2008;54:1931-1932. 4 / 5
18 Sempos CT, Vesper HW, Phinney KW, et al. The Vitamin D Standardization Program (VDSP). Vitamin D Status as an International Issue: National Surveys and the Problem of Standardization. Scandinavian Journal of Clinical & Laboratory Investigation, 2012;72(Suppl 243):32-40. 19 Thienpont LM, Stepman HCM, Vesper HW. Standardization of Measurements of 25-Hydroxyvitamin D3 and D2. Scandinavian Journal of Clinical & Laboratory Investigation, 2012;72(Suppl 243):41-49. 20 Phinney KW. Development of a standard reference material for vitamin D in serum. Am J Clin Nutr 2008;88(suppl):511-512. 21 Bischoff-Ferrari HA, Giovannucci E, Willett WC, et al. Estimation of optimal serum concentrations of 25-hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am J Clin Nutr 2006;84:18-28. 22 Holick MF. Vitamin D status: measurement, interpretation, and clinical application. Ann Epidemiol 2009;19(2):73-78. 23 KDOQI Clinical Practice Guidelines for Bone Metabolism and Disease in Children With Chronic Kidney Disease. http://www.kidney.org/professionals/kdoqi/guidelines_pedbone/ guide8.htm 24 Souberbielle JC, Body JJ, Lappe JM, et al. Vitamin D and musculoskeletal health, cardiocascular disease, autoimmunity and cancer: Recommendations for clinical practice. Autoimmun Rev 2010;9:709-715. 25 Dawson-Hughes B, Heaney RP, Holick MF, et al. Estimates of optimal vitamin D status. Osteoporos Int 2005;16:713-716. 26 Vieth R. Why the minimum desirable serum 25-hydroxyvitamin D level should be 75 nmol/l (30 ng/ml). Best Pract Res Clin Endocrinol Metab 2011;25(4):681-691. 27 Linnet K. Evaluation of Regression Procedures for Methods Comparison Studies. Clin Chem 1993;39(3):424-432. 28 Linnet K. Estimation of the Linear Relationship between the Measurements of two Methods with Proportional Errors. Statistics in Medicine 1990;9(12):1463-1473. 29 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. 30 Carter GD, Jones JC, Berry JL. The anomalous behaviour of exogenous 25 hydroxyvitamin D in competitive binding assays. J Steroid Biochem 2007;103(3-5): 480-482. Daha fazla bilgi için, lütfen söz konusu analizör için uygun olan kullanıcı kılavuzuna, ilgili aplikasyon sayfalarına ve gerekli tüm bileşenlerin ürün bilgisi ile Yöntem Sayfalarına bakın (ülkenizde mevcutsa). Bu Yöntem Sayfasında, ondalık sayıların tam ve kesirli kısımları arasındaki sınırı işaretlemek için ondalık ayırıcısı olarak her zaman nokta kullanılır. Binler basamağı için ayırıcı kullanılmaz. Semboller Roche Diagnostics, ISO 15223 1 standardında listelenenlerin yanı sıra aşağıdaki sembol ve işaretleri kullanmaktadır. Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com GTIN Kit içeriği Reaktiflerin kullanılabileceği analizörler/cihazlar Reaktif Kalibratör Sulandırıldıktan veya karıştırıldıktan sonra hacim Global Ticari Ürün Numarası İlaveler, silinmeler veya değişiklikler kenarda bir değişiklik çubuğu ile gösterilir. 2016, Roche Diagnostics 5 / 5