RIDA qline Allergy Ürün kodu: A6142 Panel 1 (20 farklı alerjenler) Ürün kodu: A6242 Panel 2 (20 solunum yoluyla alınan alerjenler) Ürün kodu: A6342 Panel 3 (20 yiyeceklerle alınan alerjenler) Ürün kodu: A6442 Panel 4 (20 pediatrik alerjenler) Ürün kodu: A6142 ASAN/BAHAR/BY/CN/CN2/HVEN/IND/IR/KO/ KZ/MA/NP/PE/PY/RAF/TH/TW/UY/UZ/VE/VIET Ürün kodu: A6242 ASAN/BD/BY/DOHA/GR/H/IAARI/IND/KO/KZ/ MA/MENA/MOFID/PA/TR/UZ/VE Ürün kodu: A6342 BY/CN/DOHA/H/IND/KO/KZ/MA/MENA/ MOFID/PA/TR/URT/UZ/UZ2/VE Ürün kodu: A6442 BY/CN/KO/KZ/MA/PA/UA1/UA2/UY/UZ/VE (Alerjik kompozisyon için birlikte gönderilen ilgili sertifikaya bakın) R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D-64297 Darmstadt, Almanya, Tel.: +49 (0) 61 51 81 02-0 / Faks: +49 (0) 61 51 81 02-20
1. Kullanım alanı İn vitro (deney ortamında) teşhis için. Bu test, insan serumunda ve plazmasında (sitrat) bulunan belirli alerjen IgE antikorlarının kantitatif olarak teşhis edilmesi için nitro selüloz membran (Westernblot) üzerinde yapılan bir enzime bağlı immüno analizdir (ELISA). 2. Testin açıklaması ve özeti Bağışıklık sisteminin görevi patojen bakteriler, virüsler ve diğer mikro organizmalara karşı koruma sağlamaktır. Koruma reaksiyonu, hastalık tetikleyicileriyle ilk temasta ve de tekrar eden temaslarda bağışıklık kazanılmasında organizmanın korunması içindir. Tüm alerjik reaksiyonlardan önce, E Sınıfına ait (IgE antikorlar) belirli antikorların oluştuğu, semptomsuz bir ilk temas geçekleşir. Tetikleyen alerjen ile tekrarlayan temaslarda bu antikorlar alerjen ile etkileşime girerek alerjinin semptomlarını ortaya çıkaran histamin, lökotrien, prostaglandin gibi mediatorların (genelde mast hücrelerinden) açığa çıkmasını sağlıyor. Alerjik reaksiyonlar söz konusu olduğu durumlarda, serumda belirli IgE antikorların tespit edilmesi, tetikleyen alerjenleri teşhiste fayda sağlar. Aynı zamanda semptomları henüz ortaya çıkmamış olan mevcut hassasiyetler de bu şekilde tespit edilebilir. 3. Test prensibi Aşağıdaki metin Westernblot Yöntemi'ni prensip alır. Nitro selüloz membran yüzeyine, panelin birleşimine göre ayrı şeritler halinde farklı alerjenler birbirine bağlanmıştır. Hastalardan alınan numunelerde alerjik IgE antikorlar ilgili alerjen ile tepkimeye girerler. Bağlı antikorlara ikinci bir adımda biotine bağlı yabancı IgE antikorlar bağlanır. Üçüncü bir inkübasyon adımında biotin bir streptavidin peroksidaz konjugata bağlanır. Peroksidaz son bir final inkübasyon adımında renksiz substrat etrametilbenzidini (TMB) mavi mor renkli bir son ürün haline dönüştürür. İnkübasyon adımları arasında bağlanmayan artık maddeleri temizlemek için bir yıkama adımı uygulanır. Mavi renklenme yoğunluğu hasta serumunda bulunan alerjen miktarı ile doğru orantılıdır. Değerlendirme RIDA qline Soft yazılımıyla birlikte piyasada satılan herhangi bir R- Biopharm onaylı 3 boyutlu düz zemin tarayıcı ile gerçekleştirilir. Alerjen şeritlerinin renk yoğunlukları IU/ml ya da RAST sınıfını belirlemek için şerit üzerindeki bulunan standart eğrisi sayesinde kantitatif olarak değerlendirilir. 3 boyutlu tarayıcıya alternatif olarak şeritler RIDA qline Soft yazılımıyla birlikte RIDA X-Screen'le de değerlendirilebilir. 2 RIDA qline Allergy 2015-03-10
Standart eğri ve işlev kontrolü: RIDA qline Allergy gerçek WHO (Dünya Sağlık Örgütü) standartlarına göre kalibre edildiği için kantitatif bir testtir. Her şeritte 5 standart bulunmaktadır. 5 Standart 1-5 arsındaki tarama sınıflarına karşı gelir, tarama sınıfı 6 ise yazılım içersinde ekstrapole edilir. Test doğru şekilde uygulandığında ve tüm reagentler çalıştığı taktirde, standart eğri görülebildiği ve tüm doğrulama kriterleri yerine getirildiği için standartlar bir işlev kontrolünün gerekliliklerini de yerine getirmiş olur. 5 Standarttan her birinin görünür olup yazılım tarafından tanınması, en küçük standardın en az Yoğunluk 3 e ulaşması ve Standart 1 < Standart 2 < Standart 3 < Standart 4 < Standart 5 olması durumunda standart eğrisi / işlev kontrolünün uygunluk kriterleri yerine getirilmiş olur. Her bir şeritte standart eğri bulunmayan, yarı kantitatif sistemdeki pozitif kontrolü, çoğu zaman Biotin BSA dan oluşur ve sadece 3. ve 4. inkübasyonu kontrol eder, oysa ki 2. ve 3. inkübasyonların karıştırılması ya da 2. inkübasyonun eksik olması durumlarında, pozitif kontrolün bandı gözükecektir, ancak test doğru bir şekilde uygulanmadığı için pozitif test sonuçları çıkması mümkün değildir. Böylece bu pozitif kontrol, pozitif kontrol gerekliliklerini yerine getirmemektedir, çünkü kendisi yanlış uygulandığı taktirde testin doğru uygulandığı izlenimi uyandıracak ve böylece yanlış negatif sonuçların doğru olarak değerlendirilmesine yol açacaktır. Bu yüzden pozitif kontrolü de işlev kontrol olarak uygun değildir, çünkü doğru uygulama şekli ya da reagentlerin işlevselliği sadece kısmen kontrol edilebilir. Bir Lineblot sistem içersinde gerçek bir dahili pozitif kontrol mümkün olmadığı için RIDA qline Allergy 5 standart / işlev kontrolü ile mümkün olan azami kontrolü sağlar. Ayrı bir prova olarak tanımlamaya göre belirlenmiş miktarda analit içeren, örneğin bir ELISA testindeki gibi ayrı bir kaba pipetlenen ve hasta provasıyla aynı standart eğri üzerinden değerlendirilen prova gerçek bir dahili pozitif kontroldür. Bir Lineblot sisteminde analitik sadece hasta provasının yanında hiçbir yapay kontrol provasının pipetlenemeyen, bir tekne içersinde gerçekleşir. 3 RIDA qline Allergy 2015-03-10
4. Paket içeriği Tablo 1 Paket içeriği 10 adet teşhis için yeterlidir Reaksiyon şeridi olarak 20 test alanı ve 5 standart üzerinde Membranlar 10 adet işlenmiş olan alerjen madde ile kaplı, RIDA qline alerji test membranı (nitro selüloz membran). Wash 25x 5 ml Yıkama bufferi, 25 kez konsantre; Tris / NaCl Antibody 5 ml Teşhis antikorları; biotin ile konjuge edilmiş yabancı IgE antikor (keçi), kullanıma hazır Konjugatlar 5 ml Streptavidin konjugat; peroksidaz konjugatlı streptavidin, kullanıma hazır Substratlar 5 ml Substrat; TMB (tetrametilbenzidin), kullanıma hazır 5. Reagentler ve saklanma koşulları Test membranları serin, kuru ve karanlık şartlarda plastik kutularının içinde saklanmalıdır. Test kiti 2-8 C arasında sıcaklıklarda saklanmalıdır. İnceltilmiş olan yıkama bufferi 2-8 C arasında sıcaklıklarda saklandığı taktirde azami 4 hafta kullanılabilir. Mikrobiyel kontaminasyondan kaçınılmalıdır. Son kullanma tarihinin geçmesinden sonra kalite garantisi verilemez. Substratın renklenmesine yol açacağından, çözeltisinin konjugat ile kontamine olmamasına mutlaka dikkat edilmelidir. Bir ayrışma ya da otooksidasyon sebebiyle renklenme oluşamaması için aynı şekilde substratın doğrudan ışık etkisinde kalmasından kaçınılmalıdır. Renkleme o- luştuğu taktirde substrat artık kullanılamaz. 6. İlave olarak gerekli olan reagentler ve ekipmanlar 6.1. Reagentler - Distile edilmiş ya da iyonsuzlaştırılmış su 6.2. Aksesuar - Vortex karıştırıcı - Ölçüm silindiri (200 ml) - Mikro pipet, 1000 µl - Test membran tutucu (tarak), 10 adet test membran kapasiteli 4 RIDA qline Allergy 2015-03-10
- Karanlık inkübasyon için Cover Box (Test membran tutucu ve Cover Box sistemi (RIDA qline Incubation Box, ürün kodu: ZG2701) R-Biopharm AG'den tedarik edilebilir) - Orbital karıştırıcı (300 d/dak, 3 mm orbital çap, ürün kodu: ZG2601) - R-Biopharm AG tarafından onaylı 3 boyutlu renkli düz tarayıcı (Ürün kodu.: ZG1106) ilave olarak USB portlu - RIDA qline Soft Software (ürün kodu: Z9995) bir bilgisayar. - RIDA X-Screen ölçüm aleti (isteğe bağlı; ürün kodu: ZG1101) ilave olarak USB portlu bir bilgisayar. 7. Güvenlik önlemleri Sadece İn vitro teşhis için. Bu test sadece doğru eğitimi almış laboratuvar personeli tarafından uygulanabilir. Tıbbi laboratuvarlarda yapılan çalışmalarla ilgili yönergelere uyulmalıdır. Testin uygulanmasıyla ilgili kullanma talimatına kesinlikle uyulmalıdır. Numuneleri ya da reagentleri ağız ile pipetlemeyin, yaralı deri ya da mukoza ile temasından kaçının. Numunelerle çalışırken tek kullanımlık eldiven giyin ve test tamamlandıktan sonra ellerinizi yıkayın. Numuneler ya da test reagentleriyle çalışılan ortamlarda sigara içmek, yemek yemek ya da bir şey içmek yasaktır. Antikor ve yıkama bufferi koruyucu madde olarak sodyum asit içerir. Deri ve mukoza ile temasından kaçının. Kurşun ve bakır borular ile temasında patlayıcı metal asitleri oluşabilir. Substrat karbon peroksit ve de koruyucu madde olarak toksik sınırın altında çözeltilerde klor metilizotiazolin ve metilizotiazolin içerir. Hasarlı paketlerde her bir parçanın kullanım öncesi zarar görmemiş olmasına dikkat edilmelidir. Kit bileşenlerinin kendi paketleri zarar gördüğünde ya da hava aldıklarında kullanılmaları yasaktır. Kit bileşenlerinin tüm parçaları kullanımdan sonra kurallara uygun olarak ve sorumluluk bilinci içersinde imha edilmelidir. Potansiyel enfeksiyon tehdidi olan numunelerle bir araya gelen tüm reagentler ve ekipmanlar, uygun dezenfeksiyon maddeleriyle ya da en az bir saat 121 C'de otoklavda bekletilerek temizlenmelidir. 5 RIDA qline Allergy 2015-03-10
8. Numunelerin toplanması ve saklanması Test, insan serumunu ve plazmasını (sitrat) incelemek için geliştirilmiştir. Kan alındıktan sonra bir hemolizi engellemek için serum en kısa zamanda pıhtı tabaksından ayrılmalıdır. Numuneler teste kadar serin ya da dondurulmuş olarak saklanmalıdır. Serumun tekrar dondurulması ya da çözülmesinden ve de aynı şekilde mikrobiyel kontaminasyondan da mutlaka kaçınılmalıdır. Isı ile etkisizleştirilmiş lipamik, hemolitik, ikterik ya da bulanık serum kullanılması hatalı sonuçların elde edilmesine sebep olabilir. Tablo 2: Numune saklama koşulları 2-8 C 1 Hafta 20 C > 1 Hafta 9. Test uygulaması: 9.1. Genel Farklı şarj numaralarına ait kitlerin içersinden kit bileşenlerinin değiştirilmesi veya birlikte kullanması mümkündür. Tekrar edilebilir sonuçlar elde etmek, ağırlıklı olarak inkübasyon sürelerine ve derecelerine uyulmasına ve de test membranlarının talimatlara uygun olarak yıkanmasına bağlıdır. Tüm test bileşenlerinin uygulama öncesi oda sıcaklığına (20-25 C) getirilmesi gerekir. 9.2. Yıkama bufferinin hazırlanması 5 ml konsantre yıkama bufferi Wash 25x bir ölçme silindirine dökün ve distile su ile 125 ml'ye kadar tamamlayın (= yıkama bufferi). Konsantrede mevcut olası kristal artıklarını ısıtarak (37 C sıcak su banyosu) çözün. Yıkama bufferini pipetin girebileceği bir kapta hazır tutun. 9.3. Birinci inkübasyon Uygulanacak olan test sayısına göre gerekli miktarda test membranı Membranlar paketten çıkarılır. Karıştırma esnasında şeritleri sabitlemek için test membran tutucuları (tarak) kızaklarına yerleştirilir. Test membranlarının her biri 500 µl yıkama bufferi ile kaplanır ve orbital karıştırıcıda 1 dakika (300 d/dak, 3 mm Orbital çap) kabarcıklar çıkmayıncaya kadar karıştırılır. Daha sonra test membranları Membranlar süngerimsi bir yüzey üzerine küçük darbelerle boşaltılır. Ardından test membranları Membranlar 400 µl hasta serumu ile doldurulur ve 30 dakika oda sıcaklığında (20-25 C) orbital karıştırıcı üzerinde inkübe edilir. Bunu yaparken membranın sıvıyı tamamen kapatıyor olmasına dikkat edilmelidir. Böyle bir durum söz konusuysa dikkatli bir şekilde bir pipet yardımıyla membrana dokunmadan düzeltme yapılabilir. 9.4. Yıkama 6 RIDA qline Allergy 2015-03-10
Serum inkübasyonundan sonra kızaklar boşaltılır. Test Membranları Membranlar üç ayrı adımda her seferinde 400 µl yıkama bufferiyle her defasında 1 dakika süreyle inkübasyon ile aynı şartlarda orbital karıştırıcı üzerinde yıkanır. Daha sonrasında test membranları süngerimsi bir yüzey üzerine küçük darbelerle boşaltılır. 9.5. İkinci inkübasyon 400 µl Antikor Antibody her bir test membranına Membranlar pipetle bırakılır. Burada da sıvının membranları tamamen kapatmasına dikkat edilmelidir. Test membranları Membranlar oda sıcaklığında (20-25 C) 45 dakika orbital karıştırıcı üzerinde inkübe edilir. 9.6. Yıkama Yıkama için 9.4. maddesine bkz. 9.7. Üçüncü inkübasyon 400 µl Konjugat Conjugate test membranına Membranlar pipetle bırakılır. Burada da sıvının membran yüzeyinin tamamen kapatmasına dikkat edilmelidir. Test membranları Membranlar oda sıcaklığında (20-25 C) 20 dakika orbital karıştırıcı üzerinde inkübe edilir. 9.8. Yıkama Bu yıkama adımı sonucun kalitesinde belirleyici rol oynar. Bir lavabo ya da uygun bir kap üzerinde her bir şerit üç defa her seferinde 1000 µl yıkama bufferi ile yıkanır. Yıkama esnasında şeridi yan tutun ve pipetle sıvıyı boşaltırken pipeti membrana dokundurmadan üst kısımdan alt kısma doğru akıtın. Daha sonra test membranlarını Membranlar iki ayrı aşamada her defasında 400 µl yıkama bufferiyle 1 dakika orbital karıştırıcı üstünde inkübasyonda geçerli olan aynı şartlarda yıkayın. Daha sonrasında test membranları süngerimsi bir yüzey üzerine küçük darbelerle boşaltılır. 9.9. Dördüncü inkübasyon 400 µl Substrat Substratlar her bir test membranı Membranlar üzerine membran tamamen kapanacak şekilde sürülür. Test membranları Membranlar karanlık, oda sıcaklığında (20-25 C) 15 dakika orbital karıştırıcı üzerinde inkübe edilir. 9.10. Yıkama Substrat inkübasyonundan sonra kızaklar boşaltılır. Test Membranları Membranlar daha sonra bir defa 400 µl yıkama bufferiyle ve bir defa 400 µl distile su ile her seferinde 1 dakika boyunca orbital karıştırıcı üzerinde (300 d/dak, 3 mm Orbital çap) inkübasyonda geçerli olan aynı şartlarda yıkanır. Daha sonrasında test membranları süngerimsi bir yüzey üzerine küçük darbelerle boşaltılır. En az 30 dakika süren bir kuruma aşamasından sonra, başka bir deyişle membranların üzerinde herhangi bir sıvı film tabakası kalmayınca, test değerlendirilebilir. Membranların bir soğuk hava kurutucusuyla kurutulmasını tavsiye ederiz. 7 RIDA qline Allergy 2015-03-10
10. Kalite kontrol - Reagent bozulması Test, eğer arka plan rengi tamamen renksizse ve standart eğrisi beş farklı şeritte görünüyorsa başarıyla sonuçlanmıştır (bkz resim). Standart eğrisi Alerji şeritleri Test membranını Membranlardökmeden önce reagentin bulanıklaşması ya da substratın mavi renk alması reagentin bozulmuş olmasına bir işaret olabilir. Standart eğrisi belirgin olarak görünmezse bir test tekrarından önce aşağıdakiler kontrol edilmelidir. - Kullanılan reagentlerin son kullanma tarihleri - Kullanılan cihazların çalışma durumları (ör. kalibrasyon) - Doğru test uygulaması - Gözle kit bileşenlerinin kontamine ya da hava almış olmaları ihtimalinin kontrol edilmesi. Mavi renk almış bir substrat çözeltisi kullanılmamalıdır. Testin tekrarlanması durumunda şartlar hala sağlanmadıysa lütfen üretici ya da bölgenizdeki R- Biopharm üreticisi ile irtibata geçin. 8 RIDA qline Allergy 2015-03-10
11. Değerlendirme ve yorumla 11.1. RIDA qline Allergy Panel 1,2,3 ve 4'ün membran konfigürasyonu Panel 1 Panel 2 Panel 3 Panel 4 20 Alerjen 20 Alerjen 20 Alerjen 20 Alerjen Standart 5 Standart 5 Standart 5 Standart 5 Standart 4 Standart 4 Standart 4 Standart 4 Standart 3 Standart 3 Standart 3 Standart 3 Standart 2 Standart 2 Standart 2 Standart 2 Standart 1 Standart 1 Standart 1 Standart 1 Derm. pteronyssinus Derm. pteronyssinus Fındık Derm. pteronyssinus Derm. farinae Derm. farinae Yer fıstığı Derm. farinae Kızılağaç Kızılağaç Ceviz Huş ağacı Huş ağacı Huş ağacı Badem Ot karışımı Fındık ağacı Fındık ağacı Süt Kedi Ot karışımı Meşe Yumurta akı Köpek Çavdar Ot karışımı Yumurta sarısı Alternaria alternata Ayvadana Çavdar Kazein Süt Sinir otu Ayvadana Patates α-laktalbumin Kedi Sinir otu Kereviz -Laktoglobulin At Kedi Havuç Kazein Köpek At Domates Yumurta akı Alternaria alternata Köpek Morina balığı Yumurta sarısı Yumurta akı Kobay (Hint domuzu) Yengeç BSA (Sığır Serum Al- Süt Hamster Portakal Soya fasulyesi Yer fıstığı Tavşan Elma Havuç Fındık Penicillium notatum Buğday unu Patates Havuç Cladospor. herbarum Çavdar unu Buğday unu Buğday unu Aspergillus fumigatus Susam Fındık Soya fasulyesi Alternaria alternata Soya fasulyesi Yer fıstığı Bu prospektüsün geçerli olduğu diğer tüm ülkeler için membran konfigürasyonları, R-Biopharm AG'den her bir panele ilave olarak sipariş edilebilir. 9 RIDA qline Allergy 2015-03-10
11.2. Renkli 3 boyutlu düz tarayıcı ya da RIDA X-Screen ve RIDA qline Soft yazılımıyla değerlendirme Bunun için test membranları yerlerine yerleştirilir ve belirtilen ölçüm aletleri ve ilgili yazılımın yardımıyla ölçülür. IU/ml otomatik olarak ölçüm değerlerinden hesaplanır ve 0-6 arasındaki RAST sınıflarına dağıtılır. Değerlendirme her bir şerit üzerinde yer alan standart eğriyi baz alır, bunu yaparken her bir alerji çizgisinin yoğunluğu bu standart eğriyle ilişkilendirilir. Farklı ölçüm aletleriyle değerlendirme yapmak için lütfen ilgili kullanım kitapçığını dikkate alın. Ölçülecek olan alerji panelleri ve uygun olan testlerin ilişkilendirilmesine mutlaka dikkat edilmelidir. Tablo 3: Tespit edilen sınıf ile alerjene yönelik hasta serumunun IgE içeriği arasındaki ilişki IU / ml Sınıf Alerjene göre IgE içeriği 0,00 0,34 0 (0,0 0,9) Bulgu yok ya da yok denecek kadar az 0,35 0,69 1 (1,0 1,9) düşük 0,70 3,49 2 (2,0 2,9) hafif yüksek 3,50 17,49 3 (3,0 3,9) belirgin yüksek 17,50 49,99 4 (4,0 4,9) yüksek 50,00 99,99 5 (5,0 5,9) çok yüksek 100,00 6 aşırı yüksek 11.3. Belgelendirme Ölçüm verileri (test membranlarının fotoğrafı ve değerlendirme) bilgisayar belleğinde önceden ayarlanmış bir klasör içersine kaydedilir. Bu veri tabanı hasta bilgilerinin yönetilmesine fayda sağlar. Her test edilen serum için bilgisayara bağlı sıradan bir yazıcıdan bir bilgi sayfası çıktısı alınabilir. 10 RIDA qline Allergy 2015-03-10
12. Metodun sınırları Bu test sistemiyle tespit edilen IgE konsantrasyonları, tek tek alerjenler ya da alerjen karışımları incelenmesi açısından hastanın hassasiyet derecesi hakkında bir görüş sahibi olmayı sağlar. Burada tespit edilen IgE konsantrasyonları ve klinik semptomların ortaya çıkması ya da şiddetiyle ilgili aralarında bir ilişki kurulamaz. Elde edilen sonuçlar her zaman klinik resmin tamamıyla birlikte yorumlanmalıdır. Ulusal ve uluslararası standartların eksikliği ve prick test ile in vitro testlerinde uygulanan alerjen özleri sonuçları arasındaki olası farklılıklar nedeniyle, in vivo ve in vitro test sonuçları arasında uyumsuzlukların oluşması mümkündür. Anafilaktik reaksiyonların ortaya çıkmasından hemen sonra yanlış negatif ya da yetersiz IgE Titerler ölçülebilir. İn vivo ve in vitro teşhis arasında uyumsuz sonuçların elde edilmesi durumunda, test 3-4 hafta sonra tekrarlanmalıdır. Devam eden uyumsuzluklar bir alerji uzmanı tarafından tekrar edilen in vivo testleri ve provokasyon testlerinde araştırılmaya devam edilmelidir. Provokasyon testleri bir anafilaktik şoka sebep olabilir. Test edilen alerjenlerin farklı alerjenlerle yanlışlıkla ortaya çıkaracağı çapraz reaktivite, pozitif sonuçlara yol açabilir. 11 RIDA qline Allergy 2015-03-10
13. Performans ölçütleri 13.1. Teşhisler arası hassasiyet Teşhisler arası hassasiyet QS-P serumunun bir şarja ait 20 adet test şeridiyle ölçülmesi sonucu belirlenmiştir. Her alerjen için ortalama değerler (OD) ve varyasyon faktörleri (VF) özel olarak hesaplanmıştır ve Tablo 4'te özetlenmiştir. Pozitif işaretli alerjenlerin teşhisler arası hassasiyeti için %10 değerler kabul edilir. Negatif işaretli alerjenlerin hassasiyetini tanımlamak için bu tanımlama kriteri kullanılamayacağından, sonuç tüm 20 ölçümde de uyumlu çıkarsa kabul edilir. Tablo 4: Teşhisler arası hassasiyet Alerjen kodu Ölçüm sayısı OD (RAST) VF (%) Değerlendirme D1 20 5.0 1.1 Pozitif D2 20 4.9 1.6 Pozitif T2 20 2.6 2.7 Pozitif T3 20 3.0 3.5 Pozitif T4 20 1.8 3.9 Pozitif GX 20 5.8 2.4 Pozitif G12 20 4.6 4.4 Pozitif W6 20 2.2 3.6 Pozitif W9 20 2.4 3.1 Pozitif E1 20 5.2 2.6 Pozitif E3 20 0.4 19.9 Negatif E5 20 5.0 2.1 Pozitif M6 20 2.5 2.3 Pozitif F1 20 2.9 4.1 Pozitif F2 20 2.9 2.9 Pozitif F13 20 5.5 2.6 Pozitif F17 20 4.6 2.9 Pozitif F31 20 2.0 2.5 Pozitif F4 20 3.3 3.7 Pozitif F14 20 2.8 5.1 Pozitif 12 RIDA qline Allergy 2015-03-10
13.2. Teşhisler arası hassasiyet Teşhisler arası hassasiyetin belirlenmesi için QS-P serum 10 gün arka arkaya çift tanımlama içersinde test edildi. Deney dört farklı kişi tarafından uygulandı. Her bir alerjen için ortalama değerler (OD) ve varyasyon faktörleri (VF) özel olarak hesaplandı ve Tablo 5'te özetlendi. Pozitif işaretli alerjenlerin teşhisler arası hassasiyeti için %15 değerler kabul edilir. Negatif işaretli alerjenlerin hassasiyetini tanımlamak için bu tanımlama kriteri kullanılamayacağından, sonuç tüm 20 ölçümde de uyumlu çıkarsa kabul edilir. Tablo 5: Teşhisler arası hassasiyet Alerjen kodu Gün sayısı Gün/Ölçü m sayısı Ölçüm sayısı OD (RAST) VF (%) Değerlendirme D1 10 2 20 5.3 4.6 Pozitif D2 10 2 20 5.2 4.3 Pozitif T2 10 2 20 2.9 7.8 Pozitif T3 10 2 20 3.2 8.0 Pozitif T4 10 2 20 2.0 9.1 Pozitif GX 10 2 20 5.9 1.6 Pozitif G12 10 2 20 5.0 7.6 Pozitif W6 10 2 20 2.3 4.6 Pozitif W9 10 2 20 2.5 6.1 Pozitif E1 10 2 20 5.5 5.8 Pozitif E3 10 2 20 0.4 19.2 Negatif E5 10 2 20 5.3 5.8 Pozitif M6 10 2 20 2.6 10.7 Pozitif F1 10 2 20 3.1 7.5 Pozitif F2 10 2 20 3.0 7.3 Pozitif F13 10 2 20 5.8 6.3 Pozitif F17 10 2 20 4.8 8.2 Pozitif F31 10 2 20 2.0 7.7 Pozitif F4 10 2 20 3.4 8.7 Pozitif F14 10 2 20 2.8 7.2 Pozitif 13 RIDA qline Allergy 2015-03-10
13.3. Kantitatif in vitro IgE referans sistemiyle metot karşılaştırması RIDA qline Allergy'nin bir kantitatif IgE referans sistemiyle uyumunu tespit ermek için bir araştırma çerçevesinde 100 adet serumun her biri farklı 11 alerjenlere özel IgE ile (toplam 1100 tanımlama) her iki sistemde de ölçümü yapıldı. Her iki test sisteminin ölçümlerden elde edilen RAST sınıflandırması sonuçları karşılaştırıldı (bkz. Tablo 6). Tablo 6: IgE referans sistemi karşılaştırması qline / IgE Referans sistemi (RAST) ortalama değeri 0,59 Uyum ( 2 RAST) 1045 Uyumsuzluk ( > 2 RAST) 55 Toplam numune 1100 % Uyum % 95,00 % Uyumsuz % 5,00 14 RIDA qline Allergy 2015-03-10
Kaynakça Kjellman, N.I.M.: Prediction and prevention of atopic allergy, Allergy 37, 463-473 (1982) Debelic, M.: Alerjik hastalıkların teşhisi ve gözlemlenmesi için toplam serum IgE ve spesifik IgE'nin klinik anlamı ve tanımlanması [The clinical importance of determining total serum IgE and specific IgE in the diagnosis and monitoring of allergenic clinical pictures]. Terapi haftası 29, 2280-2295 (1979) Urbanek, R.: Kağıt Diskli Radyo İmmüno Sorbent Test (Papier-Radio-Immuno-Sorbent- Test = PRIST) - Alerjik olan ve alerjik olmayan çocuklarda IgE seviyesi, [Paper disc Radio Immuno Sorbent Test (PRIST) - IgE levels for non-allergic and allergic children] Aylık yayın Kinderheilkunde 125, 583-585 (1977) Kjellman, N.I.M., et al.: Serum IgE levels in healthy children quantified by a Sandwich technique (PRIST), Clinical Allergy 6, 51-59 (1976) Turner, K.J.: IgE globulins and immunity. Medical Journal of Australia 2, 846 (1974) Johannson, S.G.O.: Raised levels of a new immunoglobulin class (IgND) in asthma. Lancet II, 951-953 (1967) Ishizaka, K., Ishizaka, T., Hornbook, M.M.: Physico-chemical properties of human reaginic antibody. IV. Presence of a unique immunoglobulin as a carrier of reaginic activity. Journqal of Immunol 97, 75 (1966) Bennich, H.H., et al.: Immunoglobulin E, a new class of human immunoglobulin. Bulletin World Health Organisation 38, 151 (1964) 15 RIDA qline Allergy 2015-03-10