rcfn SIDAS MEDYA Uzun Omtirlii (UHT) Siitlerdeki Antibiyotik Kahntrlannrn Tespitinde Ug Farkh Ticari Test Kitinin Kargrlagtrnlmasl 6zer



Benzer belgeler
Elazığ İli Karakoçan İlçesinden Elde Edilen Sütlerde Yağ ve Protein Oranlarının AB ve Türk Standartlarına Uygunluklarının Belirlenmesi

Çiğ Sütlerde Antibiyotik Kalıntı Analizlerinde Hızlı Test Metotlarının ve HPLC Tekniğinin Değerlendirilmesi

Edirne İlinde Elde Edilen Sütlerin Dünya Sağlık (Who) Standartlarına Uygunluğu

Ayran Üretiminde Peyniraltı Suyu ve Transglutaminaz Enzimi Kullanımının Ürün Özellikleri Üzerine Etkisi

,:t? KYS : Kalite Yonetim Sistemini, ixttl9i. VER : Olgme ve izleme sonuglarrnr, ifade eder. 4.iLGiLiDOKUMAN 1.AMA9 2.KAPSAM 3.TANIMLAR 6.

PROGRAMLAMA DiLLERi. NATURAL ve IMS bunlara 6rnek verilebilir. Bu diller profesvonellerin. Arq. Giir. Levent ELDENiZ MARMARA r-n rivpnsiresi.

f'i1 ,k;;i66 furutugan tarafrndan aireoite eoilmii olan tarafsrz denetim firmalannrn denetimleri sonucunda

rtinrive er.ivrir n, iller MEcLiSi BASKANLTGTNA

Servet GYO. 'Fiyat Tespit Raporu' DEGERLENDIRME RAPORU. A) girket HAKKTNDA VER LEN B LG LER. 'Servet GYO Fiyat Tespit Raporu' DEGERLENDIRME RAPORU

rnxxir ganrxnvrnsi "HELyuM sogurma sisrnui BoRULAMA niznrnri " ANKARAI]NiVERSITESI ELEKTRON HIZLAIIDIRICISI VE LAZER TESiSi (TARTA)

T.C. SACLIK BAKANLIEI TURKiYE KAMU HASTANELERi BiRLidi BATMAN BOLGE DEVLET HASTANESI. inrivlq LisrESi

ffi'-ffifnffi SIDAS MEDYA Kefir ve Aktcl Yo$urdun Reolojik Davranrglannrn Karakterizasyonu Ozer

r Grdalarrn bulundufu bolgede galrgan herkesin r Personelin gahgma bigimlerinin de temiz ve safihkh r Yiyeceklerle ufiragan ki5ilerin temiz ve uygunsa

rilvr grrinni, KURGU, SESLENDiRME, sruovo gerinni, nruiunsyon,

Öğrenim Durumu. Verdiği Dersler

Ev Yapımı ve Endüstriyel Üretim Yoğurtlarda ph ve Probiyotiklik İlişkisi

HALKLA ir,igximnde RADYONUN yeri VE RADYO REKLAMLARI

Akademik Grda 6(2) (2008)7-12. Nar Suyu Uretiminde Kabuklu ve Kabuksuz Presleme ile Mikrodalga Uygulamasrnrn Bazr Kalite Ozellikleri Uzerine Etkileri

MAIA Pesticide MultiTest

@ffitna Grda Bilimi ve Teknolojisi Dergisi

4. Dozallama grrrngasr (1 adet)

Bu evrak güvenli elektronik imza ile imzalanmıştır. adresinden 3922-c1e8-39ab-8e60-c949 kodu ile teyit edilebilir.

M47 MICROGEN STREP MICROGEN

ÖZGEÇMİŞ. İletişim Adresi: Ankara Üniversitesi Ziraat Fakültesi Süt Teknolojisi Bölümü, 06110, Dışkapı/Ankara Tel:

ANKARA ÜNİVERSİTESİ ZİRAAT FAKÜLTESİ EĞİTİM ÖĞRETİM DÖNEMİ YAYINLAR LİSTESİ. Yurtdışında Yayınlanan Makale Sayıları

İzmir İli Seferihisar İlçesinde Yetiştirilen Keçilerden Elde Edilen Sütlerde Biyokimyasal Parametrelerin Türk Standartlarına Uygunluğunun Belirlenmesi

t. iurle roruusu ise irisrirv BircirER ve KAF,SAM

UYGULAMALI MİKROBİYOLOJİ LABORATUARI

SIDAS MEDYA. "* *Kt I Grda Bilimi ve Teknolojisi Dergisi. Kiiflti Grdalar, Mikotoksin ve Aflatoksin ile itgiti Tiiketici Farkrndahgrnrn Belirlenmesi

Cennet Pelin BOYACI GÜNDÜZ

Buna göre, Türk Gıda Kodeksi Yönetmeliği nin amacı şu şekilde tespit edilmiştir:

rubirlr CELAL BAYAR UNiVERSiTESi RrrrOnIuGurur

T.C. FIRAT Univenslresi xasrauesi o6uen SERMAYE igrcrme einimi. elqz6 rexllp lsrenae FoRMU. MALzEME/Hlzmrr ilsresi

Ttirltriye Yiiksek lhtisas E. A. Hastanesi Strerilizasyon Bilgisayarh Takip ve Doktirnrantasyon Sistemi Teknik $artnamesi

Yüksek Lisans Tez Başlığı: Kitosanın Şarapta Bozulma Yapan Mikroorganizmalar Üzerine Antimikrobiyel Etkisinin Belirlenmesi

Bornova Vet.Kont.Arst.Enst.

VETERİNER İLAÇ KALINTILARININ ÖNEMİ ve VETERİNER İLAÇ KALINTILARI TEST METOTLARI. Beyza AVCI TÜBİTAK -ATAL 8-9 Ekim 2008 İZMİR

Akademik Grda 6(3) (2008) Giiriig / Opinion. Semih Otleg, Niltifer Karadal, Selma Oz0berk, Onur Otleg

DİYET ACIDOPHILUS BIFIDUS YOĞURDU VE DİYET YOĞURDUN KALİTE NİTELİKLERİNİN İNCELENMESİ

Derece Bölüm/Program Üniversite Yıl Mühendislik Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü Y. Lisans Ziraat Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü

Ankara Piyasasında Satılan Sütlerde Bazı Antibiyotik Kalıntılarının İnce Tabaka Kromatografisi ve Biyootografik Yöntemle Saptanması

Adıyaman İlinden Eylül Ayında Elde Edilen İnek Sütlerinin Doğu Afrika Kaliteli Çiğ İnek Sütü Standartlarına Uygunluklarinin Belirlenmesi

ir:',i{i? Belirli bir mala tahsis edilmig masazalarda ticareti

Evrak Tarih ve Sayısı: 26/12/2017-E.63092

DERLEME/REVIEW. Sütte Antibiyotik Kalıntılarının Belirlenmesinde Kullanılan Hızlı Test Kitleri ve Güvenilirlikleri Zeynep ÖZDEMİR 1*, Bünyamin TRAŞ 1

ffi. lda SIDAS MEDYA Ekserii Analizi Y6nteminin Grda Kurutmasrndaki Onemi ve Uygulamalan 6zet Akademik Grda 6(6) (2008) 18-27

Edirne İlinden Kış Aylarında Elde Edilen Sütlerde Toplam Yağ ve Protein Değerlerinin Türk Standartlarına Uygunluğunun Belirlenmesi

rexlir isreue FoRMU euzg

FARKLI STARTER KÜLTÜR KULLANILARAK ÜRETİLEN AYRANLARIN KALİTE ÖZELLİKLERİ*

TRABZ N. igortasr Kanunu.

ALl. : Tiim Kalemlere Teklif verilmesi Zorunludur. ihtiyac LiSTESi. Sayf : B SM.4.' / Konu : Teklife Davet. Fivat

Bazı Ticari ve Ev Yapımı Yoğurtlardan İzole Edilen Laktik Asit Bakterilerinin Antibiyotik Duyarlılıkları

DERS ĐÇERĐKLERĐ GÜZ YARIYILI: GMB 501 Uzmanlık Alan Dersi (4 0 0)

T.C. FrRAT Uulvensiresl xasranesi. o6xen SERMAYE lglernlte alnlirl. euzg rexulr lsreme FoRMU. TUTAT.ZETUTE/HIZTUTEI+iSTES+

ÖZEL İSTEK - ANALİZ RAPORU

@esi. T.C. Harran Universitesi Tlp Fakiiltesi Aragttrma ve Uygulama Hastanesi. Genel Toplam(KDV Harig): LUER LOK ENJEKToR(N3s)KiLiTLi i6rue eonpr.

ryfilna SIDAS MEDYA Obez Hastalann Grda Gi.ivenli$i Konusundaki Bilgi Di,izeyleri ve Giiriigleri ile llgili Bir Qahgma 6zet

Fiyat Tespit De$erlendirme Raporu

rt-rnriyn KAMU HASTANELEni ninligi BATMAN s0lct DEVLET ulsunnsi Fiyat i : Ttim Kalemlere Teklif verilmesi Zorunludur

HAcETTEPE u ru ivrnsiresi

ÖZGEÇMİŞ A. KİMLİK BİLGİLERİ

r.ffii inrivlc LisrEsi i.iii.j iti*tinin de bildirilmesini arlrica ederim' i Fiyat i ^saimln sol-cn DEVLET HASTANESI i Birim i ToPlam FiYat

SIEMENS. Acil Saha Giivenlik Uyansr

Bu birim de$er esas altnarak deler tespitine iligkin yaprlan hesaplamalar agalrder

AB Mevzuatı: Veteriner İlaç Kalıntıları

Adıyaman İli Kahta İlçesinden Bahar Aylarında Elde Edilen Yoğurtlarda Bazı Biyokimyasal Parametrelerin Karşılaştırılması

IME-DC Araştırma ve Geliştirme Laboratuvarı Q4/2012 Q2/2013 Biyokimya İhtisas Bölümü

UYGULAMA NOTU. LCMSMS ile Avertmectin Grubu Antiparazitik İlaçların Analizi. Sıvı Kromatografi Kütle Spektrometre HAZIRLAYANLAR

w6ttrk SIDAS MEDYA Ozer U HT igleminin Mikrofi ltrasyon ve U ltrafiltrasyon Retentatlannln Rennet Olugturma Ozellikleri Uzerine Etkileri

CIRRICULUM VITAE. Food Hygiene and Technology Department Graduation LANGUAGE SKILLS English Written Spoken. Medicine

Selçuk Üniversitesi Ziraat Fakultesi Bahçe Bitkileri Bolumu Selçuklu/KONYA (Sorumlu Yazar)

ENTEGRE YÖNETİM SİSTEMİ TALİMATLAR

Batman da Tüketime Sunulan Yoğurtların Bazı Kimyasal ve Tekstürel Özellikleri

Amasya İlinde İlkbahar Mevsiminde Elde Edilen İnek Sütlerinde Yağ Depresyonunun Belirlenmesi

HACETTEPE ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK FAKÜLTESİ PUREZONE CİHAZI TEST RAPORU

L' inrplant multifleman gekirdek damar r.izerine, multifleman G-g adet yan. 5'Krimpler, dokuya zarar vermeyecek gekirde yumugak hatrara sahip ormarr,

Acrk teblieat adresi. Telefon ve Faks numarasl. Not:

Bornova Vet.Kont.Arst.Enst.

STEVİA ÖZÜ İLAVESİNİN PROBİYOTİK YOĞURTLARININ BAZI KALİTE ÖZELLİKLERİ ÜZERİNE ETKİLERİ. Yrd.Doç.Dr. Hüseyin Avni Kırmacı

Buharh ve Buhar Destekli Hibrit Frnnlarda Pigirme

Hayvansal Gıdalarda VTÜ Kalıntı Mevzuatı-Türkiye BVKAE TOKSİKOLOJİ BÖLÜMÜ

MADDE 4 (1) 5996 sayılı Kanunun 3 üncü maddesindeki tanımlara ilave olarak ikinci fıkrada yer alan tanımlar da geçerlidir.

t{ffiisi&,lon *J'iJ'

25 Ağustos 2014 PAZARTESİ. Resmî Gazete. Sayı : (Mükerrer) YÖNETMELİK. Gıda, Tarım ve Hayvancılık Bakanlığından:

SICAKLIK VE ENTALP KONTROLLÜ SERBEST SO UTMA UYGULAMALARININ KAR ILA TIRILMASI

Ezgi KARA*, Murat ÇİMEN**, Servet KAYA*, Ümit GARİP*, Mehmet ŞAHİNSOY*

Adıyaman İli Kahta İlçesinden İlkbahar ve Kış Mevsimlerinde Elde Edilen Beyaz Peynirde Bazı Biyokimyasal Parametrelerin Karşılaştırılması

yangin ihbar SiSTEnni vn GAZsONnURME Sisrpui rnxxir

Akademik GtdaT(2) (2009) Derleme Makale / Review Paper. Konya Kiiflii Peyniri

l. BE$ERi TrBBi UR0N0N ADr

2. KAPSAM. eirci cuvrrvlici poririxnst

ihtiyac LisTEsi T.C. SAdLIK BAKANLICI BATMAN B6LGE DEVLET IIASTANESi SATINALMA KOMiSYON BASKANLIEI 'l

KAHRAMANMARA$ StiTCu in,ia.u univnnsirnsi 2015 YILI KURUMSAL MALi DURUM VE BEKLENTiLER RAPORU. Kurumsal Mali Durum ve Beklentiler Raporu

sayr, 81 z- Konu : Teklif Toplamfiyatyalntz.., Tl,dir TEKTIFFORMU T.C. ADANA VALiLiGi Halk Sa$rfr MildUrtiifU

KApALt ToRAKS DRENAJ sisreui zooo cc'lik

Akademik Gtda 6(1) (2008) 17-22

KÜTÜPHANE İNGİLİZCE DERGİ LİSTESİ

Akademik Grda 6(5) (2008) Derleme Makale / Review paper. Rezan Alkan, Tolga Alkan. Trehalose: lts Functions and Uses

Hatice YILDIRAN. Gıda Mühendisi BURDUR İL MÜDÜRLÜĞÜ

T.C. SAdLIK BAKANLIEI TiJRKiYE KAMU HASTANELERi BiR[idi BATMAN 86LCE DEVLET HASTANESi

Transkript:

SIDAS MEDYA rcfn Grda Bilimive Teknolojisi Dergisi Akademik Aragtrrma Makalesi / Research Paper Uzun Omtirlii (UHT) Siitlerdeki Antibiyotik Kahntrlannrn Tespitinde Ug Farkh Ticari Test Kitinin Kargrlagtrnlmasl Ozge Yrldrz, Sevcan Unltittirk, Canan Tarr 6zer izmir Ytiksek Teknoloji Enstitiisri, Grda Mrlhendisligi Boltimti, Gtilbahge Koyri, 35430 Urla, izmir E-posta: sevcanunluturk@iyte.edu.tr Bu galtgmada, Avrupa Birli$i ve Ttirk Grda Kodeksi Hayvansal Kokenli Grdalarda Veteriner ilaglarr Maksimum Kalrntr Limitleri Tebli$i'ne uygun olarak segilmig hedef konsantrasyonlarda penisilin G (2, 4 ve 8 ppb), ampisilin (2, 4 ve 8 ppb) ve tetrasiklin (100, 250 ve 500 ppb) ile kontaminedilmig UHT tam ya$h inek sritleri iig farkh ticari antibiyotik test kiti (CMT Copan stit test kiti, Rosa'MRL betalaktam test kiti ve Penzyme'srit test kiti) kullanrlarak incelenmigtir. Bu tig test kitinin antibiyotikaltnttespitigin kullandrklan yontemler birbirlerinden tamamen farklrdrr. Elde edilen bulgulargrgrnda, stjtteki antibiyotik kaltnttlartnln belirlenmesinde CMT Copan sr-it test kitinin yorumlanmasrnrn basit, kullanrmrnrn kolay, ekonomik, hassasiyetinin ytiksek ve raf omrtintin uzun oldu$u ortaya konulmugtur. Nihai bir sonuca ulagabilmek igin galrgmanrn daha fazla saytda ornekve farklt partilere ait antibiyotiktest kitleri kullanrlaraktekrar edilmesiyararlr olacaktrr. Anahtar Kelimeler: UHT srit, Antibiyotik katrntrsr, Antibiyotik test kifleri Gomparison of Three Different Gommercial Test Kits for Detection of Antibiotic Residues in UHT MIIK ABSTRACT Three commercial milk antibiotic test kits (CMT Copan milk test kit, Rosa@ MRL beta-lactam test kit or penzyme@ milk test kit) were evaluated for determination of penicillin G, ampicillin and tetracycline at target concentrations (for penicillin G and ampicillin 2,4,8ppb; fortetracycline 100, 250 and 500 ppb)selected in accordance with European Union and Turkish Food Codex in UHT whole cow milk. Under the conditionstudied, the CMT Copan milk test kit was simple to interpret, easy ro use, economical, highly sensitive and have a longer shelf life in differentiating the antibiotic residues of milk in comparison to other test kits. ln order to achive conclusive results, it should be better to repeat experiments with higher numbers of samples and different lots of commercialantibiotic kits. Key Words : UHT milk, Antibiotic residues, Antibiotic test kits GiRig sonugtara neden otmaktadrr[1,2,3,4,5,61. Antibiyotikler, uzun yrllardlr, hayvan beslenmede katkr maddesi olarak ve hayvanlarda olugan hastalrklarrn Ttiketicilerin daha grivenli srit tirtinlerine talebinin artmasl tedavi ve kontrol edilmesinde kullanrlmaktadrr. Ancak nedeniyle, Avrupa Buli}i2377l90 numarall Konsey Ttiz0grl antibiyotikaltnttlart ile kontamine olmug srit ve srlt ilestittevarolabilecekveterinerilagkalrntrlaniginmaksimu tirtinleri halk sa$h$r ve bazr tiretim proseslerinde kalrntr limitlerini belirlemigtir [7]. Trirkiye'de ise gig srit ve tireticiler ve ttiketiciler agtstndan arzu edilmeyen igme sritrindeki veteriner ilag kalrntr seviyeleri Ttirk Grda

O.Yrldrz, S. Unltitiirk, C. TartAkademik Kodeksi Hayvansal Kokenli Grdalarda Veteriner ilaglarr bir reseptor analizdir. Stit orne$inin negatif veya pozitif Maksimum Kahntr Limitleri Tebligi'nde (Teblig No: oldugu test kiti tizerinde yeralan test gizgisi ve kontrol gizgisi 2002130) duzenlenmigtir [8]. Tablo 1 Avrupa Birli$i ve ile belirlenmektedir. Trirk Grda Kodeksi'nde yer alan sutteki penisilin G, ampisilin ve tetrasiklin maksimum kaltntt limitlerini Bu aragtrrmada farklr galrgma prensiplerine sahip tig ticari gostermektedir. test kitinin ozellikleri, penisilin G, ampisilin ve tetrasiklin hedef antibiyotikleri segilerek kargtlagtrrrlmtgttr. Ttim Srit tlreticilerine ve sut rirtinlerine kargt kot0 imajtn olgrimler hem bu antibiyotikleri igeren hem de kontrol olarak olugmasrnr onlemek amactyla, srit toplama ve igleme bu antibiyotikleri igermeyen tam ya$lr inek sittleri kullantlarak srrasrnda kullanrlabilecek pek gok antibiyotik kaltntt gergeklegtiril mi gti r. tespit metodu geligtirilmigtir. Mevcut metotlar; mikrobiyal inhibisyon testleri, mikrobiyal reseptor testleri, enzimatik MATERYALVE METOT testler, immunolojik testler ile spektrofotometrik, kromatografik ve fluorimetrik gibi kimyasal-fiziksel Materyal metotlarr kapsamaktadtr [9, 10]. UHT tam ya$lr inek stltleri bir yrlllk donem boyunca her mevsimi igine alacak gekilde ve her ay diizenli olarak izmi/de Tablo 1. Avrupa Birli$i ve Ttirk Grda Kodeksi'nde yeralan yerel bir marketten temin edilmigtir. Penisilin G potasyum stitteki penisilin G, ampisilin ve tetrasiklin maksimum tuzu (%99.4), ampisilin trihidrat (%98.1) ve tetrasiklin kalrntr limitleri (MKL)[7, 8] hidroklorid (%97.3) Riedel-de-Hadn (Sigma Aldrich GmbH Antibiyotik AB Kodeksi Trirk Gtda Quality Assurance, Germany) firmastndan alrnmtgttr. CMT Qegidi MKL Kodeksi MKL Copan silt test kiti (Parti No: F3 1342) Copan (Copan ltalia (oob) (oob) Spa, ltaly), Penzyme'stitest kiti (Parti No: G3-1 505-01 ) Chr' Penisillin G 4 4 Hansen (UCB-Bioproducts, Belgium) ve Rosa' MRL Ampisillin 4 4 Tetrasiklin 100 100 betalaktam test kiti (Parti No: 068019A) ise Charm (Charm Sciences Inc., USA)'dan temin edilmigtir. Aragttrmada Toros Piyasada bulunan ticaritest kitleri rutin antibiyotik kaltntt bolgesinden temin edilen yo$urtlardan izole edilen tespitlerinde yaygtn olarak kullantlmakta ve htzlt sonuq Streptococcus thermophilus (St 95/1) ve Lactobacillus vermektedir. Ancak bu kitlerin ytiksek maliyet getirmesi, detbrueckii subsp. bulgaricus (Lb 54) yo$urt testlerinde antibiyotik tespit yelpazelerinin genig olmamast ve yanll$ kullantlmtgttr [16]. negatif / pozitif sonuglar vermesi gibi dezavantajlart da bulunmaktadrr [11]. Antibiyotik varlt$tntn tantmlanmast Antibiyotik igeren Slitlerin Hazlrlantgl ve do$rulanmastnda en grivenilir yontem kromatografik Penisilin G potasyum tuzu (C..H',KNrO4S, Yo99.4, 372.48 metotlardrr. Fakat kromatografik metotlartn da karmaglk g/mol), ampisilin trihidrat (C16H''N.O4S.3H,O, %98'1, 403'45 basamaklardan olugmast, analiz edilen orneklerin kuqtik g/mol) ve tetrasiklin hidroklorit (C,rHruClN,O s, o/o97.3,480.90 miktarda olmast, ytiksek ekipman maliyeti, kemometrik g/mol) standart soltisyon haztrlamak igin kullantlmtgttr. analizlerin kullantlmast ve tecrtlbeli personele ihtiyaq Penisilin G (2, 4, 8 ppb), ampisilin (2, 4 ve 8 ppb) ve duyulmasr gibi pek gok dezavantajr bulunmaktadtr [12' tetrasiklinin (100, 250 ve 500 ppb) kullantlan 13, 141. Bu yrizden, si.itte antibiyotik kaltnttlartntn konsantrasyonlart saf su kullantlarak stok standart belirlenmesi igin kolay, htzlt, ucuz, daha duyarlt ve seqici soh.isyonun seyreltilmesi ile haztrlanmtgttr. Soz konusu analitik prosedtirlere ihtiyag duyulmaktad t r [11]. antibiyotik konsantrasyonlarlntn segilme nedeni "birinin maksimum kalrntr limiti seviyesinin altrnda, birinin bu limit Bu galrgmantn amact, si.it ve si.ltirunlerinde antibiyotik seviyesinde ve birinin de bu limit seviyesinin tistiinde" kalrntrlartntn tespiti igin kullantlan bazt ticaritest kitlerinin olmasrdrr. Siit ornekleri, hedef antibiyotiklerin segilen bu [CMT Copan siit test kiti, Penzyme'stitest kiti ve Rosa' konsantrasyonlartnt elde etmek igin standart antibiyotik MRL betalaktam test kitil avantaj ve dezavantajlartntn soh.isyonlartyla kontaminedilmigtir. ortaya konulmast ve bu yolla bu kitleri kullanan stit endristri kuruluglartna yol gosterilmesi amaglanmrgtt r' Bu Test Kitlerinin Prosediirleri amagla, farklr prensiplere sahip 09 test kitinin kargrlagtrrrlmastna yonelik bir aragtrrma ytirtittilmtigttli. Kullanrlan stit ornekleri iiretici onerileri dikkate altnarak bu Aragtrrmada kullantlan test kitleri sut tireticileri ile yapllan ticari test kitleri kullanrlarak taranmtgtrr. CMT Copan stit testi anket galrgmalart sonucunda segilmigtir. CMT Copan igin, test edilecek 100 pl stit agar tizerine direkt olarak sut testi agar igerisinde besin ihtiva eden bir inhibisyon eklenir ve 64t0.5"C'de 3 saattl5 dk inkube edilir. Agardaki metodudur. CMT Copan stit testinin prensibi Bacillus sarr renk negatif bir sonug oldu$unu, mor renk ise pozitif bir ste aroth e rmoph i I u s v ar. cal i dol acti s C 953 sporu n u n h tzl t sonucun varlr$rnr ortaya koyar (Resim 1). bi.iyi.imesine ve asit tiretmesine dayantr. Test kitindeki bromokresol morunun rengi asit iiretimi nedeniyle Penzyme' srit testinde, 10 pl enzim (tamponu iginde de$igmektedir. Penzyme' stit testi beta-laktam grubu bulunan DD-karboksipeptidaz) 50 pl siit igine eklenir, karrgtrrrlrr ve 47"C 5 dk inkiibe edilir. ikinci basamak olarak, antibiyotiklerin hrzlr tesbiti igin kullantlan enzimatik ihtiyag duyulan di$er ttim reaktifleri igeren tablet eklenir ve kolorimetrik bir metottur. Enzim inaktivasyonu nedeniyle tabletin alt krsma gelmesi igin ttip yavag bir gekilde galkalantr. renk sarr veya geftali renginde gozlemlenir. Rosa'MRL 47'C'de tekrar inktibe edilir. ilk okuma 8 dk inktibasyon betalaktam testi hrzh antibiyoti kaltnttstespit edebilen periyodundan sonra yaptl lr.

O.Yrldrz, S. Unttittirk, C. TarrAkademik Resim 1. yorumu CMT Copan stit testi sonuglarrnrn gorsel edilip inktibasyona brrakllmrgtrr. ink0basyon sonucunda yogurt olugup olugmad r$ r gozlenmigtir. Resim 4. On tarama igin test deseni antibiyotikahntr tespitigin on tarama ilk okumadan sonra, ornek ek olarak 7 dk daha inkribasyona brrakrlrr. Renk degigimleri renk kartr kullanrlarak okunur. Sarl renk beta-laktam antibiyotiklerinin varlrgrnr gosterir. Okunmug renk pembe-portakal rengi araslnda ise, orne$in negatif oldu$u anlamrna gelir (Resim 2). -r/ \\ Rosa'MRL betalaktam test kitinin kullanrmlnda, 300 pl stit orne$i ornek kuyucuguna eklenir. Test kiti 56'C'de 8 dk Rosa'inkribasyon aleti kullanrlarak inktib edilir. Eger test gizgisi (T) kontrol gizgisi ite (C) aynr veya C gizgisinden daha koyu ise bu negatif ornek anlamtna gelir, T gizgisi C gizgisinden oldukg agrk renkte veya T gizgisi kaybolmug veya krsmen renkli goronriyor ise bu sonug pozitif ornek oldugunu igaret eder (Resim 3). Resim 3. Rosa'MRL betalaktam test kiti sonuglannrn gorsel yorumu Daha sonraki agamada yaprlacak analizler igin on tarama testlerinin sonucunda, antibiyotik igermeyen ve yogurtesti ile do$rulanmrg sadece bir ticari firmaya (A firmasr) ait UHT sritler kullanrlmrgtrr. Bu firmaya ait UHT sriilerine, her bir antibiyotik igin her mevsimi igine alan bir yrllrk periyot boyunca, Resim 5'de gosterilen ikinci test deseni uygulanmrgtrr. Resim 5. Belirlenen konsantrasyonlardaki antibiyotik kalrntr analizleri igin test deseni Tarama testi : A firmasrna ait UHT stit orneklerine antibiyotikalrntr testlerinin (ticari kitlerin ve yogurtestinin) uygulanmasr Deneme Deseni Sekiz farklr ticari markaya ait srit ornegi Resim 4,de verilen test deseni kullanrlarak antibiyotik igerikleri agrsrndan on taramaya tabii tutulmuglardrr. On tarama, tig farklr test kiti ile gergeklegtiritmigtir. Antibiyotik igermeye negatif ornekler aynca yogurt testine tabii tutularak ticari test kiti sonuglan dogrulanmrgtrr. Yogurt testinde ise negatif orneklere egit oranlarda Streptococcus thermophilus (Sf 95/1) ve Lactobacittus delbrueckii subsp. bulgaricus (Lb 54) krlltrirteri inokrjle Belirlenen negatif orneklere farklr konsantrasyonlardantibiyotik Antibiyotikli orneklerin test kitleri ile

O.Yrldrz, S. Unhittirk, C. TarrAkademik BULGULARveTARTI$MA Sekiz farklr ticari markaya ait toplam 24 adet UHT tam ya$lr inek stlttl, CMT Copan stit test kiti, Penzyme've Rosa'MRL betalaktam antibiyotik test kitleri ve yo$urt testi kullanrlarak bir on incelemeye tabi tutulmuglardtr. Test kitlerinin kullantm talimatlart dikkate altnarak, antibiyotik igermeyen stit ornekleri CMT Copan stit test kiti kullanrlarak sart renk olarak, Penzyme@ stit test kiti kullanrlarak pembe-portakal rengi ve Rosa' MRL betalaktam test kiti kullanrlarak T gizgisinin C qizgisinden daha koyu oldu$u tespit edilerek belirlenmigtir. Yogurt testinde ise orneklerin gerekli ktvamda yo$urt olugturup olugturmadr$t gozlemlenmigtir. Elde edilen on tarama sonuqlarr Resim 6'da sunulmugtur. Buna gore sekiz firmadan sadece tig tanesinin iirettigi UHT stitlerde antibiyotikalrntrsrna rastlanmamtgttr. Yani orneklerin %38'i negatif bulunurken, %50'sinde antibiyotik kalrntrsrna rastlanmtg, %13'unde ise sonuglar belirsiz grkmrgtrr. Resim 6. On tarama testlerinde tespit edilen antibiyotik kalrntr igeren/igermeyen UHT stit orneklerinin ytizde dasrlrmr silt 6rnekleri (on larama wnuqlal) kitlerinin tespit etme limit araltklart, AB Konsey Dilzenlemeleri ve Ttirk Grda Kodeksi Dtizenlemeleri goz onrine alrnarak maksimum kalrntr limiti seviyesinin alttnda, tlstrlnde ve bu limit konsantrasyonlartnda de$erlendirilmigtir. Tablo 2 segilen bu antibiyotik kaltnttlartntn tespiti igin kullanrlan stit test kitlerinin tespit etme limit ve AB/Ttirk Grda Kodeksi dtizenlemelerini bir arada sunmaktad tr. Tablo 2. Antibiyotikaltnttlartntn tespiti igin stit test kitleri (CMT Copan Srit Test Kiti, Penzyme@ stlt test kiti ve Rosau MRL betalaktam test kiti) [15] Test Test Qesidi Test Sevive Aralrdt Mikroblyal inhibisyon testi CMT Copan Sut Testi PenzymeGr Sur Testi Rosa@ MRL betalaktam testi Hrzlr enzimatik test Hrzil resepror test 1-2 ppb Penisillin G < 2 ppb Ampisillin 25O-5O0 ppb Tetrasiklin 5 ppb Penisillin G 2-3 ppb Penisillin G 3-4 ppb Ampisillin 3O-9O DDb Tetrasiklin Tablo 2 agrk bir gekilde gosteriyor ki, stltteki dtigtik antibiyotik kalrntr seviyesinininin do$ru tespiti sa$ltk ve gtivenlik konularr agtstndan insanlar igin, stit tiriinleri igleme agrsrndan rireticiler igin b0y0k onem arz etmektedir. Genel anlamda incelendi$inde, Penzyme@ siit test kitinin dezavantajt diger iki test kiti ile kargtlagttrtldt$tnda sadece beta-laktam grubu antibiyotikleri igeren, dar bir antibiyotik tespit spektrumuna sahip olmastna dayanlr. Bunun yantstra oldukga krsa bir raf omrune sahiptir (bir ayltk). Hassasiyeti 0.005-0.006 pg/ml penisilin G' dir. Inktlbasyon suresi 25 dk'drr. CMT Copan srittest kitive Rosa'MRL betalaktam test kitlerinde gorrilmemesine ra!men Penzyme' stit test kitinde hatal r pozitif ve yanl r g negatif sonuglar gozlemlenmigtir. Test kitlerinin test prosedtirleri incelendi$inde, CMT Copan srit testinin kullantmtn basit, stitte antibiyotikaltnttlartntn vadr$rnr ayrrt etmesinin kolay ve uzun raf omrtine (12 ay) sahip oldu$u ortaya konulmugtur. Hassasiyeti 0.002 t 0.001 Farklr firmalarrn tiretmig oldugu UHT s0tlerde yaptlan on pg/ml penisilin G ve 0.003 I 0.001 pg/ml diger tarama igleminden sonra, A firmaslntn tirettigi UHT antibiyotiklerdir. Ug saat stiren uzun bir inktibasyon stiresine sritlerin antibiyotik igermedi$i tespit edilmigtir. Bu ihtiyag duymaktadrr. firmanrn riretti$i UHT stitler bir sonraki agamada antibiyotik test kitlerinin performanslartnt Rosa' MRL betalaktam test kiti ise Rosa' inkribasyon de$erlendirmek igin yaprlan analizlerde kullantlmtgtlr. A cihazrna ihtiyag duymast ve her antibiyotik igin farklt test firmasrndan, bir yrl boyunca, her ay aynt tiretim gubuklarrnrn kullan t m rn r gerektirmesine ra$men tespiti h tzl t, partisinden alrnan stit ornekleri oncelikle antibiyotik kullanrmr kolay iyi bir immuno-reseptor test kitidir. igermedisinden emin olmak igin tekrar tarama testlerine inkribasyon stiresi 8 dk si.irmektedir. CMT Copan stit testi gibi tabii tutulmugtur. Bu tesbitten sonra, belirlenen hedef bir yrllrk uzun raf omritne sahiptir. Hassasiyeti 0.004 pg/ml konsantrasyonlarda kontamine edilen antibiyotik penisilin G ve di$er antibiyotiklerdir. igermeyen srit ornekleri, farklt prensiplere gore galtgan ticari test kitleri ile tekrar incelenmigtir. Antibiyotik Aragtrrmamrz gosterdi ki, CMT Copan stit test kiti bir ytlltk igermeyen silt ornekleri 2, 4 ve 8 ppb penisilin G ve stireg boyunca yapay olarak kontaminetti$imiz antibiyotikli ampisilin ile, 100, 250 ve 500 ppb konsantrasyonlarlndasrit orneklerini kullanrlan hedef konsantrasyonlartnda net tetrasiklin ile kontamine edilmigtir. Yapay olarak, olarak tespit edebilmigtir. Rosa@ MRL betalaktam test kiti ile kontamine edilen stit ornekleri CMT Copan stit test kiti, yaprlan taramalarda ise maksimum kaltntt limiti alttnda, Penzyme' stit test kiti ve Rosa' MRL betalaktam test antibiyotik varlr$r tespitinde sorun yaganmtg, test gubugunda kitleri kullantlarak gorsel olarak tekrar incelenmig ve yer alan kontrol gizgisine dayanarak bagartlt gozlemler segilen antibiyotikonsantrasyonlartntn tespit edilebilir yaprlamamrgtrr. Fakat maksimum kalrntt limiti seviyesinde ve olup olmadr$r gozlemlenmigtir. Bu yiizden her bir bunun ristrindeki konsantrasyonlarda antibiyotik varlt$t net antibiyotik igin antibiyotik test kitlerinin duyarltlt$t, test bir gekilde gorsel olarak gozlemlenebilmigtir. Penzyme' stit

O.Yrldrz, S. Unliitrlrk, C. Tarr Akademik I test kiti ile yapllan denemelerde ise penisilin ve ampisilin and cull dairy cows. Milk Quality & Milking Management, tespitinde bazr zorluklar yaganmt$, diger iki test kitinde Virginia Tech. gozlendi$i gibi net sonuglar yerine, yanlrg negatif ve [3] Callan, R.J., 2000. Antibiotic use. Food Safety and pozitif sonuglar elde edilmigtir. Quality Assurance DWM PhD ACVIM llm. Colorado State University. Antibiyotikli stitlerin tespiti igin farklr test kiflerinin [4] O'Keeffe, M., Kennedy, O., 1998. Residues- a food de$erlendirildi$i bir galrgmada da benzer sonuglar elde safety problem?. Journalof Food Safety 18:297-319. edilmigtir [7]. Bu galrgmaya gore, Penzyme@ srit test kiti [5] Kangethe, E.K.,Aboge, G.O.,Arimi, S.M., Kannja, L.W., uygulamalannda, gerekli olan reaktiflerin kullanrmrnda Omore, A.O., McDermott, J.J., 2005. Investigation of the zorluklar yagandr$r, okumalann zor oldugu ve bu kitin risk of consuming marketed milk with antimicrobial ornek sayrsr 1O'dan fazla olan denemeler igin uygun residues in Kenya. Food Control 16: 349-355. olmadrgr ortaya konmugtur. Rosa'MRL betalaktam test [6] Mathur, S., Singh, R., 2005. Antibiotic resistance in food kiti ile yaprlan denemelerde ise sonuqlarrn gorsel olarak lactic acid bacteria. lnternational Journal of Food de$erlendirilmesinde problem oldugu ve muhakkak bir M icrobiology 105: 281-295. Rosa' okuma cihazrna gerek duyuldu$u belirtilmigfir. [7] Zvirdauskiene, R., Salomskiene, J., 2007.An evaluation Di$er yandan, CMT Copan srit testinin belli bir grup of different microbial and rapid tests for determining antibiyoti$e kargl olan hassasiyetinin diger kiilere gore inhibitors milk. Food ControllS:541-547. daha yriksek oldugu, basit ve sonuglann daha kolay t8l T.C. Tarrm ve Koyigleri Bakanlrgr. Koruma ve Kontrol degerlendirildi$i ortaya konmugtur [7]. Genel Mtidrirlrigri. 2008. Turkish Food Codex. Hayvansal kokenli gldalarda veteriner ilaglarr Sonug olarak, uzun iglem stiresine sahip olmasrna maksimum kalrntr limitleri tebligi 2O0S-28. ra$men, kullanrmrn kolay olmasr, yorumlanmasrnrn basit http://www.kkgm. gov.tr. (7 Ocak, 2008) olmasr, uzun raf omrrine, ytiksek hassasiyete ve genig [9] Molina, M.P., Althaus, R.L., Motina, A., Fernandez, N., antibiyotik tespit spektrumuna sahip olmasr, farklr 2003. Antimicrobial agent detection in ewes' milk by the antibiyotiklerin varlrgrnr tek bir test kiti ile tespit edebilme microbial inhibitor test brilliant black reduction test-brt ozelligine sahip olmasl ve daha ekonomik olmasr AiM'. I ntern ation al Dairy Jou rn al 13: 821-826. nedeniyle CMT Copan srlt test kitinin tercih editebilir bir [10]Le Breton, M.H., Savoy-Perroud M.C., Diserens, J.M., test kiti olduguna karar verilmigtir. 2007. Validation and comparison of the Copan Milk Test and Delvotest SP-NT for the detection of antimicrobials SoNU9LAR inmilk. Analytica ChimicaAcfa 586: 280-283. [11]Teagasc, M., 2004. Monitoring of veterinary drug Bu galrgma, inek stittinde srkllkla rastlanan ilg farklr residues in food. The Society of Food Hygiene antibiyotik kalrntrslnrn farklr prensiplere sahip tig Technologyl-5. antibiyotik test kiti ile tespit editip kargrlagtrrrlmasrnr[12]rinken, T., Riik, H., 2006. Determination of antibiotic hedeflemigtir. Qalrgmada test kitlerinden (parti residue and their interaction in milk with lactate numaralarr belirli) birer paket alrnarak kargrlagtrrma biosensor. Journal of Biochemical and Biophysical yaprlmrgtrr. Mevcut kogullarda CMT Copan srit testinin Methods66:13-21. stitte farkh antibiyotik kalrntrlarrnrn varlr!lnr tespit [13]Toldra, F., Reig, M., 2006. Methods for rapid detection of etmede daha avantajh oldugu gorrilmektedir. Ancak nihai chemical and veterinary drug residues in animal foods. bir sonuca ulagabilmek igin galrgmanrn daha fazla ornek Tre n d s I n Food Scie n ce & Tech n o I ogy 17 : 482-489. sayrsr ile ve farklr parti numaralanndan antibiyotik test [14]Reid, L.M., O'Donnell, C. P., Downey G., 2006. Recent kitleri kullanrlarak tekrar edilmesi yararlr olacaktrr. technological advances for the determination of food authenticity. Food Science and Technology 1T:344-353. KAYNAKLAR [15]Charm Sciences Literature. 2008. ROSA Test. htpp://www.charm.com (3 Ekim, 2007). [1] McEwen, S.A., Black, W.D., Meek,A.H.,1991.Antibi-[16]Erkusotic residue prevention methods, farm management, Harsa, S.,2006. lsolation and molecular O., Celik, E.S., Yavuzdutmaz, H., Okuklu, 8., and occurrence of antibiotic residues in milk. Journal characterization of artisanal yogurt starter bacteria. The Of D a i ry Scie n ce T 4: 2128-2137. 275 International ICFMH Symposium on Food Safety [2] Jones, G.M., 1999. Preventing drug residues in milk and Food Biotechnology. Diversity 276 and 277 Global lmpact, Bologna, ltaly.