Enzygnost Anti-HBc/IgM

Transkript

1 Revizyon çubuğu, önceki versiyonda yapılan güncellemeleri göstermektedir. Kullanım Amacı İnsan serumu veya plazmasındaki hepatit B (çekirdek) antijenine (HBc) özgü IgM antikorlarının kalitatif tespiti için enzim immün testi. Enzim immün testi BEP III Sistemi, BEP 2000 Sistemi veya BEP 2000 Advance Sistemi ELISA işlemcileri kullanılarak işlenebilir. Testin otomatik olmayan şekilde çalışılması da mümkündür. Özet ve Açıklama Neredeyse tüm akut hepatit B enfeksiyonu vakalarında, hepatit B çekirdek antijenine (anti-hbc IgM) karşı IgM antikorları viral çoğalmanın başlangıcından kısa bir süre sonra üretilir ve yaklaşık 7 ila 17 hafta dolaşımda kalır. Bu nedenle, nispeten güvenilir bir akut hepatit B enfeksiyonu tanısı, HBsAg ve HBeAg kronik hepatitte de serumda oluşabildiği için, tek başına bu parametre temel alınarak elde edilebilir ve dolayısıyla ayrımsal tanı için başka parametrelerin (anti-hbs, anti-hbe veya anti-hbc) değerlendirilmesi gerekir. Bazı akut hepatit B enfeksiyonu vakalarında, HBs ve HBe antijenleri klinik semptomların başlangıcından önce halihazırda ortadan kaybolmuş olabilir, ancak ilgili antikorlar yine de tespit edilemeyebilir. Bu tür vakalarda, total anti-hbc testi netlik sağlamaz, çünkü bunlar bir enfeksiyondan yıllarca sonra bile dolaşımda hala bulunabilen, büyük olasılıkla tek olan uzun süreli antikorlardır. Akut hepatit B tanısındaki bu eksiklik, anti-hbc IgM 1 testi ile doldurulabilir. Yöntem Prensibi Reaktifler Enzygnost Anti-HBc/IgM katı fazda spesifik antijenler yerine μ-zincir spesifik anti-insan IgM antikorları kullanılarak yapılan μ yakalama prensibine dayanmaktadır. Koyundan alınan antiinsan IgG içeren örnekler [Örnek Tamponunda (Anti-HBc/IgM) bulunan RF Absorbent] ön işlemeye tabi tutulduktan sonra, test plağındaki immün reaksiyon, örnek ve HBcAg/POD Konjugatının eşzamanlı inkübasyonu olarak gerçekleştirilir. Test örneğinde bulunan HBc'ye karşı spesifik IgM antikorları, test plağının üzerindeki reaksiyon haznelerinde anti-insan IgM antikorlarına bağlanırlar. HBcAg/POD Konjugat bu spesifik antikorlara bağlanır. Konjugatın enzim kısmı Kromojen Çalışma Solüsyonunu maviye dönüştürür. Bu reaksiyon Durdurma Solüsyonu POD ilave edilmesi yoluyla sonlandırılır ve rengin sarıya dönüşmesine sebep olur. Renk yoğunluğu örnek içinde bulunan antikor konsantrasyonu ile orantılıdır. Simgeler Sağlanan Materyaller Enzygnost Anti-HBc/IgM 1 x 96 MTP Enzygnost Anti-HBc/IgM test plağı 1 prç CONJUGATE HBcAg/POD Konjugat 3 x 0,6 ml REAGENT DILUENT Konjugat Tamponu (Anti-HBc/IgM) 3 x 6 ml DILUENT Örnek Tamponu (Anti-HBc/IgM) 3 x 40 ml CONTROL + Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif 1 x 0,3 ml OWSEG13C48 Rev. 03 TR /10

2 Bileşim Simgeler Sağlanan Materyaller CONTROL Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, negatif 1 x 0,5 ml WASH POD Yıkama Solüsyonu POD a 1 x 100 ml SUBSTRATE TMB Tampon/Substrat TMB a 1 x 30 ml CHROMOGEN TMB Kromojen TMB a 1 x 3 ml STOP POD Durdurma Solüsyonu POD a 1 x 100 ml EMPTY VIAL CHROM SOL Kromojen Çalışma Solüsyonu için boş şişe 1 prç Yapışkan folyolar 6 prç Polietilen torba 1 prç Barkod Değer Tablosu 1 prç Kullanım Talimatları 1 prç a Bu bileşenler Enzygnost /TMB kit ( REF OUVP) için Yardımcı Reaktiflerde mevcuttur. Test plağı, konjugat, konjugat tamponu, örnek tamponu ve Kontrol Serumu, pozitif ile Kontrol Serumu, negatif her ambalajın üzerinde basılı olan ve her biri sırayla ekteki barkod değerler tablosunda belirtilen 6 haneli lot numarası kombinasyonu ile birlikte kullanılmalıdır. Aynısı, Kromojen TMB ve Tampon/Substrat TMB reaktifleri için de geçerlidir. Enzygnost Anti-HBc/IgM test plağı: İnsan IgM monoklonal antikorlarıyla kaplı mikrotitrasyon plakları HBcAg/POD Konjugat: Peroksidaz (POD) ile konjuge edilmiş rekombinant HBc antijeni Konjugat Tamponu (Anti-HBc/IgM): Sığır serumu ve Tween 20 içeren TRIS/HCl tampon Örnek Tamponu (Anti-HBc/IgM): Gliserol, sığır serumu, Tween 20 ve insan IgG-Fc'ye (RF Absorbent) karşı koyun antikorları içeren TRIS/HCl tampon Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif: Örnek Tamponundaki HBc antijenine karşı IgM antikorları içeren stabilize edilmiş insan serumu Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, negatif: Seyreltilmiş Örnek Tamponundaki HBc antijenine karşı IgM antikorları olmayan stabilize edilmiş insan serumu Yıkama Solüsyonu POD: Tween içeren fosfat tamponu Tampon/Substrat TMB: Asetat tampon içinde hidrojen peroksit Koruyucu: N-butanol (%< 1) Kromojen TMB: Tetrametilbenzidin dihidroklorür Durdurma Solüsyonu POD: Sülfürik asit (0,25 mol/l) Uyarılar ve Önlemler İn-vitro tanı amaçlı kullanım içindir. Test, toplu örnekler için değil ayrı ayrı örneklerin test edilmesi için geliştirilmiştir. 2/ OWSEG13C48 Rev. 03 TR

3 Uyarı! STOP POD H290, H314: Metaller için korozif olabilir. Ciddi cilt yanıkları ve göz hasarına neden olur. P280, P310, P301, P330, P331, P303, P361, P353, P305, P351, P338, P390, P501: Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/gözlük/maske kullanın. Hemen bir ZEHİR DANIŞMA MERKEZİ'ni veya doktoru arayın. YUTULMASI HALİNDE: Ağızınızı çalkalayınız. Kusmaya ZORLAMAYIN. CİLT ÜZERİNDEYSE (ya da saç): Kontamine olmuş tüm giysiler acil olarak çıkarılmalıdır. Cildinizi suyla durulayınız. GÖZLE TEMAS ETMESİ HALİNDE: Suyla bir kaç kere dikkatlice çalkalayınız. Kontakt lens kullanıyorsanız, mümkünse çıkarınız ve gözlerinizi yıkamaya devam ediniz. Malzeme hasarını önlemek için dökülen sıvıyı emdirin. İçeriği ve kabı tüm yerel, bölgesel ve ulusal düzenlemelere uygun şekilde bertaraf edin. DİKKAT! POTANSİYEL BİYOLOJİK TEHLİKE Bağışlanan her kan ünitesi veya bağışçı, insan immün yetmezlik virüsü (HIV) 1 ve 2, hepatit B virüsü (HBV) (Anti-HBc/IgM Kontrol Serum, pozitif hariç) ve hepatit C virüsü (HCV) için test edilerek, Avrupa Birliği In Vitro Direktifi veya FDA onaylı testlere uygunluk sağlayacak şekilde negatif oldukları saptanmıştır. Bilinen hiçbir test bulaşıcı etkenlerin var olmadığı konusunda tam güvence sunamayacağı için, insanlardan elde edilen tüm örneklerin gerekli dikkat ve özen gösterilerek kullanılması gerekmektedir. Güvenlik bilgi formları (MSDS/SDS) adresinden edinilebilir. Test prosedürünün tamamı boyunca koruyucu gözlüklerin takılması tavsiye edilir. Kullanılan eldivenlerin maruz kalınan materyallere karşı koruma sağlama yeterliliği bilgisi için lütfen üretici talimatlarına uyun. İmha etmek için, katı bulaşıcı malzemelerin en az 1 saat 121 C'de otoklavlanması tavsiye edilir. Aspire edilen tüm solüsyonlar seri olarak bağlanmış iki kapta toplanmalıdır. Her iki kap içinde patojenik insan virüslerini etkisizleştirebilecek dezenfektan bulunmalıdır. Üretici tarafından belirtilmiş olan konsantrasyonlara ve reaksiyon sürelerine uyulmalıdır. Tampon/Substrat TMB, Kromojen Çalışma Solüsyonu ve Durdurma Solüsyonu POD un ağır metal iyonları ya da oksidasyon maddeler ile temasından kaçınılmalıdır (sıvı ile doğrudan temasa geçen metal parçaları bulunan pipetler kullanmayın). Substrat reaksiyon aşamaları, hipoklorit içeren dezenfektanların yakınında gerçekleştirilmemelidir. Kromojen Çalışma Kromojen Solüsyonu test plağına aktarılmadan önce bir anda mavi renge dönerse solüsyon kontamine olmuş demektir; bu durumda temiz bir kap içerisinde yeni solüsyon hazırlanmalıdır. Yukarıda bahsedilen solüsyonların ciltle temas etmesinden kaçınılmalıdır. Reaktiflerin Hazırlanması Teste başlamadan önce tüm reaktiflerin ve test örneklerinin 18 ile 25 C ye gelmesini sağlayın. Bu adımda test plaklarından folyo torbayı çıkartmayın. Testi işlemeye başlamadan önce gerekmeyen stripleri yuvadan çıkartın ve bunları daha sonra kullanmak üzere ambalajdaki polietilen torbaya koyun (Bkz. Tablo 1). Reaktifler ile reaktif çalışma solüsyonlarının karıştırılması gerekiyorsa, köpük oluşmasını engelleyin. HBcAg/POD Konjugat ı 1+10 Konjugat Tampon (Anti-HBc/IgM) ile seyreltin, örneğin yarım test plağı için 0,6 ml HBcAg/POD Konjugatı bir şişe içine 6 ml Konjugat Tampon (Anti-HBc/IgM) ile ekleyin. Nazikçe çalkalayarak karıştırın. Her test plağı için, 20 ml Yıkama Solüsyonu POD u distile ya da deiyonize suyla 400 ml ye seyreltin. Her test plağı için, 1 ml Kromojen TMB'yi, 10 ml Tampon/Substrat TMB (Kromojen Çalışma Solüsyonu) ile, temin edilen boş plastik şişe içinde seyreltin. Işıktan koruyarak saklayın. Kullanılmasının ardından şişeyi distile ya da deiyonize su ile iyice durulayın. Teknik OWSEG13C48 Rev. 03 TR /10

4 nedenlerden ötürü (aşırı dolum), Kromojen TMB şişesi ile Tampon/Substrat TMB şişesinin tüm içeriklerinin bir araya toplanmasına izin verilemez. Saklama ve Stabilite Enzygnost Anti-HBc/IgM kitinin tüm bileşenleri açılmadan belirtilen sıcaklıkta saklandığı takdirde etiketlerin üzerinde belirtilen tarihe kadar kullanılabilir. Açılmış ve seyreltilmiş reaktiflerle ilgili stabilite ve saklama verilerinin tamamı için, bkz. Tablo 1. Gerekli olan donanım: Örnekler Prosedür BEP III: Örnekleri ve kontrolleri manuel olarak dağıttıktan sonra testin otomatik olarak işlenmesi ve değerlendirilmesi BEP 2000/BEP 2000 Advance : Testin tam otomatik olarak gerçekleştirilmesi ve değerlendirilmesi için Pipetler: Sabit veya değişken hacimli piston tipi pipetler veya hacmi ayarlanabilir hacimli tek veya çok kanallı pipetler. Testin otomatik olarak işlenmemesi durumunda ek olarak aşağıdakiler de gereklidir: İnkübatör: Kaplanan su banyosu (37 ±1 C) veya benzer inkübasyon yöntemi Yıkama cihazı: Fotometre: Testte kullanılan tüm ekipman onaylanmış olmalıdır. Mikrotitrasyon plak yıkayıcı Mikrotitrasyon plakları için uygun fotometre, ölçüm dalga boyu 450 nm, referans dalga boyu 650 nm (uygun olduğunda 615 nm ile 690 nm arası). Uygun olan örnekler standart laboratuvar teknikleriyle elde edilmiş olan ayrı ayrı örneklerdir (insan serumları veya EDTA'lı/heparinize edilmiş/sitratlı plazma). Örnekler 2 ile 8 C'de 3 günden fazla saklanmamalıdır. Eğer örnekler daha uzun süreyle saklanacaksa dondurulmalıdır. Örnek seyreltme (RF Absorpsiyonu dahil) Tüm test örneklerini 1+100, Örnek Tamponu (Anti-HBc/IgM) ile, örn. 10 µl örnek µl Örnek Tamponu (Anti-HBc/IgM) ile seyreltin. 2 ile 8 C'de saklandığında, seyreltilmiş örnekler 24 saate kadar kullanılabilir. Otomatik Çalışılmayan Test Prosedürü 1. Test şeması: Gereken test plağı kuyucuk sayısı, örnek sayısı alınarak ve Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif ve negatif tayini sayısı (n = 6) eklenerek belirlenir. 2. Örnekleri dağıtın: İlk 4 kuyucuğun (A1 - D1) her birine 10 µl Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif, sonraki kuyucuğa (E1) 10 µl Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu ve sonraki kuyucukların her birine 10 µl seyreltilmiş örnek dağıtın. Serinin sonunda, test plağı sırasına göre, son kuyucuğu 10 µl Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif ile doldurun. Her örnek, kendi pipet ucuyla pipetlenmelidir. Pipetleme adımları test plağı başına 15 dakika içinde gerçekleştirilmelidir. Bir 8 kanallı pipet seyreltilmiş örneklerin test plağına transferini kolaylaştırabilir ve hızlandırabilir. Dağıtma adımlarını tamamladıktan sonra, test plağını folyo ile kapatın. 3. Örnekleri inkübe edin: İnkübasyonu en az 15 dakika ( 30 dakika) süreyle 18 ile 25 C'de yapın. 4. Konjugatı dağıtın: Folyoyu çıkartın. Kuyucukları yıkamadan, her kuyucuğa 100 µl Konjugat Çalışma Solüsyonu ekleyin. Ardından test plağını kullanılmamış bir folyo ile kapatın ve derhal inkübatöre yerleştirin. 4/ OWSEG13C48 Rev. 03 TR

5 5. Konjugatı inkübe edin: İnkübasyonu 60 ±2 dakika süreyle 37 ±1 C'de yapın, ardından derhal yıkama adımına geçin. 6. Yıkama: Folyoyu çıkartın ve tüm hazneleri emdirin. Her hazneye yaklaşık 300 µl seyreltilmiş Yıkama Solüsyonu POD doldurun, plakayı emdirin ve yıkamayı üç kez tekrarlayın. Yıkama işlemi tamamlandıktan sonra, aspirasyonun etkinliğini kontrol edin ve bir sonraki reaktifin dağıtılması adımına geçin (aksi takdirde kuyucuklar kuruyabilir). 7. Substratın dağıtılması: Her kuyucuğa 100 µl Kromojen Çalışma Solüsyonu pipetleyin ve mikrotitrasyon plağını yeni folyo ile kapatın. 8. Substratın inkübasyonu: Substrat ekleme adımından hemen sonra 18 ile 25 C'de ışıktan koruyarak 30 ±2 dakika inkübe edin. 9. Reaksiyonun durdurulması: Folyoyu çıkartın ve substratın dağıtılması adımındaki ile aynı zamanlamayla kuyucukların her birine 100 µl Durdurma Solüsyonu POD ilave edin. 10. Okuma: Test plağını bir saat içinde 450 nm de okuyun. Önerilen referans dalga boyu 650 nm'dir veya gerekli durumlarda 615 ve 690 nm arasıdır. BEP III Sistemi için prosedür BEP III kullanılırken test plakları örnek dağıtma adımına kadar hazırlanmalıdır ( Otomatik Çalışılmayan Test Prosedürü bölümünde adım 1 ile 2 arası). Kısmen yüklü test plaklarının en az yarı plağa kadar suyla doldurulmuş stripler (6 test stribi) ile desteklenmesini sağlayın. Hemen ardından açık test plaklarını, yani folyo ile kapatılmamış olanları BEP III içine yerleştirin. Takip eden tüm işlem adımları analiz cihazı tarafından otomatik olarak gerçekleştirilir (bkz. BEP III Kullanım kılavuzu). BEP III yazılımındaki inkübasyon süresi ayarları ve reaktif hacimleri Otomatik Çalışılmayan Test Prosedürü bölümünde tarif edilen sürelerden teknik nedenlerden dolayı farklı olabilir (sistem hızı), ancak bunlar BEP III üzerinde Enzygnost için doğrulanmıştır. BEP 2000 Sistemi için prosedür Örnek dağıtma adımları ve bunu takip eden işlemler analiz cihazı tarafından tamamen otomatik olarak yapılır (bkz. BEP 2000 Kullanım Kılavuzu). Kısmen yüklü test plaklarının en az yarı plağa kadar suyla doldurulmuş stripler (6 test stribi) ile desteklenmesini sağlayın. Örneklerin BEP 2000 Sistemi ile çalışılması Otomatik Çalışılmayan Test Prosedürü altında verilen bilgiden farklı olabilir, ancak BEP 2000 Sistemi üzerinde Enzygnost için doğrulanmıştır. Kalite Kontrolünün Yapılması Doğrulama kriterleri Testin değerlendirilmesi için aşağıdaki kriterler karşılanmış olmalıdır: 1. Anti-HBC/IgM Kontrol Serumu, negatif: -0,010 A 0,1 2. Anti-HBC/IgM Kontrol Serumu, pozitif: A 0,7 Dört Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, negatif absorbans değerlerinden biri tanımlamaların dışındaysa bu değer yok sayılabilir. Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif absorbans değerlerinin tümü tanımlamalarla uyumlu olmalıdır. Bu şartlar karşılanmadığı takdirde ilgili test değerlendirme için geçerli değildir. Bu durumda, BEP III ve BEP 2000 yazılımı geçersiz test sonucu uyarısı verir. Geçersiz işleme yol açan nedenler araştırıldıktan sonra test tekrar edilmelidir. Sonuçlar Değerlendirmeler BEP III, BEP 2000 Sistemleri ile otomatik olarak gerçekleştirilir. Lütfen ilgili Kullanım Kılavuzuna başvurun. Yazılım desteği olmadan değerlendirme işlemi yapılmaktaysa, aşağıda belirtilen noktalar dikkate alınmalıdır. OWSEG13C48 Rev. 03 TR /10

6 Cut-off değeri kullanarak değerlendirme Cut off değerini hesaplamak için, Anti-HBc/IgM Kontrol Serumunun (negatif) geçerli absorbans değerlerinin ortalamasını kullanın ve 0,07 değerini ekleyin: Ā neg. + 0,07 = Cut off değeri Cut-off değerine dayanarak örnekler aşağıda belirtildiği gibi sınıflandırılmıştır: Anti-HBc/IgM negatif A < cut-off değeri - %10 Anti- HBc/IgM pozitif A > cut-off değeri + %10 Anti- HBc/IgM şüpheli cut-off değeri -%10 A cut-off değeri + %10 Şüpheli bir sonuç elde edilirse, örnek yeniden test edilmelidir. Yeniden test sonrası, örneklerin pozitif veya negatif olarak sınıflandırılması hala mümkün değilse, sonuç şüpheli olarak değerlendirilir. Prosedürün Sınırlamaları 1. Antikoagülanlar (sitrat, EDTA, heparin) test sonuçlarını etkilemez. 2. Lipemik, hemolitik veya ikterik örnekler test sonucunu etkilemez 3. İzole nadir durumlarda, yüksek anti-hbc seviyelerine eşlik eden romatoid faktörleri yüksek seviyelerde olan örnekler, yükseltilmiş sinyallere neden olabilir. 4. CMV, HAV, HIV, HCV, rubella virüsüne karşı antikorlar içeren örnekler ve anti-hbs için pozitif olan örnekler test sonuçlarını etkilemez. 5. Artmış transaminaz değerleri olan hastalara ait örnekler ve otoantikorlar (RF dışında, bkz. 3) içeren örneklerin test sonucunu etkilediği belirlenmemiştir. 6. EBV'ye karşı antikorlar içeren örnekler ve hemodiyaliz hastalarından elde edilen örnekler yüksek reaktivite sergileyebilir. 7. Yetersiz şekilde koagüle olmuş serumlar ve mikrobiyolojik olarak kontamine olmuş örnekler kullanılmamalıdır. Partikül niteliğindeki tüm bileşenler (örneğin fibrin pıhtıları) test öncesinde örnekten çıkarılmalıdır. 8. Sodyum azit içeren örnekler kullanılmamalıdır. 9. Eritilmiş örnekler kullanılırken materyalin iyice homojen hale geldiğinden emin olun. 10. İnkübasyon evresinde test plağı titreşimden korunmalıdır. İnkübatör olarak su banyosu kullanılıyorsa, sağlam bir yüzdürme yardımcısı veya sirkülasyonsuz bir su banyosu kullanılmalıdır. Plağın kuyucukları, ısısı termostatla kontrol altında tutulan suyla temas halinde olmalıdır. Suyun mikrobiyal kontaminasyonunu önlemek için stabilizörler kullanıldığı takdirde, bu gibi bir kontaminasyon spesifik olmayan reaksiyonlara neden olabileceğinden, test plağının yüzeyinin ya da yuvaların sıvıyla temas etmemesi için dikkat edilmelidir. 11. Reaksiyonun durdurulması sırasında, yüksek düzeyde reaktif örneklerde boya çökelebilir. Bu durum fotometrik değerlendirmeyi etkilemez. 12. Kontrol serumları, doğal insan serumundan hazırlanmıştır. Bu nedenle bulanıklık meydana gelebilir, ancak bunun test sonucu üzerinde hiçbir etkisi yoktur. 13. Ürün performansını optimize etmek ve ürün özelliklerini karşılamak amacıyla Siemens Healthcare Diagnostics çeşitli analizörlerde bu reaktiflerin kullanımını onaylamıştır. Kullanıcı tarafından belirlenen değişiklikler sistem performansını ve test sonuçlarını etkileyebileceği için Siemens tarafından desteklenmemektedir. Reaktiflerin Siemens Uygulama Kitapçıklarında veya prospektüslerde belirtilenler dışındaki analizörlerde kullanımı veya kullanım talimatlarında yapılan değişikliklerin geçerliliği kullanıcı tarafından onaylanmalıdır. 14. Bu testin sonucu her zaman hastanın tıbbi geçmişi, klinik durumu ve diğer bulgularla birlikte yorumlanmalıdır. 6/ OWSEG13C48 Rev. 03 TR

7 Performans Özellikleri Hassasiyet ve Özgüllük Testin hassasiyetini belirlemek için, toplam 192 anti-hbc/igm pozitif örnek incelenmiştir. Test edilen tüm örnekler, Enzygnost Anti-HBc/IgM test kriterleri tarafından tanımlandığı gibi pozitif olarak saptanmıştır. Yine de olasılık, test geniş bir ölçekte kullanıldığında tekli örneklerin taramadan kaçamayacaklarına dair bir kural oluşturulamaz. Örnek paneli Örnek sayısı ilk reaktif yeniden test reaktifi akut HBV enfeksiyonu * * yeniden test gerekli değildir Özgüllüğü belirlemek için, toplam 2559 anti-hbc/igm negatif örnek incelenmiş ve özgüllük %99,60 ila %99,91 arasında (ilk test) ve %99,91 ila %100 (tekrar test sonucu) arasında bulunmuştur. Örnek popülasyonu, test prosedürü ve diğer faktörler ile ilgili Ortak Teknik Tanımlamalar (CTS) ile uyumlu olması gereken farklı değerler elde edilebilir. Mevcut bilgiler, tıpkı negatif test sonucunun kesin bir şekilde HBV enfeksiyonu varlığını hariç tutmadığı gibi, pozitif anti-hbc/igm test sonucunun da HBV enfeksiyonuna dair kesin bir bulgu sağlamadığını göstermektedir. İki bağımsız merkezde gerçekleştirilmiş özgüllük çalışmaları (W, R) aşağıdaki verileri vermiştir: Örnek paneli Örnek sayısı İlk reaktif Yeniden test reaktifi W normal negatif serum örnekleri W normal negatif plazma örnekleri R hasta paneli Hassasiyet Test içi ve test arası yeniden üretilebilirlik sonuçları aşağıdaki tablolarda özetlenmektedir. Testler arası varyasyonun katsayılarını (CV) tespit etmek için örnekler 20 katlı determinasyonlarla (FP 2, n=18) test edilmiştir. Örnek Ortalama absorbans Test içi CV (%) FP 1 0,236 4,3 FP 2 0,182 6,8 FP 3 0,155 6,3 FP 4 0,159 5,7 Testler arası varyasyonun katsayılarını (CV) tespit etmek için örnekler 5 bağımsız çalışmada üç tekrar halinde test edilmiştir. Örnek Ortalama absorbans Testler arası CV (%) FP 1 0,158 10,9 FP 2 0,113 5,9 FP 3 0,125 5,8 FP 4 0,104 16,9 Not Testlerin belirli performans özellikleri için belirtilen değerler tipik sonuçları gösterir ve Enzygnost Anti-HBc/IgM özellikleri olarak düşünülmemelidir. OWSEG13C48 Rev. 03 TR /10

8 Bibliyografya 1. Frösner G. Viral hepatitis. In: Thomas L, ed. Clinical Laboratory Diagnostics, Frankfurt/Main: TH Books, 1998: Simgelerin Tanımı Tekrar kullanmayınız YYYY-MM-DD Son kullanma tarihi LOT Lot Numarası REF Katalog Numarası Dikkat, ekteki dokümanlara başvurunuz Üretici EC REP Avrupa Birliği Yetkili Temsilcisi <n> sayıda test için yeterlidir Biyolojik Tehlikeler IVD In Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz Saklama derecesi Kullanım talimatlarına başvurunuz Steril değil CE İşareti CONTENTS İçindekiler Sulandırma hacmi LEVEL Seviye Isı ve güneş ışığından uzak tutun BEP, BEP 2000 Advance ve Enzygnost, Siemens Healthcare Diagnostics firmasının ticari markalarıdır Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH. Tüm hakları saklıdır Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH Emil-von-Behring-Str Marburg/Germany 8/ OWSEG13C48 Rev. 03 TR

9 Tablo 1 Stabilite ve Saklama Materyal/reaktif Durum Saklama Stabilite b Enzygnost Anti-HBc/IgM test plağı, kalan stripler açıldıktan sonra 2 8 C Kurutucu madde içeren torbada 6 hafta HBcAg/POD Konjugat açıldıktan sonra 2 8 C 4 hafta 1+10 seyreltilmiş 2 8 C 4 hafta C 1 hafta Konjugat Tamponu (Anti-HBc/IgM) Örnek Tampon (Anti-HBc/IgM) Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, pozitif Anti-HBc/IgM Kontrol Serumu, negatif açıldıktan sonra 2 8 C 4 hafta açıldıktan sonra 2 8 C 4 hafta açıldıktan sonra 2 8 C 4 hafta Kromojen TMB açıldıktan sonra 2 8 C son kullanma tarihi Tampon/Substrat TMB açıldıktan sonra 2 8 C son kullanma tarihi Kromojen Çalışma Solüsyonu 1+10 seyreltilmiş 2 8 C 5 gün C 8 saat Işıktan korunan kapalı kapta Yıkama Solüsyonu POD açıldıktan sonra 2 8 C son kullanma tarihi 1+19 seyreltilmiş 2 8 C 1 hafta C 1 gün Durdurma Solüsyonu POD açıldıktan sonra 2 8 C son kullanma tarihi b her komponenti en geç son kullanma tarihine kadar kullanın OWSEG13C48 Rev. 03 TR /10

10 Enzygnost Anti-HBc/IgM Tablo 2 Test prosedürü Reaktiflerin hazırlanması Transfer: 4 x 10 μl Kontrol Serumu, negatif 1 x10 μl Kontrol Serumu, pozitif her örnek dilüsyondan 10 µl (1+100) 1 x10 μl Kontrol Serumu, pozitif Plakların tamamı dolmamışsa, plağın yarısı dolu olacak şekilde su ile doldurulmuş stripler ekleyin İnkübasyon: 15 dakika ( 30 dakika) (18-25 C) 100 μl Konjugat Çalışma Solüsyonu İnkübasyon: 60 ±2 dakika (37 ±1 C) BEP 2000 tam otomatik test işleme Yıkama 4 x 100 μl Kromojen Çalışma Solüsyonu BEP III otomatik test işleme İnkübasyon (ışıktan korunarak): 30 ±2 dakika (18-25 C) 100 µl Durdurma Solüsyonu (maksimum 60 dak. sonra) Ölçüm: 450 nm ye karşı 650 nm Test sonucu 10/ OWSEG13C48 Rev. 03 TR