INNO-LIA HCV Score. Vurgulanan değişiklikleri not edin.

INNO-LIA HCV Score KOD: FRI16393 80538 INNO-LIA HCV Score 28667 v7 de 2017-12-06 p 1/14 Türkçe Üretici: Fujirebio Europe N.V. Technologiepark 6 9052 Gent Belgium Tel. +32 9 329 13 29 BTW BE 0427.550.660 RPR Gent Dağıtıcı: Fujirebio Europe N.V. Tel. +32 9 329 13 29 Fax +32 9 329 19 11 customer.support@fujirebio-europe.com Fujirebio Germany GmbH Tel. +49 511 857 3931 Fax +49 511 857 3921 germany@fujirebio-europe.com Fujirebio France SARL Tel. +33 1 69 07 48 34 Fax +33 1 69 07 45 00 france@fujirebio-europe.com 0459 Fujirebio Italia S.r.l. Tel. +39 06 965 28 700 Fax +39 06 965 28 765 italy@fujirebio-europe.com Fujirebio Iberia S.L. Tel. +34 93 270 53 00 Fax +34 93 270 53 17 spain@fujirebio-europe.com Vurgulanan değişiklikleri not edin. www.e-labeling.eu/fri16393 AVRUPA +800 135 79 135 GR 00 800 161 220 577 99 IS 800 8996 LT 880 030 728 RO 0800 895 084 SK 0800 606 287 TR 0800 142 064 866 LI +31 20 796 5692 MT +31 20 796 5693 EE 0800-0100 567 AVRUPA-dışı +31 20 794 7071 US +1 855 236 0910 CA +1 855 805 8539 AR, BR, CO, UY, AU, NZ, RU +800 135 79 135 8:00 17:00 GMT+1 M T W T F S S Fujirebio Europe N.V

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 2/14 İÇİNDEKİLER Kullanım amacı... 3 Test prensibi... 3 Reaktifler... 3 Açıklama, kullanıma hazırlık ve önerilen saklama koşulları.... 3 Gerekli ama sağlanmayan malzemeler... 4 Güvenlik ve Çevre Koşulları... 5 Örnek (toplama ve kullanma)... 6 Uyarılar ve önlemler... 6 Manual test prosedürü... 6 Yıkama talimatları... 8 İnkubasyon talimatları... 8 Otomatik test prosedürleri:... 9 Sonuçlar... 9 Okuma... 9 Onaylama... 10 Sonuçların yorumlanması... 10 Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS... 11 Prosedür sınırlamaları... 11 Test performansı... 12 Hassasiyet... 12 Özgünlük... 13 Tekrarlanabilirlik... 14 Ticari markalar... 14 Kullanılan Semboller Üretici In vitro diagnostik medikal ürün Parti kodu Katalog numarası Tarafından kullanım Kullanım talimatlarına bakın Sıcaklık sınırlaması Biyolojik riskler <n> testleri için yeterli içerik Conjugate Negative control Positive control Sample diluent Stop solution Stripler Substrat BCIP/NBT

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 3/14 Kullanım amacı Wash solution 5x Tehlike Uyarı Line ImmunoAssay INNO-LIA HCV Score, insan serumunda veya plazmada insan hepatit C virüsüne karşı antikorların tespitinde kullanılan bir Line Immuno Assay (LIA) 'dır. Anti-HCV tarama prosedürü kullanılarak reaktif olduğundan, insan serumu veya plazma numunelerinde tamamlayıcı bir test olarak kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Test prensibi INNO-LIA HCV Score, NS4A, NS4B ve NS5A bölgeleri, NS3 helicase bölgesi, E2 hypervariable (HVR) bölgesi ve çekirdek bölgesinden türetilmiş HCV antijenlerini içeren, 3. nesil bir immunoassaydir. Antijenler, plastik destekli naylon strip üzerindeki 6 ayrı çizgi olarak kaplanmıştır. Ayrıca, her stripte dört kontrol çizgisi de mevcuttur: arka plan kontrol çizgisi, ayrıcanumune ilaveli kontrol hattı olarak kullanılan 3+ pozitif kontrol (anti-human Ig), 1+ pozitif kontrol (human IgG) ve ± cut- off line (human IgG). INNO-LIA HCV Scor, enzim immunoassay ilkesine dayanan bir testtir. Test edilecek numune, test stribi ile birlikte bir olukta inkübe edilir. Numunede HCV antikorları varsa, strip üzerindeki HCV antijen çizgilerine bağlanırlar. Daha sonra, afinite-saflaştırılmış alkalin fosfataz etiketli, keçi anti-human IgG (H + L) konjügatı eklenir ve eğer önceden hazırlanmışsa, spesifik HCV antijen / antikor kompleksleri ile reaksiyona girer. Enzim substratla yapılan inkübasyon kestanemsi bir renk oluşturur; bunun yoğunluğu, herhangi bir çizgideki numuneden yakalanan HCV'ye özgü antikor miktarı ile orantılıdır (Şekil 1). Renk gelişimi, sülfirik asit eklenerek durdurulur. Reaktifler Açıklama, kullanıma hazırlık ve önerilen saklama koşulları. - Açılmış veya açılmamış tüm reaktifler, 2-8 C de saklandıkları taktirde son kullanım tarihlerine kadar stabildir. Reaktifleri dondurmayın. Kiti, son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. - Test striplerini içeren tüm reaktifler ve plastik tüpler, ambalajın dışına alınmalı ve kullanımdan önce 60 dakika boyunca oda ısısında (18-25 C) tutulmalıdır. Kullanımdan sonra tüm reaktifler ve strip tüpleri hemen buzdolabına (2-8 C) kaldırılmalıdır. - Kit reaktiflerin fiziksel görünümündeki değişiklikler, istikrarsızlık veya bozulma belirtisi olabilir. - Stripleri içeren orijinal tüpler açıldıktan sonra, kullanılmayan stripler kurutuculu orijinal tüplerinde kapalı olarak 2-8 C de saklandığı taktirde,16 hafta stabilitelerini muhafaza ederler.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 4/14 Sağlanan Reaktifler: Bileşen Miktar Ref. Açıklama Stripler 20 57329 20 INNO-LIA HIV antijeni kaplı test stripleri içerir. Sample diluent 30 ml 57304 Sodyum klorid, deterjan, bovine protein stabilizörleri ve koruyucu olarak %0.3 klorasetamid (CAA) içeren renk-kodlu (yeşil) fosfat tamponu içerir. Conjugate 45 ml 57301 Tris bufferda bovine stabilizörü, deterjan ve koruyucu olarak % 0.01 metilisotiazolon (MIT)/ % 0.1CAA içeren renk-kodlu (kırmızı) alkalin posfatazlı keçi antihuman IgG içerir. Negative control 0.12 ml 57307 Koruyucu olarak %0.01 MIT/<%0.1 CAA içeren, insan orijinli bazmatriks içerir. Positive control 0.12 ml 57308 Koruyucu olarak %0.01 MIT/% 0.1 CAA içeren, inaktif pozitif HCV antikorlu insan serumu içerir. Substrate BCIP/NBT 45 ml 57302 Koruyucu olarak %0.01 MIT%/0.1 CAA içeren, dimetil formamid içinde 5- bromo-4-kloro-3-indolil fosfat nitroblue tetrazolium içerir. Stop solution 45 ml 57303 0.1 mol/l sülfirik asit içerir. Wash solution 5x 45 ml 57299 Sodyum klorid, deterjan ve koruyucu olarak %0.02 bromonitro-dioksan içeren mavi renk-kodlu Tris buffer. 5x distüle su ile dilüe edillmesi gerekir. Dilüe edilen wash solution 2-8 C de saklandığında, 2 hafta stabildir. İnkubasyon tepsisi 2 - Herbiri 11 oluklu Yapıştırıcı bantlar 5 - Veri raporlama 1 - Geliştirilen striplerin saklanması için. sayfası Reading card (okuma kartı) 1 - Pozitif antijen çizgilerin tanımlanması için. Gerekli ama sağlanmayan malzemeler - Distile veya deiyonize su. - Tek kullanımlık eldiven. - 10 μl, 20-200 μl ve 200-1000 μl dağıtma kapasitesine sahip (tek kullanımlık pipet uçlu) hassas pipetler. - Orbital mikser veya çalkalayıcı (inkübasyon için talimatlara bakınız). - Vorteks mikser veya eşdeğeri. - Dereceli silindirler: 10, 25, 50, ve 100 ml. - Stripleri tutmak için cımbız. - Zamanlayıcı. - İsteğe bağlı: Sıcak hava fanı (saç kurutma makinası) veya 37 C lik kuru inkubatör. Stop solusyonu, konjugat, substrat ve yıkama solüsyonu eklemek için tek kullanımlık flakonlar tekrarlayıcı pipet. atık şişesi % 5'lik sodyum hipoklorit solüsyonu içeren vakum aspiratör.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 5/14 Güvenlik ve Çevre Koşulları Potansiyel tehlikeli bileşenler hakkında bilgi edinmek için, Güvenlik Bilgi Formuna (SDS) ve ürünün etiketine bakınız. En yeni SDS versiyonu www.fujirebioeurope.com te mevcuttur. Uyarı Tehlike Tehlike İfadeleri H317 H360D Önlem ifadeleri 2-kloroasetamid içerir H317 P261 P280 P302+P352 P333+P313 P362+P364 N,N-Dimethylformamide içerir H360D P280 P201 P308+P313 P303+P361+P353 P305+P351+P338 Allerjik deri reaksiyonuna neden olabilir. Fetüse zarar verebilir. P201 Kullanmadan önce özel talimatları edinin. P261 Dumanı/buharı/spreyi solunmaktan kaçının. P280 Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruyucusu/yüz koruyucusu kullanın. P302+P352 CİLT İLE TEMAS HALİNDE: Bol su ile yıkayın/... P303+P361+P353 Cilt temasında(veya saç): Kontamine olan tüm giysileri derhal çıkarın. Cildi su / duş ile yıkayın. P305+P351+P338 GÖZ TEMASINDA: Birkaç dakika su ile dikkatlice yıkayın. Varsa ve kolayca çıkarılabiliyorsa, kontakt lensleri çıkarın. Yıkamaya devam edin. P308+P313 Maruz kaldığınızda veya endişenlendiğinizde: Tıbbi yardım/destek alın. P333+P313 Ciltte tahriş veya kızarıklık oluşursa: Tıbbi yardım/destek alın. P362+P364 Kontamine giysileri çıkartın ve tekrar kullanmadan önce yıkayın. - Bu test, sadece eğitimli personel tarafından yapılmalıdır. - Örnekler, pozitif ve negatif kontroller her zaman potansiyel enfeksiyöz olarak ele alınmalıdır. - Pozitif Kontrol, anti-hcv ve HBsAg açısından negatif bulunmuştur. Negatif kontrol anti-hiv-1/hiv-2, anti-hcv ve HbsAg açısından negatif bulunmuştur. Hiçbir test yöntemi, kan ürünlerinin enfeksiyöz ajanlar içermediğine dair garanti vermez. Bu nedenle, tüm kan bileşenlerinin ve biyolojik materyallerin potansiyel olarak bulaşıcı olduğu düşünülmeli ve bu şekilde ele alınmalıdır. Tüm kan bileşenleri ve biyolojik materyaller, belirlenmiş emniyet prosedürlerine uygun olarak atılmalıdır. 121 C de minimum 15 dakika otoklavlanmalıdır. Tek kullanımlık malzemeleri yakın. Sıvı atığı, son konsantrasyon ±% 1 sodyum hipoklorit olacak şekilde, sodyum hipoklorit ile karıştırın. Atmadan önce bir gece bekletin. DİKKAT: Sodyum hipoklorit eklemeden önce asit içeren sıvı atığı nötralize edin.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 6/14 - Kişisel koruyucu ekipmanların kullanılması gereklidir: Tehlikeli veya bulaşıcı ajanlar ile çalışılırken, eldiven ve koruyucu gözlük kullanılmalıdır. - Atık, kurumun atık imha etme esaslarına göre işleme tabii tutulmalıdır. Ayrıca tüm federal, eyalet ve yerel çevresel düzenlemeler de dikkate alınmalıdır. - Sodyum hipoklorit içeren atık şişesi içine durdurma solüsyonu aspire etmeyin. Örnek (toplama ve kullanma) - INNO-LIA HCV Score, koagülant olarak sitrat, heparin ya da EDTA içeren tüplere alınan insan serumu ya da plazması ile çalışılmalıdır. - Saklanmadan önce, serum ya da plazma, santrifüj ile kan pıhtısından ve kan hücrelerinden ayrılmalıdır. - Örnekleri 2-8 C de saklayın. 1 haftadan uzun saklayacaksanız -20 C ya da altında dondurunuz. - Isıya maruz kalmış örnekleri kullanmayınız. - Tekraren (3 kezden fazla) dondurulup-çözülen örnekler, hatalı sonuçlara neden olabilir. Uyarılar ve önlemler - Farklı lot numaralı reaktifleri, birbirleriyle karıştırmayınız. - Donmuş reaktifler, örneğin soğutuculara yakın saklandıysa, hatalı sonuçlara neden olabilir! - Test protokolünde belirtilen gereken doğru numune hacmi ve yıkama sürelerinin kullanıldığından emin olun. - Reaktiflerin mikrobiyal kontaminasyonundan kaçının. - Kullanmadan önce, numunelerin ve kontrollerin homojen olduğundan emin olun. - Strip membranına dokunmayın. Stripleri, her zaman plastik destek ile kullanın. - Her bir numune için yeni bir pipet ucu kullanın. - Test striplerin kendi membran tarafı yukarı bakacak şekilde oluklara yerleştirildiğinden emin olun. - Tüm inkübasyon adımları, orbital sallayıcı ya da çalkalayıcı (çalkalayıcıyı sadece gece boyunca inkübasyon yapılırken kullanı) kullanılarak yapılmalıdır. Strip üzerindeki solüsyonların sallanması, tüm çizgilerin hatlarınboyanması ve maksimum hassasiyet açısından önemlidir. Çalkalama sırasında, strip yüzeyi tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Numune inkübasyonu esnasında, striplerin kurumasını önlemek amacıyla olukların üzerini yapışkan kaplayıcı ile kapatın. - Kullanılmamış ve kullanılmış(geliştirilmiş) stripleri, güçlü ışık ve ısıdan uzak tutun. - Bu kit sadece eğitimli klinik laboratuvar tecrübesi olan personel tarafından kullanılmalıdır. - Striplerin ya da olukların tekrar tekrar kullanımı hatalı sonuçlara neden olacaktır. - Kesik stripler, hatalı sonuçlara neden olur. Manual test prosedürü Teste başlamadan önce, lütfen uyarılar ve önlemler kısmını okuyun.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 7/14-16 saatlik örnek inkubasyonu 1. Gereken miktarda test oluğu alın. 2. Her test çalışmasında, dahili kontrolü sağlamak amacıyla bir pozitif ve bir negatif kontrol de testedahil edilmelidir. 3. Numune ve kontroller için test oluklarını belirleyin ve tepsiye yerleştirin. 4. Hasta veya kontrol numunesinin, diğer kuyulcukların üzerine sıçramadığından/dökülmediğinden emin olun. Çapraz-kontaminasyondan kaçınmak için tüm manuel test prosedürü boyunca, hasta veya kontrol numunesi ve reaktifleri dikkatlice ekleyin. 5. Her test oluğuna 1mL sample diluent pipetleyin. 6. Uygun şekilde etiketlenmiş olukların, yaklaşık 10μL uygun numune veya kontrol pipetleyin. 7. Gerekli miktarda test stribini kapşarından çıkartın ve her bir test oluğuna bir strip koyun. Test stribi cımbız yardımıyla oluğun içine yukarı doğru membran tarafına yerleştirilir. STRİPLER TAMAMEN BATMIŞ OLMALIDIR. 8. Olukları yapışkan kaplayıcı ile kaplayın (Açıklamalar ve Önlemlere bakınız). Numuneleri sallanan platforma ya da çalkalayıcı tepsiye yerleştirip (İnkübasyon Talimatlarına bakın) ve oda ısısında (18-25 C) GECEBOYU (16 ± 2 saat) çalkalayarak inkübe edin. Not: Çapraz kontaminasyonu önlemek için, yapışkan kaplayıcıyı dikkatlice çıkarın. 9. Her stribi 3 kez (5 dak.) 1 ml wash solution ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 10. Her test oluğuna 1 ml conjugate solution ekleyin. 11. Test tepsisini sallanan platform ya da çalkalayıcı üzerinde konjugat ile birlikte, 30 dakika oda ısısında (18-25 C) çalkalayarak inkübe edin. 12. Her stribi 3 kez (5 dak.) 1 ml wash solution ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 13. Her test oluğuna 1 ml substrate solution ekleyin. 14. Test tepsisini sallanan platform ya da çalkalayıcı üzerinde substrate ile birlikte, 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallayarak inkübe edin. 15. Sıvıyı aspire edin. Her test oluğuna 1 ml stop solution ekleyin. 16. Test tepsisini çalkalayıcı ya da sallanan platform üzerinde stop solution ile 10-30 dakika oda ısısında (18-25 C) çalkalayarak inkübe edin. 17. Stop solution aspire edin. 18. Stripleri cımbız yardımı ile oluklardan alın ve kurutma kağıdı üzerine membran tarafı yukarı bakacak şekilde koyun. Stripler tamamen kuruduktan kısa bir süre sonra sonuçlar yorumlanabilir. Kuruma aşamasını hızlandırmak için, stripleri 37 C de 30 dakika kuru inkübatöre koyun ya da 1 dakika sıcak hava fanı ile kurutun. Çalışılan stripler karanlıkta saklanırsa renklerini korurlar. - 2 ve 3 saatlik numune inkubasyonu "2 ve 3 saatlik numune inkübasyon " protokolü, "16 saatlik numune inkübasyonu " test prosedüründeki 18 adımla aynıdır, fakat 6-8-9 ve 12. adımlarında değişiklik gösterir.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 8/14 Numuneler ve kontroller için numune hacmi 10 ila 20 μl'ye (adım 6) kadar artar ve numune inkübasyon süresi 2 ila 3 saat (adım 8) değişir. Numune inkubasyonundan sonraki yıkama, 2 saatlik prosedür için 3 kez 10 dakika, 3 saatlik prosedür için 3 kez 6 dakika arasında değişir (adım 9); son olarak ikinci yıkama 2 ve 3 saatlik numune inkubasyonu için (adım 12) 3 kez 3 dakikadır. Vurgulanmış farklılıklarla birlikte özet test prosedürleri (kalın), aşağıdaki tabloda verilmiştir: 16 saatlik numune inkubasyonu 2 saatlik numune inkubasyonu 3 saatlik numune inkubasyonu Sample diluent 1 ml 1 ml 1 ml Numune 10 µl 20 µl 20 µl Kontroller 10 µl 20 µl 20 µl LIA test stripleri 16 saatlik ± 2 saatlik 2 saat 3 saat Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 10 min 1 ml/3 x 6 min RTU* conjugate 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 3 min 1 ml/3 x 3 min RTU* substrate 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Stop solution 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min *RTU = Kullanıma hazırdır Yıkama talimatları - Bir geceden sonra, 2 ve 3 saatlik inkübasyonda, yapışkan plaka yapıştırıcıyı dikkatlice çıkarın. - Sıvılar oluklardan pipet ile aspire edilir, tercihen atık şişesinde % 5 sodyum hipoklorit içeren vakum aspiratorü kullanılabilir. Tepsi, tüm sıvının oluğun bir tarafına (her bir stribin kaplı olmayan plastik destek bölümüne) akmasına izin verecek bir açıda tutulur. - Herbir oluğa 1 ml dilüe edilmiş wash solution ekleyin, sallanan platformda ya da çalkalayıcıda sallayın. Çalkalama süresi test prosedüründe gösterilmektedir. - Bu adımları, test prosedürü kısmında belirtildiği kadar tekrar edin. NOT: Yıkama adımları arasında striplerin kurumasına izin vermeyin. Aspirasyon esnasında, test striplerin yüzeylerinin tahrip olmadığından emin olun. Çapraz-kontaminasyonu önlemek için, dezenfektan kaplı temiz bir aspirasyon cihazı kullanın. Yıkama sırasında stripin wash solution içerisine tamamen batmış olduğundan emin olun. Gerekirse sallanan platform ya da çalkalayıcı kullanın. Wash solutionun oluk kenarlarından sıçramasını önleyin. İnkubasyon talimatları - Tüm inkübasyon adımları (numune, conjugate, substrate, ve stop solution inkübasyonu) ve ayrıca yıkama adımları bir çalkalayıcı veya sallanan platform üzerinde gerçekleştirilmelidir (çalkalayıcıyı sadece gece boyunca yapılan numune inkübasyonunda kullanın). - İnkübasyon ve yıkama adımlarında, strip yüzeyi membran tarafı yukarı bakacak şekilde tamamen sıvı içinde olmalıdır.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 9/14 - Çalkalayıcı veya sallanan platform, oluklardaki striplerin karşılıklı hareket etmesine ve olukların üzerindeki sıvının striplerin üzerindeki sıvıya sıçramadan,striplerin hareke etmesine olanak sağlamalıdır. - Orbital veya ileri geri sallanan çalkalayıcı veya sallama platformu tarafından oluşturulan hız, çizgilerin boyanması ve maksimum hassasiyetin elde edilmesi açısından kritik önem taşır. Orbital çalkalayıcı için öneriler: Dairesel hareket çapı, 13 mm 'ye eşit ya da daha üst olmalıdır 13 mm dairesel hareket için önerilen hız, 160 rpm dir. 24 mm dairesel hareket için önerilen hız, 90 rpm dir. Çalkalayıcı için öneriler: 9 civarındaki açılarlardaki çalkalama için hız, 34 rpm dir. Otomatik test prosedürleri: Dökümanlar ve ilişkili protokoller Fujirebio Avrupa N.V. den edinilebilir (Bkz. www.fujirebio-europe.com/automation). Sonuçlar Okuma Strip üzerine kaplanmış olan antijenlerin ve kontrollerin tanımları ve yerleri aşağıdaki gibidir: Şekil 1: INNO-LIA HCV Score test stribi

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 10/14 Her bir stripteki kontrol çizgilerinin üzerindeki reaksiyon şiddeti, stripteki her bir antijen için reaktivite oranlarını belirlemek için kullanılır: Antijen çizgi reaksiyonunun şiddeti(r) Değerlendirme ±değerin altında R < ± - Eşittir ± R = ± ± ± daha yüksek, ama 1+ e eşit ya dadaha ± < R 1. düşüktür 1+ Den daha yüksek ama 3+ ten daha 1+ < R < 3+ 2. düşük Eşittir 3+ R = 3+ 3. Daha yüksek 3+ R > 3+ 4. Reaktivite derecesi her bir strip için ayrı ayrı yapılmalıdır. Doğru yorumlanma için okuma kartını kullanın. Çizgilerin tanımlanması, geliştirilmiş strip üzerindeki 3+ kontrol çizgisinin, okuma kartındaki ilgili 3+ kontrol çizgisi ile hizalanmasıyla elde edilir. Onaylama Test sonuçlarını okumadan önce, her şerit üzerindeki kontrol seviyelerinin geçerliliği kontrol edilmelidir ve aşağıdaki kriterleri yerine getirmelidir. Tek stribin onaylanması: 1. Kontrol seviyeleri 1+ ve ±, bunlat-rın yanı sıra güçlü pozitif kontrol seviyesi 3+ görünür olmalıdır. 2. Kontrol seviyesi 3+'ün şiddeti, 1+ seviyesindeki yoğunluktan daha büyük olmalı ve 1+ seviyesinin şiddeti, ± seviyesinin yoğunluğundan daha büyük olmalıdır. 3. Arkaplan kontrol çizgisi negatif değerlendirmeye sahip olmalıdır. Pozitif ve negatif kontrol test edildiğinde, test sonuçlarını okumadan önce pozitif ve negatif kontrol striplerinin geçerliliği kontrol edilmeli ve aşağıdaki kriterleri karşılamalıdır. 1. Pozitif kontrol stribinin C1, C2, NS3 ve NS4 antijen çizgisi üzerinde, en az 1+ bir reaksiyon görülmelidir. E2 ve NS5 antijen çizgisi negatif görülebilir. 2. Negatif kontrol strib, negatif bir derece göstermelidir (hiç reaksiyon yok veya en azından tüm HCV antijen çizgileri için, kontrol ± seviyesinden daha düşük). NOT: Stop solution eklendikten sonra görünür bantların görünmesi nedeniyle, yanlış yorumlanmamak için strip tamamen kurutulmalıdır. Islak oldukları sürece striplerin üstüne kağıt koymayın. Zayıf kontrol bantları, yüksek IgG seviyeleri (normal IgG aralığının üstünde) içeren numuneler için gözlemlenebilir. Beklenmedik sonuçlar veya test prosedürdeki olası bir hatadan şüphelendiğinde, test tekrarlanmalı ve, pozitif ve negatif kontrol yeni bir test çalışmasına dahil edilmelidir. Sonuçların yorumlanması Kapsamlı değerlendirmeler sonucun aşağıdaki gibi yorumlanabileceğini göstermiştir: HCV antikorları açısından aşağıdaki durumlarda, numune NEGATİF'tir: - tüm HCV antijen hatlarının negatif reaktiflik derecesine sahipse,

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 11/14 - NS3 için reaktivite gözlemlenmesi dışında, sadece bir HCV antijen çizgisi ± reaktiviteye sahipse. HCV antikorları açısından aşağıdaki durumlarda, numune POZİTİF tir: - eğer en az iki HCV antijen çizgisi ± minimum ya da daha yüksek aktiviteye sahip ise. HCV antikorları açısından aşağıdaki durumlarda, numune ŞÜPHELİ olarak değerlendirilir: - eğer bir HCV antijen çizgisi 1+ ya da daha yüksek rekativite derecesine sahip ise - eğer NS3 çizgisi ± ya da daha fazla reaktiviteye sahip ve tüm diğer antijen çizgileri negatif ise. Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS software LIA sonuçlarının yorumlanmasına yardımcı olması için tasarlanmıştır. En son güncellenen versiyonu edinmek için, lütfen yerel distribütörünüz ile temasa geçin. Uyarı: Otomatik yorumlamayı, aşağıda belirtilen prosedürün sınırlamalarını hesaba katmadan kullanmayın. Prosedür sınırlamaları - Tahlilin optimal performansını elde etmek için, mutlaka verilen protokol takip edilmelidir. - NS3 te tek bir ± veya daha yüksek reaktiviteli numuneler, HCV serokonversiyonun işareti olabilir. Bunlar şüpheli olarak belirtilmelidir. - ŞÜPHELİ bir sonuç elde edilirse, birkaç hafta sonra ilave bir hasta örneğini test etmeniz önerilir. - Arkaplan kontrol çizgisi üstünde pozitif reaksiyon veren bir numune diğer HIV antijen çizgileriyle çapraz-reaksiyonlar verebilir ve HCV antikorları için pozitif olarak saptanamayabilir. - Reaksiyonun takip eden antijen çizgilerinde görüldüğü durumda (arka plan kontrol çizgisindeki reaksiyona bakılmaksızın): C1, C2, E2, NS4 ve NS5, bazı tip antistreptavidin antikorları ile spesifik reaktivite olabillir. Bu nedenle strip GEÇERSİZ olarak yorumlanmalıdır. Diğer test yöntemleriyle ek test yapılması önerilir. - Erken enfeksiyonlarda, HCV için antikor seviyesi belirlenemeyebilir. - Hemodiyalizli antkorlar tespit edilemeyebilir. - Dilüe edilmiş numunelerin, kullanılması hatalı sonuçlara neden olabilir. - Karaciğer hasarını ve HCV RNA pozitifliğini değerlendirmede kullanılan parametreler, tedavi veya invaziv prosedürlerine başlamadan önce, HCV antikoru pozitif olan kişilerde çok daha fazla araştırılmalıdır. - Strip genelinde bazı hasta örnekleri tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite Bazı hasta numuneleri, strip boyunca tüm antijen hatlarında (bazı durumlarda, arka plan kontrol çizgisi ile kombinasyon halinde) eşit bir reaktivite (bufferlinesı olarak adlandırılan) gösterebilir. Bu reaktiviteler cut-off seviyesi civarında aynı yoğunluğa sahip olduğunda, sonuçlar aşağıdaki gibi yorumlanmalıdır: Cut-off seviyesi (± derece) ile 1+ derecelendirmesi arasındaki tüm antijen hatlarında (bazı durumlarda arka plan kontrol hattı ile kombine halde) eşit

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 12/14 olmayan reaktiviteler GEÇERSİZ olarak kabul edilir ve diğer test yöntemleriyle ek testler yapılması önerilir. Cut-off seviyesinin (± değerlendirme) altındaki tüm antijen çizgilerinde görülen eşit reaktivite, arka plan kontrol çizgisinin reaktivitesinin cut-off seviyesinin altında olması koşuluyla, NEGATİF olarak kabul edilir. 1+ seviyesinden daha yüksek tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite, arkaplan kontrol çizgisi reaktivitesinin cutoff seviyesi altında olması şartıyla, POZİTİF olarak kabul edilir. Test performansı Hassasiyet Serokonversiyon panelleri/düşük-titre panelleri Auto-LIA 2-saat örnek inkübasyon prosedürü ve manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak INNO-LIA HCV Score sonuçları 13 BBI serokonversiyon paneli (PHV 904 till 916), 2 BBI düşük titre paneli (PHV103 and 204) ve SFTS94 paneli üzerinde gözlemlenmiştir. 13 serokonversiyon paneli, negatif kanama ile başlayan ve dar kanama aralıklarına sahipti. Bu sonuçlar CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA ve INNO- LIA HCV Ab III update sonuçları ile karşılaştırılmıştır. (Tablo 1 ve 2) Tablo 1: BBI serokonversiyon panellerin genel sonuçları Tahlil INNO-LIA HCV Score (2 saatlik Auto-LIA prosedürü)* INNO-LIA HCV Score (16 saatlik manuel prosedürü)* Chiron RIBA HCV 3.0 SIA'ya yönelik saptayıcı serokonversiyon panelleri Daha erken Eşit Tablo 2: BBI düsük titreli panellerinin ve SFTS94 panelinin genel sonuçları Daha geç Negatif kalan 7 4 1 1 7 4 1 1 Tespit edilen pozitif numune/panel sayısı Tahlil PHV 103 PHV 204 SFTS 94 INNO-LIA HCV Score (2 saatlik Auto-LIA prosedürü)* INNO-LIA HCV Score (16 saatlik manuel prosedürü)* 10 18 38 12 20 41 CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA 12 23 31 HIV-pozitif numuneler HCV ile enfekte olan hastalardan gelen ve 2 tarama testinde pozitif tespit edilmiş toplam 257 numune, INTO-LIA HCV Skorunda Auto-LIA 2 -saat'lik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak dahili olarak analiz edilmiştir. Şüpheli olan bir numune hariç, diğer tüm numuneler pozitif olarak değerlendirilmiştir. Ayrıca, INNO-LIA HCV Scor ile Auto-LIA 2 saatlik numune inkübasyon prosedürü, genotiplenmiş 109 HCV numunesi üzerinde dahili olarak gerçekleştirilmiştir. Tüm major HCV genotipleri, numune setinde kaplsnmıştır(tablo 3).

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 13/14 Tablo 3. Test edilen HCV-pozitif numunelerin genotip dağılımı. Test edilen numunelerin genotipleri Test edilen numune sayısı 1 30 1a 15 1b 15 2 21 3a 21 4 21 4 1 4a 15 4 non-a 5 5 6 6 10 Toplam 109 109 pozitif numunenin tamamı, pozitif sonuç verdi. Toplamda, tek belirsiz sonuç dahil edildiğinde (366/366;% 95 CI [% 99.0;% 100.0]) % 100hassasiyet elde edilmiştir. Özgünlük Kan donörleri HCV antikorları için negatif olarak bulunan toplamda 400 kan donörü, manuel 16- saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak dahili olarak analiz edilmiştir. İlk testten sonra 377 numune negatif, 22 numune şüpheli, bir örnek pozitif sonuç vermiş ve başlangıç özgünlüğü % 94.3 (377/400;% 95 CI [% 91.5;% 96.1])olarak elde edilmiştir. Başlangıçta pozitif çıkan numuneler tekrar çalışıldığında negatif olarak bulunmuştur, tekrar testinden sonraki özgünlük 94.5% (378/400; 95% CI [91.8%; 96.3%]) idi. Klinik numuneler Manual 16- saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak 206 klinik numune test edilmiştir. Yüz seksen dokuzu negatif, 11 tanesi belirsiz, 5 tanesi pozitifti. Bu 5 numuneden üçü,tekrarlanan testten sonra negatif sonuç verdi. Diğer 2 numuneden biri, tekrarlanan test sonrasında pozitif, diğer numune ise şüpheli sonuç verdi. Her iki numune de, Enhanced SAVe ile Ortho HCV 3.0 ELISA ve INNOTEST HCV Ab IV 'de çalışıldığında, negatif bulundu. Bu 2 numuneden biri CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA üzerinde test edildi ve negatif olarak bulundu. Bu numune seti için tekrarlanan testlerden sonra özgünlük% 93.7 (192/205;% 95 GA;% 89.5; % 96.3]) idi. Etkileşim vermesi olası numuneler Yüz otuz yedi potansiyel olarak etkileşebilecek numune, manuel 16 saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak, dahili olarak test edildi. Yüz yirmi yedi numune negatif, 9 tanesi şüpheli ve bir tanesi ise pozitif çıktı. Çift tekrarlanan testen sonra, bu numune sırasıyla pozitif ve şüpheli olarak değerlendirilmiştir. Bu numune Ortho HCV 3.0 ELISA withenhanced SAVe, INNOTEST HCV Ab IV vechiron RIBA HCV 3.0 SIA testlerinde negatif bulunmuştur. Bu numune setinde, % 92.7 (127/137;% 95 CI [% 87.1;% 96.0]) özgünlük elde edildi.

80538 INNO-LIA HCV Score / 28667 v7 de / KOD:FRI16393 p 14/14 Tekrarlanabilirlik İki araştırmacı, Auto-LIA 2 saatlik numune inkübasyon prosedürünü kullanarak 3 farklı lot üzerinde 13 HCV pozitif numunenin yanı sıra bir pozitif ve bir negatif kontrol panelini test etti; üçüncü bir araştırmacıise bu partilerin birinde bu paneli test etti. Farklı kit lotlarının kullanılması ve farklı kişiler tarafından performansı değerlendirilen numunelerin her biri için aynı test sonucu ile sonuçlanmıştır. Ticari markalar INNO-LIA, LiRAS ve Auto-LIA ABD ve diğer ülkelerde tescilli, Fujirebio Europe N.V. ticari markalarıdır.