INFINITI Varfarin Testi (2C9 & VKORC1 Multiplex testi)

Transkript

1 INFINITI Varfarin Testi (2C9 & Multiplex testi) Kullanım Talimatı In Vitro Diagnostik Kullanım İçin SADECE İHRACAT İÇİN Üretim Yeri: AutoGenomics, Inc., 2980 Scott Street, Vista, CA USA Yetkili AB Temsilcisi: BÜHLMANN Laboratories AG Baselstrasse 55 CH-4124, Schönenbuch, Switzerland 1 of 11

2 KULLANIM AMACI INFINITI Varfarin testi, EDTA lı tam kan örneklerinden elde edilen DNA da CYP2C19 *2 and *3 CYP2C9 genetik varyantları ve 3673 (-1639) intronik varyantlarının tesbit edilmesi ve genotipinin belirlenmesinde kullanılan in vitro diagnostik bir testtir. INFINITI Varfarin testi yetkili hekimin reçetesi üzerine klinik laboratuvarlarda kullanılan kalitatif bir denemedir. The INFINITI Varfarin testi, varfarin duyarlılığı açısından risk altındaki bireyleri tespit etmek amacıyla kullanılmaktadır. TEMEL BİLGİLER Varfarin, venöz tromboz ve pulmoner emboli, kronik atriyal fibrilasyon ve kalp kapakçığı protezi olan hastalar için yaygın olarak reçetelendirilen bir antikoagülandır. FDA'nın tahminine göreamerika Birleşik Devletleri'nde her yıl iki milyon kişi kan pıhtılaşmasından korunmak için varfarin almaktadır. (2) K vitamini alımı, hastalık, yaş, cinsiyet, eşzamanlı ilaç kullanımları, vücut yüzey alanı, ve genetik farklılıklar gibi bireysel farklılıkları hastanın varfarine yanıtını etkileyebilir. Varfarin çeşitli pıhtılaşma faktörlerinin aktivasyonunu sağlayan K vitamininin geri dönüşümüne müdahale ederek etki gösterir. Varfarinin farmakokinetik ve farmakodinamik parametrelerini etkileyen iki gen CYP2C9 (sitokrom P450 2C9) ve (K vitamini epoksit redüktaz kompleks altbirim 1)'dir. Bu iki gen; yaş, vücut yüzey alanı, ve cinsiyet gibi diğer faktörler ile birlikte,varfarine bireysel yanıtlar arası değişimi kısmen açıklamaktadır (1). Araştırmalar, varfarine yanıttaki hastalar arası değişkenliğin hastaların CYP2C9 ve 2 gen varyantlarına bağlı olabileceğini düşündürmektedir (2). CYP2C9 Varfarin, R-ve S-izomerlerin bir rasemik karışımı olarak temin edilir, S-izomeri, R-formunda 3-5 kat daha etkilidir. Oral uygulamadan sonra,serbest varfarin karaciğer tarafından alınır burada sitokrom P450 tarafından metabolize edilir. S-izomeri sitokrom P450 altfamilya IIc, polipeptid 9 protein (CYP2C9) tarafından metabolize edilir, safra ile atılır (3). CYP2C9 varyantları arasında yer alan CYP2C9 * 2 ve CYP2C9 * 3'nın azalmış enzimatik aktivitesi sergiledikleri gösterilmiştir (5,9). The *2/*2 homozygous variant leads to a reduction to approximately 12% of wild-type CYP2C9 activity and the *3/*3 homozygous variant has a <5% of wild type CYP2C9 activity (4). Retrospektif bir ilişki çalışmasında, genetik varyantlardan biri veta her ikisine sahip bireylerin bu varyasyonlar olmayan hastalara göre Varfarin için daha düşük bir idame dozu kullanmaları gerektiği bildirildi (5,7,8). Varfarinin antikoagülan aktivitesi değişik koagülasyon faktörlerinin aktivasyonu için önemli olan K vitamini epoksit redüktaz inhibisyonundan kaynaklıdır. Çalışmalar tek nükleotit polimorfizminin (SNPs) C1subunitinde K vitamini 2,3 epoksit redüktaz kompleksinin () varfarin duyarlılığı etkileyebileceğini düşündürmektedir. Polimorfizmleri kuvvetli bağlantı dengesizliği gösteren belirli polimorfizm kombinasyonları ile birlikte ile haplotip blok oluşturma eğilimindedir. Bir haplotip blok bir üyesinin belirlenmesi sıklıkla genel haplotipin öngörülmesinde kullanılabilmektedir (7). H1 ve H2 haplotipleri için ortak olan 3673 (-1639) polimorfizminin tanımlanması, varfarine bireysel cevabın öngörülmesinde faydalı olabilir. 2 of 11

3 TEST PRENSIBI /TESTE BAKIŞ INFINITI Varfarin Testi *2 VE *3 CYP4502C9 genetik varyantları ve 3673 (-1639) intronik varyantları eşzamanlı tespit etmek için tasarlanmıştır. Test protokolü 5 temel proses üzerine kuruludur: (a) İnsan kanından DNA izolasyonu (b) Saflaştırılmış DNA ın PCR amplifikasyonu (c) PCR ürünlerinin etiketlenmesi (d) Etiketli PCR ürünlerinin izotermal koşullarda microarraylerde hibridizasyonu (e) Mikroarray ın taranması (f) Sinyal tespit ve analizi [, ve 3673 (-1639) genotiplerinin tesbit edilmesi] (c) den (f) e kadar basamaklar CE onaylı INFINITI Analizörü ile otomatik yapılmaktadır. Testin şematik özeti aşağıdadır; METOD TANIMI INFINITI Varfarin denemesi, insanda tam perifer kan örneğinden elde edilen DNA dan,, ve 3673 (-1639) mutasyonlarının tesbit edilmesi ve genotiplenmesinde kullanılan AutoGenomics tescilli, film- temelli microarray teknolojisini proses otomasyonu, reaktif yönetimi ve yazılım teknolojisi ile kombinleyen in vitro diagnostik bir yöntemdir. INFINITI Varfarin denemesi, BioFilmChip Microarray, Intellipac Reaktif Modülü, ve Qmatic İşletim Yazılımı içeren INFINITI Analizörden oluşmaktadır. BioFilmChip Microarray DNA analizleri için tasarlanmış tescilli çoklu tabaka komponent ile kaplı polyester filmlerden meydana gelmiştir. Tabakalar, test performansını arttırmak için çok amaçlı bir yüzey sağlamak üzere tasarlanmıştır. Microarrayler teste spesifik olarak tasarlanmıştır. INFINITI INFINITI Varfarin testikullanılmamış Yakalama Probları içeren, herhangi spesifik bir denemesin uygulanabileceği microarray çipleri kullanmaktadır. Bu sebeple, aynı microarray kullanılarak çoklu testler geliştirilebilir. 3 of 11

4 Intellipac Reaktif Modülü, test reaktiflerinin yerleştirildiği ve bütünleşmiş hafıza çipinin bulunduğu bir iletişim hattıdır. Lot numarası, son kullanma tarihi, miktar kullanımı gibi reaktif bilgileri hafıza çipinde arşivlenmekte ve çalışma raporunda görüntülenmektedir. INFINITI Varfarin denemesi, AutoGenomics INFINITI Analizörü kullanılarak çalıştırılmalıdır. INFINITI Analizörü klinik çoklu sistemlerinde, klinik bir örnekten gelen çoklu sinyalleri ölçmek ve ayrıştırmak amacıyla kullanılan bir cihazdır. INFINITI Analizatörü işaretlenmiş hedef DNA nın BioFilmChip microarraylerde hibritleşmesiyle oluşan florasansı ölçmek üzere tasarlanmıştır. INFINITI Analizör; 2C9 ve denemelerini otomatikleştirmiş ve örneklerin(pcr ürünü) dağıtımı, reaktif yönetimi, hibridizasyon, tespit ve sonuç analizi gibi farklı proseslerin entegrasyonunu sağlamıştır. Test otomatik olarak tamamlanır ve noktalar aynı odaklı dahili bir mikroskop tarafından okunmaktadır. Sonuçlar genotip çağrıları olarak analiz edilmekte ve sunulmaktadır. INFINITI Analizörü nün kullanma talimatları, INFINITI Analizörü Kullanıcı El Kitabı nda bulunmaktadır. INFINITI Analizörü CE onaylıdır. UYARILAR VE ÖNLEMLER Gereksinimler In vitro diagnostik kullanım için. Eğitimli laboratuar personeli tarafından kullanılmalıdır. Bu test, EDTA içinde toplanan tam kan ile sadece kullanılmalıdır. Kan örneklerini dondurma/çözündürmekten kaçının. Örnekler en kısa sürede test edilmelidir. Tüm hasta numuneleri potansiyel tehlikelidir ve insan kaynaklı materyaller çok dikkatli alınmalıdır. Hiçbir test yöntemi HCV, HIV veya diğer bulaşıcı ajanların bulunmadığına dair tam bir güvence vermez. CLSI talimatlarını takip ediniz (Molecular Diagnostics Methods for Infectious Diseases; Approved Guidelines; MM3-A). Örneğin durumunu görsel olarak takip edin. Özellikle, yapısal bütünlüğünde bozulma olup olmadığına dair anormal işaretlere (buğulanma, hacimde azalma, çökelme, renk bozukluğu, sedimentasyon, ayrışma, bulanıklık) bakılmalıdır. Eğer örneklerde bir anormallik gözler veya bundan şüphelenirseniz hiçbir test çalışmayın. Kontaminasyonu, örneklerin karışmasını ve dökülmesini engellemek için çok dikkatli olunmalıdır. Örneklerin karışmasını önlemek için örnek tüpleri açık bir şekilde etiketlenmelidir. Örnekler kendi spesifik koşullarında saklanmalıdır. Çapraz kontaminasyon riskini en aza indirmek için, numune hazırlama, PCR kurma ve PCR ürün analizi gibi işlemler CLSI de onaylanan talimatlara göre yapılmalıdır (Molecular Diagnostic Methods for Genetic Diseases: Approved Guideline). Reaktifleri karıştırmayın ve farklı lotlarda biriktirmeyin. Son kullanma tarihi geçmiş kit ve reaktifleri kullanmayın. Kit ve reaktifleri ürün etiketinde belirtilen koşullarda saklayın. Laboratuar İşlemleri Laboratuar kullanımı için normal önlemleri izleyin. Güvenli laboratuar prosedürlerini izleyin: ağız ile pipetleme yapmayın; koruyucu giysiler (örneğin, tek kullanımlık eldiven, laboratuar önlüğü gibi) ve koruyucu gözlük takın; laboratuarda çalışma alanlarında yemek yemeyin, içecek ve sigara içmeyin. Numunelere ve reaktiflere dokunduktan sonra ellerinizi iyice yıkayın. Atıkların İşlenmesi Kullanılmayan reaktif, örnek ve atıkları bulunduğu ülke, federal, eyalet ve yerel yönetmeliklere göre imha edin. Malzeme Güvenlik Bilgi Formları (MSDS) AutoGenomics Müşteri Hizmetleri tarafından istek üzerine gönderilebilir. 4 of 11

5 Örnek Hazırlama Kullanılan DNA ekstraksiyon kiti ile birlikte verilen prospektüste güvenlik talimatlarına bakın. PCR ürünü mikroarray üzerine yüklemeden önce saklanamaz. Hemen kullanın. INFINITI Analizörü Cihazı kullanmadan önce INFINTI Analizör Kullanıcı El Kitabı nı okuyun. "Notlar" a özellikle dikkat edin. Operatör Manuelinde Güvenlik Uyarını ve Dikkat Edilmesi Gerekenler i izleyin. Cihazı kurarken Kurulum Gereksinimleri Bölümü ne bakın. Cihaz çalışırken hatalar karşılaşıldığında Hatalar Bölümü ne bakın. Sorunla karşılaşıldığında Yardım Bölümü ne bakın. SAKLAMA/STABILITE BioFilmChip Microarray: 12 ay Oda Sıcaklığında (15 C ila 30 C) Intellipac Reaktifi: 12 ay Buzdolabında (2 C ila 8 C) Not: Açıldıktan 30 gün sonra Intellipac kullanmayın. Amplifikasyon Mix: 18 ay Dondurucuda (-30 C ila -15 C) Not: Ürünlerin son kullanma tarihi ürün üzerindeki etiketlerde bulunmaktadır. NUMUNE TOPLAMA VE STABILITE Periferik kan EDTA lı (Mor kapak) tüpte toplanmalıdır. Örnekler dondurulup - çözülmemelidir. Örnekler mümkün olan en kısa sürede çalışılmalıdır. SAĞLANAN MATERYALLER (Her paket 48 test içermektedir.) AutoGenomics Ürün Kodu INFINITI Varfarin testi BioFilmChip Microarray Magazin. Her pakette 4 magazin mevcuttur. AutoGenomics Ürün Kodu INFINITI Varfarin testi Intellipac Reaktif Modülü Her modülde 24 test, her pakette 2 modül mevcuttur. Intellipac modülü içeriği; 1.1ml ASPE Master Mix, içeriği: dntp ler İşaretlenmiş-dCTP Allele Spesifik Primerler Ekstansiyon Tamponu 2.6ml Hibridizasyon Tamponu SSC Hibridizasyon Pozitif Kontrol Sodyum Azid koruyucu 0.08% AutoGenomics Ürün Kodu INFINITI Varfarin testi Amp Mix. Her pakette, 4 x 250μl vial PCR reaksiyonu master mix, içeriği: 5 of 11

6 dntp ler PCR Primer Mix MgCl 2 PCR Reaksiyon Tamponu Ürün Kodu : Yıkama Tamponu GEREKEN VE AUTOGENOMICS TARAFINDAN SAĞLANMAYAN REAKTİFLER DNA Ektraksiyon Kiti INFINITI Varfarin testi insan kanından başarıyla saflaştırılmış genomik DNA kullanarak,, ve 3673 ( -1639) genetik varyasyonları tespit edebilmektedir. Absorbans aralığı: nm, DNA saflığı 1.7 ile 2.0 arasında olmalıdır. Bu şartname ile uyumlu herhangi bir DNA ekstraksiyon yöntemi kullanılabilir INFINITI Varfarin testi ticari olarak mevcut çeşitli kitlerle test edilmiştir ve kullanıcılar daha fazla bilgi için AutoGenomics ile bağlantı kurulabilir. Distile su (DNAaz ve RNAaz sız) Titanyum Taq DNA Polimeraz ( Önerilen Titanyum Taq DNA Polimeraz ve sağlayıcısını öğrenmek için AutoGenemics Ürün Katalog una bakınız.) EKİPMANLAR Aşağıdaki ekipmanlar gereklidir fakat test ile beraber sağlanmamaktadır: AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI Analizatör AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI Atık treyleri AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI 24 kuyucuklu plate/lids AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI Temp Cycle Plate AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI Atık trey / Stir Bars AutoGenomics Ürün Kodu : INFINITI Pipe uçları 8-kuyucuk Düz Strip Kap (Genesee Scientific, Catalog No ) Pipet uçları Mini santrifüj Mikrofüj tüp rakları Termocycler Vortex PCR için 2.0 ml inceliğinde Wall tüpleri 1,5 ml mikro santrifüj tüpleri 24- kuyucuklu plate TEST PROSEDÜRÜ DNA Ekstraksiyonu Kullanılan DNA ekstraksiyon kiti ile birlikte verilen talimatları izleyin. 6 of 11

7 PCR Reaksiyonu AutoGenomics Not: Platin Taq DNA polimeraz buz üstünde tutunuz. Reaktifleri buzun içinde çözünüz. Amplifikasyon Mix tüpünü 2 5 sn santrifüj ediniz. Kontaminasyondan kaçınmak için taze hazırlanmış% 0.5 sodyum hipoklorit (deiyonize veya distile su ile seyreltilmiş çamaşır suyu) ile tüm çalışma yüzeyleri dezenfekte ediniz Örnekleri ve kontrolleri çalışırken değişik filtre ipuçları ve eldiven kullanılmalıdır. PCR ürünleri microarraylere yüklenmeden önce depolanamaz. Süratle kullanınız. 1.PCR Master Mix i hazırlayınız. Amplifikasyon mix Titanyum Taq Polimeraz 17.5 μl 0.5 μl PCR Master mixin toplam hacmi 18.0 μl Not: Gereken reaktif miktarını uygulanan testin sayısına göre hesaplayınız. 2. PCR maste mixi hafifçe vorteksleyiniz, 18 μl PCR master mixi 24lük kuyucuklu plate deki kuyucuklarına ekleyiniz μl örnek DNA (25 ng/μl ) ekleyiniz. PCR master mix 18.0 μl Örnek DNA 2.0 μl Amplifikasyon reaksiyonun toplam hacmi 20.0 μl kuyucuklu-plate i 8-kuyucuklu flat strip kapaklarıyla kapatın termocycler a yerleştirin ve aşağıdaki programı kullanarak amplifikasyon reaksiyonunu başlatınız. Multiplex 2 Tm PCR Koşulları Basa mak Sıcaklık C Süre Döngü Sayısı dak 1 2a 2b 2c (-0.5 C/cycle) sn 30 sn 30 sn 12x sn 30 sn 30 sn dak Bekle Not: 2b basamağındaki her döngü sonrasında sıcaklık döngü başına 0.5 C iner. Eppendorf Mastercycler EP (aluminyum blok) kullanıldığında ramp rate kurulumu %75 olduğunda total döngü için geçen zaman 1 saat 40 dak. dır. (+10 dak) Diğer Termal Cycler lar kullanıldığında eş zamanı elde edecek şekilde ramp ayarı yapınız. 30x 7 of 11

8 Örnek Yükleme Lütfen INFINITI Analizör Kullanıcı El Kitabı na bakın (Kısım kodu: EM 34000). 20 μl PCR ürününü 3x8 kuyucuklu plate e ekleyin. Test spesifik magazin, Intellipack, pipet uçları ve yıkama solüsyonlarını cihaza yükleyin. INFINITI Analizör ün İşleyişi Lütfen INFINITI Analizör Kullanıcı El Kitabı na bakın (Kısım kodu: EM 34000) KALİTE KONTROL Her testte pozitif kontrol( heterozigot ve/veya homozigot örnek) çalışılması önerilmektedir. Ek olarak, bir negatif kontrol (vahşi tip serum) ve no template kontrol(moleküler düzeyde su) her teste dahil edilmelidir. Tespit edilmiş pek çok genotip için Coriell DNA ( örnekleri uygundur. Coriell DNA nın kullanımı hakkında tavsiye almak için lütfen AutoGenomics ile irtibata geçin. Not:Termal cyclerın düzenli aralıklarla AutoGenomics 'özelliklerine göre bakımı yapılmalı ve kalibre edilmelidir. Not: Kullanılan termal cyclerlar QC gereksinimlerine uygun olarak düzenli bakımı yapılmalı ve harici sıcaklık standartlarına göre ile kalibre edilmelidir. KISITLAMALAR INFINITI Varfarin testi testinden elde edilen sonuçlar sadece genel klinik tanı bağlamında yorumlanmalıdır. AutoGenomics alınan herhangi bir klinik karardan sorumlu değildir. geninde, 3673G> A dışında ek polimorfizmlerin varlığı gözlenmiştir. Benzer şekilde, * 2 ve * 3 dışında 2C9 varyantları da gözlenmiştir. Bu test o varyasyonları bildirmez. SONUÇLARIN YORUMLANMASI INFINITI Varfarin testi denemesinden elde edilen sonuçlar örnekte tesbit edilen örneği belirtecek şekilde genotip çağrılar olarak sunulur. (, ve 3673 (-1639) için Vahşi tip, Homozigot ve Heterozigot varyantları. Test tamamlanmaz ve hiçbir genotip belirlemesi yapılamaz ise (tip yok), çalışma tekrarı gerekecektir. Hatalar test sırasında meydana gelirse rapor mesajında neden genotipleme yapılamadığını "Test Error" iletisi (örneğin, "düşük DNA")ile gösterilir. Bir Error Log dosyası sorunu tanımlamak için oluşturulur. Hatalar hakkında daha fazla bilgi için; INFINITI Analizatör Kullanıcı El Kitabı nın Arıza Teşhisi kısmına başvurunuz. Hata mesajı/probleme bağlı olarak testancak hata/problem giderildikten sonra tekrarlanmalıdır. PERFORMANS ÖZELLİKLERİ Analitik Spesifite Özgüllük ile ilgili çalışmalar analiz gelişimi sırasında yapılmıştır. PCR primer spesifitesi bir jel üzerinde amplikon boyutuna göre belirlenmiş ve amplikon sıralaması yapılmışır. ASP primer spesifisitesi bilinen genomik örnekleri kullanılarak test tarafından gönderilen doğru genotipler ile tespit edilmiştir. Prob un yakalama spesifitesi farklı oligoların hibridizasyonu ile tespit edilmiştir ve bilinen noktaya doğru oligo hibridleşmesini göstermektedir. 8 of 11

9 Tespit aralığı ( Analitik duyarlılık) AutoGenomics Bilinen saf DNA dan bir seri sulandırma (200, 100, 50, 25, 10, 1 ve 0.1 ng DNA/μl) yapılmıştır. Her sulandırılmış örnek INFINITI Varfarin testi kullanılarak üç kez çalışılmıştır. Çalışmalar INFINITI Varfarin testi için minumum DNA miktarının 1ng olduğunu göstermiştir. Önerilen DNA 25ng/µl dir. Deneme, test başına 50 ng DNA girdisi için 2μ DNA örneği önermektedir. Ek olarak, aynı çalışma göstermektedir ki, önerilen konsantrasyondan ( 50 ng) fazla DNA miktarı (100ng veya 200ng) INFINITI Varfarin testi ile interferans vermemektedir. 9 of 11

10 Yüzde Anlaşması ve Çift Yönlü Dizilemenin Karşılaştırılması Üç klinik merkezden yürütülen INFINITI Varfarin testi ile çift yönlü sıralamanın karşılaştırılması çalışması göstermektedir ki Birinci çalışmada genotiplerinin çift yönlü dizileme ile karşılaştırılması için uyum %98.0, finalde % 100 Birinci çalışmada genotiplerinin çift yönlü dizileme ile karşılaştırılması için uyum %97.3, finalde % 99.3 Birinci çalışmada 3673 (-1639) genotiplerinin çift yönlü dizileme ile karşılaştırılması için uyum %97.3, finalde % 100 Metot karşılaştırılmasının özeti Tablo 1 de görülmektedir; Genotip *1/*2 *2/*2 *1/*1 Total for *1/*3 *3/*3 *1/*1 Total for 3673 (-1639) GA 3673(-1639) AA 3673 (-1639) GG Total for 3673 (-1639) Total for Assay Tablo 1: Sequencing INFINITI Varfarin testi ile çift yönlü DNA dizilimi arasındaki uyum Test edilen örnek sayısı İlk çalışmada doğru çağrı sayısı İlk çalışmada yanlış örnek sayısı İlk çalışmada sonuçsuz çağrı sayısı İlk çalışmada uyum Tekrar çalışmasından sonra doğru çağrı sayısı Tekrar çalışmasından sonra yanlış çağrı sayısı Tekrar çalışmasından sonra sonuçsuz çağrı sayısı % % % % % % * % * % % % % % * % * 0 A re İlk INFINITI sonuçları ( için *1/*1, için *1/*3 ve 3673 için GG) çif yönlü dizilim sonuçları ( için *1/*1, için *1/*3 ve 3673 için GG) ile uyuşmamıştır. Tekrar çalışmasından da aynı sonuçlar alınmıştır. Sebebi bilinmemektedir. 10 of 11

11 Laboratuvarlar Arası Tekrarlanabilirlik INFINITI Varfarin testinin tekrarlanabilirliğini göstermek için üç konumlu bir çalışma yapılmıştır. INFINITI Varfarin testinin üç lotu kullanılmıştır. Konumlar yedi genomik DNA örneği ve bel tam kan örneği olmak üzere birbirinin aynı örneklerle çalışmıştır. Örneklerin kimlikleri gizlidir. Her konum farklı bir DNA ekstraksiyonu yöntemi kullanmıştır. Her konumda her örnek gün / kullanıcı başına ikişer defa olmak üzere altı gün çalışılmıştır. Her konum için üç kullanıcı mevcuttur. Laboratuvarlar arası tekrarlanabilirlik çalışmasının sonuçları Tablo 2 de özetlenmiştir; Genotype *1/*2 *2/*2 *1/*1 *1/*3 *3/*3 *1/*1 3673(-1639) GA Samples Tested Tests per Site Site Table 2: Inter-Laboratory Reproducibility of the INFINITI Varfarin Assay by Genotype calls # Genotype calls Correct Incorrect First Run No % Correct Correct Final (After Repeat Run) Incorrect b total b total a total Total for b total c total a b total Total for b total No % Correct 3673(-1639) AA 3673(-1639) GG Total for 3673 (-1639) * Results after one repeat of samples b total a total of 11

12 İlaç İnterferansı Bilirubin, kolesterol, ve heparinden kaynaklanabilecek olası interferans değerlendirilmesi göstermiştir ki bu içerikler 8mg/dl bilirubin, 70mg/dl kolesterol ve 133v/dl heparin konsantrasyonlarındainfiniti Varfarin Testi ile interferans vermemektedir. Örnek Taşınması 300 ng pozitif örneğin 10 ng lık ikinci bir pozitif örnek tarafından izlendiği durumda ve 300 ng pozitif örneğin templatesiz kontrol veya su tarafından izlendiği durumda örnek taşınması gözlenmemiştir. Bütün genotipler çağrıları %100 doğrudur. Test İnterferansı INFINITI Vardarin Testi ile Faktör II ve Faktör V için INFINITI Testinin aynı cihazda çalışılması sonuçları etkilememektedir. Testler birbirlerinin sonuçlarına etki etmemektedirler. REFERANSLAR 1 Wadelius M et al Pharmacogenetics of varfarin: current status and future challenges The Pharmacogenomics Journal (2007) 7, FDA Approves Updated Varfarin (Coumadin) prescribing Information FDA News, August 16, Gage B Pharmacogenetics-Based Coumarin Therapy Hematology Caldwell M et al Evaluation of Genetic factors for Varfarin Dose prediction Clinical medicine & Research (2007) Volume 5, Number 1: Cho H et al Factors affecting the interindividual variability of varfarin dose requirement in adult Korean patients Pharmacogenomics (2007) 8(40, Lee CR, Goldstein JA, Peiper JA Cytochrome P450 2C9 polymorphisms: a comprehensive review of the invitro and human data Pharmacogenetics 2002; 12: Rieder M et al Effect of Haplotypes on Transcriptional Regulation and Varfarin Dose The New England Journal of Medicine (June 2, 2005) 352;22 8 Takahashi H et al Pharmacogenetics of CYP2C9 and interindividual variability in anticoagulant response to varfarin The Pharmacogenomics Journal (2003) 3, Takahashi H et al Different contributions of polymorphisms in and CYP2C9 to intra- and interpopulation differences in maintenance dose of varfarin in Japanese, Caucasians and African-Americans Pharmacogenetics and Genomics 2006, Vol 16 No 2 12 of 11