KHDAK hastalarının Moleküler Patoloji raporunda neler olmalı? Tibbi Onkoloji kongresi 19-23 Mart 2014 Dr Büge Öz İÜ, Cerrahpaşa Tıp Fakültesi Patoloji AD
Hiçbir çıkar ilişkim yoktur.
Recommended procedure for the histological examination of lung cancer Translated from the 2012 Czech Society of Pathology Diagnostic Guidelines for Lung Cancer, prepared by: Pavel Dundr, Helena Hornychová, Radoslav Matĕj, Ales Ryška, Libor Stanĕk, Tomáš Tichy
Akciğer Adenokarsinomlarında EGFR araştırılması EGFR protein ekspresyonu İHK Mutasyon spesifik EGFR gen kopya sayısı mutasyon EGFR mutasyonu İmmunohistokimya En sık görülen (IHK) aktive edici mutasyonlar için: Ek 19 ve Ek 21, Senstivite %92 Spesifite %99 Flöresan in-situ hibridizasyon (FISH) DNA bazlı araştırmalar 1-Sanger sequencing 2-RT-PCR, ARMS 3-Pyrosequencing
Akc adenokarsinomlarında EGFR-TKI duyarlığı ile ilişkili EGFR Mutasyonları Nat Rev Cancer. 2007; 7: 169-81.
EGFR mutasyonu araştırmak için yöntemler (Türkiye de sık kullanılan) Metot duyarlılı k süre fiyat Bilinen /Spesifik mutatsyon bilinmeyen mutasyon Sanger dizileme % 25 2-3 gün ucuz Evet/Evet Evet Pyro- dizileme Gerçek zamanlı PCR Yeni jenerasyon % 5-10 1-2 orta evet /Evet Evet/ bazı koşullarda %1-5 1 gün orta Evet/ Evet-hayır Hayır %0.1-1 uzun pahalı Evet Evet/hayır
EGFR- KRAS Raporlama: Hasta kimlik bilgileri İstek yapımına ait bilgiler Diğer Lab a ait Patoloji No su Materyalin cinsi
EGFR- KRAS Raporlama EGFR /KRAS inceleme için seçilen metot Metodun duyarlılık eşiği EGFR mut. hakkında genel bilgi
EGFR mutasyon raporu
EML-4/ALK mutasyonu Yöntem; İHK RT-PCR FİSH
KHDAK olgularında ALK mutasyonu değerlendirmesi «+» olgu diyebilmek için standart yöntem Spesifite ve sensitivite False «+ «rarorlama mümkün FDA onaylı Prob; Abbott Vysis Füzyon partnerini göstermez Subjektifvite! Ön değerlendirm e için hızlı bir yöntem Spesifite ve sensitite sorunu var Hangi i ALK klonu nun kullanıldığı önemli Subjektivite Sensitivite ve spesivite yüksek Füzyon partnerini gösterir Bilinen ALK mutasyonların ı değerlendirir Doku fiksasyon/taki b ideal olmalı
ALK İmmunhistokimya değerlendirmesi Primer antikorun klonu ( D5F3, 5A4 vb) semi-kantitatif skor; +,++,+++ pozitif
FISH -----2 günlük işlem
Raporlama: Hasta kimlik bilgileri İstek yapımına ait bilgiler Diğer Lab a ait Patoloji No su Materyalin cinsi ALK hakkında genel bilgi
Raporlama: Araştırma yöntemi /leri Değerlendirme Sonuçlar
İ.Ü. CERRAHPAŞA TIP FAKÜLTESİ MOLEKÜLER PATOLOJİ 2011-2013 800 700 121 600 33 500 400 300 591 630 POZİTİF NEGATİF 200 100 0 43 99 ALK EGFR KRAS n= 624 n= 751 n=142
Akciğer Adenokarsinomlarında mutasyonlar WT ALK KRAS EGFR KRAS EGFR ALK Her2 BRAF PI3KCA MET AKT MAP2KI ROS1 KIF5B-RET WT Hedefe yönelik tedavi 28
ROS-1 KHDAK larında %1-2 (Adenokarsinom) ROS1 pozitif hasta profili ALK ile aynı; Genç erkek hasta, kadın=erkek Sigara içmemiş/ az içmiş Araştırma yöntemi : FISH (break-apart) İHK D4D6 Tedavi : crizotinb Rimkunas VM et al. Clin Cancer Res 2012 Aug 15: 18(16):4449-57 Response to crizotinib in ROS1-rearranged non-small-cell lung cancer. [J Clin Oncol. 2012] Targeting ROS1 with anaplastic lymphoma kinase ınhibitors. A promising therapeutic strategy for a newly defined molecular subset of NSCLC [J Thoracic Oncol. 2012 )
CTF Patoloji AD da ROS 1 deneyimi Çok yeni; 8 hastada EGFR ve ALK negatif, sigara içmemiş 39 y kadın hasta (m289/14)
Rutin uygulama; Patoloğa moleküler çalışma istenen doku örneği ( boyanmamış yayma!!!, hücre bloğu ve parafin blok) tanı aldığı H+E camı ile birlikte gönderilmeli Hastaya ait patoloji raporu istek yazısıyla birlikte mutlaka yollanmalı Revizyon isteniyorsa dokunun gereksiz harcanmaması için immunhistokimyasal çalışma yapılmışsa bu lamlar da gönderilmeli Birden fazla moleküler test istenecekse bunları yapan tek bir merkezden istenmesi tümör dokusunun daha ekonomik kullanılması için önemli!
Türkiye de son durum; KHDAK için tanı sırasında problemler: Kötü kalite fiksasyon- optimal olmayan doku işlemleri, Tümörlerde tip tayininde sorunlar Moleküler test için doku saklanmaması Her test için ayrı ayrı lab. a gönderilmesi Moleküler test için geçen sürenin uzunluğu Seçilmiş- kalifiye laboratuvar tayini/ istihdamı Laboratuvar kalite kontrol / sertifikasyon Geri ödeme sorunları
Şu günlerde sorun; hatalı fikse sitolojik materyal ve hücre blokları Doku kesiti Hücre bloğu
10 iş günü Akc KHDAK larında prediktif belirleyicilerin saptanmasında CTF algoritması Adenokarsinom, KHDAK-NOS, AC fenotipi + ( IHK) EGFR mutasyon analizi, KRAS (isteğe bağlı ) mutasyon analizi + ALK IHK +Skorlama «-» ise ALK FISH
Dikkatiniz için teşekkürler