İÇERİK TABLOSU. In vitro diagnostik medikal gereç. Lot numarası. Katalog numarası. İle Kullanım. Kullanım bilgileri.

Transkript

1

2 İÇERİK TABLOSU Kullanılan Semboller... 5 Türkçe Kullanım Amacı... 7 Test Prensibi... 8 Reaktifler... 8 Tanımlama,kullanım için hazırlama ve saklama koşulları... 8 Kit içeriğinde olmayan gerekli materyaller... 9 Güvenlik ve Çevre Koşulları Örnekler Beyanat ve Önlemler Manual test prosedürü Yıkama Talimatı İnkübasyon Talimatı Otomatik test prosedürü: Auto-LIA Sonuçlar Okuma Validasyon Sonuçların Yorumlanması Software yorumlanması: LiRAS infeksiyon hastalıklar için Sınırlamalar Test performansı Duyarlılık Özgünlük Çoğalabilirlik Kullanılan Semboller Üretici In vitro diagnostik medikal gereç Lot numarası Katalog numarası İle Kullanım Kullanım bilgileri Biyolojik riskler Sıcaklık sınırlamaları < X > testi için yeterli miktarı içerir Negatif Kontrol Pozitif Kontrol Stripler Örnek Diluent

3 Yıkama Solusyonu 5x Kullanıma hazır Konjugat Kullanıma hazır Substrat BCIP/NBT Stop solüsyonu INNO-LIA HCV Score insan serum ya da plazmasında insan Hepatit C antikorlarının belirlenmesi için bir Line Immunotesttir (LIA ). Bu test insan serum ya da plazmasında anti-hcv tarama test sonucu pozitif bulunan örnekler için destekleyici olarak tasarlanmıştır. Test Prensibi INNO-LIA HCV Score; core bölgesi, E2 çok değişken bölgesi (HVR, NS3 helikaz bölgesi, NS4A, NS4B ve NS5A bölgelerinden elde edilimiş HCV antijenlerini kullanan 3. jenerasyon line immunotesttir. Antijenler, plastik destekli naylon strip üzerindeki 6 farklı bölgeye bağlanmışlardır. Ayrıca, strip üzerinde dört kontrol bölgesi bulunmaktadır: streptavidin kontrol çizgisi, örnek eklenerek kullanılan 3+ pozitif kontrol (anti-human Ig) çizgisi, 1+ pozitif kontrol (human IgG) ve ± cut-off çizgisi (human IgG). INNO-LIA HCV Score enzim immun assay prensibine dayanır. Test örneği, test stripi ile birlikte oluklarda inkübe edilir. Eğer örnekler içinde var ise HCV antikoru striplerdeki HCV antijen çizgileri ile birleşir. Daha sonra, affinite-purifiye alkaline phosphatase işaretli goat anti-human IgG (H+L) Konjugat eklenir ve spesifik HCV antijen/antikor kompleksine bağlanır. Enzim substrat ile inkübasyon kestane-benzeri bir renk oluşturur. Oluşan renk şiddeti örnek içinden yakalanan HCV spesifik antikorlarının miktarı ile orantılıdır (Fig. 1). Sülfirik asit ile renk gelişimi durdurulur. Reaktifler Tanımlama,kullanım için hazırlama ve saklama koşulları - Tüm test reaktifleri orjinal ambalajında, 2-8 C de saklanırsa son kullanma tarihine kadar bozulmaz. Son kullanım tarihi geçmiş reaktifleri kullanmayınız. Reaktifleri dondurmayınız. - Tüm reaktifler ve plastik tüp içindeki stripler kullanımdan yaklaşık 30 dakika önce oda sıcaklığına (18-30 C) getirilmiş olmalı ve kullanımdan hemen sonra buzdolabına (2-8 C) kaldırılmalıdır. - Kit reaktiflerinin fiziksel görünüşündeki değişiklikler bozulmalara ya da kararsızlıklara neden olabilir. - Stripleri içeren orjinal paket açıldıktan sonra, herbir kullanılmayan strip 2-8 C de kapalı orjinal tüpünde kurutucu madde ile birlikte 16 hafta saklanabilir. İçeriğindeki Reaktifler: Komponent Miktar Ref. Açıklama Stripler INNO-LIA HCV antijen-kaplı test strip içerir. Örnek Diluent 30 ml Sodium chloride, detergent, bovine protein stabilizörü ve koruyucu olarak 0.3% chloroacetamide (CAA) içeren renk-kodlu (yeşil) phosphate buffer içerir. Kullanıma hazır Konjugat 45 ml Tris bufferda bovine stabilizörü, detergent ve koruyucu olarak 0.01% methylisothiazolone (MIT)/0.1% CAA içeren renk-kodlu (kırmızı) alkaline phosphatase işaretli goat anti-human IgG içerir. Negatif Kontrol 0.12 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/0.1% CAA içeren insan orijinli basematriks içerir. Pozitif Kontrol 0.12 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/0.1% CAA içeren HCV antikorları için pozitif inaktive edilmiş insan serumu içerir. Kullanıma hazır BCIP/NBT 45 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/0.1% CAA içeren dimethyl formamide içinde 5-bromo-4-chloro-3-indolyl Substrat phosphate/nitroblue tetrazolium içerir. Stop Solusyonu 45 ml mol/l sulfuric acid içerir. Yıkama Solusyonu 45 ml sodium chloride, detergent ve koruyucu olarak 0.02% bromo-nitro-dioxane içeren renk-kodlu (mavi) Tris buffer,distile su ile 5x seyreltilmiştir.seyreltilmiş yıkama solusyonu 2-8 C de 2 hafta saklanabilir. Inkübasyon tablası 2 - Herbiri 11 oluk içerir. Yapışkan Kaplayıcı 5 - Bilgi Rapor Sayfası 1 - Kullanılan striplerin saklanması için. Okuma Kartı 1 - Reaktif antijen çizgileri yorumlamak için. Kit içeriğinde bulunmayan gerekli materyaller - Distile ya da deiyonize su µl, µl ve µl pipetler ve tek kullanımlık pipet uçları. - Orbital shaker ya da salıncak (İnkubasyon talimatlarına bakınız). - Vorteks mikser. - Dereceli silindirler: 10, 25, 50 ve 100 ml. - Stripleri tutmak için cımbız. - Zamalayıcı. - Opsiyonel olarak:

4 sıcak hava fanı (saç kurutucu) ya da 37 C kuru inkübatör. stop solusyon, konjugat, substrat ve yıkama solusyonu eklemek için tek kullanımlık şişeler ile tekrarlayıcı pipet. atık şişesinde 5% sodium hypochlorite solusyonu içeren vakum aspiratörü. Güvenlik ve Çevre Koşulları - Lütfen Material Safety Data Sheet (MSDS) ve potansiyel tehlikeli komponentler içeren işaretli ürün bilgilerini inceleyiniz. En son güncellenen MSDS versiyonu websitesinde yer almaktadır. R43, S24-37 Tahriş edici! (Xi) Deri ile temasından kaçınınız. Deri ile teması hassasiyete neden olur. Eldiven kullanın. 2-Chloroacetamide içeren: Örnek Diluent, Kullanıma hazır Konjugat, Kullanıma hazır BCIP/NBT Substrat, Pozitif Kontrol ve Negatif Kontrol. - Örnekler, Pozitif ve Negatif Kontrollerin potansiyel enfeksiyon ajanı olabileceği göz önüne alınarak kullanılmalıdır. - Pozitif Kontrol anti-hiv ve HbsAg için negatif bulunmuştur. Negatif Kontrol anti-hiv-1/hiv-2, anti-hcv ve HbsAg için negatif bulunmuştur. Hiçbir metod insan kan ürünlerinden enfeksiyon ajanı bulaşmayacağını garanti etmez. Tüm biyolojik materyallerinin potansiyel enfeksiyon ajanı olduğu göz önüne alınarak kullanılmalıdır. Sadece yeterince tecrübesi olan personel bu testi çalışmalıdır. Tüm biyolojik materyaller güvenlik koşullarına uygun olarak atılmalıdır. 121 C de 15 dakika otklavlanmalıdır. Tek kullanımlık materyaller yakılmalıdır. Sodyum hipokloritli miks likit atıkların son konsantrasyonu ± 1% sodyum hipoklorit olmalıdır. Atmadan önce bir gece bekletiniz. ÖNLEM: asit içeren likitlere sodium hipoklorit eklemeden önce nötralize ediniz. - Tehlikeli ya da enfeksiyonlu ajanlar ile çalışılırken koruyucu giysiler; eldiven ve koruyucu gözlük kullanılması gereklidir. - Atıklar hastanelerin atılım talimatlarına göre yok edilmelidir. Kamusal ve çevresel düzenlemelere uyulmalıdır. - Sodium hypochlorite içeren atık şişesindeki stop solusyonunu aspire etmeyiniz. Örnekler - INNO-LIA HCV Score insan serumu veya antikoagülant olarak sitrat, heparin ya da EDTA içeren tüplere toplanan insan plazması ile çalışlmalıdır. - Saklanmadan önce, serum ya da plazma santrifüj ile kan pıhtısından ve kan hücrelerinden ayırılmalıdır. - Örnekleri 2-8 C de saklayınız. 1 haftadan uzun saklayacaksanız -20 C ya da altında dondurunuz. - Isıya maruz kalmış örnekleri kullanmayınız. - Devamlı dondurup çözdürülmüş örnekler hatalı sonuçlara neden olabilir. Beyanat ve Önlemler - Farklı lot numarasındaki reaktifleri birbirine karıştırmayınız. - Donmuş reaktifler hatalı sonuçlara neden olabilir! - Doğru miktarda örnek ekleyip ve yeterli yıkama sayısı yaptığınızdan emin olun. - Reaktiflerin mikrobiyal kontaminasyonundan kaçınınız. - Kullanmadan önce örnekler ve kontrollerin homojen olduğundan emin olun. - Strip membranına dokunmayın.daima stripleri plastik desteğinden tutun. - Herbir örnek için yeni bir pipet ucu kullanın. - Striplerin arka yüzleri aşağı bakacak şekilde doğru oluklarda olduklarından emin olunuz. - Tüm inkübasyon aşamaları orbital shaker ya da salıncak (salıncağı sadece overnight bekletme için kullanınız) kullanılarak yapılmalıdır. Strip üzerindeki solusyonların sallanması tüm çizgilerin boyanması ve maksimum duyarlılık açısından önemlidir.sallanma sırasında, strip yüzeyi tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Geceboyu inkübasyon sırasında, striplerin kurumasını önlemek için olukların üzerini yapışkan kaplayıcı ile kapatın. - Kullanılmamış ve kullanılmış stripleri güçlü ışık ve ısıdan uzak tutun. - Bu kit sadece yeterli laboratuvar tecrübesi olan personel tarafından kullanılmalıdır. - Strip ya da olukların tekrar tekrar kullanımı hatalı sonuçlara neden olacaktır. - Kesik stripler hatalı sonuç yorumlarına neden olacaktır. Manuel Test Prosedürü Lütfen teste başlamadan önce Beyanat ve Önlemler kısmını okuyunuz saat örnek inkübasyonu 1. Yeterli miktarda oluk hazırlayın, herbir test çalışması için bir Pozitif ve bir Negatif Kontrol olmalıdır. Test oluklarını kontrol ve örnekler olarak ayırdıktan sonra onları tabla içine yerleştirin. 2. Herbir test oluğuna 1 ml Örnek Diluent ekleyin. 3. Uygun kuyucuklara 10 µl örnek ya da kontrol ekleyin. 4. Uygun miktarda test stripi hazırlayın ve herbir test oluğuna bir strip yerleştirin. Cımbız yardımı ile test striplerinin membran tarafları yukarıya doğru olacak şekilde yerleştirin. STRİPLER TAMAMEN SIVIYA BATMIŞ OLMALIDIR. 5. Olukları yapışkan kaplayıcı ile kaplayın (Beyanat ve Önlemlere bakınız). Tablayı shaker ya da salıncak üzerinde inkübe edin (İnkübasyon Talimatlarına bakın) ve OVERNIGHT (16 ± 2 saat oda ısısında (18-25 C) sallayın. NOT: çapraz kontaminasyonu önlemek için yapışkan kaplayıcıyı dikkatlice çıkarın. 6. Herbir stripi 3 kez (5 kez) 1 ml Yıkama Solusyonu ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 7. Herbir test oluğuna 1 ml Konjugat Solusyonu ekleyin. 8. Tablayı shaker ya da salıncak üzerinde inkübe edin ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 9. Herbir stripi 3 kez (5 kez) 1 ml Yıkama Solusyonu ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 10. Herbir test oluğuna 1 ml Substrat Solusyonu ekleyin. 11. Tablayı shaker ya da salıncak üzerinde inkübe edin ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 12. Sıvıyı aspire edin. Herbir test oluğuna 1 ml Stop Solusyonu ekleyin. 13. Tablayı shaker ya da salıncak üzerinde inkübe edin ve dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 14. Stop Solusyonunu aspire edin. 15. Cımbız yardımı ile stripleri oluklardan alın ve absorbent kağıdı üzerine membran tarafı yukarı bakacak şekilde koyun. Stripler tamamen kuruduğunda sonuçlar yorumlanabilir. Kuruma aşamasını hızlandırmak için, stripleri 37 C de 30 dakika kuru inkübatöre koyun ya da 1 dakika sıcak hava fazı ile kurutun. Çalışılan stripler karanlıkta saklanırsa renklerini korurlar.

5 - 2 ve 3 saat örnek inkübasyonu "2 saat ve 3 saat örnek inkübasyonu" protokolü için "16 saat örnek inkübasyonu " test prosedüründeki 15 aşama aynıdır, fakat ve 9. aşamalarda değişiklik gösterir. Örnek ve kontroller için yükleme miktarı 10 dan 20 µl ye çıkar (3. aşama) ve örnek inkübasyon zamanı 2 ve 3 saate değişir (5. aşama). Örnek inkübasyonlarından sonraki yıkama 2 saat prosedürü için 3 kez 10 dakikaya, 3 saat prosedürü için 3 kez 6 dakikaya değişir (6. aşama); son olarak ikinci yıkama aşaması her iki prosedür içinde 3 kez 3 dakika olarak değişir (9. aşama). Özet test prosedürleri koyulaştırılmış değişiklikler ile aşağıdaki tabloda verilmiştir: 16 saat örnek 2 saat örnek 3 saat örnek inkübasyonu inkübasyonu inkübasyonu Örnek Diluent 1 ml 1 ml 1 ml Örnek 10 µl 20 µl 20 µl Kontroller 10 µl 20 µl 20 µl LIA test stripleri 16 hours ± 2 hours 2 hours 3 hours Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 10 min 1 ml/3 x 6 min RTU* Konjugat 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 3 min 1 ml/3 x 3 min RTU* Substrat 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Stop Solusyonu 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min *RTU = Kullanıma hazır Yıkama Talimatı - Gece boyu, 2 saat ve 3 saat inkübasyondan sonra, dikkatlice yapışkan kaplayıcı çıkarılır. - Sıvılar oluklardan pipet ile aspire edilir, tercihen atık şişesinde 5% sodium hypochlorite içeren vakum aspirator kullanılabilir. Tüm sıvı oluğun tek bir köşesinden akacak şekilde tablayı kaldırın. - Herbir oluğa 1 ml seyreltilmiş yıkama solusyonu ekleyin ve shaker ya da salıncak üzerinde sallayın. Sallama zamanı test prosedürü kısmında yazmaktadır. - Bu aşamaları test prosedürü kısmında belirtildiği kadar tekrar edin. NOT: Yıkama aşamaları arasında stripin kurumasına izin vermeyin. Aspirasyon sırasında test strip yüzeylerinin tahrip olmadığından emin olun. Yıkama sırasında stripin tamamen yıkama solusyonu içinde olduğundan emin olun. Gerektiğinde shaker ya da salıncağın adaptasyonlarını yapın. İnkübasyon Talimatı - Tüm inkübasyon aşamaları (örnek, konjugat, substrat ve stop solusyonu inkübasyonu) ve yıkama aşamaları shaker ya da salıncak ile yapılmalıdır (salıncağı sadece overnight bekletme için kullanınız). - inkübasyon ve yıkama aşamalarında, strip yüzeyi membran tarafı yukarı bakacak şekilde tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Shaker ya da salıncak oluklardaki stripin iki taraflı (öne ve arkaya) hareketini sağlamalı ve striplerin üzerindeki sıvının olukların dışına sıçramamasını sağlamalıdır. - Orbital ya da longitudinal olarak hızla hareket eden shaker ya da salıncaklar uygun çizgi boyanması ve maksimum duyarlılık açısından uygun değildir. Orbital shaker için öneriler: sürküler hareketin çapı 13 mm e eşit ya da üzerinde olmalıdır. 13 mm sirküler hareket için tavsiye edilen hız 160 rpm 24 mm sirküler hareket için tavsiye edilen hız 90 rpm. Salıncak için öneriler: sıvının dökülmesini önlemek için düşük ve yüksek seviyeler arasındaki fark 80 mm I aşmamalıdır önerilen hız 34 rpm. Otomatik test prosedürü: Auto-LIA LIA test prosedürü Auto-LIA otomate kullanılarak kolayca otomatize edilebilir. Bu cihaz, aspirasyon, pipetleme ve inkübasyonu otomatize eden ve kolaylaştıran bir sistemdir. Daha fazla bilgi ve spesifik protokol Auto-LIA II dadır, lütfen Innogenetics yerel distribütörünüzle bağlantıya geçiniz. Lütfen teste başlamadan önce Beyanat ve Önlemler kısmını okuyunuz. Auto-LIA prosedür detayları - 16 saat örnek inkübasyonu Auto-LIA 1. DISP CH1 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 2. INC 1 min, shake speed 4 3. PAUSE 4. INC 960 min, shake speed 4 5. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 6. INC 6 min, shake speed 4 7. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 8. INC 6 min, shake speed 4 9. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 10. INC 6 min, shake speed ASP 12. DISP CH4 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 13. INC 30 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 15. INC 3 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 17. INC 3 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 19. INC 3 min, shake speed ASP 21. DISP CH6 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl

6 22. INC 30 min; shake speed ASP 24. DISP CH5 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 25. INC 20 min, shake speed ASP 27. END - 2 saat örnek inkübasyonu Auto-LIA 1. DISP CH1 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 2. INC 1 min, shake speed 4 3. PAUSE 4. INC 120 min, shake speed 4 5. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 6. INC 10 min, shake speed 4 7. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 8. INC 10 min, shake speed 4 9. WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 10. INC 10 min, shake speed ASP 12. DISP CH4 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 13. INC 30 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 15. INC 3 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 17. INC 3 min, shake speed WASH CH2 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 19. INC 3 min, shake speed ASP 21. DISP CH6 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 22. INC 30 min; shake speed ASP 24. DISP CH5 Stpos: Begin Endpos: Till end 1000 µl 25. INC 20 min, shake speed ASP 27. END CH1 = Sample Diluent CH2 = Wash Solution CH4 = Conjugate CH5 = Stop Solution CH6 = Substrate - 3 saat örnek inkübasyonu Auto-LIA "3 saat örnek inkübasyonu" protokolü "2 saat örnek inkübasyonu " test prosedürünün 27 aşaması ile aynıdır, fakat ve 10 aşamaları değişmektedir. Örnek inkübasyon zamanı 180 dakikaya değişir (4. aşama) ve yıkama 3 saat örnek inkübasyonundan sonra 3 kez 6 dakika olarak değişmektedir ( aşama). Sonuçlar Okuma Strip üzerinde kaplı antijen ve kontrollerin lokasyon ve tanımlamaları aşağıdaki gibidir: Figür 1: INNO-LIA HCV Score test strip Herbir strip üzerindeki kontrol çizgilerindeki reaksiyonların yoğunluğu, o strip üzerindeki herbir antijenin reaktivite derecesine bağlıdır: Antigen çizgi reaksiyon yoğunluğu (R) Derece ± den az R < ± - ± ye eşit R = ± ± ±, den fazla fakat 1+ den az veya eşit ± < R den fazla fakat 3+ den az 1+ < R < e eşit R = den fazla R > Reaktivite derecesi herbir strip için ayrılmalıdır. Yorumlamaya yardımcı olmak için, okuma kartı eklenmiştir. Okuma kartı üzerinde çalışılmış striplerin 3+ kontrol çizgisisine göre dizilmesi çizgilerin tanımlanmasını kolaylaştırır. Validasyon Test sonuçlarını okumadan önce pozitif ve negatif kontrol striplerinin ve herbir stripin üzerindeki kontrol seviyesinin geçerliliğini teyit edin. Test çalışmasının validasyonu: 1. Pozitif kontrol stripi C1, C2, NS3 ve NS4 antijen çizgilerinde en az 1+ reaksiyon gösterir. E2 ve NS5 antijen çizgisi negatif derece gösterebilir. 2. Negatif kontrol stripi negatif derece göstermelidir (Tüm HCV antijen çizgileri için tümünde hiç rieaksiyon olmaz ya da en az kontrol seviyesi ± den düşüktür). Tek bir strip validasyonu : 1. Kontrol seviyesleri 1+ ve ± yanında güçlü pozitif kontrol seviyesi 3+ görünür olmalıdır. 2. Kontrol seviyesi 3+ yoğunluğu seviye 1+ dan büyük olmalı ve seviye 1+ yoğunluğu seviye ± dan büyük olmalıdır. 3. Anti-streptavidin için kontrol çizgisi negative dereceli olmalıdır. NOT:

7 Stop solusyonunun eklenmesinden sonra zayıf bantlardan dolayı yanlış okumaların olmasını önlemek için strip tamamen kurutulmalıdır. Islak ise striplerin en üst kısmına kağıdı yerleştirmeyin. Yüksek IgG seviyesine sahip örneklerde zayıf kontrol bantları görülebilir (normal IgG aralığının üstünde). Sonuçların yorumlanması Kapsamlı çalışmalar sonuçların aşağıdaki gibi yorumlanabileceğini göstermiştir: HCV antikorları için NEGATİF : - Tüm HCV antijen bantlarının negatif reaktivite derecesinde olması, - NS3 hariç diğer HCV antijen bantlarından birinin ± reaktivitesine sahip olması, HCV antikorları için POZİTİF : - Eğer en az iki HCV antijen bandı ± ya da daha yüksek aktiviteye sahip ise. HCV antikorları için ŞÜPHELİ : - Eğer herhangi bir HCV antijen çizgisi 1+ ya da daha yüksek rekativite derecesine sahip ise. - Eğer NS3 bandı ± ya da daha fazla rektiviteye sahip ve tüm diğer antijen çizgileri negatif ise. Software yorumlanması: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS software LIA sonuçlarının yorumlanmasına yardımcı olması için dizayn edildi. Son güncellenen versiyonu öğrenmek için lütfen yerel distribütörünüz ile bağlantıya geçin. UYARI: - aşağıdaki sınırlama prosedürleri olmadan otomatik yorumlamayı kullanmayınız. Sınırlamalar - Testte optimal performası sağlayabilmek için protokole bazı sınırlamalar getirilmiştir. - Sadece NS3 bandında +/- ya da daha yüksek reaktiviteye sahip olan örnekler HCV serokonversiyonu için belirti olabilir. Bunlar şüpheli olarak belirtilmelidir. - Eğer SÜPHELİ bir sonuç bulunursa, bir kaç hafta sonra başka örneklerle birlikte tekrar çalışılması önerilir. - Streptavidin kontrol çizgisinde pozitif veren bir örnek diğer HCV antijen çizgileri ile çapraz reaksiyona girmiş olabileceğinden HCV antikorları için pozitif olarak belirtilmemelidir. - Anti-HCV antikorları erken enfeksiyonlarda belirlenemeyebilir. - Hemodiyaliz aşamasında antikorlar belirlenemeyebilir. - Seyreltilmiş örneklerin kullanılması hatalı sonuçlara neden olabilir. - Yetkili tedavi ya da invaziv prosedürler uygulanmadan önce HCV anitkor-pozitif kişilerde, karaciğer hasarı ve HCV RNA pozitifliği değerlendirmesi için parametreler araştırılmalıdır. Test performansı Duyarlılık Serokonversiyon panelleri/düşük-titre panelleri Auto-LIA 2-saat örnek inkübasyon prosedürü ve manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak INNO-LIA HCV Score sonuçları 13 BBI serokonversiyon paneli (PHV 904 till 916), 2 BBI düşük titre paneli (PHV103 and 204) ve SFTS94 paneli üzerinde gözlemlenmiştir. Bu sonuçlar CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA ve INNO-LIA HCV Ab III update sonuçları ile karşılaştırılmıştır. INNO-LIA HCV Score 2-saat ve 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak, 7 panelde CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA den daha erken ve 4 panelde aynı anda pozitif bulunmuştur. CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA bir paneled aynı örnek inkübasyon prosedürlerini kullanarak INNO-LIA HCV Score dan erken antikorları belirlemiştir. Bir panel bu testlerin hiçbiri ile pozitif bulunmamıştır. INNO-LIA HCV Score 2- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak 2 panelde INNO-LIA HCV Ab III update den daha erken ve diğer 10 panelde aynı zamanda antikorları belirlemiştir. 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak, 4 panelde INNO- LIA HCV Ab III update den daha erken, 7 panelde aynı anda ve bir panelde daha geç pozitif olarak antikorları belirlemiştir. 2 BBI düşük-titre paneli arasında 40 örnek üzerinde, 28 ve 32 örnek INNO-LIA HCV Score da 2-saat ve 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak pozitif bulunmuştur. Bu örneklerin otuz beşi CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA ile pozitif, the INNO- LIA HCV Ab III update ile 34 tanesi pozitif bulunmuştur. CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA ile ya da INNO-LIA HCV HCV Ab III update ile pozitif bulunan tüm örnekler INNO-LIA HCV Score kullanılarak da pozitif ya da süpheli bulunmuştur. SFTS94 panel içinde 49 örnekten; 38, 41 ve 40 örnek INNO-LIA HCV Score testinde 2-saat ve 16- saat örnek inkübasyon prosedürü ve INNO-LIA HCV Ab III update kullanılarak pozitif bulunmuştur. Bu örneklernden 31 tanesi the CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA kullanılarak pozitif bulunmuştur. HCV-pozitif örnekler 2 tarama testi ve INNO-LIA HCV Ab III update testinde pozitif bulunan HCV enfeksiyonu olan toplamda 257 örnek INNO-LIA HCV Score Auto-LIA 2- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak test edilmiştir. Bir şüpheli örnek hariç tüm örnekler pozitif bulunmuştur. Sonuçların duyarlılığı 100% (257/257). Farklı genotipler INNO-LIA HCV Score Auto-LIA 2- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak, 15 örnek genotip 1a, 15 of 1b, 15 örnek genotip 2, 15 örnek genotip 3a, 15 örnek genotip 4a, 5 örnek genotip 4 non-a ve 5 örnek genotip 5 test edilmiştir. Tüm örnekler pozitif bulunmuştur, test duyarlılığı 100% (85/85). Özgünlük Kan donorleri

8 Manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak toplamda 400 kan donorü HCV antikorları için negatif bulunmuştur. Başlangıç testinden sonra 377 örnek negatif, 22 örnek şüpheli ve bir örnek pozitif bulunmuştur, sonuçların özgünlüğü 94.3% (377/400). Başlangıçta pozitif çıkan örnekler tekrar çalışıldığında negatif olarak bulunmuştur, tekrar tesinden sonraki özgünlük 94.5% (378/400). Klinik Örnekler Manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak toplamda 205 örnek test edilmiştir. 189 tanesi negatif, 11 tanesi şüpheli ve 5 tanesi pozitif bulunmuştur. 5 örnekten 3 tanesi testin tekrar edilmesinden sonra negatif bulunmuştur. INNO-LIA HCV Score ve INNO-LIA HCV Ab III update testlerinden sonra, bu testlerde diğer örnekler şüpheli çıkarken, diğer 2 pozitif örneğin 1 tanesi pozitif bulunmuştur. Ortho HCV 3.0 ELISA with Enhanced SAVe ve INNOTEST HCV Ab IV testlerinde her iki örnek de negatif bulunmuştur. CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA testi ile 2 örnekten 1 tanesi negatif bulunmuştur. Bu örnek setleri için özgünlük 92.2% (189/205) olarak bulunurken tekrar test edilmesinden sonra duyarlılık 93.7% (192/205) bulunmuştur. Potansiyel karışım örnekleri 137 potansiyel karışım örneği manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak test edilmiştir. 127 örnek negatif, 9 örnek şüpheli ve 1 örnek pozitif bulunmuştur. Testin tekrar edilmesinden sonra, bu örnekler INNO-LIA HCV Ab III Update testi ile potizif bulunmuşken önce pozitif sonra şüpheli olarak bulunmuştur. Bu örnekler Ortho HCV 3.0 ELISA with Enhanced SAVe, INNOTEST HCV Ab IV vechiron RIBA HCV 3.0 SIA testlerinde negatif bulunmuştur. Bu örnek setlerinde özgünlük 92.7% (127/137) olarak görülmüştür. Tekrarlanabilirlik İki araştırmacı, 3 farklı lottaki Auto-LIA 2- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanarak bir pozitif ve bir negatif kontrol yanında 3 HCV pozitif örnek paneli ile çalışırken üç araştırmacı, bu paneli bu lotların birinde çalışmıştır. Her iki taraf da aynı test sonuçlarını almıştır.