FRI45593 INNO-LIA HCV Score

Transkript

1 INNO-LIA HCV Score ANAHTAR-KODU: FRI INNO-LIA HCV Score v3 19 Nisan 2016 Salı 09:59:30 p 14 Türkçe Tarafından üretildi: Fujirebio Europe N.V. Technologiepark Gent Belgium Tel BTW BE RPR Gent Tarafından dağıtılan: Fujirebio Europe N.V. Tel Fax customer.support@fujirebio-europe.com 0459 Fujirebio Italia S.r.l. Tel Fax spain@fujirebio-europe.com "Vurgulanan Not değişiklikleri" Fujirebio Germany GmbH Tel Fax germany@fujirebio-europe.com Fujirebio France SARL Tel Fax france@fujirebio-europe.com Fujirebio Iberia S.L. Tel Fax spain@fujirebio-europe.com Diğer Dillere bakınız / Autres langues voir / Andere Sprachen siehe / Altre lingue vedere / Ver otros idiomas / Outras línguas ver: AVRUPA GR IS LT RO SK TR LI MT EE non-europe US CA AR, BR, CO, UY, AU, NZ, RU :00 17:00 GMT+1 M T W T F S S Fujirebio Europe N.V

2 İÇİNDEKİLER Kullanılan Semboller... 2 Kullanım amacı... 3 Test prensibi... 3 Reaktifler... 3 Açıklama, kullanım için hazırlanması ve önerilen depolama koşulları... 3 Gerekli ama sağlanmayan malzemeler... 4 Güvenlik ve Çevre Koşulları... 4 Örnek (toplama ve kullanma)... 6 Uyarılar ve önlemler... 6 Manual test prosedür... 6 Yıkama talimatları... 8 İnkubasyon talimatları... 8 Otomatik test prosedürleri:... 9 Sonuçlar... 9 Okuma... 9 Doğrulama Sonucların yorumlanması Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS Prosedür sınırlamaları Test performans Duyarlılık Özgüllük Tekrarlanabilirlik Ticari markalar Kullanılan Semboller Üretici In Vitro Diagnostic Medikal Cihaz Batch code Katalog numarası Tarafından Kullanılan Kullanım Talimatlarına başvurun Sıcaklık sınırlaması Biyolojik riskler <n> testleri için yeterli içerir Konjugat Negatif Kontrol Pozitif Kontrol Örnek Dilüent Durdurma solüsyonu Stripler

3 Kullanım amacı Substrat BCIP/NBT Yıkama Solüsyonu 5x Tehlike Uyarı: INNO-LIA HCV Score insan serum ya da plazmasında insan Hepatit C antikorlarının belirlenmesi için bir Line Immunotesttir (LIA). Bu test insan serum ya da plazmasında anti-hcv tarama prosedürü kullanılarak reaktif bulunmuş hastalar için ilave bir test olarak tasarlanmıştır. Test prensibi INNO-LIA HCV Score; core bölgesi, E2 çok değişken bölgesi (HVR, NS3 helikaz bölgesi, NS4A, NS4B ve NS5A bölgelerinden türemiş HCV antijenleri ile birleşen 3. jenerasyon line immunotesttir. Antijenler, plastik destekli naylon strip üzerindeki 6 farklı bölgeye bağlanmışlardır. Ek olarak, her strip üzerinde dört kontrol bölgesi bulunmaktadır: arkaplan kontrol çizgisi,ayrıca örnek ilaveli kontrol hattı olarak kullanılan 3+ pozitif kontrol (anti-insan Ig), 1+ pozitif kontrol (human IgG) ve ± cut-off çizgisi (human IgG). INNO-LIA HCV Score enzim immunotest prensibine dayanır. Test örneği, test stripi ile birlikte oluklarda inkübe edilir. Eğer örnekler içinde mevcutsa HCV antikoru striplerdeki HCV antijen çizgileri ile birleşir. Daha sonra, affinite-purifiye alkaline phosphatase işaretli goat anti-human IgG (H+L) Konjugat eklenir ve spesifik HCV antijen/antikor kompleksine bağlanır, daha önceden oluşmuşsa. Enzim substrat ile inkübasyon kestane-benzeri bir renk oluşturur, oluşan renk şiddeti örnek içinden yakalanan HCV spesifik antikorlarının miktarı ile orantılıdır (Fig. 1). Renk gelişimi sülfirik asit eklenmesi ile durdurulur. Reaktifler Açıklama, kullanım için hazırlanması ve önerilen depolama koşulları - Eğer 2-8 C de saklandıysa, açılmış veya açılmamış, tüm reaktifler son kullanım tarihine kadar stabildir. Reaktifleri dondurmayın. Son kullanma tarihinden sonra kiti kullanmayın. - Test stripleri içeren tüm reaktifler ve plastik tüpler kutunun dışına alınmalıdır ve kullanımdan önce 60 dakika boyunca oda ısısına (18-25 C) getirilmeli. Kullanımdan sonra tüm reaktifler ve strip tüpleri buzdolabına (2-8 C) derhal geri konulmalı. - Kit reaktiflerin fiziksel görünümündeki değişiklikler istikrarsızlık veya bozulma belirtisine neden olabilir. - Stripleri içeren alüminyum folyo çantasını açtıktan sonra kullanılmamış test stripleri kurutucu ile kapalı plastik minigrip çantasında 2-8 C de saklandığında 16 hafta stabil kalır.

4 Verilen Reaktifler: Bileşen Miktar Ref. Açıklama Stripler INNO-LIA HIV antijen kaplı test stripleri içerir. Örnek Dilüent 30 ml Sodium chloride, detergent, bovine protein stabilizörü ve koruyucu olarak 0.3% chloroacetamide (CAA) içeren renkkodlu (yeşil) phosphate buffer içerir. Kullanıma hazır Konjugat. 45 ml Tris bufferda bovine stabilizörü, detergent ve koruyucu olarak 0.01% methylisothiazolone (MIT)/0.1% CAA içeren renk-kodlu (kırmızı) alkaline phosphatase işaretli goat antihuman IgG içerir. Negatif Kontrol 0.12 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/<0.1% CAA içeren insan orijinli basematriks içerir. Pozitif Kontrol 0.12 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/0.1% CAA içeren HCV antikorları için pozitif inaktive edilmiş insan serumu içerir. Kullanma hazır BCIP/NBT Substrat 45 ml Koruyucu olarak 0.01% MIT/0.1% CAA içeren dimethyl formamide içinde 5- bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate/nitroblue tetrazolium içerir. Durdurma solüsyonu 45 ml mol/l sulfuric acid içerir. Yıkama Solüsyonu 45 ml Sodium chloride, detergent ve koruyucu olarak 0.02% bromo-nitro-dioxane içeren renk-kodlu (mavi) Tris buffer,distile su ile 5x seyreltilmiştir. Seyreltilen yıkama solüsyonu 2-8 C de tutulursa 2 hafta stabildir. İnkubasyon tepsisi 2-11 olukları ile her biri. Yapıştırıcı bantları 5 - Veri raporlama 1 - Kullanılan striplerin saklanması için. sayfası Okuma kartı 1 - Pozitif antijen çizgilerin tanımlanması için. Gerekli ama sağlanmayan malzemeler - Distile veya deionize su. - Tek kullanımlık eldiven μl, μl ve μl dağıtma kapasitesine sahip (tek kullanımlık uçla) hassas pipetler. - Orbital mikser veya rocker (inkübasyon için talimatlara bakınız). - Vorteks mikser veya eşdeğer. - Dereceli silinderler: 10, 25, 50, ve 100 ml. - Strip tutmak için çımbız. - Zamanlayıcı. - İsteğe bağlı: Sıcak hava fanı (saç kurutma makinası) veya 37 C lik kuru inkubatör. stop solusyon, konjugat, substrat ve yıkama solüsyonu eklemek için tek kullanımlık şişeler ile tekrarlayıcı pipet. atık şişesinde 5% sodium hypoklorit solüsyonu içeren vakum aspiratörü. Güvenlik ve Çevre Koşulları Lütfen Material Safety Data Sheet (SDS) ve potansiyel tehlikeli komponentler içeren işaretli ürün bilgilerini inceleyiniz. En son güncellenen SDS versiyonu almaktadır.

5 Uyarı. Tehlike Tehlike Açıklamaları H317 H360D Önlem ifadeleri: P201 P261 P280 İçerir 2-Chloroacetamide H317 P261-P280-P302+P352-P333+P313-P362+P364 İçerir N,N-Dimethylformamide H360D P280-P201-P308+P313-P303+P361+P353-P305+P351+P338 Allerjik deri reaksiyonuna neden olabilir. Fetüsa zarar verebilir. Kullanmadan önce özel talimatlar elde ediniz. Duman/buhar/sprey solunmaktan kaçının. Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruyucu/yüz koruyucusu kullanın. P303+P361+P353 Cilt temasında(veya saç): Derhal tüm bulaşmış olan kıyafetleri çıkarın. Su/duş ile cildi durulayın. P305+P351+P338 GÖZ TEMASINDA: Dikkatlice bir kaç dakika sudan geçiriniz. Mevcut ve kolaysa kontakt lensleri çıkarın. Yıkamaya devam edin. P308+P313 Maruz kaldığınızda veya endişenlendiğinizde: Tıbbi yardım/destek alın. P333+P313 Ciltte tahriş veya kızarıklık meydana gelirse: Tıbbi yardım/destek alın. P362+P364 Kirlenen giysileri çıkartın ve tekrar kullanmadan önce yıkayın. P302+P352 Cilt temasında: Bol su ve sabun ile yıkayın. - Sadece yeterince eğitimli personel test prosedürünü yapmak için izinli olmalıdır. - Örnekler, Örnekler, Pozitif Kontrol ve Negatif Kontrol her zaman potansiyel enfekte olarak elle alınmalıdır. - Pozitif Kontrol anti-hcv ve HBsAg için negatif olarak bulunmuştur. Negatif Kontrol anti-hiv-1/hiv-2,anti-hcv ve HBsAg için negatif olarak bulunmuştur. Hiçbir test yöntemi kan ürünlerinin enfeksiyöz ajanlar içermediğine dair garanti vermez. Bu nedenle, tüm kan bileşenleri ve biyolojik maddeler potansiyel olarak bulaşıcı olarak kabul edilmelidir. Tüm kan bileşenleri ve tüm biyolojik materyaller güvenlik koşullarına uygun olarak atılmalıdır. 121 C de 15 dakika otoklavlanmalıdır. Tek kullanımlık malzemeleri yakınız. Nihai konsantrasyon ±% 1 sodyum hipokloritli olacak şekilde,sıvı atığı sodyum hipoklorit ile karıştırın. Bertaraf etmeden önce bir gece bekletin. DİKKAT: Asit içeren sıvı atığı sodium hipoklorit eklemeden önce nötralize edin. - Kişisel koruyucu ekipman kullanımı gereklidir: Tehlikeli veya bulaşıcı ajanlar işlenirken eldiven ve koruyucu gözlük kullanılmalıdır. - Atık, kurumun atık bertaraf kurallarına göre ele alınmalıdır. Tüm federal, eyalet ve yerel çevresel düzenlemeler de dikkate alınmalıdır.

6 - Sodyum hipoklorit içeren atık şişesi içine durdurma solüsyonu aspire etmeyin. Örnek (toplama ve kullanma) - INNO-LIA HCV Score koagülant olarak sitrat, heparin ya da EDTA içeren tüplere toplanan insan serum ya da plazması ile çalışılmalıdır. - Saklanmadan önce, serum ya da plazma santrifüj ile kan pıhtısından ve kan hücrelerinden ayırılmalıdır. - Örnekleri 2-8 C de saklayınız. 1 haftadan uzun saklayacaksanız -20 C ya da altında dondurunuz. - Isıya maruz kalmış örnekleri kullanmayınız. - Art arda (3 kezden fazla) dondurulmuş ve çözdürülmüş örnekler hatalı sonuçlara neden olabilir. Uyarılar ve önlemler - Farklı lot numarasındaki reaktifleri birbirine karıştırmayınız. - Donmuş reaktifler, örneğin soğutma elemanına yakın saklandıysa, hatalı sonuclara neden olabilir! - Doğru örnek hacminden ve test prosedüründe gerekli yıkama sürelerin kullanıldığından emin olun. - Reaktiflerin mikrobiyel kontaminasyonundan kaçının. - Kullanmadan önce örnekler ve kontrollerin homojen olduğundan emin olun. - Strip membranına dokunmayın. Her zaman plastik destek ile stripleri kullanın ve işleyin. - Herbir örnek için yeni bir pipet ucu kullanın. - Test stripleri kendi membran tarafı yukarı bakacak şekilde olukları yerleştirildiğinden emin olun. - Tüm inkübasyon aşamaları orbital shaker ya da rocker (rocker sadece geceden bekletme için kullanınız) kullanılarak yapılmalıdır. Strip üzerindeki solüsyonların sallanması tüm çizgilerin boyanması ve maksimum duyarlılık açısından önemlidir. Sallanma sırasında, strip yüzeyi tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Numune inkübasyon sırasında, striplerin kurumasını önlemek için olukların üzerini yapışkan kaplayıcı ile kapatın. - Kullanılmamış ve kullanılmış stripleri güçlü ışık ve ısıdan uzak tutun. - Bu kit sadece yeterli laboratuvar tecrübesi olan personel tarafından kullanılmalıdır. - Striplerin ya da olukların tekrar tekrar kullanımı hatalı sonuçlara neden olacaktır. - Kesik stripler hatalı sonuç yorumlarına neden olacaktır. Manual test prosedür Teste başlamadan önce lütfen uyarıları ve önlemleri okuyun saatlik örnek inkubasyonu 1. Gereken miktarda test oluğu alın. 2. Her test çalışması için bir Pozitif ve bir Negatif Kontrol iç kontrol amaçlı test edilebilir. 3. Numune olarak test oluklarını (ve kontrolleri) belirleyin ve tepsiye yerleştirin. 4. Hasta veya kontrol numunesinin diğer kuyuların üzerine taşmadığından emin olun. Çapraz-kontaminasyondan kaçınmak için tüm manuel test prosedürü boyunca hasta veya kontrol numunesi ve reaktifleri dikkatlice ekleyin.

7 5. Her test oluğuna 1mL Örnek Diluent ekleyin. 6. Uygun şekilde etiketlenmiş oluklarına yaklaşık 10μL uygun numune veya kontrol ekleyin. 7. Konteynerlerinden gerekli miktarda test stribini çıkartın ve test oluklarının her birine bir strip ekleyin. Bu test stribi cımbız kullanılarak oluğun içine yukarı doğru membran tarafına yerleştirilir. BU STRİPLER TAMAMEN BATMIŞ OLMALIDIR. 8. Olukları yapışkan kaplayıcı ile kaplayın (Açıklamlar ve Önlemlere bakınız). Numuneleri shaker ya da salıncak tepsi üzerine yerleştirerek inkübe edin (İnkübasyon Talimatlarına bakın) ve GECEBOYU (16 ± 2 saat oda ısısında (18-25 C) sallayın. NOT: Çapraz kontaminasyonu önlemek için yapışkan kaplayıcıyı dikkatlice çıkarın. 9. Herbir stripi 3 kez (5 dak.) 1 ml Yıkama Solusyonu ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 10. Her test oluğuna 1 ml Konjugat Solüsyonu ekleyin. 11. Test tepsisini çalkalayıcı ya da rocker üzerinde konjugat ile inkübe edin ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 12. Herbir stripi 3 kez (5 dak.) 1 ml Yıkama Solusyonu ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 13. Her test oluğuna 1 ml Konjugat Solüsyonu ekleyin. 14. Test tepsisini çalkalayıcı ya da rocker üzerinde substrat ile inkübe edin ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 15. Sıvıyı aspire edin. Her test oluğuna 1 ml Konjugat Solüsyonu ekleyin. 16. Test tepsisini çalkalayıcı ya da rocker üzerinde durdurma solüsyonu ile inkübe edin ve dakika oda ısısında (18-25 C) sallayın. 17. Durdurma solüsyonu aspire edin. 18. Cımbız yardımı ile stripleri oluklardan alın ve absorbent kağıdı üzerine membran tarafı yukarı bakacak şekilde koyun. Stripler tamamen kuruduktan kısa bir süre sonra sonuçlar yorumlanabilir. Kuruma aşamasını hızlandırmak için, stripleri 37 C de 30 dakika kuru inkübatöre koyun ya da 1 dakika sıcak hava fazı ile kurutun. Çalışılan stripler karanlıkta saklanırsa renklerini korurlar saatlik örnek inkubasyonu "2-3 saatlik örnek inkübasyon " protokolü için "16 saatlik örnek inkübasyon " test prosedüründeki 18 aşama aynıdır, fakat ve 12. aşamalarda değişiklik gösterir. Numuneler için numune hacmi ve kontroller için 10 dan 20μL ye çıkar (aşama 6) ve örnek inkübasyon süresi 2 den 3 saate değişir (aşama 8). Örnek inkübasyonlarından sonraki yıkama 2 saatlik prosedür için 3 kez 10 dakikaya ve 3 saatlik prosedür için 3 kez 10 dakika olarak değişir (aşama 9); son olarak ikinci yıkama aşaması 2 ve 3 saatlik örnek inkübasyonu için 3 kez 3 dakikadır (aşama12).

8 Özet test prosedürlerinde vurgulanan farklılıklar (kalın), aşağıdaki tabloda verilir: 16 saatlik örnek inkubasyonu 2 saatlik örnek inkubasyonu 3 saatlik örnek inkubasyonu Örnek Dilüent 1 ml 1 ml 1 ml Numune 10 µl 20 µl 20 µl Kontroller 10 µl 20 µl 20 µl LIA test stripleri 16 saatlik ± 2 saatlik 2 saat 3 saat Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 10 min 1 ml/3 x 6 min RTU* Konjugat 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Yıkama 1 ml/3 x 5 min 1 ml/3 x 3 min 1 ml/3 x 3 min RTU* Substrat 1 ml/30 min 1 ml/30 min 1 ml/30 min Durdurma solüsyonu 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min 1 ml/10-30 min *RTU = Kullanıma hazır Yıkama talimatları - Geceden 2 saat ve 3 saatlik inkübasyondan sonra, dikkatlice yapışkan kaplayıcı çıkarın. - Sıvılar oluklardan pipet ile aspire edilir, tercihen atık şişesinde 5% sodium hypochlorite içeren vakum aspirator kullanılabilir. Tepsi sıvısı (her şeridin kaplanmamış plastik destek kısmına) oluğun bir tarafına akmasını sağlamak için bir açıda tutulur. - Herbir oluğa 1 ml seyreltilmiş yıkama solüsyonu ekleyin ve çalkalayıcı ya da rocker üzerinde sallayın. Çalkalama süresi test prosedüründe gösterilmektedir. - Bu aşamaları test prosedürü kısmında belirtildiği kadar tekrar edin. NOT: Yıkama aşamaları arasında striplerin kurumasına izin vermeyin. Aspirasyon sırasında test striplerin yüzeylerinin tahrip olmadığından emin olun. Her zaman çapraz-bulaşmayı önlemek için dezenfektan kapanı ile temiz bir aspirasyon cihazı kullanın. Yıkama sırasında stripin tamamen yıkama solusyonu içinde olduğundan emin olun. Gerektiğinde çalkalayıcıyı ya da rockerı uyarlayın. Olukların kenarları boyunca Yıkama Çözeltisi sıçramasını önleyin. İnkubasyon talimatları - Tüm inkübasyon aşamaları (örnek, konjugat, substrat ve stop solusyonu inkübasyonu) ve yıkama aşamaları çalkalayıcı ya da rocker ile yapılmalıdır (rocker sadece geceden bekletme için kullanınız). - İnkübasyon ve yıkama aşamalarında, strip yüzeyi membran tarafı yukarı bakacak şekilde tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Çalkalayıcı ya da rocker oluklardaki stripin iki taraflı (öne ve arkaya) hareketini sağlamalı ve striplerin üzerindeki sıvının olukların dışına sıçramaması sağlamalıdır. - Çalkalayıcı veya rocker tarafından oluşturulan hızların çizgi boyama ve maksimum hassasiyete ulaşmada kritik öneme sahiptir. Orbital çalkalayıcı için öneriler: dairesel hareket çapı 13 mm 'ye eşit ya da daha üstün olmalıdır 13 mm dairesel hareket için önerilen hız 160 rpm

9 24 mm dairesel hareket için önerilen hız 90 rpm Rocker için öneriler: sıvının dökülmememsi için en yüksek ve en düşük noktası arasındaki fark 80 mm'yi geçmemelidir Önerilen hız 34 rpm. Otomatik test prosedürleri: Göstergeler ve ilişkili protokoller Fujirebio Avrupa N.V. edinilebilir (bakınız- Sonuçlar Okuma Strip üzerinde kaplı antijen ve kontrollerin lokasyon ve tanımlamaları aşağıdaki gibidir: Şekil 1: INNO-LIA HCV Score test strip

10 Herbir strip üzerindeki kontrol çizgilerindeki reaksiyonların yoğunluğu, o strip üzerindeki herbir antijenin reaktivite derecesine bağlıdır: Antijen çizgi reaksiyon şiddeti (R) Değerlendirme Daha düşük ± R < ± - Eşittir ± R = ± ± ± daha yüksek, ama 1+ düşük veya eşittir ± < R daha yüksek ama 3+daha düşük 1+ < R < Eşittir 3+ R = Daha yüksek 3+ R > Reaktivite derecesi her bir strip için ayrı ayrı yapılmalıdır. Doğru yorumlanması için okuma kartı kullanın. Çizgilerinin belirlenmesi kart okumaya karşılık gelen 3+ kontrol hattı ile geliştirilen şeridinde 3+ kontrol hattı hizalanması ile elde edilir. Doğrulama Test sonuçlarını okumadan önce her stripteki kontrol seviyelerinin geçerliliği kontrol edilmeli ve aşağıdaki kriterleri karşılamalıdır: Tek stribin validasyonu: 1. Güçlü pozitif kontrol seviye 3+ ve kontrol seviyeleri 1+ ve ± görünür olmalıdır. 2. Kontrol seviyesi 3+ yoğunluğu seviye 1+ dan daha çok olmalıdır ve seviye 1+ yoğunluğu seviye ± dan daha büyük olmalıdır. 3. Arkaplan kontrol çizgisi negatif değerlendirmeye sahip olmalıdır. Pozitif ve Negatif kontrol test edildiğinde, Pozitif ve Negatif Kontrol striplerinin geçerliliği test sonuçlarını okumadan önce kontrol edilmelidir ve aşağıdaki kriterleri karşılamalıdır. 1. Pozitif Kontrol stribi C1, C2, NS3 ve NS4 antijen çizgisinde en az 1+ reaksiyon göstermelidir. E2 ve NS5 antijen çizgisi negatif değerlendirme gösterebilir. 2. Negatif Kontrol stribi negatif değerlendirme göstermelidir (tüm HCV antijen çizgileri için hiç reaksiyon yok veya en azından kontrol seviyesi ± dan daha az) NOT: Bu strip durdurma solüsyonu eklenmesinden sonra görünen hafif görünür bantlardan dolayı herhangi yanlış yorumlamadan kaçınmak için tamamen kurutulmalıdır. Islak oldukları sürece striplerin üstüne kağıt koymayın. Zayıf kontrol bantları yüksek IgG seviyeleri içeren örnekler için gözlenebilir (normal IgG aralığı üstünde) Beklenmeyen sonuçlar halinde veya test prosedürü hatasından şüphelenildiğinde test tekrarlanmalıdır ve Pozitif ve Negatif Kontrol yeni test çalışmasına dahil edilmelidir. Sonucların yorumlanması Kapsamlı değerlendirmeler aşağıdaki gibi yorumlanabilen sonuçları göstermiştir: Bir örnek HCV antikorları için NEGATİF tir: - tüm HCV antijen çizgileri negatif reaktivite değerlendirmesine sahipse

11 - eğer bir HCV antijen çizgisi ± reaktivitesine sahip, NS3 için reaktivite görülmesi dışında. Bir örnek HCV antikorları için POZİTİF tir: - eğer en az iki HCV antijen çizgisi ± minimum ya da daha yüksek aktiviteye sahip ise. Bir örnek HCV antikorları için ŞÜPHELİ bulunmuştur: - eğer bir HCV antijen çizgisi 1+ ya da daha yüksek rekativite derecesine sahip ise - eğer NS3 çizgisi ± ya da daha fazla reaktiviteye sahip ve tüm diğer antijen çizgileri negatif ise. Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS software LIA sonuçlarının yorumlanmasına yardımcı olması için tasarlanmıştır. En son güncellenen versiyonu öğrenmek için lütfen yerel distribütörünüz ile bağlantıya geçin. UYARI: Aşağıda belirtilen şekilde prosedür sınırlamalarını dikkate almadan otomatik yorumu kullanmayınız. Prosedür sınırlamaları - Testte optimal performası sağlayabilmek için verilen protokol sıkı takip edilmelidir. - NS3 de tek +/- ya da daha yüksek reaktiviteye sahip olan örnekler HCV serokonversiyonu için belirti olabilir. Bunlar şüpheli olarak belirtilmelidir. - Belirsiz veya tiplendirilebilir olmayan sonuç elde edilirse, bir kaç hafta sonra ek bir hasta örneğinin test edilmesi önerilir. - Arkaplan kontrol çizgisi üstünde pozitif reaksiyon veren bir örnek diğer HIV antijen çizgileriyle çapraz-reaksiyonlar verebilir ve HIV antikorları için pozitif olarak tanımlanamaz. - Aşağıdaki antijen çizgilerinde reaktivitenin görüldüğü durumda (arkaplan kontrol çizgisindeki reaktiviteye bakılmaksızın): C1,C2,E2,NS4 ve NS5, anti-streptavidin antikorlarının bazı tipleriyle spesifik olmayan reaktivite olması ihtimali vardır. Bu nedenle strip GEÇERSİZ olarak yorumlanmalıdır. Diğer test yöntemleriyle ek test önerilir. - Erken enfeksiyonlarda HCV için antikor seviyesi belirlenemeyebilir. - Hemodiyalizli antkorlar belirlenemeyebilir. - Seyreltilmiş örneklerin kullanılması hatalı sonuçlara neden olabilir. - Yetkili tedavi ya da invaziv prosedürler uygulanmadan önce HCV anitkor-pozitif kişilerde, karaciğer hasarı ve HCV RNA pozitifliği değerlendirmesi için parametreler araştırılmalıdır. - Strip genelinde bazı hasta örnekleri tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite üretebilir (bazı durumlarda arkaplan kontrol çizgisiyle kombine halde) (sözde bufferlines. Bu reaktiviteler cut-off seviyesi civarında aynı yoğunluğa sahip olduğunda sonuçlar aşağıdaki gibi yorumlanmalıdır: Cut-off seviyesi (± değerlendirme) ve 1+ değerlendirme arasında tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite (bazı durumlarda arkaplan kontrol çizgisiyle kombine halde) GEÇERSİZ olarak düşünülür ve diğer test yöntemleriyle ek test önerilir.

12 Cut-off seviyesi (± değerlendirme ) altındaki tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite, arkaplan kontrol çizgisi reaktivitesininde cut-off seviyesi altında olması şartıyla NEGATİF olarak düşünülür. 1+ seviyesinden daha yüksek tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite, arkaplan kontrol çizgisi reaktivitesinin cutoff seviyesi altında olması şartıyla POZİTİF olarak düşünülür Test performans Duyarlılık Serokonversiyon panelleri/düşük-titre panelleri Auto-LIA 2-saat örnek inkübasyon prosedürü ve manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak INNO-LIA HCV Score sonuçları 13 BBI serokonversiyon paneli (PHV 904 till 916), 2 BBI düşük titre paneli (PHV103 and 204) ve SFTS94 paneli üzerinde gözlemlenmiştir. Bu 13 seroconversion panelin, 22 si negatif kanamayla başladı ve dar kanama aralıkları vardı. Bu sonuçlar CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA ve INNO-LIA HCV Ab III update sonuçları ile karşılaştırılmıştır. (Tablo 1 ve 2) Tablo 1: BBI serokonversiyon panellerin genel sonucları Tahlil Chiron RIBA HCV 3.0 SIA a karşı Serodönüşüm panelleri tespiti Daha erken Eşit Daha geç Negatif kalan INNO-LIA HCV Score (2 saatlik Auto-LIA prosedür)* INNO-LIA HCV Score (16 saatlik manuel prosedür)* Tablo 2: BBI düsük titre panellerin ve SFTS94 panel genel sonucları Pozitif örneklerin/panelin belirlenme sayısı Tahlil PHV 103 PHV 204 SFTS 94 INNO-LIA HCV Score (2 saatlik Auto-LIA prosedür)* INNO-LIA HCV Score (16 saatlik manuel prosedür)* CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA HIV-pozitif örnekleri 2 tarama testi ve INNO-LIA HCV Ab III update testinde pozitif bulunan HCV enfeksiyonu olan toplamda 257 örnek INNO-LIA HCV Score Auto-LIA 2-saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak test edilmiştir. Bir şüpheli örnek hariç tüm örnekler pozitif bulunmuştur. Ayrıca, INNO-LIA HCV Scor ile Auto-LIA 2 saatlik örnek inkübasyon prosedürü genotiplenmiş 99 HCV numunesi üzerinde dahili olarak gerçekleştirilmiştir. Tüm major HCV genotipleri örnek setinde kaplandı (Tablo 3).

13 Tablo 3. HCV-pozitif örneklerin genotip dağılımı. Örneklerin genotipleri Test edilen örnek sayısı a 15 1b a a 15 4 non-a Toplam 99 NOT: Test etmek üzere genotip 6 bulunamadı. Tüm 99 pozitif örnekler bulundu. Toplamda, bu tek bir belirsiz sonuç dahil, % 100 (356/356; 95% CI [98.9%; 100.0%]) hassasiyet elde edilir. Özgüllük Kan donörleri Manuel 16-saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak toplamda 400 kan donorü HCV antikorları için negative bulunmuştur. Başlangış testinden sonra 377 örnek negatif, 22 örnek şüpheli ve bir örnek pozitif bulunmuştur, sonuçların özgünlüğü 94.3% (377/400; 95% CI [91.5%; 96.1%]). Başlangıçta pozitif çıkan örnekler tekrar çalışıldığında negatif olarak bulunmuştur, tekrar testinden sonraki özgünlük 94.5% (378/400; 95% CI [91.8%; 96.3%]). Klinik numuneleri Manual 16- saatlik örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak 206 klinik örnek test edilmiştir. 189 tanesi negatif, 11 tanesi şüpheli ve 5 tanesi pozitif bulunmuştur. 5 örnekten 3 tanesi testin tekrar edilmesinden sonra negatif bulunmuştur. INNO-LIA HCV Score ve INNO-LIA HCV Ab III update testlerinden sonra, bu testlerde diğer örnekler şüpheli çıkarken, diğer 2 pozitif örneğin 1 tanesi pozitif bulunmuştur. Ortho HCV 3.0 ELISA with Enhanced SAVe ve INNOTEST HCV Ab IV testlerinde her iki örnek de negatif bulunmuştur. CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA testi ile 2 örnekten 1 tanesi negatif bulunmuştur. Bu örneksetleri için özgünlük 92.2% (189/205; 95% CI [87.7%; 95.1%]) olarak bulunurken tekrar test edilmesinden sonra duyarlılık 93.7% (192/205; 95% CI [89.5%; 96.3%]) bulunmuştur. Etkileşim vermesi olası örnekler 137 etkileşim vermesi potansiyel örneği manuel 16- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanılarak test edilmiştir. 127 örnek negatif, 9 örnek şüpheli ve 1 örnek pozitif bulunmuştur. Testin tekrar edilmesinden sonra, bu örnek sırasıyla pozitif, veşüpheli bulunmuştur. Bu örnekler Ortho HCV 3.0 ELISA withenhanced SAVe, INNOTEST HCV Ab IV vechiron RIBA HCV 3.0 SIA testlerinde negatif bulunmuştur. Bu örnek setlerinde özgünlük 92.7% (127/137; 95% CI [87.1%; 96.0%]) olarak görülmüştür. Tekrarlanabilirlik

14 İki araştırmacı, 3 farklı lottaki Auto-LIA 2- saat örnek inkübasyon prosedürü kullanarak bir pozitif ve bir negatif kontrol yanında 13HCV pozitif örnek paneli ile çalışırken üç araştırmacı, bu paneli bu lotların birinde çalışmıştır. Farklı kit lotlarının kullanılması ve farklı deneyciler tarafından performans değerlendirilen örneklerin her biri için aynı test sonucu ile sonuçlanmıştır. Ticari markalar - LIA, Avrupa, ABD, Çin de olduğu gibi dünya çapında tescilli markadır. - INNO-LIA USA ve Japonya da tescilli bir markadır ve dünyanın geri kalanında patentlidir. - LiRAS Avrupa da tescilli markadır ve dünyanın geri kalanında bir markadır (ABD dahil) - Otomatik LIA ABD'de kayıtlı bir ticari markadır ve dünyanın geri kalanı bir ticari markadır.