INNO-LIA HIV I/II Score

Transkript

1 INNO-LIA HIV I/II Score KOD: FRI INNO-LIA HIV I/II Score v p 1/14 Türkçe Üretici: Fujirebio Europe N.V. Technologiepark Gent Belgium Tel BTW BE RPR Gent Dağıtıcı: Fujirebio Europe N.V. Tel Fax customer.support@fujirebio-europe.com Fujirebio Germany GmbH Tel Fax germany@fujirebio-europe.com Fujirebio France SARL Tel Fax france@fujirebio-europe.com 0459 Fujirebio Italia S.r.l. Tel Fax italy@fujirebio-europe.com Fujirebio Iberia S.L. Tel Fax spain@fujirebio-europe.com Vurgulanan değişiklikleri not edin. AVRUPA GR IS LT RO SK TR LI MT EE AVRUPA-dışı US CA AR, BR, CO, UY, AU, NZ, RU :00 17:00 GMT+1 M T W T F S S Fujirebio Europe N.V

2 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 2/14 İÇİNDEKİLER Kullanım amacı...3 Test prensibi...3 Reaktifler...3 Açıklama, kullanıma hazırlık ve önerilen saklama koşulları....3 Gerekli ama sağlanmayan malzemeler...4 Güvenlik ve Çevre Koşulları...5 Örnek (toplama ve kullanma)...6 Uyarılar ve önlemler...6 Manual test prosedürü...6 Yıkama talimatları...9 İnkubasyon talimatları...9 Otomatik test prosedürü:...9 Sonuçlar...9 Okuma...9 Onaylama...10 Sonuçların yorumlanması...11 Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS...11 Prosedür sınırlamaları...12 Test performansı...12 Hassasiyet...12 Özgünlük...13 Tekrarlanabilirlik...14 Ticari markalar...14 Kullanılan Semboller Üretici In vitro diagnostik medikal ürün Parti kodu Katalog numarası Tarafından kullanım Kullanım talimatlarına bakın Sıcaklık sınırlaması Biyolojik riskler <n> testleri için yeterli içerik Conjugate Negative control Positive control Sample diluent Stop solution Stripler Substrate BCIP/NBT Wash solution 5x Tehlike Uyarı Line ImmunoAssay

3 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 3/14 Kullanım amacı INNO-LIA HIV I/II Score insan serum ya da plazmasında grup O dahil olmak üzere, human immunodeficiency virus tip 1 (HIV-1) ve tip 2 (HIV-2) ye karşı oluşan antikorların varlığını teyit etmek amacıyla kullanılan, bir Line Immuno Assay (LIA)dir. INNO-LIA HIV I/II Score, ayrıca HIV-1 ve HIV-2 enfeksiyonları arasındaki ayrımı da yapar. Anti-HIV tarama testinde reaktif olduğu tespit edilen numunelerde, tamamlayıcı test olarak kullanılır. Test prensibi HIV-1 ve HIV-2'deki rekombinant proteinler ve sentetik peptitler ile HIV-1 grubu O'daki sentetik bir peptid, plastik sırtlı bir naylon strip üzerine ayrı hatlar olarak kaplanmıştır. Beş farklı HIV-1 antijeni uygulanmıştır: HIV-1'e spesifik antikorları saptayan sgp120 ve gp41 ve HIV-2'ye karşı antikorlar ile çapraz reaksiyona girebilen p31, p24 ve p17. HIV- 1 grup O peptidleri, HIV-1 sgp120 bandında görülürler. gp36 ve sgp105 antijenleri HIV- 2 ye karşı oluşan antikorların belirlenmesinde kullanılır Bu HIV antijenlerine ek olarak, her bir stribe dört kontrol bölgesi kaplanmıştır: antistreptavidin çizgisi, ± cut-off çizgisi (human IgG), 1+ pozitif kontrol çizgisi (human IgG) ve bir örnek ekleme kontrol çizgisi (anti-human IgG) de olan güçlü 3+ pozitif kontrol çizgisi. INNOLIA HIV I/II Score enzyme immunoassay prensibine dayanır (EIA) Test edilecek numuneler, çoklu antijen kaplı test stripleri ile test oluklarında inkübe edilir. Numune içinde HIV antikorları varsa, kendi HIV antijen çizgisine bağlanır. Daha sonra, alkaline phosphatase işaretli goat anti-human IgG eklenir ve önceden oluşan her bir HIV antijen/antikor kompleksine bağlanır. (BCIP / NBT) enzyme substrate ile yapılan inkübasyon, numunedeki spesifik antikor miktarı ile orantılı olarak koyu kahverengi bir renk oluşturur. Renk gelişimi, sülfirik asit eklenerek durdurulur. Numunede HIV-spesifik antikoru yoksa, anti-human etiketli antikor, antijen/antikor kompleksine bağlanmayacak ve sadece düşük standart arka plan renk gelişimi gözlenecektir. Reaktifler Açıklama, kullanıma hazırlık ve önerilen saklama koşulları. - Açılmış veya açılmamış tüm reaktifler, 2-8 C de saklandıkları taktirde son kullanım tarihlerine kadar stabildir. Reaktifleri dondurmayın. Kiti, son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. - Test striplerini içeren tüm reaktifler ve plastik tüpler, ambalajın dışına alınmalı ve kullanımdan önce 60 dakika boyunca oda ısısında (18-25 C) tutulmalıdır. Kullanımdan sonra tüm reaktifler ve strip tüpleri hemen buzdolabına (2-8 C) kaldırılmalıdır. - Kit reaktiflerin fiziksel görünümündeki değişiklikler istikrarsızlık veya bozulma belirtisine neden olabilir. Sağlanan Reaktifler: Bileşen Miktar Ref. Açıklama Stripler adet INNO-LIA HIV antijen kaplı test stribi içerir. Sample diluent 30mL Sodyum klorid, deterjan, bovine protein stabilizörleri ve koruyucu olarak %0.3 klorasetamid (CAA) içeren renk-kodlu (yeşil) fosfat tamponu içerir.

4 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 4/14 Bileşen Miktar Ref. Açıklama Negative control 0.12mL Koruyucu olarak 0.01% MIT/<%0.1 CAA ile insan orijinli basematriks içerir. Positive control 0.12mL Koruyucu olarak %0.01 MIT/%0.1 CAA içeren HIV antikorları için pozitif inaktive edilmiş insan serumu Kullanıma hazır Konjugat. Kullanma hazır BCIP/NBT Substrat. 45mL 45mL içerir Tris bufferda bovine stabilizörü, deterjjan ve koruyucu olarak %0.01 methylisothiazolone (MIT)/% 0.1 CAA içeren renk-kodlu (kırmızı) alkaline phosphatase işaretli goat anti-human IgG içerir Koruyucu olarak %0.01 MIT/%0.1 CAA ile, dimethyl formamide içinde 5-bromo-4-chloro-3 - indolyl phosphate/nitroblue tetrazolium içerir. Stop solution 45mL mol/l sülfirik asit içerir. Wash solution 45mL Sodyum klorid, deterjan ve koruyucu olarak %0.02 bromo-nitro-dioksan içeren mavi renk-kodlu Tris buffer. 5x distüle su ile dilüe edillmesi gerekir. Dilüe edilen wash solution 2-8 C de muhafaza edildiği taktirde, 2 hafta stabildir. İnkubasyon tepsisi 2 - Herbiri 11 oluklu Yapıştırıcı bantlar 5 - Veri raporlama 1 Geliştirilen striplerin saklanması için. sayfası Reading card (okuma kartı) 1 Pozitif antijen çizgilerin tanımlanması için. Gerekli ama sağlanmayan malzemeler - Distile veya deiyonize su. - Tek kullanımlık eldivenler - Tek kullanımlık atılabilir pipet uçlu 10µL, µL, ve µL hacimli hassas pipetler. - Orbital mikser veya çalkalayıcı (inkübasyon için talimatlara bakınız). - Vorteks mikser veya eşdeğeri. - Dereceli silindirler: 10, 25, 50, ve 100mL. - Stripleri tutmak için cımbız. - Zamanlayıcı. - İsteğe bağlı: Sıcak hava fanı (saç kurutma makinası) veya 37 C lik kuru inkubatör. stop solution, conjugate, substrate ve wash solüsyonunu eklemek için, tek kullanımlık flakonlu tekrarlayıcı pipet. atık şişesi % 5'lik sodyum hipoklorit solüsyonu içeren vakum aspiratör.

5 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 5/14 Güvenlik ve Çevre Koşulları Potansiyel tehlikeli bileşenler hakkında bilgi edinmek için, Güvenlik Bilgi Formuna (SDS) ve ürünün etiketine bakınız. En yeni SDS versiyonu te mevcuttur. Uyarı Tehlike Tehlike İfadeleri H317 H360D Önlem ifadeleri P201 P261 P280 P302+P352 P303+P361+P353 2-kloroasetamid içerir H317 P261 P280 P302+P352 P333+P313 P362+P364 N,N-Dimethylformamide içerir H360D P280 P201 P308+P313 P303+P361+P353 P305+P351+P338 Allerjik deri reaksiyonuna neden olabilir. Fetüse zarar verebilir. Kullanmadan önce özel talimatları edinin. Dumanı/buharı/spreyi solunmaktan kaçının. Koruyucu eldiven/koruyucu giysi/göz koruyucusu/yüz koruyucusu kullanın. CİLT İLE TEMAS HALİNDE: Bol su ile yıkayın/... Cilt temasında(veya saç): Kontamine olan tüm giysileri derhal çıkarın. Cildi su / duş ile yıkayın. P305+P351+P338 GÖZ TEMASINDA: Birkaç dakika su ile dikkatlice yıkayın. Varsa ve kolayca çıkarılabiliyorsa, kontakt lensleri çıkarın. Yıkamaya devam edin. P308+P313 Maruz kaldığınızda veya endişenlendiğinizde: Tıbbi yardım/destek alın. P333+P313 Ciltte tahriş veya kızarıklık oluşursa: Tıbbi yardım/destek alın. P362+P364 Kontamine giysileri çıkartın ve tekrar kullanmadan önce yıkayın. - Bu test, sadece eğitimli personel tarafından yapılmalıdır. - Örnekler, pozitif ve negatif kontroller her zaman potansiyel enfeksiyöz olarak ele alınmalıdır. - Positive control, anti-hcv ve HBsAg için negatif olarak bulunmuştur. Negative control, anti-hiv-1/hiv-2, anti-hcv ve HBsAg için negatif bulunmuştur. Hiçbir test yöntemi, kan ürünlerinin enfeksiyöz ajanlar içermediğine dair garanti vermez. Bu nedenle, tüm kan bileşenlerinin ve biyolojik materyallerin potansiyel olarak bulaşıcı olduğu düşünülmeli ve bu şekilde ele alınmalıdır. Tüm kan bileşenleri ve biyolojik materyaller, belirlenmiş emniyet prosedürlerine uygun olarak atılmalıdır. 121 C de minimum 15 dakika otoklavlanmalıdır. Tek kullanımlık malzemeleri yakın. Nihai konsantrasyon ±% 1 sodyum hipokloritli olacak şekilde,sıvı atığı sodyum hipoklorit ile karıştırın. Atmadan önce bir gece bekletin. DİKKAT: Sodyum hipoklorit eklemeden önce asit içeren sıvı atığı nötralize edin. - Kişisel koruyucu ekipmanlar kullanılmalıdır: Tehlikeli veya bulaşıcı ajanlar ile çalışılırken, eldiven ve koruyucu gözlük kullanılmalıdır. - Atık, kurumun atık imha etme esaslarına göre işleme tabii tutulmalıdır. Ayrıca tüm federal, eyalet ve yerel çevresel düzenlemeler de dikkate alınmalıdır.

6 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 6/14 - Sodyum hipoklorit içeren atık şişesi içine durdurma solüsyonu aspire etmeyin. Örnek (toplama ve kullanma) - INNO-LIA HIV I/II Score, antikoagülan olarak sitrat, heparin veya EDTA içeren tüplerde toplanan insan serumu veya plazmasında çalışılabilir. - Saklanmadan önce, serum ya da plazma, santrifüj ile kan pıhtısından ve kan hücrelerinden ayrılmalıdır. - Örnekleri 2-8 C de saklayın. 1 haftadan uzun saklayacaksanız 20 C ya da altında dondurun. - Isıya maruz kalmış örnekleri kullanmayınız. - Tekraren (3 kezden fazla) dondurulup-çözülen örnekler, hatalı sonuçlara neden olabilir. Uyarılar ve önlemler - Farklı lot numaralı reaktifleri, birbirleriyle karıştırmayınız. - Donmuş reaktifler, örneğin soğutuculara yakın saklandıysa, hatalı sonuçlara neden olabilir! - Test prosedürü için gerekli olan doğru numune hacmi ve yıkama sürelerinin kullanıldığından emin olun. - Reaktiflerin mikrobiyal kontaminasyonundan kaçının. - Kullanmadan önce, numunelerin ve kontrollerin homojen olduğundan emin olun. - Strip membranına dokunmayın. Stripleri, daima plastik desteğinde çalışın. - Her bir numune için yeni bir pipet ucu kullanın. - Test striplerinin, kendi membran tarafı yukarı bakacak şekilde oluklara yerleştirildiğinden emin olun. - Tüm inkübasyon adımları, orbital sallanan platform ya da çalkalayıcı (çalkalayıcıyı sadece gece boyu süren inkübasyon için kullanınız) kullanılarak yapılmalıdır. Strip üzerindeki solüsyonların sallanması, tüm çizgilerin hatlarınboyanması ve maksimum hassasiyet açısından önemlidir. Çalkalama sırasında, strip yüzeyi tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Numune inkübasyonu esnasında, striplerin kurumasını önlemek için olukların üzerini yapışkan kaplayıcı ile kapatın. - Kullanılmamış ve kullanılmış(geliştirilmiş) stripleri, güçlü ışık ve ısıdan uzak tutun. - Bu kit sadece yeterli laboratuvar tecrübesi olan personel tarafından kullanılmalıdır. - Striplerin ya da olukların tekrar tekrar kullanımı hatalı sonuçlara neden olacaktır. - Kesik stripler, hatalı sonuçlara neden olur. Manual test prosedürü Teste başlamadan önce, lütfen uyarıları ve önlemleri okuyun saatlik numune inkubasyonu 1. Gereken miktarda test oluğunu alın. 2. Her test çalışmasında, dahili kontrolü sağlamak amacıyla bir pozitif ve bir negatif kontrol de teste dahil edilmelidir. 3. Numune ve kontroller için test oluklarını belirleyin ve tepsiye yerleştirin. 4. Hasta veya kontrol numunesinin, diğer kuyucukların üzerine sıçramadığından/dökülmediğinden emin olun. Çapraz-kontaminasyondan kaçınmak için tüm manuel test prosedürü boyunca, hasta veya kontrol numunesi ve reaktifleri dikkatlice ekleyin. 5. Her test oluğuna 1mL Örnek Diluent ekleyin.

7 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 7/14 6. Uygun şekilde etiketlenmiş oluklara yaklaşık 10μL numune veya kontrol ekleyin. 7. Gerekli miktarda test stribini kaplarından çıkartın ve her bir test oluğuna bir strip koyun. Test stribi cımbız yardımıyla oluğun içine yukarı doğru membran tarafına yerleştirilir. BU STRİPLER TAMAMEN BATMIŞ OLMALIDIR.

8 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 8/14 8. Olukları yapışkan kaplayıcı ile kaplayın (Açıklamlar ve Önlemlere bakınız). Numuneleri, tepsiyi çalkalayıcı ya da sallanan platform üzerine yerleştirerek (İnkübasyon Talimatlarına bakın) ve GECEBOYU (16 ± 2 saat) oda ısısında (18-25 C) 25 C) sallanmalarını sağlayarak inkübe edin. NOT: Çapraz kontaminasyonu önlemek için, yapışkan kaplayıcıyı dikkatlice çıkarın. 9. Herbir stripi 3 kez (5 dak.) 1 ml wash solution ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 10. Her test oluğuna 1mL conjugate solution ekleyin. 11. Test tepsisini, çalkalayıcı ya da sallanan platform üzerinde konjugat ile ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) salllanıyor halde inkübe edin 12. Herbir stripi 3 kez (5 dak.) 1mL wash solution ile yıkayın (Yıkama Talimatlarına bakın). 13. Her test oluğuna 1mL substrate solution ekleyin. 14. Test tepsisini, çalkalayıcı ya da sallanan platform üzerinde stop solution ile ve 30 dakika oda ısısında (18-25 C) sallanıyor halde inkübe edin. 15. Sıvıyı aspire edin. Her test oluğuna 1mL stop solution ekleyin. 16. Test tepsisini, çalkalayıcı ya da sallanan platform üzerinde stop solution ile ve dakika oda ısısında (18-25 C) sallanıyor halde inkübe edin. 17. Stop solution ı aspire edin. 18. Stripleri cımbız yardımı ile oluklardan alın ve kurutma kağıdı üzerine membran tarafı yukarı bakacak şekilde koyun. Stripler tamamen kuruduktan kısa bir süre sonra sonuçlar yorumlanabilir. Kuruma aşamasını hızlandırmak için, stripleri 37 C de 30 dakika kuru inkübatöre koyun ya da 1 dakika sıcak saç kurutma makinası ile kurutun. Çalışılan stripler karanlıkta saklanırsa, renklerini korurlar. - 3 saatlik numune inkubasyonu - "3 saatlik numune inkübasyonu " protokolü için "16 saatlik numune inkübasyonu " test prosedüründeki 18 adım aynıdır, fakat ve 12. adımlarda değişiklik gösterir Numuneler ve kontroller için numune hacmi 10μL'den 20µL'ye (adım 6) çıkar, numune inkübasyon süresi ise 3 saat (adım 8) olarak değişir. Numune inkübasyondan sonraki yıkama, 3 saat protokolü için 3 kez 6 dakikaya değişir (9. adım); son olarak, ikinci yıkama 3 saatlik numune inkubasyonu için 3 kez 3 dakika (12. adım). Özet test prosedürlerinde vurgulanan farklılıklar (kalın), aşağıdaki tabloda verilir: 16 saatlik numune inkubasyonu 3 saatlik numune inkubasyonu Sample diluent 1mL 1mL Numune 10µL 20µL Kontroller 10µL 20µL LIA test stripleri 16 saatlik ± 2 saatlik 3 saat Yıkama 1mL/3 x 5 dk 1mL/3 x 6 dk RTU* conjugate 1mL/30 dk 1mL/30 dk Yıkama 1mL/3 x 5 dk 1mL/3 x 3 dk RTU* substrate 1mL/30 dk 1mL/30 dk Stop solution 1mL/10 x 30 dk 1mL/10 x 30 dk *RTU = Kullanıma hazırdır

9 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 9/14 Yıkama talimatları - Geceden ve 3 saatlik inkübasyondan sonra, dikkatlice yapışkan kaplayıcı çıkarılır. - Sıvılar oluklardan pipet ile aspire edilir, tercihen atık şişesinde % 5 sodyum hipoklorit içeren vakum aspiratorü kullanılabilir. Tepsi, tüm sıvının oluğun bir tarafına (her bir stribin kaplı olmayan plastik destek bölümüne) akmasına izin verecek bir açıda tutulur. - Her bir oluğa 1 ml dilüe edilmiş wash solution ekleyin ve çalkalayıcıya ya da sallanan platforma koyun. Çalkalama süresi, test prosedüründe belirtilmiştir. - Bu adımları, test prosedürü kısmında belirtildiği kadar tekrar edin. - Not: Yıkama adımları arasında striplerin kurumasına izin vermeyin. Aspirasyon esnasında, test striplerin yüzeylerinin tahrip olmadığından emin olun. Çapraz kontaminasyonu önlemek için daima dezenfektan kapanı olan temiz bir aspirasyon cihazı kullanın. Yıkama sırasında stripin wash solution içerisine tamamen batmış olduğundan emin olun. Gerekirse sallanan platform ya da çalkalayıcı kullanın. Wash solutionun oluk kenarlarından sıçramasını önleyin. İnkubasyon talimatları - Tüm inkübasyon adımları (numune, conjugate, substrate, ve stop solution inkübasyonu) ve ayrıca yıkama adımları bir çalkalayıcı veya sallanan platform üzerinde gerçekleştirilmelidir (çalkalayıcıyı sadece gece boyunca yapılan numune inkübasyonunda kullanın). - İnkübasyon ve yıkama adımlarında, strip yüzeyi membran tarafı yukarı bakacak şekilde tamamen sıvı içinde olmalıdır. - Çalkalayıcı veya sallanan platform, oluklardaki striplerin karşılıklı hareket etmesine ve olukların üzerindeki sıvının striplerin üzerindeki sıvıya sıçramadan,striplerin hareke etmesine olanak sağlamalıdır. - Çalkalayıcı veya sallanan platform tarafından oluşturulan hız, çizgi boyama ve maksimum hassasiyete ulaşmada kritik öneme sahiptir. Orbital çalkalayıcı için öneriler: Dairesel hareket çapı, 13 mm 'ye eşit ya da daha fazla olmalıdır. 13 mm dairesel hareket için önerilen hız, 160 rpm dir. 24 mm dairesel hareket için önerilen hız, 90 rpm dir. Çalkalayıcı için öneriler: 9 civarındaki açılarlardaki çalkalama için hız, 34 rpm dir. Otomatik test prosedürü: Dökümanlar ve ilişkili protokoller Fujirebio Avrupa N.V. den edinilebilir (Bkz. Sonuçlar Okuma Strip üzerine kaplanmış olan antijenlerin ve kontrollerin tanımları ve yerleri aşağıdaki gibidir:

10 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 10/14 Şekil 1: INNO-LIA HIV I/II Score test stribi Her bir stripteki kontrol çizgilerinin üzerindeki reaksiyon şiddeti, stripteki her bir antijen için reaktivite oranlarını belirlemek için kullanılır: Antijen çizgi reaksiyonunun şiddeti(r) Değerlendir me ±değerin altında R < ± - Eşittir ± R = ± ± ± daha yüksek, ama 1+ e eşit ya da daha düşüktür ± < R Den daha yüksek ama 3+ ten daha düşük 1+ < R < Eşittir 3+ R = Daha yüksek 3+ R > Reaktivite derecesi her bir strip için ayrı ayrı yapılmalıdır. Doğru yorumlanma için okuma kartını kullanın. Çizgilerin tanımlanması, geliştirilmiş strip üzerindeki 3+ kontrol çizgisinin, okuma kartındaki ilgili 3+ kontrol çizgisi ile hizalanmasıyla elde edilir. Onaylama Test sonuçlarını okumadan önce her stripteki kontrol seviyelerinin geçerliliği kontrol edilmeli ve aşağıdaki kriterleri karşılamalıdır: Tek stribin onaylanması: 1. Kontrol seviyeleri 1+ ve ±, bunların yanı sıra güçlü pozitif kontrol seviyesi 3+ görünür olmalıdır. 2. Kontrol seviyesi 3+'ün şiddeti, 1+ seviyesindeki yoğunluktan daha büyük olmalı ve 1+ seviyesinin şiddeti, ± seviyesinin yoğunluğundan daha büyük olmalıdır. 3. Arkaplan kontrol çizgisi negatif değerlendirmeye sahip olmalıdır (yoğunluk ± kontrol çizgisinden zayıftır). Pozitif ve negatif kontrol test edildiğinde, test sonuçlarını okumadan önce pozitif ve negatif kontrol striplerinin geçerliliği kontrol edilmeli ve aşağıdaki kriterleri karşılıyor olmalıdır. 1. Pozitif Kontrol stribi sgp120, gp41, p31, p24 ve gp36 üstünde en az 1+ reaksiyonu göstermelidir. p17 ve sgp105 antijen çizgisi negatif görülebilir. 2. HIV antijen çizgilerinin tümü için negatif Kontrol stribi negatif değerlendirme göstermelidir ( hiç reaksiyon yok veya en azından kontrol seviyesi ± dan daha az) Not: Stop solution eklendikten sonra görünür bantların görünmesi nedeniyle, yanlış yorumlamamak için strip tamamen kurutulmalıdır.

11 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 11/14 Islak oldukları sürece striplerin üstüne kağıt koymayın. Zayıf kontrol bantları, yüksek IgG seviyeleri (normal IgG aralığının üstünde) içeren numuneler için gözlemlenebilir. Beklenmedik sonuçlarla karşılaşıldığında ya da test prosedürdeki olası bir hatadan şüphelendiğinde, test tekrarlanmalı ve, pozitif ve negatif kontrol yeni bir test çalışmasına dahil edilmelidir. Sonuçların yorumlanması Kapsamlı değerlendirmeler sonucun aşağıdaki gibi yorumlanabileceğini göstermiştir: Minimum 1+ değerlendirme gözleniyorsa, çizgi pozitif olarak tanımlanır. ENV1= HIV-1 için kaplama çizgisi: sgp120 ve gp41 ENV2= HIV-2 için kaplama çizgisi: sgp105 ve gp36 NEG= HIV antikorları için NEGATİF IND= HIV antikorları için BELİRSİZ POS= HIV antikorları için POZİTİF Pozitif çizgi yok Çizgi yok ± NEG 1 çizgi ± NEG 2 veya daha fazla çizgi ± IND 1 çizgi pozitif ( IND 2 çizgi pozitif ( ENV pozitif değil IND 1 ENV1 ve p24 HIV-1 (*) 2 ENV1 HIV-1 (****) 1 ENV2 ve p24 HIV-2 (**) 2 ENV2 HIV-2 Diğer kombinasyonlar IND 3 veya daha fazla pozitif çizgi ( ENV pozitif değil IND 1 ENV1 ve 1 ENV2 1 veya 2 ENV1 HIV 1 ENV1 HIV-1 (*) 2 ENV1 HIV-1 1 veya 2 ENV2 1 ENV2 HIV-2 (**) 2 ENV2 HIV-2 2 ENV1 ve 1 ENV2 HIV-1 1 ENV1 ve 2 ENV2 HIV-2 2 ENV1 ve 2 ENV2 HIV (***) (*) Her iki ENV2 antijen çizgisinde de ± derecesi elde edilirse, numune HIV pozitiftir, ancak tiplendirilebilir değildir. (*) Her iki ENV1 antijen çizgisinde de ± derecesi elde edilirse, numune HIV pozitiftir ancak tiplendirilemez. (***) Bir HIV-1 ve / veya HIV-2 enfeksiyonunun teyit edilebilmesi için, bir takip numunesinin alternatif test yöntemleri (örn., PCR) ile değerlendirilmesi gereklidir. (****) Bkz Prosedür Sınırlamaları. Yorumlama yazılımı: Enfeksiyon hastalıkları için LiRAS Enfeksiyon hastalıkları için tasarlanan LiRAS ın amacı, LIA sonuçlarının yorumlanmasına yardımcı olmaktır. En son güncellenen versiyonu edinmek için, lütfen yerel distribütörünüz ile temasa geçin. Uyarı: Aşağıda belirtilen prosedür sınırlamalarını dikkate almadan, otomatik yorumu kullanmayınız.

12 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 12/14 Prosedür sınırlamaları - Tahlilin optimal performansını elde etmek için, mutlaka verilen protokol takip edilmelidir. - Arkaplan kontrol çizgisi üstünde pozitif reaksiyon veren bir numune, diğer HIV antijen çizgileriyle çapraz-reaksiyonlar verebilir ve HIV antikorları için pozitif olarak saptanamayabilir. - Belirsiz veya tiplendirilebilir olmayan sonuç elde edilirse, bir kaç hafta sonra ek bir hasta örneğinin test edilmesi önerilir. - HIV pozitifliğinin belirlenmesi yalnızca 2 HIV-antijen bandının pozitif skoruna dayanıyorsa, bir takip numunesinin analizi yapılmalıdır. Sgp120 ve gp41 çizgilerinde reaktivite görülmesi halinde (arka plan kontrol çizgisi üzerindeki reaktiviteye bakılmaksızın), bazı anti streptavidin antikorları ile spesifik bir reaktivite olabilir. Diğer test yöntemleriyle ek test yapılması önerilir. - Negatif çıkan bir sonuç, HIV'e maruz kalma olasılığını ya da virüs ile enfeksiyonu engellemez. - Dilüe edilmiş numunelerin, kullanılması hatalı sonuçlara neden olabilir. - Strip genelinde bazı hasta numuneleri, tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite gösterebilir (bazı durumlarda arkaplan kontrol çizgisiyle kombine halde) (bufferlines olarak adlandıırılan). Bu reaktiviteler cut-off seviyesi civarında aynı yoğunluğa sahip olduğunda, sonuçlar aşağıdaki gibi yorumlanmalıdır: - Cut-off seviyesi (± derece) ile 1+ derecelendirmesi arasındaki tüm antijen hatlarında (bazı durumlarda arka plan kontrol hattı ile kombine halde) eşit olmayan reaktiviteler GEÇERSİZ olarak kabul edilir ve diğer test yöntemleriyle ek testler yapılması önerilir. - Cut-off seviyesinin (± değerlendirme) altındaki tüm antijen çizgilerinde görülen eşit reaktivite, arka plan kontrol çizgisinin reaktivitesinin cut-off seviyesinin altında olması koşuluyla, NEGATİF olarak kabul edilir seviyesinden daha yüksek tüm antijen çizgilerinde eşit reaktivite, arkaplan kontrol çizgisi reaktivitesinin cutoff seviyesi altında olması şartıyla, POZİTİF olarak kabul edilir. Test performansı Hassasiyet Serokonversiyon panelleri/düşük-titre panelleri Toplam 12 BBI serokonversiyon paneli (PRB 903, 904, 908, 910, 912, 916, 919, 922, 923, 924, 925, 927, 25 erken serokonversiyon numuneleri dahil) ve 3 BBI düşük titreli paneller (PRB 103'den 105, 17 erken serokonversiyon numuneleri dahil) dahili olarak, Auto-LIA II 3 saatlik numune inkübasyon prosedürü ve manuel 16 saatlik prosedürü kullanarak, INNO-LIA HIV I / II Score ile analiz edildi. Bu sonuçlar, Western blot (Tablo 1 ve Tablo 2) sonuçları ile karşılaştırılmıştır. Tüm serokonversiyon panelleri negatif kanama ile başlamış ve dar kanama aralıklı idi. Tablo 1: BBI serokonversiyon panellerin genel sonuçları Western Blot Testine karşı serokonversiyon panellerin tespiti Daha erken Eşit Daha geç INNO-LIA HIV I/II Score (3 saatlik Auto-LIA prosedürü)* INNO-LIA HIV I/II Score (16 saatlik Auto-LIA prosedürü)* Uyarı*: Bir panel (PRB924), her iki test için pozitif olmadığında, bunu genele dahil etmeyin.

13 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 13/14 Tablo 2: BBI düşük titre panellerin genel sonucları Tespit edilen pozitif numune/panel sayısı Tahlil PRB103 PRB104 PRB105 INNO-LIA HIV I/II Score (3 saatlik Auto-LIA prosedürü)* INNO-LIA HIV I/II Score (16 saatlik Auto-LIA prosedürü)* Western Blot HIV-pozitif örnekleri Vironostika HIV Uni-Form II Ag / Ab ve INNO-LIA HIV Confirmation'da pozitif bulunan toplam 273 HIV-1 pozitif ve 120 HIV-2 pozitif numune, Auto-LIA II 3 saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak dahili olarak analiz edildi. 273 HIV-1 pozitif numunenin tamamı, HIV-1 antikorları için % 100 duyarlılık ve farklılaşma kapasitesi ile (273/273;% 95 CI [% 98.6;% 100.0]) pozitif olarak tanımlandı. 120 HIV-2 pozitif numunenin 108 'i, HIV-2 antikorları için pozitif olarak doğru tespit edildi, 10 numune HIV antikorları için pozitif olarak kabul edildi, ancak 2 numune belirlenemedi. 2 belirsiz sonuç da dahil olmak üzere bu HIV-2 numune için% 100 duyarlılık (120/120;% 95 CI [% 96.9;% 100.0]) ve % 91.5 farklılaşma kapasitesi (108/118;% 95 CI [% 85.1%; 95.3%] ) gözlenmiştir. Özgünlük Kan donörleri Manuel 16 saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak HIV antikorları için negatif bulunan toplam 300 kan donör numunesi dahili olarak analiz edildi. İlk testten sonra, 290 numune negatif, 9 numune belirsiz ve 1 numune HIV-2 antikorları için pozitif olarak bulundu. Çift tekrar çalışmaları yapıldığında, bu pozitif kan numuneleri INNO-LIA HIV Confirmation testinde önce HIV-2 antikorları için pozitif, sonra ikinci saniyede şüpheli ve pozitif olarak bulunmuştur. Bu numuneler, Vironostika HIV Uni- Form II Ag/Ab ve Genelabs Diagnostics HIV Blot 2.2 testlerinde negatif olarak bulunmuştur. Bu numune seti için özgünlük 96.7% (290/300; 95% CI [94.0%-98.2%]) olarak hesaplanmıştır. Klinik numuneler 206 klinik numune, manual 16- saatlik nuune inkübasyon prosedürü kullanılarak test edildi. 198 numune negatif, 7 numune şüpheli ve 1 numune pozitif bulundu. Bu son numunenin, çift olarak tekrarlandığı testte ve NNO-LIA HIV Confirmation testinde pozitif olduğu görülürken, Vironostika HIV Uni-Form II Ag / Ab ve Genelabs Diagnostics HIV Blot 2.2 'de negatif sonuç elde edildi. Bu numune setinde özgünlük 96.1% (198/206; 95% CI [92.5%; -98.0%]) olarak görülmüştür. Etkileşim vermesi olası numuneler Potansiyel 124 etkileşim numunesi manual 16- saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak test edildi. Bunlardan 117'si negatif, 7'si belirsizdi. Bu numune seti için özgünlük % 94.4 (117/124; % 95CI [%88.8-%97.2]) idi.

14 80540 INNO-LIA HIV I/II Score / v6 / KOD: FRI78352 p 14/14 Tekrarlanabilirlik 5 HIV pozitif numunenin yanı sıra bir pozitif ve bir negatif kontrol paneli, Auto-LIA II 3 -saatlik numune inkübasyon prosedürü kullanılarak 4 kişi tarafından 2 farklı lot üzerinde test edildi. Farklı kişiler tarafından farklı strip lotları ile yapılan çalışma, 5 gözlemden 1inde HIV-1 pozitif sonuç yerine belirsiz sonuç elde edilen bir numune dışında, aynı test sonucuyla sonuçlandı. Ticari markalar INNO-LIA, LiRAS ve Auto-LIA ABD ve diğer ülkelerde tescilli, Fujirebio Europe N.V. ticari markalarıdır.