ST AIA-PACK ie2 ADI VE KULLANIM AMACI ÖZET VE TESTİN AÇIKLAMASI ÖLÇÜM İLKESİ UYARILAR VE ÖNLEMLER SAĞLANAN MALZEME

Transkript

1 EU rev. IE Dikkat: Bu IFU, IVD yönetmeliği 98/79/EC ile uyumludur ve Avrupa Birliği üyesi bir ülkede çalışan müşteriler tarafından kullanılmayı amaçlamaktadır ST AIA-PACK ie2 Serum ya da Heparinize plazmada Estradiol'un (E 2) Niceliksel Ölçümü İçin ADI VE KULLANIM AMACI ST AIA-PACK ie2, TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazları kullanılarak insan serumunda ya da heparinize plazmada, estradiol'un (E 2) nicel ölçümü için yalnızca İN-VİTRO TANILARDA kullanılmak üzere tasarlanmıştır. ÖZET VE TESTİN AÇIKLAMASI Estradiol (E2), genellikle yumurtalık (hamile olmayan kadınlarda), daha az olarak adrenal korteks (erkeklerde ve kadınlarda) ve testislerde (erkeklerde) üretilen ve salgılanan bir steroid hormonudur. Hamilelik sırasında, dolaşımdaki E2'nin çoğunun plasenta üretir (1). E2'nin değerlendirilmesi, E2'nin üretimi ve salgılanması, yumurtalık işlevlerini yansıttığından, yumurtalık işlevi bozukluklarının ya da östrojen üreten tümörlerin tanısında çok önemli bir role sahiptir. E2'nin sürekli ölçülmesi, kısırlık tedavisi sırasında folikül olgunlaşmasını ya da yumurtlama endüksiyonunun izlenmesi açısından da yararlıdır. Ayrıca E 2, FSH ve LH'nin salgılama stimülasyonu ve geri bildirim mekanizması ile folikül stimülasyon hormonu (FSH) ve lüteinleştirici hormonun (LH) salgılanma mekanizmasıyla da ilişkilidir. E 2'nin, diğer gonodal steroid hormonlar olan FSH ve LH seviyeleriyle birlikte ölçülmesi, yumurtalık işlevinin değerlendirilmesiyle ilgili bilgi sağlayabilir (4, 5). ÖLÇÜM İLKESİ ST AIA-PACK ie2, rekabetçi bir enzim imüno-ölçümdür ve tamamen ST AIA-PACK ie2 test kaplarında gerçekleştirilir. Test örneğinde bulunan estradiol, manyetik boncukların üzerine bağlanmış anti-e 2 monoklonal antikor üzerindeki sınırlı sayıdaki bağlanma sahası için enzimle etiketlenmiş E 2 ile rekabete girer. Manyetik boncuklar, bağlanmamış enzim etiketli E 2 antikorları temizlemek için yıkanır ve daha sonra flüorojenik sübstrat, 4-metilyumbelliferil fosfat (4MUP) içinde inkübe edilir. Boncuklara bağlanan enzim etiketli E2 miktarı, test örneğindeki estradiol konsantrasyonuyla ters orantılıdır. Bir standart eğri oluşturulur ve bilinmeyen estradiol konsantrasyonları bu eğri kullanılarak hesaplanır. SAĞLANAN MALZEME Kat. No ST AIA-PACK ie2 5 tepsi x 20 test kabı Anti-E2 tavşan monoklonal antikoru kaplanmış on iki liyofilize manyetik boncuk ve sığır alkalin fosfataza konjüge 50 µl E 2 ile koruyucu olarak sodyum azid içeren plastik test kapları. GEREKLİ OLAN ANCAK SAĞLANMAYAN MALZEMELER Aşağıdaki malzemeler, TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazlarında ST AIA-PACK ie2 (Kat. No ) kullanarak estradiol analizi gerçekleştirmek için gereklidir. Aşağıdakiler TOSOH'tan ayrıca alınabilir. Malzemeler Kat. No. AIA Nex IA ya da AIA AIA Nex IA ya da AIA-21 LA AIA-1800 ST AIA-1800 LA AIA-2000 ST AIA-2000 LA AIA-600 II AIA-600 II BCR AIA AIA AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II / AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR SET ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (1) 0 pg/ml ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (2) 40 pg/ml (yaklaşık) ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (3) 100 pg/ml (yaklaşık) ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (4) 500 pg/ml (yaklaşık) ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (5) 1000 pg/ml (yaklaşık) ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR (6) 3250 pg/ml (yaklaşık) ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE SAMPLE CUPS AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Yalnızca AIA Nex IA/AIA-21 için Ek Gereksinimler: PIPETTE TIPS PRELOADED PIPETTE TIPS AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 ve AIA-2000 için Ek Gereksinimler: PIPETTE TIPS TIP RACK PRELOADED PIPETTE TIPS Yalnızca TOSOH'dan alınan malzemeler kullanılmalıdır. Ölçüm performansı, TOSOH malzemelerinin kullanılmasına önemli ölçüde bağlı olduğundan başka yerlerden temin edilecek malzemeler kullanılmamalıdır. UYARILAR VE ÖNLEMLER 1. ST AIA-PACK ie2, yalnızca in-vitro tanı amaçlı kullanılmak içindir. 2. Kullanım öncesi hasar durumunu tespit etmek için ambalaj ve alüminyum torbanın dışını kontrol etmeyi unutmayın. Gözle görülür hasar varsa, yerel TOSOH satış temsilcinizle temas kurun. 3. Farklı paketlerden ya da farklı lotlardan test kapları, bir tepside karıştırılmamalıdır. 4. ST AIA-PACK ie2, kurşun ya da bakır tesisatlarla tepkimeye girerek patlama tehlikesi bulunan metal azidler oluşturabilecek sodyum azid içermektedir. Bu tür reaktifleri atarken, azid birikmesini önlemek için her zaman bol miktarda su ile akıtın. 5. Bu ürünün hazırlanmasında insan kökenli malzemeler kullanılmamıştır; ancak örnek olarak insandan alınan örnekler kullanılacağından ve laboratuardaki diğer kalite kontrolü ürünleri insan kökenli olabileceğinden, tüm numuneler ve kontrollerle işlem yaparken standart laboratuar güvenlik uygulamalarına uygun hareket edin. 6. Son kullanma tarihi geçen ürünleri kullanmayın. 7. Güvenli atık uzaklaştırması için her laboratuarın, belirlenmiş laboratuar kurallarına ve yerel, eyalet ve federal yönetmeliklere uygun hareket etmesi önerilmektedir. 2-12

2 8. ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION tüpü açıldıktan sonra, temiz bir lastik kapak ile sıkı biçimde kapalı tutulmalıdır. Kirli malzemelerle kapatma, reaktifin bozulmasına neden olabilir. 9. Kullanımdan sonra kalan örnek seyreltme solüsyonu, başka bir tüple karıştırılmamalı ve kirlenmeyi önlemek için atılmalıdır. 10. Serum, toz, metal ya da mikroorganizma kirliliği, hazırlanan substrat solüsyonunun bozulmasına neden olabilir. Doğrudan güneş ışığı ya da ultraviyole ışıktan uzakta, temiz bir yerde saklayın. 11. TOSOH, kalibrasyon için yeni bir test kapları torbasının kullanılmasını önermektedir. SAKLAMA VE STABİLİTE Açılmamış tüm malzemeler, belirtilen sıcaklıkta saklandığında etiket üzerindeki son kullanma tarihine kadar stabil halde kalacaktır. Malzemeler Kat. No. 2-8 C: ST AIA-PACK ie ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR SET ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE C: AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Alüminyum torbanın açılmasından sonra ST AIA-PACK ie2 test kapları, en fazla 10 gün boyunca (10 x 24 saat) TOSOH AIA System Analyzer'lar üzerinde bırakılabilir (18-25 C). Geceleri 2-8 C'de saklandıklarında test kapları 30 güne kadar kullanılabilir (8 saati cihaz üzerinde ve 16 saati buzdolabında olmak üzere 30 döngü). Alüminyum torba açıldığında test kapları 30 gün içinde kullanılmalıdır. ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR SET sıkıca kapatılmalı ve 2-8 C arasında soğutulmalıdır. Açıktan sonra kalibratörler 1 gün içinde kullanılmalıdır. ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION açıldıktan sonra en fazla 1 gün boyunca (24 saat) TOSOH AIA System Analyzer'lar üzerinde bırakılabilir (18-25 C). Geceleri 2-8 C'de saklandıklarında test kapları 3 güne kadar kullanılabilir (8 saati cihaz üzerinde ve 16 saati buzdolabında olmak üzere 3 döngü). Numune seyreltme solüsyonu açıldıktan sonra, kapalı ve buzdolabında bile saklansa 90 günden daha uzun süre kullanılmamalıdır. Düzenlenmiş sübstrat solüsyonu C sıcaklıkta 3 gün ya da 2-8 C sıcaklıkta 30 gün stabil kalacaktır. Seyreltme ve yıkama solüsyonları, C sıcaklıkta 30 gün stabil kalacaktır. Reaktifler, bulanık ya da bozuk renkte görünüyorlarsa kullanılmamalıdır. NUMUNELERİN ALINMASI VE TAŞINMASI 1. Ölçüm için serum ya da heparinize plazma gereklidir. EDTA plazma ya da sitratlanmış plazma KULLANILMAMALIDIR. 2. Serum kullanıldığında, venöz kan numunesi, katkı maddesi olmadan aseptik olarak toplanmalıdır. Pıhtı oluşana kadar (genellikle dakika) C sıcaklıkta saklayın, daha sonra ölçümde kullanılacak serum numunesi elde etmek için santrifüje tabi tutun. 3. Eğer heparinize plazma kullanıldığında, venöz kan numunesi belirtilen katkı maddesi ile aseptik olarak toplanmalıdır. Santrifüj uygulayın ve paketli hücrelerden plazmayı mümkün olduğunca kısa süre içinde ayırın Yetersiz santrifüj ya da numunede fibrin ya da parçacık maddelerin bulunması, hatalı sonuçlara neden olabilir. 5. Alkalin fosfataz inhibitörleri içeren numuneler, hatalı sonuçlara neden olabilir. 6. Tüm numuneleri, hava baloncularını ve köpüklenmeye karşı inceleyin. Ölçümden önce tüm hava baloncuklarını uzaklaştırın. 7. Numune türleri, bir hastanın seri izlenmesi sırasında karşılıklı değiştirilecek kullanılmamalıdır. Belirli hastalarda, ölçülen konsantrasyon numune türleri arasında hafif farklılıklar gösterebilmektedir. 8. Numuneler, analizden önce 7 güne kadar 2-8 C'de saklanabilir. Eğer 7 gün içinde analiz gerçekleştirilemezse, numune -20 C ya da daha düşük sıcaklıklarda donmuş halde 60 güne kadar saklanabilir. 9. Tekrar tekrar dondurma ve çözme işlemleri yapılmamalıdır. Bulanık serum numuneleri ya da parçacıklar içeren numuneler, testten önce santrifüje tabi tutulmalıdır. Ölçümden önce dondurulmuş örnekleri yavaşça C arasına getirin ve hafifçe karıştırın. 10. Analiz için gereken numune 75 µl'dir. İŞLEM AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800, AIA-2000 ve AIA-360 ürünlerinde, ayrıntılı talimatlar için ilgili ürünlerin Operatör Kılavuzlarına bakın. I. Reaktif Hazırlığı A. Sübstrat Solüsyonu Çalışma reaktif maddesini hazırlamadan önce tüm reaktif maddeleri C'ye getirin. AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II'nin tüm içeriğini (100 ml) liyofilize AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II'ye ekleyin, katı malzemelerin çözünmesi için iyice karıştırın. B. Yıkama Solüsyonu AIA-PACK WASH CONCENTRATE'in (100 ml) tüm içeriğini CLSI GP40-A4-AMD kurallarında tanımlanan şekilde yaklaşık 2,0 L CAP Sınıf I ya da klinik laboratuar reaktif suya (daha önceden NCCLS Tür I) ekleyin, iyice karıştırın ve son hacmi 2,5 L'ye ayarlayın. C. Seyreltici AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE'in (100 ml) tüm içeriğini CLSI GP40-A4-AMD kurallarında tanımlanan şekilde yaklaşık 4,0 L CAP Sınıf I ya da klinik laboratuar reaktif suya (daha önceden NCCLS Tür I) ekleyin, iyice karıştırın ve son hacmi 5,0 L'ye ayarlayın. II. Kalibrasyon İşlemleri A. Kalibrasyon Eğrisi ST AIA-PACK ie2 ile kullanılacak kalibrasyon malzemelerine, IRMM (Referans Malzemeler ve Ölçümler Enstitüsü) CRM577'de atıfta bulunulmuştur. ST AIA-PACK ie2'nin kalibrasyon eğrisi, 90 güne kadar geçerlidir. Kalibrasyon kararlılığı, kalite kontrolü işlemleri ile izlenir ve uygun reaktif işleme ve üreticinin talimatlarına uygun olarak TOSOH AIA Sistem bakımına bağlıdır. Tekrar kalibrasyon işlemi, eğer kontroller bu ölçüm için belirlenmiş aralığın dışındaysa ya da belirli servis işlemleri gerçekleştirildiyse (ör. sıcaklık ayarı, numune mekanizması değişimleri, yıkama sondasının bakımı ya da detektör lambası ayarlaması ya da değişikliği) daha sık gerekli olabilir. Cihazın çalışmasıyla ilgili daha fazla bilgi için TOSOH AIA Sistem Operatörleri Kılavuzu'na bakın. Aşağıda AIA-2000'den alınan bir örnek kalibrasyon eğrisi bulunmaktadır ve sonuçların hesaplanmasında kullanılan algoritmayı göstermektedir. 4-12

3 B. Kalibrasyon İşlemleri 1. İşlem talimatları için uygun TOSOH AIA Sistem Operatörleri kılavuzuna bakın. 2. Kalibrasyon grubu ve konsantrasyon numaralarının, yazılıma doğru girildiğini kontrol edin. 3. ST AIA-PACK ie2 CALIBRATOR SET, kullanıma hazır halde sağlanmaktadır. 4. TOSOH, tüm kalibrasyon malzemelerinin üç kez çalıştırılmasını önermektedir. C. Kalibrasyon Kabul Ölçütü 1. Konsantrasyon ve hız arasında ters orantılı bir ilişki olduğundan, konsantrasyon arttıkça hız azalmalıdır. 2. Tekrar eden değerler %10'luk bir aralık içinde olmalıdır. D. Kalibrasyon Gözden Geçirmesi ve Kabulü 1. Yukarıda listelenen ölçütleri kullanarak kalibrasyon eğrisini dikkatli biçimde gözden geçirin. 2. Gerekiyorsa kalibrasyonu düzenleyin, daha sonra kalibrasyonu kabul edin. Kalibrasyon ile ilgili daha fazla bilgi için TOSOH AIA Sistem Operatörleri kılavuzuna bakın. III. Kalite Kontrol İşlemleri A. Ticari Olarak Satılan Kontroller Ticari olarak kullanılan kontroller en az günde bir kez çalıştırılmalıdır. Normal ve anormal olmak üzere en az iki kontrol seviyesinin kullanılması önerilmektedir. Bu ölçüm için laboratuar ilkesi, aşağıdakileri belirtmektedir: Kontrol Malzemesi: Sıklık: Kontrol malzemesi grup numarası, kabul edilebilir limitler, kontrolün laboratuar ölçütlerini sağlamaması durumunda yapılacak düzeltme işlemleri, laboratuarda saklanan ayrı bir kalite kontrolü belgesinde bulunacaktır. B. Kalite Kontrol İşlemleri 1. Analiz cihazınızın Operatör Kılavuzunda belirtilen şekilde kalite kontrol numunelerinin ölçümünü yapın. Ayrıca dosyaların tanımlanması ve düzenlenmesi hakkında ayrıntılı talimatlar için TOSOH AIA Sistem Operatörleri kılavuzuna bakın. 2. Bu ölçümde kullanılacak kalite kontrolü malzemesi, her bir laboratuarın kendi politikası tarafından tanımlanmaktadır IV. Numune İşleme A. Hazırlık Analiz cihazının Operatörler Kılavuzu'ndaki talimatları uygulayarak, numuneleri uygun biçimde alete yerleştirin. Barkodlu birincil tüpler ve numune kapları, AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800, AIA-2000 ve AIA-360'da çalıştırılabilir. B. Ölçüm İşlemleri 1. Çalıştırılacak numune sayısı için uygun miktarda ST AIA-PACK ie2 test kabı bulunduğundan emin olun. 2. Operatör kılavuzunda belirtilen şekilde hasta numunelerini yerleştirin ve analize başlayın. Not: AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 ve AIA-2000, kart üzerinde seyreltme kullanıldığında AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP gerektirecektir. İŞLEM NOTLARI 1) Liyofilize sübstratın tam olarak çözünmesi gerekmektedir. 2) TOSOH AIA System Analiz Cihazlarıyla yapılan ligand ölçümleri, laboratuarda kullanılacak suyun CAP tarafından Sınıf I ya da CLSI klinik laboratuar reaktif su olarak belirlenmiş olmasını gerektirmektedir. Suyun en az ayda bir kez test edilmesi ve bakteriler dahil olmak üzere parçacık madde içermemesi gerekmektedir. Daha fazla bilgi için CLSI belgesine bakın: GP40-A4-AMD, Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Fourth Edition (Klinik Laboratuarlarda Reaktif Suyun Hazırlanması ve Test Edilmesi; Onaylı Kurallar - Dördüncü Sürüm). 3) Eğer bir örnek estradiol konsantrasyonu, ölçümün üst limiti olan 3000 pg/ml'den daha büyük bulunursa, numunenin ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION ile seyreltilmesi ve Ölçüm İşlemine uygun olarak tekrar ölçülmesi gerekmektedir pg/ml'den fazla değere sahip örnekler için önerilen seyreltme 5 kattır. Seyreltilen örneğin 20 ile 3000 pg/ml arası bir konsantrasyona gelmesini sağlayacak şekilde seyreltme yapılması istenmektedir. Seyreltme faktörü, yazılıma girilmelidir. Numunelerin seyreltilmesiyle ilgili daha fazla bilgi için TOSOH AIA Sistem Operatörleri Kılavuzu'na bakın. 4) TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazları, aynı anda her bir analiz için iki farklı kalibrasyon eğrisini saklayabilmektedir. Bu nedenle aynı çalışmada iki farklı grup ST AIA-PACK ie2 test kabı kullanılabilir. 5) Eğer bu test için ölçüm özellikleri, sistem yazılımında hazır değilse, teknik özelliklerin 053 test kodu ile girilmesi gerekmektedir. SONUÇLARIN HESAPLANMASI TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazları, tüm numune ve reaktif ele alma işlemlerini otomatik olarak yapmaktadır. TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazları, reaksiyon tarafından oluşturulan floresan oranını okur ve bu oranı otomatik olarak pg/ml cinsinden estradiol konsantrasyonuna çevirir. Seyreltme gerektiren numuneler için AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 ve AIA-2000, seyreltme işlemlerini otomatik olarak gerçekleştirecek ve seyreltme faktörleri yazılıma girilirse sonuçları hesaplayacaktır. Seyreltmelerin programlanmasıyla ilgili ayrıntılı bilgi için uygun TOSOH AIA Operatör kılavuzu'na başvurun. SONUÇLARIN DEĞERLENDİRİLMESİ Kalite Kontrolü Analitik performansın hassasiyetini izlemek ve değerlendirmek için ticari olarak satılan kontrol numunelerinin yerel yönetmeliklere uygun olarak ölçülmesi önerilmektedir. En düşük iç kontrol malzemesinin çalıştırılma sıklığı önerileri aşağıda verilmektedir: 6-12

4 Kalibrasyondan sonra kalibrasyon eğrisinin kabul edilmesi için üç seviye iç kontrol çalıştırılır. Belirli servis işlemlerinin gerçekleştirilmesi durumunda üç seviye kontrol tekrar edilir (ör. sıcaklık ayarlaması, örnekleme mekanizması değişiklikleri, yıkama sondasının bakımı ya da detektör lambası ayarlaması ya da değişikliği). Günlük bakımdan sonra, TOSOH AIA Sistem Analiz Cihazlarının genel performansını kontrol etmek amacıyla en az iki seviye kontrol gerçekleştirilir. Bir ya da daha fazla kontrol değer(ler)i kabul edilebilir aralığın dışındaysa, hasta sonuçlarını rapor etmeden önce kalibrasyon eğrisinin geçerliliğini araştırmak gerekir. Laboratuarın bağlı olduğu katı yasal kuruma uygun olarak standart laboratuar işlemleri uygulanmalıdır. İŞLEMİN SINIRLARI 1. Tanı amacıyla, bu ölçümden elde edilen sonuçlar, diğer verilerle birlikte kullanılmalıdır (ör. belirtiler, diğer testlerin sonuçları, klinik izlenimler, terapi vs.). 2. ST AIA-PACK ie2 kullanıldığında, seyreltilmemiş estradiol'un en yüksek ölçülebilir konsantrasyonu 3000 pg/ml, en düşük ölçülebilir konsantrasyonu ise 20 pg/ml'dir (ölçüm hassasiyeti). 3. En yüksek kalibrasyon malzemesinin yaklaşık değeri 3250 pg/ml olmasına karşın tam konsantrasyon biraz farklı olabilir. ASSAY RANGE HIGH ölçüm özelliği, ölçüm aralığının üst limiti olan 3000 pg/ml olarak tanımlanmalıdır. 4. Hemolizin ölçüm üzerinde etkisi dikkate alınmayacak ölçüde olmasına karşın, hemoliz yapılmış numuneler, ölçümden önce numunenin yanlış işlemlere tabi tutulduğunu işaret edebilir ve sonuçların dikkatli yorumlanması gerekmektedir. 5. Lipaemia'nın, spatiyal girişimin meydana gelebileceği büyük lipeamia durumu dışında ölçüm üzerinde dikkate değer bir etkisi yoktur. 6. İlaç alan ve/veya tıbbi tedavi göre hastalardan alınan numuneler yanlış sonuçlara neden olabilir. 7. Heterofil antikorların bu tür ölçümlerde girişime neden olduğu bilinmektedir. ST AIA-PACK ie2, heterofil antikorların etkilerini en aza indirmek için tasarlanmıştır ancak yüksek titerlerden kaynaklanan girişim önlenemez. 8. Asfotaz Alfa (Genetik Rekombinasyon) tedavisi altındaki hastalardan alınan numuneler, yanlış yükselmiş sonuçlara neden olabilir. 9. Bu işlemin sınırlarının daha iyi anlaşılabilmesi için lütfen bu bilgi sayfasının NUMUNELERİN ALINMASI VE TAŞINMASI, UYARILAR VE ÖNLEMLER, SAKLAMA VE STABİLİTE ile İŞLEM NOTLARI bölümlerine bakın. BEKLENEN DEĞERLER Her laboratuar, test edilen popülasyonun özelliklerine uygun bir referans aralık belirlemelidir. Tüm tanı işlemlerinde olduğu gibi klinik sonuçlar, hastaya eşzamanlı verilen ilaçlar dikkate alınarak yorumlanmalıdır. I. Referans Aralıklar Burada verilen aralık, 359 sağlıklı görünen Asya kökenli bireyden alınan serum numunelerinde belirlenmiştir. Avrupa'da yapılan çalışmalar, bu referans değerlerin aynı zamanda Avrupa nüfusu için de geçerli olduğunu göstermiştir. Kategori n Aralık Kadınlar Foliküler faz 134 <20 ~ 300,8 Ovulation phase 34 41,3 ~ 527,4 Luteal faz 22 <20 ~ 349, Kategori n Aralık Postmenopozlu kadınlar 45 <= 48,0 Hamile Kadınlar İlk trimester ~ 4404 İkinci trimester ~ Üçüncü trimester ~ Erkekler 82 <=51,1 II. Dönüştürme Faktörleri Bu uygulamadaki estradiol konsantrasyonları, pg/ml birimi cinsindendir. Elde edilen pg/ml cinsinden değerlerin pmol/l'ye dönüştürülürken 3,67 ile çarpılması gerekmektedir. PERFORMANS ÖZELLİKLERİ DOĞRULUK a. Geri kazanım: Üç serum numunesi ve üç heparinize plazma numunesine, üç farklı konsantrasyon seviyesinde estradiol verilmiş ve verme öncesi ve sonrasında ölçüm yapılmıştır. Numune İlk E 2 Beklenen Ölçülen Yüzde Değer Eklenen Değer Değer Geri kazanım (pg/ml) (pg/ml) Serum A , , ,0 Serum B , , ,6 Serum C , , ,2 Plazma A , , ,1 Plazma B , , ,2 Plazma C , , ,4 b. Seyreltme: Yüksek estradiol konsantrasyonu içeren üç serum numunesi ve üç heparinize plazma numunesi, ST AIA-PACK ie2 SAMPLE DILUTING SOLUTION ile seri biçimde seyreltilmiş ve ölçülmüştür. Numune Seyreltme Beklenen Ölçülen Yüzde Faktörü Değer Değer Geri kazanım Serum A2 yok ,0 7,5/ ,9 5,0/ ,9 2,5/ ,0 1,0/ ,1 8-12

5 Numune Seyreltme Beklenen Ölçülen Yüzde Faktörü Değer Değer Geri kazanım Serum B2 yok ,0 7,5/ ,4 5,0/ ,9 2,5/ ,7 1,0/ ,4 Serum C2 yok ,0 7,5/ ,3 5,0/ ,2 2,5/ ,4 1,0/ ,1 Plazma A2 yok ,0 7,5/ ,8 5,0/ ,0 2,5/ ,3 1,0/ ,8 Plazma B2 yok ,0 7,5/ ,9 5,0/ ,9 2,5/ ,5 1,0/ ,2 Plazma C2 yok ,0 7,5/ ,7 5,0/ ,8 2,5/ ,2 1,0/ ,6 c. Doğrusallık: ST AIA-PACK ie2 için doğrusallık, CLSI Protokol EP6-A kuralları temel alınarak belirlenmiştir. Doğrusallık AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800, AIA-360 ve AIA-2000 cihazlarında ölçülmüştür ve pg/ml arasında doğrusal olduğu görülmüştür. HASSASİYET a. Çalışma içi hassasiyet, toplam 20 çalışmada altı kontrol kullanılarak belirlenmiştir. Her çalışma içinde kontrol başına bir set çift takım ölçülmüştür. Her çiftin ortalaması, havuz standart sapmasını (SD) elde etmek için kullanılmıştır. Daha sonra bu değer, farklılık katsayısının (CV) hesaplanmasında kullanılmıştır. Numune Ortalama Havuz SD'si CV Serum A ,75 3,1 Serum B ,7 2,2 Serum C ,6 2,7 Plazma A ,32 4,2 Plazma B ,0 1,8 Plazma C ,3 1,7 b. Toplam hassasiyet, 20 ayrı çalışmada alto kontrolün çift ölçümleriyle belirlenmiştir. Her çalışmanın ortalaması, havuz değerleri standart sapmasının (SD) ve farklılık katsayısının (CV) hesaplanmasında kullanılmıştır Numune Ortalama Havuz SD'si CV Serum A ,30 4,1 Serum B ,7 2,5 Serum C ,7 2,9 Plazma A ,67 5,1 Plazma B ,2 2,7 Plazma C ,5 2,8 KORELASYON a. 1) ST AIA-PACK E2 (x) ve ST AIA-PACK ie2 (y), 2) ticari olarak piyasada satılan E 2 testi (x) ve ST AIA-PACK ie2 (y), 3) ID-GC/MS (x) ve ST AIA-PACK ie2 (y) arasındaki korelasyonlar, sırasıyla 115, 115 ve 39 hasta numunesi kullanılarak hesaplanmıştır. (1) (2) (3) Eğim 1,15 0,87 0,95 y-kesişimi -4,7 25,5 36,0 Korelasyon Katsayısı 0,999 0,996 0,998 Numune Sayısı b. ST AIA-PACK ie2 üzerinde serum (x) ve heparinize plazma (y) arasındaki korelasyon 105 hasta numunesi kullanılarak belirlenmiştir. Eğim 0,99 y-kesişimi 2,2 Korelasyon Katsayısı 1,000 Numune Sayısı 105 ÖZGÜLLÜK Aşağıdaki maddeler, çapraz reaktiflik için test edilmiştir. Çapraz reaktiflik (mol%), estradiol olarak tanımlanacak maddenin yüzdesidir. Bu maddeler numunede estradiol ile aynı konsantrasyonlarda bulunursa sonuç, belirtilen yüzdeler ile yükseltilecektir. Eklenen madde Konsantrasyon (µg/ml) Çapraz reaktiflik (mol%) 17α-estradiol 1 0,022 Estron 0,1 1,1 Estriol 0,1 0,25 17β-esrtradiol-3-sülfat-17β-D-glukuronid 10 T.E. 17β-estradiol 17-propionat 1 0,12 17β-estradiol 17-valerat 1 0,057 17β-estradiol-17-glukuronid 10 0,004 17β-estradiol-3-glucuronid-17-sülfat 10 T.E. 17β-estradiol-3-sülfat 1 0,04 Estriol 3-sülfat 10 T.E. d-aldosteron 10 T.E. Androstendion 10 T.E. 5α-androstan-3α,17β-diol 10 T.E. Kortizon 10 T.E. Danazol 10 T.E. DHEA 10 T.E. DHEA-S 10 T.E. Ekuilin 1 0,03 Etisteron 10 T.E

6 Eklenen madde Konsantrasyon (µg/ml) Çapraz reaktiflik (mol%) 17α-etinilestradiol 0,01 8,2 Hidrokortizon 10 T.E. 17α-hidroksipregnenolon 10 T.E. 17α-hidroksiprogesteron 10 T.E. Mestranol 0,1 0,70 Noretindron asetat 10 T.E. Progesteron 10 T.E. Testosteron 10 T.E. Klomifen sitrat tuzu 10 T.E. Tamoksifen 10 T.E. Fulvestrant 0,05 0,66 (T.E.: tespit edilemedi) TOSOH EUROPE N.V. Transportstraat 4 B-3980 TESSENDERLO, BELGIUM Tel.: +32 (0) Faks: +32 (0) TOSOH BIOSCIENCE, INC Shoreline Court, Suite 101 South San Francisco, CA 94080, USA Tel: Net Hacim (Liyofilize malzeme için düzenleme sonrası) HASSASİYET Tespit Sınırı: ST AIA-PACK ie2 için algılama sınırı, CLSI kural EP17-A'ya göre belirlenmiştir. Boş örnek, 60 kopyada ölçülmüştür. Altı düşük seviyeli örneğin her biri 10 kopyada ölçülmüştür. Sonuçta ST AIA-PACK ie2 için tespit sınırı 14,4 pg/ml olarak tahmin edilmiştir. GİRİŞİM Girişim, bu çalışmada, insan numunelerine aşağıdaki maddeler eklendikten sonra bilinen numune konsantrasyonunun %10'u dışında geri kazanım olarak tanımlanmaktadır. 1. Hemoglobin (450 mg/dl'ye kadar), serbest bilirubin (17 mg/dl'ye kadar) ve konjüge bilirubin (9 mg/dl'ye kadar), ölçümle girişim oluşturmaz. 2. Trigliserit konsantrasyonuyla belirtilen lipaemi (415 mg/dl'ye kadar), ölçümle girişim oluşturmaz. 3. Askorbik asit (20 mg/dl'ye kadar) ölçümle girişim oluşturmaz. 4. İnsan albümin konsantrasyonlarıyla belirtilen protein (1 g/dl'ye kadar, sağlıklı görünen kişilerden alınan örneklere eklenmiştir), ölçümle girişim oluşturmaz. 5. EDTA 2K (5 mg/ml'ye kadar) ölçümle girişim oluşturmaz. 6. Heparin (100 U/ml'ye kadar) ölçümle girişim oluşturmaz. REFERANSLAR 1. Cunningham FG, Kenneth JL, Steven LB, John CH, et al.: Williams Obstetrics 23rd Edition: (2009). 2. Nader S, Berkowitz AS, Maklad N and Wolf D: Characteristics of patients with and without gonadotropin surges during follicular recruitment in IVF-ET programs. Fertil. Steril. 45, (1986). 3. Ben-Rafael Z, Kopf GS, Blasco L, Flickinger G, Tureck R, Strauss J and Mastraianni L: Follicular maturation parameters associated with failure of oocyte retrieval, fertilization and cleavage in vitro. Fertil. Steril. 45, (1986). 4. Abraham GE, Odell WD, Swerdloff RS and Hopper K: Simultaneous radioimmunoassay of plasma FSH, LH, progesterone, 17-hydroxyprogesterone, and estradiol-17β during the menstrual cycle. J. Clin. Endocrinol. 34, (1972). 5. Goisk J, Welshons WV, Sakai D, Hansen J, Walent J, Kassis J, Shull J, Stack G and Campen C : Evolution of a model of estrogen action, Recent Prog. Horm. Res, 42, (1986). TOSOH CORPORATION 3-8-2, Shiba-Koen, Minato-ku TOKYO (JAPAN) Tel.: +81 (0) Faks: +81 (0)