TAKD olgu sunumları- 21 Kasım 2012 Dr Şebnem Batur Dr Büge ÖZ İÜ Cerrahpaşa Tıp Fakültesi Patoloji AD
Konuşma akışı; ALK mutasyonu değerlendirmedeki sorunlar ROS-1 mutasyonu Avrupa pulmoner patoloji çalışma grubu uygulama önerileri CTF Patoloji Sonuçları
ALK mutasyonu =Anaplastik large cell lenfoma kinaz ALK somatik hücrelerde (nöral hücre hariç) %3-7 Adeno/KHDAK Genç, hasta sigara içmemiş EGFR «-» hastalar Solid büyüme paterni, taşlı yüzük hücreli ve müsinöz ADenoKa
ALK/ EML4 mutasyonu ALK 2p23 da, EML4 2p21 da en sık inversiyon yada translokasyon Nature 448:561, 2007
EML-4/ALK mutasyonu Yöntem; İHK FİSH RT-PCR Abbott moleküler- 2011 (FDA onayı)
IHK ve FİSH uygulamalarını irdeleyen 11 çalışma değerlendirilmiş; Ticari olarak 4 ALK primer antikoru satan 5 firma var Bunlardan en duyarlı olan 5A4 ve D5F3 klonları
ALK İmmunhistokimya değerlendirmesi Histo-skor =(H-Skoru) semi-kantitatif; Yaygınlık ve yoğunluk derecelendirilmesi +,++,+++ pozitif
ROS-1 İnsülin reseptör ailesinden bir tirozin kinaz üyesi Kr 6 nın uzun kolu 22. lokusda Daha önce glioblastom ve kolanjiokarsinom başka tm lerde
ROS -1 ROS1 rearrangements in lung cancer: a new genomic subset of lung adenocarcinoma. [J Clin Oncol. 2012] Response to crizotinib in ROS1-rearranged non-small-cell lung cancer. [J Clin Oncol. 2012] Targeting ROS1 with anaplastic lymphoma kinase ınhibitors. A promising therapeutic strategy for a newly defined molecular subset of NSCLC [J Thoracic Oncol. 2012 November)
ROS-1 KHDAK larında %1-2 (Adenokarsinom) En sik CD74-ROS1 ve SCL34A2-ROS 1 ROS1 pozitif hasta profili ALK ile aynı; Genç erkek hasta, Sigara içmemiş/ az içmiş Subtip Araştırma yöntemi : FİSH (break-apart) İHK? D4D6 Tedavi : Crizotinib Rimkunas VM et al. Clin Cancer Res 2012 Aug 15: 18(16):4449-57
Skuamöz hücreli karsinom: yönlendirici mutasyonlar Perez-Moreno P et al. CCR 2012 in press
Akc Adenokarsinomlarında EGFR Mutasyonu CTF Patoloji deneyimi Aralık 2010- Ekim 2012 256 hasta 22-88y med 59.9 %71.9 %28.1 42pozitif %16.4 %45.2 (%10.3) %54.8 (%31.9) 35 Ex 19 (E746-T751, L747- T751 delesyon) 7 Ex 21 (L858R aktive edici mutasyon) SİGARA
EGFR pozitif olguların materyal türüne göre dağılımı 22% 16.7% 21.4% 27% Lobektomi-wedge Bx 16% 19% 21.4 21.4 21% IIAB LN-MED Metastaz 14%
EGFR Mutasyonu CTF Patoloji deneyimi Aralık 2010- Ekim 2012 EGFR TOPLAM VAKA SAYISI: 271 ADENOKARSİNOM: 256 (%94.5) SKUAMÖZ HÜCRELİ KARSİNOM: 12 (%4.4) KÜÇÜK HÜCRELİ KARSİNOM: 1 BÜYÜK HÜCRELİ KARSİNOM: 1 YÜKSEK GRADELİ NÖROENDOKRİN KARSİNOM:1
Akc Adenokarsinomlarında ALK CTF Patoloji deneyimi Mart 2011- Ekim 2012 112 hasta 102 IHK (ALK 5A4 Klonu) FİSH (Abbott Vys) %7.8 pozitif (% 3-7) A B
Akc Adenokarsinomlarında kras mutasyonu CTF Patoloji deneyimi Aralık 2010- Ocak 2012 24 hasta (EGFR ile eş zamanlı veya ardından) 5olgu pozitif (% 20,83) Bu olgular EGFR ve ALK negatif 3 ü Müsinöz, 1 i asiner
Hangi materyalde genetik araştırma? Taze doku, parafin doku, sıvılardan elde edilen hücre bloğu Cerrahi rezeksiyon materyalleri Plevral doku biyopsileri ve efüzyon sıvısı Metastatik organdan biyopsi Duyarlı yöntemlerle az miktarda tümöral DNA içeren materyaller: plevral sıvı, biyopsi, bronşiyal lavaj, ince iğne aspirayon BAL
Materyal seçiminde önemli noktalar Test duyarlılığını olumsuz etkileyenler Materyalde tümör hücre oranı %25 in altında ise sekanslama mutasyonu saptayamayabilir Tümör hücrelerinin en çok olduğu bloklar seçilmeli (%50 den fazla) İnflamasyon ve nekrotik alanlar olmamalı Kemik metaz. biyopsisi sorun!! Fiksasyon çok önemli; küçük doku için (6-12 sa. ve büyük dokular için 12-48 sa. Formalin fiksasyonu) Tümör heterojenitesi sorun oluşturabilir!
Tanısal materyal için biyopsi teknikleri ve elde edilen doku volümü Biyopsi başına hücre sayısı Önerilen Biyopsi sayısı 21g asp. iğnesi 19g asp iğnesi Trab biyopsi BT eşliğinde İAB 100 150 300 500 4 4 4 2-3 50 ml reak 75 ng DNA Sonunda 3-6 pmol. DNA
Pratikte çoğu vakayı çok küçük - az materyalden değerlendirmek zorundayız; Mümkün olan en doğru tanıyı, en ekonomik doku kullanımı ile vermek Çünkü; gerekiyor; Klinik-cerrahi Bu materyal büyük örnekleme olasılıkla materyali hastanın tedavisini yönlendirecek tek materyal olacaktır ve bugün ve gelecekte moleküler testler için kullanılacaktır!
İ Ü,Cerrahpaşa Tıp Fakültesi Patoloji Anabilim Dalı- Moleküler Patoloji